员员远 灾燥造援员缘 摇摇骨肉瘤占原发性恶性骨肿瘤的圆圆援源豫, 是青少 [ 员鄄猿年骨骼肿瘤中最常见的恶性骨肿瘤 ] 骨肉瘤起病隐匿, 恶性程度高, 浸润转移早, 早期诊断困难 近猿园年来, 有关骨肉瘤的化疗 外科手术保肢治疗等报道很多, 但疗效仍不尽人意, 传统截肢或关节离断术治疗的缘年生存率仅

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1 灾燥造援员缘晕燥援圆粤责则援圆园园愿 悦澡蚤灶藻泽藻允燥怎则灶葬造燥枣悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则葬责赠 员员缘 [ 文章编号 ] 摇员园园苑鄄猿愿缘载 ( 圆园园愿 ) 园圆鄄园员员缘鄄园缘 论著 重组腺病毒介导小鼠内皮抑素对荷骨肉瘤酝郧鄄远猿细胞裸鼠肺转移的抑制 梅摇炯, 窦摇帮, 马晓辉, 童天朗, 蔡宣松 ( 同济大学附属同济医院骨科, 上海摇圆园园园远缘 ) [ 摘摇要 ] 摇目的 : 构建携小鼠内皮抑素 ( 藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶, 耘杂 ) 基因的重组腺病毒载体, 观察其对荷骨肉瘤裸鼠肺转移的抑制, 探讨内皮抑素表达水平与骨肉瘤肺转移的关系 方法 : 构建责阅悦猿员缘鄄皂耘灶凿燥表达质粒, 同源重组产生重组腺病毒粤凿鄄皂耘灶凿燥 裸鼠右前肢皮下注射骨肉瘤酝郧鄄远猿细胞建立移植瘤裸鼠模型 ; 随机分为源组 : 小鼠内皮抑素腺病毒 ( 粤凿鄄皂耘灶凿燥 ) 组, 携带耘郧云孕基因腺病毒 ( 粤凿鄄耘郧云孕 ) 组, 孕月杂组, 未接种肿瘤细胞裸鼠空白对照组 各组裸鼠每周分别注射相应药物圆园园 μ 造, 连续缘次, 观察各组动物移植瘤体积 瘤组织病理, 耘蕴陨杂粤法检测各组裸鼠血耘杂水平 ; 苑周后处死动物, 观察有无肺转移及肺转移灶病理 结果 : 粤凿鄄耘郧云孕组肿瘤体积为 ( 员援缘猿依园援园缘 ) 糟皂猿, 孕月杂组为 ( 员援缘远依园援园苑 ) 糟皂猿, 粤凿鄄皂耘灶凿燥组为 ( 园援怨员依园援园猿 ) 糟皂猿, 粤凿鄄皂耘灶凿燥治疗的抑瘤率达源园援苑豫 粤凿鄄皂耘灶凿燥组裸鼠血内皮抑素表达水平明显高于粤凿鄄耘郧云孕组和孕月杂组 ( 孕约园援园缘 ) 粤凿鄄皂耘灶凿燥组裸鼠肺部未发现肿瘤转移灶, 其他两组肺部见大量散在转移灶, 肺转移率分别为愿园豫和怨园豫 未发生肺转移裸鼠的耘杂水平显著高于发生肺转移的裸鼠 ( 孕约园援园缘 ) 结论 : 腺病毒介导的小鼠内皮抑素显著抑制了荷骨肉瘤裸鼠肺转移, 内皮抑素表达水平与肺转移有着直接的关系 [ 关键词 ] 摇骨肉瘤 ; 内皮抑素 ; 肺转移 ; 抗血管生成 [ 中图分类号 ] 摇砸苑猿愿援员 ; 砸苑猿园援缘源摇摇摇摇 [ 文献标志码 ] 摇粤 陨灶澡蚤遭蚤贼燥则赠藻枣枣藻糟贼燥枣则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼葬凿藻灶燥增蚤则怎泽鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿皂燥怎泽藻藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶燥灶责怎造皂燥灶葬则赠皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽燥枣燥泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬糟藻造造造蚤灶藻酝郧鄄远猿蚤灶灶怎凿藻皂蚤糟藻 酝耘陨允蚤燥灶早, 阅韵哉月葬灶早, 酝粤载蚤葬燥鄄澡怎蚤, 栽韵晕郧栽蚤葬灶鄄造葬灶早, 悦粤陨载怎葬灶鄄泽燥灶早 ( 阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣韵则贼澡燥责葬藻凿蚤糟泽, 栽燥灶早躁蚤匀燥泽责蚤贼葬造, 栽燥灶早躁蚤哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠, 杂澡葬灶早澡葬蚤圆园园园远缘, 悦澡蚤灶葬 ) [ 粤遭泽贼则葬糟贼 ] 摇韵遭躁藻糟贼蚤增藻 : 栽燥糟燥灶泽贼则怎糟贼葬灶葬凿藻灶燥增蚤则怎泽鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿皂燥怎泽藻藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶增藻糟贼燥则 ( 粤凿鄄皂耘灶凿燥 ) 葬灶凿贼燥燥遭泽藻则增藻蚤贼泽蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠藻枣枣藻糟贼燥灶贼澡藻责怎造皂燥灶葬则赠皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽燥枣燥泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬蚤灶灶怎凿藻皂蚤糟藻, 泽燥葬泽贼燥凿蚤泽糟怎泽泽贼澡藻则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责遭藻贼憎藻藻灶耘杂藻曾责则藻泽泽蚤燥灶葬灶凿贼澡藻责怎造皂燥灶葬则赠皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽燥枣燥泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬援酝藻贼澡燥凿泽 : 砸藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼葬凿藻灶燥增蚤则怎泽责造葬泽皂蚤凿责阅悦猿员缘鄄皂耘灶凿燥憎葬泽糟燥灶泽贼则怎糟贼藻凿葬灶凿怎泽藻凿贼燥责则藻责葬则藻则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼粤凿鄄皂耘灶凿燥援韵泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬酝郧鄄远猿糟藻造造泽憎藻则藻泽怎遭糟怎贼葬灶藻燥怎泽造赠蚤灶躁藻糟贼藻凿蚤灶贼燥贼澡藻则蚤早澡贼枣燥则藻造蚤皂遭泽贼燥藻泽贼葬遭造蚤泽澡灶怎凿藻皂燥怎泽藻皂燥凿藻造燥枣燥泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬 ; 葬灶凿贼澡藻皂燥凿藻造泽憎藻则藻则葬灶凿燥皂造赠凿蚤增蚤凿藻凿蚤灶贼燥猿早则燥怎责泽 : 粤凿鄄皂耘灶凿燥早则燥怎责, 粤凿鄄耘郧云孕早则燥怎责葬灶凿孕月杂早则燥怎责 ; 葬灶蚤皂葬造泽则藻糟藻蚤增蚤灶早灶燥贼则葬灶泽责造葬灶贼葬贼蚤燥灶泽藻则增藻凿葬泽遭造葬灶噪糟燥灶贼则燥造援栽澡藻糟燥则则藻鄄泽责燥灶凿蚤灶早葬早藻灶贼泽憎藻则藻蚤灶躁藻糟贼藻凿 ( 圆园 μ 造责藻则贼蚤皂藻 ) 枣燥则葬糟燥灶泽藻糟怎贼蚤增藻燥枣缘贼蚤皂藻泽燥灶葬憎藻藻噪造赠遭葬泽蚤泽援栽澡藻贼怎皂燥则增燥造怎皂藻泽, 澡蚤泽鄄贼燥责葬贼澡燥造燥早蚤糟葬造糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽憎藻则藻燥遭泽藻则增藻凿 ; 耘蕴陨杂粤憎葬泽藻皂责造燥赠藻凿贼燥藻曾葬皂蚤灶藻贼澡藻泽藻则怎皂耘杂造藻增藻造援粤灶蚤皂葬造泽憎藻则藻泽葬糟则蚤枣蚤糟藻凿苑憎藻藻噪泽造葬贼藻则葬灶凿贼澡藻责怎造皂燥灶葬则赠皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽憎葬泽燥遭泽藻则增藻凿援砸藻泽怎造贼泽 : 杂蚤曾贼藻藻灶凿葬赠泽造葬贼藻则, 贼澡藻贼怎皂燥则增燥造怎皂藻憎葬泽 ( 员援缘猿依猿猿猿园郾园缘 ) 糟皂蚤灶粤凿鄄耘郧云孕早则燥怎责,( 员援缘远依园援园苑 ) 糟皂蚤灶贼澡藻孕月杂早则燥怎责, 葬灶凿 ( 园援怨员依园援园猿 ) 糟皂蚤灶贼澡藻粤凿鄄皂耘灶凿燥早则燥怎责, 憎蚤贼澡贼澡藻贼怎皂燥则蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠则葬贼藻遭藻蚤灶早源园援苑豫蚤灶贼澡藻造葬泽贼早则燥怎责援栽澡藻泽藻则怎皂耘杂造藻增藻造蚤灶贼澡藻粤凿鄄皂耘灶凿燥早则燥怎责憎葬泽泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠澡蚤早澡藻则贼澡葬灶贼澡葬贼燥枣贼澡藻燥贼澡藻则早则燥怎责泽 ( 孕约园援园缘 ) 援晕燥责怎造皂燥灶葬则赠皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽憎葬泽灶燥贼蚤糟藻凿蚤灶贼澡藻粤凿鄄皂耘灶凿燥早则燥怎责, 遭怎贼藻曾贼藻灶鄄泽蚤增藻皂藻贼葬泽贼葬泽藻泽憎藻则藻泽藻藻灶蚤灶贼澡藻造怎灶早泽燥枣贼澡藻燥贼澡藻则圆早则燥怎责泽, 憎蚤贼澡贼澡藻皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽则葬贼藻泽遭藻蚤灶早愿园豫葬灶凿怨园豫援酝蚤糟藻憎蚤贼澡燥怎贼皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽澡葬凿泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠澡蚤早澡藻则造藻增藻造泽燥枣耘杂糟燥皂责葬则藻凿憎蚤贼澡贼澡燥泽藻憎蚤贼澡皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽 ( 孕约园援园缘 ) 援悦燥灶糟造怎泽蚤燥灶 : 粤凿藻灶燥增蚤鄄则怎泽鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿皂燥怎泽藻藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶糟葬灶泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠蚤灶澡蚤遭蚤贼贼澡藻责怎造皂燥灶葬则赠皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽燥枣燥泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬蚤灶灶怎凿藻皂蚤糟藻, 蚤灶凿蚤糟葬贼蚤灶早葬凿蚤则藻糟贼造赠造蚤灶噪遭藻贼憎藻藻灶藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣耘杂葬灶凿责怎造皂燥灶葬则赠皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽援 [ 运藻赠憎燥则凿泽 ] 摇燥泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬 ; 藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶 ; 责怎造皂燥灶葬则赠皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽 ; 葬灶早蚤燥早藻灶藻泽蚤泽 [ 悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则, 圆园园愿, 员缘 ( 圆 ): 员员缘鄄员员怨 ] 摇摇 [ 基金项目 ] 摇国家自然科学基金资助项目 ( 晕燥援猿园源苑员苑远园 ) 援杂怎责责燥则贼藻凿遭赠贼澡藻晕葬贼蚤燥灶葬造晕葬贼怎则葬造杂糟蚤藻灶糟藻云燥怎灶凿葬贼蚤燥灶燥枣悦澡蚤灶葬 ( 晕燥援猿园源苑员苑远园 ) [ 作者简介 ] 摇梅摇炯 ( 员怨远源鄄 ), 男, 汉族, 贵州省贵州市人, 硕士, 主任医师, 硕士生导师, 主要从事骨肿瘤基础和临床方面的研究 悦燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早葬怎贼澡燥则援耘鄄皂葬蚤造 : 皂藻蚤躁蚤燥灶早岳员远猿援糟燥皂

2 员员远 灾燥造援员缘 摇摇骨肉瘤占原发性恶性骨肿瘤的圆圆援源豫, 是青少 [ 员鄄猿年骨骼肿瘤中最常见的恶性骨肿瘤 ] 骨肉瘤起病隐匿, 恶性程度高, 浸润转移早, 早期诊断困难 近猿园年来, 有关骨肉瘤的化疗 外科手术保肢治疗等报道很多, 但疗效仍不尽人意, 传统截肢或关节离断术治疗的缘年生存率仅为员缘豫左右 圆园豫耀耀耀耀耀耀 猿园豫的患者无论采取何种治疗, 预后均极差 ; 如发生 [ 源鄄远转移, 即使化疗之后缘年生存率也只有圆园豫 ] 肿瘤血管生成 ( 葬灶早蚤燥早藻灶藻泽蚤泽 ) 在肿瘤发生 发展过程中的重要作用是近年来有关肿瘤研究中的重要突破之一 肿瘤的快速生长 浸润和转移是肿瘤的主要特点, 也是导致患者死亡的主要原因 如能有效抑制肿瘤血管生成, 切断肿瘤血供, 就有望达到抑制肿瘤生长 侵袭和转移的目的 鉴于骨肉瘤的原发灶 转移灶与内皮抑素基因 ( 藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶, 耘杂 ) 可能有密切关系, 本实验构建携带小鼠耘杂基因的腺病毒载体, 干扰荷骨肉瘤裸鼠的肺转移, 观察比较耘杂治疗组与对照组中裸鼠的肺转移程度 转移瘤数目及骨肉瘤细胞病理学的变化, 并进一步探讨耘杂水平和骨肉瘤肺转移的关系 员摇 员援员摇 材料与方法 实验动物与试剂 月粤蕴月辕糟 ( 灶怎辕灶怎 ) 裸小鼠由中科院上海实验动物所提供, 实验动物合格证号 [ 杂悦载运 ( 沪 ) 圆园园源鄄园园园圆 ] 腺病毒载体责阅悦猿员缘购自加拿大酝蚤糟则燥遭蚤曾月蚤燥泽赠泽贼藻皂泽公司, 人血清缘型腺病毒 ( 宰粤凿缘 ) 由本室保存 圆怨猿细胞购自加拿大酝陨悦砸韵月陨载月陨韵杂再杂鄄栽耘酝杂公司, 小鼠骨肉瘤细胞株酝郧鄄远猿购自武汉中国典型培养物保存中心 耘蕴陨杂粤内皮抑素试剂盒购自深圳晶美公司 员援圆摇 携带小鼠耘杂基因腺病毒载体的构建 将耘杂基因连接到腺病毒载体责阅悦猿员缘中, 构建 责阅悦猿员缘鄄皂耘灶凿燥表达质粒, 将此表达质粒与腺病毒重组质粒责月郧匀耘猿通过造蚤责燥枣藻糟贼葬皂蚤灶藻圆园园园共同转染 圆怨猿细胞, 经同源重组产生重组腺病毒粤凿鄄皂耘灶凿燥, 并测定病毒滴度 员援猿摇 荷骨肉瘤裸鼠动物模型的建立及分组 采用骨肉瘤细胞酝郧鄄远猿园援圆皂造细胞悬液 ( 约 远员伊员园个细胞 ) 注射裸鼠右前肢皮下, 共猿园只, 成瘤后随机分为猿组, 每组员园只 : 孕月杂组, 粤凿鄄耘郧云孕 组, 粤凿鄄皂耘灶凿燥组 ; 另取未接种肿瘤细胞的裸鼠 ( 员园 只 ) 作空白对照组 各组每周分别于瘤体边缘外员糟皂处皮下注射相应药物圆园园 μ 造辕次, 连续缘次 员援源摇 观察移植瘤生长情况 孕月杂组 粤凿鄄耘郧云孕组 粤凿鄄皂耘灶凿燥组分别在分组当日及之后每圆凿测量肿瘤长 短径, 并计算肿瘤体圆积, 绘制生长曲线 肿瘤体积越员辕圆粤月 ( 粤为肿瘤的最大长径, 月为肿瘤的横径 ) 抑瘤率 ( 豫 ) 越 ( 对照组肿瘤的平均体积原实验组肿瘤的平均体积 ) 辕 对照组肿瘤的平均体积伊员园园豫 员援缘摇 裸鼠荷瘤后肺转移的组织病理学观察 观察至第苑周结束后, 处死并解剖裸鼠观察有无肺部转移, 计数肺转移结节 摘除肺脏称取湿重, 将肺脏固定 包埋, 连续切片 ( 源 μ 皂 ), 行匀鄄耘染色 员援远摇 裸鼠荷瘤后肺转移程度的分级 Ⅰ 级 : 单个小转移灶员耀耀耀耀耀耀缘个 ( 直径均在员皂皂 以下 );Ⅱ 级 : 小转移灶在肺内呈弥散分布, 有远耀耀耀耀耀耀员园 个 ( 直径均在员耀耀耀耀耀耀圆皂皂之间 );Ⅲ 级小转移灶在肺内呈广泛分布 ( 几乎分布所有肺叶 ), 或有几个大转移灶 ( 直径均在圆皂皂以上 ) 员援苑摇 耘蕴陨杂粤法检测各组小鼠血耘杂的水平 裸鼠处死前采用眼球摘除取血法取血, 用免疫酶联吸附法 ( 耘蕴陨杂粤法 ) 检测耘杂水平, 用酶标分析仪测定源怨园灶皂处的阅值 另取标准品配制系列浓度, 以酶标仪测定阅源怨园, 绘制耘杂标准曲线 最后通过标准曲线计算各样品中的耘杂浓度 员援愿摇 统计学处理 用杂责泽泽员猿援园统计软件的一般线性模型中单因变量多因素方差分析进行各组之间两两比较, 并对所有裸鼠中发生肺转移和未发生肺转移者之间进行 贼检验统计分析 圆摇结摇果 圆援员摇 粤凿鄄皂耘灶凿燥病毒鉴定及滴度测定 提取病毒阅晕粤, 用皂耘灶凿燥引物做孕悦砸鉴定, 经酶切初步鉴定阳性的样品进行测序, 证实克隆成功 缘园豫组织培养感染剂量法测定病毒滴度为圆援缘伊员园员园孕云哉辕皂造, 构建内皮抑素基因重组腺病毒载体构建成功 圆援圆摇 耘杂的表达 粤凿鄄皂耘灶凿燥促进骨肉瘤细胞移植瘤裸鼠体内 各组荷骨肉瘤移植瘤裸鼠经治疗后, 取血检测 耘杂的表达水平 结果显示, 粤凿鄄皂耘灶凿燥组 孕月杂组以及粤凿鄄耘郧云孕组裸鼠外周血中的耘杂水平分别为 ( 源远员援怨缘依缘园援员怨 ) ( 员苑远援圆怨依员员愿援远苑 ) ( 员远员援圆源依怨苑援苑苑 ) 灶早辕皂造, 粤凿鄄皂耘灶凿燥组裸鼠血的耘杂水平较其他两组显著升高 ( 孕约园援园员 ), 证实裸鼠注射含耘杂基因的重组腺病毒载体后, 其体内耘杂水平明显增加 圆援猿摇 粤凿鄄皂耘灶凿燥对裸鼠移植骨肉瘤的抑制作用

3 晕燥援圆梅摇炯, 等援重组腺病毒介导小鼠内皮抑素对荷骨肉瘤酝郧鄄远猿细胞裸鼠肺转移的抑制 员员苑 猿组裸鼠在瘤细胞接种后缘耀耀耀耀耀耀苑凿全部成瘤, 观察员愿凿后, 计算肿瘤体积并绘出生长曲线 ( 图员 ) 结果显示 : 粤凿鄄耘郧云孕组和孕月杂组在接种后第怨凿肿瘤体积增长明显, 粤凿鄄皂耘灶凿燥组增长受到抑制 接种猿后员远凿粤凿鄄耘郧云孕组肿瘤体积为 ( 员援缘猿依园援园缘 ) 糟皂, 猿孕月杂组为 ( 员援缘远依园援园苑 ) 糟皂, 粤凿鄄皂耘灶凿燥组为 ( 园援怨员猿依园郾园猿 ) 糟皂, 其抑瘤率达源园援苑豫 圆援源摇 粤凿鄄皂耘灶凿燥对裸鼠移植骨肉瘤肺转移的抑制 空白对照组未见有肺转移情况 孕月杂组和粤凿鄄耘郧云孕组分别有愿只和怨只裸鼠出现肺转移灶, 肺转移率分别为愿园豫和怨园豫 孕月杂组肺转移灶在肺表面呈结节状广泛分布, 直径均在圆皂皂以上, 转移程度为 Ⅲ 级 粤凿鄄耘郧云孕组平均肺转移结节数皆大于 缘, 肺移程度为 Ⅱ 级 粤凿鄄皂耘灶凿燥组员园只裸鼠皆未出现肺转移灶 肺转移情况见表员 摇摇所有荷瘤裸鼠中, 发生肺转移鼠的耘杂为 ( 员圆远郾苑员依员怨援圆圆 ) 灶早辕皂造, 未发生肺转移裸鼠的耘杂 为 ( 圆远远援远苑依圆员远援愿猿 ) 灶早辕皂造, 两者耘杂表达水平进行比较, 贼值为猿援园苑怨, 孕约园援园缘, 说明发生肺转移裸鼠和未发生肺转移鼠之间耘杂水平有明显差异 图员摇粤凿鄄皂耘灶凿燥对裸鼠移植骨肉瘤的抑制作用云蚤早援员摇陨灶澡蚤遭蚤贼燥则赠藻枣枣藻糟贼燥枣粤凿鄄皂耘灶凿燥葬早葬蚤灶泽贼燥泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬蚤灶灶怎凿藻皂蚤糟藻 孕约园援园缘, 孕约园援园员增泽粤凿鄄耘郧云孕燥则孕月杂早则燥怎责 栽葬遭援员摇 表员摇 粤凿鄄皂耘灶凿燥对荷骨肉瘤裸鼠肺转移的抑制 陨灶澡蚤遭蚤贼燥则赠藻枣枣藻糟贼燥枣粤凿鄄皂耘灶凿燥葬早葬蚤灶泽贼造怎灶早皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽燥枣燥泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬蚤灶灶怎凿藻皂蚤糟藻 郧则燥怎责月燥凿赠憎藻蚤早澡贼 ( 皂辕早 ) 蕴怎灶早皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽 晕燥凿藻 ( 灶 ) 酝藻贼葬泽贼葬泽蚤泽早则葬凿藻造怎灶早憎藻蚤早澡贼 ( 皂辕早 ) 摇 摇 粤凿鄄皂耘灶凿燥 圆园援园怨依园援远员 园 园援愿员依园援园员 摇 摇 孕月杂 员愿援愿怨依园援缘远 苑援愿园 Ⅲ 员援园员依园援园员 摇 摇 粤凿鄄耘郧云孕 圆猿援圆缘依园援猿源 缘援圆园 Ⅱ 园援愿缘依园援园缘 摇 摇 悦燥灶贼则燥造 圆员援员远依园援员圆 园援怨园依园援园圆 圆援缘摇粤凿鄄皂耘灶凿燥致裸鼠移植骨肉瘤组织和肺转移灶的病理改变移植瘤组织病理观察发现, 接受粤凿鄄皂耘灶凿燥治疗的小鼠肿瘤组织出现大片坏死, 血管密度减小 ; 而对照组小鼠肿瘤组织生长良好, 肿瘤中心部位出现小坏死灶, 组织血管密度高 对粤凿鄄耘郧云孕组裸鼠的肺转移病理切片进行观察, 源园倍镜下观察发现肺周边部有大量癌巢融合 ; 员园园倍镜下观察下发现肿瘤细胞排列紊乱, 没有层次和极向, 紧密重叠或呈多层状, 癌巢中可见坏死, 与周围的正常肺组织细胞排列差异明显 ; 源园园倍镜下发现肿瘤细胞大小形态各异, 可发现瘤巨细胞, 核浆比明显增大, 核膜增厚, 核仁数目增多, 核分裂增多, 呈不对称 多极性和顿挫性 ( 图圆 ) 图圆摇 粤凿鄄耘郧云孕组荷瘤裸鼠肺转移灶病理改变 ( 匀鄄耘 ) 云蚤早援圆摇 孕葬贼澡燥造燥早蚤糟糟澡葬灶早藻燥枣贼澡藻责怎造皂燥灶葬则赠皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽 贼蚤泽泽怎藻蚤灶燥泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬糟藻造造泽鄄遭藻葬则蚤灶早灶怎凿藻皂蚤糟藻 ( 匀鄄耘 ) 粤 : 伊员园园 ; 月 : 伊源园园 猿摇 讨摇 论 骨肉瘤转移是一个多步骤 多分子参与的癌细 胞与宿主细胞间相互作用的复杂过程, 大致可以分

4 员员愿 灾燥造援员缘 为两个阶段 : 第一, 原发病灶的肿瘤血管生成 ; 第二, 转移的肿瘤细胞在到达目的器官后必须重新经历血管生成过程, 建立自身的血管系统, 该部位细胞克隆处于高增殖和高凋亡相互抵消的蛰伏状态 摇摇目前发现的肿瘤血管生成因子及抑制因子有 源园多种, 抑制因子中以耘杂最为典型 本研究利用含有耘杂基因片段的重组腺病毒注射裸鼠移植瘤体, 致裸鼠体内高效表达内皮抑素蛋白, 从而抑制种植瘤生长和肺转移 在接种肿瘤细胞观察苑周后, 治疗组肺转移发生率 ( 园 ) 明显低于对照组的愿园豫和怨园豫 ( 孕约园郾园员 ), 肺湿重及肺转移结节数也明显低于对照组 同时通过对各组裸鼠血耘杂含量的检测发现, 粤凿鄄皂耘灶凿燥治疗组裸鼠耘杂呈高表达, 而出现肺转移的对照组裸鼠耘杂明显低表达, 证实了重组携带耘杂 基因片段的腺病毒粤凿鄄皂耘灶凿燥具有抑制肿瘤远处转移的作用, 耘杂表达水平与肺转移有直接的关系 耘杂的晕末端结合一个锌离子, 与耘杂成员颐员复 [ 苑合物, 有人认为这是耘杂活性所必须的 ], 也有人提出耘杂是否结合锌离子对它的抗血管活性并不重要, 突变了的不能结合锌的耘杂抗血管活性没有受 [ 愿到影响 ], 因此认为锌是耘杂的结构基团而非功能 [ 怨基团 ] 但最新研究表明锌结构位点对于保持耘杂 [ 员园结构和功能都是必不可少的 ] [ 员员 ] 韵忆砸蚤燥则凿葬灶等 发现耘杂及不对称二甲基精氨酸和连接组织生长因子等可通过抑制晕韵杂启动内皮鄄间质细胞分化 在蚤葬 [ 员圆 ] 等发现, 来源于血液或血管瘤的人类内皮祖细胞被血管生成抑制因子所刺激, 表明当内皮祖细胞和成熟内皮细胞对血管生成或抗血管生成信号的反应是不同的 有研究表明耘杂除了有抗血管生成作用 [ 员猿外, 本身也有直接的抗肿瘤作用 ] [ 员源 ] 月则蚤早蚤贼等发现耘杂的抗血管生成作用取决于给药的方式和表达的部位 内皮抑素病毒基因治疗一般是通过小鼠尾静脉注射给药, 但全身治疗的弱点在于选择性 特异性不高 对大多数实体肿瘤而 [ 员缘言, 局部给药可能有助于解决这一缺陷 ] 除此之外, 病毒基因存在一定的组织毒性, 全身给药剂量范围有限, 而局部治疗全身毒性反应相对较轻, 安 [ 员远全性较好, 故用药剂量范围大 ] 本实验中发现, 荷瘤裸鼠能接受局部高滴度粤凿鄄皂耘治疗, 且能耐受良好, 并能表达出高水平的耘杂 ; 使得耘杂随血流到肺脏, 抑制肺转移灶的血管生成 通过抑制血管内皮细胞而达到抗肿瘤血管形成是肿瘤治疗的全新领域, 虽然尚处于实验阶段, 但已 [ 员苑鄄员愿取得了令人鼓舞的结果 ] 与传统直接杀伤肿 瘤的化疗相比, 抑制血管内皮细胞抗肿瘤血管形成来治疗肿瘤具有无可比拟的优点, 但同时也存在一些亟待解决的问题, 如基因治疗的机体不受控性 缺乏靶向性 病毒载体抗原性以及导入基因的表达与 [ 员苑, 员怨调控等问题 联合治疗有可能提高效率 ] [ 圆园 ] 杂糟澡皂蚤凿贼等发现耘杂有血管生成调节作用, 而不是先前认为的抗血管生成的作用 其他研究者也有类 [ 圆员鄄圆圆似发现 ] 相信随着肿瘤血管形成机制研究的不断深入, 目前存在的问题一定会逐一得到解决, 抗肿瘤血管形成将成为肿瘤治疗的重要手段 [ 参考文献 ] [ 员 ] 摇云怎糟澡泽月, 孕则蚤贼糟澡葬则凿阅允援耘贼蚤燥造燥早赠燥枣燥泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬 [ 允 ] 援悦造蚤灶韵则贼澡燥责砸藻造葬贼砸藻泽, 圆园园圆, 猿怨苑 : 源园鄄缘圆援 [ 圆 ] 摇云则葬泽泽蚤糟葬云允, 云则葬泽泽蚤糟葬阅粤, 宰燥造凿蕴耘, 藻贼葬造援孕燥泽贼则葬凿蚤葬贼蚤燥灶泽葬则糟燥皂葬燥枣遭燥灶藻 [ 允 ] 援韵则贼澡燥责藻凿蚤糟泽, 员怨怨猿, 员远 ( 员 ): 员园缘鄄员园远援 [ 猿 ] 摇砸燥泽藻灶郧, 悦葬责葬则则燥泽月, 匀怎增燥泽粤郧, 藻贼葬造援孕则藻燥责藻则葬贼蚤增藻糟澡藻皂燥贼澡藻鄄则葬责赠枣燥则燥泽贼藻燥早藻灶蚤糟泽葬则糟燥皂葬 : 泽藻造藻糟贼蚤燥灶燥枣责燥泽贼燥责藻则葬贼蚤增藻葬凿躁怎增葬灶贼糟澡藻皂燥贼澡藻则葬责赠遭葬泽藻凿燥灶贼澡藻则藻泽责燥灶泽藻燥枣贼澡藻责则蚤皂葬则赠贼怎皂燥则贼燥责则藻燥责鄄藻则葬贼蚤增藻糟澡藻皂燥贼澡藻则葬责赠 [ 允 ] 援悦葬灶糟藻则, 员怨愿圆, 源怨 ( 远 ): 员圆圆员鄄员圆猿园援 [ 源 ] 摇酝葬灶噪蚤灶匀允, 郧藻遭澡葬则凿贼酝悦, 允藻灶灶蚤灶早泽蕴悦, 藻贼葬造援蕴燥灶早鄄贼藻则皂则藻泽怎造贼泽燥枣葬造造燥早则葬枣贼则藻责造葬糟藻皂藻灶贼蚤灶贼澡藻皂葬灶葬早藻皂藻灶贼燥枣遭燥灶藻贼怎皂燥则泽 [ 允 ] 援悦造蚤灶韵则贼澡燥责, 员怨怨远, 猿圆源 : 愿远鄄怨苑援 [ 缘 ] 摇蕴葬匝怎葬早造蚤葬酝孕援韵泽贼藻燥泽葬则糟燥皂葬援杂责藻糟蚤枣蚤糟贼怎皂燥则皂葬灶葬早藻皂藻灶贼葬灶凿则藻泽怎造贼泽 [ 允 ] 援悦澡藻泽贼杂怎则早悦造蚤灶晕粤皂, 员怨怨愿, 愿 ( 员 ): 苑苑鄄怨缘援 [ 远 ] 摇宰怎灶凿藻则允杂, 孕葬怎造蚤葬灶郧, 匀怎增燥泽粤郧, 藻贼葬造援栽澡藻澡蚤泽贼燥造燥早蚤糟葬造则藻泽责燥灶泽藻贼燥糟澡藻皂燥贼澡藻则葬责赠葬泽葬责则藻凿蚤糟贼燥则燥枣贼澡藻燥灶糟燥造燥早蚤糟葬造燥怎贼糟燥皂藻燥枣燥责藻则葬贼蚤增藻贼则藻葬贼皂藻灶贼燥枣耘憎蚤灶早泽葬则糟燥皂葬 [ 允 ] 援允月燥灶藻允燥蚤灶贼杂怎则早粤皂, 员怨怨愿, 愿园 ( 苑 ): 员园圆园鄄员园猿猿援 [ 苑 ] 摇月燥藻澡皂栽, 韵忆则藻蚤造造赠酝杂, 运藻燥怎早澡运, 藻贼葬造援在蚤灶糟鄄遭蚤灶凿蚤灶早燥枣藻灶凿燥泽贼葬鄄贼蚤灶蚤泽藻泽泽藻灶贼蚤葬造枣燥则蚤贼泽葬灶贼蚤葬灶早蚤燥早藻灶蚤糟葬糟贼蚤增蚤贼赠 [ 允 ] 援月蚤燥糟澡藻皂月蚤燥责澡赠泽砸藻泽悦燥皂皂怎灶, 员怨怨愿, 圆缘圆 ( 员 ): 员怨园鄄员怨源援 [ 愿 ] 摇再葬皂葬早怎糟澡蚤晕, 粤灶葬灶凿鄄粤责贼藻月, 蕴藻藻酝, 藻贼葬造援耘灶凿燥泽贼葬贼蚤灶蚤灶澡蚤遭蚤贼泽灾耘郧云鄄蚤灶凿怎糟藻凿藻灶凿燥贼澡藻造蚤葬造糟藻造造皂蚤早则葬贼蚤燥灶葬灶凿贼怎皂燥则早则燥憎贼澡蚤灶凿藻责藻灶凿藻灶贼造赠燥枣扎蚤灶糟遭蚤灶凿蚤灶早 [ 允 ] 援耘酝月韵允, 员怨怨怨, 员愿 ( 员远 ): 源源员源鄄源源圆猿援 [ 怨 ] 摇在葬贼贼藻则泽贼则燥皂哉运, 云藻造遭燥则哉, 云怎噪葬蚤晕, 藻贼葬造援悦燥造造葬早藻灶 ⅩⅧ 辕藻灶鄄凿燥泽贼葬贼蚤灶泽贼则怎糟贼怎则藻葬灶凿枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造则燥造藻蚤灶葬灶早蚤燥早藻灶藻泽蚤泽 [ 允 ] 援悦藻造造杂贼则怎糟贼云怎灶糟贼, 圆园园园, 圆缘 ( 圆 ): 怨苑鄄员园员援 [ 员园 ] 栽躁蚤灶栽澡葬皂杂躁蚤灶砸酝, 杂葬贼糟澡蚤鄄云葬蚤灶葬则燥砸, 月蚤则泽灶藻则粤耘, 藻贼葬造援粤圆苑鄄葬皂蚤灶燥鄄葬糟蚤凿泽赠灶贼澡藻贼蚤糟责藻责枣蚤凿藻糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早贼燥贼澡藻晕匀圆鄄贼藻则皂蚤灶葬造扎蚤灶糟鄄遭蚤灶凿蚤灶早凿燥皂葬蚤灶燥枣藻灶凿燥泽贼葬凿灶蚤泽则藻泽责燥灶泽蚤遭造藻枣燥则蚤贼泽葬灶贼蚤贼怎皂燥则葬糟贼蚤增蚤贼赠 [ 允 ] 援悦葬灶糟藻则砸藻泽, 圆园园缘, 远缘 ( 怨 ): 猿远缘远鄄猿远远猿援 [ 员员 ] 韵忆砸蚤燥则凿葬灶耘, 酝藻灶凿藻造藻增晕, 孕葬贼泽糟澡葬灶杂, 藻贼葬造援悦澡则燥灶蚤糟晕韵杂蚤灶澡蚤鄄遭蚤贼蚤燥灶葬糟贼怎葬贼藻泽藻灶凿燥贼澡藻造蚤葬造鄄皂藻泽藻灶糟澡赠皂葬造贼则葬灶泽枣燥则皂葬贼蚤燥灶 [ 允 ] 援粤皂允孕澡赠泽蚤燥造匀藻葬则贼悦蚤则糟孕澡赠泽蚤燥造, 圆园园苑, 圆怨圆 ( 员 ): 匀圆愿缘鄄匀圆怨源援 [ 员圆 ] 运澡葬灶在粤, 酝藻造藻则燥鄄酝葬则贼蚤灶允酝, 宰怎载, 藻贼葬造援耘灶凿燥贼澡藻造蚤葬造责则燥早藻灶蚤贼燥则糟藻造造泽枣则燥皂蚤灶枣葬灶贼蚤造藻澡藻皂葬灶早蚤燥皂葬葬灶凿怎皂遭蚤造蚤糟葬造糟燥则凿遭造燥燥凿凿蚤泽责造葬赠怎灶蚤择怎藻糟藻造造怎造葬则则藻泽责燥灶泽藻泽贼燥藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶 [ 允 ] 援月造燥燥凿, 圆园园远, 员园愿 ( 猿 ): 怨员缘鄄怨圆员援 [ 员猿 ] 阅噪澡蚤泽泽蚤云, 蕴怎匀, 杂燥则蚤葬悦, 藻贼葬造援耘灶凿燥泽贼葬贼蚤灶藻曾澡蚤遭蚤贼泽葬凿蚤则藻糟贼葬灶贼蚤鄄

5 晕燥援圆梅摇炯, 等援重组腺病毒介导小鼠内皮抑素对荷骨肉瘤酝郧鄄远猿细胞裸鼠肺转移的抑制 员员怨 贼怎皂燥则藻枣枣藻糟贼蚤灶葬凿凿蚤贼蚤燥灶贼燥蚤贼泽葬灶贼蚤葬灶早蚤燥早藻灶蚤糟葬糟贼蚤增蚤贼赠蚤灶糟燥造燥灶糟葬灶糟藻则糟藻造造泽 [ 允 ] 援匀怎皂郧藻灶藻栽澡藻则, 圆园园猿, 员源 ( 员园 ): 怨怨苑鄄员园园愿援 [ 员源 ] 杂糟澡葬枣枣澡葬怎泽藻则月, 灾藻蚤噪噪燥造葬栽, 杂贼则蚤贼贼皂葬贼贼藻则运, 藻贼葬造援酝燥凿藻则葬贼藻葬灶贼蚤鄄葬灶早蚤燥早藻灶蚤糟葬糟贼蚤增蚤贼赠遭赠造燥糟葬造, 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶蚤灶砸蚤责员栽葬早圆贼则葬灶泽早藻灶蚤糟皂蚤糟藻 [ 允 ] 援允蕴藻怎噪燥糟月蚤燥造, 圆园园远, 愿园 ( 源 ): 远远怨鄄远苑远援 [ 员缘 ] 月燥藻澡皂栽, 云燥造噪皂葬灶允, 月则燥憎凿藻则栽, 藻贼葬造援粤灶贼蚤葬灶早蚤燥早藻灶蚤糟贼澡藻则葬责赠燥枣藻曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造糟葬灶糟藻则凿燥藻泽灶燥贼蚤灶凿怎糟藻葬糟择怎蚤则藻凿凿则怎早则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻援 [ 允 ] 援晕葬贼怎则藻, 员怨怨苑, 猿怨园 ( 远远缘愿 ): 源园源鄄源园苑援 [ 员远 ] 月藻则早藻则粤悦, 云藻造凿皂葬灶粤蕴, 郧灶葬灶贼酝云, 藻贼葬造援栽澡藻葬灶早蚤燥早藻灶藻泽蚤泽蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则, 藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶, 凿燥藻泽灶燥贼葬枣枣藻糟贼皂怎则蚤灶藻糟怎贼葬灶藻燥怎泽憎燥怎灶凿澡藻葬造鄄蚤灶早援 [ 允 ] 援允杂怎则早砸藻泽, 圆园园园, 怨员 ( 员 ): 圆远鄄猿员援 [ 员苑 ] 阅蚤则噪曾粤耘, 燥怎凿藻耘早遭则蚤灶噪酝郧, 悦葬泽贼藻则皂葬灶泽运, 藻贼葬造援粤灶贼蚤鄄葬灶早蚤燥早藻鄄灶藻泽蚤泽贼澡藻则葬责赠糟葬灶燥增藻则糟燥皂藻藻灶凿燥贼澡藻造蚤葬造糟藻造造葬灶藻则早赠葬灶凿责则燥皂燥贼藻造藻怎鄄噪燥糟赠贼藻藻灶凿燥贼澡藻造蚤怎皂蚤灶贼藻则葬糟贼蚤燥灶泽葬灶凿蚤灶枣蚤造贼则葬贼蚤燥灶蚤灶贼怎皂燥则泽 [ 允 ] 援云粤杂耘月允, 圆园园远, 圆园 ( 远 ): 远圆员鄄远猿园援 [ 员愿 ] 杂糟澡怎皂葬糟澡藻则允允, 阅蚤灶早泽砸孕, 悦燥泽蚤灶允, 藻贼葬造援酝燥凿怎造葬贼蚤燥灶燥枣葬灶早蚤燥鄄早藻灶蚤糟责澡藻灶燥贼赠责藻葬造贼藻则泽贼怎皂燥则蚤早藻灶蚤糟蚤贼赠蚤灶则葬贼燥增葬则蚤葬灶藻责蚤贼澡藻造蚤葬造糟藻造造泽 [ 允 ] 援悦葬灶糟藻则砸藻泽, 圆园园苑, 远苑 ( 愿 ): 猿远愿猿鄄猿远怨园援 [ 员怨 ] 蕴蚤载, 砸葬蚤噪憎葬则杂孕, 蕴蚤怎再匀, 藻贼葬造援悦燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶贼澡藻则葬责赠燥枣葬灶凿则燥鄄早藻灶鄄蚤灶凿藻责藻灶凿藻灶贼责则燥泽贼葬贼藻糟葬灶糟藻则怎泽蚤灶早葬责则燥泽贼葬贼藻则藻泽贼则蚤糟贼藻凿则藻责造蚤糟葬鄄贼蚤增藻葬凿藻灶燥增蚤则怎泽葬灶凿葬则藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶鄄凿藻枣藻糟贼蚤增藻葬凿藻灶燥增蚤则怎泽藻灶糟燥凿蚤灶早澡怎皂葬灶藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶鄄葬灶早蚤燥泽贼葬贼蚤灶枣怎泽蚤燥灶早藻灶藻 [ 允 ] 援酝燥造悦葬灶糟藻则栽澡藻则, 圆园园远, 缘 ( 猿 ): 远苑远鄄远愿源援 [ 圆园 ] 杂糟澡皂蚤凿贼粤, 粤凿凿蚤糟噪泽运, 月造燥糟澡宰援韵责责燥泽蚤贼藻藻枣枣藻糟贼泽燥枣藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶燥灶凿蚤枣枣藻则藻灶贼藻灶凿燥贼澡藻造蚤葬造糟藻造造泽 [ 允 ] 援悦葬灶糟藻则月蚤燥造栽澡藻则, 圆园园源, 猿 ( 员员 ): 员员远圆鄄员员远愿援 [ 圆员 ] 杂糟澡皂蚤凿贼粤, 宰藻灶扎藻造阅, 云藻则则蚤灶早陨, 藻贼葬造援陨灶枣造怎藻灶糟藻燥枣藻灶凿燥泽贼葬贼蚤灶燥灶藻皂遭则赠燥灶蚤糟增葬泽糟怎造燥鄄葬灶凿葬灶早蚤燥早藻灶藻泽蚤泽 [ 允 ] 援阅藻增阅赠灶, 圆园园源, 圆猿园 ( 猿 ): 源远愿鄄源愿园援 [ 圆圆 ] 宰藻灶扎藻造阅, 杂糟澡皂蚤凿贼粤, 砸藻蚤皂葬灶灶运, 藻贼葬造援耘灶凿燥泽贼葬贼蚤灶, 贼澡藻责则燥贼藻燥鄄造赠贼蚤糟枣则葬早皂藻灶贼燥枣糟燥造造葬早藻灶 ⅩⅧ, 蚤灶凿怎糟藻泽增葬泽燥则藻造葬曾葬贼蚤燥灶 [ 允 ] 援悦蚤则糟砸藻泽, 圆园园远, 怨愿 ( 怨 ): 员圆园猿鄄员圆员员援 [ 收稿日期 ] 摇圆园园苑原员员原园愿 [ 修回日期 ] 摇圆园园愿原园圆原员缘 [ 本文编辑 ] 摇韩摇丹 檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿 栽燥造造样受体源内吞后诱导干扰素 β 的产生 科技动态 摇摇栽燥造造样受体 ( 栽燥造造鄄造蚤噪藻则藻糟藻责贼燥则泽, 栽蕴砸泽 ) 是目前研究最清楚的一类模式识别受体, 募集一类含有栽陨砸结构域的接头分子, 激活下游的陨砸粤运和酝粤孕运家族信号分子以及耘猿泛素连接酶栽砸粤云分子, 活化晕云鄄 κ 月和干扰素调节因子 ( 陨砸云 ) 等转录因子, 最终诱导炎性因子和陨型干扰素的产生 目前栽陨砸接头分子共发现缘个成员 : 酝赠阅愿愿, 酝粤蕴 ( 栽陨砸粤孕 ), 栽砸陨云 ( 栽陨悦粤酝员 ), 栽砸粤酝 ( 栽陨鄄悦粤酝圆 ) 和杂粤砸酝 栽蕴砸信号通路主要分为酝赠阅愿愿依赖和栽砸陨云依赖两类通路, 栽蕴砸源是唯一同时利用两条通路的栽蕴砸受体, 且同时募集除杂粤砸酝以外的其余源种栽陨砸接头分子 目前, 所有已知诱导产生陨型干扰素的受体信号都是胞内膜结构触发的, 唯一例外的栽蕴砸源, 被认为是从胞膜上通过栽砸粤酝鄄栽砸陨云通路诱导干扰素 β 的产生 然而, 论文作者利用栽砸粤酝缺失小鼠模型并构建栽砸粤酝不同片段缺失体 突变体和不同细胞定位的融合蛋白, 揭示了栽蕴砸源在阅赠灶葬皂蚤灶依赖的内吞后在砸葬遭缘标记的早期内体上触发栽砸粤酝鄄栽砸陨云途径, 最终产生干扰素 β 该研究证明了栽蕴砸源在蕴孕杂刺激后猿园皂蚤灶内通过阅赠灶葬皂蚤灶依赖的方式内吞到砸葬遭缘标记的早期内体中 蕴孕杂刺激阅赠鄄灶葬皂蚤灶特异性抑制剂阅赠灶葬泽燥则藻提前处理的细胞, 栽蕴砸源的内吞受到明显抑制, 同时栽砸粤酝鄄栽砸陨云信号通路以及该通路诱导的炎性因子砸粤晕栽耘杂 陨蕴鄄远和干扰素 β 的产生都受到明显抑制, 而酝粤蕴鄄酝赠阅愿愿通路基本未受影响 葡聚糖内吞共聚焦定位证实了活化后的栽蕴砸源以及栽砸粤酝能和被内吞的葡聚糖共定位早期内体中 对栽砸粤酝不同片段缺失体和序列进行分析, 鉴定出了员耀耀耀耀耀耀圆园氨基酸残基的二级定位序列, 该二级定位序列由苑个氨基酸残基的豆蔻酰化基序跟随员猿个多碱性和芳香族残基基序组成 其中, 豆蔻酰化基序决定了栽砸粤酝的内体定位, 而碱性序则决定了其胞膜定位 豆蔻酰化基序点突变明显抑制了蕴孕杂诱导的陨蕴鄄远和砸粤晕栽杂的产生, 碱性基序的点突变抑制了栽砸粤酝和大多数酸性磷酸肌醇以及磷脂酸的结合 共聚焦显示, 栽砸陨云和酝赠阅愿愿共同的下游信号分子栽砸粤云猿主要分布于胞质溶胶中, 孕蕴悦鄄栽砸粤云猿融合蛋白包含胞膜定位信号磷脂酶悦的孕匀结构域, 该蛋白过表达能诱导提高晕云鄄 κ 月的转录活性和干扰素激活反应原件 ( 陨杂砸耘 ) 的活性 稳定表达孕蕴悦鄄栽砸粤云猿的砸葬憎圆远源援苑细胞株能通过刺激栽蕴砸圆产生干扰素 β, 在野生型栽砸粤云猿稳定株中却不能, 而炎性因子陨蕴鄄员 β 并未有明显变化 抑制栽蕴砸源的内吞和破坏内体定位的栽砸粤酝突变体抑制蕴孕杂诱导干扰素 β 的产生 ; 胞膜定位的栽砸粤云猿能使栽蕴砸圆信号通路产生干扰素 β, 提示了栽砸粤云猿可能是限制蕴孕杂诱导的干扰素 β 从细胞内触发产生的关键 该研究论证了只有活化的栽蕴砸源内吞到栽砸粤酝定位的早期内体中, 两者结合后才能向下游传递信号, 其中关键因素之一则是胞质溶胶定位的栽砸粤云猿 该研究否定了学术界之前公认的栽蕴砸源鄄栽砸粤酝鄄栽砸陨云是唯一的能从细胞膜上触发产生干扰素 β 的信号通路 同时, 栽砸粤酝的二级定位基序 ( 苑个氨基酸残基的豆蔻酰化基序跟随员猿个多碱性和芳香族残基基序 ) 是一种控制蛋白在细胞膜和细胞器内循环迁移的定位基序 [ 姚摇鸣摘译, 陈涛涌审阅援运葬早葬灶允悦, 杂怎栽, 匀燥则灶早栽, 藻贼葬造援晕葬贼怎则藻陨皂皂怎灶燥造, 圆园园愿, 怨 ( 源 ): 猿远员鄄猿远愿 ]