员远园 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员猿年源月, 圆园 ( 圆 ) 憎葬泽怎泽藻凿贼燥遭造燥糟噪灾耘郧云泽蚤早灶葬造蚤灶早葬灶凿贼澡藻责则燥责燥则贼蚤燥灶燥枣酝阅杂悦蚤灶糟燥造燥灶蚤糟造藻泽蚤燥灶泽葬灶凿贼澡藻澡蚤泽贼燥责葬贼澡燥造燥早赠燥枣悦粤悦憎藻则藻凿藻鄄贼藻糟贼藻凿援砸藻泽怎造贼泽 : 酝怎

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1 中国肿瘤生物治疗杂志摇澡贼贼责 : 辕辕憎憎憎援遭蚤燥贼澡藻则援燥则早悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则, 粤责则援圆园员猿, 灾燥造援圆园, 晕燥援圆 员缘怨 凿燥蚤 : 员园援猿愿苑圆辕躁援蚤泽泽灶援员园园苑鄄猿愿缘载援圆园员猿援园圆援园园缘 基础研究 灾耘郧云在溃疡性结肠炎癌变中的作用及其可能的机制 员, 圆王柯, 王一圆 猿圆圆圆圆圆圆圆圆, 刘桂君, 韩根成, 王仁喜, 肖鹤, 侯春梅, 彭晖, 沈倍奋, 黎燕, 陈国江 ( 员援中南大学基础医学院免疫学系, 湖南长沙源员园园员猿 ; 圆援军事医学科学院基础医学研究所免疫学研究室, 北京员园园愿缘园 ; 猿援内蒙古医科大学基础医学院分子生物学中心, 内蒙古呼和浩特园员园园缘怨 ) [ 摘摇要 ] 摇目的 : 观察血管内皮细胞生长因子 ( 增葬泽糟怎造葬则藻灶凿燥贼澡藻造蚤葬造糟藻造造早则燥憎贼澡枣葬糟贼燥则, 灾耘郧云 ) 信号对溃疡性结肠炎 ( 怎造糟藻则葬贼蚤增藻糟燥造蚤贼蚤泽, 哉悦 ) 癌变的影响并探讨其作用机制 方法 : 建立小鼠肠炎相关结直肠癌 ( 糟燥造蚤贼蚤泽鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿糟燥造燥则藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则, 悦粤悦 ) 模型, 用流式细胞术和则藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸分别检测模型小鼠外周血 脾脏 骨髓及瘤组织中髓样来源的抑制性细胞 ( 皂赠藻造燥蚤凿鄄凿藻则蚤增藻凿泽怎责鄄责则藻泽泽燥则糟藻造造, 酝阅杂悦 ) 的比例和酝阅杂悦中精氨酸酶员 ( 葬则早蚤灶葬泽藻鄄员, 粤则早鄄员 ) 和诱导型一氧化氮合酶 ( 蚤灶凿怎糟蚤遭造藻灶蚤贼则蚤糟燥曾蚤凿藻泽赠灶贼澡葬泽藻, 蚤晕韵杂 ) 皂砸晕粤的表达, 耘蕴陨杂粤法检测结肠和悦粤悦组织培养上清中灾耘郧云的表达 以索拉菲尼 ( 泽燥则葬枣藻灶蚤遭 ) 或灾耘郧云单抗阻断 灾耘郧云信号后, 检测小鼠结肠和悦粤悦部位酝阅杂悦比例的变化和病理改变 结果 : 成功建立小鼠悦粤悦的模型, 并根据多项评价垣垣指标确定建模后员个月和猿个月为悦粤悦的早期和晚期 在悦粤悦形成过程中, 小鼠体内郧则鄄员悦阅员员遭酝阅杂悦细胞数量明显增多, 病灶部位酝阅杂悦的积聚尤甚, 对照组为 ( 园援猿园依园援员愿 ) 豫 悦粤悦早期组为 ( 员援猿圆依园援园源 ) 豫 悦粤悦晚期组为 ( 猿援园愿依园援圆怨 ) 豫 ( 孕约园援园缘 ) 这些酝阅杂悦细胞高表达粤则早鄄员和蚤晕韵杂 ( 孕约园援园缘 ), 但病灶部位蕴鄄精氨酸含量显著降低 [ 早期组为 ( 源援圆圆依园援员苑 ) μ 早辕皂造 晚期组为 ( 圆援怨缘依员援园愿 )μ 早辕皂造 对照组为 ( 源援源员依园援员远 )μ 早辕皂造, 孕约园援园缘 ] 此外, 与对照组相比, 悦粤悦早期和晚期病灶组织高表达灾耘郧云 [ 悦粤悦早期组为 ( 员员苑园依怨源援源猿 ) 责早辕皂造 晚期组为 ( 员员员苑依苑员援怨圆 ) 责早辕皂造 对照组为 ( 愿苑苑援远依猿员援远苑 ) 责早辕皂造, 孕约园援园缘 ] 索拉菲尼或灾耘郧云抗体的治疗可显著抑制病灶部位酝阅杂悦的积聚 结论 : 灾耘郧云信号在悦粤悦形成过程中发挥重要的促瘤功能, 其作用机制可能与诱导酝阅杂悦在病灶部位的聚集有关 [ 关键词 ] 摇血管内皮细胞生长因子 ; 髓样来源的抑制性细胞 ; 溃疡性结肠炎 ; 肠炎相关结肠直癌 ; 索拉菲尼 [ 中图分类号 ] 摇砸苑猿缘援猿 ; 砸苑猿园援圆摇摇摇摇 [ 文献标志码 ] 摇粤摇摇摇摇 [ 文章编号 ] 摇员园园苑鄄猿愿缘载 ( 圆园员猿 ) 园圆鄄园员缘怨鄄园苑 孕燥泽泽蚤遭造藻皂藻糟澡葬灶蚤泽皂葬灶凿藻枣枣藻糟贼燥枣灾耘郧云燥灶贼澡藻糟葬灶糟藻则葬贼蚤燥灶燥枣怎造糟藻则葬贼蚤增藻糟燥造蚤贼蚤泽 员, 圆宰葬灶早运藻, 宰葬灶早再蚤圆 猿圆圆圆圆圆, 蕴蚤怎郧怎蚤躁怎灶, 匀葬灶郧藻灶糟澡藻灶早, 宰葬灶早砸藻灶曾蚤, 载蚤葬燥匀藻, 匀燥怎悦澡怎灶皂藻蚤, 孕藻灶匀怎蚤, 圆圆圆杂澡藻灶月藻蚤枣藻灶, 蕴蚤再葬灶, 悦澡藻灶郧怎燥躁蚤葬灶早 ( 员援阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣陨皂皂怎灶燥造燥早赠, 杂糟澡燥燥造燥枣月葬泽蚤糟酝藻凿蚤糟蚤灶藻, 悦藻灶贼则葬造杂燥怎贼澡哉灶蚤增藻则鄄泽蚤贼赠, 悦澡葬灶早泽澡葬源员园园员猿, 匀怎灶葬灶, 悦澡蚤灶葬 ; 圆援陨皂皂怎灶燥造燥早赠蕴葬遭燥则葬贼燥则赠, 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻燥枣月葬泽蚤糟酝藻凿蚤糟葬造, 粤糟葬凿藻皂赠燥枣酝蚤造蚤贼葬则赠酝藻凿蚤糟葬造杂糟蚤藻灶糟藻泽, 月藻蚤躁蚤灶早员园园愿缘园, 悦澡蚤灶葬 ; 猿援砸藻泽藻葬则糟澡悦藻灶贼藻则燥枣酝燥造藻糟怎造葬则月蚤燥造燥早赠, 杂糟澡燥燥造燥枣月葬泽蚤糟酝藻凿蚤糟蚤灶藻, 陨灶灶藻则酝燥灶早燥造蚤葬酝藻凿蚤糟葬造哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠, 匀燥澡澡燥贼园员园园缘怨, 陨灶灶藻则酝燥灶早燥造蚤葬, 悦澡蚤灶葬 ) [ 粤遭泽贼则葬糟贼 ] 摇 韵遭躁藻糟贼蚤增藻 : 栽燥蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻贼澡藻则燥造藻葬灶凿皂藻糟澡葬灶蚤泽皂燥枣增葬泽糟怎造葬则藻灶凿燥贼澡藻造蚤葬造早则燥憎贼澡枣葬糟贼燥则 ( 灾耘郧云 ) 泽蚤早灶葬造蚤灶早 蚤灶贼澡藻凿藻增藻造燥责皂藻灶贼燥枣怎造糟藻则葬贼蚤增藻糟燥造蚤贼蚤泽 ( 哉悦 ) 鄄则藻造葬贼藻凿糟葬灶糟藻则援酝藻贼澡燥凿泽 : 悦燥造蚤贼蚤泽鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿糟燥造燥则藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则 ( 悦粤悦 ) 皂燥凿藻造 憎葬泽藻泽贼葬遭造蚤泽澡藻凿蚤灶月葬造遭辕糟皂蚤糟藻援栽澡藻责则燥责燥则贼蚤燥灶燥枣皂赠藻造燥蚤凿鄄凿藻则蚤增藻凿泽怎责责则藻泽泽燥则糟藻造造泽 ( 酝阅杂悦泽 ) 蚤灶贼澡藻责藻则蚤责澡藻则葬造遭造燥燥凿, 泽责造藻藻灶, 遭燥灶藻皂葬则则燥憎葬灶凿贼怎皂燥则贼蚤泽泽怎藻泽燥枣贼澡藻皂燥凿藻造皂蚤糟藻葬灶凿造藻泽蚤燥灶泽憎葬泽藻曾葬皂蚤灶藻凿遭赠枣造燥憎糟赠贼燥皂藻贼则赠援粤则早蚤灶葬泽藻鄄员 ( 粤则早鄄员 ) 皂砸晕粤葬灶凿蚤灶凿怎糟蚤遭造藻灶蚤贼则蚤糟燥曾蚤凿藻泽赠灶贼澡葬泽藻 ( 蚤晕韵杂 ) 皂砸晕粤藻曾责则藻泽泽蚤燥灶泽蚤灶酝阅杂悦泽憎藻则藻凿藻贼藻糟贼藻凿遭赠择孕悦砸援栽澡藻灾耘郧云 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶蚤灶贼澡藻泽怎责藻则灶葬贼葬灶贼泽燥枣糟燥造燥灶蚤糟贼蚤泽泽怎藻泽憎葬泽凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿遭赠耘蕴陨杂粤援杂燥则葬枣藻灶蚤遭燥则灶藻怎贼则葬造蚤扎蚤灶早葬灶贼蚤鄄灾耘郧云葬灶贼蚤遭燥凿赠 [ 基金项目 ] 摇 国家重点基础研究发展计划 ( 怨苑猿计划 ) 资助项目 ( 晕燥援圆园园苑悦月缘员圆源园远 ); 国家自然科学基金资助项目 ( 晕燥援猿园愿园员园圆怨, 晕燥援 愿员圆苑圆猿圆园 ) 孕则燥躁藻糟贼泽怎责责燥则贼藻凿遭赠贼澡藻晕葬贼蚤燥灶葬造运藻赠月葬泽蚤糟砸藻泽藻葬则糟澡葬灶凿阅藻增藻造燥责皂藻灶贼孕则燥躁藻糟贼 ( 怨苑猿孕则燥躁藻糟贼 ) 燥枣悦澡蚤灶葬 ( 晕燥援圆园园苑悦月缘员圆源园远 ), 葬灶凿贼澡藻晕葬鄄 贼蚤燥灶葬造晕葬贼怎则葬造杂糟蚤藻灶糟藻云燥怎灶凿葬贼蚤燥灶燥枣悦澡蚤灶葬 ( 晕燥援猿园愿园员园圆怨, 晕燥援愿员圆苑圆猿圆园 ) [ 作者简介 ] 摇 王柯 ( 员怨愿远原 ), 男, 四川省雅安市人, 硕士生, 主要从事肿瘤微环境对免疫细胞调控机制的研究 耘鄄皂葬蚤造 : 噪蚤灶早噪藻藻则岳早皂葬蚤造援糟燥皂 摇 摇 摇 摇 摇 王一 ( 员怨愿源原 ), 男, 吉林省吉林市人, 博士生, 研究工作同王柯 耘鄄皂葬蚤造 : 赠噪园怨员园圆猿岳员远猿援糟燥皂 为共同第一作者 [ 通信作者 ] 摇 陈国江 ( 悦澡藻灶郧怎燥躁蚤葬灶早, 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早葬怎贼澡燥则 ), 耘鄄皂葬蚤造 : 早怎燥早葬灶早糟澡岳赠葬澡燥燥援糟燥皂 [ 网络出版 ] 摇 澡贼贼责 : 辕辕憎憎憎援糟灶噪蚤援灶藻贼辕噪糟皂泽辕凿藻贼葬蚤造辕猿员援员苑圆缘援砸援圆园员猿园源圆源援员猿员园援园园缘援澡贼皂造

2 员远园 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员猿年源月, 圆园 ( 圆 ) 憎葬泽怎泽藻凿贼燥遭造燥糟噪灾耘郧云泽蚤早灶葬造蚤灶早葬灶凿贼澡藻责则燥责燥则贼蚤燥灶燥枣酝阅杂悦蚤灶糟燥造燥灶蚤糟造藻泽蚤燥灶泽葬灶凿贼澡藻澡蚤泽贼燥责葬贼澡燥造燥早赠燥枣悦粤悦憎藻则藻凿藻鄄贼藻糟贼藻凿援砸藻泽怎造贼泽 : 酝怎则蚤灶藻悦粤悦皂燥凿藻造憎葬泽藻泽贼葬遭造蚤泽澡藻凿泽怎糟糟藻泽泽枣怎造造赠援员皂燥灶贼澡葬灶凿猿皂燥灶贼澡泽葬枣贼藻则贼澡藻遭藻早蚤灶灶蚤灶早燥枣悦粤悦憎藻则藻垣增藻则蚤枣蚤藻凿葬泽贼澡藻藻葬则造赠葬灶凿造葬贼藻泽贼葬早藻泽燥枣悦粤悦则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠, 葬糟糟燥则凿蚤灶早贼燥泽藻增藻则葬造责葬则葬皂藻贼藻则泽援栽澡藻蚤灶糟则藻葬泽藻凿灶怎皂遭藻则燥枣郧则鄄员 垣悦阅员员遭酝阅杂悦憎葬泽燥遭泽藻则增藻凿蚤灶贼澡藻责则燥早则藻泽泽蚤燥灶燥枣悦粤悦葬灶凿憎葬泽皂燥则藻泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼蚤灶造藻泽蚤燥灶泽 : 糟燥灶贼则燥造 ( 园援猿园依园郾员愿 ) 豫, 藻葬则造赠泽贼葬早藻燥枣悦粤悦 ( 员援猿圆依园援园源 ) 豫, 造葬贼藻泽贼葬早藻燥枣悦粤悦 ( 猿援园愿依园援圆怨 ) 豫 ( 孕约园援园缘 ) 援栽澡藻泽藻酝阅杂悦泽藻曾责则藻泽泽藻凿葬澡蚤早澡造藻增藻造燥枣粤则早鄄员葬灶凿蚤晕韵杂 ( 孕约园援园缘 ) 援月怎贼贼澡藻造藻增藻造泽燥枣蕴鄄葬则早蚤灶蚤灶藻蚤灶糟燥造燥灶蚤糟造藻泽蚤燥灶泽燥枣悦粤悦皂蚤糟藻憎葬泽皂怎糟澡造燥憎藻则贼澡葬灶糟燥灶贼则燥造泽 ( 藻葬则造赠泽贼葬早藻燥枣悦粤悦 [ 源援圆圆依园援员苑 ]μ 早辕皂造, 造葬贼藻泽贼葬早藻燥枣悦粤悦 [ 圆援怨缘依员援园愿 ]μ 早辕皂造, 糟燥灶贼则燥造 [ 源援源员依园援员远 ] μ 早辕皂造, 孕约园援园缘 ) 援云怎则贼澡藻则皂燥则藻, 灾耘郧云藻曾责则藻泽泽蚤燥灶蚤灶贼澡藻造藻泽蚤燥灶泽燥枣悦粤悦皂蚤糟藻憎葬泽藻造藻增葬贼藻凿泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 ( 藻葬则造赠泽贼葬早藻燥枣悦粤悦 [ 员员苑园依怨源援源猿 ] 责早辕皂造, 造葬贼藻泽贼葬早藻燥枣 [ 员员员苑依苑员援怨圆 ] 责早辕皂造, 糟燥灶贼则燥造 [ 愿苑苑援远依猿员援远苑 ] 责早辕皂造, 孕约园援园缘 ) 援栽澡藻贼则藻葬贼皂藻灶贼燥枣泽燥则葬枣藻灶蚤遭燥则葬灶贼蚤鄄灾耘郧云凿则葬皂葬贼蚤糟葬造造赠则藻凿怎糟藻凿葬糟糟怎皂怎造葬贼蚤燥灶燥枣酝阅杂悦蚤灶贼澡藻造藻泽蚤燥灶泽援悦燥灶糟造怎泽蚤燥灶 : 灾耘郧云责造葬赠泽葬责则燥鄄贼怎皂燥则则燥造藻蚤灶悦粤悦枣燥则皂葬贼蚤燥灶, 憎澡蚤糟澡皂葬赠遭藻则藻造葬贼藻凿憎蚤贼澡贼澡藻蚤灶凿怎糟藻凿葬糟糟怎皂怎造葬贼蚤燥灶燥枣酝阅杂悦蚤灶糟燥造燥灶蚤糟贼蚤泽泽怎藻泽援 [ 运藻赠憎燥则凿泽 ] 摇增葬泽糟怎造葬则藻灶凿燥贼澡藻造蚤葬造糟藻造造早则燥憎贼澡枣葬糟贼燥则 ; 皂赠藻造燥蚤凿鄄凿藻则蚤增藻凿泽怎责责则藻泽泽燥则糟藻造造 ; 怎造糟藻则葬贼蚤增藻糟燥造蚤贼蚤泽 ; 糟燥造蚤贼蚤泽鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿糟燥造燥则藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则 ; 泽燥则葬枣藻灶蚤遭 [ 悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则, 圆园员猿, 圆园 ( 圆 ): 员缘怨鄄员远缘 ] 摇摇 摇摇髓样来源的抑制性细胞 ( 皂赠藻造燥蚤凿鄄凿藻则蚤增藻凿泽怎责鄄责则藻泽泽燥则糟藻造造, 酝阅杂悦 ) 是肿瘤和其他多种病理条件下免疫抑制网络的主要成员, 在肿瘤的发生 发展 逃逸过程中发挥重要作用 在小鼠中该细胞群共表达郧则鄄员 和悦阅员员遭 目前研究认为, 酝阅杂悦主要通过产生精氨酸酶员 ( 葬则早蚤灶葬泽藻鄄员, 粤则早鄄员 ) 诱导型一氧化氮合酶 ( 蚤灶凿怎糟蚤遭造藻灶蚤贼则蚤糟燥曾蚤凿藻泽赠灶贼澡葬泽藻, 蚤晕韵杂 ) 一氧化氮 ( 灶蚤鄄贼则蚤糟燥曾蚤凿藻, 晕韵 ) 及活性氧族 ( 则藻葬糟贼蚤增藻燥曾赠早藻灶泽责藻糟蚤藻泽, [ 员砸韵杂 ) 发挥免疫抑制功能 ], 酝阅杂悦也可分泌一些炎性因子如血管内皮细胞生长因子 ( 增葬泽糟怎造葬则藻灶凿燥贼澡藻造蚤葬造糟藻造造早则燥憎贼澡枣葬糟贼燥则, 灾耘郧云 ) 金属基质蛋白酶怨 ( 皂葬贼则蚤曾皂藻贼葬造造燥责藻责贼蚤凿葬泽藻怨, 酝酝孕怨 ) 转化生长因子 ( 贼则葬灶泽枣燥则鄄皂蚤灶早早则燥憎贼澡枣葬糟贼燥则鄄 β, 栽郧云鄄 β) 等来促进炎症及肿瘤的 [ 圆鄄源发展 ] 近年来, 随着对酝阅杂悦研究的深入, 人们对 酝阅杂悦的免疫抑制功能已经有较多的认识, 目前人们将研究重点更多地转移到调控酝阅杂悦的产生和功能方面 酝阅杂悦是在自身免疫病 感染 肿瘤等病理情况下髓系细胞分化发生异常时产生的, 其产生和功能受 [ 缘到多条信号通路和细胞因子的影响 ] 灾耘郧云是促进肿瘤生长和转移的重要因子, 针对灾耘郧云鄄粤的单克 [ 远隆抗体已经用于治疗转移性结直肠癌 ] [ 苑 ] 有研究 报道, 灾耘郧云可刺激肠上皮细胞增殖, 促进肿瘤细胞生长 然而灾耘郧云在溃疡性结肠炎 ( 怎造糟藻则葬贼蚤增藻糟燥造蚤贼蚤泽, 哉悦 ) 癌变过程中的作用机理仍不甚清楚 本研究旨在观察在小鼠肠炎相关结直肠癌 ( 糟燥造蚤贼蚤泽鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿糟燥造燥则藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则, 悦粤悦 ) 模型中灾耘郧云对酝阅杂悦产生的调控作用, 并评价其对悦粤悦形成的影响, 为哉悦癌变的防治打下基础 员摇 员援员摇 材料与方法 实验动物和主要试剂 选取愿园只远耀耀耀耀耀耀愿周龄的月粤蕴月辕糟小鼠, 由军事医学科学院实验动物中心提供, 实验动物许可证号为杂悦载运 ( 军 ) 圆园园苑鄄园园源 氧化偶氮甲烷 ( 葬扎燥曾赠鄄皂藻贼澡葬灶藻, 粤韵酝 ) 购自杂蚤早皂葬鄄粤造凿则蚤糟澡公司, 葡聚糖硫酸钠 ( 凿藻曾贼则葬灶泽怎造枣葬贼藻泽燥凿蚤怎皂, 阅杂杂 ) 购自酝孕月蚤燥皂藻凿蚤糟葬造公司, 砸孕酝陨员远源园培养基购自匀赠糟造燥灶藻公司, 索拉菲尼 ( 泽燥则葬枣藻灶蚤遭 ) 购自月葬赠藻则公司, 孕藻则糟燥造造分离液购自美国粤皂藻则泽澡葬皂公司, 胎牛血清购自北京元亨金马生物技术开发有限公司, 胶原酶阅购自美国砸燥糟澡藻阅蚤葬早灶燥泽贼蚤糟泽公司, 栽砸陨扎燥造溶液购自美国陨灶增蚤贼则燥早藻灶公司, 逆转录试剂盒购自北京全式金生物技术公司, 引物由北京天一辉远公司合成, 孕耘鄄葬灶贼蚤鄄郧则鄄员 云陨栽悦鄄葬灶贼蚤鄄悦阅员员遭 粤孕悦鄄葬灶贼蚤鄄灾耘郧云砸圆均为美国藻月蚤燥泽糟蚤藻灶糟藻产品, 灾耘郧云耘蕴陨杂粤检测试剂盒购自美国砸驭阅公司, 抗小鼠灾耘郧云鄄粤抗体购自美国月蚤燥鄄蕴藻早藻灶凿公司 悦酝云辕云月杂辕耘阅栽粤溶液自配, 缘园园皂造中含源缘皂造员园伊匀月杂杂 缘园皂造云月杂 苑援缘皂造员皂燥造辕蕴匀耘孕耘杂 员园皂造园郾圆缘皂燥造辕蕴耘阅栽粤, 调责匀值至苑援圆, 使用前猿苑益水浴加热 员援圆摇小鼠悦粤悦模型与其治疗模型的建立小鼠悦粤悦模型建立参照文献 [ 愿鄄怨 ] 将小鼠猿园只随机分为悦粤悦模型组 ( 圆园只 ) 和对照组 ( 不做任何处理, 员园只 ) 悦粤悦组小鼠在原缘凿一次性腹腔注射粤韵酝 ( 员园皂早辕噪早 ), 在园凿开始喂圆豫阅杂杂水员周, 随后自由饮水圆周 ; 圆轮喂阅杂杂水后悦粤悦早期模型建模结束, 源轮喂阅杂杂水后悦粤悦晚期模型建模结束 ( 图员 ) 根据小鼠结肠病理情况和该部位肿瘤检测指标将小鼠喂完圆轮阅杂杂水时 ( 即员个月时 ) 作为悦粤悦早期, 将小鼠喂完源轮阅杂杂水时 ( 即猿个月时 ) 作为悦粤悦晚期 分别在员个月 ( 悦粤悦早期 ) 和猿个

3 王柯, 等援灾耘郧云在溃疡性结肠炎癌变中的作用及其可能的机制 月 ( 悦粤悦晚期 ) 圆个时间点处死小鼠, 进行后续相关实验 在该悦粤悦模型的基础上选择早期模型小鼠, 将其随机分为索拉菲尼治疗模型和灾耘郧云抗体治疗模型 索拉菲尼治疗模型在悦粤悦模型建立第员天起每天给小鼠口服灌胃索拉菲尼 ( 源园皂早辕噪早 ), 每天 员次, 在建模员个月时处死小鼠, 进行指标检测 ; 灾耘郧云抗体治疗模型在悦粤悦模型建立的第员天和第 员源天腹腔注射灾耘郧云抗体, 剂量为圆园园皂早 ( 辕只 次 ), 在建模员个月时处死小鼠, 进行指标检测 员援猿摇 图员摇 小鼠肠炎相关结直肠癌模型的制备步骤 云蚤早援员摇孕则燥糟藻泽泽燥枣藻泽贼葬遭造蚤泽澡蚤灶早葬糟燥造蚤贼蚤泽鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿糟燥造燥则藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则皂蚤糟藻皂燥凿藻造 匀鄄耘染色观察小鼠结直肠组织的病理变化 颈椎脱臼法处死小鼠后, 打开腹腔取出结肠, 从结肠的近肛门端剪取园援圆耀耀耀耀耀耀园援缘糟皂结肠组织固定于 员园豫的甲醛溶液中, 石蜡包埋, 切片, 进行匀鄄耘染色, 镜下观察拍片 员援源摇 小鼠结肠组织离体培养 圆取近肛门端员糟皂处结 ( 直 ) 肠, 剪成约园援缘糟皂 小块, 用无菌生理盐水清洗干净 ( 洗缘耀耀耀耀耀耀苑次 ), 置猿 小块于圆源孔板中, 加圆皂造含青链霉素的无血清培养基, 猿苑益 缘豫悦韵圆条件下培养圆源澡, 收集上清, 存于原源园益备用 员援缘摇酶消化法与孕藻则糟燥造造密度梯度离心法制备结肠固有层细胞悬液 采用酶消化法消化结肠组织与孕藻则糟燥造造密度梯 [ 员园度离心法结合获得结肠固有层细胞 ] 首先将结肠纵向剪开, 用生理盐水将结肠清洗干净, 每组结肠 ( 缘条辕组 ) 剪成员耀耀耀耀耀耀圆糟皂的片段放入员缘园皂造的锥形瓶中, 加入圆园皂造悦酝云辕云月杂辕耘阅栽粤溶液, 于猿苑益摇床 ( 员愿园则辕皂蚤灶 ), 消化肠组织缘次, 每次圆园皂蚤灶 ; 用 圆园园目筛网过滤去除上清, 去除肠上皮细胞 将结肠组织放回锥形瓶中继续用含胶原酶 ( 员园园哉辕皂造 ) 的砸孕酝陨员远源园培养基于摇床猿苑益消化猿次, 每次用 圆园皂造胶原酶溶液消化员澡, 用圆园园目筛网过滤细胞悬液至缘园皂造离心管中 收集好细胞悬液后, 愿缘园伊早离心员园皂蚤灶, 弃上清, 将每组细胞重悬于源皂造员园园豫孕藻则糟燥造造溶液中, 然后缓慢在液面上方铺上同体积的源园豫孕藻则糟燥造造溶液, 愿缘园伊早室温离心圆园皂蚤灶, 小心取出, 可见液面中间有一层白膜层 用吸管将 白膜层细胞吸到新的试管中, 加入大量生理盐水洗涤细胞, 猿愿园伊早离心缘皂蚤灶, 弃上清, 获得结肠固有层细胞, 将细胞重悬于培养基中 员援远摇 流式细胞术检测结肠固有层中酝阅杂悦的比例 将获得的结肠固有层细胞用生理盐水洗涤圆 次, 用砸孕酝陨员远源园培养基重悬细胞并将细胞密度调苑至员伊员园辕皂造, 每员皂造悬液各加入圆 μ 造郧则鄄员 悦阅员员遭 灾耘郧云砸圆抗体, 冰上孵育圆园皂蚤灶, 云粤悦杂洗涤 圆次, 源豫多聚甲醛固定, 上流式细胞仪检测 用 垣垣宰蚤灶酝阅陨圆援愿软件分析各处理组中郧则鄄员悦阅员员遭细垣垣垣胞的比例和郧则鄄员悦阅员员遭灾耘郧云砸圆细胞的比例 员援苑摇 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸检测小鼠结肠部位酝阅杂悦的 粤则早鄄员和蚤晕韵杂的表达 栽砸陨扎燥造法抽提结肠酝阅杂悦总砸晕粤, 反转录为 糟阅晕粤 以郧粤孕阅匀为内参, 则藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸检测各组 酝阅杂悦中粤则早鄄员和蚤晕韵杂的表达 扩增条件 : 怨缘益猿皂蚤灶 ; 怨缘益员园泽, 远员益员缘泽, 苑圆益员园泽, 源园个循环 ; 远员益猿园泽, 共远怨个循环 各因子的扩增产物均以原 悦栽其相对应的郧粤孕阅匀为基准校正, 利用公式圆 进行相对定量分析 栽葬遭援员摇 表员摇 引物序列 孕则蚤皂藻则泽藻择怎藻灶糟藻 郧藻灶藻摇摇孕则蚤皂藻则 郧粤孕阅匀 摇云燥则憎葬则凿缘忆鄄栽悦栽栽郧郧郧悦栽粤悦粤悦栽郧粤郧郧粤悦鄄猿忆 摇砸藻增藻则泽藻缘忆鄄悦粤栽粤悦悦粤郧郧粤粤粤栽郧粤郧悦栽栽郧粤鄄猿忆 粤则早鄄员 摇云燥则憎葬则凿缘忆鄄悦栽悦悦粤粤郧悦悦粤粤粤郧栽悦悦栽栽粤郧粤郧鄄猿忆 摇砸藻增藻则泽藻缘忆鄄粤郧郧粤郧悦栽郧栽悦粤栽栽粤郧郧郧粤悦粤栽悦鄄猿忆 蚤晕韵杂 摇云燥则憎葬则凿缘忆鄄郧栽栽悦栽悦粤郧悦悦悦粤粤悦粤粤栽粤悦粤粤郧粤鄄猿忆 摇砸藻增藻则泽藻缘忆鄄郧栽郧郧粤悦郧郧郧栽悦郧粤栽郧栽悦粤悦鄄猿忆 员远员 员援愿摇高效液相色谱检测小鼠血清和结肠培养上清中蕴鄄精氨酸的浓度 血清和结肠培养上清中的蕴鄄精氨酸用高效液相色谱 ( 澡蚤早澡责藻则枣燥则皂葬灶糟藻造蚤择怎蚤凿糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠, [ 员猿匀孕蕴悦 ) 测定 ] 取员园园 μ 造样本至员援缘皂造耘孕管中, 加入员园园 μ 造圆园豫三氯乙酸, 颠倒混匀, 上机检测 员援怨摇耘蕴陨杂粤法检测小鼠结肠培养上清中灾耘郧云的表达 留取各组小鼠的结肠组织培养上清 ( 对照组

4 员远圆 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员猿年源月, 圆园 ( 圆 ) 悦粤悦早期组 悦粤悦晚期组 ), 采用双抗夹心法耘蕴陨杂粤检测各组上清中的灾耘郧云浓度 按照灾耘郧云耘蕴陨杂粤试剂盒操作要求依次加样 ; 肠培养上清每孔缘园 μ 造, 猿苑益孵育猿园皂蚤灶, 洗涤缘次 ; 加酶标抗体后猿苑益孵育猿园皂蚤灶 洗涤苑次, 猿苑益显色员缘皂蚤灶, 终止反应 检测 ( 源缘园灶皂波长 ) 光密度阅值 每个标准品和样品的阅值减去空白对照孔阅值后代入标准曲线公式, 得到相应的灾耘郧云质量浓度 ( 责早辕皂造 ) 员援员园摇统计学处理数据以珋曾依泽表示, 采用孕砸陨杂酝缘援园软件分析, 两组间比较采用贼检验, 以孕约园援园缘或孕约园援园员表示差异具有统计学意义 源郾怨怨 ) 豫 ; 脾组织中晚期组为 ( 怨援怨缘依猿援缘猿 ) 豫, 早期组为 ( 猿援员源依园郾源员 ) 豫 ; 骨髓中晚期组为 ( 远园援苑猿依愿郾圆源 ) 豫, 早期组为 ( 源愿援愿苑依圆援员圆 ) 豫 圆摇结摇果 圆援员摇小鼠悦粤悦模型的成功建立本实验以粤韵酝和阅杂杂联用, 成功建立悦粤悦模型, 猿个月时的发病率为员园园豫 观察结肠形态( 图圆粤 ) 发现, 悦粤悦早期结肠缩短, 中度水肿, 但未见明显肿瘤 ; 悦粤悦晚期可见多个肿瘤, 集中于结直肠部位 计算肿瘤个数 : 悦粤悦晚期 ( 猿个月 ) 肿瘤数目明显多于悦粤悦早期 ( 员个月 )[( 苑援圆依园援苑怨 ) 增泽 ( 园援圆圆依园援员缘 ) 个, 孕约园援园员 ] 分析组织病理 ( 图圆月 ): 悦粤悦早期肠道可见上皮破坏, 溃疡形成, 炎性细胞浸润 ; 悦粤悦晚期出现菜花样肿瘤向肠道内凸起 根据上述指标可将模型建立员月时定为悦粤悦早期, 建模猿月时定为悦粤悦晚期, 为后期研究打下基础 圆援圆摇早期和晚期悦粤悦病灶组织高表达灾耘郧云耘蕴陨杂粤检测结肠组织离体培养上清中灾耘郧云表达, 结果显示, 对照组小鼠结肠部位灾耘郧云的含量为 ( 愿苑苑援远依猿员援远苑 ) 责早辕皂造, 悦粤悦早期组为 ( 员员苑园依怨源郾源猿 ) 责早辕皂造, 悦粤悦晚期组为 ( 员员员苑依苑员援怨圆 ) 责早辕皂造, 与对照组相比, 悦粤悦小鼠结肠部位灾耘郧云的含量在员个月和猿个月时均显著升高 ( 孕约园援园缘 ) 圆援猿摇早期和晚期悦粤悦小鼠体内酝阅杂悦大量累积观察小鼠悦粤悦早期和晚期外周器官和病灶组织中酝阅杂悦的聚集情况, 结果 ( 图猿 ) 显示, 悦粤悦早期组和晚期组病灶部位的酝阅杂悦均显著增多 [ 对照组为 ( 园援猿园依园郾员愿 ) 豫, 悦粤悦早期为 ( 员援猿圆依园郾园源 ) 豫, 悦粤悦晚期为 ( 猿援园愿依园援圆怨 ) 豫, 均孕约园援园员 ] 同时检测了悦粤悦早期组和晚期组外周组织 ( 外周血, 脾脏, 骨髓 ) 中酝阅杂悦的比例, 结果 ( 图源 ) 显示, 与对照组相比悦粤悦早期组外周组织中的酝阅杂悦没有明显增加, 但晚期组均显著增加 ( 均孕约园援园员 ); 外周血中晚期组为 ( 源怨郾源猿依苑援苑缘 ) 豫, 早期组为 ( 圆怨援怨远依 图圆摇小鼠悦粤悦模型的建立云蚤早援圆摇耘泽贼葬遭造蚤泽澡皂藻灶贼燥枣糟燥造蚤贼蚤泽鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿糟燥造燥则藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则皂燥凿藻造粤 : 酝葬糟则燥泽糟燥责蚤糟蚤皂葬早藻燥枣糟燥造燥灶泽蚤灶藻葬糟澡早则燥怎责 ; 月 : 匀蚤泽贼燥责葬贼澡燥造燥早赠蚤皂葬早藻燥枣糟燥造燥灶泽蚤灶藻葬糟澡早则燥怎责 ( 匀鄄耘泽贼葬蚤灶蚤灶早, 伊员园园 ) 图猿摇早期和晚期悦粤悦小鼠结肠部位酝阅杂悦的比例云蚤早援猿摇孕则燥责燥则贼蚤燥灶燥枣酝阅杂悦蚤灶皂蚤糟藻糟燥造燥灶泽葬贼藻葬则造赠泽贼葬早藻葬灶凿造葬贼藻泽贼葬早藻燥枣悦粤悦圆援源摇悦粤悦组小鼠结肠中蕴鄄精氨酸含量明显降低且酝阅杂悦高表达粤则早鄄员和蚤晕韵杂为进一步探究酝阅杂悦发挥免疫抑制功能的机制, 实验检测了血清和结肠组织培养上清中的蕴鄄精氨酸含量 与对照组相比, 悦粤悦早期组血清中的蕴鄄精氨酸含量并无明显变化 ( 结果未显示 ), 而此时悦粤悦小鼠病灶组织中蕴鄄精氨酸含量明显降低, 且悦粤悦晚期组降低更为明显 早期组为 ( 源援圆圆依园郾员苑 )μ 早辕皂造, 晚期组为 ( 圆援怨缘依员援园愿 )μ 早辕皂造, 而对照组为 ( 源援源员依园援员远 )μ 早辕皂造 ( 孕约园援园缘 ) 以则藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸技术检测了悦粤悦早期组和晚期组结肠酝阅杂悦中粤则早鄄员和蚤晕韵杂的表达 结果 ( 图缘粤 月 ) 显示, 悦粤悦早期组结肠酝阅杂悦中粤则早鄄员相对表达量高于对照组 ( 圆援源远依园援员缘增泽园援愿愿依园援园苑, 孕约

5 王柯, 等援灾耘郧云在溃疡性结肠炎癌变中的作用及其可能的机制 园援园缘 ), 蚤晕韵杂相对表达量高于对照组 ( 苑援愿源依园援苑远增泽员援圆园依园援圆缘, 孕约园援园缘 ) 悦粤悦晚期组结肠酝阅杂悦中粤则早鄄员相对表达量更高于对照组 ( 愿援愿圆依园援远园增泽圆郾缘圆依园援猿员, 孕约园援园员 ), 蚤晕韵杂相对表达量也更高于对照组 ( 员园援缘缘依园援苑苑增泽员援圆源依园援圆园, 孕约园援园员 ) 粤则早鄄员和蚤晕韵杂在悦粤悦结肠组织酝阅杂悦中均明显升高, 提示悦粤悦形成过程中结肠部位聚集了大量的酝阅杂悦, 这些细胞高表达粤则早鄄员和蚤晕韵杂, 降解体液中的蕴鄄精氨酸, 抑制效应栽细胞的增殖 员远猿 ( 孕约园援园缘 ); 而且酝阅杂悦表面灾耘郧云砸圆表达显著降低, 粤韵酝垣阅杂杂组为 ( 苑员猿怨依员苑远援员 ), 粤韵酝垣阅杂杂垣泽燥则葬枣藻灶蚤遭组为 ( 源猿苑园依圆猿猿援愿 )( 孕约园援园员 ) 结果提示, 灾耘郧云信号在悦粤悦早期阶段酝阅杂悦的诱导和累积过程中发挥了重要作用, 阻断灾耘郧云信号能明显降低酝阅杂悦在病灶部位的累积, 从而抑制结肠癌病情的发展 图缘摇早期 ( 粤 ) 和晚期 ( 月 ) 悦粤悦结肠组织酝阅杂悦中粤则早鄄员和蚤晕韵杂皂砸晕粤的相对表达量云蚤早援缘摇砸藻造葬贼蚤增藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶造藻增藻造泽燥枣粤则早鄄员皂砸晕粤葬灶凿蚤晕韵杂皂砸晕粤蚤灶糟燥造燥灶蚤糟贼蚤泽泽怎藻酝阅杂悦葬贼藻葬则造赠 ( 粤 ) 葬灶凿造葬贼藻 ( 月 ) 泽贼葬早藻燥枣悦粤悦 孕约园援园员增泽悦贼则造 图源摇早期和晚期悦粤悦小鼠外周血 脾脏和骨髓中酝阅杂悦的比例云蚤早援源摇孕则燥责燥则贼蚤燥灶泽燥枣酝阅杂悦蚤灶皂蚤糟藻遭造燥燥凿, 泽责造藻藻灶葬灶凿遭燥灶藻皂葬则则燥憎葬贼藻葬则造赠泽贼葬早藻葬灶凿造葬贼藻泽贼葬早藻燥枣悦粤悦粤 : 月造燥燥凿 ; 月 : 杂责造藻藻灶 ; 悦 : 月燥灶藻皂葬则则燥憎 圆援缘摇索拉菲尼治疗可抑制结肠部位酝阅杂悦的累积和肠癌的发展上述结果提示, 灾耘郧云表达的升高与结肠部位酝阅杂悦的诱导累积存在明显的时空一致性, 说明灾耘郧云可能对酝阅杂悦在病灶部位的累积具有一定的作用 为验证这一假设, 鉴于灾耘郧云砸圆是酪氨酸酶受体之一, 实验采用索拉菲尼阻断灾耘郧云信号, 观察其对结肠部位酝阅杂悦的累积和悦粤悦进程的影响 结果 ( 图远粤 月 ) 显示, 索拉菲尼治疗组小鼠结直肠水肿明显减轻, 肠上皮破坏受到抑制 与此相应, 结肠组织中酝阅杂悦明显减少 ( 图远悦 ), 其中对照组为 ( 园援苑源依园援员苑 ) 豫 粤韵酝垣阅杂杂垣泽燥则葬枣藻灶蚤遭组为 ( 园援缘远依园援员圆 ) 豫 粤韵酝垣阅杂杂组为 ( 圆援愿员依园援猿怨 ) 豫 图远摇索拉菲尼治疗对悦粤悦形成 结肠组织中酝阅杂悦的累积的影响云蚤早援远摇耘枣枣藻糟贼泽燥枣泽燥则葬枣藻灶蚤遭贼则藻葬贼皂藻灶贼燥灶悦粤悦枣燥则皂葬贼蚤燥灶, 酝阅杂悦葬糟糟怎皂怎造葬贼蚤燥灶蚤灶糟燥造燥灶蚤糟贼蚤泽泽怎藻泽粤 : 酝葬糟则燥泽糟燥责蚤糟蚤皂葬早藻泽燥枣糟燥造燥灶蚤灶藻葬糟澡早则燥怎责 ; 月 : 匀蚤泽贼燥责葬贼澡燥造燥早赠燥枣糟燥造燥灶蚤灶藻葬糟澡早则燥怎责 ( 匀鄄耘, 伊员园园 ); 悦 : 栽澡藻责则燥责燥则贼蚤燥灶燥枣酝阅杂悦蚤灶糟燥造燥灶蚤糟贼蚤泽泽怎藻泽憎蚤贼澡燥则憎蚤贼澡燥怎贼泽燥则葬枣藻灶蚤遭贼则藻葬贼皂藻灶贼

6 员远源 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员猿年源月, 圆园 ( 圆 ) 圆援远摇灾耘郧云抗体治疗可抑制结肠酝阅杂悦的累积和肠癌的发展 鉴于索拉菲尼是一种非特异性灾耘郧云信号阻断剂, 为进一步明确灾耘郧云在酝阅杂悦累积中的作用, 实验用灾耘郧云中和抗体在体内进一步验证灾耘郧云的效应 结果 ( 图苑 ) 显示, 在悦粤悦早期阶段用灾耘郧云抗体治疗后, 病理检查显示治疗效果明显 ( 图苑粤 ); 同时观察到结肠部位酝阅杂悦比例降低 ( 图苑月 ), 对照组为 ( 园援圆源依园援园圆 ) 豫 粤韵酝垣阅杂杂垣灾耘郧云皂粤遭组为 ( 圆援园怨依园援园缘 ) 豫, 粤韵酝垣阅杂杂组为 ( 猿依园援园苑 ) 豫 ( 孕约园援园员 ) 结果再次表明, 灾耘郧云信号对酝阅杂悦的诱导累积可能发挥着重要调控作用 图苑摇 灾耘郧云抗体治疗对悦粤悦形成和酝阅杂悦累积的影响 云蚤早援苑摇耘枣枣藻糟贼泽燥枣葬灶贼蚤鄄灾耘郧云葬灶贼蚤遭燥凿赠贼则藻葬贼皂藻灶贼燥灶悦粤悦枣燥则皂葬贼蚤燥灶葬灶凿酝阅杂悦葬糟糟怎皂怎造葬贼蚤燥灶 粤 : 栽澡藻责则燥责燥则贼蚤燥灶燥枣酝阅杂悦蚤灶糟燥造燥灶贼蚤泽泽怎藻泽憎蚤贼澡燥则憎蚤贼澡燥怎贼葬灶贼蚤鄄灾耘郧云贼则藻葬贼皂藻灶贼 ; 月 : 匀蚤泽贼燥责葬贼澡燥造燥早赠燥枣糟燥造燥灶泽憎蚤贼澡燥则憎蚤贼澡燥怎贼葬灶贼蚤鄄灾耘郧云贼则藻葬贼皂藻灶贼 ( 匀鄄耘, 伊员园园 ) 猿摇讨摇论 哉悦是一种病因不明的慢性肠道炎性疾病, 具有病程长 易复发 迁延不愈等特点, 严重影响患者的 [ 员源 ] 生活质量 近年来研究发现, 随着疾病的迁延不愈和炎症的加重, 并发结直肠癌的风险逐渐增加, 哉悦 患者病程员园年后的累计癌变率为圆豫, 圆园年上升为 愿豫, 猿园年以上病史的哉悦患者患结直肠癌的风险高达员愿豫 在另一项对哉悦患者和正常人群的对照回 [ 员缘 ] 顾性研究中发现, 哉悦的结直肠癌的发病率是非 哉悦的发病率的圆耀耀耀耀耀耀猿倍 尽管悦粤悦只占整个人群中结直肠癌的员豫耀耀耀耀耀耀圆豫, 但它被认为是哉悦的严重并发症, 据统计, 约员缘豫的哉悦患者死于癌症 因此, 急需对哉悦诱发癌变的分子机制进行深入研究, 筛选潜在靶点, 开发特异高效的治疗药物 摇摇灾耘郧云是维持实体瘤生长和转移的重要因子, 通过多种各种形式影响肿瘤的生长, 灾耘郧云可促进肿瘤组织内微血管的形成, 为肿瘤的生长提供养 [ 员远分 ] ; 也可直接刺激肿瘤细胞增殖, 加速肿瘤的生 [ 员苑长 ], 还可维持肿瘤干细胞集落, 利于肿瘤干细胞 [ 员愿生长等 ] [ 苑 ] 有文献报道, 在悦粤悦的形成过程中, 灾耘郧云通过刺激结肠上皮细胞增殖, 加速其恶变, 从而促进悦粤悦的生长 本研究发现, 诱导酝阅杂悦在病灶部位的产生和累积可能是灾耘郧云促进肿瘤生长的又一重要机制 灾耘郧云很可能是悦粤悦早期与酝阅杂悦 诱导累积相关的重要因子之一, 阻断灾耘郧云信号显著减少了酝阅杂悦的产生和聚集, 从而增强抗肿瘤免疫, 抑制肿瘤的生长 然而灾耘郧云调控酝阅杂悦产生和聚集的机制还有待进一步研究, 此外阻断灾耘郧云 信号很可能也影响了其他促进肿瘤发展的因素, 这些问题都值得更加深入的研究 另外, 灾耘郧云的来源仍不甚清楚 在不同的病理环境中, 多种细胞可分泌灾耘郧云, 有意思的是酝阅杂悦也可分泌灾耘郧云, 提 [ 员怨示可能存在着灾耘郧云自分泌调节机制 ], 这需要进一步的研究加以验证 摇摇酝阅杂悦可能通过多种机制影响机体的抗肿瘤免疫, 其中粤则早鄄员和蚤晕韵杂是酝阅杂悦分泌的重要介质, 粤则早鄄员通过分解体内的精氨酸, 抑制栽细胞的增殖, [ 圆园蚤晕韵杂在分解精氨酸的过程中可产生晕韵 ] 本实验结果显示, 在悦粤悦模型小鼠体内, 酝阅杂悦高表达 粤则早鄄员和蚤晕韵杂, 与此同步的是病灶部位的蕴鄄精氨酸含量显著降低 这些结果提示, 酝阅杂悦的作用机制部分是通过产生粤则早鄄员和蚤晕韵杂来抑制悦栽蕴的增殖和功能, 从而抑制机体的抗肿瘤免疫反应, 促进肿瘤的生长 综上, 本研究为诠释灾耘郧云对悦粤悦发生 发展的作用机制提供了新的思路 : 灾耘郧云通过影响酝阅杂悦 的产生和累积, 营造有利于悦粤悦形成的微环境, 促进悦粤悦形成 因此, 开发靶向灾耘郧云的药物, 如抗体或小分子化合物或抑制酝阅杂悦功能的药物可能是将来治疗哉悦和悦粤悦的有效手段 [ 参考文献 ] [ 员 ] 摇悦燥灶凿葬皂蚤灶藻栽, 郧葬遭则蚤造燥增蚤糟澡阅陨援酝燥造藻糟怎造葬则皂藻糟澡葬灶蚤泽皂泽则藻早怎造葬贼蚤灶早皂赠藻造燥蚤凿鄄凿藻则蚤增藻凿泽怎责责则藻泽泽燥则糟藻造造凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶葬灶凿枣怎灶糟贼蚤燥灶 [ 允 ] 援栽则藻灶凿泽陨皂皂怎灶燥造, 圆园员员, 猿圆 ( 员 ): 员怨鄄圆缘援 [ 圆 ] 摇耘造造蚤泽蕴酝, 匀蚤糟噪造蚤灶阅允援灾耘郧云鄄贼葬则早藻贼藻凿贼澡藻则葬责赠 : 酝藻糟澡葬灶蚤泽皂泽燥枣葬灶贼蚤鄄贼怎皂燥怎则葬糟贼蚤增蚤贼赠 [ 允 ] 援晕葬贼砸藻增悦葬灶糟藻则, 圆园园愿, 愿 ( 愿 ): 缘苑怨鄄缘怨员援 [ 猿 ] 摇韵泽贼则葬灶凿鄄砸燥泽藻灶遭藻则早杂, 杂蚤灶澡葬孕援酝赠藻造燥蚤凿鄄凿藻则蚤增藻凿泽怎责责则藻泽泽燥则糟藻造造泽 : 蕴蚤灶噪蚤灶早蚤灶枣造葬皂皂葬贼蚤燥灶葬灶凿糟葬灶糟藻则 [ 允 ] 援允陨皂皂怎灶燥造, 圆园园怨, 员愿圆 ( 愿 ): 源源怨怨鄄源缘园远援

7 王柯, 等援灾耘郧云在溃疡性结肠炎癌变中的作用及其可能的机制 员远缘 [ 源 ] 摇栽藻则葬遭藻酝, 酝葬贼泽怎蚤杂, 孕葬则噪允酝, 藻贼葬造援栽则葬灶泽枣燥则皂蚤灶早早则燥憎贼澡枣葬糟贼燥则鄄遭藻贼葬责则燥凿怎糟贼蚤燥灶葬灶凿皂赠藻造燥蚤凿糟藻造造泽葬则藻葬灶藻枣枣藻糟贼燥则皂藻糟澡葬灶蚤泽皂贼澡则燥怎早澡憎澡蚤糟澡悦阅员凿鄄则藻泽贼则蚤糟贼藻凿栽糟藻造造泽遭造燥糟噪糟赠贼燥贼燥曾蚤糟栽造赠皂责澡燥鄄糟赠贼藻鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿贼怎皂燥则蚤皂皂怎灶燥泽怎则增藻蚤造造葬灶糟藻 : 粤遭则燥早葬贼蚤燥灶责则藻增藻灶贼泽贼怎皂燥则则藻糟怎则则藻灶糟藻 [ 允 ] 援允耘曾责酝藻凿, 圆园园猿, 员怨愿 ( 员员 ): 员苑源员鄄员苑缘圆援 [ 缘 ] 摇王柯, 陈国江, 黎燕援髓源抑制性细胞产生及其功能的分子调控机制 [ 允 ] 援中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员圆, 员怨 ( 猿 ): 猿圆园鄄猿圆缘援 [ 远 ] 摇云怎造燥则蚤葬允援杂葬枣藻贼赠责则燥枣蚤造藻泽燥枣糟怎则则藻灶贼葬灶贼蚤葬灶早蚤燥早藻灶蚤糟贼澡藻则葬责蚤藻泽枣燥则皂藻贼葬泽贼葬贼蚤糟糟燥造燥则藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则 [ 允 ] 援韵灶糟燥栽葬则早藻贼泽栽澡藻则, 圆园员圆, 缘 : 员猿猿鄄员源圆援 [ 苑 ] 摇宰葬造凿灶藻则酝允, 宰蚤则贼扎杂, 允藻枣则藻皂燥憎粤, 藻贼葬造援灾耘郧云则藻糟藻责贼燥则泽蚤早灶葬鄄造蚤灶早造蚤灶噪泽蚤灶枣造葬皂皂葬贼蚤燥灶葬灶凿贼怎皂燥则蚤早藻灶藻泽蚤泽蚤灶糟燥造蚤贼蚤泽鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿糟葬灶糟藻则 [ 允 ] 援允耘曾责酝藻凿, 圆园员园, 圆园苑 ( 员猿 ): 圆愿缘缘鄄圆愿远愿援 [ 愿 ] 摇栽葬灶葬噪葬栽, 运燥澡灶燥匀, 杂怎扎怎噪蚤砸援藻贼葬造援粤灶燥增藻造蚤灶枣造葬皂皂葬贼蚤燥灶鄄则藻造葬贼藻凿皂燥怎泽藻糟燥造燥灶糟葬则糟蚤灶燥早藻灶藻泽蚤泽皂燥凿藻造蚤灶凿怎糟藻凿遭赠葬扎燥曾赠皂藻贼澡鄄葬灶藻葬灶凿凿藻曾贼则葬灶泽燥凿蚤怎皂泽怎造枣葬贼藻 [ 允 ] 援悦葬灶糟藻则杂糟蚤, 圆园园猿, 怨源 ( 员员 ): 怨远缘鄄怨苑猿援 [ 怨 ] 摇杂怎扎怎噪蚤砸, 酝蚤赠葬皂燥贼燥杂, 再葬泽怎蚤再, 藻贼葬造援郧造燥遭葬造早藻灶藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶葬灶葬造赠泽蚤泽燥枣贼澡藻皂燥怎泽藻糟燥造燥灶蚤糟皂怎糟燥泽葬贼则藻葬贼藻凿憎蚤贼澡葬扎燥曾赠皂藻贼澡葬灶藻葬灶凿凿藻曾贼则葬灶泽燥凿蚤怎皂泽怎造枣葬贼藻 [ 允 ] 援月酝悦悦葬灶糟藻则, 圆园园苑, 苑 : 愿源鄄怨远援 [ 员园 ] 蕴藻枣则葬灶糟燥蚤泽蕴, 蕴赠糟噪藻晕援陨泽燥造葬贼蚤燥灶燥枣皂燥怎泽藻泽皂葬造造蚤灶贼藻泽贼蚤灶葬造蚤灶贼则葬藻责蚤鄄贼澡藻造蚤葬造造赠皂责澡燥糟赠贼藻泽, 孕藻赠藻则忆泽责葬贼糟澡, 葬灶凿造葬皂蚤灶葬责则燥责则蚤葬糟藻造造泽 [ 酝 ] 援悦怎则则孕则燥贼燥糟陨皂皂怎灶燥造, 圆园园员, 悦澡葬责贼藻则猿 : 哉灶蚤贼猿援员怨援 [ 员员 ] 孕葬则蚤泽澡悦砸, 郧造蚤凿凿藻灶酝匀, 匝怎葬澡月允, 藻贼葬造援哉泽藻燥枣贼澡藻蚤灶贼则葬糟藻造造怎造葬则枣造怎燥则藻泽糟藻灶贼凿赠藻悦云杂耘贼燥皂燥灶蚤贼燥则造赠皂责澡燥糟赠贼藻皂蚤早则葬贼蚤燥灶葬灶凿责则燥造蚤枣鄄藻则葬贼蚤燥灶 [ 允 ] 援悦怎则则孕则燥贼燥糟陨皂皂怎灶燥造, 圆园园怨, 悦澡葬责贼藻则源 : 哉灶蚤贼源援怨援 [ 员圆 ] 匝怎葬澡月允, 孕葬则蚤泽澡悦砸援栽澡藻怎泽藻燥枣糟葬则遭燥曾赠枣造怎燥则藻泽糟藻蚤灶凿蚤葬糟藻贼葬贼藻泽怎糟糟蚤灶蚤皂蚤凿赠造藻泽贼藻则 ( 悦云杂耘 ) 贼燥皂燥灶蚤贼燥则造赠皂责澡燥糟赠贼藻责则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶 [ 允 ] 援允灾蚤泽耘曾责, 圆园员园, 源源 : 圆圆缘怨鄄圆圆远圆援 [ 员猿 ] 酝葬则则葬酝, 月燥灶枣蚤早造蚤粤砸, 栽藻泽贼葬砸, 藻贼葬造援匀蚤早澡鄄责藻则枣燥则皂葬灶糟藻造蚤择怎蚤凿糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡蚤糟葬泽泽葬赠燥枣葬泽赠皂皂藻贼则蚤糟凿蚤皂藻贼澡赠造葬则早蚤灶蚤灶藻, 泽赠皂皂藻贼则蚤糟凿蚤皂藻贼澡赠造葬则早蚤灶蚤灶藻, 葬灶凿葬则早蚤灶蚤灶藻蚤灶澡怎皂葬灶责造葬泽皂葬遭赠凿藻则蚤增葬贼蚤扎葬贼蚤燥灶憎蚤贼澡灶葬责澡贼澡葬造藻灶藻鄄圆, 猿鄄凿蚤糟葬则遭燥曾葬造凿藻澡赠凿藻 [ 允 ] 援粤灶葬造月蚤燥糟澡藻皂, 圆园园猿, 猿员愿 ( 员 ): 员猿鄄员苑援 [ 员源 ] 耘葬凿藻灶允粤, 酝葬赠遭藻则则赠允云, 藻贼葬造援郧怎蚤凿藻造蚤灶藻泽枣燥则泽糟则藻藻灶蚤灶早葬灶凿泽怎则增藻蚤造造葬灶糟藻燥枣葬泽赠皂责贼燥皂葬贼蚤糟糟燥造燥则藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则蚤灶责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡蚤灶鄄枣造葬皂皂葬贼燥则赠遭燥憎藻造凿蚤泽藻葬泽藻 [ 允 ] 援郧怎贼, 圆园园圆, 缘员 ( 杂怎责责造缘 ): 灾员园鄄灾员圆援 [ 员缘 ] 增葬灶杂贼葬葬栽孕, 悦葬则凿栽, 蕴燥早葬灶砸云, 藻贼葬造援缘鄄粤皂蚤灶燥泽葬造蚤糟赠造葬贼藻怎泽藻葬灶凿糟燥造燥则藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则则蚤泽噪蚤灶蚤灶枣造葬皂皂葬贼燥则赠遭燥憎藻造凿蚤泽藻葬泽藻 : 粤造葬则早藻藻责蚤凿藻皂蚤燥造燥早蚤糟葬造泽贼怎凿赠 [ 允 ] 援郧怎贼, 圆园园缘, 缘源 ( 员员 ): 员缘苑猿鄄员缘苑愿援 [ 员远 ] 悦葬则皂藻造蚤藻贼孕援灾耘郧云葬泽葬噪藻赠皂藻凿蚤葬贼燥则燥枣葬灶早蚤燥早藻灶藻泽蚤泽蚤灶糟葬灶糟藻则 [ 允 ] 援韵灶糟燥造燥早赠, 圆园园缘, 远怨 ( 杂怎责责造猿 ): 源鄄员园援 [ 员苑 ] 砸葬责蚤泽葬则凿葬粤, 酝藻造蚤造造燥郧援砸燥造藻燥枣贼澡藻灾耘郧云辕灾耘郧云砸葬曾蚤泽蚤灶糟葬灶糟藻则遭蚤燥造燥早赠葬灶凿贼澡藻则葬责赠 [ 允 ] 援粤凿增悦葬灶糟藻则砸藻泽, 圆园员圆, 员员源 : 圆猿苑鄄圆远苑援 [ 员愿 ] 月藻糟噪月, 阅则蚤藻泽泽藻灶泽郧, 郧燥燥泽泽藻灶泽杂, 藻贼葬造援粤增葬泽糟怎造葬则灶蚤糟澡藻葬灶凿葬灾耘郧云鄄晕则责员造燥燥责则藻早怎造葬贼藻贼澡藻蚤灶蚤贼蚤葬贼蚤燥灶葬灶凿泽贼藻皂灶藻泽泽燥枣泽噪蚤灶贼怎皂燥怎则泽 [ 允 ] 援晕葬贼怎则藻, 圆园员员, 源苑愿 ( 苑猿远怨 ): 猿怨怨鄄源园猿援 [ 员怨 ] 阅燥灶噪燥则酝运, 蕴葬澡怎藻耘, 匀燥噪藻栽粤, 藻贼葬造援酝葬皂皂葬则赠贼怎皂燥则澡藻贼藻则燥早藻鄄灶藻蚤贼赠蚤灶贼澡藻藻曾责葬灶泽蚤燥灶燥枣皂赠藻造燥蚤凿鄄凿藻则蚤增藻凿泽怎责责则藻泽泽燥则糟藻造造泽 [ 允 ] 援陨灶贼陨皂皂怎灶燥责澡葬则皂葬糟燥造, 圆园园怨, 怨 ( 苑辕愿 ): 怨猿苑鄄怨源愿援 [ 圆园 ] 郧葬遭则蚤造燥增蚤糟澡阅陨, 晕葬早葬则葬躁杂援酝赠藻造燥蚤凿鄄凿藻则蚤增藻凿泽怎责责则藻泽泽燥则糟藻造造泽葬泽则藻早怎造葬贼燥则泽燥枣贼澡藻蚤皂皂怎灶藻泽赠泽贼藻皂 [ 允 ] 援晕葬贼砸藻增陨皂皂怎灶燥造, 圆园园怨, 怨 ( 猿 ): 员远圆鄄员苑源援 [ 收稿日期 ] 摇圆园员圆原员圆原园圆 [ 修回日期 ] 摇圆园员猿原园圆原圆远 [ 本文编辑 ] 摇王莹, 黄静怡 檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿 参考文献题名后须标注文献类型和文献载体标志代码 读者 作者 编者 摇摇本刊参考文献按照国家标准郧月辕栽苑苑员源鄄圆园园缘 文后参考文献著录规则 的要求进行著录 该国家标准要求, 每条文献的题名后都须标上 [ 文献类型标志 ] 或 [ 文献类型标志辕文献载体标志 ] 对纸质文献, 如为期刊中析出文献, 题名后应标上 [ 允 ]; 如为专著中析出文献, 题名后应标上 [ 酝 ] 对电子文献, 如为网络期刊析出文献, 题名后须标上 [ 允辕韵蕴 ]; 如为网络专著中析出文献, 题名后须标上 [ 酝辕韵蕴 ] 现把常用的文献类型标志代码和电子文献载体标志代码介绍如下 : 表员摇 文献类型和文献载体标志代码 文献类型 标志代码 文献类型 标志代码 载体类型 标志代码 期摇 摇 刊 允 报摇 摇 摇 纸 晕 磁摇 摇 带 酝栽 专摇 摇 著 酝 专摇 摇 摇 利 孕 磁摇 摇 盘 阅运 汇摇 摇 编 郧 标摇 摇 摇 准 杂 光摇 摇 盘 悦阅 会议录 悦 数 据 库 阅月 联机网络 韵蕴 学位论文 阅 计算机程序 悦孕 报摇 摇 告 砸 电子公告 耘月