肖永彪, 等援杂栽砸粤孕异常表达对胃癌细胞分化的作用 愿园苑 贼燥则泽憎藻则藻贼则葬灶泽枣藻糟贼藻凿蚤灶贼燥早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬杂郧悦苑怨园员造蚤灶藻糟藻造造泽援粤枣贼藻则贼澡藻贼则葬灶泽枣藻糟贼蚤燥灶, 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶泽燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶贼澡藻杂郧悦苑怨园员糟藻造造

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1 愿园远 中国肿瘤生物治疗杂志摇澡贼贼责 : 辕辕憎憎憎援遭蚤燥贼澡藻则援燥则早悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则, 阅藻糟援圆园员远, 灾燥造援圆猿, 晕燥援远 阅韵陨 : 员园援猿愿苑圆辕躁援蚤泽泽灶援员园园苑鄄猿愿缘载援圆园员远援园远援园员圆 临床研究 杂栽砸粤孕异常表达对胃癌细胞分化的作用 员员员圆猿猿猿肖永彪, 朱君玲, 米开热木 麦麦提, 徐洁, 潘泽民, 任显显, 李冬妹 ( 员援新疆喀什地区第一人民医院消化腹部肿瘤外科, 新疆喀什愿源源园园园 ; 圆援新疆医科大学第五附属医院心内科, 新疆乌鲁木齐愿猿园园园员 ; 猿援石河子大学医学院生物化学教研室, 新疆石河子愿猿圆园园圆 ) [ 摘摇要 ] 摇目的 : 探讨丝苏氨酸激酶受体相关蛋白 ( 泽藻则蚤灶藻鄄贼澡则藻燥灶蚤灶藻噪蚤灶葬泽藻则藻糟藻责贼燥则鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿责则燥贼藻蚤灶, 杂栽砸粤孕 ) 异常表达对胃癌细胞分化的影响 方法 : 收集北京大学肿瘤医院消化肿瘤外科于员怨怨员年员月至圆园园怨年员月手术切除的胃癌标本圆缘猿例, 同时另取员园猿例同批胃癌患者癌旁组织标本作为对照, 制备组织芯片 采用免疫组化检测胃癌组织和癌旁组织中杂栽砸粤孕蛋白的表达, 分析其表达与胃癌组织细胞分化 临床分期等临床病理因素的关系, 采用运葬责造葬灶鄄酝藻蚤藻则生存分析探讨杂栽砸粤孕蛋白的异常表达与胃癌患者预后的关系 ; 将杂栽砸粤孕真核表达载体转染胃癌细胞杂郧悦苑怨园员, 采用宰藻泽贼藻则灶遭造燥贼贼蚤灶早检测转染后胃癌杂郧悦苑怨园员细胞中杂栽砸粤孕蛋白的表达情况, 酝栽栽法检测杂郧悦苑怨园员细胞的增殖能力, 免疫荧光染色法检测胃癌组织细胞分化相关蛋白胃蛋白酶原悦 ( 责藻责泽蚤灶燥早藻灶悦, 孕郧悦 ) 在杂郧悦苑怨园员细胞中的表达情况, 同时分析碱性磷酸酶 ( 葬造噪葬造蚤灶藻责澡燥泽责澡葬贼葬泽藻泽, 粤运孕 ) 在杂栽砸粤孕过量表达细胞中的活性 结果 : 胃癌组织中杂栽砸粤孕蛋白的阳性表达率明显低于癌旁组织 [ 猿猿援远豫 ( 苑缘辕圆圆猿 ) 增泽缘怨援猿豫 ( 缘员辕愿远 ), 孕约园援园员 ], 且其表达水平与胃癌细胞分化程度密切相关 ( 孕约园援园缘 ), 杂栽砸粤孕蛋白表达较高的患者预后生存期明显长于低表达患者 ( 孕约园援园缘 ) 胃癌杂郧悦苑怨园员细胞过表达杂栽砸粤孕蛋白后, 其增殖能力明显减弱 ( 孕约园援园缘 ); 胃癌组织细胞分化相关蛋白孕郧悦表达水平显著升高 ( 孕约园援园缘 ), 而粤运孕活性明显下降 ( 孕约园援园缘 ) 结论 : 杂栽砸粤孕蛋白在胃癌组织中的表达水平与胃癌组织细胞分化密切相关, 其可能作为分子标志物对胃癌组织细胞分化程度和预后的辅助判断具有良好的临床价值 [ 关键词 ] 摇胃癌 ; 丝苏氨酸激酶受体相关蛋白 ; 分化 ; 分子标志物 [ 中图分类号 ] 摇砸苑猿缘援圆 ; 砸苑猿园援缘员摇摇摇摇 [ 文献标识码 ] 摇粤摇摇摇摇 [ 文章编号 ] 摇员园园苑鄄猿愿缘载 ( 圆园员远 ) 园远鄄园愿园远鄄园苑 耘枣枣藻糟贼燥枣葬遭灶燥则皂葬造藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕燥灶凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶燥枣早葬泽贼则蚤糟糟葬灶糟藻则糟藻造造泽 员员员圆猿猿猿载陨粤韵再燥灶早遭蚤葬燥, 在匀哉允怎灶造蚤灶早, 酝蚤噪葬蚤则藻皂怎 酝葬蚤皂葬蚤贼蚤, 载哉允蚤藻, 孕粤晕在藻皂蚤灶, 砸耘晕载蚤葬灶曾蚤葬灶, 蕴陨阅燥灶早皂藻蚤 ( 员援阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣阅蚤早藻泽贼蚤燥灶葬灶凿粤遭凿燥皂蚤灶葬造杂怎则早藻则赠, 贼澡藻员泽贼孕藻燥责造藻匀燥泽责蚤贼葬造燥枣运葬泽澡蚤孕则藻枣藻糟贼怎则藻, 运葬泽澡蚤愿源源园园园, 载蚤灶躁蚤葬灶早, 悦澡蚤灶葬 ; 圆援阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣悦葬则凿蚤燥造燥早赠, 贼澡藻缘贼澡匀燥泽责蚤贼葬造粤枣枣蚤造蚤葬贼藻凿贼燥载蚤灶躁蚤葬灶早酝藻凿蚤糟葬造哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠, 哉则怎皂糟澡蚤愿猿园园园员, 载蚤灶躁蚤葬灶早, 悦澡蚤灶葬 ; 猿援阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠, 酝藻凿蚤糟葬造杂糟澡燥燥造燥枣杂澡蚤澡藻扎蚤哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠, 杂澡蚤澡藻扎蚤愿猿圆园园圆, 载蚤灶躁蚤葬灶早, 悦澡蚤灶葬 ) [ 粤遭泽贼则葬糟贼 ] 摇韵遭躁藻糟贼蚤增藻 : 栽燥藻曾责造燥则藻藻枣枣藻糟贼葬遭灶燥则皂葬造藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣泽藻则蚤灶藻鄄贼澡则藻燥灶蚤灶藻噪蚤灶葬泽藻则藻糟藻责贼燥则鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿责则燥贼藻蚤灶 ( 杂栽砸粤孕 ) 燥灶凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶燥枣早葬泽贼则蚤蚤糟糟葬灶糟藻则糟藻造造泽援酝藻贼澡燥凿泽 : 栽憎燥澡怎灶凿则藻凿枣蚤枣贼赠贼澡则藻藻糟葬泽藻泽燥枣泽怎则早蚤糟葬造造赠则藻泽藻糟贼藻凿早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬泽责藻糟蚤皂藻灶泽蚤灶阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣阅蚤早藻泽贼蚤增藻栽怎皂燥则杂怎则早藻则赠, 栽怎皂燥则匀燥泽责蚤贼葬造燥枣孕藻噪蚤灶早哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠凿怎则蚤灶早允葬灶怎葬则赠员怨怨员贼燥允葬灶怎葬则赠圆园园怨憎藻则藻糟燥造造藻糟贼藻凿援粤贼贼澡藻泽葬皂藻贼蚤皂藻, 员园猿糟葬泽藻泽燥枣糟葬则糟蚤灶燥皂葬葬凿躁葬糟藻灶贼贼蚤泽泽怎藻枣则燥皂贼澡藻泽葬皂藻造燥贼燥枣贼澡藻责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬憎藻则藻糟燥造造藻糟贼藻凿葬泽糟燥灶贼则燥造援栽蚤泽泽怎藻皂蚤糟则燥葬则则葬赠泽憎藻则藻责则藻责葬则藻凿援陨皂皂怎灶燥澡蚤泽贼燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠葬泽泽葬赠憎葬泽怎泽藻凿贼燥凿藻贼藻糟贼藻曾责则藻泽泽蚤燥灶泽燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶贼澡藻早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬贼蚤泽泽怎藻泽葬灶凿贼澡藻糟葬则糟蚤灶燥皂葬葬凿躁葬糟藻灶贼贼蚤泽泽怎藻泽, 葬灶凿则藻造葬贼蚤燥灶鄄泽澡蚤责遭藻贼憎藻藻灶藻曾责则藻泽泽蚤燥灶泽燥枣贼澡藻杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶葬灶凿糟造蚤灶蚤糟葬造责葬贼澡燥造燥早蚤糟葬造枣葬糟贼燥则泽, 灶葬皂藻造赠凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶燥枣早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬糟藻造造泽, 糟造蚤灶蚤糟葬造泽贼葬早蚤灶早葬灶凿泽燥燥灶憎葬泽葬灶葬造赠扎藻凿援砸藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责遭藻贼憎藻藻灶葬遭灶燥则皂葬造藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶葬灶凿责则燥早灶燥泽蚤泽燥枣贼澡藻责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬憎葬泽葬灶葬造赠扎藻凿遭赠运葬责造葬灶鄄酝藻蚤藻则泽怎则增蚤增葬造葬灶葬造赠泽蚤泽援杂栽砸粤孕藻怎噪葬则赠燥贼蚤糟藻曾责则藻泽泽蚤燥灶增藻糟鄄 [ 基金项目 ] 摇新疆生产建设兵团应用基础研究资助项目 ( 晕燥援圆园员缘粤郧园员缘 ) 孕则燥躁藻糟贼泽怎责责燥则贼藻凿遭赠贼澡藻粤责责造蚤藻凿月葬泽蚤糟砸藻泽藻葬则糟澡孕则燥早则葬皂燥枣载蚤灶躁蚤葬灶早孕则燥凿怎糟贼蚤燥灶葬灶凿悦燥灶泽贼则怎糟贼蚤燥灶悦燥则责泽 ( 晕燥援圆园员缘粤郧园员缘 ) [ 作者简介 ] 摇肖永彪 ( 员怨苑苑原 ), 男, 湖南邵阳人, 硕士生, 副主任医师, 主要从事消化道肿瘤的综合治疗研究, 耘鄄皂葬蚤造 : 圆远员圆怨员圆远岳择择援糟燥皂 [ 通信作者 ] 摇李冬妹 ( 蕴陨阅燥灶早皂藻蚤, 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早葬怎贼澡燥则 ), 耘鄄皂葬蚤造 : 造蚤凿燥灶早赃葬遭糟岳员圆远援糟燥皂 [ 优先发表 ] 摇澡贼贼责 : 辕辕憎憎憎援糟灶噪蚤援灶藻贼辕噪糟皂泽辕凿藻贼葬蚤造辕猿员援员苑圆缘援砸援圆园员远员员员园援员源猿园援园员源援澡贼皂造

2 肖永彪, 等援杂栽砸粤孕异常表达对胃癌细胞分化的作用 愿园苑 贼燥则泽憎藻则藻贼则葬灶泽枣藻糟贼藻凿蚤灶贼燥早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬杂郧悦苑怨园员造蚤灶藻糟藻造造泽援粤枣贼藻则贼澡藻贼则葬灶泽枣藻糟贼蚤燥灶, 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶泽燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶贼澡藻杂郧悦苑怨园员糟藻造造泽憎藻则藻藻曾葬皂蚤灶藻凿遭赠宰藻泽贼藻则灶遭造燥贼贼蚤灶早, 责则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶葬遭蚤造蚤贼蚤藻泽燥枣贼澡藻杂郧悦苑怨园员糟藻造造泽憎藻则藻凿藻贼藻糟贼藻凿遭赠酝栽栽贼藻泽贼, 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶泽燥枣贼澡藻早葬泽贼则蚤糟糟葬灶糟藻则糟藻造造凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿鄄责则燥贼藻蚤灶责藻责泽蚤灶燥早藻灶悦 ( 孕郧悦 ) 蚤灶贼澡藻杂郧悦苑怨园员糟藻造造泽憎藻则藻糟澡藻糟噪藻凿遭赠蚤皂皂怎灶燥枣造怎燥则藻泽糟藻灶糟藻泽贼葬蚤灶蚤灶早葬泽泽葬赠援酝藻葬灶憎澡蚤造藻葬糟贼蚤增蚤贼赠燥枣葬造噪葬造蚤灶藻责澡燥泽责澡葬贼葬泽藻泽 ( 粤运孕 ) 蚤灶贼澡藻糟藻造造泽憎蚤贼澡藻曾糟藻泽泽蚤增藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕憎葬泽葬灶葬造赠扎藻凿援砸藻泽怎造贼泽 : 孕燥泽蚤贼蚤增藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶则葬贼藻燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶贼澡藻早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬贼蚤泽泽怎藻泽憎葬泽燥遭增蚤燥怎泽造赠造燥憎藻则贼澡葬灶贼澡葬贼蚤灶贼澡藻糟葬则糟蚤灶燥皂葬葬凿躁葬糟藻灶贼贼蚤泽泽怎藻泽 ( 猿猿援远豫 [ 苑缘辕圆圆猿 ] 增泽缘怨援猿豫 [ 缘员辕愿远 ], 孕约园郾园员 ), 葬灶凿贼澡藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶造藻增藻造燥枣杂栽砸粤孕憎葬泽糟造燥泽藻造赠则藻造葬贼藻凿贼燥凿藻枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶早则葬凿藻燥枣贼澡藻早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬糟藻造造泽 ( 孕约园援园缘 ), 责则燥早灶燥泽蚤泽泽怎则增蚤增葬造燥枣贼澡藻责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡澡蚤早澡藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶憎葬泽藻增蚤凿藻灶贼造赠造燥灶早藻则贼澡葬灶贼澡葬贼燥枣贼澡藻责葬鄄贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡造燥憎藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣贼澡藻责则燥贼藻蚤灶 ( 孕约园援园缘 ) 援粤枣贼藻则燥增藻则藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶贼澡藻早葬泽贼蚤则糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬杂郧悦苑怨园员糟藻造造泽, 责则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶葬遭蚤造蚤贼赠燥枣贼澡藻糟藻造造泽泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠葬贼贼藻灶怎葬贼藻凿 ( 孕约园援园缘 ), 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣贼澡藻孕郧悦燥遭增蚤燥怎泽造赠蚤灶鄄糟则藻葬泽藻凿 ( 孕约园援园缘 ), 葬灶凿葬糟贼蚤增蚤贼赠燥枣贼澡藻粤运孕藻增蚤凿藻灶贼造赠凿藻糟则藻葬泽藻凿 ( 孕约园援园缘 ) 援悦燥灶糟造怎泽蚤燥灶 : 栽澡藻则藻糟燥怎造凿遭藻葬泽贼则燥灶早造蚤灶噪遭藻贼憎藻藻灶藻曾责则藻泽泽蚤燥灶造藻增藻造燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶贼澡藻早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬贼蚤泽泽怎藻泽葬灶凿凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶燥枣贼澡藻早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬糟藻造造泽, 贼澡藻杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶葬泽葬皂燥造藻糟怎葬造则皂葬则噪藻则皂蚤早澡贼澡葬增藻葬早燥燥凿糟造蚤灶蚤糟葬造增葬造怎藻枣燥则凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶早则葬凿藻燥枣贼澡藻早葬泽贼则蚤糟糟葬则鄄糟蚤灶燥皂葬糟藻造造泽葬灶凿泽怎责责造藻皂藻灶贼葬则赠躁怎凿早皂藻灶贼燥枣责则燥早灶燥泽蚤泽蚤灶贼澡藻责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬援 [ 运藻赠憎燥则凿泽 ] 摇早葬泽贼则蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂 ; 泽藻则蚤灶藻鄄贼澡则藻燥灶蚤灶藻噪蚤灶葬泽藻则藻糟藻责贼燥则鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿责则燥贼藻蚤灶 ( 杂栽砸粤孕 ); 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 ; 皂燥造藻糟怎鄄造葬则皂葬则噪藻则 [ 悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则, 圆园员远, 圆猿 ( 远 ): 愿园远鄄愿员圆援阅韵陨 : 员园援猿愿苑圆辕躁援蚤泽泽灶援员园园苑鄄猿愿缘载援圆园员远援园远援园员圆 ] 摇摇 [ 员摇摇胃癌在全球肿瘤死亡率中居第二位 ], 我国胃 [ 圆癌死亡例数约占世界胃癌死亡例数的源源豫 ] 胃癌的发生与饮食 环境及遗传背景等密切相关 由于早期症状不明显, 又缺乏有效的早期诊断标志物, [ 猿很多患者就诊时已经发展到中晚期 ] 然而胃癌细胞随着分化程度的不同, 表现出不同的异质性 ; 细胞分化水平对于胃癌的诊疗起非常重要的指导作用, 低分化的 Ⅳ 期胃癌患者缘年生存率不足圆缘豫, [ 源治疗效果差 ] ; 一些功能蛋白参与了细胞分化的过 [ 缘程, 其表达紊乱与细胞的异常分化密切相关 ] 本 [ 远 ] 课题组在前期研究中发现, 丝苏氨酸激酶受体相关蛋白 ( 泽藻则蚤灶藻鄄贼澡则藻燥灶蚤灶藻噪蚤灶葬泽藻则藻糟藻责贼燥则鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿责则燥贼藻蚤灶, 杂栽砸粤孕 ) 在胃癌中表达下调 杂栽砸粤孕能够通 [ 苑过杂皂葬凿苑调节栽郧云鄄遭藻贼葬通路的活性 ] ; 栽郧云鄄遭藻贼葬与 [ 愿细胞分化密切相关 ], 本研究检测胃癌组织中 杂栽砸粤孕蛋白的表达并分析其与胃癌组织细胞分化 临床病理特征及生存的关系, 探讨杂栽砸粤孕蛋白的异常表达对胃癌发生发展及预后判断的价值 员摇 员援员摇 资料与方法 临床资料 收集北京大学肿瘤医院消化肿瘤外科于员怨怨员 年员月至圆园园怨年员月手术切除的胃癌标本圆缘猿例, 同时另取同批胃癌患者距离癌灶边缘猿耀耀耀耀耀耀耀耀缘糟皂的癌旁组织标本员园猿例作为对照 所有患者术前均未接受放化疗, 其中男性员愿源例, 女性远怨例 ; 年龄圆怨耀耀耀耀耀耀耀耀苑远 岁, 中位年龄远员援源远岁 ; 病理分期采用哉陨悦悦的责栽鄄晕酝法, 栽员耀耀耀耀耀耀耀耀栽源 晕园耀耀耀耀耀耀耀耀晕源 Ⅰ 耀耀耀耀耀耀耀耀 Ⅳ 患者例数见表员 具有详细随访资料的患者为员怨远例, 采用电话和临床随诊等方式进行随访, 以总生存期 ( 韵杂 ) 作为观察指标, 随访时间从患者开始手术治疗起到死亡止, 其中最短猿个月, 最长怨园个月, 平均圆苑个月 本研究获得我院伦理委员会批准, 患者或家属均签暑了知情同意书 员援圆摇主要试剂与仪器 [ 远一抗兔抗人杂栽砸粤孕抗体为自制抗体 ] 一抗兔抗人胃蛋白酶原悦 ( 孕藻责泽蚤灶燥早藻灶悦, 孕郧悦 ) 抗体均购自 葬遭糟葬皂公司, 一抗鼠抗人 β 鄄葬糟贼蚤灶抗体购自泽蚤早皂葬公司, 辣根过氧化物酶标记的羊抗兔陨早郧辕匀砸孕 山羊抗小鼠陨早郧抗体 山羊抗兔陨早郧 ( 匀垣蕴 ) 二抗均购自中杉金桥公司, 免疫组化试剂盒购自阅粤运韵公司, 责糟阅晕粤猿援员鄄杂栽砸粤孕真核表达载体为中科院基因组栽酝研究所馈赠, 蕴蚤责燥枣藻糟贼葬皂蚤灶藻圆园园园购自陨灶增蚤贼则燥早藻灶公司, 郧源员愿 ( 源园园 μ 早辕皂造 ) 为郧蚤遭糟燥鄄月砸蕴公司产品, 二甲基亚砜 ( 凿蚤皂藻贼澡赠造泽怎造枣燥曾蚤凿藻, 阅酝杂韵 ) 粤运孕活性测定试剂盒均购自南京检测生物有限公司 组织阵列仪为美国月藻藻糟澡藻则公司产品, 耘蕴鄄阅韵悦圆园园园凝胶成像仪购自美国月蚤燥鄄砸葬凿公司 员援猿摇 免疫组化法检测胃癌与癌旁组织芯片中 杂栽砸粤孕蛋白的表达 设计阵列草图, 根据匀鄄耘染色在蜡块上标记取材, 采用组织阵列仪, 以直径员皂皂孔径细针在空白蜡块上穿出隧道, 空白蜡块中组织条间距为员皂皂 ; 再从标本蜡块中根据预先确定的取材部位穿取组织条, 将组织条精确填入空白蜡块的隧道中, 组织条穿刺面直径为员皂皂, 高度为员皂皂 ; 重复以上步骤, 直

3 愿园愿 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员远年员圆月, 圆猿 ( 远 ) 至所有样本取完 所用组织石蜡块大小为圆远皂皂伊圆圆皂皂伊员园皂皂, 每个标本含圆个重复点阵 将阵列蜡块切片, 厚度为源 μ 皂, 置于载玻片中备用 按照免疫组化试剂盒说明书操作, 剔除因高压修复脱片等损坏标本后, 共检测圆圆猿例胃癌组织和愿远 例癌旁组织中杂栽砸粤孕蛋白的表达 ; 阅粤月显色, 苏木精复染后, 镜下观察结果, 根据着色强度和比例计分 着色强度计分 : 未染色记为园 ; 着色强度较弱记为员垣 ; 着色适中记为圆垣 ; 着色强记为猿垣 根据着色面积所占的比例计分 : 未着色记为园 ; 约圆园豫记为员垣 ; 圆园豫耀耀耀耀耀耀耀耀缘园豫记为圆垣 ; 跃缘园豫记为猿垣 最后计算着色强度积分与着色面积比例的乘积, 约员判断为阴性, 圆耀耀耀耀耀耀耀耀源为员垣, 缘耀耀耀耀耀耀耀耀苑为圆垣, 愿耀耀耀耀耀耀耀耀怨为猿垣 员援源摇 细胞培养及杂栽砸粤孕真核表达载体转染胃癌 杂郧悦苑怨园员细胞 杂郧悦苑怨园员细胞在含员园豫胎牛血清及员豫双抗的 阅酝耘酝培养基中常规培养 将胃癌细胞杂郧悦苑怨园员 缘分别按圆伊员园个细胞接种至猿缘皂皂平皿, 加入员援员皂造无血清无双抗的阅酝耘酝培养基, 分别用圆园园 μ 造 无血清无双抗的阅酝耘酝稀释圆 μ 早重组质粒责糟阅鄄晕粤猿援员鄄杂栽砸粤孕和圆 μ 早空载质粒, 加入接种 杂郧悦苑怨园员胃癌细胞的培养皿中, 培养缘澡, 用完全培养基替换含有质粒和蕴蚤责燥圆园园园的培养基, 加入含 郧源员愿的培养液进行筛选 转染筛选成功后, 开展后期实验 员援缘摇宰藻泽贼藻则灶遭造燥贼贼蚤灶早检测转染后胃癌杂郧悦苑怨园员细胞中杂栽砸粤孕的表达 在密度怨园豫的细胞中加入圆园园耀耀耀耀耀耀耀耀猿园园 μ 造员园皂皂燥造辕蕴杂阅杂缓冲液, 裂解员缘皂蚤灶, 加入蛋白酶抑制剂 糟燥糟噪贼葬蚤造, 超声 离心, 保留上清液, 紫外分光光度计测定蛋白浓度 定量后行杂阅杂鄄孕粤郧耘电泳 以空载体转染的细胞蛋白为对照,β 鄄葬糟贼蚤灶蛋白为内参, 分离后的蛋白电转至孕灾阅云膜上, 加一抗兔抗人杂栽砸粤孕抗体 ( 员颐缘园园 ) 鼠抗人 β 鄄葬糟贼蚤灶抗体 ( 员颐员园园园园 ), 孵育过夜 加辣根过氧化物酶标记的羊抗兔陨早郧辕匀砸孕 山羊抗小鼠陨早郧二抗, 孵育圆澡, 发光 显影 定影 用 郧耘蕴鄄阅韵悦圆园园园凝胶成像仪软件扫描转化条带灰度值 蛋白相对表达量越杂栽砸粤孕目的条带灰度值辕 β 鄄葬糟贼蚤灶条带灰度值 实验重复猿次, 用鉴定后稳定表达 杂栽砸粤孕的细胞系作为研究对象 员援远摇酝栽栽法检测杂栽砸粤孕转染对胃癌杂郧悦苑怨园员细胞增殖的影响 取对数生长期转染杂栽砸粤孕的细胞, 接种到怨远 孔培养板 ( 员园园园个辕孔 ), 分为杂栽砸粤孕过表达组和空载体转染对照组, 每组源个复孔, 分别培养圆源 源愿 苑圆 怨远和员圆园澡, 每孔加入员园园 μ 造酝栽栽 ( 终浓度缘 μ 早辕皂造 ), 在培养箱中继续培养源澡 ; 小心吸弃上清液, 每孔加入员园园 μ 造二甲基亚砜, 在室温下避光水平轻摇员园皂蚤灶后酶标仪在缘苑园灶皂下读取光密度 ( 阅 ) 值 实验重复猿次取平均值 员援苑摇免疫荧光染色观察胃癌组织细胞分化相关蛋白孕郧悦的表达 将贴壁生长的对数期过表达杂栽砸粤孕的胃癌 杂郧悦苑怨园员细胞滴在盖玻片上, 爬片生长圆源澡, 孕月杂洗 猿次 ; 原圆园益甲醇固定员园皂蚤灶, 孕月杂再洗猿次 ; 加入 园援缘豫孕月杂栽 ( 贼则蚤贼燥灶鄄载鄄员园园 ) 于猿苑益孵育缘皂蚤灶, 加入 圆皂造猿豫月杂粤封闭猿园皂蚤灶, 用员园皂皂燥造辕蕴孕月杂稀释一抗兔抗人孕郧悦抗体 ( 员颐缘园 ), 源益孵育过夜, 罗丹明 ( 砸澡燥凿葬皂蚤灶藻 ) 标记的二抗陨早郧 ( 匀垣蕴 )( 员颐缘园 ), 猿苑益孵育员澡, 二氨基苯基吲哚 ( 源, 远鄄凿蚤葬皂蚤凿蚤灶燥鄄圆鄄责澡藻鄄灶赠造蚤灶凿燥造藻凿蚤澡赠凿则燥糟澡造燥则蚤凿藻, 阅粤孕陨 )( 员颐缘园 ) 在同一张片子上染核, 甘油封片, 荧光显微镜下观察测定孕郧悦蛋白分子在细胞中的定位和表达量 [ 罗丹明为红色荧光染料, 荧光显微镜下观察同一张片子中红色荧光 ( 孕郧悦蛋白 ) 和蓝色荧光 ( 阅粤孕陨染核 ), 然后用自带软件将红色和蓝色的荧光图像融合形成皂藻则早藻图像 ], 以观察分析孕郧悦蛋白的定位和表达情况 员援愿摇杂栽砸粤孕转染后胃癌杂郧悦苑怨园员细胞中粤运孕的活性检测 将筛选出的稳定过量表达杂栽砸粤孕的胃癌 杂郧悦苑怨园员细胞于远园皂皂培养皿中培养, 采用常规胰酶消化制成单细胞悬液, 低速离心员园皂蚤灶后加入 园郾缘皂造孕月杂悬浮细胞, 超声破碎细胞 将细胞裂解混合液再低速离心员缘皂蚤灶, 取上清测定浓度 按照 粤运孕活性测定试剂盒说明书操作, 将混合液于缘圆园灶皂比色, 空白管调零, 分别测定各管的光密度 ( 阅 ) 值 碱性磷酸酶 ( 粤运孕 ) 活性计算公式 : 碱性磷酸酶 ( 金氏单位哉辕员园园皂造 ) 越 [ 测定管 ( 阅 ) 值辕标准管 ( 阅 )] 伊酚含量 ( 园援园园缘 ) 伊稀释倍数 ( 员园园辕园援园缘 ) 员援怨摇 统计学处理 采用杂孕杂杂员怨援园软件, 计量资料以珋曾依泽表示, 两组间均数比较采用贼检验, 计数资料以率表示, 采用 圆 χ 检验, 生存分析采用运葬责造葬灶鄄酝藻蚤藻则分析, 以孕约园郾园缘或孕约园援园员表示差异有统计学意义 圆摇结摇果 圆援员摇 胃癌组织中杂栽砸粤孕蛋白表达明显下降 免疫组化检测组织芯片中杂栽砸粤孕的表达结果 ( 图员 ) 显示, 杂栽砸粤孕蛋白的阳性染色 ( 棕褐色 ) 主要定位于细胞质, 从正常胃黏膜到胃癌的恶性病变过

4 肖永彪, 等援杂栽砸粤孕异常表达对胃癌细胞分化的作用程中, 杂栽砸粤孕蛋白表达下调, 癌旁组织的阳性表达率明显强于胃癌组织 与癌旁组织相比, 胃癌组织中杂栽砸粤孕蛋白的阳性表达率显著降低 [ 猿猿援远豫 ( 苑缘辕圆圆猿 ) 增泽缘怨援猿豫 ( 缘员辕愿远 ), 孕约园援园员 ] 杂栽砸粤孕蛋白的表达与患者临床病理参数的相关性分析结果 ( 表员 ) 显示, 杂栽砸粤孕蛋白的表达仅与胃癌组织细胞分化相关 ( 孕约园援园员 ) 运葬责造葬灶鄄酝藻蚤藻则生存分析 ( 图圆 ) 结果显示, 杂栽砸粤孕表达较高的患者其预后总生存时间明显长于低表达的患者 ( 孕约园援园缘 ), 杂栽砸粤孕表达阴性的胃癌患者的平均生存时间为 ( 缘缘援员缘依源郾园缘 ) 个月, 而杂栽砸粤孕表达阳性的患者的平均生存时间为 愿园怨 ( 远愿援远愿依源援圆园 ) 个月 ( 孕约园援园缘 ) 圆援圆摇胃癌杂郧悦苑怨园员细胞过表达杂栽砸粤孕蛋白杂栽砸粤孕重组载体转染杂郧悦苑怨园员细胞后, 采用郧源员愿筛选稳定转染的细胞株, 以空载体转染组作为对照 提取筛选出的克隆细胞中的蛋白质, 采用宰藻泽贼藻则灶遭造燥贼贼蚤灶早鉴定转染效率 检测结果 ( 图猿 源 ) 显示, 与空载体转染组相比, 杂栽砸粤孕重组载体转染组杂郧悦苑怨园员细胞中杂栽砸粤孕蛋白的表达水平明显升高 [( 员援怨圆猿员依园援园远缘猿 ) 增泽 ( 园援源源缘员依园郾园圆源源 ), 孕约园郾园员 ] 将鉴定后稳定表达杂栽砸粤孕蛋白的细胞系作为研究对象 图员摇免疫组织化学法检测杂栽砸粤孕蛋白在胃癌组织和癌旁组织中的表达云蚤早援员摇耘曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶郧悦贼蚤泽泽怎藻泽葬灶凿责葬则葬鄄糟葬则糟蚤灶燥皂葬贼蚤泽泽怎藻泽凿藻贼藻糟贼藻凿遭赠蚤皂皂怎灶燥澡蚤泽贼燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠葬泽泽葬赠粤 : 栽澡藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶责燥燥则造赠凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼藻凿贼蚤泽泽怎藻泽 ( 伊源园 ); 月 : 栽澡藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶责燥燥则造赠凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼藻凿贼蚤泽泽怎藻泽 ( 伊圆园园 ); 悦 : 栽澡藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶憎藻造造凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼藻凿贼蚤泽泽怎藻泽 ( 伊源园 ); 阅 : 栽澡藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶憎藻造造凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼藻凿贼蚤泽泽怎藻泽 ( 伊圆园园 ); 耘 : 栽澡藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶灶燥则皂葬造贼蚤泽泽怎藻泽 ( 伊源园 ); 云 : 栽澡藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶灶燥则皂葬造贼蚤泽泽怎藻泽 ( 伊圆园园 ) 圆援猿摇过量表达杂栽砸粤孕蛋白明显抑制胃癌杂郧悦苑怨园员细胞的增殖酝栽栽法检测结果 ( 图源 ) 显示, 在获得过量表达杂栽砸粤孕蛋白的稳定转染胃癌细胞系后, 通过酝栽栽实验检测不同转染组胃癌细胞的增殖活力 过量表达组的生长曲线显示, 转染入杂栽砸粤孕的杂郧悦苑怨园员细胞较空载体转染组各时间点的细胞生长速度明显减慢 ( 均孕约园援园缘 ) 结果提示, 过量表达杂栽砸粤孕后杂栽砸粤孕的表达时间延长, 杂郧悦苑怨园员细胞生长受到明显抑制 圆援源摇过量表达杂栽砸粤孕蛋白的胃癌杂郧悦苑怨园员细胞中孕郧悦的表达明显增强免疫荧光检测胃癌组织细胞分化相关蛋白 孕郧悦的表达, 结果 ( 图缘 ) 显示, 孕郧悦在杂栽砸粤孕过表达组中的表达水平明显强于空载体转染对照组 ( 孕约园援园缘 ) 杂栽砸粤孕转染组细胞排布较为整齐, 具有一定的方向性, 空载体转染组的细胞排列紊乱无序 圆援缘摇过表达杂栽砸粤孕蛋白的胃癌杂郧悦苑怨园员细胞中粤运孕的活性明显减弱粤运孕检测结果显示, 过表达杂栽砸粤孕蛋白的转染组中粤运孕的活性 [( 苑苑援猿依缘援愿 ) 哉辕早 ] 显著低于空载体转染的对照组 [( 怨员援怨依猿援缘 ) 哉辕早 ]( 孕约园援园缘 ) 结果提示, 过量表达杂栽砸粤孕蛋白具有促进胃癌杂郧悦苑怨园员细胞分化的趋势

5 愿员园 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员远年员圆月, 圆猿 ( 远 ) 表员摇 杂栽砸粤孕蛋白表达与胃癌患者临床病理特征的关系 栽葬遭援员摇 砸藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责遭藻贼憎藻藻灶藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶 葬灶凿糟造蚤灶蚤糟燥责葬贼澡燥造燥早蚤糟葬造枣藻葬贼怎则藻泽燥枣贼澡藻责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤澡早葬泽贼则蚤糟糟葬灶糟藻则 云藻葬贼怎则藻泽摇 摇 摇 杂栽砸粤孕藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 ( 豫 ) 孕 郧藻灶凿藻则 摇 酝葬造藻 远怨辕员源怨 ( 源远援猿 ) 摇 云藻皂葬造藻 圆怨辕远缘 ( 源源援远 ) 园援圆园怨 粤早藻 ( 贼辕葬 ) 摇 约远园 源员辕愿愿 ( 源远援远 ) 摇 远园 缘缘辕员圆圆 ( 源缘援员 ) 园援源远怨 栽晕酝泽贼葬早藻 摇 Ⅰ 员员辕圆园 ( 缘缘援园 ) 摇 Ⅱ 猿员辕苑缘 ( 源员援猿 ) 摇 Ⅲ 圆苑辕远员 ( 源源援猿 ) 摇 Ⅳ 圆苑辕缘员 ( 缘圆援怨 ) 园援缘园员 栽怎皂燥怎则凿藻责贼澡 摇 栽员鄄栽圆 圆缘辕源缘 ( 缘缘援远 ) 摇 栽猿鄄栽源 苑圆辕员远源 ( 源猿援怨 ) 园援员员员 蕴赠皂责澡灶燥凿藻泽贼葬贼怎泽 摇 晕园 圆苑辕缘员 ( 缘圆援怨 ) 摇 晕员 猿圆辕苑猿 ( 源猿援愿 ) 摇 晕猿 圆怨辕远远 ( 源猿援怨 ) 摇 晕源 怨辕员苑 ( 缘圆援怨 ) 园援远愿员 阅蚤泽贼葬灶贼皂藻贼葬泽贼葬泽蚤泽 摇 酝园 愿员辕员愿圆 ( 源源援缘 ) 摇 酝员 员远辕圆苑 ( 缘怨援猿 ) 园援员员园 阅蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 摇 阅员 ( 憎藻造造 ) 怨辕员圆 ( 苑缘援园 ) 摇 阅圆 ( 皂燥凿藻则葬贼藻 ) 源员辕苑源 ( 缘缘援源 ) 摇 阅猿 ( 责燥燥则 ) 源缘辕员圆园 ( 猿苑援缘 ) 园援园园远 图猿摇杂栽砸粤孕蛋白在杂栽砸粤孕转染组胃癌杂郧悦苑怨园员株细胞中的过表达云蚤早援猿摇韵增藻则藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶蚤灶贼澡藻早葬泽贼则蚤糟糟葬灶糟藻则杂郧悦苑怨园员造蚤灶藻糟藻造造泽燥枣贼澡藻杂栽砸粤孕贼则葬灶泽枣藻糟贼蚤燥灶早则燥怎责图源摇各转染组胃癌杂郧悦苑怨园员细胞的增殖能力云蚤早援源摇孕则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶葬遭蚤造蚤贼蚤藻泽燥枣贼澡藻早葬泽贼则蚤糟糟葬灶糟藻则杂郧悦苑怨园员造蚤灶藻糟藻造造泽蚤灶增葬则蚤燥怎泽贼则葬灶泽枣藻糟贼蚤燥灶早则燥怎责泽杂栽砸粤孕 : 杂栽砸粤孕贼则葬灶泽枣藻糟贼蚤燥灶早则燥怎责灾藻糟贼燥则 : 灾藻糟贼燥则贼则葬灶泽枣藻糟贼蚤燥灶早则燥怎责 孕约园援园缘, 孕约园援园员增泽增藻糟贼燥则贼则葬灶泽枣藻糟贼蚤燥灶早则燥怎责 图缘摇免疫荧光分析孕郧悦在杂栽砸粤孕过表达的胃癌杂郧悦苑怨园员细胞中的表达水平云蚤早援缘摇孕郧悦藻曾责则藻泽泽蚤燥灶造藻增藻造泽蚤灶贼澡藻早葬泽贼则蚤糟糟葬灶糟藻则杂郧悦苑怨园员造蚤灶藻糟藻造造泽憎蚤贼澡燥增藻则藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕葬灶葬造赠扎藻凿遭赠蚤皂皂怎灶燥枣造怎燥则藻泽糟藻灶糟藻葬泽泽葬赠 图圆摇杂栽砸粤孕蛋白表达量不同的患者生存曲线云蚤早援圆摇杂怎则增蚤增葬造糟怎则增藻泽燥枣贼澡藻责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡凿蚤枣枣藻则藻灶贼藻曾责则藻泽泽蚤燥灶泽燥枣杂栽砸粤孕责则燥贼藻蚤灶 猿摇讨摇论 [ 怨 ] 杂栽砸粤孕是阅葬贼贼葬等运用酵母双杂交技术从鼠胚胎糟阅晕粤文库中发现的能与栽 β 砸陨相互作用 富含

6 肖永彪, 等援杂栽砸粤孕异常表达对胃癌细胞分化的作用 宰阅鄄源园重复模序的新蛋白, 又名酝粤宰阅 ( 酝粤孕运粤糟鄄贼蚤增葬贼燥则憎蚤贼澡宰阅源园则藻责藻葬贼泽, 酝粤宰阅 ), 其结构中每一个重复序列约有源园个氨基酸, 通常以色鄄天冬氨酸结尾 杂栽砸粤孕是一种丝氨酸辕苏氨酸激酶受体相关蛋白, 定位于人类基因员圆责员圆援猿, 全长圆员园远苑遭责, 有员园 个外显子 随后发现了杂栽砸粤孕招募杂皂葬凿苑形成复 [ 员园合体, 加强了对栽郧云鄄遭藻贼葬通路的抑制 ] 杂栽砸粤孕在不同的个体 不同的肿瘤之间表现出 [ 员员 ] [ 员圆 ] 异质性 杂栽砸粤孕在乳腺癌和肺癌中表达呈现一定程度的上调 ; 在前列腺癌患者中, 通过基因组杂交发现杂栽砸粤孕所在的区域存在一定比率的缺 [ 员猿失 ] ; 结肠癌患者有源缘援圆豫 ( 苑缘辕员远远 ) 存在杂栽砸粤孕 [ 员源的全部或者部分缺失 ], 且有杂栽砸粤孕基因或缺失的患者对缘鄄氟尿嘧啶辅助治疗的反应不一, 其表达情况是对患者进行缘鄄氟尿嘧啶化疗的重要参考指标 杂栽砸粤孕在肿瘤中表现出的抑制肿瘤进展的作 [ 员缘用可能与激活孕缘猿有关 ] 在匀藻造葬 匀悦栽员员远和 酝耘云等肿瘤细胞系中, 也发现晕酝圆员和杂栽砸粤孕的结 [ 员远合能够提高责缘猿的下游基因的转录活性 ] 在冬凌草甲素抗肝癌的抗肿瘤蛋白谱中也包括 [ 员苑杂栽砸粤孕 ] 由此可见, 杂栽砸粤孕与肿瘤的关系非常密切 本课题组在前期胃癌的蛋白组学研究中也发现了杂栽砸粤孕存在异常的表达, 提示其功能与胃癌的发 [ 远生发展相关 ] 本研究通过组织学和体外细胞学实验, 初步验证了杂栽砸粤孕与胃癌组织细胞分化的相关性, 说明了 杂栽砸粤孕的表达能够影响患者的预后, 并且在体外细胞中过量表达杂栽砸粤孕能够抑制细胞的增殖 在胃癌组织中, 本实验检测到杂栽砸粤孕的表达水平下调, 这与前期胃癌蛋白组学的研究结果相吻合, 在 杂栽砸粤孕的表达与临床特征的分析中, 发现其表达程度的确与分化有着密切关系, 其表达随分化程度的降低而降低, 运葬责造葬灶鄄酝藻蚤藻则生存分析结果提示 杂栽砸粤孕表达越低, 总生存时间越短, 这与低分化患者预后不良的结果也是相吻合的, 提示杂栽砸粤孕胃癌的发生发展过程中可能发挥抑癌基因的作用 本实验选择胃蛋白酶原悦 ( 孕藻责泽蚤灶燥早藻灶悦, 孕郧悦 ) 和碱性磷酸酶 ( 葬造噪葬造蚤灶藻责澡燥泽责澡葬贼葬泽藻泽, 粤运孕 ) 两个指标进行分化水平的检测, 是因为孕郧悦是胃组织细胞 [ 员愿分化程度的重要标志性参数 ], 粤运孕活性与胃癌组织细胞分化程度相关, 在胃黏膜肠上皮化生和肠型胃癌中粤运孕活性呈不同程度升高, 粤运孕是胃癌组织细胞分化的一种标志酶, 在胃癌细胞中表达水平与 [ 员怨鄄圆园分化程度相反 ] 通过体外细胞孕郧悦和粤运孕的检测也证实了杂栽砸粤孕诱导促进胃癌组织细胞分化, 愿员员 其作用机制可能涉及到杂栽砸粤孕参与的信号通路相关, 杂栽砸粤孕能够调节栽郧云鄄遭藻贼葬通路的活性, 而栽郧云鄄遭藻贼葬又与细胞分化密切相关, 杂栽砸粤孕可能参与了胃组织细胞分化调节, 其表达水平与胃癌患者的预后与分化有关 综上, 杂栽砸粤孕蛋白在胃癌组织中的表达与胃癌组织细胞分化密切相关, 但其确切的机制还需进一步研究探讨, 以深入阐明杂栽砸粤孕作为分子标志物对胃癌组织细胞分化程度和预后辅助判断所具有的临床价值 [ 参考文献 ] [ 员 ] 摇悦匀耘晕宰, 在匀耘晕郧砸, 月粤粤阅耘孕阅, 藻贼葬造援悦葬灶糟藻则泽贼葬贼蚤泽贼蚤糟泽蚤灶悦澡蚤灶葬, 圆园员缘 [ 允 ] 援悦粤悦葬灶糟藻则允悦造蚤灶, 圆园员远, 远远 ( 圆 ): 员员缘鄄员猿圆援阅韵陨 : 员园援猿猿圆圆辕糟葬葬糟援圆员猿猿愿援 [ 圆 ] 摇宰粤晕郧悦, 在匀粤晕郧允, 悦粤陨酝, 藻贼葬造援阅月郧悦 : 葬凿葬贼葬遭葬泽藻燥枣澡怎皂葬灶早葬泽贼则蚤糟糟葬灶糟藻则 [ 允辕韵蕴 ] 援孕蕴燥杂韵灶藻, 圆园员缘, 员园 ( 员员 ): 藻园员源圆缘怨员 [ 圆园员远鄄园圆鄄圆缘 ] 援澡贼贼责 : 辕辕躁燥怎则灶葬造泽援责造燥泽援燥则早辕责造燥泽燥灶藻辕葬则贼蚤糟造藻? 蚤凿越员园援员猿苑员辕躁燥怎则灶葬造援责燥灶藻援园员源圆缘怨员援阅韵陨 : 员园援员猿苑员辕躁燥怎则灶葬造援责燥灶藻援园员源圆缘怨员援 [ 猿 ] 摇云耘砸砸粤砸陨云, 砸耘陨杂酝粤援杂贼怎凿赠燥枣则蚤泽噪枣葬糟贼燥则泽枣燥则早葬泽贼则蚤糟糟葬灶糟藻则遭赠责燥责怎造葬贼蚤燥灶葬造凿葬贼葬遭葬泽藻泽葬灶葬造赠泽蚤泽 [ 允 ] 援宰燥则造凿允郧葬泽贼则燥藻灶贼藻则燥造, 圆园员猿, 员怨 ( 源愿 ): 怨猿愿猿鄄怨猿怨员援阅韵陨 : 员园援猿苑源愿辕憎躁早援增员怨援蚤源愿援怨猿愿猿援 [ 源 ] 摇耘蕴蕴陨杂韵晕蕴云, 月砸再粤晕栽匀, 蕴韵悦运宰韵韵阅郧, 藻贼葬造援悦燥灶凿蚤贼蚤燥灶葬造泽怎则鄄增蚤增葬造葬灶葬造赠泽藻泽葬糟则燥泽泽糟葬灶糟藻则泽蚤贼藻泽 [ 允 ] 援匀藻葬造贼澡砸藻责, 圆园员员, 圆圆 ( 圆 ): 圆员鄄圆缘援澡贼贼责 : 辕辕憎憎憎援泽贼葬贼糟葬灶援早糟援糟葬辕葬糟糟藻泽泽赃葬糟糟藻泽辕葬则糟澡蚤增藻援葬糟贼蚤燥灶? 造燥糟越辕责怎遭辕愿圆鄄园园猿鄄曾辕圆园员员园园圆辕葬则贼蚤糟造藻辕员员源圆缘鄄藻灶早郾责凿枣驭葬则糟澡蚤增藻越员援 [ 缘 ] 摇粤酝韵砸陨酝陨, 栽粤哉蕴耘杂悦哉酝粤, 阅粤再酝允, 藻贼葬造援悦葬灶蚤灶藻早葬泽贼则蚤糟责葬贼澡燥造燥早赠 : 葬则藻增蚤藻憎 [ 允 ] 援允悦燥皂责孕葬贼澡燥造, 圆园员远, 员缘源 ( 员 ): 怨鄄猿苑援阅韵陨 : 员园援员园员远辕躁援躁糟责葬援圆园员缘援员园援员愿员援 [ 远 ] 摇在匀粤晕郧允, 运葬灶早月, 栽粤晕载, 月粤陨在, 藻贼葬造援悦燥皂责葬则葬贼蚤增藻葬灶葬造赠泽蚤泽燥枣贼澡藻责则燥贼藻蚤灶责则燥枣蚤造藻泽枣则燥皂责则蚤皂葬则赠早葬泽贼则蚤糟贼怎皂燥则泽葬灶凿贼澡藻蚤则葬凿躁葬鄄糟藻灶贼则藻早蚤燥灶泽 : 酝粤宰月孕糟燥怎造凿遭藻葬灶藻憎责则燥贼藻蚤灶糟葬灶凿蚤凿葬贼藻蚤灶增燥造增藻凿蚤灶早葬泽贼则蚤糟糟葬灶糟藻则 [ 允 ] 援允孕则燥贼藻燥皂藻砸藻泽, 圆园园苑, 远 ( 员员 ): 源源圆猿鄄源源猿圆援阅韵陨 : 员园援员园圆员辕责则园苑园猿源圆缘援 [ 苑 ] 摇砸耘陨晕耘砸允耘, 阅粤栽栽粤孕运援栽郧云鄄遭藻贼葬鄄凿藻责藻灶凿藻灶贼葬灶凿鄄蚤灶凿藻责藻灶凿鄄藻灶贼则燥造藻泽燥枣杂栽砸粤孕蚤灶糟葬灶糟藻则 [ 允 ] 援云则燥灶贼月蚤燥泽糟蚤, 圆园员员, 员远 : 员园缘鄄员员缘援 [ 愿 ] 摇韵酝韵砸陨运, 匀粤栽栽韵砸陨晕, 杂耘晕韵韵栽, 藻贼葬造援陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶燥枣责造葬泽鄄皂蚤灶燥早藻灶葬糟贼蚤增葬贼燥则蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则鄄员葬贼贼藻灶怎葬贼藻泽贼则葬灶泽枣燥则皂蚤灶早早则燥憎贼澡枣葬糟贼燥则鄄遭藻贼葬鄄凿藻责藻灶凿藻灶贼藻责蚤贼澡藻造蚤葬造皂藻泽藻灶糟澡赠皂葬造贼则葬灶泽蚤贼蚤燥灶葬灶凿凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬鄄贼蚤燥灶燥枣枣蚤遭则燥遭造葬泽贼泽贼燥皂赠燥枣蚤遭则燥遭造葬泽贼泽 [ 允辕韵蕴 ] 援孕蕴燥泽韵灶藻, 圆园员远, 员员 ( 圆 ): 藻园员源愿怨远怨 [ 圆园员缘鄄员圆鄄圆愿 ] 援澡贼贼责 : 辕辕躁燥怎则灶葬造泽援责造燥泽援燥则早辕责造燥泽燥灶藻辕葬则贼蚤糟造藻? 蚤凿越员园援员猿苑员辕躁燥怎则灶葬造援责燥灶藻援园员源愿怨远怨援阅韵陨 : 员园援员猿苑员辕躁燥怎则灶葬造援责燥灶藻援园员源愿怨远怨援 [ 怨 ] 摇阅粤栽栽粤孕运, 悦匀再栽陨蕴粤, 郧韵砸杂运粤粤耘藻贼葬造援陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶燥枣杂栽砸粤孕, 葬灶燥增藻造宰阅凿燥皂葬蚤灶责则燥贼藻蚤灶蚤灶贼则葬灶泽枣燥则皂蚤灶早早则燥憎贼澡枣葬糟贼燥则鄄遭藻贼葬泽蚤早灶葬造蚤灶早 [ 允 ] 援允月蚤燥造悦澡藻皂, 员怨怨愿, 圆苑猿 ( 缘圆 ): 猿源远苑员鄄猿源远苑源援阅韵陨 : 员园援员园苑源辕躁遭糟援圆苑猿援缘圆援猿源远苑员援 [ 员园 ] 阅粤栽栽粤孕运, 酝韵杂耘杂匀蕴援杂栽砸粤孕葬灶凿杂皂葬凿苑泽赠灶藻则早蚤扎藻蚤灶贼澡藻蚤灶鄄澡蚤遭蚤贼蚤燥灶燥枣贼则葬灶泽枣燥则皂蚤灶早早则燥憎贼澡枣葬糟贼燥则遭藻贼葬泽蚤早灶葬造蚤灶早 [ 允 ] 援酝燥造悦藻造造

7 愿员圆 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员远年员圆月, 圆猿 ( 远 ) 月蚤燥造, 圆园园园, 圆园 ( 怨 ): 猿员缘苑鄄猿员远苑援阅韵陨 : 员园援员员圆愿辕酝悦月援圆园援怨援猿员缘苑鄄猿员远苑援圆园园园援 [ 员员 ] 酝粤栽杂哉阅粤杂, 运粤栽杂哉酝粤栽粤砸, 韵运哉阅粤栽, 藻贼葬造援酝燥造藻糟怎造葬则糟造燥鄄灶蚤灶早葬灶凿糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶燥枣澡怎皂葬灶酝粤宰阅, 葬灶燥增藻造责则燥贼藻蚤灶糟燥灶贼葬蚤鄄灶蚤灶早宰阅鄄源园则藻责藻葬贼泽枣则藻择怎藻灶贼造赠燥增藻则藻曾责则藻泽泽藻凿蚤灶遭则藻葬泽贼糟葬灶糟藻则 [ 允 ] 援悦葬灶糟藻则砸藻泽, 圆园园园, 远园 ( 员 ): 员猿鄄员苑援 [ 员圆 ] 运陨酝悦允, 悦匀韵陨月允, 杂韵晕郧允匀, 藻贼葬造援韵增藻则藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣泽藻则蚤灶藻鄄贼澡则藻燥灶蚤灶藻则藻糟藻责贼燥则噪蚤灶葬泽藻鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿责则燥贼藻蚤灶蚤灶糟燥造燥则藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则泽 [ 允 ] 援孕葬贼澡燥造陨灶贼, 圆园园苑, 缘苑 ( 源 ): 员苑愿鄄员愿圆援阅韵陨 : 员园援员员员员辕躁援员源源园鄄员愿圆苑援圆园园苑援园圆园苑愿援曾援 [ 员猿 ] 阅韵晕郧允栽援悦澡则燥皂燥泽燥皂葬造凿藻造藻贼蚤燥灶泽葬灶凿贼怎皂燥则泽怎责责则藻泽泽燥则早藻灶藻泽蚤灶责则燥泽贼葬贼藻糟葬灶糟藻则 [ 允 ] 援悦葬灶糟藻则酝藻贼葬泽贼砸藻增, 圆园园员, 圆园 ( 猿辕源 ): 员苑猿鄄员怨猿援阅韵陨 : 员园援员园圆猿辕粤 : 员园员缘缘苑缘圆缘苑愿园援 [ 员源 ] 月哉耘杂杂酝, 栽耘砸砸粤悦悦陨粤晕韵蕴, 砸耘哉栽耘砸允, 藻贼葬造援杂栽砸粤孕蚤泽葬泽贼则燥灶早责则藻凿蚤糟贼蚤增藻皂葬则噪藻则燥枣葬凿躁怎增葬灶贼糟澡藻皂燥贼澡藻则葬责赠遭藻灶藻枣蚤贼蚤灶糟燥造燥则鄄藻糟贼葬造糟葬灶糟藻则 [ 允 ] 援晕藻燥责造葬泽蚤葬, 圆园园源, 远 ( 远 ): 愿员猿鄄愿圆园援阅韵陨 : 员园援员员员员辕躁援员源源园鄄员愿圆苑援圆园园苑援园圆园苑愿援曾援 [ 员缘 ] 允哉晕郧匀, 杂耘韵晕郧匀粤, 匀粤匀援晕酝圆猿鄄匀员贼怎皂燥则泽怎责责则藻泽泽燥则葬灶凿蚤贼泽蚤灶贼藻则葬糟贼蚤灶早责葬则贼灶藻则杂栽砸粤孕葬糟贼蚤增葬贼藻责缘猿枣怎灶糟贼蚤燥灶 [ 允 ] 援允月蚤燥造悦澡藻皂, 圆园园苑, 圆愿圆 ( 源愿 ): 猿缘圆怨猿鄄猿缘猿园苑援阅韵陨 : 员园援员园苑源辕躁遭糟援酝苑园缘员愿员圆园园援 [ 员远 ] 杂耘韵晕郧匀粤, 允哉晕郧匀, 悦匀韵陨匀杂, 藻贼葬造援砸藻早怎造葬贼蚤燥灶燥枣贼则葬灶泽枣燥则鄄皂蚤灶早早则燥憎贼澡枣葬糟贼燥则鄄遭藻贼葬泽蚤早灶葬造蚤灶早葬灶凿孕阅运员噪蚤灶葬泽藻葬糟贼蚤增蚤贼赠遭赠责澡赠泽蚤糟葬造蚤灶贼藻则葬糟贼蚤燥灶遭藻贼憎藻藻灶孕阅运员葬灶凿泽藻则蚤灶藻鄄贼澡则藻燥灶蚤灶藻噪蚤灶葬泽藻则藻鄄糟藻责贼燥则鄄葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿责则燥贼藻蚤灶 [ 允 ] 援允月蚤燥造悦澡藻皂, 圆园园缘, 圆愿园 ( 缘圆 ): 源圆愿怨苑鄄源圆怨园愿援阅韵陨 : 员园援员园苑源辕躁遭糟援酝缘园苑缘猿怨圆园园援 [ 员苑 ] 宰粤晕郧匀, 再耘再, 孕粤晕杂再, 藻贼葬造援孕则燥贼藻燥皂蚤糟蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶燥枣责则燥鄄贼藻蚤灶泽蚤灶增燥造增藻凿蚤灶贼澡藻葬灶贼蚤糟葬灶糟藻则葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽燥枣燥则蚤凿燥灶蚤灶蚤灶匀藻责郧圆糟藻造造泽 [ 允 ] 援孕澡赠贼燥皂藻凿蚤糟蚤灶藻, 圆园员员, 员愿 ( 圆辕猿 ): 员远猿鄄员远怨援阅韵陨 : 员园援员园员远辕躁援责澡赠皂藻凿援圆园员园援园远援园员员援 [ 员愿 ] 运粤郧耘再粤酝粤栽援孕藻责泽蚤灶燥早藻灶泽, 责则燥早葬泽贼则蚤糟泽蚤灶泽, 葬灶凿责则燥糟澡赠皂燥泽蚤灶泽 : 泽贼则怎糟贼怎则藻, 枣怎灶糟贼蚤燥灶, 藻增燥造怎贼蚤燥灶, 葬灶凿凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 [ 允 ] 援悦藻造造酝燥造蕴蚤枣藻杂糟蚤, 圆园园圆, 缘怨 ( 圆 ): 圆愿愿鄄猿园远援阅韵陨 : 员园援员园圆猿辕员猿 : 粤月陨酝援园园园园园员园猿源苑援源怨圆圆愿援园怨援 [ 员怨 ] 云陨杂匀酝粤晕宰匀援砸藻糟藻灶贼凿藻增藻造燥责皂藻灶贼泽蚤灶葬造噪葬造蚤灶藻责澡燥泽责澡葬贼葬泽藻则藻鄄泽藻葬则糟澡 [ 允 ] 援悦造蚤灶悦澡藻皂, 员怨怨圆, 猿愿 ( 员圆 ): 圆源愿源援 [ 圆园 ] 杨善民援阅酝杂韵对人胃腺癌酝郧悦愿园鄄猿细胞的诱导分化作用 [ 允 ] 援实验生物学报, 员怨怨源, 圆苑 ( 猿 ): 圆愿员鄄圆愿苑援 [ 收稿日期 ] 摇圆园员远原园远原圆愿 [ 修回日期 ] 摇圆园员远原员园原员缘 [ 本文编辑 ] 摇阮芳铭 檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿 读者 作者 编者 凡临床试验都应在中国临床试验注册中心注册 摇摇中国临床试验注册中心 ( 悦澡蚤灶藻泽藻悦造蚤灶蚤糟葬造栽则蚤葬造砸藻早蚤泽贼藻则, 悦澡蚤悦栽砸 ) 为卫生部下属的国家临床试验注册中心, 是世界卫生组织国际临床试验注册协作网一级注册机构 ( 宰燥则造凿匀藻葬造贼澡韵则早葬灶蚤扎葬贼蚤燥灶陨灶贼藻则灶葬贼蚤燥灶葬造悦造蚤灶蚤糟葬造栽则蚤葬造砸藻早蚤泽贼则葬贼蚤燥灶孕造葬贼枣燥则皂孕则蚤皂葬则赠砸藻早蚤泽鄄贼藻则, 宰匀韵陨悦栽砸孕孕则蚤皂葬则赠砸藻早蚤泽贼藻则 ), 由卫生部中国循证医学中心和四川大学华西医院等于圆园园缘年苑月圆缘日正式成立并运行 全球临床试验注册制度由世界各国政府共同决定由宰匀韵领导建立 临床试验注册具有伦理和科学的双重意义, 目的是为了尊重和珍惜所有试验参与者的贡献, 他们的贡献用于改善全社会的医疗保健, 因此, 任何临床试验都与公众利益相关 公开临床试验的信息, 并将其置于公众监督之下是试验研究者的义务和道德责任 临床试验注册不仅能确保追溯每个临床试验的结果, 公开在研试验或试验结果信息还有助于减少不必要的重复研究 悦澡蚤悦栽砸的宗旨是联合中国和全球的临床医师 临床流行病学家 统计学家 流行病学家和医疗卫生管理者, 严格科学地管理中国临床试验信息, 提高其质量, 为广大医务工作者 医疗卫生服务消费者和政府卫生政策制定者提供可靠的临床试验证据, 让医疗卫生资源更好地服务于中国人民和全人类的健康事业 所有在人体实施的试验均属于临床试验, 都应该先注册后实施 凡已注册临床试验都会被授予宰匀韵陨悦栽砸孕全球统一的唯一注册号 我国众多医学期刊已和中国临床试验注册中心共同建立了临床试验报告发表机制, 正在分步实施优先发表 直到只发表具有全球性唯一注册号的临床试验报告 悦澡蚤悦栽砸接受中国地区及全球的临床试验注册申请, 还接受获得宰匀韵陨悦栽砸孕认证的二级注册机构输送的注册资料, 并向宰匀韵陨悦栽砸孕中央数据库输送注册信息供全球检索 除注册临床试验外, 悦澡蚤悦栽砸以卫生部中国循证医学中心 循证医学教育部网上合作研究中心 中国悦燥糟澡则葬灶藻中心 英国悦燥糟澡则葬灶藻中心 四川大学华西医院国际临床流行病学网华西资源与培训中心为人才和技术支持平台, 负责指导临床试验设计 中心随机 论文写作 教育培训, 推动提高我国临床试验的质量 通过悦澡蚤悦栽砸检索入口网址憎憎憎援糟澡蚤糟贼则援燥则早, 公众可方便地查询已注册临床试验信息, 并与宰匀韵全球检索入口链接, 可方便地查询全球已注册临床试验 ( 本刊编辑部 )

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主估 评组 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software 影响力渊权重值园援圆缘冤是砸耘云增设的评估指标袁重点是确定研究成果的卓越性以及对经济尧社会尧文化尧公共服务及生活质量等各个方面所形成的广泛影响力和有效应用价值遥参评学科需要以案例的形式说明该学科与 现代教育管理窑 2014 年第 9 期 比较教育 譹訛 李漫红袁姜华 渊东北大学袁辽宁沈阳 110004 冤 摘要院英国野创新国家冶战略的实施袁要求本国高校的科研发展方式由资源型转变为创新型遥为提升科研创新水平袁英国深化科研评估制度改革袁实施全新的卓越科研框架渊砸耘云冤评估袁在评估的内容尧组织和技术方面展现出新的特点遥借鉴砸耘云评估袁我国科研质量管理应将进一步确立权威尧规范系统内外的关系并保证多方利益相关者的有效参与遥关键词院英国曰卓越科研框架曰科研评估中图分类号院郧

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教育改革的新趋势袁试图构建政府与大学的新型法律关系遥在我国袁由于市场经济体制的建立和完善以及治理理论的兴起袁为政府与大学关系的变革提供了理论与实践的依据遥改变大学与政府之间的附属关系袁最大限度地减少政府对大学的日常干预袁赋予大学自我管理尧自我负责的权力机制袁成为了现代大学行政法人制度构建的主要目标遥 现代教育管理窑 2013 年第 10 期 专 题 譹訛 黄海群 渊厦门大学袁福建厦门 361005 冤 摘要院我国大学行政法人制度迄今尚未建立袁主要存在大学法人性质定位不明尧政府行政管理权力和大学行政法人权利边界不清尧教育法律调控机制尚未健全等现实境况遥现代大学行政法人制度应是现代大学制度建设的重要组成部分袁其构建的主要目标是改变大学与政府之间的附属关系袁减少政府对大学的不当干预袁赋予大学自我管理与负责的权力机制遥应以保障学术自由和大学自治权为前提袁明确界定我国大学行政法人地位袁真正落实大学办学自主权遥关键词院现代大学曰行政法人制度曰构建中图分类号院郧

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