猿怨园 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员员年愿月, 员愿 ( 源 ) 葬灶凿造葬泽贼藻凿枣燥则葬遭燥怎贼苑凿援晕燥泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼贼燥曾蚤糟则藻葬糟贼蚤燥灶泽憎藻则藻燥遭泽藻则增藻凿蚤灶葬造造早则燥怎责泽凿怎则蚤灶早贼澡藻泽贼怎凿赠援悦燥灶糟造怎泽蚤燥灶 : 陨灶贼则葬贼怎鄄皂燥则葬造蚤灶躁藻糟

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1 中国肿瘤生物治疗杂志摇澡贼贼责 : 辕辕憎憎憎援遭蚤燥贼澡藻则援燥则早悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则, 粤怎早援圆园员员, 灾燥造援员愿, 晕燥援源 猿愿怨 阅韵陨 : 员园援猿愿苑圆辕躁援蚤泽泽灶援员园园苑鄄猿愿缘载援圆园员员援园源援园园怨 基础研究 活体成像系统检测携荧光素酶增殖缺陷型腺病毒在小鼠体内的表达和分布 员员员员员员, 圆猿孟希亭, 林晨, 梅佳, 王海娟, 马飞, 张金龙, 张颖, 钱海利员 ( 员援中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所暨分子肿瘤学国家重点实验室, 北京员园园园圆员 ; 圆援潍坊医学院附属医院肿瘤科, 山东潍坊圆远员园猿员 ; 猿援首都医科大学附属北京妇产科医院微创科, 北京员园园园圆园 ) [ 摘摇要 ] 摇目的 : 研究携带荧光素酶的增殖缺陷型腺病毒 ( 粤凿鄄造怎糟蚤枣藻则葬泽藻, 粤凿鄄蕴怎糟蚤 ) 经不同途径注射后小鼠体内荧光素酶的表达和分布, 为肿瘤的腺病毒载体基因治疗提供参考 方法 : 建立人胰腺癌孕粤晕悦鄄员细胞裸鼠移植瘤模型, 粤凿鄄蕴怎糟蚤病毒单次或多次瘤体内注射, 或者肌内 尾静脉和腹腔注射粤凿鄄蕴怎糟蚤病毒至正常小鼠, 采用陨灾陨杂蕴怎皂蚤灶葬活体成像系统观察荧光素酶在小鼠体内的分布和表达, 并观察粤凿鄄蕴怎糟蚤病毒的毒性作用 结果 : 单次瘤内注射粤凿鄄蕴怎糟蚤荧光素酶在瘤内持续表达员缘凿, 多次瘤内注射后表达时间更长 肌内注射组荧光素酶随时间延长表达减弱, 注射后源愿澡无荧光素酶表达 尾静脉注射组荧光素酶大部分聚集在肝脏, 注射后员愿凿仍有表达 腹腔注射组源澡后可见荧光素酶的表达, 但苑凿后无表达 粤凿鄄蕴怎糟蚤各注射组小鼠均未出现明显的毒性反应 结论 : 腺病毒携带外源基因经瘤内注射可在瘤内表达较长时间, 多次注射可延长表达时间 ; 经尾静脉注射后主要聚集在肝脏, 且表达时间较长 [ 关键词 ] 摇腺病毒载体 ; 胰腺癌 ; 荧光素酶 ; 活体成像系统 ; 基因治疗 [ 中图分类号 ] 摇砸苑猿缘援怨 ; 砸苑猿园援缘摇摇摇摇 [ 文献标志码 ] 摇粤摇摇摇摇 [ 文章编号 ] 摇员园园苑鄄猿愿缘载 ( 圆园员员 ) 园源鄄园猿愿怨鄄园缘 陨灶增蚤增燥蚤皂葬早蚤灶早泽赠泽贼藻皂蚤灶凿藻贼藻糟贼蚤灶早藻曾责则藻泽泽蚤燥灶葬灶凿凿蚤泽贼则蚤遭怎贼蚤燥灶燥枣则藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶鄄凿藻枣蚤糟蚤藻灶贼葬凿藻灶燥增蚤则怎泽糟葬则则赠蚤灶早造怎糟蚤枣藻则葬泽藻蚤灶皂蚤糟藻 员员员员员员, 圆猿员 酝耘晕郧载蚤鄄贼蚤灶早, 蕴陨晕悦澡藻灶, 酝耘陨允蚤葬, 宰粤晕郧匀葬蚤鄄躁怎葬灶, 酝粤云藻蚤, 在匀粤晕郧允蚤灶鄄造燥灶早, 在匀粤晕郧再蚤灶早, 匝陨粤晕匀葬蚤鄄造蚤 ( 员援杂贼葬贼藻运藻赠蕴葬遭燥则葬贼燥则赠燥枣酝燥造藻糟怎造葬则韵灶糟燥造燥早赠驭悦葬灶糟藻则陨灶泽贼蚤贼怎贼藻燥枣悦葬灶糟藻则匀燥泽责蚤贼葬造, 悦澡蚤灶藻泽藻粤糟葬凿藻皂赠燥枣酝藻凿蚤糟葬造杂糟蚤鄄藻灶糟藻泽, 月藻蚤躁蚤灶早哉灶蚤燥灶酝藻凿蚤糟葬造匀燥泽责蚤贼葬造, 月藻蚤躁蚤灶早员园园园圆员, 悦澡蚤灶葬 ; 圆援阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣韵灶糟燥造燥早赠, 粤枣枣蚤造蚤葬贼藻凿匀燥泽责蚤贼葬造燥枣宰藻蚤鄄枣葬灶早酝藻凿蚤糟葬造悦燥造造藻早藻, 宰藻蚤枣葬灶早圆远员园猿员, 杂澡葬灶凿燥灶早, 悦澡蚤灶葬 ; 猿援阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣酝蚤糟则燥泽怎则早藻则赠, 粤枣枣蚤造蚤葬贼藻凿月藻蚤躁蚤灶早韵遭泽贼藻贼则蚤糟泽匀燥泽责蚤贼葬造燥枣悦葬责蚤贼葬造酝藻凿蚤糟葬造哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠, 月藻蚤躁蚤灶早员园园园圆园, 悦澡蚤灶葬 ) [ 粤遭泽贼则葬糟贼 ] 摇韵遭躁藻糟贼蚤增藻 : 栽燥泽贼怎凿赠贼澡藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣造怎糟蚤枣藻则葬泽藻蚤灶皂蚤糟藻凿藻造蚤增藻则藻凿遭赠则藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶鄄凿藻枣蚤糟蚤藻灶贼葬凿藻灶燥增蚤则怎泽糟葬则则赠鄄蚤灶早造怎糟蚤枣藻则葬泽藻 ( 粤凿鄄造怎糟蚤枣藻则葬泽藻, 粤凿鄄蕴怎糟蚤 ) 贼澡则燥怎早澡凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶则燥怎贼藻泽, 泽燥葬贼贼燥责则燥增蚤凿藻蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶枣燥则葬凿藻灶燥增蚤则怎泽鄄皂藻鄄凿蚤葬贼藻凿贼怎皂燥则早藻灶藻贼澡藻则葬责赠援酝藻贼澡燥凿泽 : 晕怎凿藻皂燥怎泽藻皂燥凿藻造遭藻葬则蚤灶早澡怎皂葬灶责葬灶糟则藻葬贼蚤糟糟葬灶糟藻则孕粤晕悦鄄员糟藻造造泽憎葬泽藻泽贼葬遭造蚤泽澡藻凿葬灶凿粤凿鄄蕴怎糟蚤憎葬泽葬凿皂蚤灶蚤泽贼藻则藻凿蚤灶贼燥贼则葬灶泽责造葬灶贼藻凿贼怎皂燥则泽憎蚤贼澡泽蚤灶早造藻燥则皂怎造贼蚤责造藻蚤灶贼则葬贼怎皂燥则葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶泽援粤凿鄄蕴怎糟蚤憎葬泽葬造泽燥葬凿皂蚤灶蚤泽贼藻则藻凿蚤灶贼燥灶燥则皂葬造皂蚤糟藻贼澡则燥怎早澡蚤灶贼则葬皂怎泽糟怎造葬则, 蚤灶贼则葬增藻灶燥怎泽葬灶凿蚤灶贼则葬责藻则蚤贼燥灶藻葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶泽援栽澡藻凿蚤泽贼则蚤遭怎贼蚤燥灶葬灶凿藻曾鄄责则藻泽泽蚤燥灶燥枣造怎糟蚤枣藻则葬泽藻蚤灶皂蚤糟藻憎藻则藻皂燥灶蚤贼燥则藻凿遭赠蚤灶增蚤增燥陨灾陨杂蕴怎皂蚤灶葬蚤皂葬早蚤灶早泽赠泽贼藻皂葬灶凿贼澡藻贼燥曾蚤糟蚤贼赠燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤憎葬泽葬造泽燥泽贼怎凿蚤藻凿援砸藻泽怎造贼泽 : 杂蚤灶早造藻蚤灶贼则葬贼怎皂燥则葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤则藻泽怎造贼藻凿蚤灶糟燥灶贼蚤灶怎燥怎泽造怎糟蚤枣藻则葬泽藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶枣燥则葬贼造藻葬泽贼员缘凿, 憎澡蚤造藻皂怎造贼蚤责造藻蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶泽则藻泽怎造贼藻凿蚤灶藻增藻灶造燥灶早藻则藻曾责则藻泽泽蚤燥灶援陨灶贼则葬皂怎泽糟怎造葬则蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤早葬增藻葬憎藻葬噪藻则葬灶凿泽澡燥则贼藻则凿怎则葬贼蚤燥灶燥枣造怎糟蚤枣藻则葬泽藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶枣燥则灶燥造燥灶早藻则贼澡葬灶源愿澡援栽澡藻皂葬躁燥则蚤贼赠燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤蚤灶躁藻糟贼藻凿贼澡则燥怎早澡贼葬蚤造鄄增藻蚤灶澡燥皂藻凿贼燥造蚤增藻则葬灶凿藻曾责则藻泽泽藻凿造怎糟蚤枣藻则葬泽藻枣燥则葬贼造藻葬泽贼员愿凿援耘曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣造怎糟蚤枣藻则葬泽藻遭赠蚤灶贼则葬责藻则蚤贼燥灶藻葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶凿藻糟则藻葬泽藻凿憎蚤贼澡贼蚤皂藻鄄造葬责泽藻 [ 基金项目 ] 摇国家高科技研究发展计划 ( 愿远猿计划 ) 资助项目 ( 晕燥援圆园园苑粤粤园圆员园园员 ); 国家自然科学基金资助项目 ( 晕燥援猿园苑苑圆缘圆苑 ) 孕则燥躁藻糟贼泽怎责鄄责燥则贼藻凿遭赠贼澡藻晕葬贼蚤燥灶葬造匀蚤早澡杂糟蚤藻灶糟藻葬灶凿栽藻糟澡灶燥造燥早赠砸藻泽藻葬则糟澡葬灶凿阅藻增藻造燥责皂藻灶贼孕则燥早则葬皂 ( 愿远猿孕则燥早则葬皂 ) 燥枣悦澡蚤灶葬 ( 晕燥援圆园园苑粤粤园圆员园园员 ), 葬灶凿贼澡藻晕葬鄄贼蚤燥灶葬造晕葬贼怎则葬造杂糟蚤藻灶糟藻云燥怎灶凿葬贼蚤燥灶燥枣悦澡蚤灶葬 ( 晕燥援猿园苑苑圆缘圆苑 ) [ 作者简介 ] 摇孟希亭 ( 员怨愿苑原 ), 女, 北京市人, 学士, 主要从事肿瘤生物治疗研究 耘鄄皂葬蚤造 : 葬燥糟则燥灶猿员岳曾蚤灶澡怎葬灶藻贼援糟燥皂 [ 通信作者 ] 摇林晨 ( 蕴陨晕悦澡藻灶, 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早葬怎贼澡燥则 ), 耘鄄皂葬蚤造 : 糟造蚤灶憎噪岳赠葬澡燥燥援糟燥皂援糟灶 ; 钱海利 ( 匝蚤葬灶匀葬蚤鄄造蚤, 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早葬怎贼澡燥则 ), 耘鄄皂葬蚤造 : 择蚤葬灶澡葬蚤鄄 造蚤园园员岳员远猿援糟燥皂援共同通信作者 [ 网络出版 ] 摇澡贼贼责 : 辕辕憎憎憎援糟灶噪蚤援灶藻贼辕噪糟皂泽辕凿藻贼葬蚤造辕猿员援员苑圆缘援砸援圆园员员园苑员源援员员园园援园园远援澡贼皂造

2 猿怨园 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员员年愿月, 员愿 ( 源 ) 葬灶凿造葬泽贼藻凿枣燥则葬遭燥怎贼苑凿援晕燥泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼贼燥曾蚤糟则藻葬糟贼蚤燥灶泽憎藻则藻燥遭泽藻则增藻凿蚤灶葬造造早则燥怎责泽凿怎则蚤灶早贼澡藻泽贼怎凿赠援悦燥灶糟造怎泽蚤燥灶 : 陨灶贼则葬贼怎鄄皂燥则葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣葬凿藻灶燥增蚤则怎泽糟葬则则赠蚤灶早藻曾燥早藻灶燥怎泽早藻灶藻早蚤增藻泽葬糟燥灶贼蚤灶怎燥怎泽藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣早藻灶藻枣燥则葬造燥灶早凿怎则葬贼蚤燥灶, 憎澡蚤造藻皂怎造鄄贼蚤责造藻蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶泽则藻泽怎造贼蚤灶藻增藻灶造燥灶早藻则藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 ; 造蚤增藻则蚤泽贼澡藻皂葬蚤灶贼葬则早藻贼燥则早葬灶葬枣贼藻则贼葬蚤造蚤灶贼则葬增藻灶燥怎泽葬凿皂蚤灶蚤泽贼则葬贼蚤燥灶葬灶凿责则燥鄄增蚤凿藻泽造燥灶早藻曾责则藻泽泽蚤燥灶凿怎则葬贼蚤燥灶援 [ 运藻赠憎燥则凿泽 ] 摇葬凿藻灶燥增蚤则怎泽增藻糟贼燥则 ; 责葬灶糟则藻葬贼蚤糟糟葬灶糟藻则 ; 造怎糟蚤枣藻则葬泽藻 ; 蚤灶增蚤增燥蚤皂葬早蚤灶早泽赠泽贼藻皂 ; 早藻灶藻贼澡藻则葬责赠 [ 悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则, 圆园员员, 员愿 ( 源 ): 猿愿怨鄄猿怨猿 ] 摇摇 摇摇腺病毒是肿瘤基因治疗中应用最广泛的病毒载 [ 员鄄圆体之一 ], 具有感染效率高 安全性好 理化性质较 [ 猿稳定 外源基因容纳量大等多种优点 ] 肿瘤基因治疗实验的给药途径有局部给药 系统给药等方 [ 员, 源法 ] 但在诸多的基因治疗实验研究中, 腺病毒载体的给药方案差别很大, 给药间隔时间也尚无标准, 影响基因治疗实验方案的确定 生物发光成像技术是近年发展起来的一项可在活体动物中直接测 [ 缘定生物发光信号的新技术 ] 荧光素酶( 造怎糟蚤枣藻则葬泽藻 ) 在底物阅鄄荧光素 ( 造怎糟蚤枣藻则蚤灶 ) 存在的情况下催化底物产生生物发光, 可被成像系统检测 将肿瘤细胞用荧光素酶标记, 可以在活体动物水平观察肿瘤的生长和变化情况, 具有高效 灵敏 快速 非损伤等特 [ 缘点 ], 已有大量的研究应用荧光素酶体内成像技术 [ 远鄄愿进行了肿瘤治疗的研究 ] 荧光素酶只在活细胞内产生发光现象, 光的强度与标记细胞的数目成正 [ 怨比, 为实验研究提供了很好的定量指标 ] 携带荧光素酶的腺病毒载体 ( 粤凿鄄造怎糟蚤枣藻则葬泽藻, 粤凿鄄蕴怎糟蚤 ) 系统 [ 员园能较好地反映外源基因在体内的表达水平 ] 本研究通过肌内 静脉和腹腔注射将粤凿鄄蕴怎糟蚤注射入人胰腺癌孕粤晕悦鄄员细胞荷瘤裸鼠体内, 然后经腹腔给予底物阅鄄荧光素, 利用陨灾陨杂蕴怎皂蚤灶葬成像系统检测外源基因在小鼠体内的表达和分布, 为腺病毒在肿瘤治疗中的应用提供依据 员摇材料与方法员援员摇小鼠 试剂和细胞系月粤蕴月辕糟裸鼠购自中国医学科学院实验动物中心, 雄性 源耀耀耀耀耀耀耀远周龄, 体质量 ( 员苑耀耀耀耀耀耀耀员怨 ) 早, 动物合格证号为杂悦载运 ( 京 ) 圆园园怨鄄园园园源 悦缘苑月蕴辕远小鼠购自维通利华实验动物中心, 雄性 源耀耀耀耀耀耀耀远周龄, 体质量员愿耀耀耀耀耀耀耀圆园早, 动物合格证号为杂悦载运 ( 京 ) 圆园园远鄄园园园怨 雄性月粤蕴月辕糟小鼠 ( 方法员援源用鼠 ) 购自中国医学科学院实验动物中心, 员苑耀耀耀耀耀耀耀员怨早, 动物合格证号为杂悦载运 ( 京 ) 圆园园怨鄄园园园苑 雌性月粤蕴月辕糟小鼠 ( 方法员援缘用鼠 ) 购自维通利华实验动物中心, 源耀耀耀耀耀耀耀远周龄, 体质量员愿耀耀耀耀耀耀耀圆园早, 动物合格证号为杂悦载运 ( 京 ) 圆园园远鄄园园园怨 粤凿鄄蕴怎糟蚤购自北方诺赛基因组研究中心有限公司, 阅鄄蕴怎糟蚤枣藻则蚤灶购自杂赠灶糟澡藻皂公司, 麻醉剂戊巴比妥钠由动物室提供, 砸孕酝陨造远源园培养液购自弘博康医药科技有限公司, 胎牛血清为北方同正公司产品 人胰腺癌细胞株孕粤晕悦鄄员由本实验室保存 陨灾陨杂蕴怎鄄皂蚤灶葬成像系统购自载藻灶燥早藻灶悦燥则责燥则葬贼蚤燥灶公司 员援圆摇活体成像系统检测孕粤晕悦鄄员细胞裸鼠移植瘤内注射粤凿鄄蕴怎糟蚤后荧光素酶的表达 将对数生长期的孕粤晕悦鄄员细胞消化, 离心后去除消化液, 用生理盐水洗圆次, 调整细胞密度为 苑员伊员园辕皂造, 取圆园园 μ 造接种于员圆只裸鼠右腋下, 待瘤体生长至缘皂皂伊缘皂皂时备用 实验分为对照组 愿单次粤凿鄄蕴怎糟蚤注射组 ( 第员天瘤内注射员伊员园责枣怎辕员园园 μ 造 ) 多次粤凿鄄蕴怎糟蚤注射组 ( 第员 源 苑天分别注射 愿员伊员园责枣怎辕员园园 μ 造 ) 猿组, 每组猿只 注射后第员 源 苑 员园 员缘 员愿 圆圆天经腹腔给予荧光素 ( 员缘园皂早辕噪早体质量 ) 及麻醉剂戊巴比妥钠 ( 缘缘皂早辕噪早体质量 ), 注射后员园皂蚤灶在活体成像系统下观察荧光素酶在移植瘤内的表达情况 员援源摇活体成像系统检测肌内注射粤凿鄄蕴怎糟蚤后注射部位荧光素酶的表达 实验分高剂量组 低剂量组 对照组, 悦缘苑月蕴辕远 怨小鼠经腿部肌内注射粤凿鄄蕴怎糟蚤病毒员伊员园责枣怎或圆愿伊员园责枣怎, 并设无病毒空白对照, 注射后的圆源 源愿澡 给予荧光素及麻醉剂, 在活体成像系统下观察腿部肌内注射部位荧光素酶的表达情况 员援缘摇 活体成像系统检测腹腔及尾静脉注射粤凿鄄蕴怎糟蚤 后小鼠体内荧光素酶的表达 怨经月粤蕴月辕糟小鼠腹腔 尾静脉注射员伊员园 责枣怎 的粤凿鄄蕴怎糟蚤病毒, 分别在注射后的源澡和第圆 猿 源 苑 员园 员源 员愿天给予荧光素及麻醉剂, 在活体成像系统下观察小鼠体内荧光素酶的表达情况 员援远摇粤凿鄄蕴怎糟蚤经尾静脉途径注射对小鼠的毒性作用 怨经月粤蕴月辕糟小鼠尾静脉分别注射员伊员园 圆伊怨员园员园 员伊员园责枣怎的粤凿鄄蕴怎糟蚤病毒, 每组猿只, 观察小鼠生命体征的变化 员援苑摇 统计学处理 实验数据以珋曾依泽表示, 采用杂孕杂杂员苑援园软件组间差异采用贼检验或秩和检验, 孕约园援园缘或孕约园援园员

3 孟希亭, 等援活体成像系统检测携荧光素酶增殖缺陷型腺病毒在小鼠体内的表达和分布 猿怨员 表示差异具有统计学意义 圆摇结摇果圆援员摇粤凿鄄蕴怎糟蚤瘤内注射后荧光素酶的表达移植瘤内直接注射粤凿鄄蕴怎糟蚤腺病毒后, 荧光素酶可在瘤内持续表达相当长时间, 单次注射后表达可持续圆园凿以上, 多次注射在第员园 员愿天荧光素酶的表达强度是单次注射的圆援圆倍和源援愿倍 ( 孕约园郾园员, 图员 圆 猿 ) 经肌内注射不同剂量粤凿鄄蕴怎糟蚤病毒圆源澡后, 圆伊愿源怨员园责枣怎组荧光素光通量值为猿援园远伊员园, 员伊员园责枣怎高缘剂量组荧光素光通量值较高 ( 猿援远源伊员园 ), 两者差异有统计学意义 ( 孕约园援园员 ); 源愿澡再次观察时, 无论低剂量组还是高剂量组均不能再检测到荧光素酶的表达 ( 图源 缘 远 ) 可见, 粤凿鄄蕴怎糟蚤经肌内注射后外源基因的表达持续时间较短 图员摇瘤内注射粤凿鄄蕴怎糟蚤后肿瘤中荧光素酶的表达云蚤早援员摇蕴怎糟蚤枣藻则葬泽藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶蚤灶贼怎皂燥则泽葬枣贼藻则蚤灶贼则葬贼怎皂燥则葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤 孕约园援园员增泽泽蚤灶早造藻蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶 图源摇肌内注射粤凿鄄蕴怎糟蚤后肿瘤中荧光素酶的表达云蚤早援源摇蕴怎糟蚤枣藻则葬泽藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶蚤灶贼怎皂燥则泽葬枣贼藻则蚤灶贼则葬皂怎泽糟怎造葬则蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤 孕约园援园员增泽圆伊员园愿责枣怎早则燥怎责 图圆摇粤凿鄄蕴怎糟蚤瘤内注射后员园凿小鼠的活体成像结果云蚤早援圆摇陨灶增蚤增燥蚤皂葬早蚤灶早燥枣皂蚤糟藻员园凿葬枣贼藻则蚤灶贼则葬贼怎皂燥则葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤粤 : 悦燥灶贼则燥造 ; 月 : 杂蚤灶早造藻蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶 ; 悦 : 酝怎造贼蚤责造藻蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶 图缘摇不同剂量粤凿鄄蕴怎糟蚤肌内注射后圆源澡的活体成像结果云蚤早援缘摇陨灶增蚤增燥蚤皂葬早蚤灶早燥枣皂蚤糟藻圆源澡葬枣贼藻则蚤灶贼则葬皂怎泽糟怎造葬则蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣凿蚤枣枣藻则藻灶贼糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤 图猿摇粤凿鄄蕴怎糟蚤瘤内注射后圆圆凿的活体成像结果云蚤早援猿摇陨灶增蚤增燥蚤皂葬早蚤灶早燥枣皂蚤糟藻圆圆凿葬枣贼藻则蚤灶贼则葬贼怎皂燥则葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤粤 : 悦燥灶贼则燥造 ; 月 : 杂蚤灶早造藻蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶 ; 悦 : 酝怎造贼蚤责造藻蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶圆援圆摇粤凿鄄蕴怎糟蚤肌内注射后荧光素酶的表达 图远摇不同剂量粤凿鄄蕴怎糟蚤肌内注射后源愿澡的活体成像结果云蚤早援远摇陨灶增蚤增燥蚤皂葬早蚤灶早燥枣皂蚤糟藻源愿澡葬枣贼藻则蚤灶贼则葬皂怎泽糟怎造葬则蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣凿蚤枣枣藻则藻灶贼糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤

4 猿怨圆 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员员年愿月, 员愿 ( 源 ) 圆援猿摇粤凿鄄蕴怎糟蚤尾静脉和腹腔注射后荧光素酶的表达经尾静脉注射粤凿鄄蕴怎糟蚤后, 粤凿鄄蕴怎糟蚤绝大部分聚集在肝脏并很快表达外源荧光素酶, 持续相当长时间, 直至员愿凿仍能见到明显表达 腹腔注射粤凿鄄蕴怎糟蚤源澡后, 观察可见腹腔内外源荧光素的表达, 但随时间的延长表达逐渐减弱, 注射后苑凿基本检测不到其表达 ( 图苑 愿 ) 图苑摇粤凿鄄蕴怎糟蚤尾静脉和腹腔注射后小鼠荧光素酶的表达云蚤早援苑摇蕴怎糟蚤枣藻则葬泽藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶蚤灶皂蚤糟藻葬枣贼藻则贼葬蚤造蚤灶贼则葬增藻灶燥怎泽葬灶凿蚤灶贼则葬责藻则蚤贼燥灶藻葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤 孕约园援园员增泽糟燥灶贼则燥造早则燥怎责 ; 孕约园援园缘 孕约园援园员增泽蚤灶贼则葬增藻灶燥怎泽蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶早则燥怎责图愿摇粤凿鄄蕴怎糟蚤尾静脉和腹腔注射后不同时间小鼠活体成像云蚤早援愿摇陨灶增蚤增燥蚤皂葬早蚤灶早燥枣皂蚤糟藻葬贼凿蚤枣枣藻则藻灶贼贼蚤皂藻责燥蚤灶贼泽葬枣贼藻则贼葬蚤造蚤灶贼则葬增藻灶燥怎泽葬灶凿蚤灶贼则葬责藻则蚤贼燥灶藻葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶燥枣粤凿鄄蕴怎糟蚤悦燥灶 : 悦燥灶贼则燥造 ; 蚤增 : 陨灶贼则葬增藻灶燥怎泽蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶 ( 贼葬蚤造 ); 蚤责 : 陨灶贼则葬责藻则蚤贼燥灶藻葬造蚤灶躁藻糟贼蚤燥灶粤 : 源澡 ; 月 : 源凿 ; 悦 : 员园凿 ; 阅 : 员愿凿圆援源摇粤凿鄄蕴怎糟蚤对小鼠的毒性作用以尾静脉途径给予不同剂量粤凿鄄蕴怎糟蚤后, 连续 观察数日, 小鼠状态良好, 体重未见下降, 进食及排泄均正常, 毛色润泽, 活动正常, 未见死亡, 组间未见差异 由此表明, 小鼠对粤凿鄄蕴怎糟蚤腺病毒载体有较好的耐受性, 在大剂量下粤凿鄄蕴怎糟蚤未对小鼠产生毒性作用 猿摇讨摇论 肿瘤基因治疗中最常用的是腺病毒载体, 它能有效地把外源基因转运到各种靶细胞和组织中, 大量的肿瘤基因治疗实验采用了腺病毒为作载 [ 员, 猿, 员员体 ], 但腺病毒在体内的分布及外源基因表达 [ 员圆持续时间仍无明确的答案 ] 生物发光和荧光成像作为近年来新兴的活体动物体内光学成像技术, 以其操作简便及直观性成为研究小动物活体成像的一种理想方法, 在生命科学研究中得以不断发展 利用这种成像技术, 可以实时观察标记的基因及细 [ 员猿胞在活体动物体内的变化及运动 ] 荧光素酶是广泛表达于萤火虫体内的一种蛋白, 因为具备无毒 成像时间短 ( 员皂蚤灶 ) 背景低 半 [ 员源鄄员缘衰期短等优点而被广泛使用 ] 荧光素酶能持 [ 员远鄄员苑续在哺乳动物细胞内表达 ], 在底物荧光素及 圆垣 [ 员愿酝早存在的条件下发生酶促反应 ], 使用陨灾陨杂蕴怎鄄皂蚤灶葬成像系统可在体内 体外进行荧光检测, 通过细胞或组织发出荧光的光子数来分析荧光素酶表达情况, 该方法能用于肿瘤生长及治疗效果的研 [ 员怨鄄圆园究 ] 肿瘤基因治疗的给药方案有系统给药 局部给药方式 不同的给药方式会直接影响基因治疗的疗 [ 圆员效 ] 因此, 需要有详细准确的数据为腺病毒载体的肿瘤基因治疗方案提供指导 本研究使用活体动物成像技术直观地显示腺病毒载体进入体内后的主要分布器官和表达时间, 便于实时观察外源基因在活体动物体内的表达 本研究结果表明, 粤凿鄄蕴怎糟蚤腺病毒直接瘤内注射后可以持续表达相当长时间, 单次注射后腺病毒携带的荧光素酶信号可持续表达圆园凿以上, 多次注射腺病毒可在一定程度上增加基因表达和持续时间, 这为腺病毒载体的肿瘤基因治疗方案中病毒注射间隔和强度的确定奠定了基础 本研究还发现, 腺病毒的肌内注射表达持续时间较短, 肌内注射腺病毒 源愿澡后, 荧光素酶的表达即趋于消失, 表明肌内可能不适合腺病毒携带的外源基因表达, 这与宰葬灶早 [ 圆圆 ] 等以肌肉作为肿瘤腺病毒疫苗的接种部位未能产生有效免疫保护的结果一致 其原因可能与肌肉组织中缺乏相应的腺病毒受体有关

5 孟希亭, 等援活体成像系统检测携荧光素酶增殖缺陷型腺病毒在小鼠体内的表达和分布 猿怨猿 另外, 腺病毒尾静脉注射后主要分布于肝脏, 且表达外源基因时间较长, 这为腺病毒为载体的基因治疗有很好的提示作用 一方面, 腺病毒的静脉注射可能会导致相当多的腺病毒被阻滞在肝脏, 降低肝脏以外目标部位的有效载体荷量 ; 另一方面, 以腺病毒为载体的肿瘤基因治疗经静脉进行全身给药对于肝内肿瘤可能有较好的效果 腹腔给药也是腺病毒载体的潜在注射途径之一 本研究发现, 尽管腺病毒腹腔注射后外源荧光素酶表达的持续时间短于尾静脉注射, 但在一段时间内仍可维持有效的表达强度, 因此, 腹腔注射对于卵巢癌及其腹腔转移等局限性肿瘤可能有较好的效果 需要注意的是, 腺病毒载体的小鼠感染谱与人感染谱可能存在一定的差异, 将本研究结果推论至人体应用时应谨慎, 需参考腺病毒在人体的生物分布数据 总之, 本研究为小鼠模型中以腺病毒为载体的肿瘤基因治疗提供了有用的参考数据 [ 参考文献 ] [ 员 ] 摇蕴蚤怎载, 蕴蚤允, 栽蚤葬灶再, 藻贼葬造援耘灶澡葬灶糟藻凿责葬灶糟则藻葬贼蚤糟糟葬灶糟藻则早藻灶藻贼澡藻则葬责赠遭赠糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶燥枣葬凿藻灶燥增蚤则葬造增藻糟贼燥则藻曾责则藻泽泽蚤灶早糟鄄藻则遭鄄月圆 ( 匀藻则鄄圆辕灶藻怎 ) 鄄贼葬则早藻贼藻凿蚤皂皂怎灶燥贼燥曾蚤灶憎蚤贼澡葬则藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶鄄糟燥皂责藻贼藻灶贼葬凿藻灶燥增蚤则怎泽燥则藻贼燥责燥泽蚤凿藻 [ 允 ] 援匀怎皂郧藻灶藻栽澡藻则, 圆园员园, 圆员 ( 圆 ): 员缘苑鄄员苑园援 [ 圆 ] 摇蕴怎允, 再怎阅援粤凿藻灶燥增蚤则葬造鄄增藻糟贼燥则遭葬泽藻凿泽蚤砸晕粤枣燥则皂怎贼葬灶贼运鄄则葬泽葬泽葬责则燥皂蚤泽蚤灶早贼燥燥造枣燥则造怎灶早糟葬灶糟藻则早藻灶藻贼澡藻则葬责赠 : 粤造蚤糟藻灶泽藻贼燥噪蚤造造 [ 允 ] 援悦葬灶糟藻则月蚤燥造栽澡藻则, 圆园园远, 缘 ( 员圆 ): 员苑圆源鄄员苑圆缘援 [ 猿 ] 摇杂澡葬则皂葬粤, 栽葬灶凿燥灶酝, 月葬灶早葬则蚤阅杂, 藻贼葬造援粤凿藻灶燥增蚤则葬造增藻糟贼燥则鄄遭葬泽藻凿泽贼则葬贼藻早蚤藻泽枣燥则糟葬灶糟藻则贼澡藻则葬责赠 [ 允 ] 援悦怎则则阅则怎早栽澡藻则, 圆园园怨, 源 ( 圆 ): 员员苑鄄员猿愿援 [ 源 ] 摇孕则葬皂怎凿躁蚤悦, 杂澡蚤皂怎则葬杂, 耘遭葬则葬杂, 藻贼葬造援陨灶泽蚤贼怎责则燥泽贼葬贼藻糟葬灶糟藻则早藻灶藻贼澡藻则葬责赠怎泽蚤灶早葬灶燥增藻造葬凿藻灶燥增蚤则葬造增藻糟贼燥则则藻早怎造葬贼藻凿遭赠贼澡藻糟葬增藻鄄燥造蚤灶鄄员责则燥皂燥贼藻则 [ 允 ] 援悦造蚤灶悦葬灶糟藻则砸藻泽, 圆园园员, 苑 ( 员圆 ): 源圆苑圆鄄源圆苑怨援 [ 缘 ] 摇孙宝昌, 靳宝锋, 侗冬青援荧光素酶标记的月耘蕴鄄苑源园缘细胞体内外成像及肿瘤动物模型建立 [ 允 ] 援中国比较医学杂志, 圆园园愿, 员愿 ( 员 ): 员鄄源援 [ 远 ] 摇郧怎泽藻运, 阅蚤葬泽允阅, 月葬怎藻则泽糟澡皂蚤贼扎郧允, 藻贼葬造援蕴怎糟蚤枣藻则葬泽藻蚤皂葬早蚤灶早枣燥则藻增葬造怎葬贼蚤燥灶燥枣燥灶糟燥造赠贼蚤糟葬凿藻灶燥增蚤则怎泽则藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶蚤灶增蚤增燥 [ 允 ] 援郧藻灶藻栽澡藻则, 圆园园苑, 员源 ( 员员 ): 怨园圆鄄怨员员援 [ 苑 ] 摇杂葬灶贼燥泽耘月, 再藻澡砸, 蕴藻藻允, 藻贼葬造援杂藻灶泽蚤贼蚤增藻蚤灶增蚤增燥蚤皂葬早蚤灶早燥枣栽糟藻造造泽怎泽蚤灶早葬皂藻皂遭则葬灶藻鄄遭燥怎灶凿早葬怎泽泽蚤葬责则蚤灶糟藻责泽造怎糟蚤枣藻则葬泽藻 [ 允 ] 援晕葬贼酝藻凿, 圆园园怨, 员缘 ( 猿 ): 猿猿愿鄄猿源源援 [ 愿 ] 摇栽燥赠燥泽澡蚤皂葬酝, 栽葬灶葬噪葬再, 酝葬贼怎皂燥贼燥酝, 藻贼葬造援郧藻灶藻则葬贼蚤燥灶燥枣葬泽赠灶早藻灶藻蚤糟皂燥怎泽藻皂燥凿藻造贼燥泽贼怎凿赠贼澡藻蚤灶贼则葬责藻则蚤贼燥灶藻葬造凿蚤泽泽藻皂蚤灶葬贼蚤燥灶燥枣燥增葬则蚤葬灶糟葬灶糟藻则憎蚤贼澡蚤灶增蚤增燥造怎糟蚤枣藻则葬泽藻蚤皂葬早蚤灶早 [ 允 ] 援蕴怎皂蚤灶藻泽鄄糟藻灶糟藻, 圆园园怨, 圆源 ( 缘 ): 猿圆源鄄猿猿员援 [ 怨 ] 摇张怡, 韩或, 赵春林援活体动物体内光学成像技术的研究进 展 [ 允 ] 援生命科学, 圆园园远, 员愿 ( 员 ): 圆缘鄄猿园援 [ 员园 ] 悦则藻泽糟藻粤宰, 阅葬灶凿怎砸, 月怎则早藻则粤, 藻贼葬造援悦澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶葬灶凿则藻葬造鄄贼蚤皂藻蚤皂葬早蚤灶早燥枣早藻灶藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣葬凿藻灶燥增蚤则怎泽藻皂遭藻凿凿藻凿泽蚤造噪鄄藻造葬泽贼蚤灶造蚤噪藻责则燥贼藻蚤灶责燥造赠皂藻则澡赠凿则燥早藻造泽 [ 允 ] 援酝燥造孕澡葬则皂, 圆园园愿, 缘 ( 缘 ): 愿怨员鄄愿怨苑援 [ 员员 ] 宰葬灶早再, 酝葬蕴, 宰葬灶早杂, 藻贼葬造援粤泽泽藻泽泽皂藻灶贼燥枣悦粤砸鄄燥则悦阅源远鄄凿藻鄄责藻灶凿藻灶贼葬凿藻灶燥增蚤则葬造增藻糟贼燥则鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿栽砸粤陨蕴早藻灶藻贼澡藻则葬责赠蚤灶糟造蚤灶蚤糟葬造葬凿藻灶燥糟葬则糟蚤灶燥皂葬造怎灶早糟葬灶糟藻则糟藻造造泽 [ 允 ] 援韵灶糟燥造燥早赠, 圆园园怨, 苑苑 ( 远 ): 猿远远鄄猿苑苑援 [ 员圆 ] 刘思景, 郭伟韬, 王辉援腺病毒载体的研究新进展 [ 允 ] 援现代中西医结合杂志, 圆园员园, 员怨 ( 猿 ): 员远远怨鄄员远苑园援 [ 员猿 ] 张怡, 韩或, 赵春林援活体动物体内光学成像技术的研究进展 [ 允 ] 援生命科学, 圆园园远, 员愿 ( 员 ): 圆缘鄄猿园援 [ 员源 ] 匀蚤糟噪泽燥灶允, 粤糟噪造藻则杂, 运造葬怎遭藻则贼阅, 藻贼葬造援晕燥灶蚤灶增葬泽蚤增藻皂燥造藻糟怎造葬则蚤皂葬早蚤灶早燥枣葬责燥责贼燥泽蚤泽蚤灶增蚤增燥怎泽蚤灶早葬皂燥凿蚤枣蚤藻凿枣蚤则藻枣造赠造怎糟蚤枣藻则葬泽藻泽怎遭鄄泽贼则葬贼藻, 在鄄阅耘灾阅鄄葬皂蚤灶燥造怎糟蚤枣藻则蚤灶 [ 允 ] 援悦藻造造阅藻葬贼澡阅蚤枣枣藻则, 圆园员园, 员苑 ( 远 ): 员园园猿鄄员园员园援 [ 员缘 ] 酝藻扎扎葬灶燥贼贼藻蕴, 匝怎藻陨, 运葬蚤躁扎藻造耘, 藻贼葬造援杂藻灶泽蚤贼蚤增藻凿怎葬造糟燥造燥则蚤灶增蚤增燥 遭蚤燥造怎皂蚤灶藻泽糟藻灶糟藻蚤皂葬早蚤灶早怎泽蚤灶早葬灶藻憎则藻凿糟燥凿燥灶燥责贼蚤皂蚤扎藻凿枣蚤则藻枣造赠造怎糟蚤枣藻则葬泽藻葬灶凿葬早则藻藻灶糟造蚤糟噪遭藻藻贼造藻造怎糟蚤枣藻则葬泽藻 [ 允 ] 援孕蕴燥杂韵灶藻, 圆园员员, 远 ( 源 ): 藻员怨圆苑苑援 [ 员远 ] 凿藻宰藻贼允砸, 宰燥燥凿运灾, 凿藻蕴怎糟葬酝, 藻贼葬造援云蚤则藻枣造赠造怎糟蚤枣藻则葬泽藻早藻灶藻 : 杂贼则怎糟贼怎则藻葬灶凿藻曾责则藻泽泽蚤燥灶蚤灶皂葬皂皂葬造蚤葬灶糟藻造造泽 [ 允 ] 援酝燥造悦藻造造月蚤燥造, 员怨愿苑, 苑 ( 圆 ): 苑圆缘鄄苑猿苑援 [ 员苑 ] 凿藻宰藻贼允砸, 宰燥燥凿运灾, 允藻噪蚤灶泽噪蚤阅砸, 藻贼葬造援悦造燥灶蚤灶早燥枣枣蚤则藻枣造赠造怎糟蚤枣鄄藻则葬泽藻糟阅晕粤葬灶凿贼澡藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣葬糟贼蚤增藻造怎糟蚤枣藻则葬泽藻蚤灶耘泽藻澡藻则蚤糟澡蚤葬悦燥造蚤 [ 允 ] 援孕则燥糟晕葬贼造粤糟葬凿杂糟蚤哉杂粤, 员怨愿缘, 愿圆 ( 圆猿 ): 苑愿苑园鄄苑愿愿猿援 [ 员愿 ] 月则燥灶泽贼藻蚤灶陨, 云燥则贼蚤灶允, 杂贼葬灶造藻赠孕耘, 藻贼葬造援悦澡藻皂蚤造怎皂蚤灶藻泽藻藻灶贼葬灶凿遭蚤鄄燥造怎皂蚤灶藻泽藻藻灶贼则藻责燥则贼藻则早藻灶藻葬泽泽葬赠泽 [ 允 ] 援粤灶葬造赠贼月蚤燥糟澡藻皂, 员怨怨源, 圆员怨 ( 圆 ): 员远怨鄄员愿员援 [ 员怨 ] 栽葬噪葬澡葬泽澡蚤运, 韵灶燥凿藻则葬杂, 栽燥澡赠葬皂葬匀, 藻贼葬造援陨灶增蚤增燥蚤皂葬早蚤灶早燥枣责葬则贼蚤糟造藻鄄蚤灶凿怎糟藻凿蚤灶枣造葬皂皂葬贼蚤燥灶葬灶凿燥泽贼藻燥造赠泽蚤泽蚤灶贼澡藻糟葬造增葬则蚤葬藻燥枣晕云噪葬责责葬月辕造怎糟蚤枣藻则葬泽藻贼则葬灶泽早藻灶蚤糟皂蚤糟藻 [ 允 ] 援允月蚤燥皂藻凿月蚤燥贼藻糟澡灶燥造, 圆园员员,[ 耘责怎遭葬澡藻葬凿燥枣责则蚤灶贼 ] 援 [ 圆园 ] 凿藻灾燥糟澡贼晕, 月藻则早憎藻则枣陨, 灾葬灶澡燥怎贼贼藻郧, 藻贼葬造援蕴葬遭藻造蚤灶早燥枣造怎糟蚤枣藻则鄄葬泽藻辕藻郧云孕鄄藻曾责则藻泽泽蚤灶早遭燥灶藻皂葬则则燥憎鄄凿藻则蚤增藻凿泽贼则燥皂葬造糟藻造造泽憎蚤贼澡枣造怎燥鄄则藻泽糟藻灶贼皂蚤糟则燥灶鄄泽蚤扎藻凿蚤则燥灶燥曾蚤凿藻责葬则贼蚤糟造藻泽蚤皂责则燥增藻泽择怎葬灶贼蚤贼葬贼蚤增藻葬灶凿择怎葬造蚤贼葬贼蚤增藻皂怎造贼蚤皂燥凿葬造蚤皂葬早蚤灶早燥枣糟藻造造怎造葬则早则葬枣贼泽蚤灶增蚤增燥 [ 允 ] 援酝燥造陨皂葬早蚤灶早月蚤燥造, 圆园员员,[ 耘责怎遭葬澡藻葬凿燥枣责则蚤灶贼 ] 援 [ 圆员 ] 匀燥造泽贼孕允, 韵则泽噪燥增悦, 栽澡燥皂泽藻灶粤砸, 藻贼葬造援匝怎葬造蚤贼赠燥枣贼澡藻贼则葬灶泽早藻灶藻鄄垣泽责藻糟蚤枣蚤糟悦阅愿栽糟藻造造则藻泽责燥灶泽藻蚤灶凿怎糟藻凿遭赠葬凿藻灶燥增蚤则葬造增藻糟贼燥则蚤皂皂怎鄄灶蚤扎葬贼蚤燥灶蚤泽糟则蚤贼蚤糟葬造造赠蚤灶枣造怎藻灶糟藻凿遭赠增蚤则怎泽凿燥泽藻葬灶凿则燥怎贼藻燥枣增葬糟糟蚤灶葬鄄贼蚤燥灶 [ 允 ] 援允陨皂皂怎灶燥造, 圆园员园, 员愿源 ( 愿 ): 源源猿员鄄源源猿怨援 [ 圆圆 ] 宰葬灶早允, 栽澡燥则泽燥灶蕴, 杂贼燥噪藻泽砸宰, 藻贼葬造援杂蚤灶早造藻皂怎糟燥泽葬造, 遭怎贼灶燥贼责葬则藻灶贼藻则葬造, 蚤皂皂怎灶蚤扎葬贼蚤燥灶憎蚤贼澡则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼葬凿藻灶燥增蚤则葬造鄄遭葬泽藻凿增葬糟鄄糟蚤灶藻责则燥增蚤凿藻泽责燥贼藻灶贼责则燥贼藻糟贼蚤燥灶枣则燥皂责怎造皂燥灶葬则赠贼怎遭藻则糟怎造燥泽蚤泽 [ 允 ] 援允陨皂皂怎灶燥造, 圆园园源, 员苑猿 ( 员园 ): 远猿缘苑鄄远猿远缘援 [ 收稿日期 ] 摇圆园员员原园源原圆圆 [ 修回日期 ] 摇圆园员员原园远原员园 [ 本文编辑 ] 摇王摇莹

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DWX1204 摇 动物学杂志悦澡蚤灶藻泽藻允燥怎则灶葬造燥枣在燥燥造燥早赠摇圆园员圆袁源苑渊源冤院怨远耀员园猿 松江鲈鱼皮肤的显微和亚显微结构 鄢蒋摇鑫摇潘连德摇 马召腾 上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室摇 上海摇圆园员猿园远 摘要院采用光学显微镜尧扫描电镜和透射电镜袁对松江鲈鱼渊栽则葬糟澡蚤凿藻则皂怎泽枣葬泽糟蚤葬贼怎泽冤成体皮肤的显微和亚显微结构进行了观察遥结果表明袁松江鲈鱼体表不同部位皮肤的厚薄不一袁但基本结构相似遥皮肤由表皮和真皮层构成遥松江鲈鱼的皮肤裸露无鳞袁表皮层较薄袁由约源耀愿层细胞构成袁主要由复层上皮细胞和黏液细胞及基底细胞组成遥表层细胞呈扁平尧多边形袁细胞之间主要靠桥粒紧密连接袁连接处形成增厚的边缘嵴状突起遥表皮细胞游离面向内凹陷袁表面形成指纹状微嵴遥黏液细胞呈圆形或卵圆形袁散布在上皮细胞之间遥黏液细胞内的黏原颗粒具有椭圆颗粒状尧均匀致密的块状和疏松丝状猿种不同形态遥真皮通过基膜与表皮相连袁由稀疏层和致密层构成遥真皮结缔组织在腹部较厚而在其他部位较薄遥表皮与真皮连接处有色素层袁头部尧背部尧尾柄和体侧皮肤色素细胞分布多袁色素层明显袁而腹部和颏部皮肤缺少色素遥松江鲈鱼黄河群体真皮层中有角质棘状突起袁而滦河群体则无遥头部尧体侧和尾柄处皮肤上还分布有侧线孔和表面神经丘等感觉器官遥关键词院松江鲈鱼曰皮肤曰显微结构曰亚显微结构中图分类号院匝怨缘源袁杂怨员苑郾源摇文献标识码院粤摇文章编号院园圆缘园鄄猿圆远猿渊圆园员圆冤园源鄄怨远鄄园愿

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人 士 待于探测性调查的检验袁同样由于篇幅原因袁不再罗列遥渊二冤李克特量表的采纳设计量表的一个重要考虑因素就是权重的设计问题遥在探讨高校教育质量的影响因素时可以采咱 6 用因子分析方法遥暂但是袁进行因子旋转后使得评价结果难以直观的解释袁指标权重也不具有可继承性袁在不同阶段中袁若评价指标值变化袁则各指 现代教育管理窑 2012 年第 4 期 教育督导与评价 譹訛 贾新明 渊浙江外国语学院袁浙江杭州 310012 冤 摘要院高校软环境评估工作具有历史和现实意义袁但是软环境的评估研究比较缺乏遥以学生为中心袁通过测评学生感知来对高校软环境进行指数化评估具有可行性遥在高校软环境的研究初期袁可通过开放式的专家调查法袁提出针对公办普通高等本科学院的高校软环境评价的李克特调查量表袁并运用配额抽样和封闭式调查问卷执行该量表袁采用权重具有可继承性的主观赋权法给出量表的权重遥在对具体高校的软环境进行测评时袁应当采纳分层等比例抽样方法对本科三年级全日制学生进行问卷调查袁并依据高校软环境评价的指数计算公式给出评估结果遥关键词院高校软环境曰学生感知曰李克特量表曰指数化评价中图分类号院郧

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教育改革的新趋势袁试图构建政府与大学的新型法律关系遥在我国袁由于市场经济体制的建立和完善以及治理理论的兴起袁为政府与大学关系的变革提供了理论与实践的依据遥改变大学与政府之间的附属关系袁最大限度地减少政府对大学的日常干预袁赋予大学自我管理尧自我负责的权力机制袁成为了现代大学行政法人制度构建的主要目标遥 现代教育管理窑 2013 年第 10 期 专 题 譹訛 黄海群 渊厦门大学袁福建厦门 361005 冤 摘要院我国大学行政法人制度迄今尚未建立袁主要存在大学法人性质定位不明尧政府行政管理权力和大学行政法人权利边界不清尧教育法律调控机制尚未健全等现实境况遥现代大学行政法人制度应是现代大学制度建设的重要组成部分袁其构建的主要目标是改变大学与政府之间的附属关系袁减少政府对大学的不当干预袁赋予大学自我管理与负责的权力机制遥应以保障学术自由和大学自治权为前提袁明确界定我国大学行政法人地位袁真正落实大学办学自主权遥关键词院现代大学曰行政法人制度曰构建中图分类号院郧

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主估 评组 Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software 影响力渊权重值园援圆缘冤是砸耘云增设的评估指标袁重点是确定研究成果的卓越性以及对经济尧社会尧文化尧公共服务及生活质量等各个方面所形成的广泛影响力和有效应用价值遥参评学科需要以案例的形式说明该学科与 现代教育管理窑 2014 年第 9 期 比较教育 譹訛 李漫红袁姜华 渊东北大学袁辽宁沈阳 110004 冤 摘要院英国野创新国家冶战略的实施袁要求本国高校的科研发展方式由资源型转变为创新型遥为提升科研创新水平袁英国深化科研评估制度改革袁实施全新的卓越科研框架渊砸耘云冤评估袁在评估的内容尧组织和技术方面展现出新的特点遥借鉴砸耘云评估袁我国科研质量管理应将进一步确立权威尧规范系统内外的关系并保证多方利益相关者的有效参与遥关键词院英国曰卓越科研框架曰科研评估中图分类号院郧

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hjkx1204.mps ISSN 0250-3301 CODEN HCKHDV (HUANJING KEXUE) ENVIRONMENTAL SCIENCE 第 33 卷第 4 期 Vol.33 No.4 2012 中国科学院生态环境研究中心主办出版 摇摇耘晕灾陨砸韵晕酝耘晕栽粤蕴杂悦陨耘晕悦耘渊匀哉粤晕允陨晕郧运耘载哉耘冤 目 次 第猿猿卷第源期圆园员圆年源月员缘日 碳同位素比技术定量估算城市大气悦韵圆的来源 刘卫袁位楠楠袁王广华袁姚剑袁曾友石袁范雪波袁耿彦红袁李燕渊员园源员冤

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