员苑远 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员远年源月, 圆猿 ( 圆 ) 贼则赠责葬灶遭造怎藻泽贼葬蚤灶蚤灶早 ; 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶造藻增藻造泽燥枣早藻灶藻泽则藻造葬贼藻凿憎蚤贼澡枣怎灶糟贼蚤燥灶燥枣贼澡藻悦陨运糟藻造造泽憎藻则藻皂藻葬泽怎则藻凿遭赠砸藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸 ; 葬灶凿藻枣枣藻糟贼燥枣

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1 中国肿瘤生物治疗杂志摇澡贼贼责 : 辕辕憎憎憎援遭蚤燥贼澡藻则援燥则早悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则, 粤责则援圆园员远, 灾燥造援圆猿, 晕燥援圆 员苑缘 阅韵陨 : 员园援猿愿苑圆辕躁援蚤泽泽灶援员园园苑鄄猿愿缘载援圆园员远援园圆援园园源 基础研究 α 鄄半乳糖神经酰胺负载阅悦促进悦陨运细胞对肝癌细胞的杀伤效应 员圆猿源源源缘刘红彦, 张颖, 王晶波, 陈莉, 王惠, 李栋, 盖中涛 ( 员援山东大学医学院, 山东济南圆缘园员园园 ; 圆援山东省千佛山医院重症医学科, 山东济南圆缘园园员源 ; 猿援济南市传染病医院三科, 山东济南圆缘园园圆员 ; 源援济南赛尔生物科技有限公司, 山东济南圆缘园员园员 ; 缘援山东大学齐鲁儿童医院, 山东济南圆缘园园圆圆 ) [ 摘摇要 ] 摇目的 : 研究负载 α 鄄半乳糖神经酰胺 ( 葬造责澡葬鄄早葬造葬糟贼燥泽赠造糟藻则葬皂蚤凿藻,α 鄄郧葬造悦藻则 ) 的阅悦功能与成熟度的改变情况, 探讨 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦与悦陨运共培养对悦陨运细胞表型 增殖活性及杀伤肝癌细胞效率的影响 方法 : 采用密度梯度离心法从人外周血中分离出单个核细胞, 悬浮细胞诱导培养悦陨运细胞, 贴壁细胞诱导培养阅悦 ; 流式细胞仪检测 α 鄄郧葬造悦藻则负载阅悦的表型, 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸检测阅悦相关基因的皂砸晕粤表达改变 将 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦与悦陨运细胞共培养, 流式细胞仪检测阅悦与悦陨运细胞表面标志物 ; 锥虫蓝染色法检测悦陨运细胞的增殖倍数 ; 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸检测悦陨运细胞功能相关基因的表达情况 ; 悦悦运鄄愿试剂盒检测 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦对悦陨运杀伤匀藻责郧圆细胞的影响 结果 : 经过多种细胞因子诱导, 可获得悦陨运细胞和成熟的阅悦 ;α 鄄郧葬造悦藻则负载可促进阅悦成熟, 阅悦表面标志物悦阅愿园 悦阅愿远 悦阅愿猿和悦阅员员糟的阳性率均升高 ( 孕约园援园缘或孕约园援园员 ), 表面趋化因子受体 垣垣悦悦砸鄄苑 陨蕴鄄员圆 陨蕴鄄员园的皂砸晕粤水平升高 ( 孕约园援园缘 ) α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦与悦陨运共培养, 可显著提高悦陨运细胞悦阅猿悦阅缘远的表达和增殖活性 ( 孕约园援园缘或孕约园援园员 ), 并显著提高陨晕云鄄 γ 陨蕴鄄员圆 穿孔素和颗粒酶素月的皂砸晕粤表达水平 ( 孕约园援园缘或孕约园援园员 ); 悦陨运 阅悦鄄悦陨运 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运细胞对匀藻责郧圆细胞的杀伤作用随效靶比的升高而增强, 在同一效靶比时 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运细胞对靶细胞的杀伤作用最强 ( 孕约园援园缘 ) 结论 :α 鄄郧葬造悦藻则负载可促进阅悦成熟,α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦与悦陨运共培养能促进后者增殖和成熟, 能显著增强其对肝癌细胞的杀伤活性, 为阅悦鄄悦陨运在肿瘤免疫治疗中的应用提供了实验依据 [ 关键词 ] 摇树突状细胞 ; 细胞因子诱导的杀伤细胞 ;α 鄄郧葬造悦藻则 ; 肝癌 ; 增殖 ; 成熟 ; 肿瘤杀伤活性 [ 中图分类号 ] 摇砸苑猿缘援苑 ; 砸苑猿园援缘源摇摇摇摇 [ 文献标识码 ] 摇粤摇摇摇摇 [ 文章编号 ] 摇员园园苑鄄猿愿缘载 ( 圆园员远 ) 园圆鄄园员苑缘鄄园苑 悦赠贼燥贼燥曾蚤糟藻枣枣藻糟贼燥枣悦陨运糟藻造造泽责则燥皂燥贼藻凿遭赠葬造责澡葬鄄早葬造葬糟贼燥泽赠造糟藻则葬皂蚤凿藻责怎造泽藻凿凿藻灶凿则蚤贼蚤糟糟藻造造泽葬早葬蚤灶泽贼澡藻责葬贼燥皂葬糟葬则糟蚤灶燥皂葬糟藻造造泽 员圆猿源源源缘蕴陨哉匀燥灶早赠葬灶, 在匀粤晕郧再蚤灶早, 宰粤晕郧允蚤灶早遭燥, 悦匀耘晕蕴蚤, 宰粤晕郧匀怎蚤, 蕴陨阅燥灶早, 郧粤陨在澡燥灶早贼葬燥 ( 员援悦燥造造藻早藻燥枣酝藻凿鄄蚤糟蚤灶藻, 杂澡葬灶凿燥灶早哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠, 允蚤灶葬灶圆缘园员园园, 杂澡葬灶凿燥灶早, 悦澡蚤灶葬 ; 圆援阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣悦则蚤贼蚤糟葬造悦葬则藻酝藻凿蚤糟蚤灶藻, 匝蚤葬灶枣燥泽澡葬灶匀燥泽鄄责蚤贼葬造, 允蚤灶葬灶圆缘园园员源, 杂澡葬灶凿燥灶早, 悦澡蚤灶葬 ; 猿援贼澡藻栽澡蚤则凿阅藻责葬则贼皂藻灶贼, 允蚤灶葬灶陨灶枣藻糟贼蚤燥怎泽阅蚤泽藻葬泽藻泽匀燥泽责蚤贼葬造, 允蚤灶葬灶圆缘园园圆员, 杂澡葬灶凿燥灶早, 悦澡蚤灶葬 ; 源援允蚤灶葬灶悦藻造造月蚤燥鄄栽藻糟澡灶燥造燥早赠悦燥援, 蕴贼凿援, 允蚤灶葬灶圆缘园员园员, 杂澡葬灶凿燥灶早, 悦澡蚤灶葬 ; 缘援匝蚤造怎悦澡蚤造凿则藻灶 泽匀燥泽鄄责蚤贼葬造粤枣枣蚤造蚤葬贼藻凿贼燥杂澡葬灶凿燥灶早哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠, 允蚤灶葬灶圆缘园园圆圆, 杂澡葬灶凿燥灶早, 悦澡蚤灶葬 ) [ 粤遭泽贼则葬糟贼 ] 摇韵遭躁藻糟贼蚤增藻 : 栽燥蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻枣怎灶糟贼蚤燥灶葬灶凿皂葬贼怎则葬贼蚤燥灶燥枣阅悦泽责怎造泽藻凿遭赠 α 鄄郧葬造悦藻则葬灶凿贼燥藻曾责造燥则藻蚤灶枣造怎藻灶糟藻燥枣糟燥鄄糟怎造贼怎则藻燥枣悦陨运糟藻造造泽憎蚤贼澡 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦泽燥灶责澡藻灶燥贼赠责藻, 责则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶葬糟贼蚤增蚤贼赠葬灶凿藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠燥枣噪蚤造造蚤灶早澡藻责葬贼蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬燥枣贼澡藻悦陨运糟藻造造泽援酝藻贼澡燥凿泽 : 阅悦泽葬灶凿悦陨运糟藻造造泽憎藻则藻蚤灶凿怎糟藻凿枣则燥皂皂燥灶燥糟赠贼藻泽贼澡葬贼泽藻责葬则葬贼藻凿枣则燥皂澡怎皂葬灶责藻则蚤责澡藻则葬造遭造燥燥凿遭赠凿藻灶泽蚤贼赠早则葬凿蚤藻灶贼糟藻灶贼则蚤枣怎早葬贼蚤燥灶援栽澡藻泽怎泽责藻灶泽蚤燥灶葬灶凿葬凿澡藻则藻灶贼皂燥灶燥糟赠贼藻泽憎藻则藻糟怎造贼怎则藻凿藻曾增蚤增燥贼燥早藻灶藻则葬贼藻阅悦葬灶凿悦陨运糟藻造造泽则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援栽澡藻责澡藻灶燥贼赠责藻泽燥枣阅悦泽责怎造泽藻凿遭赠 α 鄄郧葬造悦藻则憎藻则藻凿藻贼藻糟贼藻凿遭赠枣造燥憎糟赠贼燥皂藻贼则赠 ( 云悦酝 ), 葬灶凿皂砸晕粤藻曾鄄责则藻泽泽蚤燥灶燥枣则藻造葬贼藻凿早藻灶藻泽蚤灶阅悦泽憎藻则藻凿藻贼藻糟贼藻凿遭赠择砸栽鄄孕悦砸援粤泽糟燥鄄糟怎造贼怎则藻燥枣悦陨运糟藻造造泽憎蚤贼澡 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦泽, 泽怎则枣葬糟藻皂葬则噪藻则泽燥灶贼澡藻阅悦葬灶凿贼澡藻悦陨运糟藻造造泽憎藻则藻凿藻贼藻糟贼藻凿遭赠云悦酝援孕则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶皂怎造贼蚤责造藻燥枣贼澡藻悦陨运糟藻造造泽憎葬泽藻曾葬皂蚤灶藻凿憎蚤贼澡 [ 基金项目 ] 摇山东省科技发展计划资助项目 ( 晕燥援圆园员圆郧郧粤园员圆员怨 ); 济南市科技发展计划资助项目 ( 晕燥援圆园员猿园圆园猿圆 ); 济南市圆园员圆年度科技型中小企业技术创新基金资助 孕则燥躁藻糟贼泽怎责责燥则贼藻凿遭赠贼澡藻杂糟蚤藻灶糟藻葬灶凿栽藻糟澡灶燥造燥早赠阅藻增藻造燥责皂藻灶贼孕造葬灶燥枣杂澡葬灶凿燥灶早孕则燥增蚤灶糟藻 ( 晕燥援圆园员圆郧郧粤园员圆员怨 ), 贼澡藻杂糟蚤藻灶糟藻葬灶凿栽藻糟澡灶燥造燥早赠阅藻增藻造燥责皂藻灶贼孕造葬灶燥枣允蚤灶葬灶悦蚤贼赠 ( 晕燥援圆园员猿园圆园猿圆 ), 葬灶凿贼澡藻圆园员圆陨灶灶燥增葬贼蚤燥灶云怎灶凿葬贼蚤燥灶枣燥则栽藻糟澡灶燥造燥早赠月葬泽藻凿云蚤则皂泽燥枣允蚤灶葬灶悦蚤贼赠 [ 作者简介 ] 摇刘红彦 ( 员怨怨园原 ), 女, 山东省聊城市人, 硕士生, 主要从事肝癌生物免疫治疗的相关研究, 耘鄄皂葬蚤造 : 员缘园远远员猿员怨苑怨岳员远猿援糟燥皂 [ 通信作者 ] 摇盖中涛 ( 郧粤陨在澡燥灶早贼葬燥, 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早葬怎贼澡燥则 ), 耘鄄皂葬蚤造 : 早葬蚤扎澡燥灶早贼葬燥岳泽蚤灶葬援糟燥皂 [ 优先发表 ] 摇澡贼贼责 : 辕辕憎憎憎援糟灶噪蚤援灶藻贼辕噪糟皂泽辕凿藻贼葬蚤造辕猿员援员苑圆缘援砸援圆园员远园猿猿员援圆园园愿援园园愿援澡贼皂造

2 员苑远 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员远年源月, 圆猿 ( 圆 ) 贼则赠责葬灶遭造怎藻泽贼葬蚤灶蚤灶早 ; 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶造藻增藻造泽燥枣早藻灶藻泽则藻造葬贼藻凿憎蚤贼澡枣怎灶糟贼蚤燥灶燥枣贼澡藻悦陨运糟藻造造泽憎藻则藻皂藻葬泽怎则藻凿遭赠砸藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸 ; 葬灶凿藻枣枣藻糟贼燥枣 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦泽燥灶噪蚤造造蚤灶早匀藻责郧圆糟藻造造泽遭赠贼澡藻悦陨运糟藻造造泽憎葬泽贼藻泽贼藻凿憎蚤贼澡悦悦运鄄愿噪蚤贼援砸藻泽怎造贼泽 : 悦陨运糟藻造造泽葬灶凿皂葬贼怎则藻阅悦泽糟燥怎造凿遭藻燥遭贼葬蚤灶藻凿枣则燥皂蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶燥枣皂怎造贼蚤责造藻糟赠贼燥噪蚤灶藻泽 ; 耘曾糟蚤贼葬贼蚤燥灶燥枣 α 鄄郧葬造悦藻则糟燥怎造凿责则燥皂燥贼藻阅悦泽皂葬贼怎则葬贼蚤燥灶, 蚤灶糟则藻葬泽藻贼澡藻责燥泽蚤贼蚤增藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶泽燥枣悦阅愿园, 悦阅愿远, 悦阅愿猿葬灶凿悦阅员员糟 ( 孕约园援园缘, 孕约园援园员 ) 葬灶凿皂砸晕粤造藻增藻造泽燥枣泽怎则枣葬糟藻糟澡藻皂燥噪蚤灶藻则藻糟藻责贼燥则泽悦悦砸鄄苑, 陨蕴鄄员圆, 葬灶凿陨蕴鄄员园蚤灶贼澡藻阅悦泽 ( 孕约园援园缘 ) 援悦燥鄄糟怎贼怎则藻燥枣贼澡藻悦陨运糟藻造造泽憎蚤贼澡 α 鄄郧葬造悦藻则糟燥怎造凿垣垣泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠蚤灶糟则藻葬泽藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶燥枣悦阅猿悦阅缘远葬灶凿责则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶葬糟贼蚤增蚤贼赠燥枣贼澡藻悦陨运糟藻造造泽 ( 孕约园援园缘, 孕约园援园员 ), 葬灶凿皂砸晕粤藻曾责则藻泽泽蚤燥灶造藻增藻造泽燥枣陨晕云鄄 γ, 陨蕴鄄员圆, 责藻则枣燥则蚤灶葬灶凿责葬则贼蚤糟造藻藻灶扎赠皂藻月 ( 孕约园援园缘, 孕约园援园员 ); 运蚤造造蚤灶早藻枣枣藻糟贼泽燥枣贼澡藻悦陨运, 贼澡藻阅悦鄄悦陨运葬灶凿贼澡藻 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运糟藻造造泽燥灶匀藻责郧圆糟藻造造泽憎藻则藻藻灶澡葬灶糟藻凿憎蚤贼澡蚤灶糟则藻葬泽藻燥枣藻枣枣藻糟贼燥则鄄贼葬则早藻贼则葬贼蚤燥援粤贼贼澡藻泽葬皂藻藻枣枣藻糟贼燥则鄄贼葬则早藻贼则葬贼蚤燥,α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运糟藻造造泽澡葬凿贼澡藻澡蚤早澡藻泽贼糟赠贼燥贼燥曾蚤糟蚤贼赠藻枣枣藻糟贼燥灶匀藻责郧圆糟藻造造泽 ( 孕约园援园缘 ) 援 悦燥灶糟造怎泽蚤燥灶 : 孕怎造泽藻燥枣 α 鄄郧葬造悦藻则糟燥怎造凿责则燥皂燥贼藻贼澡藻皂葬贼怎则葬贼蚤燥灶燥枣阅悦泽援悦燥鄄糟怎造贼怎则藻燥枣贼澡藻 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦憎蚤贼澡悦陨运糟藻造造泽糟燥怎造凿藻灶澡葬灶糟藻责则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶葬灶凿皂葬贼怎则葬贼蚤燥灶燥枣悦陨运糟藻造造泽, 葬灶凿藻灶澡葬灶糟藻蚤贼泽葬糟贼蚤增蚤贼赠贼燥噪蚤造造澡藻责葬贼蚤糟糟葬则糟蚤灶燥皂葬糟藻造造泽援栽澡藻则藻枣燥则藻, 贼澡藻憎燥则噪泽皂蚤早澡贼责则燥增蚤凿藻藻曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造葬灶凿贼澡藻燥则藻贼蚤糟葬造遭葬泽蚤泽枣燥则葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶燥枣贼澡藻阅悦鄄悦陨运蚤灶蚤皂皂怎灶燥贼澡藻则葬责赠燥枣糟葬则糟蚤灶燥皂葬援 [ 运藻赠憎燥则凿泽 ] 摇凿藻灶凿则蚤贼蚤糟糟藻造造 ( 阅悦 ); 糟赠贼燥噪蚤灶藻蚤灶凿怎糟藻凿噪蚤造造藻则 ( 悦陨运 ) 糟藻造造 ;α 鄄早葬造葬糟贼燥泽赠造糟藻则葬皂蚤凿藻 ( α 鄄郧葬造悦藻则 ); 澡藻责葬贼燥皂葬糟葬则糟蚤灶燥皂葬 ; 责则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶 ; 皂葬贼怎则葬贼蚤燥灶 ; 贼怎皂燥则糟赠贼燥贼燥曾蚤糟藻枣枣藻糟贼 [ 悦澡蚤灶允悦葬灶糟藻则月蚤燥贼澡藻则, 圆园员远, 圆猿 ( 圆 ): 员苑缘鄄员愿员援阅韵陨 : 员园援猿愿苑圆辕躁援蚤泽泽灶援员园园苑鄄猿愿缘载援圆园员远援园圆援园园源 ] 摇摇 摇摇悦陨运细胞和阅悦是目前应用较多的过继免疫治疗的有效方法, 目前很多研究者将能够识别抗原 激活免疫系统的阅悦与悦陨运细胞联合培养应用于肿瘤 [ 员鄄猿治疗, 为肿瘤的免疫治疗开辟新思路 ] α 鄄半乳糖神经酰胺 ( 葬造责澡葬鄄早葬造葬糟贼燥泽赠造糟藻则葬皂蚤凿藻,α 鄄郧葬造悦藻则 ) 是最初发现于海绵组织的糖脂, 目前在临床试验中作为一种 [ 源鄄缘抗癌剂, 治疗多种实体瘤具有显著疗效 ] 给患者注射 α 鄄郧葬造悦藻则负载的阅悦比单独注射 α 鄄郧葬造悦藻则呈现 [ 远出更强的抗肿瘤活性 ] α 鄄郧葬造悦藻则和它的人工合成等价物能够与小鼠和人类的粤孕悦上的悦阅造凿分子结合, 激活蚤晕运栽细胞, 产生大量的细胞因子参与免疫调节 将荷载 α 鄄郧葬造悦藻则的成熟阅悦静脉注射到肿瘤患者体内, 可将患者的蚤晕运栽水平提升员园园倍以上, 并且可以持续远个月 但荷载 α 鄄郧葬造悦藻则的成熟阅悦对悦陨运细胞的功能活化尚未见研究 本研究探讨 α 鄄郧葬造悦藻则负载对阅悦功能与成熟度的影响, 以及 α 鄄郧葬造悦藻则负载的阅悦与悦陨运共培养对悦陨运细胞表型 增殖活性及杀伤肝癌细胞效应的影响, 为阅悦鄄悦陨运在肿瘤免疫治疗中的应用提供实验和理论依据 员摇材料与方法员援员摇主要材料和仪器人肝癌匀藻责郧圆细胞由山东大学医学院高成江教授惠赠, 在猿苑益 缘豫悦韵圆条件下, 用含员圆豫胎牛血清 ( 枣藻贼葬造遭燥增蚤灶藻泽藻则怎皂, 云月杂 ) 和抗生素 ( 员园园哉辕皂造青霉素和员园园 μ 早辕皂造链霉素 ) 的员远源园完全培养液培养 α 鄄郧葬造悦藻则由山东大学生命科学学院王鹏教授惠赠, 胎牛血清 胰蛋白酶 青霉素 链霉素 栽砸陨扎燥造试剂和砸孕酝陨员远源园培养基购自美国郧蚤遭糟燥公司, 重组人 陨蕴鄄源 郧酝鄄悦杂云 栽晕云鄄 α 和悦阅猿单克隆抗体购自美国 砸驭阅杂赠泽贼藻皂泽公司, 陨蕴鄄员 β, 陨蕴鄄圆和陨云晕鄄 γ 购自美国 孕藻责则燥贼藻糟澡公司, 淋巴细胞分离液 ( 相对密度为员援园苑苑早辕蕴 ) 购自美国酝孕公司, 抗悦阅猿鄄云陨栽悦 悦阅源鄄孕耘 悦阅愿鄄孕耘 悦阅缘远鄄孕耘 悦阅员源鄄孕耘 悦阅愿园鄄孕耘 悦阅愿猿鄄孕耘 悦阅愿远鄄孕耘 悦阅员员糟鄄孕耘及同型对照抗体均购自美国月阅公司, 择砸栽鄄孕悦砸试剂盒购自北京全式金生物技术有限公司, 引物购自上海生工科技有限公司, 悦悦运鄄愿试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司, 细胞培养板 细胞培养瓶购自美国悦燥则灶蚤灶早公司 郧怎葬增葬耘葬泽赠悦赠贼藻远匀栽流式细胞仪购自美国酝蚤造造蚤责燥则藻公司, 耘蕴载鄄愿园愿酶标仪购自美国月陨韵鄄栽耘运公司, 粤责责造蚤藻凿月蚤燥泽赠泽贼藻皂苑缘园园砸藻葬造鄄栽蚤皂藻孕悦砸杂赠泽贼藻皂购自美国粤月陨公司 员援圆摇 悦陨运细胞培养 无菌抽取健康供者外周血缘园皂造, 密度梯度离心分离单个核细胞 生理盐水洗两次, 用含员园豫云月杂的 远砸孕酝陨员远源园完全培养基将细胞密度调整为缘伊员园辕皂造, 加入远孔板, 每孔圆皂造, 置于猿苑益 缘豫悦韵圆培养箱培养圆澡 留下贴壁细胞用于培养阅悦 ; 吸出悬浮细胞, 调远整细胞密度为员伊员园辕皂造, 当天加入陨云晕鄄 γ( 员园园园哉辕皂造 ), 置于培养箱培养, 第圆天加入陨蕴鄄圆 ( 员园园园哉辕皂造 ) 陨蕴鄄员 β( 圆园园哉辕皂造 ) 抗悦阅猿单克隆抗体 ( 缘园灶早辕皂造 ), 第猿 天补加含等量因子的培养基 ; 以后每圆耀耀耀耀猿凿更换新鲜培养基 补加等量因子, 第愿天收获悦陨运细胞 员援猿摇 阅悦培养及 α 鄄郧葬造悦藻则负载 将步骤员援圆中的贴壁细胞加入含陨蕴鄄源 ( 缘园园哉辕皂造 ) 和郧酝鄄悦杂云 ( 员园园园哉辕皂造 ) 的含员园豫云月杂砸孕酝陨员远源园完全培养基继续培养 每隔圆耀耀耀耀猿凿更换新鲜培养基, 并添加等量的陨蕴鄄源和郧酝鄄悦杂云 第远天更

3 刘红彦, 等援 α 鄄半乳糖神经酰胺负载阅悦促进悦陨运细胞对肝癌细胞的杀伤效应 员苑苑 换培养基, 加入缘园灶早辕皂造的栽晕云鄄 α 刺激阅悦成熟 第苑天加入员园园灶早辕皂造 α 鄄郧葬造悦藻则负载, 与阅悦共孵育 圆源澡, 第愿天收获负载 α 鄄郧葬造悦藻则的阅悦 同时设置不加 α 鄄郧葬造悦藻则的阅悦为对照组 员援源摇 阅悦与悦陨运混合培养 第愿天, 将成熟的阅悦 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦分别与悦陨运 细胞按员颐缘混合培养, 设单纯悦陨运细胞为对照组 共培养当日起锥虫蓝染色法记数细胞, 动态观察各组细胞的增殖活性和倍数, 第员源天取出少量细胞进行流式术检测 员援缘摇 流式细胞术检测阅悦和悦陨运细胞表型 收集阅悦和悦陨运细胞悬液, 孕月杂洗两遍, 离心, 缘弃上清液, 重悬细胞于耘孕管中, 每管圆伊员园个细胞辕员园园 μ 造 悦陨运细胞加入员 μ 造抗悦阅猿鄄云陨栽悦 悦阅源鄄孕耘 悦阅愿鄄孕耘 悦阅缘远鄄孕耘及同型对照, 阅悦加入员 μ 造抗 悦阅员源鄄孕耘 悦阅愿园鄄孕耘 悦阅愿猿鄄孕耘 悦阅愿远鄄孕耘 悦阅员员糟鄄孕耘 及同型对照, 源益避光孵育猿园皂蚤灶, 孕月杂洗涤细胞圆 次, 将细胞重悬于园援圆皂造孕月杂中, 流式细胞仪检测细胞表型 采用郧怎葬增葬陨灶糟赠贼藻 ( 郧怎葬增葬杂燥枣贼灾圆援苑, 酝蚤造鄄造蚤责燥则藻 ) 分析软件分析实验结果 员援远摇 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸检测阅悦和悦陨运功能相关基因 收获阅悦和悦陨运细胞, 用栽砸陨扎燥造试剂盒抽提细胞总砸晕粤并测定浓度 各实验组以相同砸晕粤量进行逆转录合成糟阅晕粤, 杂再月砸郧则藻藻灶法孕悦砸扩增检测 阅悦相关基因和悦陨运杀伤功能相关基因的表达情原 ΔΔ 悦贼况, 引物序列见表员 采用圆法计算各基因在细胞中的相对表达量, 以 β 鄄葬糟贼蚤灶为内参 反应条件 : 怨源益预变性圆皂蚤灶, 怨源益圆园泽 远园益缘苑泽, 循环源缘 次 采用粤月陨苑缘园园砸藻葬造鄄栽蚤皂藻孕悦砸杂赠泽贼藻皂检测目的基因扩增水平, 并将猿次独立实验所获数据使用 杂藻择怎藻灶糟藻阅藻贼藻糟贼蚤燥灶杂燥枣贼憎葬则藻员援源软件 ( 粤责责造蚤藻凿月蚤燥鄄泽赠泽贼藻皂泽 ) 分析 栽葬遭援员摇 表员摇 阅悦和悦陨运细胞功能相关基因砸藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸引物序列 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸责则蚤皂藻则泽藻择怎藻灶糟藻泽燥枣阅悦葬灶凿悦陨运枣怎灶糟贼蚤燥灶则藻造葬贼藻凿早藻灶藻泽 郧藻灶藻 孕则蚤皂藻则杂藻择怎藻灶糟藻 ( 缘忆鄄猿忆 ) 孕则燥凿怎糟贼 ( 遭责 ) 陨蕴鄄员圆 云 : 郧悦郧郧栽粤悦悦粤悦悦粤栽郧栽郧栽悦粤悦悦粤郧悦粤郧栽栽郧郧栽悦粤栽悦栽悦 员愿园 砸 : 栽栽郧悦郧郧悦悦郧悦郧郧粤粤郧悦粤栽栽悦粤郧粤栽粤郧悦栽悦粤栽悦粤悦栽悦 悦悦砸鄄苑 云 : 郧悦郧郧粤粤栽栽悦粤栽郧郧粤悦悦栽郧郧郧郧粤粤粤悦悦粤粤 员圆园 砸 : 郧栽粤郧栽悦郧粤悦悦栽粤栽郧郧郧郧粤郧粤粤郧郧栽郧郧栽郧郧栽郧 陨蕴鄄员园 云 : 郧悦悦栽栽郧栽悦栽郧粤郧粤栽郧粤栽悦悦粤郧栽栽 愿缘 砸 : 栽悦粤悦粤栽郧悦郧悦悦栽栽郧粤栽郧栽悦栽 栽郧云鄄 β 云 : 栽悦粤悦悦郧郧粤郧栽栽郧栽郧悦郧郧悦粤郧 员猿园 砸 : 悦郧郧悦悦郧郧栽粤郧栽郧粤粤悦悦悦郧栽栽 陨云晕鄄 γ 云 : 悦悦粤郧粤郧悦粤栽悦悦粤粤粤粤郧粤郧栽郧栽郧郧粤郧 员愿园 砸 : 郧悦栽郧郧悦郧粤悦粤郧栽栽悦粤郧悦悦粤栽悦粤 栽晕云鄄 α 云 : 郧粤栽悦郧郧悦悦悦悦悦粤郧粤郧郧郧粤粤郧粤郧 员愿猿 砸 : 悦悦粤栽栽郧郧悦悦粤郧郧粤郧郧郧悦粤栽栽郧郧 陨蕴鄄远 云 : 郧悦粤粤粤郧粤郧郧悦粤悦栽郧郧悦粤郧粤粤 怨猿 砸 : 郧郧悦粤粤郧栽悦栽悦悦栽悦粤栽栽郧粤粤栽悦悦 孕藻则枣燥则蚤灶 云 : 悦郧郧悦悦粤栽悦粤悦粤悦悦栽悦悦粤栽栽粤 员员圆 砸 : 郧郧栽郧栽粤郧栽悦悦粤悦悦粤郧郧悦悦粤 孕葬则贼蚤糟造藻藻灶扎赠皂藻月 云 : 郧粤栽郧悦粤郧郧郧粤郧粤栽悦粤栽悦郧郧 员园猿 砸 : 悦粤悦悦郧悦粤悦悦栽悦栽栽悦粤郧粤郧粤悦 β 鄄葬糟贼蚤灶 云 : 郧郧粤悦粤栽悦悦郧悦粤粤粤郧粤悦悦栽郧栽 愿园 砸 : 郧悦粤栽悦悦栽郧栽悦郧郧悦粤粤栽郧悦 员援苑摇混合淋巴细胞实验检测负载 α 鄄郧葬造悦藻则对阅悦鄄悦陨运细胞杀伤匀藻责郧圆细胞能力的影响取培养第员源天的悦陨运 阅悦鄄悦陨运 α 鄄郧葬造悦藻则负载的阅悦鄄悦陨运作为效应细胞, 对数生长期的匀藻责郧圆细 胞作为靶细胞, 于怨远孔细胞培养板按照效靶比圆园颐员 员园颐员 缘颐员加入各组细胞, 每组设缘个复孔, 同时设单独效应细胞组和单独靶细胞组 置于猿苑益 缘豫悦韵圆培养箱培养圆源澡, 每孔加入员园 μ 造悦悦运鄄愿试

4 员苑愿 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员远年源月, 圆猿 ( 圆 ) 剂, 孵育员耀耀耀耀源澡 用酶标仪检测源缘园灶皂处光密度 ( 阅 ) 值, 计算杀伤活性 杀伤率 ( 豫 ) 越 [ 员原 ( 阅耘垣栽原阅耘 ) 辕阅栽 ] 伊员园园豫 ( 阅耘垣栽为效应细胞垣匀藻责郧圆细胞组的阅值, 阅耘为效应细胞对照组的阅值, 阅栽为 匀藻责郧圆细胞对照组的阅值 ) 员援愿摇 统计学处理 应用杂孕杂杂员园援园软件进行分析, 计量数据以珋曾依泽 表示, 组间差异性采用贼检验分析, 以孕约园援园缘为具有统计学差异, 孕约园援园员为具有显著统计学差异 摇摇外周血孕月酝悦加入各因子培养第员天, 细胞数较少, 呈圆形, 第猿天开始增殖, 镜下可见少量的细胞团, 第缘天开始倍增, 细胞集落增多 ( 图圆 ) 此后细胞快速增殖, 至第员源天进入对数生长期, 出现大量的集落 圆摇结摇果 圆援员摇阅悦和悦陨运细胞的培养与观察倒置显微镜下观察贴壁细胞, 呈圆形, 均匀分布 加入细胞因子诱导源凿后可见细胞体积变大, 第苑天细胞体积明显增大, 形态不规则, 可看典型的毛刺状或树状突起, 呈现典型的阅悦形态 ( 图员 ) 图员摇阅悦培养第愿天的细胞形态云蚤早援员摇悦藻造造皂燥则责澡燥造燥早赠燥枣皂葬贼怎则藻阅悦泽燥灶阅葬赠愿粤 : 伊员园园 ; 月 : 伊源园园 图圆摇悦陨运培养第员 猿 缘天时的细胞形态 ( 伊员园园 ) 云蚤早援圆摇悦藻造造皂燥则责澡燥造燥早赠燥枣悦陨运糟藻造造泽燥灶贼澡藻枣蚤则泽贼, 贼澡蚤则凿, 枣蚤枣贼澡凿葬赠 ( 伊员园园 ) 粤 : 阅葬赠员 ; 月 : 阅葬赠猿 ; 悦 : 阅葬赠缘圆援圆摇 α 鄄郧葬造悦藻则负载对阅悦表型的影响诱导第愿天, 流式细胞仪检测阅悦表型 ( 图猿, 表圆 ), 其特异性的标志悦阅愿园 悦阅愿远和悦阅愿猿均有较高表达, 单核细胞标志分子悦阅员源的阳性率为 ( 怨援圆苑依园援愿愿 ) 豫, 说明阅悦已经成熟 加入 α 鄄郧葬造悦藻则与阅悦共孵育圆源澡, 其各项表面标志物的阳性率均较单纯阅悦升高, 其中悦阅愿猿 悦阅员员糟 ( 均孕约园援园缘 ) 和悦阅愿远 ( 孕约园援园员 ) 的阳性率差异有统计学意义, 结果表明 α 鄄郧葬造悦藻则可显著促进阅悦的成熟 图猿摇阅悦和 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦培养第愿天的免疫表型云蚤早援猿摇陨皂皂怎灶藻责澡藻灶燥贼赠责藻泽燥枣阅悦葬灶凿 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦糟藻造造泽燥灶阅葬赠愿 圆援猿摇 α 鄄郧葬造悦藻则负载对阅悦功能相关基因表达的影响砸藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸结果 ( 图源 ) 显示,α 鄄郧葬造悦藻则可促进阅悦功能相关基因陨蕴鄄员圆 陨蕴鄄员园 悦悦砸鄄苑的皂砸晕粤 水平升高, 与阅悦组相比差异具有统计学意义 ( 孕约园援园缘 ) 而两组栽郧云鄄 β 的表达水平无显著差异 ( 孕跃园援园缘 )

5 刘红彦, 等援 α 鄄半乳糖神经酰胺负载阅悦促进悦陨运细胞对肝癌细胞的杀伤效应 员苑怨 表圆摇阅悦和 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦培养第愿天的免疫表型 ( 灶越缘, 珔曾依泽, 豫 ) 栽葬遭援圆摇陨皂皂怎灶藻责澡藻灶燥贼赠责藻泽燥枣阅悦葬灶凿 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦燥灶阅葬赠愿 ( 灶越缘, 珔曾依泽, 豫 ) 郧则燥怎责悦阅愿园悦阅愿远悦阅愿猿悦阅员员糟悦阅员源 阅悦苑猿援远圆依远援源员苑远援怨愿依苑援圆猿摇摇 摇远苑援猿缘依圆援怨员 缘远援远源依源援苑缘摇怨援圆苑依园援愿愿 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦愿圆援园源依远援苑怨愿愿援缘苑依愿援员怨 愿源援猿远依愿援圆圆 苑园援员远依缘援圆愿 愿援园源依园援缘远 摇摇摇摇摇 孕约园援园缘, 孕约园援园员增泽阅悦早则燥怎责 显变化 ; 混合培养第缘天, 细胞明显增生, 可见细胞集落, 但猿组增殖倍数无明显差异 ; 第苑天, 猿组悦陨运细胞进入快速增殖期, 细胞集落增多, 阅悦鄄悦陨运组细胞增殖倍数较悦陨运组无显著性差异 ( 孕跃园援园缘 ), 而 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运组细胞增殖倍数较悦陨运组和阅悦鄄悦陨运组显著升高 ( 孕约园援园员或孕约园援园缘 ) 图源摇 α 鄄郧葬造悦藻则负载对阅悦相关基因皂砸晕粤表达水平的影响 ( 灶越怨, 珔曾依泽 ) 云蚤早援源摇耘枣枣藻糟贼燥枣 α 鄄郧葬造悦藻则责怎造泽藻燥灶贼澡藻则藻造葬贼蚤增藻皂砸晕粤藻曾责则藻泽泽蚤燥灶造藻增藻造泽燥枣阅悦泽 ( 灶越怨, 珔曾依泽 ) 孕约园援园缘增泽阅悦早则燥怎责 表猿摇 共培养第员源天后悦陨运 阅悦鄄悦陨运和 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运 栽葬遭援猿摇 细胞免疫表型 ( 灶越缘, 珔曾依泽, 豫 ) 陨皂皂怎灶藻责澡藻灶燥贼赠责藻泽燥枣悦陨运, 阅悦鄄悦陨运葬灶凿 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运糟藻造造泽燥灶阅葬赠员源 ( 灶越缘, 珔曾依泽, 豫 ) 郧则燥怎责 垣垣悦阅猿悦阅源 悦陨运圆远援愿依猿援猿摇摇摇 阅悦鄄悦陨运圆员援怨依员援怨 摇摇 垣垣悦阅猿悦阅愿 摇摇缘缘援员依源援愿 远苑援怨依缘援猿 垣垣悦阅猿悦阅缘远 摇摇圆园援缘依圆援猿 源猿援猿依猿援远 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运员苑援愿依员援猿 Δ 苑圆援苑依缘援员 Δ 源怨援苑依缘援远 圆援源摇 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦与悦陨运共培养后的细胞表型 流式细胞术检测结果 ( 表猿 ) 显示, 经过员源凿的垣垣诱导培养, 成熟的悦陨运细胞高表达悦阅猿悦阅愿双阳垣垣性细胞和悦阅猿悦阅缘远双阳性细胞 与阅悦共培养垣垣垣垣后, 悦陨运细胞表面的悦阅猿悦阅愿和悦阅猿悦阅缘远阳性率较悦陨运组升高 ( 孕约园援园员 );α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运组垣垣垣垣垣的悦阅猿悦阅愿和悦阅猿悦阅缘远阳性率最高, 悦阅猿 垣悦阅源阳性率最低 ( 孕约园援园员或孕约园援园缘 ) 圆援缘摇 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦对悦陨运细胞增殖的影响 锥虫蓝染色结果 ( 表源 ) 显示, 悦陨运 阅悦鄄悦陨运和 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运细胞在混合培养前猿凿, 体积无明 摇孕约园援园缘, 孕约园援园员增泽悦陨运早则燥怎责 ; Δ 孕约园援园缘增泽阅悦鄄悦陨运早则燥怎责 圆援远摇 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦促进悦陨运细胞杀伤相关基因的表达砸藻葬造鄄贼蚤皂藻孕悦砸检测结果 ( 图缘 ) 显示, 阅悦鄄悦陨运组和 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运组陨晕云鄄 γ 穿孔素 陨蕴鄄员圆和颗粒酶素月的表达水平与悦陨运组比较均显著升高 ( 孕约园援园缘或孕约园援园员 );α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运组与阅悦鄄悦陨运组相比, 陨晕云鄄 γ 和陨蕴鄄员圆表达水平更高 ( 孕约园援园缘或孕约园援园员 ) 表源摇悦陨运 阅悦鄄悦陨运和 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运细胞增殖倍数比较 ( 灶越缘, 珔曾依泽 ) 栽葬遭援源摇孕则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶糟燥皂责葬则蚤泽燥灶泽燥枣悦陨运, 阅悦鄄悦陨运葬灶凿 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运糟藻造造泽 ( 灶越缘, 珔曾依泽 ) 郧则燥怎责 孕则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶皂怎造贼蚤责造藻 ( 苑凿 ) 孕则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶皂怎造贼蚤责造藻 ( 员源凿 ) 孕则燥造蚤枣藻则葬贼蚤燥灶皂怎造贼蚤责造藻 ( 圆员凿 ) 悦陨运圆猿援园愿依猿援源源源缘援远苑依缘援员员员圆圆援猿缘依员园援苑苑 阅悦鄄悦陨运圆愿援员苑依猿援远缘远园援猿愿依远援苑源 员愿怨援员源依员愿援猿缘 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运 Δ 源员援猿猿依源援愿圆 Δ 愿苑援苑缘依愿援怨员 Δ 圆缘苑援圆远依猿园援园怨 摇摇摇摇摇 孕约园援园缘增泽悦陨运早则燥怎责 ; Δ 孕约园援园缘增泽阅悦鄄悦陨运早则燥怎责

6 员愿园 中国肿瘤生物治疗杂志, 圆园员远年源月, 圆猿 ( 圆 ) 圆援苑摇 α 鄄郧葬造悦藻则负载的阅悦对悦陨运细胞杀伤活性的影响 悦悦运鄄愿法检测结果 ( 表缘 ) 显示, 悦陨运细胞对 匀藻责郧圆细胞有明显的细胞毒作用, 其抑制率随着效靶比的增高而增高 ( 孕约园援园缘 ), 而阅悦与悦陨运细胞混合培养可显著增强悦陨运细胞的杀伤活性 ( 孕约园郾园缘 ) 在同一效靶比时,α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运细胞组对靶细胞的杀伤作用最强, 明显高于悦陨运 阅悦鄄悦陨运 细胞组 ( 孕约园援园缘 ) 图缘摇 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦对悦陨运细胞杀伤功能基因表达的影响 ( 珔曾依泽, 灶越怨 ) 云蚤早援缘摇耘枣枣藻糟贼燥枣 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦燥灶贼澡藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶泽燥枣糟赠贼燥贼燥曾蚤糟蚤贼赠早藻灶藻泽燥枣悦陨运糟藻造造泽 ( 珔曾依泽, 灶越怨 ) Δ 表缘摇 孕约园援园缘, 孕约园援园员增泽悦陨运早则燥怎责 ; 孕约园援园缘, ΔΔ 孕约园援园员增泽阅悦鄄悦陨运早则燥怎责 悦陨运 阅悦鄄悦陨运和 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运 细胞对匀藻责郧圆细胞的直接杀伤作用 ( 灶越缘, 珔曾依泽, 豫 ) 栽葬遭援缘摇 阅蚤则藻糟贼噪蚤造造蚤灶早藻枣枣藻糟贼燥枣悦陨运, 阅悦鄄悦陨运葬灶凿 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运糟藻造造泽葬早葬蚤灶泽贼匀藻责郧圆糟藻造造泽 ( 灶越缘, 珔曾依泽, 豫 ) 郧则燥怎责 耘枣枣藻糟贼燥则鄄贼葬则早藻贼则葬贼蚤燥 缘颐员员园颐员圆园颐员 悦陨运圆园援员愿依圆援缘员摇圆愿援缘愿依员援圆苑源猿援苑缘依圆援愿源 Δ 摇 阅悦鄄悦陨运 摇圆猿援怨远依员援愿圆 α 鄄郧葬造悦藻则鄄阅悦鄄悦陨运猿园援圆苑依源援员源 猿缘援远源依猿援源怨 Δ 源怨援圆猿依猿援愿远 Δ 摇 源远援员远依圆援苑圆 Δ 缘怨援员苑依源援猿缘 Δ 摇摇 孕约园援园缘增泽悦陨运早则燥怎责葬贼贼澡藻泽葬皂藻糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶 ; Δ 孕约园援园缘增泽 摇摇凿蚤枣枣藻则藻灶贼糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶葬贼贼澡藻泽葬皂藻早则燥怎责 猿摇讨摇论 阅悦鄄悦陨运细胞治疗已成为肿瘤生物治疗的一种 [ 苑常规方法 ] [ 愿鄄怨 ], 对多种肿瘤都有显著治疗作用 但在肿瘤微环境中, 阅悦数量有限 肿瘤细胞分泌抑制阅悦功能的细胞因子等原因, 都导致阅悦的抗原提 [ 员园呈能力有限 ] α 鄄郧葬造悦藻则和它的人工合成等价物 能够与小鼠和人类的粤孕悦上的悦阅造凿分子结合, 激活蚤晕运栽细胞, 产生大量的细胞因子参与免疫调 [ 远节 ] 因此, 本研究采用 α 鄄郧葬造悦藻则负载阅悦以提高其抗原提呈的能力, 结果显示 α 鄄郧葬造悦藻则负载可促进阅悦成熟, 其表面标志物悦阅愿园 悦阅愿猿 悦阅愿远 悦阅员员糟的阳性率均升高 趋化因子受体苑 ( 糟澡藻皂燥噪蚤灶藻则藻糟藻责贼燥则苑, 悦悦砸苑 ) 表达于成熟阅悦的表面, 最主要的作用是趋化作用, [ 员员并且在阅悦成熟和迁移过程中逐渐增多 ] 本研究发现,α 鄄郧葬造悦藻则负载可促进阅悦的悦悦砸鄄苑皂砸晕粤表达水平升高 除此之外, 激活的阅悦可分泌高水平的陨蕴鄄员园 陨蕴鄄员圆以及栽郧云鄄 β 等细胞因子, 进而对 [ 员圆鄄员猿悦陨运细胞的增殖和杀伤活性有促进作用 ], 这对肿瘤的临床治疗有重要意义 上述结果表明 α 鄄郧葬造鄄悦藻则负载可以全面活化阅悦, 无论是表面共刺激分子还是相关细胞因子的分泌水平均有所上调 同时, α 鄄郧葬造悦藻则负载的阅悦还可以促进悦陨运细胞增殖和成熟, 并提高悦陨运细胞对匀藻责郧圆细胞的杀伤活性, 可能是通过提高悦陨运细胞杀伤功能相关基因的表达水平发挥作用 悦陨运细胞发挥抗肿瘤作用主要是通过悦陨运表面配体蕴云粤和陨悦粤酝鄄员途径与肿瘤细胞结合, 通过分泌穿孔素和颗粒酶素月等直接杀伤肿瘤 [ 员源细胞 ] ; 另外, 悦陨运细胞可分泌大量的陨蕴鄄员圆 陨蕴鄄远 [ 员缘陨云晕鄄 γ 栽晕云鄄 α 等细胞因子, 提高细胞毒作用 ], 与本研究结果一致 免疫过继疗法已经成为继手术和放化疗之后抗肿瘤治疗的主要手段, 在临床实践中已经逐渐得到了广大医护人员认可, 但其治疗有效率尚待进一步提高 本研究发现 α 鄄郧葬造悦藻则可有效活化阅悦, 提高悦陨运细胞的增殖 因子分泌和杀瘤能力, 可为肿瘤的细胞免疫治疗提供一个重要的思路 本课题组将进一步研究其具体的激活机制及杀伤机制, 并通过临床试验验证该方法的安全性和有效性 [ 参考文献 ] [ 员 ] 摇允陨粤晕郧允栽, 宰哉悦孕, 蕴哉月云援悦赠贼燥噪蚤灶藻鄄蚤灶凿怎糟藻凿噪蚤造造藻则糟藻造造泽责则燥鄄皂燥贼藻葬灶贼蚤贼怎皂燥则蚤皂皂怎灶蚤贼赠 [ 允辕韵蕴 ] 援允栽则葬灶泽造酝藻凿, 圆园员猿, 员员 ( 员 ): 愿猿 [ 圆园员缘鄄员员鄄员缘 ] 援澡贼贼责 : 辕辕贼则葬灶泽造葬贼蚤燥灶葬造鄄皂藻凿蚤糟蚤灶藻援遭蚤燥皂藻凿糟藻灶贼则葬造援糟燥皂辕葬则贼蚤糟造藻泽辕员园援员员愿远辕员源苑怨鄄缘愿苑远鄄员员鄄援愿猿援阅韵陨 : 员园援员员愿远辕员源苑怨鄄缘愿苑远鄄员员鄄愿猿援 [ 圆 ] 摇酝耘杂陨粤晕韵郧, 栽韵阅韵砸韵灾陨悦酝, 郧粤酝酝粤陨栽韵晕陨蕴, 藻贼葬造援悦赠贼燥鄄噪蚤灶藻鄄蚤灶凿怎糟藻凿噪蚤造造藻则 ( 悦陨运 ) 糟藻造造泽葬泽枣藻葬泽蚤遭造藻葬灶凿藻枣枣藻糟贼蚤增藻葬凿燥责贼蚤增藻蚤皂皂怎灶燥贼澡藻则葬责赠枣燥则贼澡藻贼则藻葬贼皂藻灶贼燥枣泽燥造蚤凿贼怎皂燥则泽 [ 允 ] 援耘曾责藻则贼韵责蚤灶月蚤燥造栽澡藻则, 圆园员圆, 员圆 ( 远 ): 远苑猿鄄远愿源援阅韵陨 : 员园援员缘员苑辕员源苑员圆缘怨愿援圆园员圆援远苑缘猿圆猿援 [ 猿 ] 摇酝粤再, 在匀粤晕郧在, 栽粤晕郧蕴, 藻贼葬造援悦赠贼燥噪蚤灶藻鄄蚤灶凿怎糟藻凿噪蚤造造藻则糟藻造造泽蚤灶贼澡藻贼则藻葬贼皂藻灶贼燥枣责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡泽燥造蚤凿糟葬则糟蚤灶燥皂葬泽 : 葬泽赠泽贼藻皂葬贼蚤糟则藻鄄

7 刘红彦, 等援 α 鄄半乳糖神经酰胺负载阅悦促进悦陨运细胞对肝癌细胞的杀伤效应 员愿员 增蚤藻憎葬灶凿责燥燥造藻凿葬灶葬造赠泽蚤泽 [ 允 ] 援悦赠贼燥贼澡藻则葬责赠, 圆园员圆, 员源 ( 源 ): 源愿猿鄄源怨猿援阅韵陨 : 员园援员园员远辕躁援糟造蚤皂援圆园员园援员员援园员园援 胞的免疫效应 [ 允 ] 援中国生物制品学杂志, 圆园员员, 圆源 ( 员园 ): 员员远愿鄄员员苑园援 [ 源 ] 摇 杂糟澡灶藻蚤凿藻则泽云蕴, 杂糟澡藻责藻则砸允, 灾燥灶月造燥皂遭藻则早月酝耘, 藻贼葬造援悦造蚤灶蚤鄄糟葬造藻曾责藻则蚤藻灶糟藻憎蚤贼澡 α 鄄早葬造葬糟贼燥泽赠造糟藻则葬皂蚤凿藻 ( 运砸晕苑园园园 ) 蚤灶责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡葬凿增葬灶糟藻凿糟葬灶糟藻则葬灶凿糟澡则燥灶蚤糟澡藻责葬贼蚤贼蚤泽月辕悦蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 [ 允 ] 援悦造蚤灶陨皂皂怎灶燥造, 圆园员员, 员源园 ( 圆 ): 员猿园鄄员源员援阅韵陨 : 员园援员园员远辕躁援糟造蚤皂援圆园员园援员员援园员园援 [ 员园 ] 蕴陨砸酝, 宰粤晕郧悦蕴, 蕴陨哉蕴, 藻贼葬造援粤怎贼燥造燥早燥怎泽糟赠贼燥噪蚤灶藻鄄蚤灶凿怎糟藻凿噪蚤造造藻则糟藻造造蚤皂皂怎灶燥贼澡藻则葬责赠蚤灶造怎灶早糟葬灶糟藻则 : 葬责澡葬泽藻 Ⅱ 糟造蚤灶蚤糟葬造泽贼怎凿赠 [ 允 ] 援悦葬灶糟藻则陨皂皂怎灶燥造陨皂皂怎灶燥贼澡藻则, 圆园员圆, 远员 ( 员员 ): 圆员圆缘鄄圆员猿猿援阅韵陨 : 员园援员园园苑辕泽园园圆远圆鄄园员圆鄄员圆远园鄄圆援 [ 员员 ] 酝哉运粤耘杂, 韵运粤在粤运陨再, 栽杂哉阅粤匀, 藻贼葬造援阅藻贼藻糟贼蚤燥灶燥枣枣葬泽糟蚤灶 [ 缘 ] 摇 酝韵栽韵匀粤杂匀陨杂, 晕粤郧粤栽韵运, 运哉晕陨陨晕, 藻贼葬造援粤责澡葬泽藻 Ⅰ 鄄 Ⅱ 葬灶凿悦悦砸鄄苑责燥泽蚤贼蚤增藻皂葬贼怎则藻凿藻灶凿则蚤贼蚤糟糟藻造造泽蚤灶燥则葬造造蚤糟澡藻灶责造葬灶怎泽 泽贼怎凿赠葬造责澡葬鄄早葬造葬糟贼燥泽赠造糟藻则葬皂蚤凿藻责怎造泽藻凿陨蕴鄄圆辕郧酝鄄悦杂云糟怎造贼怎则藻凿责藻鄄 [ 允 ] 援允韵则葬造孕葬贼澡燥造酝藻凿, 圆园园怨, 猿愿 ( 源 ): 猿猿源鄄猿源圆援 阅韵陨 : 员园援 则蚤责澡藻则葬造遭造燥燥凿皂燥灶燥灶怎糟造藻葬则糟藻造造泽蚤灶责葬贼蚤藻灶贼泽憎蚤贼澡葬凿增葬灶糟藻凿葬灶凿则藻鄄 员员员员辕躁援员远园园鄄园苑员源援圆园园愿援园园苑源员援曾援 糟怎则则藻灶贼灶燥灶鄄泽皂葬造造糟藻造造造怎灶早糟葬灶糟藻则 [ 允 ] 援允陨皂皂怎灶燥造, 圆园园怨, 员愿圆 ( 源 ): 圆源怨圆鄄圆缘园员援阅韵陨 : 员园援源园源怨辕躁蚤皂皂怎灶燥造援园愿园园员圆远援 [ 员圆 ] 李云霞, 远洋, 王雪峰援杂韵悦杂员泽蚤砸晕粤和陨蕴鄄员圆基因共同修饰树突状细胞体外抗喉癌的免疫反应 [ 允 ] 援临床耳鼻咽喉头颈 [ 远 ] 摇 灾粤晕阅耘砸灾蕴陨耘栽匀允, 酝韵蕴蕴陨晕郧允宰, 灾韵晕月蕴韵酝月耘砸郧月酝 外科杂志, 圆园员圆, 圆远 ( 员怨 ): 愿怨园鄄愿怨远援 耘, 藻贼葬造援 栽澡藻蚤皂皂怎灶燥则藻早怎造葬贼燥则赠则燥造藻燥枣悦阅员凿鄄则藻泽贼则蚤糟贼藻凿灶葬贼怎则葬造 [ 员猿 ] 允陨晕再, 宰陨匀允, 悦匀韵陨酝匀, 藻贼葬造援砸藻早怎造葬贼蚤燥灶燥枣葬灶贼蚤鄄蚤灶枣造葬皂皂葬贼燥则赠 噪蚤造造藻则栽糟藻造造泽蚤灶凿蚤泽藻葬泽藻 [ 允 ] 援悦造蚤灶陨皂皂怎灶燥造, 圆园园源, 员员圆 ( 员 ): 愿鄄 糟赠贼燥噪蚤灶藻泽陨蕴鄄员园葬灶凿栽郧云鄄 β 蚤灶皂燥怎泽藻凿藻灶凿则蚤贼蚤糟糟藻造造泽贼澡则燥怎早澡贼则藻葬贼鄄 圆猿援阅韵陨 : 员园援员园员远辕躁援糟造蚤皂援圆园园源援园猿援园园猿援 皂藻灶贼憎蚤贼澡悦造燥灶燥则糟澡蚤泽泽蚤灶藻灶泽蚤泽糟则怎凿藻葬灶贼蚤早藻灶 [ 允辕韵蕴 ] 援 耘曾责酝燥造 [ 苑 ] 摇 杂匀粤晕悦悦, 杂匀陨蕴砸, 阅陨晕郧酝匝, 藻贼葬造援悦赠贼燥噪蚤灶藻鄄蚤灶凿怎糟藻凿噪蚤造造藻则 酝藻凿, 圆园员源, 源远 ( 员 ): 藻苑源 [ 圆园员缘鄄园苑鄄员缘 ] 援澡贼贼责 : 辕辕憎憎憎援灶葬贼怎则藻援 糟藻造造泽糟燥鄄糟怎造贼怎则藻凿憎蚤贼澡凿藻灶凿则蚤贼蚤糟糟藻造造泽造燥葬凿藻凿憎蚤贼澡贼澡藻责则燥贼藻蚤灶造赠泽葬贼藻 糟燥皂辕藻皂皂辕躁燥怎则灶葬造辕增源远辕灶员辕枣怎造造辕藻皂皂圆园员猿员源源葬援澡贼皂造援 阅韵陨 : 员园援 责则燥凿怎糟藻凿遭赠则葬凿蚤燥枣则藻择怎藻灶糟赠葬遭造葬贼蚤燥灶蚤灶凿怎糟藻葬泽责藻糟蚤枣蚤糟葬灶贼蚤贼怎皂燥则则藻鄄 员园猿愿辕藻皂皂援圆园员猿援员源源援 泽责燥灶泽藻 [ 允 ] 援韵灶糟燥造蕴藻贼贼, 圆园员缘, 怨 ( 源 ): 员缘源怨鄄员缘缘远援阅韵陨 : 员园援猿愿怨圆辕燥造援圆园员缘援圆怨苑苑援 [ 员源 ] 杨葳, 徐铭宝援悦陨运细胞治疗恶性肿瘤研究进展 [ 允 ] 援中国实用医药, 圆园园怨, 源 ( 圆怨 ): 圆员苑鄄圆员怨援阅韵陨 : 员园援猿怨远怨辕躁援蚤泽泽灶援员远苑猿鄄 [ 愿 ] 摇 宰粤晕郧再云, 运哉晕阅粤孕耘, 蕴陨晕允宰, 藻贼葬造援悦赠贼燥噪蚤灶藻鄄蚤灶凿怎糟藻凿噪蚤造鄄造藻则糟藻造造泽糟燥鄄糟怎造贼怎则藻凿憎蚤贼澡糟燥皂责造藻贼藻贼怎皂燥则葬灶贼蚤早藻灶鄄造燥葬凿藻凿凿藻灶凿则蚤贼蚤糟糟藻造造泽, 澡葬增藻藻灶澡葬灶糟藻凿泽藻造藻糟贼蚤增藻糟赠贼燥贼燥曾蚤糟蚤贼赠燥灶糟葬则遭燥责造葬贼蚤灶鄄则藻泽蚤泽贼葬灶贼则藻贼蚤灶燥遭造葬泽贼燥皂葬糟藻造造泽 [ 允 ] 援韵灶糟燥造砸藻责, 圆园员猿, 圆怨 ( 缘 ): 员愿源员鄄员愿缘园援 苑缘缘缘援圆园园怨援圆怨援员苑愿援 [ 员缘 ] 刘军权, 朱云, 陈复兴, 等援不同刺激因子对人悦陨运细胞功能影响 [ 允 ] 援中国实验血液学杂志, 圆园员猿, 圆员 ( 源 ): 员园圆员鄄员园圆远援 阅韵陨 : 员园援猿愿怨圆辕燥造援圆园员缘援圆怨苑苑援 [ 收稿日期 ] 摇圆园员缘原员员原圆园 [ 修回日期 ] 摇圆园员远原园圆原圆源 [ 怨 ] 摇 艾丽梅, 宋盈盈, 苏荣英援阅悦鄄悦陨运细胞体外抗白血病运缘远圆细 [ 本文编辑 ] 摇 黄静怡 檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿 读者 作者 编者 中国肿瘤生物治疗杂志 征稿和征订启事 摇摇 中国肿瘤生物治疗杂志 是由中国免疫学会和中国抗癌协会联合主办的高级学术刊物, 为中国精品科技期刊 砸悦悦杂耘中国权威学术期刊 中国中文核心期刊, 中国科学引文数据库核心源期刊 中国科技核心期刊 中国人民解放军优秀医学期刊, 为同行专家评审期刊 ; 获圆园员缘原圆园员苑年度中国科协精品科技期刊工程项目资助 本刊主要报道肿瘤生物治疗领域基础研究和临床应用的新成果 新理论 新技术和新经验, 常设有述评 院士论坛 专家论坛 研究快报 青年学者论坛 基础研究 临床研究 转化医学 技术方法 短篇论著 学术争鸣 文献综述 个案报告等栏目, 以从事肿瘤防治的中高级临床和科研工作者 医药院校师生及相关学科科技人员为读者对象 双月刊, 每双月底圆园日出版, 国内外公开发行 本刊主编为中国医学科学院院长 中国免疫学会理事长曹雪涛院士, 编委会由包括员缘名院士和怨名外籍专家的众多名家大师组成 本刊已被美国 化学文摘 ( 悦粤 ) 俄罗斯 文摘杂志 ( 粤允 ) 荷兰 医学文摘 ( 耘酝遭葬泽藻 ) 等员园个国际著名检索系统收录 本刊在国内肿瘤学领域的学术地位和影响力名列前茅, 在国际学术界的显示度日益广泛和增强 本刊使用网络远程投稿 审稿系统和编校管理系统进行编辑出版工作, 工作效率高, 编校质量好, 论文发表周期短 另设 快速发表通道, 将有较高创新性的论文以圆耀耀耀耀猿个月的速度快速发表 热忱欢迎广大肿瘤防治工作者通过本刊网站投稿系统 电子信箱踊跃投稿 中国肿瘤生物治疗杂志 每册定价员缘援园园元, 全年定价怨园援园园元 邮发代号 : 源原缘苑远, 请通过当地邮局订阅 若错过, 可从本刊编辑部补订, 请将怨园援园园元 ( 优惠免邮资 ) 寄编辑部, 并注明详细通讯地址及邮政编码, 编辑部负责将每期杂志准时寄给您 联系地址 : 上海市翔殷路愿园园号 ; 第二军医大学免疫楼 中国肿瘤生物治疗杂志 编辑部 ( 邮编圆园园源猿猿 ) 联系人 : 韩丹摇黄静怡联系电话 : 园圆员原缘缘远圆园远园缘伊圆圆, 园圆员原愿员愿苑员园园圆伊圆圆传摇摇真 : 园圆员原愿员愿苑员园园苑 ; 网摇摇址 : 憎憎憎援遭蚤燥贼澡藻则援燥则早 ; 电子邮箱 : 糟躁糟遭岳遭蚤燥贼澡藻则援燥则早