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1 尸 n 吕 S 血 d 虹 dsofchjna212,vo 13Nα6 Dn ˉ 刊药品标准 22 年第 3 卷第 6 期 48 ;; 丫夕 _ 2mKˉ ; } } 川ˉ 5ˉ { 广 =~ 5 { } } {.5 52 ` 样! } () 一 } ~-_ 窟 --~ˉ--ˉ -- ~ 一 -~X` (( " ˉ25ˉ m 图 13 原标准甘草酸波峰与样品中相应波峰的光谱扫描图 2 2=53 图 14 在不同流动桓 = 昔三宝兰乏著 = 搓图提高标准的甘草酸光谱扫描图比较得知 甘草酸在甲醇 ˉ()2% 乙酸铰溶液 ˉ 冰醋酸 (55:45:5) 的缓冲参考文献盐流动相中 其光谱扫描图显示在 29nm 和 252 [1 中国药典 S 二.21O 三轰 ˉ_ 三 ˉ 二 U1: 鹃 3. nm 处, 呈现二个最大吸收波长 ; 而在乙睛 ˉ 甲醇 ˉ [2 国家药品标准 YBZ116 二 聘 ˉ 三 ˉˉ O% 磷酸 (3:8:45) 的流动相中 只有 251nm 处 [3 韩桂茹, 赵韶华. 赵 三 ˉ 二.= 全三薄层色谱鉴别研究的一个最大吸收波长 见图 14 以此提示 在中药 [J 中成药,2O9 3I1:5ˉ 昌 ˉ 成分的测定中 可以通过改变流动相的组合 改变其 HPLC 法测定辛伐他汀滴丸的含量和有关物质郑全哄 { 俞雄杰 2 郑国钢! 李会林 ( 浙江省食品药品检验所 杭州 314;2 中 喜大 = 学更 219) 摘要目的 : 建立辛伐他汀滴九含量测定及有关物质的检查方法 方法 : 采用反相高效浅桓岂著崖 岂碧差为 5 PELCOC 8 柱 (46mm 33mm 3 队 m) 以乙睛 1% 磷酸 (5:5) 为流动相 A.1% 磷酸乙睛溶浅为演煮桓 B. 鬃麦麦灵, 流量 3.mL ninˉ, 检测波长 238nm 结果: 辛伐他汀与辛伐他汀酸 洛伐他汀及强制玻坏产生的丢 产结羞分三灵好, 辛伐他汀浓度在 2O94~885 队 g mlˉ 范围内, 与峰面积呈良好的线性关系 回归方程 A=9414C 丁 32 宁.2. 厂 =1ˉO(n=); 平均回收率为 9Q8 歼,RSD 为 O%( 门 =9) 结论: 该法专属性强, 准确 灵敏, 可用于辛伐他汀壹丸莹含量混定幸有关物质检查 关键词 : 辛伐他汀滴九 ; 含量测定 ; 有关物质 ; 高效液相色谱法中图分类号 :R9212 文献标识码 :A 文章编号 : (212)_6- 斗 18-5 ZhengJinqi `YuXiongjie2 ZhengGuogang LiHuiin(Z 阿 m 厕 g 加 尼厂厂 α 厕 d 助唱 Co I,Hα o 幽 3O4; 25 OOo 尸 hα 而 αcv C 加 mphα 厂 mαceut cα Unj e 砸 ), vjng29) ˉAbStraCtOhjeCtiveToeStabiShamethodtodetermmethecontentandre1atedSubStancesofSimvastatinPiIS.MethOdS:HPLC WaSuSedandchromatographyconditionWaSdeterminedˉThesystemWasca iedoutusmgs PELCOC!8co1umn(46mm 33mm, j 队 m)andacetonit e1%phosphoricacidso1ution(5:5)asthemobi1ephase 入,O1%phoSpho cacidinacetonitri1easthe mmobiephaseb, 肛 adienteution TheⅡoWrateWaS3.mL mjnˉandthedetect1onwave1engthwas238nm.r 蹈 u 帕 :Theresouˉ tjo betweenthepeakoflosvatatinandsimvastatmwas 止 OVe4 andthatbetweenthepeakoflosvatatmandsimvastatinacidw 巫 aˉ bove15andthemdmpeakcou1dbesepmatedioma1peaksofdegradationproducts 1emearrangeOfthemethOdWaS2 94ˉ HPLCDeterminatiOnOfCOntentandtheReatedSubStancesOfSimvastatmPi1S 18 O血高不舌方经C汀有有了关稳一子汀呈5n试2; 郑金哄, 主管药师 ; 研究方向 : 药物质量分析 Te: ;Eˉmai:jingqizheng@hotmai com 1作者简介 ( 2 三=兰准2 ( 溶 2. ˉ 实现排除干扰成分的目的 能条长检测波长

2 Oˉ6 且同 =S=daJdsQ[Chna212,Voˉ13Noˉ6 中国药品标蛀 22 年纳 3 卷蛾 6 期斗 9 二巫 ˉ5{ 唱 mlˉ andtheregress1onequat1onwasa=9414.c+32ˉ2 厂 =1(n=)ˉTheaVeragereCover`,Wa 葛 99.8%({SI) =2ˉ=%`n=9)andtheimjtofdetectjonWaS6O8ng.mLˉ;. e 三 ampe 三 o1utjon``ˉasstabe``ithjn24hours.concusion.the = 鱼 冈!i3S)eCihC,aCCurate,SenSIt VeandCanbeuSedhrthedetermmatiOnOfCO te tandreatedsubst(mcesofsimvastati P S. 区丘下 words:simvastatjnpiⅡs;assay;reatedsubstances;hplc 究 王上 < 辛伐他汀为轻甲基戊二酷辅酶 A(HMCˉ {{ 二 o 人 ) 还原酶抑制剂 抑制体内胆固醇的合成 使二清胆固醇下降 [ 用于高胆固醇血症 ` 混合型 喜指 Ⅲ 症 ` 冠心病和脑中风的防治 辛伐他汀是 下稳定物质 易被氧化和水解 在生产和贮藏过 中可能产生降解物 因而在辛伐他汀滴丸的处 方中加人抗氧化剂以增加辛伐他汀的稳定 性 经查阅 各国药典 (ChP21 年版 `BP21 年版 5P34 版 EP. 版和 JP16 版 ) 均未收载辛伐他 汀滴丸 现行标准 [WS!ˉ(Xˉ92)ˉ26Z 未进行 有关物质检查 参考已有的辛伐他汀及其制剂有关物质检查方法 [3ˉ 经方法学研究 我们建立 了 HPLC 法梯度洗脱测定辛伐他汀滴丸含量和有 关物质的方法 1 仪器与试药 岛津高效液相色谱仪 (LCˉ2AT 泵 SPDˉM2A 检测器 LCsoution 色谱工作站 );MetterAEˉ24 电 子天平 ; 洛伐他汀 ( 批号 16ˉ23) 和辛伐他 汀 ( 批号 161ˉ252) 对照品由中国药品生物制 品检定所提供 ; 辛伐他汀滴丸 ( 生产企业提供 ; 规格 5mg 批号 ; 规格 mg 批号 1 141); 乙睛为色谱级 水为重蒸水 其余 试剂均为分析纯 2 方法与结果 2 1 溶液的制备 供试品溶液的制备取供试品细粉适量 ( 约相当于辛伐他汀 1mg) 精密称定 置 1mL 量瓶中 加溶剂 [ 乙腊 ˉ.1mo Lˉ 磷酸二氢钾溶 液 ( 用磷酸调节 ph 值至 4.)(6:4) 溶解并稀释至刻度 摇匀 滤过, 取续滤液 即得 对照品溶液的制备取辛伐他汀对照品约 mg 精密称定, 置 ml 量瓶中 加 211 中溶剂溶解并稀释至刻度 摇匀, 即得 2.2 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱为 SUPELCOC8 柱 (46mm 33 mm 3 m); 以乙睛 1% 磷酸 (5:5) 为流动相 A O% 磷酸的乙腊溶液为流动相 B 按表 条件进行梯度洗脱 ; 流量 3.mL.minˉ!; 检测波 长 238nm 取辛伐他汀对照品约 2mg 置 5mL 量瓶中 加.2mo.L_ 氢氧化钠溶液 ˉ 乙睛 (:) 的 混合溶液 5mL 振摇使溶解 放置 5min 加稀盐 酸中和后用 2.11 中溶剂稀释至刻度 ( 得到含 开环降解物辛伐他汀酸溶液 ) 取 5mL 和洛伐他 汀与辛伐他汀对照品各约 2mg 置同 ml 量瓶中, 加上述溶剂溶解并稀释至刻度 摇匀. 作 为系统适用 性溶液 取 队 L 注人液相色谱仪. 记录色谱图 辛伐他汀峰与洛伐他汀峰的分离度 应不小于 4 辛伐他汀酸峰与洛伐他汀峰的分离度应符合规定 理论板数按辛伐他汀峰计算不 低于 2^ 表 1 梯度洗脱条件 时同 皿 n 流动相 A% 流动相 B% 1I " 距4.5 工4.6 玉5 "8 "5 I 专属惶试羞 空白溶液和辅料试验取 2L 中溶剂进样 1 L 得空白溶液色谱图 见图 ; 取依处方比例混合的辅料适量 依法制备成辅料溶液 进样 1 件 L 见图 2 结果可知 空白溶液无干扰 辅料出峰时间.5min 在相对主峰保留时间.3 倍内 系统适用 性溶液色谱图见图 3 辛 伐他汀酸 ` 洛伐他汀和辛伐他汀的出峰时间分别为 Lmjn L3mn 和 19mn 辛伐他汀峰与洛伐他汀峰的分离度大于 4 辛伐他汀酸峰与洛伐他汀峰之间的分离度大于 破坏性试验取批号为 1 的供试品细粉 5 份 ( 每份约含辛伐他汀 4mg) 分别置 5mL 量瓶中 加 2.1I 中溶剂 1mL 振摇使辛伐他汀溶解 分别加人 Lmo.L! 盐酸溶液 5.mL 放置 24h 加 1mo.L! 氢氧化钠溶液 5mL 中和后 加上述溶剂稀释至刻度 摇匀 滤过 取续滤液作"

3 - 秆 午个 勺 1mL 量瓶中 加 211 中溶剂溶解并稀释至刻 尸 巾囚药品标准 22 年第 3 卷第 6 蛆 42 飞 () 司 ) 气 - = ( ( 1 斗 3 rugsta 门 dardsofchin 出 22,Vo1 巳 No.6 一 2-5= ) 一 2 司弓二 () 二 ~ 一 -ˉˉˉ [)55 f:n1i 图 2 蔫皋 (mg) 容 : 妄的 HPLC 色谱图 人 ˉ~ ˉ_- ˉ _- 一 _ -ˉ- ˉ -- ˉˉ 丁一 () 25 5ˉO5 f!:ii 图 1 空白溶液 ( 稀泽液 ) 约 HPLC 色谱图 3 25`ˉ. 2ˉ 5 { 一 八 [ ~ˉ- 一 =ˉ-_ - - 5= 5 ` 一 () 一 A `} 二坐云 === 斋二 = 亏 = [ T ^O 5, 5 二 5 >> 户 尸 5 _-ˉ -~ C 焉压 司 = 表 三玉化可宾= ~d 七 一 匡 匡 日 p 惶 () 一 ˉˉ..ˉ.~ 一 ˉ 2555 ) 图 3 系统适用性溶液的 HPLC 色谱图 L 辛伐他汀腋 ;2 洛伐他汀 ;3. 辛伐他汀 为酸破坏供试品溶液 ; 加人 1mo.L 氢氧化钠溶液 5OmL 放置 24h 加 1mo Lˉ 盐酸溶液 5.mL 中和后 加上述溶剂稀释至刻度 摇匀 滤过 取续滤液作为碱破坏供试品溶液 ; 加人 3% 过氧化氢溶液 5mL 放置 24h 加上述溶剂稀释至刻度 ` 摇匀 滤过 取续滤液作为氧化破坏供试品溶液 ; 在 (45±5)LX 光照强度下放置 24h 加上述溶剂稀释至刻度, 摇匀 滤过 取续滤液作为光照破坏供试品溶液 ; 在 6 水浴中加热 8h 放冷 加上述溶剂稀释至刻度 摇匀 滤过 取续滤液作为热破坏供试品溶液 依法测定 结果见图 标准曲线和检测限取辛伐他汀对照品约 mg 精密称定 置 图 4 玻坏性试验 HPLC 色谱图 A 强酸破坏 ;B 强碱破坏 ;C 氧氧化破坏 ;D 热破坏 ;E 强光破坏 度 摇匀 作为标准贮备液 ; 精密量取 L2 15 和 18mL 分别置 1mL 量瓶中 用上述溶剂稀释至刻度 摇匀 取 1 队 L 注人液相色谱仪, 记录色谱图 以浓度 C( g.mlˉ ) 对峰面积 A 作标准曲线 线 性回归方程为 A=9414C+ 322( 厂 =1 n 二 ) 由此可见辛伐他汀浓度在 2O94~1885 队 g.ml 范围内与峰面积呈良好的线性关系. 把辛伐他汀对照品溶液逐步稀释 检测限测定浓度为 6.8ng.mLˉ 信噪比为 回收率试验取处方量辅料 另取辛伐他汀对照品适量 按 2.1 项下分别制备成高 中 低 3 种不同浓度的溶液 (12% 1% 8%) 各 3 份 分别取上述溶液各 L 注人液相色谱仪 以外标法测定并计算回收

4 O 6 Dm 巨 SandmdSOfChina22.VO13NO.6 中国药品标准 22 年绷 3 卷绵 6 期 42 ` 率 其平均回收率为 99.8% RSD 为 O% 2.6 精密度试验取批号为 111 的供试品 于同 日内及不同日内依法分别连续测定含量 6 次 得到日内和日间精密度 结果辛伐他汀的含量为 984% 和 982% RSD 为.5% 和 O2% 表明本方法精密度良好 = 2. 稳定性试验取批号为 11 的供试品溶液 分别在 和 24h 进样, 测定有关物质 结果见表 2 可见供试品溶液在 24h 内基本稳定 表 2 稳定性试验结果 时间 h 最大单杂 % 总杂质 % ˉ 有关物质检查方法取供试品适量 用 2.11 中溶剂溶解并稀释制成每 ml 中约含.8mg 的溶液 摇匀 滤过 取续滤液作为供试品溶液 (3h 内测定 ); 精密量取适量, 用上述溶剂稀释制成每 1mL 中含 8 队 g 的溶液 作为对照溶液 精密量取对照溶液 1 L 注人液相色谱仪 调节检测灵敏度 使主成分色谱峰的峰高约为满量程的 2% 再精密量取供试品溶液和对照溶液各 1} L, 分别注人液相色谱仪 记录色谱图 供试品溶液的色谱图中如有杂质峰 扣除相对主峰保留时间 O3 倍内的辅料峰 单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积 (1%) 各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的 3 倍 (3.%) 供试品溶液中任何小于对照溶液主峰面积 O5 倍的峰可忽略不计 2 9 样品含量测定取辛伐他汀滴丸, 按 21, 及 28 项下制备供试品溶液 测定含量和有关物质 结果见表 3 表 3 辛伐他汀滴九含量及有关物质测定结果 有关物质 批号含量 % Z 最大单杂 % 38 ˉ 总杂质 % 讨论 3 1 测定有关物质的必要性 辛伐他汀是不稳定物质 在生产和贮藏过程中可能产生降解产物 而现行标准中未进行有关物质检查 本实验对 4 批样品进行了有关物质检查 结果 : 单个杂质为 O36%~O4% 总杂质为 O4%~L6%. 可见 有必要对其有关物质进行控制 = 3.2 乞谱条件约选择辛伐他汀滴丸现行标准中采用 HPLC 法等度洗脱测定含量 而未进行有关物质检查 = 经查阅各国药典 辛伐他汀及其制剂的有关物质检查均采用 HPLC 法梯度洗脱进行测定 同时参考 中国药典 21 年版二部辛伐他汀片有关物质检查方法, 建立了 HPLC 法梯度洗脱测定辛伐他汀滴丸有关物质的方法 辛伐他汀的合成原料为洛伐他汀 在放置过程中产生的主要杂质为辛伐他汀酸 故增加系统适用性试验 使辛伐他汀酸 ` 洛伐他汀与辛伐他汀的分离度符合规定 辛伐他汀在乙睛 `Omo.L 氢氧化钠乙睛溶液及 O1mo.L_ 盐酸乙睛溶液中的最大吸收波长 致 均为 238nm 8. 参考 中国药典 21 年版二部中辛伐他汀及其制剂均选择在 238nm 处测定 同时经强制破坏试验 结果显示在 238nm 处能较好地检出所有降解产物 因此选择 238nm 波长作为检测波长 3 3 辅料干扰的扣除厂家在辛伐他汀滴丸处方中加人抗氧化剂以增加稳定性 抗氧化剂的保留时间在相对主峰保留时间 O3 倍内 ; 同时对辛伐他汀原料亦进行了降解试验 结果在相对主峰保留时间 O3 倍内基本无降解杂质峰 因而拟在有关物质测定时 扣除相对主峰 保留时间.3 倍内的辅料峰后 测定辛伐他汀滴丸的最大单个杂质和总杂质 3.4 有关物质限度由两个规格 4 批样品的有关物质测定结果 知 单个杂质均小于 5% 总杂质均小于 16% 考虑到辛伐他汀是不稳定物质 对酸 ` 碱 热和氧化均不稳定 市售辛伐他汀滴丸的有效期为 2 年 考虑产品在有效期内的降解空间 建议限度订为单个杂质不得过 1% 总杂质不得过 3O% 3.5 溶液稳定性考察在室温不高于 2 的实验条件下 本实验有关物质供试品溶液在 24h 内基本稳定 本课题组之前在进行辛伐他汀及其片剂 ` 胶囊剂和分散片的有关物质溶液稳定性考察时发现 供试品溶液在放置 3h 内基本稳定, 随着放置时间的延长 有关物质略

5 n 皿厂 可 潍 b 品标准 22 年第 3 卷第 6 期 422 有增加 实验结果差异的原因在于本次实验时间在春天 实验室温度不高于 2 ; 之前实验时间在夏天 实验室温度基本在 25 以上 可见辛伐他汀的溶液稳定性与实验温度有关 考虑到方法的通用性及与辛伐他汀及其片剂 胶囊剂和分散片标准的 致性 仍在标准中注明供试品溶液在配制 3h 内 测定 3.6 为提高含量测定的准确度 同时使方法统 以便干操作 含量测定 色谱条件修改为同有关物质检查方法 _ 致 结果方法的线性 准确度和精密度均 良好 IugStandmdSOfChina22,Vo.13NO.6 参考文献 1PoskerGL,MeTavishD,Simvastatin.Areappraisa1ofitspharˉ macoogyandtherapeutice 伍 cacyinhyperchoesteroaemia[j DmgS, ˉ363 [2 国家药品标准. 新药转正标准 [S. 第 2 册 149 [3 中国药典二 S 二.21 年版. 二部.21:368ˉ3. [4 欧洲药典目 S 二 ˉ. 版 ˉ.:296ˉ29 [5 美国药典二 S 二 ˉ34 版.34: O :6 二英国药典三 5 三.211 年版 211:32 陷 ˉ325. _ˉ 日本药局方 =S 二. 第 6 改正版.6:35ˉ36. ˉ8ˉ 刘春河. 刘河 陈兰福, 等 辛伐他汀的波谱学数据和结构确证 ˉJ 己 ˉ 分析忆学 25.33():985ˉ988 D < 卫 旦 HPLC 法测定金养麦胶鬃中原儿茶酸的含量 赵晓霞 息 高辉 3 张清波 2 毕开顺!(1 沈阳药科大学 沈阳 116;2 黑龙江省食品药品检验检测所 哈尔滨 15O;a 黑龙江省 澳利达药业有限公司, 哈尔滨 51) 摘要目的 : 建立 HPLC 测定金养麦胶裳中原儿茶酸含量的方法 方法 : 未用反相高效液相色谱法 C 8 柱 流动相为甲醇 ˉ O3% 冰醋酸溶液梯度洗脱, 检测波长为 255nm, 流量 1.mL.mjnˉ 柱温 3 结果 : 原儿茶酸浓度在.1658~O3316 队 g 范围内线性关系良好 ( 厂 =.9999) 测定平均回收率为 95%(n=6),RSD 为.1% 结论 : 所建方法准确 快速, 可作为全养麦胶丈中原儿茶酸的含量测定方法 关键词 : 全养麦胶裳 ; 反相高效液相色谱 ; 原儿茶酸 ; 含量测定中图分类号 :R9212 文献标识码 ;A 文章编号 :19 一 3656(22)-6 一 422_3 H P L C D e t e r n O f t h e C O n t e P 帕n r O t O c a t e C n u a O m a S u e S AbStraCtOhjeCtiVe:ToestabiShanHPLCmethod 允 rdete ninationofprotocatechuicacidmjmqjaomaicapsu1es.method:the HPLCmetbOdWaSCamedOnC8COumnuSmgmethanOO.3%g1aCia1aCetiCaCidaSthemObiephaSetOgradienteutiOn andthedetecˉ t OnWaVeen 部 hwas255 m,theⅡowratewas1.ml mmˉandthetemperatureofcoumnwas3qc R 田 ut:inthehplcmeth- d theca1jbrationcurveforprotocatechuicacjdwasinearintherangeof 队 g(r=o9999).theaveragerecovery forproto 伯 atechuicacidwas9.5%,rsdwas1.1%( 网 =6).COncuSiOn:Themethodjsconven1ent,prec1Seandreiabehrdete n1ˉ jngthecontentofprotocatechuicacidinjinqiaommcapsues KeyWOrdSJmqiaOmaiCapSueS;RPˉHPLC;prOtOCateChuiCaCid;deter unat On O c A c d m J o二n C 旦 旦O 侦a ZhaoXiaoxia `2 GaoHui3 ZhangQingbo2 BiKaishun (1S 加厕 yα 厕 gphα c α γ,s 肛厕 yα 厕 g1o6;2 陋 o 厕 Ⅲm 厕 g 几 Ⅷt! teb 厂 Foodα 砸 D 皿 gcont 厂 o ;3. 版 jo 咽 m 吧 P 厂 mjnceao 迹 Medjc 硒 Coˉ 血 d,hα 厂 bm15) a D旦金养麦胶囊是由金养麦经过提取加工而成 具有清热解毒 排脓怯痕 怯痰止咳平喘之功效 用于急性肺脓疡 急 { 谩型气管炎 喘息型 慢 性气管炎 支气管哮喘及细菌 生痢疾 目前市场上有两家企业生 产该品种 执行标准不统 原儿茶酸为金养麦中起抗菌作用的酚酸类物质的指标 性成分 [ 为此本文建立了原儿茶酸含量测定方法 所建方法简便 重现性及分离效果好 针对两家样品均适用 可以作 作者简介 : 赵晓霞, 主管药师 ; 研究方向 : 药物分析和药品检验 Te: ;Eˉmai:916291@qqcom

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