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5 王军淋 等 超高效液相色谱 大体积流通池荧光法检测奶及奶制品中的黄曲霉毒素 M 1 第2期 195 左 1 为国标法 经典提取法 提取 其余为乙腈法提取 从左到右依次为 m 牛奶 V 乙腈 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 T he lef t one w as ex t racted by national standard method classical ex traction met hod t he ot hers w ere ex t racted by different ratios of milk to acetonit rile Fro m lef t to rig ht the ratios of milk to acetonitrile w ere 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 respectively 图 3 乙腈提取法与国标法离心后的效果比较 Fig 3 表2 T able 2 Efficiency comparison of acetonit rile ex traction and national standard method af ter centrif ugation 乙腈提取法与国标法检测灵敏度及阳性样品检测结果比较 Comparison of the sensitivity and determination result of positive samples ex tracted by acetonit rile and national standard methods 提取法 Ex t raction methods 1 4 6 w 阳性样品 Positive sample content μ g kg 乙腈提取法 Acetonitrile ex traction met hod 1 04 ± 0 02 1 2 5 1 1 1 01 ± 0 01 0 81 ± 0 02 国标法 National standard met hod 1 0 0 54 ± 0 02 m 牛奶 V 乙腈 1 4 6 1 2 5 1 1 1 0 2畅 4 Ratios of milk to acetonit rile in mass to volume are 1 4 6 1 2 5 1 1 1 0 respectively 线性关系 以 0 1 0 2 0 5 0 8 1 0 1 5 和 2 0 ng ml 黄曲 霉毒素 M1 为标准 在给定条件下进行 UPLC 分析 以 峰面积为 Y 轴 浓度为 X 轴作校准曲线 黄曲霉毒素 M1 检测方法的线性回归方程为 Y 6 20 10 X 2 03 5 10 线性范围为 0 1 2 0 ng ml R 0 999 6 2畅 5 加标回收率及精密度 向空白牛奶样品中添加不同质量分数的黄曲霉 毒素 M 1 每个添加量做 3 个平行 黄曲霉毒素 M 1 4 2 表3 T able 3 的平均回收率在 81 95 94 20 之间 精密度 即相对标准偏差 为 4 61 7 98 表 3 取阳 性样品做日内精密度 n 5 及日间精密度 n 5 实验表 明 日 内 精 密 度 为 3 44 日 间 精 密 度 为 4 50 2畅 6 实际样品测定 用本文所建立的方法对我国某地区 某个时间 段的 9 份牛奶样品进行检测表明 黄曲霉毒素 M 1 的检出率为 100 表 4 超标率为 55 56 牛奶样品黄曲霉毒素 M1 的加标回收率和精密度 Recovery rate and precision of aflatoxin M 1 in milk samples 添加量 测定值 相对标准偏差 平均回收率 Spiked level μ g kg Detected value μ g kg Relative standard deviation M ean recovery rate 0 5 0 41 ± 0 03 6 64 82 64 0 2 n 3 1 0 表4 T able 4 0 19 ± 0 02 7 98 0 82 ± 0 04 4 61 94 20 81 95 实际样品中黄曲霉毒素 M1 的检测结果 Determination results of aflatoxin M 1 in real samples 样品号 Sample number 1 2 3 4 5 6 7 8 9 w 黄曲霉毒素 M 1 Aflatoxin M 1 content μ g kg 1 26 0 12 0 79 0 12 0 67 0 58 0 48 0 03 0 62 3 结论 本研究用乙腈对样品中的黄曲霉毒素 M 1 进行 提取 可以有效地沉淀样品中的蛋白质 从而得到澄 清的提取液 在过免疫亲和柱净化时 只需利用溶液 自身重力作用即能过柱 解决了国标法中直接过柱 易堵塞的问题 提高了提取效率 缩短了前处理时 间 对超高效液相色谱系统分离条件的优化 大大缩 短了分析时间 减少了有毒溶剂使用量 同时 采用

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