卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 卡培他滨片 CTD 格式申报药学研究主要信息汇总表 3.2. P.1 剂型及产品组成 (1) 我公司研制开发的卡培他滨片, 剂型为片剂, 规格 :0.5g, 处方中的辅 料为乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 羟丙甲纤维素 硬脂酸镁 二氧 化硅 胃溶

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1 经注册申请人授权, 恩替卡韦与卡培他滨片 CTD 资料仅限于 2013 年药物研发与评价研讨班使用, 不得挪作他用 为便于会议使用, 已对研究资料及相关数据进行了修改, 且研讨班的评述意见不代表对申请人申报该品种的真实审评意见

2 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 卡培他滨片 CTD 格式申报药学研究主要信息汇总表 3.2. P.1 剂型及产品组成 (1) 我公司研制开发的卡培他滨片, 剂型为片剂, 规格 :0.5g, 处方中的辅 料为乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 羟丙甲纤维素 硬脂酸镁 二氧 化硅 胃溶型薄膜包衣预混剂 卡培他滨片单位剂量的处方组成如下 : 成分用量过量加入作用执行标准 片芯 mg % 卡培他滨 无主药企业标准 乳糖 无稀释剂中国药典 2010 年版 微晶纤维素 无稀释剂 JX***** 羟丙甲纤维素 (5cps) 约 无粘合剂 JX 中国药典 2010 年版 交联羧甲基纤维素钠 无 崩解剂 JX 二氧化硅 无 润滑剂 中国药典 2010 年版 硬脂酸镁 无 润滑剂 中国药典 2010 年版 包衣胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) / 无 包衣粉 沪 Q/WS 纯化水 *( 工艺中使用到并最终去除的溶剂 ) / 无 包衣溶剂 中国药典 2010 年版 注 :* 纯化水为粘合剂配制用溶剂, 包衣粉的分散介质, 在工艺过程中去除 (2) 本品为片剂, 无附带专用溶剂 (3) 本品使用的包装材料为铝箔和聚氯乙烯 / 聚偏二氯乙烯固体药用复合硬 片 (PVC/PVDC) 2.3.P.2 产品开发卡培他滨由瑞士罗氏 (Roche) 制药公司开发, 于 1998 年 4 月以商品名希罗达 (Xeloda) 在美国获准上市,2000 年获得 SFDA 批准进口, 上市剂型为片剂, 规格 0.15g 0.5g 我公司仿制的卡培他滨片, 剂型同原研厂家罗氏制药的希罗达, 规格 0.5g 1

3 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 2.3.P.2.1 处方组成 2.3.P 原料药 (1) 原料药和辅料的相容性试验参照 FDA 官方网站希罗达 (Xeloda ) 使用说明书, 希罗达为桃色或浅桃色薄膜衣, 其非活性成分包括 : 无水乳糖, 交联羧甲基纤维素钠, 羟丙甲纤维素, 微晶纤维素, 硬脂酸镁, 纯化水 ; 桃色或浅桃色薄膜衣含羟丙甲纤维素 滑石粉 钛白粉 合成氧化铁黄 氧化铁红 日本上市的卡培他滨片, 商品名 :Xeloda, 规格 0.3g, 白色薄膜衣片 其非活性成分包括 : 无水乳糖, 交联羧甲基纤维素钠, 羟丙甲纤维素, 微晶纤维素, 硬脂酸镁, 滑石粉 二氧化钛 参照希罗达处方中的辅料组成, 选用固体制剂常用辅料乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 羟丙甲纤维素 硬脂酸镁 二氧化硅, 分别与主药按一定比例混合后, 取适量, 分别在 (4500±500Lx) 高温(60 ) 高湿( 相对湿度 92.5%,25 ) 的条件下放置 10 天, 检测有关物质, 考察辅料与卡培他滨原料药的相容性 卡培他滨与上述辅料经高温 60 强光照射 高湿 92.5% 放置 10 天, 与初始相比, 其外观性状 有关物质 含量基本没有变化 ; 表明上述各种辅料与卡培他滨的相容性良好, 可用作卡培他滨片的辅料 包衣粉选用常用的水溶性胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 详见申报资料 3.2. P 原料药 ( 页码 :4~6) (2) 卡培他滨为白色或类白色结晶性粉末 ; 无臭 卡培他滨在甲醇中极易溶解, 在水中略溶 2.3.P 辅料 (1) 辅料种类选择依据参考希罗达的辅料种类, 并结合原料的性质进行卡培他滨片辅料相容性试验, 最终确认卡培他滨片的辅料有乳糖 微晶纤维素 羟丙基纤维素 交联羧甲基纤维素钠 二氧化硅 硬脂酸镁 包衣粉选用的是常用的胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 选择的卡培他滨片辅料种类基本同原研制剂希罗达 2

4 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 (2) 辅料用量选择依据通过对对照药品 ( 原研产品 ) 希罗达片重的测定, 其片芯重约 611~625mg, 设计自制片重控制同希罗达 选用与卡培他滨相容性良好的辅料, 在常规用量范围内, 进行组方, 以中间体物料性状 压片情况 片剂外观性状 溶出度等项目为指标, 进行处方筛选 希罗达每片含乳糖约 54mg 片芯重约 623mg, 其中主药卡培他滨 500mg 乳糖 54mg 在此基础上, 确定了微晶纤维素用量 45mg/ 片 粘合剂羟丙甲纤维素溶液的浓度, 根据中间体的物料休止角 可压性, 最终选择 3% 浓度 崩解剂交联羧甲基纤维素钠用量决定了片溶出速度, 根据实验结果, 调整用量使自制片的溶出速度 ( 溶出曲线 ) 基本同希罗片 处方中润滑剂二氧化硅 硬脂酸镁的用量, 在一般常规用量范围内, 根据中间体休止角 流动性, 片子外观, 确定用量 包衣粉的用量, 使片剂增重不超过 3% 详见申报资料 3.2. P.2.1.2( 页码 :7~9 ) 2.3.P.2.2 制剂研究 2. 3.P 处方开发过程 处方的研究开发过程和确定依据参见申报资料 3.2.P.2.2.1( 页码 :9~10) 最终确定的自制卡培他滨片与对照药品希罗达的处方组成比较见下表 : 希罗达 ( 原研产品 ) 自制卡培他滨片 主药卡培他滨卡培他滨 稀释剂乳糖乳糖 微晶纤维素 微晶纤维素 粘合剂羟丙甲纤维素羟丙甲纤维素 崩解剂交联羧甲基纤维素钠交联羧甲基纤维素钠 润滑剂硬脂酸镁硬脂酸镁 助流剂 / 二氧化硅 包衣材料 羟丙甲纤维素 滑石粉 钛白粉 胃溶型薄膜包衣预混剂合成氧化铁黄 氧化铁红 下表说明不同开发阶段 ( 小试 中试 大生产 ) 处方组成的变化 原因以 及支持变化的验证研究 处方组成变化汇总 3

5 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 小试处方中试处方大生产处方主要变化及原因支持依据 批量 800 片 3.5 万片 本品从小试到放大, 处方组成没有变化 / 本品中原辅料均不存在过料投料现象 2.3.P 制剂相关特性 为进一步验证我们的处方工艺, 将自制样品与希罗达进行体外溶出行为 有关物质的对比 对照药品 : 由上海罗氏制药有限公司为瑞士巴塞尔豪夫迈 罗氏有限公司生产 ; 商品名 : 希罗达 (Xeloda ); 规格 :0.5g; 铝塑包装 批号 :SH0189, 生产日期 , 有效期至 ; 批号 :SH0329, 生产日期 , 有效期至 ; (1) 自制制剂与对照药品不同溶出介质中的溶出行为对比自制卡培他滨片批号 :***, 规格 :0.5g, 铝塑包装 考察自制卡培他滨片与希罗达在四种不同溶出介质中的累积溶出情况进行对比 溶出条件 : 溶出介质 : 分别以 900ml 水 ph1.2 盐酸溶液 ph4.0 醋酸盐缓冲液 ph6.8 磷酸盐缓冲液作为溶出介质方法 : 中国药典 2010 年版二部附录 X C 第二法桨法转速 : 每分钟 50 转取样点 : 分别经 min 时, 取溶出液 10ml, 经 0.45μm 滤膜滤过, 同时补加等量同温溶剂, 测定方法 : 精密量取续滤液 2ml, 置 50ml 容量瓶中, 分别用相对应的溶出介质稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液 ; 另取卡培他滨对照品适量, 加相应溶出介质溶解制成每 1ml 中约含 16µg 卡培他滨的溶液, 作为对照品溶液 分别取供试品溶液及对照品溶液, 照紫外 - 可见分光光度法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 ⅣA), 在 304nm 波长处测定吸光度, 计算溶出度并绘制累积溶出曲线 4

6 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 溶出 介质 表 * 卡培他滨片 (** 批 ) 同希罗达在四种介质中溶出曲线测定结果比较 (n=6) 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批希罗达 SH0189 希罗达 SH 水 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批希罗达 SH0189 希罗达 SH0329 ph1.2 盐酸 溶液 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批希罗达 SH0189 希罗达 SH0329 ph4.0 醋酸盐缓 冲液 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批希罗达 H0189 希罗达 SH0329 ph6.8 磷酸盐缓 冲液 注 :(1) 本品在盐酸溶液累积溶出量在溶出 30 分钟后有降低趋势, 推测与本品在盐酸溶液中不稳定, 发生降解有关 5

7 累积溶出度(% )卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 (2) 在自制片 *** 批和希罗达 SH0189 批的溶出曲线测定中 15min 没有取样 图 10 卡培他滨片 (**** 批 ) 与希罗达在水中溶出曲线的比较 (40 % )水中溶出曲线 20 SH0329 SH 时间 (min) 累积溶出度 卡培他滨片 (*** 批 ) 与希罗达在 ph1.2 盐酸溶液中溶出曲线的比较 ph1.2 盐酸溶液中溶出曲线 (50 % )SH0189 SH 时间 (min) 6

8 累积溶出度卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 卡培他滨片 (*** 批 ) 与希罗达在 ph4.0 醋酸盐缓冲液中溶出曲线的比较 ph4.0 醋酸溶液中溶出曲线 (% )SH0189 SH0329 SH 时间 (min) 卡培他滨片 (**** 批 ) 与希罗达在 ph6.8 磷酸盐缓冲液中溶出曲线的比较 ph6.8 磷酸溶液中溶出曲线 100 累积溶80 出度60 (40 % )20 SH0189 SH 从四种溶出介质中的累积溶出曲线看, 我公司研制的卡培他滨片与希罗达 的体外溶出行为基本一致 计算 f2 相似因子, 溶出达到 85% 以上的时间点只能 选取一个, 且时间点不少于 3 个 因此选择 min 的溶出数据, 结果如 下 : 时间 (min) 溶出介质 **** 批与希罗达 SH0189 **** 批与希罗达 SH0329 f2 相似因子 水 ph1.2 盐酸溶液 ph4.0 醋酸盐缓冲液 ph6.8 磷酸盐缓冲液 因自制样品与对照药品希罗达 SH0189 在水的溶出曲线各时间点相差在 2%~5% 之间, 因此在水中两者的 f2 相似因子在 65~83 之间 7

9 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 结论 : 自制样品与希罗达在 4 种不同的溶出介质中溶出曲线的 f2 相似因子 均大于 50, 说明自制样品与希罗达溶出曲线具有相似性 详见申报资料 3.2.P.2.2.2( 页码 :10~25) (2) 有关物质比较 自制卡培他滨片 : 江苏正大天晴药业股份有限公司生产, 批号 :100225;**** **** ****, 规格 :0.5g, 铝塑包装 有关物质测定方法详见 3.2.P.5.2 分析方法 自制卡培他滨片与希罗达有关物质测定结果见表 10 批号 表 10 自制卡培他滨片与希罗达有关物质测定结果 杂质 (A%) 杂质 B (%) 杂质 C (%) 最大未知单杂 (%) 未知总杂 (%) 总杂 (%) 未检出 **** 0.03 未检出 **** **** 0.03 未检出 希罗达 (SH0189) 0.05 未检出 希罗达 (SH0329) 另外, 将自制卡培他滨片的有关物质与希罗达的有关物质进行了详细的对比 分析 ( 面积归一化 ), 详见申报资料 3.2. P.2.2.2( 页码 :25~26 ) 2.3.P.2.3 生产工艺的开发 生产工艺的选择和优化过程参见申报资料 3.2.P.2.3( 页码 :26~32) 8

10 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 本品在研制过程中, 随着批量的增加, 生产地点由实验室逐渐转为车间生产线, 原辅料预处理 制粒 烘干整粒 压片 包衣 铝包等设备也发生了相应的变化, 具体见下表 : 小试工艺 中试生产工艺 大生产工艺 主要变化 支持依据 批量 800 片 3.5 万片 批量增加 逐步放大 预处理 手工 60 目筛 FZB-150 粉碎整粒机 60 目 制粒 20 目筛 LHS-200 湿法混合制粒机筛网孔径 3*3mm 设备及参数 干燥 DGG-9053A 电热恒温鼓风干燥箱 60 终点判断 : 水分 2.0% FZ-60 沸腾制粒机进风温度 60 风量 30~40Hz, 根据物料流化状态适当调整终点判断 : 水分 2.0% 整粒 20 目筛 ZL-450 干整粒机孔径 1.2mm 总混 压片 包衣 塑料袋手工混合 15min 中间体含量 79.61% 休止角约 33 DP 亚力单冲压片机硬度 13~15kg/mm 2 片重差异 ±4% BG1-5 高效包衣机热风温度 60 主机转速 4~7 转 /min 雾化压力约 0.5Mpa HTD-200 料斗混合机混合 15min 中间体含量 79.7%~80.6% 休止角约 36 ZPY-124 旋转式压片机硬度 14~17kg/mm 2 片重差异 ±4% BG40B 高效包衣机热风温度 60 主机转速 4~7 转 /min 雾化压力约 0.5Mpa 随批产量增加, 生产地点从实验室转移到车间, 生产设备发生变化 随批产量增加, 生产设备发生变化 中间体含量 休止角等参数与小试基本相同, 对压片工艺没有明显影响 溶出行为与原研产品基本一致 铝包 In-pack 铝包机热合温度 120~140 压缩空气压力约 0.6Mpa DPS250DⅠ 自动泡罩包装机热合温度 120~160 压缩空气压力约 0.6Mpa 9

11 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 卡培他滨片批分析汇总 批号 生产日期 生产地点 规模 收率 样品用途 **** 连云港市新稳定性考察, 浦区巨龙北 3.5 万 / 片 84.9% 工艺验证路 8 号九车间 连云港市新 浦区巨龙北 **** 路 8 号九车间稳定性考察, 3.5 万 / 片 89.7% 工艺验证 **** 连云港市新稳定性考察, 浦区巨龙北 3.5 万 / 片 88.9% 工艺验证路 8 号九车间 样品质量 含量 (%) 杂质 (%) 溶出度 (%) 杂质 A 0.03 杂质 B 未检出 98.5 杂质 C 未知最大单杂 0.04 未知总杂 0.15 总杂 0.18 杂质 A 0.04 杂质 B 杂质 C 0.01 未知最大单杂 未知总杂 0.04 总杂 0.10 杂质 A 0.03 杂质 B 未检出 杂质 C 未知最大单杂 未知总杂 0.03 总杂

12 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 杂质 A 0.10 **** 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 2.5 万 / 片 82.4% 生产现场核查 杂质 B 0.01 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.03 未知总杂 总杂 0.20 杂质 A 0.08 **** 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 2.5 万 / 片 85.2% 生产现场核查 98.1 杂质 B 0.02 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.05 未知总杂 总杂 0.19 杂质 A 0.08 **** 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 2.5 万 / 片 89.7% 生产现场核查 杂质 B 0.02 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.05 未知总杂 总杂

13 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 2.3.P.2.4 包装材料 / 容器 注 2 项目包装容器配件 注 1 包材类型 包材生产商 包材注册证号 包材注册证有效期 包材质量标准编号 聚氯乙烯 / 聚偏二氯乙烯固体药用复合硬片 (PVC/PVDC) 药品包装用铝箔 (PTP) 江苏琼花高科技股份有限公司江苏中金玛泰医药包装有限公司国药包字 国药包字 至 2015 年 2 月 11 日至 2011 年 10 月 9 日 YBB YBB 不适用 注 1: 铝塑泡罩包装, 组成为 : PVC/PVDC/ 铝 详细信息详见申报资料 3. 2.P.2.4( 页码 :36) 2.3.P.2.5 相容性本品为片剂, 无附带溶剂或者给药装置, 因此不进行该项目的研究 2.3.P.3 生产 2.3.P.3.1 生产商生产商的名称 : 江苏正大天晴药业股份有限公司注册地址 : 江苏省连云港市新浦区巨龙北路 8 号电话 : 传真 : 生产地址 : 江苏省连云港市新浦区巨龙北路 8 号 电话 : 传真 :

14 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 2.3.P.3.2 批处方 片芯 成分用量 % 过量加入作用执行标准 卡培他滨 17.5kg 无 主药 企业标准 乳糖 1890g 8.67 无 稀释剂 中国药典 2010 年版 微晶纤维素 1575g 7.22 无 稀释剂 JX 羟丙甲纤维素 (5cps) 约 315g 1.44 无粘合剂 JX 中国药典 2010 年版 交联羧甲基纤维素钠 210g 0.96 无 崩解剂 JX 二氧化硅 210g 0.96 无 润滑剂 中国药典 2010 年版 硬脂酸镁 105g 0.48 无 润滑剂 中国药典 2010 年版 包衣胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 655g / 无 包衣粉 沪 Q/WS 纯化水 *( 工艺中使用到并最终去除的溶剂 ) 4390g / 无 包衣溶剂 中国药典 2010 年版 共制成 3.5 万片 注 : 纯化水为粘合剂配制用溶剂和包衣粉的分散介质, 在工艺过程中去除 本品中原辅料不存在过量投料现象 2.3.P.3.3 生产工艺和工艺控制 (1) 工艺流程图 : 参见申报资料 3.2.P.3.3( 页码 :40~ 41 ) (2) 工艺描述 : 1 原辅料预处理工序将卡培他滨 乳糖 微晶纤维素分别过 60 目筛备用 2 制粒工序粘合剂的制备 : 按羟丙基甲基纤维素 (5cps): 纯化水 =3:97(W:W) 的比例配制成 3% 的溶液 将过筛后卡培他滨 乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠加入湿法混合制粒机中, 干粉搅拌 **rpm, 剪切 **rpm, 混合 ** 分钟后, 加入 3% 羟丙基甲基纤维素 (5cps) 溶液, 制成颗粒 将制好的软材在线湿整粒, 筛网孔径 :3 3mm, 启动流化床, 将湿颗粒传输至流化床 3 干燥工序使用沸腾干燥机进行干燥, 进风温度为 60, 干燥风量设定 40HZ, 抖袋频率为 2 次 / 秒, 抖袋次数为 10 次 进料结束后, 将风量从 40HZ 调到 30~35HZ 13

15 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 之间, 全部颗粒应整体翻动 用红外快速水分测定仪测定水分, 水分 2.0%, 干燥结束, 收料 4 整粒工序将烘干后的干颗粒进行在线整粒, 筛网孔径 : 1.2mm 5 总混工序将整粒后的干颗粒 硬脂酸镁 二氧化硅于混合机中混合 ** 分钟, 取样检测中间体含量 水分 水分 3.0%, 中间体含量含卡培他滨应为 76.0%--84.0% 6 压片工序根据中间体含量, 折算标准片重, 压片 片重差异控制 ±4.0%; 压力范围 **~**kg/mm 2 7 包衣工序包衣液的配制 : 按胃溶型薄膜包衣预混剂 (85G): 纯化水 =1:6.7(W:W) 的比例配制成 13% 的包衣液 将压好的片剂放入高效薄膜包衣锅中, 包衣锅转速控制在 4-7 转 / 分进行包衣, 片剂预热达到 48 以上开始包衣 包衣机热风温度设为 65 左右, 控制出风温度在 48 ~55 之间 ; 热风转速设为 3000 转 / 分钟左右, 排风转速设为 1400 转 / 分钟左右 ; 清枪时间设为每分钟清枪一秒钟 片剂包衣增重不超过 3% 8 包装工序铝塑包装参数设定 : 热合温度设定为 140, 压缩空气压力 0.6Mpa, 可根据室温和铝塑包装材料的不同, 可适当上下调整设定温度, 密封合格为宜 包装规格 :12 片 / 板,11 板 / 盒,25 板 / 盒 详细内容参见申报资料 3.2.P.3.3( 页码 :41~43) (3) 主要的生产设备详细内容参见申报资料 3.2.P.3.3( 页码 43) (4) 大生产的拟定规模 : 我公司卡培他滨片注册批规模最大为 3.5 万片 / 批, 拟定的大生产批量为 2.5 万片 ~7 万片 2.3.P.3.4 关键步骤和中间体的控制 14

16 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 (1) 关键步骤及其工艺参数控制范围 工序 检查项目 合格标准 预混 搅拌 **rpm, 剪切 **rpm, 时间 **min 制 粒 制粒 搅拌 **rpm; 剪切 **rpm; 雾化压力 0.25~0.35Mpa, 至软材中有明显颗粒时, 制粒结束 湿颗粒整粒 筛网孔径 :3 3mm 干燥进风温度 60 干 燥 风量 30~40Hz, 应使全部颗粒应整体翻动, 必要时调整风量 干燥终点 以颗粒水分检测结果为准, 颗粒水分控制在 2.0% 整 粒 筛网目数 mm 混 合 混合时间 ** 分钟混合转速 15rpm 性状 白色或类白色颗粒和粉末 中间体 卡培他滨含量 76.0%--84.0% 水 分 3.0% 素片外观 表面完整光洁, 边缘整齐 压 片 片重差异 ±4% 硬 度 **~**kg/mm 2 包衣 包衣参数 包衣增重约 3.0% 外观 包衣锅转速 4-7 转 / 分 ; 包衣机热风温度设为 65, 预热至出风温度 48 开始包衣 蠕动泵转速 5~10rpm, 雾化压力 0.40~ 0.60Mpa, 喷枪到片床距离控制在 20~40cm, 喷射角度与片床平面成 90 度, 包衣过程控制负压在 60~100pa 包衣过程中出风温度控制在 48 ~55 之间 色泽均匀, 表面光滑, 无粘连 无包衣液脱落等现象 (2) 中间体的质量控制参见申报资料 3.2.P.3.4( 页码 :44~45) 2.3.P.3.5 工艺验证和评价 卡培他滨片工艺验证方案 ( 编号 :YZ , 版本号 :01) 和工艺验证报 告 ( 编号 :YZ , 版本号 :01), 详见参见申报资料的附件一 二 2.3.P.4 原辅料的控制 成分生产商批准文号 / 注册证号质量标准 卡培他滨 ******* 有限公司 15 同期申报 企业标准 微晶纤维素日本旭化成株式会社注册证号 F***** JX***** 乳糖 羟丙甲基纤维素 (5cps) 交联羧甲基纤维素钠 上海华茂药业有限公司 沪卫药准字 (1998) 第 号 中国药典 2010 年版 陶氏化学公司注册证号 F JX 泰安瑞泰纤维素有限公司 美国 FMC Biopolymer,INC. 鲁药准字 (2005) 第 号注册证号 F 中国药典 2010 年版 JX

17 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 鉴别 检查 硬脂酸镁 湖州展望药业有限公司 浙药准字 F 号 中国药典 2010 年版 二氧化硅 湖州展望药业有限公司 浙药准字 F 中国药典 2010 年版 胃溶性薄膜包衣预混剂沪卫药准字 (1998) 沪 ( 欧巴代 上海卡乐康薄膜包衣有限公司 85G68918) 第 号 Q/WS 纯化水 江苏正大天晴药业股份有限公司 中国药典 2010 年版 注 : 纯化水为粘合剂配制用溶剂和包衣粉的分散介质, 在工艺过程中去除 2.3.P.5 制剂的质量控制 2.3.P.5.1 质量标准 卡培他滨片的质量标准如下表, 详细信息参见申报资料 3.2.P.5.1( 页码 :48) 检查项目方法放行标准限度货架期标准限度 性状 (1) (2) 有关物质 溶出度 微生物限度 其他 重量差异 目检 HPLC 峰保留时间 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ) IR 法 红外分光光度法操作规程 (Q/SOP ) 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ) 溶出度测定法操作规程 (Q/SOP ) 微生物限度检查法操作规程 (Q/SOP ) 中国药典 2010 年版二部附录 I A 中国药典 2010 年版二部附录 I A 本品为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致杂质 A 应 1.0% 杂质 B 应 1.0% 杂质 C 应 0.5% 单个杂质应 0.1% 未知总杂应 0.5% 总杂质应 2.0% 本品为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致杂质 A 应 1.0% 杂质 B 应 1.0% 杂质 C 应 0.5% 单个杂质应 0.1% 未知总杂应 0.5% 总杂质应 2.0% 限度为标示量的 80% 限度为标示量的 80% 细菌数应 1000cfu/g 霉菌及酵母菌数 100cfu/g 大肠埃希菌应不得检出应完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 细菌数应 1000cfu/g 霉菌及酵母菌数 100cfu/g 大肠埃希菌应不得检出应完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 应为平均片重 (1±5%) 应为平均片重 (1±5%) 含卡培他滨 (C 液相色谱法操作规程 15 H 22 FN 3 O 6 ) 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 含量测定应为标示量的 93.0%~ 应为标示量的 93.0% ~ (Q /SOP ) 105.0% 105.0% 注 : 卡培他滨片质量标准主要是参照 USP32/NF27 版中的卡培他滨片质量标 准并结合自制样品的研究情况而制定的 在加速及长期稳定性试验中 ( 目前长期 试验已完成至 12 个月 ), 各考察项均没有发现明显的变化趋势, 故目前暂定放行 标准与货架期标准一致 16

18 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 2.3.P.5.2 分析方法 卡培他滨片的含量和有关物质测定采用高效液相色谱法, 且条件相同, 具体 条件如下 : 有关物质 含量测定 溶出度 HPLC 法 固定相 : 十八烷基硅烷键合硅胶 流动相 : 以 0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5) 为流动相 A; 甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5) 为流动相 B, 按下表进行线性梯度洗脱 ; 时间 ( 分钟 ) 流动相 A(%) 流动相 B(%) 检测波长 :250nm; 流 速 :1.0ml/min; 柱 温 :40 ; 自动进样器温度 5 ; 进样量 :10μl 系统适用性要求 : 出峰顺序依次为杂质 A B 卡培他滨和杂质 C, 杂质 A 峰与杂质 B 峰的分离度应不小于 1.0 HPLC 法色谱条件及系统适用性试验要求 : 同有关物质项 溶出度测定法介质 : 经脱气处理的 900ml 水 (37 ); 转速 :50 转 / 分钟 ; 时间 :30 分钟 ; 波长 :304nm( 采用紫外 - 可见分光光度法测吸光度值 ) 详细信息参见申报资料 3.2.P.5.2( 页码 :48~ 54) 2.3.P.5.3 分析方法的验证分析方法验证主要根据中国药典二部附录 ⅪⅩA 药品质量标准分析方法验证指导原则的要求进行, 卡培他滨片有关物质测定条件 含量测定条件 溶出度和微生物等照规定进行了相应的方法验证研究 ; 其中性状和片重差异等项目参考现行版药典凡例和附录收载方法 现行标准分析方法的验证总结如下 : 17

19 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 (1) 有关物质方法学验证总结 项目波长选择专属性系统适用性检测限溶液稳定性耐用性 验证结果 (1) 卡培他滨与片剂的强制降解产物杂质 A 杂质 B 和杂质 C 在 250nm 左右均有较大吸收 (2) 辅料在 250nm 处基本无吸收, 不干扰样品测定 选用 250nm 作为有关物质检测波长比较合理, 能够较好的控制杂质 A B C 以及其他杂质 (1) 卡培他滨主峰与已知杂质 ( 起始原料, 杂质 A B C D 和杂质 E) 之间达到良好分离 ; (2) 卡培他滨片强制降解 ( 酸 碱 高温 氧化及光降解 ) 产物之间达到良好分离且峰纯度符合要求 出峰顺序依次为杂质 A B 卡培他滨和杂质 C, 杂质 A 峰与杂质 B 峰的分离度应不小于 1.0 卡培他滨的检测限是 0.21ng; 杂质 A 的检测限是 0.48ng; 杂质 B 的检测限是 0.31ng; 杂质 C 的检测限是 0.32ng 供试品溶液室温放置 小时杂质峰个数及含量没有变化, 结果显示有关物质测定溶液至少在 12 小时内是稳定的 将色谱条件中的参数作适度变化后, 如色谱条件中的流速 柱温及色谱柱的厂家等参数作微小调整对测定结果基本不会产生显著性影响, 方法的耐用性是可以接受的 (2) 含量测定方法学验证总结 项目专属性线性和范围定量限准确度精密度溶液稳定性耐用性 验证结果见有关物质方法学验证总结专属性项 在 1.196~11.960μg 范围内与峰响应值呈显著线性关系 设卡培他滨进样量为 X, 峰面积为 Y, 得线性方程 :Y= X , 相关系数 r= 定量限为 0.62ng, 符合检测要求 回收率均在 98.36%~99.40% 之间, 平均回收率为 98.83%, RSD(n=9) 为 0.34% 含量测定重复性试验平均含量为 100.2%,RSD(n=6) 为 0.31%; 中间精密度试验平均含量为 100.1%,RSD(n=12) 为 0.32% 供试品溶液放置 和 12 小时进样主成分峰面积无明显变化,RSD(n=6) 为 0.71%, 结果显示含量测定溶液至少在 12 小时内保持稳定 将色谱条件中的参数作适度变化后, 如色谱条件中的流速 柱温及色谱柱的厂家等参数作微小调整对测定结果基本不会产生显著性影响, 方法的耐用性是可以接受的 18

20 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 (3) 溶出度方法学验证总结 溶出方法的确定 项目溶出介质与体积的选择 测定波长的选择 转速的的选择辅料干扰试验精密度 溶出介质中的稳定性 线性和范围 准确度 验证结果选用 900ml 的水作为溶出介质 紫外 - 可见分光光度法扫描图谱结果显示 : 本品在 304nm 的波长处有最大紫外吸收 溶出度试验的转速选择 50rpm 辅料在测定波长 304nm 处无吸收, 对测定结果无干扰 仪器精密度试验 6 次重复测定吸光度值 RSD(n=6)=0.45%; 供试品溶液放置 和 8 小时吸光度值无明显变化, RSD(n=6) 为 0.25%, 结果显示溶出液在室温条件下至少在 8 小时内保持稳定 在浓度 2.50μg/ml~25.0μg/ml 的范围内与吸收值呈良好的线性关系 设卡培他滨进样量为 x, 峰面积为 y, 得线性方程 :y =0.0261x+0.001, 相关系数 r= 回收率均在 99.30%~101.29% 之间, 平均回收率为 %, RSD(n=9) 为 0.64% (4) 微生物限度方法学验证 项目 菌落计数方法的验证 控制菌大肠埃希菌检查方法 验证结果大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌采用培养基稀释法平皿计数, 回收率均达到 70% 以上, 白色念珠菌和黑曲霉采用常规法平皿计数, 回收率均达到 70% 以上 试验组检出控制菌大肠埃希菌, 阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌, 说明此法可用于本品的控制菌检查 详细信息参见申报资料 3.2.P.5.3( 页码 :54~ 56) 2.3.P.5.4 批检验报告 三个连续批次 ( 批号 :*****) 的检验报告参见申报资料 3.2.P.5.4( 页码 :58~60) 19

21 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 2.3.P.5.5 杂质分析生产合成的中间体及工艺引入的副产物由于在原料药的标准中已进行了控制, 所以制剂中不再进行控制, 制剂中仅对卡培他滨的主要降解产物进行控制 卡培他滨的主要降解产物包括 : 杂质 A 杂质 B 和杂质 C, 卡培他滨片杂质控制降解产物如下 : 降解产物 杂质名称杂质结构杂质来源 该杂质可由 杂质控制限度 是否定入质量标准 杂质 A:5'- 脱氧 -5- 氟胞嘧啶核苷 卡培他滨经 水解反应降 1.0% 是 解产生 该杂质可由 杂质 B:5'- 脱氧 -5- 氟尿嘧啶核苷 卡培他滨经水解反应降 1.0% 是 解产生 杂质 C:2', 3'-O- 羰基 -5'- 脱氧 -5- 氟 -N4-[( 戊氧基 ) 羰基 ] 胞嘧啶核苷 该杂质可由卡培他滨经高温降解产生 0.5% 是 详细信息参见申报资料 3.2.P.5.5( 页码 :61~ 63) 2.3.P.5.6 质量标准制定依据 质量标准制定依据参见申报资料 3.2.P.5.6( 页码 :64~ 65) 2.3.P.6 对照品 1. 卡培他滨对照品卡培他滨原料药质量标准收载于 USP32/NF27 版, 我公司在开发本品过程中 使用了美国药典对照品及自制对照品, 自制对照品含量使用美国药典对照品进行 标定 (1) 美国药典对照品 ( 用于含量测定 ) 20

22 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 名 批 来 称 :Capecitabine reference standard 号 :F0G037 源 :U. S. Pharmacopeia 含量 :99.7% (2) 自制对照品 名 称 : 卡培他滨 含量 : 采用了两种经过验证的不同方法进行测定, 具体如下 : 方法 1: 电位滴定法 *************************** 结果 :99.7%(n=2) 方法 2: ********* ********* 结果 : 按外标法以峰面积计算,99.9% 两种方法测定结果基本一致, 我们暂时规定本品采用电位滴定法测定含量 自制对照品含量为 99.7% 制备方法 :********* 解制得 详细信息参见卡培他滨片申报资料 3.2.P.6( 页码 :66-70) 及卡培他滨原料药申报资料 3.2.S.2.2( 页码 :3~6) 2. 杂质对照品我公司在开发本品过程中, 所用杂质 A B 及 C 均为本公司自制 (1) 杂质 A 对照品化学名 :5'- 脱氧 -5- 氟胞嘧啶核苷含量 :99.2%(HPLC 法,*********) 制备方法 :********* 水解反应制得 (2) 杂质 B 对照品化学名 :5'- 脱氧 -5- 氟尿嘧啶核苷含量 :100.0% (HPLC 法,*********)) 制备方法 ********* 水解制得 21

23 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 (3) 杂质 C 对照品 化学名 :2', 3'-O- 羰基 -5'- 脱氧 -5- 氟 -N4-[( 戊氧基 ) 羰基 ] 胞嘧啶核苷 含量 :96.2%(HPLC 法,*********) 制备方法 :********* 反应制得 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 3.2.S.5( 页码 :132~138) 2.3.P.7 稳定性 2.3.P.7.1 稳定性总结 (1) 试验样品 批号 **** **** **** 规格 0.5g 0.5g 0.5g 0.5g 原料药来源及批号 江苏正大天晴药业股份有限公司批号 : 江苏正大天晴药业股份有限公司批号 : 江苏正大天晴药业股份有限公司批号 : 江苏正大天晴药业股份有限公司批号 : 生产日期 **** **** **** 连云港市新浦区巨连云港市新浦区巨连云港市新浦区巨生产地点龙北路 8 号研究院龙北路 8 号九车间龙北路 8 号九车间 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 批量 800 片 3.5 万片 3.5 万片 3.5 万片 内包装材料铝塑铝塑铝塑铝塑 影响因素试验 (2) 研究内容 常规稳定性考察结果 项目放置条件计划考察时间已完成的考察时间 高温 40 和 60 0,5,10 天 0,5,10 天 高湿 25, RH90%±5% (KNO 3 饱和溶液 ) 22 0,5,10 天 0,5,10 天 光照 4500Lx±500Lx 0,5,10 天 0,5,10 天 加速试验 40 ±2,RH75%±5% 月 月 长期试验 30 ±2,RH65±5% 月 月 注 : 使用中产品稳定性研究结果 - 不适用 (3) 稳定性结论 经影响因素试验考察, 结果显示 : 素片 包衣片经高温 (60 ) 高湿 (25, RH92.5% 湿度 ) 和强光照射 (25,4500±500Lx)10 天, 有关物质中杂质 A 在 60 考察 10 天时增幅最大 : 从 0.03% 增加至 0.18%, 其他考察条件无明显变化 ;

24 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 杂质 B 在高湿试验 RH92.5% 考察 10 天时略有增加 : 从未检出增加至 0.03%, 其他考察条件均未检出 ; 杂质 C 在 60 考察 10 天时增幅最大 : 从 0.01% 增加至 0.04%, 其他考察条件无明显变化 ; 总杂质在 60 考察 10 天时增幅最大 : 从 0.17% 增加至 0.36%; 含量及溶出度考察结果没有明显区别 卡培他滨片经加速试验 ( 温度 40 ±2, 相对湿度 75%±5%) 和长期试验 ( 温度 30 ±2, 相对湿度 65%±5%), 样品外观 含量 溶出度等项目基本未发现明显变化 ; 在加速试验中, 杂质 A 由 0.04% 增加至 0.77%, 增幅 0.73%, 杂质 B 由 0.01% 增加至 0.25%, 增幅 0.24%, 杂质 C 由 0.01% 增加至 0.03%, 增幅 0.02%, 其他单个最大杂质基本不变, 总杂质由 0.10% 增加至 1.10%, 增幅 1.0%; 在长期试验中, 杂质 A 由 0.03% 增加至 0.13%, 增幅 0.10%, 杂质 B 在由未检出增加至 0.05%, 增幅 0.05%, 杂质 C 与其他单个最大杂质基本不变, 总杂质由 0.07% 增加至 0.23%, 增幅 0.16%, 均在标准控制范围内 ( 所列增幅均为最大增幅 ); 含量及溶出度考察结果没有明显区别 ; 微生物 0 6 和 12 月检验均合格 根据本品影响因素试验和稳定性试验考核结果, 结合希罗达使用说明书中贮藏条件 有效期, 我们将本品贮藏条件定为 : 密封, 常温 (10~30 ) 保存 ; 有效期定为 24 个月 2.3.P.7.2 上市后的稳定性承诺和稳定性方案 详细信息参见申报资料 3.2.P.7.2( 页码 :75) 基于目前稳定性研究结果, 拟定包装材料 贮藏条件和有效期如下 : 拟定内包材拟定贮藏条件拟定有效期对说明书中相关内容的提示 铝塑包装密封, 常温 (10~30 ) 保存 24 个月无 23

25 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 2.3.P.7.3 稳定性数据 (1) 影响因素试验 考察项目方法及限度 ( 要求 ) 试验结果 性状 有关物质 目检, 要求 : 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ), 限度为 : 杂质 A 应 1.0%; 杂质 B 应 1.0%; 杂质 C 应 0.5%; 单个杂质应 0.1%; 未知总杂应 0.5%; 总杂质应 2.0% 在 0 至 10 天考察期间, 各影响因素考察各时间点均符合规定 在 0 至 10 天考察期间, 本品素片和包衣片, 经光照 高湿和高温 (60 ) 考察 10 天后, 有关物质没有明显区别 杂质 A 最大为 0.18%, 杂质 B 最大为 0.03%, 杂质 C 最大为 0.04%, 单一杂质最大为 0.05%, 总杂质最大为 0.36% 溶出度 溶出度测定法操作规程 (Q/SOP ), 限度为 : 标示量的 80% 在 0 至 10 天考察期间, 本品素片和包衣片, 经光照 高湿 高温 60 考察 10 天后, 各时间点均符合规定, 均为 98% 左右, 溶出度没有明显区别 含量 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ), 限度为 : 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 应为标示量的 93.0%~105.0% 在 0 至 10 天考察期间, 本品素片和包衣片, 经高温 (60 ) 高湿 (25,RH92.5% 湿度 ) 和强光照射 ( 25, 4500±500Lx)10 天, 含量没有明显区别 变化范围为 99.2% ( 最低值 ) 至 100.7%( 最大值 ) 24

26 卡培他滨片 CTD 格式申报主要研究信息汇总表 (2) 加速试验 考察项目方法及限度 ( 要求 ) 试验结果 性状 有关物质 溶出度 含量 微生物限度 (3) 长期试验 目检, 要求 : 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ), 限度为 : 杂质 A 应 1.0%; 杂质 B 应 1.0%; 杂质 C 应 0.5%; 单个杂质应 0.1%; 未知总杂应 0.5%; 总杂质应 2.0% 溶出度测定法操作规程 (Q/SOP ), 限度为 : 标示量的 80% 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ), 限度为 : 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 应为标示量的 93.0%~105.0% 微生物限度检查法操作规程 (Q/SOP ), 要求 : 应符合规定 在 0 至 6 月考察期间, 各时间点均符合规定 在 0 至 6 月考察期间, 杂质 A 最大为 0.77%, 杂质 B 最大为 0.25%, 杂质 C 最大为 0.03%, 单一杂质最大为 0.04%, 总杂质最大为 1.10%, 均在标准限度范围内 在 0 至 6 月考察期间, 各时间点均符合规定 在 0 至 6 月考察期间, 含量变化范围为 97.4% ( 最低值 ) 至 101.6%( 最大值 ), 未显示出明显的变化趋势 在 0 月和 6 月考察时, 均符合规定 考察项目方法及限度 ( 要求 ) 试验结果 性状 有关物质 溶出度 含量 微生物限度 目检, 要求 : 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ), 限度为 : 杂质 A 应 1.0%; 杂质 B 应 1.0%; 杂质 C 应 0.5%; 单个杂质应 0.1%; 未知总杂应 0.5%; 总杂质应 2.0% 溶出度测定法操作规程 (Q/SOP ), 限度为 : 标示量的 80% 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ), 限度为 : 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 应为标示量的 93.0%~105.0% 微生物限度检查法操作规程 (Q/SOP ), 要求 : 应符合规定 在 0 至 12 月考察期间, 各时间点均符合规定 在 0 至 12 月考察期间, 杂质 A 最大为 0.13%, 杂质 B 最大为 0.05%, 杂质 C 最大为 0.01%, 单一杂质最大为 0.04%, 总杂质最大为 0.27%, 均在标准限度范围内 在 0 至 12 月考察期间, 各时间点均符合规定 在 0 至 12 月考察期间, 含量变化范围为 98.2%( 最低值 ) 至 101.6%( 最大值 ), 未显示出明显的变化趋势 在 0 至 12 月考察期间,0 月 6 月和 12 月均符合规定 详细信息参见申报资料 3.2.P.7.3( 页码 :76~83) 25

27 卡培他滨片 CTD 格式药学研究资料 目录 3.2.P.1 剂型及产品组成 P.2 产品开发 P.2.1 处方组成 P 原料药 P 辅料 P.2.2 制剂研究 P 处方开发过程 P 制剂相关特性 P.2.3 生产工艺的开发 P.2.4 包装材料 / 容器 P.2.5 相容性 P.3 生产 P.3.1 生产商 P.3.2 批处方 P.3.3 生产工艺和工艺控制 P.3.4 关键步骤和中间体的控制 P.3.5 工艺验证和评价 P.4 原辅料的控制 P.5 制剂的质量控制 P.5.1 质量标准 P.5.2 分析方法 P.5.3 分析方法的验证 P.5.4 批检验报告 P.5.5 杂质分析 P.5.6 质量标准制定依据 / 97

28 3.2.P.6 对照品 P.7 稳定性 P.7.1 稳定性总结 P.7.2 上市后的稳定性承诺和稳定性方案 P.7.3 稳定性数据汇总 正文 2 / 97

29 3.2.P.1 剂型及产品组成 (1) 我公司研制开发的卡培他滨片, 剂型为片剂, 规格 :0.5g, 处方中的辅料为乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 羟丙甲纤维素 硬脂酸镁 二氧化硅 胃溶型薄膜包衣预混剂 卡培他滨片单位剂量的处方组成如下 : 成分用量过量加入作用执行标准 片芯 mg % 卡培他滨 无主药企业标准 乳糖 无稀释剂中国药典 2010 年版 微晶纤维素 无稀释剂 JX***** 羟丙甲纤维素 (5cps) 约 无粘合剂 JX 中国药典 2010 年版 交联羧甲基纤维素钠 无崩解剂 JX 二氧化硅 无润滑剂中国药典 2010 年版 硬脂酸镁 无润滑剂中国药典 2010 年版 包衣 注 1 胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 纯化水注 2 ( 工艺中使用到并最终去除的溶剂 ) / 无包衣粉沪 Q/WS / 无包衣溶剂中国药典 2010 年版 注 1: 胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 配方成份 : 聚乙烯醇 二氧化钛 滑石粉 聚乙二醇 大豆磷脂 注 2: 纯化水为粘合剂配制用溶剂和包衣粉的分散介质, 在工艺过程中去除 (2) 本品为片剂, 无附带专用溶剂 (3) 本品使用的包装材料为铝箔和聚氯乙烯 / 聚偏二氯乙烯固体药用复合硬片 (PVC/PVDC) 3.2.P.2 产品开发 P.2.1 处方组成参照原研产品希罗达的处方组成, 同时考虑到主药卡培他滨约占处方组成的 80%, 且流动性较差, 增加了助流剂二氧化硅, 按一定比例将原辅料混合进行相容性实验, 选择出合适的辅料 3.2.P 原料药 卡培他滨由瑞士罗氏 (Roche) 制药公司原研开发, 于 1998 年 4 月以商品名希罗达 (Xeloda) 在美国获准上市,2000 年获得 SFDA 批准进口, 上市剂型为片剂, 规格 0.15g 3 / 97

30 0.5g, 铝塑包装 我公司仿制的卡培他滨片, 剂型同原研厂家罗氏制药的希罗达, 规格 0.5g (2) 原料药和辅料的相容性试验 FDA 官方网站 Xeloda ( 希罗达 1 ) 使用说明书, 希罗达为桃色或浅桃色薄膜衣, 其非活性成分包括无水乳糖, 交联羧甲基纤维素钠, 羟丙甲纤维素, 微晶纤维素, 硬脂酸镁, 纯化水 ; 桃色或浅桃色薄膜衣含羟丙甲纤维素 滑石粉 钛白粉 合成氧化铁黄 氧化铁红 2 日本上市的卡培他滨片, 商品名 :Xeloda, 规格 0.3g, 白色薄膜衣片, 其非活性成分包括无水乳糖, 交联羧甲基纤维素钠, 羟丙甲纤维素, 微晶纤维素, 硬脂酸镁, 滑石粉 二氧化钛 参照希罗达的辅料成份, 同时考虑到主药卡培他滨约占处方组成的 80%, 且流动性较差 ( 休止角约 44 度 ), 选用固体制剂常用辅料乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 羟丙甲纤维素 硬脂酸镁 二氧化硅, 分别与主药按一定比例混合后, 取适量, 分别在强光照射 (4500±500Lx) 高温(60 ) 高湿( 相对湿度 92.5%,25 ) 的条件下放置 10 天, 考察辅料与卡培他滨原料药的相容性 结果 : 乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 羟丙甲纤维素 硬脂酸镁 二氧化硅与卡培他滨的相容性良好, 可用来进行卡培他滨片的处方筛选 包衣材料选用常用的水溶性胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 4 / 97

31 卡培他滨与辅料的相容性试验结果 辅料 主药 辅料 条件 外观 有关物质 (%) 杂质 A 杂质 B 杂质 C 未知最大单杂未知总杂总杂 吸湿增重 (%) 0 天白色粉末 0.01 未检出 卡培他滨 / 乳糖 1 5 强光 10 天 白色粉末 0.02 未检出 天 白色粉末 0.06 未检出 高湿 10 天 白色粉末 0.03 未检出 天 白色粉末 0.01 未检出 强光 10 天 白色粉末 0.02 未检出 未检出 天 白色粉末 0.07 未检出 高湿 10 天 白色粉末 天 白色粉末 0.01 未检出 微晶纤维素羟丙甲纤维素交联羧甲基纤维素钠 :1 强光 10 天 白色粉末 天 白色粉末 高湿 10 天 白色粉末 天 白色粉末 0.01 未检出 强光 10 天 白色粉末 0.02 未检出 天 白色粉末 0.05 未检出 高湿 10 天 白色粉末 0.04 未检出 天 类白色粉末 0.01 未检出 强光 10 天 类白色粉末 0.02 未检出 天 类白色粉末 0.05 未检出 高湿 10 天 类白色粉末 / 97

32 硬脂酸镁 二氧化硅 天 白色粉末 0.01 未检出 强光 10 天 白色粉末 0.02 未检出 天 白色粉末 0.05 未检出 高湿 10 天 白色粉末 0.04 未检出 天 白色粉末 0.01 未检出 强光 10 天 白色粉末 天 白色粉末 高湿 10 天 白色粉末 (2) 卡培他滨为白色或类白色结晶性粉末 ; 无臭 卡培他滨在甲醇中极易溶解, 在水中略溶 6 / 97

33 3.2.P 辅料 采用与卡培他滨相容性良好的辅料, 设计不同的组方, 从填充剂用量 粘合剂浓度 崩解剂用量 润滑剂与助流剂的用量 中间体颗粒的休止角与流动性及可压性 片子的溶出行为等进行处方筛选, 并与希罗达的溶出行为进行对比, 从而确定处方中的辅料组成 (1) 辅料种类选择依据参考希罗达的辅料种类, 并结合辅料相容性试验结果, 选择乳糖 微晶纤维素 羟丙基纤维素 交联羧甲基纤维素钠 二氧化硅 硬脂酸镁作为自制卡培他滨片的辅料 包衣材料选用的是常用的胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 我们选择的卡培他滨片辅料种类基本同原研产品希罗达 详见 3.2.P 原料药 原料药与辅料的相容性实验 (2) 辅料用量选择依据选用与卡培他滨相容性良好的辅料, 在常规用量范围内, 进行组方, 以中间体物料休止角 流动性 可压性 片剂外观性状 溶出速度等项目为指标, 进行初步处方筛选 根据实验结果, 逐步调整处方中辅料用量, 使自制片与希罗达的溶出行为 ( 溶出曲线 ) 接近 取原研产品希罗达多片称重, 片重约 630~645mg 片剂包衣增重一般 3%; 据此推算, 希罗达素片的片重约 611~625mg 自制片的片芯片重控制同希罗达, 在 615~625mg 硬度在 13~15kg/mm 2 取希罗达, 溶出条件参照 USP32 3 测定溶出, 约 25min 全部溶出 在处方筛选过程中, 自制片片重 溶出控制参照希罗达 本品的处方筛选汇总如下 : 原辅料名称 处方用量 (g/100 片 ) 处方 1 处方 2 处方 3 处方 4 处方 5 处方 6 卡培他滨 乳 糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 % 羟丙甲纤维素 (5cps) 溶液 48 ml 2% 羟丙甲纤维素 (5cps) 溶液 40 ml 44 ml 39 ml 3% 羟丙甲纤维素 (5cps) 溶液 28ml 27ml 二氧化硅 硬脂酸镁 测定项目 处方 1 处方 2 处方 3 处方 4 处方 5 处方 6 7 / 97

34 颗粒性状颗粒较好细粉较多细粉较多细粉较多颗粒较好颗粒较好 是否粘冲粘冲粘冲否否否否 外观 裂片, 侧面粗糙 裂片, 侧面粗糙 良好裂片光洁光洁 可压性好好好不好好好 硬度 (kg) 流动性 ( 休止角, 度 ) 溶出度 (%) 片剂基本项目考察结果 处方 1 2 存在的问题 : 处方 1 2 中间体的流动性较差, 压片有粘冲现象 ; 乳糖和微晶纤维素的用量不同对中间体物料性质影响不大 解决方案 : 在处方 1 2 的基础上微调乳糖和微晶纤维素的用量, 处方 3 采用 1% 羟丙甲纤维素 (5cps) 溶液做粘合剂, 润滑剂增加硬脂酸镁用量, 同时增加了二氧化硅, 以改善粘冲现象 处方 4 粘合剂仍使用 2% 羟丙甲纤维素 (5cps) 溶液, 仅增加润滑剂硬脂酸镁用量处方 3 4 实验结论 存在的问题 : 处方 3 中间体的细粉较多, 可压性良好, 流动性较差, 片的外观良好 ; 处方 4 流动性 可压性较差, 粘冲 将处方 3 的片与希罗达, 参照 USP32 的溶出条件 [3] [4], 取样点参考 FDA 网站卡培他滨片溶出度数据进行和希罗达的溶出行为比较, 结果自制片的溶出较希罗达快 因此应减少处方中崩解剂交联羧甲基纤维素钠用量 希罗达每片含无水乳糖 52mg 5, 相当于乳糖约 54mg 因此调整乳糖用量约 54mg/ 片 改进方法 : 在处方 3 的基础上调整, 设计处方 5 6, 考虑到物料的流动性较差, 为使物料的流动性改进, 需要粘合剂浓度为 3%; 同时崩解剂交联羧甲基纤维素钠考察不同用量的对溶出的影响 处方 5 6 中间体颗粒流动性 可压性都得到明显改善, 片剂外观较好 取处方 5 处方 6 的片子与希罗达进行溶出速度 ( 溶出曲线 ) 测试, 处方 5 与希罗达溶出行为基本一致, 处方 6 的溶出快于希罗达 处方组成初步确认处方 P.2.2 制剂研究 3.2.P 处方开发过程 选用与卡培他滨相容性良好的辅料, 进行处方研究, 最终确定自制卡培他滨片的处方, 详细参照 3. 2.P 辅料部分 按上述初步确定的处方 5, 配制卡培他滨片 ( 批号 :100122), 取其中一半采用胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 进行薄膜包衣, 包衣增重约为片芯重量 3% 将素片和包衣片, 同时进行影响因素考察以考察包衣对本品稳定性的影响, 确定本品的处方工艺 影响因素试验考察结果显示 : 素片 包衣片经高温 (60 ) 高湿 (25,RH92.5%) 和强光照射 (25,4500±500Lx)10 天, 有关物质 含量 溶出度考察结果没有明显区别 详见 3.2.P.7.3 稳定性数据 按照上述确定的处方工艺进行三批样品的放大, 批号 : , , , 8 / 97

35 对自制样品与希罗达在 4 种溶出介质中的溶出行为进行了对比研究 详见 3.2. P 制剂相关特性的溶出行为比较部分 从自制卡培他滨片与原研产品希罗达在四种溶出介质中的累积溶出曲线看, 两者体外溶出行为基本一致 确定的自制卡培他滨片与对照药品希罗达的处方组成比较见下表 : 希罗达 ( 原研产品 ) 自制卡培他滨片 主药卡培他滨卡培他滨 稀释剂 乳糖 乳糖 微晶纤维素 微晶纤维素 粘合剂 羟丙甲纤维素 羟丙甲纤维素 崩解剂交联羧甲基纤维素钠交联羧甲基纤维素钠 润滑剂硬脂酸镁硬脂酸镁 助流剂 / 二氧化硅 包衣材料 羟丙甲纤维素 滑石粉 钛白粉 合成氧化铁黄 氧化铁红 在药品开发阶段中处方组成变化汇总, 见下表 : 处方组成变化汇总 胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 配方组分 : 聚乙烯醇 二氧化钛 滑石粉 聚乙二醇 大豆磷脂 ) 小试处方中试处方大生产处方主要变化及原因支持依据 批量 800 片 / 3.5 万片 本品从小试到放大, 处方组成没有变化 / 本品中原辅料均不存在过量投料现象 3.2.P 制剂相关特性 为进一步验证我们的处方工艺, 将自制样品与希罗达进行了体外溶出行为和有关物质的对比 原研产品 : 由上海罗氏制药有限公司为瑞士巴塞尔豪夫迈 罗氏有限公司生产 ; 商品名 : 希罗达 (Xeloda ); 规格 :0.5g; 铝塑包装 批号 :SH0189, 生产日期 , 有效期至 ; 批号 :SH0329, 生产日期 , 有效期至 ; (1) 自制样品与对照药品不同溶出介质中的溶出行为对比自制卡培他滨片批号 , 规格 0.5g, 铝塑包装, 来源 : 江苏正大天晴药业股份有限公司 溶出条件 : 溶出介质 : 分别以 900ml 水 ph1.2 盐酸溶液 ph4.0 醋酸盐缓冲液 ph6.8 磷酸盐缓冲液作为溶出介质方法 : 中国药典 2010 年版二部附录 X C 第二法桨法转速 : 每分钟 50 转取样点 : 分别经 min 时, 取溶出液 10ml, 经 0.45μm 滤膜滤 9 / 97

36 过, 同时补加等量同温溶剂, 测定方法 : 精密量取续滤液 2ml, 置 50ml 容量瓶中, 分别用相对应的溶出介质稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液 ; 另取卡培他滨对照品适量, 加相应溶出介质溶解制成每 1ml 中约含 16µg 卡培他滨的溶液, 作为对照品溶液 分别取供试品溶液及对照品溶液, 照紫外 - 可见分光光度法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 ⅣA), 在 304nm 波长处测定吸光度, 计算溶出度并绘制累积溶出曲线 在四种溶出介质中的累积溶出度及溶出曲线结果见表 ** 及图 ** 表 ** 卡培他滨片 批水中溶出曲线测定结果 (n=6) 时间 min 110 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 图 ** 卡培他滨片 批水中溶出曲线 (n=6 ) 批水中溶出曲线 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 表 ** 时间 min 时间 (min) 卡培他滨片 批 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线数据 (n=6) 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 图 ** 卡培他滨片 批 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线 (n=6) 10 / 97

37 累积溶出度 批 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线 (% ) 片 1 片 2 片 4 片 5 片 时间 (min) 表 ** 时间 min 卡培他滨片 批 ph4.0 醋酸盐缓冲液溶出曲线数据 (n=6) 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 图 ** 卡培他滨片 批 ph4.0 醋酸盐缓冲液溶出曲线 (n=6) 批 PH4.0 醋酸盐缓冲液溶出曲线累90 积溶出70 度(50 % )30 10 片 1 片 2 片 4 片 5 片 时间 (min) 表 ** 卡培他滨片 批 ph6.8 磷酸盐缓冲液溶出曲线数据 (n=6) 11 / 97

38 累积溶出度 (%) 时间 min 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 图 ** 卡培他滨片 批 ph6.8 磷酸盐缓冲液溶出曲线 (n=6) 批 ph6.8 磷酸盐缓冲液溶出曲线 90 (累% )积溶出度 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 时间 (min) 时间 min 表 ** 希罗达水中溶出曲线测定结果 (n=6) 希罗达批号 :SH0189 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 时间 min 希罗达 累积溶出度 (%) 12 / 97 批号 :SH0329 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 图 5 希罗达水中溶出曲线 (n=6) rsd% rsd%

39 希罗达 SH0189 水中溶出曲线 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 时间 (min) 希罗达 SH0329 水中溶出曲线 100 (累80 % )积溶出度 片 1 片 2 片 3 片 4 片 时间 (min) 表 ** 希罗达 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线测定结果 (n=6) 希罗达批号 :SH0189 时间累积溶出度 (%) min 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 时间 min 希罗达 累积溶出度 (%) 批号 :SH0329 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 图 ** 希罗达 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线 (n=6) rsd% 13 / 97

40 希罗达 SH0189 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线(累100 % )积溶出度 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 时间 (min) 希罗达 SH0329 ph1.2 盐酸中溶出曲线(累% )积溶出度 时间 (min) 片 1 片 2 片 3 表 * 希罗达 ph4.0 醋酸盐缓冲液溶出曲线数据 (n=6) 希罗达 批号 :SH0189 时间 min 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 时间 min 希罗达 批号 :SH0329 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 图 * 希罗达 ph4.0 醋酸盐缓冲液溶出曲线 (n=6) 14 / 97

41 min (% )积溶出度110 (% )0 累 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 时间 (min) 希罗达 SH0329 ph4.0 醋酸中溶溶出曲线 累积溶出度 时间 (min) 表 * 希罗达 ph6.8 磷酸盐缓缓冲液溶出曲曲线数据 (n= =6) 时间累积溶出度 (%) rsd% min 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 时间 n 片 1 片 2 希罗达 希罗达 累积积溶出度 (%) 片 3 片 批号 :SH01899 批号 :SH0329 片 片 6 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 平均 rsd% / 97

42 累累(% )0 (% )60 图 * 希罗罗达 ph6.8 磷酸盐缓冲液液溶出曲线 ( n=6) 时间 (min) 希罗达 SH0329 ph6.8 磷酸盐缓冲液中中溶出曲线 积溶出度累积溶出度0 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 60 片 1 片 2 片 3 片 4 20 片 5 片 时间 ( min) 16 / 97

43 溶出 介质 表 * 卡培他滨片 (*** 批 ) 同希罗达在四种介质中溶出曲线测定结果比较 (n=6) 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批希罗达 SH0189 希罗达 SH 水 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批希罗达 SH0189 希罗达 SH0329 ph1.2 盐酸 溶液 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批希罗达 SH0189 希罗达 SH0329 ph4.0 醋酸盐缓 冲液 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批希罗达 H0189 希罗达 SH0329 ph6.8 磷酸盐缓 冲液 注 :(1) 本品在盐酸溶液累积溶出量在溶出 30 分钟后有降低趋势, 推测与本品在盐酸溶液中不稳定, 发生降解有关 17 / 97

44 累积溶出度(% )(2) 在自制片 *** 批和希罗达 SH0189 批的溶出曲线测定中 15min 没有取样 图 10 卡培他滨片 (*** 批 ) 与希罗达在水中溶出曲线的比较 (40 % )水中溶出曲线 20 SH0329 SH 时间 (min) 累积溶出度 卡培他滨片 (*** 批 ) 与希罗达在 ph1.2 盐酸溶液中溶出曲线的比较 ph1.2 盐酸溶液中溶出曲线 (50 % )SH0189 SH 时间 (min) 卡培他滨片 (*** 批 ) 与希罗达在 ph4.0 醋酸盐缓冲液中溶出曲线的比较 18 / 97

45 累积溶出度120 ph4.0 醋酸溶液中溶出曲线 (% )40 20 SH0189 SH0329 SH 时间 (min) 卡培他滨片 (*** 批 ) 与希罗达在 ph6.8 磷酸盐缓冲液中溶出曲线的比较 ph6.8 磷酸溶液中溶出曲线 100 累积溶80 出度60 (40 % )20 SH0189 SH 时间 (min) 从四种溶出介质中的累积溶出曲线看, 我公司研制的卡培他滨片与希罗达的体外溶出行为基本一致 计算 f2 相似因子, 溶出达到 85% 以上的时间点只能选取一个, 且时间点不少于 3 个 因此选择 min 的溶出数据, 结果如下 : 溶出介质 **** 批与希罗达 SH0189 **** 批与希罗达 SH / 97 f2 相似因子 水 ph1.2 盐酸溶液 ph4.0 醋酸盐缓冲液 ph6.8 磷酸盐缓冲液 因自制样品与对照药品希罗达 SH0189 在水的溶出曲线各时间点相差在 2%~5% 之间, 因此在水中两者的 f2 相似因子在 65~83 之间 结论 : 自制样品与希罗达在 4 种不同的溶出介质中溶出曲线的 f2 相似因子均大于 50, 说明自制样品与希罗达溶出曲线具有相似性 (2) 有关物质比较自制卡培他滨片批号 :100225;**** 批,**** 批 **** 批规格 :0.5g, 铝塑包装, 来源 : 江苏正大天晴药业股份有限公司 有关物质测定方法详见 3.2.P.5.2 分析方法 自制卡培他滨片与希罗达有关物质测定结果

46 批号 杂质 (A%) 杂质 B (%) 杂质 C (%) 最大未知单杂 (%) 未知总杂 (%) 总杂 (%) 未检出 **** 批 0.03 未检出 **** 批 **** 批 0.03 未检出 希罗达 (SH0189) 0.05 未检出 希罗达 (SH0329) 另外, 将自制卡培他滨片的有关物质与希罗达的有关物质杂质谱进行了详细的对比分析 ( 面积归一化 ), 结果见下表 自制卡培他滨片与希罗达有关物质杂质谱比较杂质峰 (%) 相对保留时间 **** 批 **** 批 **** 批 20 / 97 希罗达 (SH0189) 希罗达 (SH0329) 0.18( 杂质 A) ( 杂质 B) / / / / / / / / / / / 0.38 / / / / 0.03 / / 0.67 / / / / / ( 杂质 C) / 0.01 / / / / / / / / / / / 未知最大单杂 (%) 总杂 (%) 将自制卡培他滨片与希罗达进行对比, 结果显示自制卡培他滨片有关物质总杂 < 0.20%, 单一杂质 <0.10%, 与希罗达杂质谱基本一致 P.2.3 生产工艺的开发 根据本品处方组成, 考虑到主药卡培他滨流动性较差且在处方中约占总重的 80%, 选择了常规的湿法制粒 压片 薄膜包衣工艺 小试工艺参数在实验 经验基础上, 确定各工序的参数控制 ; 根据小试工艺 生产设备的一些常用参数, 进行 3 批放大生产并同步工艺验证, 确定主要工序 制粒 总混的工艺控制参数 对 3 批放大样品的片重差异 溶出度 有关物质 含量等主要测定项目结果看, 没有明显差异 ; 并通过自制样品批内溶出均一性 批间溶出重现性以及与希罗达溶出行为比较, 来考察工艺稳定性, 最终确定生产工艺 (1) 小试工艺 :

47 1 预处理原辅料预处理过筛去除结块, 获得均匀粒子群, 利于后续制粒 混合 压片等工序的进行 根据原料药卡培他滨 乳糖 微晶纤维素的性状 粒度, 选择常规 60 目筛 2 制粒根据主药特性, 本品选择湿法制粒工艺, 改善物料的流动性 可压性 小试原辅料手工混合, 加粘合剂制软材, 制粒选择常规 20 目筛网, 手工制粒 经多批小试制备的颗粒较为均一, 能重现 3 烘干 整粒烘干温度通常根据药物性质制定, 一般为 40~60 卡培他滨原料药 60 放置 5 天有关物质没有明显变化, 表明对温度不敏感 ; 制粒使用水做润湿剂, 为保证干燥效率拟定烘干温度 60 一般干燥颗粒水分控制在 3% 左右 多批小试的烘干终点均根据水分测定结果 ( 干燥失重法 ) 确认, 水分在 0.8~1.8% 之间, 压片外观 硬度批内 批间没有差异 因此控制干燥水分不超过 2.0%, 干燥终点以水分控制结果为准 整粒可使干燥过程中结块 粘连的颗粒分散开, 得到大小均匀的颗粒 筛网选择一般比制粒的筛网稍小, 本品制粒 20 目筛, 故整粒拟选择 24 目筛网 在小试中整粒采用 目筛, 对松密度 休止角等项目进行对比如下 : 整粒筛目松密度 g/ml 休止角 ( 度 ) 可压性片重差异 (%) 20 目 35~37 32 良好 ±5 24 目 37~38 34 良好 ±4 因此确定烘干温度 60, 整粒 24 目筛 4 总混小试采用塑料袋手工混合, 参照公司多个产品总混时间, 选择 10~15min 中间体含量检测, 与理论值基本相同, 说明混合 10~15min 能保证混合均匀 中间体的含量理论值约 80%, 多批样品的中间体含量见下表 : 批号 中间体含量 (%) 考虑大生产, 并参照成品的含量控制范围, 暂定中间体含量范围 74.6%--84.3% 5 压片片重控制 : 本品片重大于 0.5g, 按照中国药典附录片重差异应控制在 ±5.0%, 从小试情况看, 片重控制可以在 ±4.0%, 因此暂定压片阶段片重差异控制 ±4.0% 硬度 : 片硬度较低 ** kg/mm 2 时, 脆碎度大于 0.1%, 崩解时限 ( 片溶出时间 ) 较快约 15~20min; 硬度大于 ** kg/mm 2 设备负荷过大, 生产不可行 因此压片选择压力控制 **~**kg/mm 2 压片速度 : 压片小试采用 DP 亚力单冲压片机, 根据模具形状 设备运行情况 压片的片重检测, 压片速度控制在 10~20 片 /min 范围内, 能保证压片的质量 小试阶段的压片速度一直控制在此范围 6 包衣使用 BG1-5 高效包衣机, 热风温度 60 主机转速 4~7 转 /min 雾化压力约 0.5Mpa 包衣液喷液速度 ( 决定于蠕动泵速度 ) 均是参照经验参数 7 铝包使用 In-pack 铝包机, 热合温度 120~140 压缩空气压力约 0.6Mpa 均参照经验使用参数 (2) 放大生产各主要参数 1 预处理采用 FZB-150 粉碎整粒机将原辅料过筛, 筛网 60 目 2 预混 制粒大生产采用 LHS-200 湿法混合制粒机, 此设备常用预混搅拌 ***rpm 剪切 ***rpm, 21 / 97

48 时间 5min, 加入粘合剂制粒, 制粒参数 : 搅拌 **rpm; 剪切 **rpm; 雾化压力 0.25~0.35Mpa, 至软材中有明显颗粒时, 制粒结束 将制好的软材在线湿整粒, 筛网孔径 :3 3mm 启动流化床, 将湿颗粒在线传输至流化床 三批放大样品, 预混后在 5 个不同位置取样检测含量, 含量均匀性较好,RSD 在 0.2~0.4% 之间 确认预混搅拌 ***rpm 剪切 ***rpm 时间 **min, 湿整粒筛网 3*3mm 3 烘干 整粒放大生产采用 FZ-60 沸腾制粒机, 进风温度参照小试设定为 60, 干燥风量 Hz, 可根据物料流化状态 批量进行调整风量 干燥终点水分参照小试不超过 *%, 干燥终点根据水分测定结果确定 整粒机采用设备常用参数, 筛网 1.2*1.2mm, 根据整粒后颗粒状况可适当调整转速 4 总混大生产采用 HTD-200 料斗混合机, 固定转速 15rpm, 混合 min 在 5 个不同位置取样测定含量, 结果含量均匀度 RSD 均 <1% 干颗粒水分控制不超过 2.0%, 总混加入硬脂酸镁 二氧化硅, 因此中间体水分控制不超过 3.0% 5 压片大生产采用 ZPY-124 旋转式压片机, 硬度 片重控制参照小试, 三批样品硬度在 **~**kg/mm 2 之间, 片重差异能控制在 ±2% 之内, 压片速度控制 2~4 万片 / 小时, 能保证压片质量 考虑大生产压片硬度控制 **~**kg/mm 2, 片重差异控制 ±4% 6 包衣包衣采用 BG40B 高效包衣机, 热风温度 60, 主机转速 4~7 转 /min, 雾化压力约 0.5Mpa, 均是经验参数 三批放大样品按照上述参数包衣, 外观光洁 无粘连 本品为薄膜包衣, 增重控制不超过 3% 在包衣结束每批随即抽样 12 片, 检测溶出度, 证明包衣对溶出度没有影响 产品的溶出曲线批内均一性 批间重现性, 证明包衣工序对产品质量没有影响 因此包衣参数可行 7 铝包铝包机 DPS250DⅠ 自动泡罩包装机, 热合温度 120~160, 压缩空气压力 0.6Mpa, 均是经验参数 按照上述参数进行三批放大样品的铝包, 经密封性实验, 无一漏水, 确定铝包参数 (2) 按上述工艺放大生产 3 批样品, 同步工艺验证 主要项目的检测结果如下 : 卡培他滨片三批放大样品主要项目检测结果批号 **** 批 **** 批 **** 批 检查 含量测定 片重差异符合规定符合规定符合规定 有关物质 杂质 A 0.03% 0.04% 0.03% 杂质 B 未检出 0.01% 未检出 杂质 C 0.01% 0.01% 0.01% 其他单个杂质 0.04% 0.02% 0.02% 未知总杂质 0.15% 0.04% 0.03% 总杂质 0.18% 0.10% 0.07% 溶出度 96% 99% 100% 22 / 97

49 含卡卡培他滨 (C 15 5H 22 FN 3 O 6 ) 应为为标示量的 93.0~ % 98.5% 101.1% 101.6% (4) 溶出均一性性试验 自制卡培他他滨片批号 :****, 溶出介质 : 以 900ml 水为溶出介质 方法 : 中国国药典 2010 年版二部附录 X C 第二法 桨法 转速 : 50 转 /min 取样点 : 分别经 min 时, 取溶出液 10ml, 经 0.45μm 滤膜滤 过, 同时补加等等量同温溶剂剂 测定方法同 3.2.P 制剂相关特特性 --- 溶出行行为的溶出曲曲线测定方法法 结果见 表 12, 溶出曲线线见图 14 表 12 **** 批溶出出均一性测定定结果 (n=6) 编号 累积溶出度 (%) 10min 20min 30min 45min 60min 平均值 % RSD% 从 3 批样样品主要项目目的检测结果果看, 工艺较较为稳定 图 14 卡培培他滨片 ( 批号 :****) 累计溶出曲曲线图 23 / 97

50 (5) 批间溶出重重现性 为考察拟定定工艺的稳定定性, 对 3 批放大样品进进行溶出行为的考察 溶出介质 : 以 900ml 水为溶出介质 方法 : 中国国药典 2010 年版二部附录 X C 第二法 桨法 转速 : 50 转 /min 取样点 : 分别经 min 时, 取溶出液 10ml, 经 0.45μm 滤膜滤 过, 同时补加等等量同温溶剂, 测定方法同 3.2.P 制剂相关特性 --- 溶出行为为的溶出曲线线测定方法 结果见表 13, 溶出曲线见见图 15 表 13 三批批自制样品溶溶出度重现性试验结果 (n=6) 时间累积溶出出度 (%) (min) **** 批 **** 批 **** 批平均值 RSD% 图 15 三批自制制样品累计溶溶出曲线 f2 相似因子子比较 : 采用单点比比较法, 自制三三批卡培他滨滨片的在水中中溶出曲线的的每个时间点点得差异在 2~5% 之间,f2 相似因子在 65~83 (6) 与希罗达溶溶出行为比较对 **** 批与希罗达在在四种溶出介介质中的溶出出行为进行比比较, 确认生生产工艺 详见 3.2.P 制剂剂相关特性 (7) 生产工艺变变化汇总和批批分析汇总本品在研制制过程中, 随着批量的增加, 生产地点由实验室逐逐渐转为车间间生产线, 原辅辅料预处理 制粒 烘干整粒 压片 包衣 铝包包等设备也发发生了相应的的变化, 具体见见下表 : 24 / 97

51 生产工艺变化汇总 小试工艺 中试生产工艺 大生产工艺 主要变化 支持依据 批量 800 片 / 3.5 万片 批量增加 逐步放大 预处理 手工 60 目筛 / FZB-150 粉碎整粒机 60 目 制粒 20 目筛 / LHS-200 湿法混合制粒机筛网孔径 3*3mm 干燥 DGG-9053A 电热恒温鼓风干燥箱 60 终点判断 : 水分 2.0% / FZ-60 沸腾制粒机进风温度 60, 风量 30~40Hz, 根据物料流化状态适当调整终点判断 : 水分 2.0% 整粒 20 目筛 / ZL-450 干整粒机孔径 1.2mm 随批产量增加, 生 设备及参数 总混 压片 包衣 塑料袋手工混合 15min 中间体含量 79.61% / 休止角约 33 DP 亚力单冲压片机硬度 13~15kg/mm 2 片重差异 ±4% BG1-5 高效包衣机热风温度 60 主机转速 4~7 转 /min 雾化压力约 0.5Mpa / / HTD-200 料斗混合机混合 15min 中间体含量 79.7%~80.6% 休止角约 36 ZPY-124 旋转式压片机硬度 14~17kg/mm 2 片重差异 ±4% BG40B 高效包衣机热风温度 60 主机转速 4~7 转 /min 雾化压力约 0.5Mpa 随批产量增加, 生产地点从实验室转移到车间, 生产设备发生变化 产设备发生变化 中间体含量 休止角等参数与小试基本相同, 对压片工艺没有明显影响 溶出行为与原研产品基本一致 铝包 In-pack 铝包机热合温度 120~140 压缩空气压力约 0.6Mpa / DPS250DⅠ 自动泡罩包装机热合温度 120~160 压缩空气压力约 0.6Mpa 卡培他滨片批分析汇总 25 / 97

52 批号生产日期生产地点规模收率样品用途 样品质量 含量 (%) 杂质 (%) 溶出度 杂质 A 0.03 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 84.9% 工艺验证, 稳定性考察 98.5 杂质 B 未检出 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.04 未知总杂 0.15 符合规定 总杂 0.18 杂质 A 0.04 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 89.7% 工艺验证, 稳定性考察 杂质 B 0.01 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.02 未知总杂 0.04 符合规定 总杂 0.10 杂质 A 0.03 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 88.9% 工艺验证, 稳定性考察 杂质 B 未检出 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.02 未知总杂 0.03 符合规定 总杂 0.07 **** 批 连云港市新浦区 3.5 万片 82.4% 生产现场核查 杂质 A 0.10 符合规定 26 / 97

53 巨龙北路 8 号九车间 杂质 B 0.01 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.03 未知总杂 0.08 总杂 0.20 杂质 A 0.08 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 85.2% 生产现场核查 98.1 杂质 B 0.02 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.05 未知总杂 0.08 符合规定 总杂 0.19 杂质 A 0.08 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 89.7% 生产现场核查 杂质 B 0.02 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.05 未知总杂 0.08 符合规定 总杂 / 97

54 P.2.4 包装材料 / 容器 项目包装容器配件 注 1 包材类型 包材生产商 聚氯乙烯 / 聚偏二氯乙烯固体药用复合硬片 (PVC/PVDC) 江苏琼花高科技股份有限公司 药品包装用铝箔 (PTP) 江苏中金玛泰医药包装有限公司 包材注册证号国药包字 国药包字 不适用 包材注册证有效期至 2015 年 2 月 11 日至 2011 年 10 月 9 日 包材质量标准编号 YBB YBB 注 1: 铝塑泡罩包装, 组成为 : PVC/PVDC/ 铝 包材的检验报告 ( 包材生产商 ) 见下页 (2) 参照对照药品希罗达的包装, 选择铝塑包装 铝塑包装为固体制剂常用的包装形式, 便于携带, 减少药品携带和服用过程中的污染, 对水 气 光具有良好的阻隔性能 (3) 卡培他滨片直接接触药品的包装材料为聚氯乙烯 / 聚偏二氯乙烯固体药用复合硬片和药品包装用铝箔, 为固体制剂常用的包装材料, 具有良好的防潮 抗氧化功能 本品稳定性试验所用样品均采用铝塑包装, 经 40±2 /RH75±5% 加速 6 个月试验 30±2 /RH65±5% 长期留样 12 月稳定性试验考察, 质量稳定 结果表明, 本品选择的包装材料是合理的, 能满足贮藏 使用要求 28 / 102

55 29 / 102

56 P.2..5 相容性本品为片剂, 无附带溶剂或者给药药装置, 因此不进行该项目的研究 30 / 102

57 本部分参考文献 : 1 FDA 网站希罗达说明书 2 希罗达日文说明书 3 美国药典 USP32 版中卡培他滨片标准 4 FDA 网站卡培他滨片溶出曲线数据 5 希罗达处方中乳糖用量 3.2.P.3 生产 P.3.1 生产商 生产商的名称 : 江苏正大天晴药业股份有限公司注册地址 : 江苏省连云港市新浦区巨龙北路 8 号电话 : 传真 : 生产地址 : 江苏省连云港市新浦区巨龙北路 8 号电话 : 传真 : P.3.2 批处方 成分用量 % 过量加入 作用 执行标准 片芯 卡培他滨 17.5kg 无主药企业标准 乳糖 1890g 8.67 无 稀释剂 中国药典 2010 年版 微晶纤维素 1575g 7.22 无 稀释剂 JX 羟丙甲纤维素 (5cps) 约 315g 1.44 无粘合剂 JX 中国药典 2010 年版 31 / 102

58 交联羧甲基纤维素钠 210g 0.96 无崩解剂 JX 二氧化硅 210g 0.96 无润滑剂中国药典 2010 年版 硬脂酸镁 105g 0.48 无润滑剂中国药典 2010 年版 包衣胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 纯化水 *( 工艺中使用到并最终去除的溶剂 ) 655g / 无包衣粉沪 Q/WS g / 无包衣溶剂中国药典 2010 年版 共制成 3.5 万片 注 : 纯化水为粘合剂配制用溶剂和包衣粉的分散介质, 在工艺过程中去除本品中原辅料不存在过量投料现象 P.3.3 生产工艺和工艺控制 (1) 工艺流程图 : 32 / 102

59 卡培他滨 微晶纤维素 乳糖 交联羧甲基纤维素钠 60 目过筛 60 目过筛 60 目过筛 3% 羟丙基甲基纤维素溶液 混合制粒 60 干燥 干 燥 二氧化硅 整 粒 时间 :15 分 总 混 硬脂酸镁 压 片 中间体检验 片重差异 :±4.0% 内包材料 内包装 外包材料 外包装 30 万级 检 验 入 库 (2) 工艺描述以工艺验证批 **** 批为例 (3.5 万片 / 批 ): 8 原辅料预处理工序 9 将卡培他滨 乳糖 微晶纤维素分别过 60 目筛 制粒工序 粘合剂的制备 : 按羟丙基甲基纤维素 (5cps): 纯化水 =3:97(W:W) 的比例配制成 3% 的溶液 将过筛后卡培他滨 乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠加入湿法混合制粒机中, 进行预混, 预混参数 : 搅拌 **rpm, 剪切 **rpm, 时间 **min 预混结束加入黏合剂进行制粒, 33 / 102

60 制粒参数 : 搅拌 **rpm; 剪切 **rpm; 雾化压力 0.25~0.35Mpa, 至软材中有明显颗粒时, 制粒结束 将制好的软材在线湿整粒, 筛网孔径 :3 3mm 启动流化床, 将湿颗粒在线传输至流化床 10 干燥工序 使用沸腾干燥机进行干燥, 进风温度为 60, 干燥风量设定 30~40HZ, 应使全部颗粒应整体翻动, 必要时调整风量 用红外快速水分测定仪测定水分, 水分 2.0%, 干燥结束, 收料 11 整粒工序 将烘干后的干颗粒进行在线整粒, 筛网孔径 1.2mm 12 总混工序 将整粒后的干颗粒 硬脂酸镁 二氧化硅于混合机中混合 15 分钟, 取样检测中间体含量 水分 水分 3.0%, 中间体含量含卡培他滨应为 76.0%--84.0% 13 压片工序 根据中间体含量, 折算标准片重, 压片 片重差异控制 ±4.0%; 压力范围 **~**kg/mm 2 14 包衣工序 按胃溶型薄膜包衣预混剂 : 纯化水 =1:6.7(W:W) 的比例配制包衣液 包衣锅主机转速控制在 4~7 转 /min 包衣机热风温度设为 65, 预热至出风温度 48 开始包衣 蠕动泵转速 5~10rpm, 雾化压力 0.40~0.60Mpa, 喷枪到片床距离控制在 20~40cm, 喷射角度与片床平面成 90 度, 包衣过程控制负压在 60~100pa 包衣过程中出风温度控制在 48 ~55 之间 包衣增重约约 3.0% 9 包装工序 铝塑包装参数设定 : 热合温度设定为 140, 压缩空气压力 0.6Mpa, 可根据室温和铝塑包装材料的不同, 可适当上下调整设定温度, 密封合格为宜 包装规格 :12 片 / 板,11 板 / 盒,25 板 / 盒 (3) 主要的生产设备 生产设备型号生产厂家生产能力 湿法混合制粒机 LHS-200 迦南科技集团 60kg/ 批次 沸腾制粒机 FZ-60 迦南科技集团 30kg/ 批次 干整粒机 ZL-450 迦南科技集团 - 料斗混合机 HTD-200 迦南科技集团 60kg/ 批次 旋转式压片机 ZPY-124 上海天和制药机械厂 6 万片 / 小时 高效包衣机 BG40B 北京航空制造工程研究所 40kg/ 批次 自动泡罩包装机 DPS250DⅠ 江南包装机械有限公司 15 万片 / 小时 (4) 大生产的拟定规模 : 我公司卡培他滨片注册批规模最大为 3.5 万片 / 批, 拟定的大生产批量为 2.5 万片 ~7 万片 P.3.4 关键步骤和中间体的控制 (1) 关键步骤及其工艺参数控制范围 34 / 102

61 工序 检查项目 合格标准 预混 搅拌 **rpm, 剪切 **rpm, 时间 **min 制 粒 制粒 搅拌 **rpm; 剪切 **rpm; 雾化压力 0.25~0.35Mpa, 至软材中有明显颗粒时, 制粒结束 湿颗粒整粒 筛网孔径 :3 3mm 干燥进风温度 60 干 燥 风量 30~40Hz, 应使全部颗粒应整体翻动, 必要时调整风量 干燥终点 以颗粒水分检测结果为准, 颗粒水分控制在 2.0% 整 粒 筛网目数 mm 混 合 混合时间 ** 分钟混合转速 15rpm 性状 白色或类白色颗粒和粉末 中间体 卡培他滨含量 76.0%--84.0% 水 分 3.0% 素片外观 表面完整光洁, 边缘整齐 压 片 片重差异 ±4% 硬 度 **~**kg/mm 2 包衣 包衣参数 包衣增重约 3.0% 外观 包衣锅转速 4-7 转 / 分 ; 包衣机热风温度设为 65, 预热至出风温度 48 开始包衣 蠕动泵转速 5~10rpm, 雾化压力 0.40~ 0.60Mpa, 喷枪到片床距离控制在 20~40cm, 喷射角度与片床平面成 90 度, 包衣过程控制负压在 60~100pa 包衣过程中出风温度控制在 48 ~55 之间 色泽均匀, 表面光滑, 无粘连 无包衣液脱落等现象 根据实验小试, 放大 3 批工艺验证的参数, 制定各工序控制参数标准控制 ; 并根据工艺验证, 缩小中间体含量控制范围 (2) 中间体的控制检查项目方法合格标准 性状目测观察白色或类白色颗粒和粉末 水分 水分测定法操作规程 Q/SOP % 含量 液相色谱法操作规程 Q/SOP 含卡培他滨应为 74.6%--84.3% 本品中间体含量的测定方法同卡培他滨片的含量测定方法, 方法学研究参照 3.2.P.5.3 分析方法的验证 --- 含量方法学验证 1. 水分 1.1 仪器与用具 : 快速红外水分测定仪 1.2 操作方法 : 取供试品 2g, 置快速红外水分测定仪中, 依法测定, 从仪器显示屏上直接读取供试品中水分的含量 1.3 限度 : 应小于 3.0% 2. 中间体含量测定 2.1 试剂与试液 : 甲醇 乙腈 醋酸 卡培他滨对照品 2.2 仪器与用具 : 电子分析天平 十八烷基硅烷键合硅胶柱 高效液相色谱仪 量筒 容量瓶 2.3 流动相的配制 : 流动相 A:0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5); 流动相 B: 甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5); 按下表梯度洗脱 : 时间流动相 A (%) 流动相 B (%) / 102

62 供试品溶液的配制 : 取供试品适量 ( 约相当于卡培他滨 15mg), 置 25ml 量瓶中, 加溶 剂 [ 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)] 适量, 超声 5 分钟, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上 层离心液作为供试品溶液 ( 配制 2 份 ) 2.5 对照品溶液 : 精密称取经水分测定的卡培他滨对照品适量, 加溶剂溶解并定量稀释制成 每 1ml 中约含 0.6mg 的溶液, 作为对照品溶液 ( 配制 2 份 ) 2.6 色谱条件与系统适用性试验 : 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ; 流动相 A 为 0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5), 流动相 B 为甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5), 流速为每分钟 1.0ml, 线性梯度洗脱 ; 柱温 40 ; 样品温度 5 ; 检测波长为 250nm 理论塔板数按卡培他滨峰计算不低于 操作方法 : 照 Q/SOP 高效液相色谱法操作规程 检测, 精密量取对照品溶液 10μl, 分别注入液相色谱仪 ( 一份进 2 针, 一份进 3 针 ), 在系统适用性试验符合上述要求的条件下, 调节检测灵敏度, 使对照品溶液主峰全量程显示 ; 再精密量取供试品溶液 10μl, 注入液相色谱仪 ( 每份各进 2 针 ), 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算, 即得 C对照 ( 1 水对照 %) 对照品含量 % f A 2.8 计算公式 :(1) 对照式中 : f 校正因子 ; C 对照 对照品溶液的浓度,mg/ml; A 对照 对照品溶液主峰的峰面积 ; 水对照 % 对照品所含水分的百分数 f 平均 A供试品 (2) 含量 % 100% C供试品式中 : f 平均 平均校正因子 ; C 供试品 供试品溶液的浓度,mg/ml; A 供品试 供试品溶液主峰的峰面积 P.3.5 工艺验证和评价 卡培他滨片工艺验证方案 ( 编号 :YZ , 版本号 :01) 和工艺验证报告 ( 编号 : YZ , 版本号 :01), 详见附件二 三 我公司于 2010 年 3 月 30 日 ---4 月 1 日在本公司九车间进行三批卡培他滨片 ( 批号 : **,**,**) 放大, 每批配制量 3.5 万片, 并同时对预处理工序 制粒工序 烘干工序 总混工序 压片工序 包衣工序 铝塑包装工序等关键的工艺步骤进行验证 验证总结如下 : 工序验证结果 预混制粒工序 烘干 在制粒机中干粉预混 5min 后, 在 5 个不同位置取样, 每个位置取样 2g, 检测各取样点样品含量 检测结果 : 各取样点的含量均匀性较好,RSD 均在 0.2%~0.4% 之间通过对烘干过程中水分的监测, 从 30 分钟开始每隔 10 分钟取样检测水分, 直至生产结束, 可以看出颗粒的水分随着烘干时间的延长, 水分成梯度下降, 36 / 102

63 总混 压片 包衣 铝塑包装 并且 3 批数据稳定, 说明现行的生产设备和生产工艺满足生产要求, 并且在 50 分钟时水分均符合要求 含量 : 在总混 5 分钟 10 分钟 15 分钟时在 5 各不同位置取样, 检测中间体含量, 结果显示三批样品的中间体含量均匀性较好, 其 RSD 值均在 0.2%~ 0.4% 结果表明, 总混时间控制为 * 分钟, 可以确保物料混合均匀 水分 : 在总混结束后在 5 个不同位置取样, 各取样点 2g, 对总混工序中的物料水分进行检查 结果表明 : 三批产品的水分均在 1.4%~1.6% 之间 结果表明 : 中间体的水分控制在 3.0% 以内, 符合工艺规定 堆密度和休止角 : 在总混结束后在混合机中部取样 100g, 检测样品的堆密度和休止角 结果显示 : 三批中间体松密度均在 40g/100ml~65g/100ml 范围之内, 三批中间体休止角均在 30 ~40 范围之内, 物料的流动性良好, 保证压片工序顺利进行 在压片过程中, 检测卡培他滨片的片重差异 硬度 溶出度 脆碎度 片重差异 : 在压片运行正常以后, 每 15 分钟取 20 片, 直至生产结束, 对其片重差异进行检查 三批样品的片重差异结果显示, 最大正偏差为 0.41, 最大负偏差为 0.42 表明卡培他滨片的片重差异在可控范围之内, 符合工艺要求硬度 : 在压片运行正常以后, 每 15 分钟取 6 片, 对其硬度进行检查 三批样品的硬度检查结果均在 **~**kg/mm 2, 符合工艺要求 溶出度 : 在压片开始阶段 中间阶段 结束阶段各取样 12 片, 检测样品的溶出度 三批样品的溶出度测定结果均在 90% 以上, 符合工艺要求 脆碎度 : 在压片开始阶段 中间阶段 结束阶段各取样 12 片, 检测样品的脆碎度 三批样品的脆碎度检测结果 : 减失重量均为 0.1%, 符合工艺要求 通过对压片过程中的片重差异 硬度 溶出度 脆碎度的测定, 可以看出, 压片设备, 以及中间体的颗粒性质能够满足工艺要求, 压片生产工艺稳定可靠, 并且为下一道包衣工序提供符合包衣要求的片剂 在包衣结束后随机抽取 12 片, 检测成品的溶出度 三批样品的溶出度均在 90% 以上, 符合工艺要求 在包装开始 结束阶段各取样 6 板, 检验密封性 三批均无一片渗水, 表明包装材料和包装设备以及包装工艺满足工艺要求 综上所述, 按照 卡培他滨片工艺规程 和 卡培他滨片工艺验证方案, 对连续生产的三批卡培他滨片进行验证, 各工序的各项数据均符合工艺要求, 生产过程中无偏差, 确认了各工序工艺关键参数 ; 按照此工艺条件生产的三批样品, 经检验, 各项检验结果均在可控的范围之内, 符合卡培他滨片质量标准 表明卡培他滨片既定的工艺参数符合工艺要求, 生产工艺能够生产要求, 具有良好的重现性和稳定性 3.2.P.4 原辅料的控制 成分生产商批准文号 / 注册证号质量标准 卡培他滨 连云港润众制药有限公司 37 / 102 同期申报 自拟质量标准 微晶纤维素日本旭化成株式会社注册证号 F***** JX***** 乳糖 上海华茂药业有限公司 沪卫药准字 (1998) 第 号 中国药典 2010 年版 注册证号陶氏化学公司羟丙甲基纤维素 F JX (5cps) 鲁药准字 (2005) 泰安瑞泰纤维素有限公司第 号 中国药典 2010 年版 交联羧甲基纤维素钠 美国 FMC Biopolymer,INC. 注册证号 JX

64 F 硬脂酸镁 湖州展望药业有限公司 浙药准字 F 号 中国药典 2010 年版 二氧化硅湖州展望药业有限公司浙药准字 F 中国药典 2010 年版 胃溶性薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 上海卡乐康薄膜包衣有限公司 沪卫药准字 (1998) 第 号 沪 Q/WS 江苏正大天晴药业股份纯化水 中国药典 2010 年版有限公司注 : 纯化水为粘合剂配制用溶剂和包衣粉的分散介质, 在工艺过程中去除 附 : 1) 卡培他滨原料药质量标准 检验报告书 2) 微晶纤维素生产商检验报告书及自检报告书 3) 乳糖生产商检验报告书及自检报告书 4) 羟丙甲纤维素 (5cps) 生产商检验报告书及自检报告书 5) 交联羧甲基纤维素钠生产商检验报告书及自检报告书 6) 硬脂酸镁生产商检验报告书及自检报告书 7) 二氧化硅生产商检验报告书及自检报告书 8) 胃溶型薄膜包衣预混剂生产商检验报告书及自检报告书 3.2.P.5 制剂的质量控制 P.5.1 质量标准 检查项目方法放行标准限度货架期标准限度 38 / 102

65 性状 目检 本品为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 本品为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 鉴别 检查 (1) (2) 有关物质 溶出度 微生物限度 其他 重量差异 含量测定 HPLC 峰保留时间 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ) IR 法 红外分光光度法操作规程 (Q/SOP ) 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ) 溶出度测定法操作规程 (Q/SOP ) 微生物限度检查法操作规程 (Q/SOP ) 中国药典 2010 年版二部附录 I A 中国药典 2010 年版二部附录 I A 液相色谱法操作规程 (Q /SOP ) 供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致 供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致 在 1760~1500cm -1 区间的 在 1760~1500cm -1 区间的红 红外光吸收图谱应与对照 外光吸收图谱应与对照品的 品的图谱一致 图谱一致 杂质 A 应 1.0% 杂质 A 应 1.0% 杂质 B 应 1.0% 杂质 B 应 1.0% 杂质 C 应 0.5% 杂质 C 应 0.5% 单个杂质应 0.1% 单个杂质应 0.1% 未知总杂应 0.5% 未知总杂应 0.5% 总杂质应 2.0% 总杂质应 2.0% 限度为标示量的 80% 限度为标示量的 80% 细菌数应 1000cfu/g 细菌数应 1000cfu/g 霉菌及酵母菌数 100cfu/g 霉菌及酵母菌数 100cfu/g 大肠埃希菌应不得检出 大肠埃希菌应不得检出 应完整光洁, 色泽均匀, 有 应完整光洁, 色泽均匀, 有 适宜的硬度和耐磨性 适宜的硬度和耐磨性 应为平均片重 (1±5%) 应为平均片重 (1±5%) 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 应为标示量的 93.0%~ 应为标示量的 93.0% ~ 105.0% 105.0% 注 : 卡培他滨片质量标准主要是参照 USP32/NF27 版中的卡培他滨片质量标准并结合自制样品的研究情况而制定的 在加速及长期稳定性试验中 ( 目前长期试验已完成至 12 个月 ), 各考察项均没有发现明显的变化趋势, 故目前暂定放行标准与货架期标准一致 P.5.2 分析方法 1. 性状目检 : 本品为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 2. 鉴别 2.1 试剂与试液 : 醋酸 甲醇 乙腈 溴化钾 卡培他滨对照品 2.2 仪器与用具 : 傅里叶变换红外仪 高效液相色谱仪 2.3 操作方法 在含量测定项下记录的色谱图中, 供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致 取供试品约 1~1.5mg 溴化钾约 200~300mg( 与供试品的比约为 200:1), 置玛瑙研钵中, 研磨均匀, 压制成透明的溴化钾片, 将溴化钾片放在红外光谱仪中, 照 Q/SOP 红外分光光度法操作规程 检测, 录制光谱图, 即得 供试品在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致 39 / 102

66 3 有关物质 3.1 试剂与试液 : 甲醇 乙腈 醋酸 杂质 A 杂质 B 杂质 C 卡培他滨对照品 3.2 仪器与用具 : 电子分析天平 十八烷基硅烷键合硅胶柱 高效液相色谱仪 量筒 容量瓶 移液管 3.3 流动相的配制方法 : 流动相 A:0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5); 流动相 B: 甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5); 按下表梯度洗脱 : 时间流动相 A (%) 流动相 B (%) 供试品溶液的配制 : 取供试品 10 片, 精密称定, 研细, 精密称取 19mg( 约相当于卡培他滨 15mg), 置 25ml 量瓶中, 加溶剂 [ 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)] 适量, 超声处理 5 分钟, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上清液作为供试品溶液 ( 配制 1 份 ) 3.5 对照溶液的配制 : 精密量取供试品溶液 1ml, 置 100ml 量瓶中, 加溶剂 [ 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)] 稀释至刻度, 摇匀, 再精密量取 1ml, 置 10ml 量瓶中, 加溶剂稀释至刻度, 作为对照溶液 ( 配制 1 份 ) 3.6 系统适用性试验溶液的配制 : 精密称取杂质 A B C 对照品各 12mg, 置 100ml 量瓶中, 加溶剂溶解并稀释至刻度, 摇匀, 精密量取 1ml 置 10ml 量瓶, 加溶剂稀释至刻度, 摇匀, 作为混合对照品溶液 ; 精密称取卡培他滨对照品 12mg, 置 20ml 量瓶中, 再精密量取混合对照品溶液 1ml, 置同一 20ml 量瓶中, 加溶剂溶解并稀释至刻度, 摇匀, 制成每 1ml 中分别含 0.6μg 0.6μg 0.6μg 和 0.6mg 的混合溶液, 作为系统适用性试验溶液 ( 配制 1 份 ) 3.7 色谱条件与系统适用性试验 : 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ; 流动相 A 为 0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5), 流动相 B 为甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5), 流速为每分钟 1.0ml, 线性梯度洗脱 ; 柱温 40 ; 自动进样器温度 5 ; 检测波长 250nm 系统适用性试验溶液的出峰顺序依次为杂质 A B 卡培他滨 杂质 C, 杂质 A 峰与杂质 B 峰的分离度应不小于 操作方法 : 照 Q/SOP 液相色谱法操作规程 测定, 精密量取对照溶液 10μl, 注入液相色谱仪 ( 进样 1 针 ), 在系统适用性试验符合上述要求的条件下, 调节检测灵敏度, 使主成分峰高为满量程的 15~25%; 再精密量取对照溶液和供试品溶液各 10μl 注入液相色谱仪 ( 各进样 1 针 ), 记录色谱图, 供试品溶液记录的色谱图中如有 A B C 杂质峰, 杂质 A B 的峰面积与校正因子的乘积不得大于对照溶液主峰面积的 10 倍 (1.0%), 杂质 C 的峰面积与校正因子的乘积不得大于对照溶液主峰面积的 5 倍 (0.5%), 其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积 (0.1%), 各未知杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的 5 倍 (0.5%), 杂质 A,B,C 经校正后的峰面积与未知总杂质的峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的 20 倍 (2.0%) 供试品溶液中峰面积小于对照溶液主峰面积 0.05 倍的杂质峰不计 ( 杂质峰校正因子 :A=1.05 B=0.81 C=0.91) A单个杂质 3.9 计算公式 : 单个杂质 % 0.1% A 对照主峰 A未知总杂未知总杂质 % 0.1% A 对照主峰 40 / 102

67 A总杂质总杂质 % 0.1% A对照主峰式中 :A 单个杂质 供试品溶液色谱图中最大未知单个杂质峰的峰面积 ( 用于计算单个杂质 ) 或供试品溶液色谱图中杂质 A B C 校正后的峰面积 ( 用于计算杂质 A 杂质 B 和杂质 C);; A 未知总杂 供试品溶液色谱图中未知杂质峰的峰面积之和 ( 不包括溶剂峰 ); A 总杂质 供试品溶液 A B 和 C 经校正后的峰面积与未知总杂质的峰面积的和 ( 不包括溶剂峰 ); A 对照主峰 对照溶液主峰的峰面积 3.10 限度 : 杂质 A 应 1.0%, 杂质 B 应 1.0%, 杂质 C 应 0.5%, 其他单个杂质应 0.1%, 各未知杂质的和应 0.5%, 总杂质应 2.0% 4 溶出度 4.1 试剂与试液 : 卡培他滨对照品 4.2 仪器与用具 : 溶出仪 紫外 - 可见分光光度计 量筒 注射器 容量瓶 移液管 4.3 供试品溶液 : 取供试品 6 片, 照 Q/SOP 溶出度测定法操作规程 检测, 以 900ml 水为溶出介质, 转速为每分钟 50 转, 依法操作, 经 30 分钟时, 取溶液适量, 滤过, 精密量取续滤液 2ml, 置于 50ml 量瓶中, 加水稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液 4.4 对照品溶液 : 取卡培他滨对照品约 16mg, 精密称定, 置 50ml 量瓶中, 加水溶解稀释至刻度, 精密量取 1ml, 置 20ml 量瓶中, 加水稀释至刻度, 作为对照品溶液 4.5 操作方法 : 取上述两种溶液, 照 Q/SOP 紫外- 可见分光光度法操作规程 检测, 在 304nm 的波长处分别测定吸光度, 计算每片的溶出量 A供试品 C对照品 对照品含量 % 4.6 计算公式 : 溶出度 %= 100% A C 式中 : 对照品 A 供试品 供试品溶液的吸光度 ; A 对照品溶液的吸光度 ; C 对照品 对照品 对照品溶液的浓度 (mg/ml); C 供试品 供试品溶液的浓度 (mg/ml); 4.7 限度 : 不小于标示量的 80% 5 其他片剂外观应完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 6 重量差异 6.1 仪器与用具 : 电子分析天平 镊子 6.2 操作方法 : 取供试品 20 片, 精密称定总重量, 求得平均片重后, 再分别精密称定每片的重量, 每片重量与平均片重相比较, 超出重量差异限度的不得多于 2 片, 并不得有 1 片超出限度的 1 倍 6.3 限度 : 平均片重 (1±5%) 7 微生物限度 7.1 细菌数 霉菌及酵母菌数检查 : 取供试品 10g, 加 ph7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液至 100ml, 置 45 水浴加热溶解, 混匀, 作为 1:10 的供试品, 照 Q/SOP 微生物限度检查法操作规程 检查 细菌数检测采用培养基稀释法 (1ml 平均加入 5 个皿, 每皿 0.2ml); 霉菌及酵母菌数检测采用平皿法 ( 每皿 1ml), 应符合规定 7.2 大肠埃希菌检查 : 取 1:10 供试液加入 500ml 胆盐乳糖培养基中, 照 Q/SOP 微生物限度检查法操作规程 大肠埃希菌检查; 应符合规定 7.3 限度 : 每 1g 供试品中细菌数不得过 1000 cfu 霉菌及酵母菌数不得过 100cfu, 不得检出大肠埃希菌 供试品 41 / 102

68 8 含量测定 8.1 仪器与用具 : 电子分析天平 十八烷基硅烷键合硅胶柱 高效液相色谱仪 量筒 容量瓶 移液管 8.2 试剂与试液 : 甲醇 乙腈 醋酸 卡培他滨对照品 8.3 流动相的配制方法 : 流动相 A:0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5); 流动相 B: 甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5); 按下表梯度洗脱 : 时间流动相 A (%) 流动相 B (%) 供试品溶液的配制 : 取供试品 10 片, 精密称定, 研细, 精密称取约 19mg( 约相当于卡培他滨 15mg), 置 25ml 量瓶中, 加溶剂 [ 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)] 适量, 超声处理 5 分钟, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上清液作为供试品溶液 ( 配制 2 份 ) 8.5 对照品溶液的配制 : 精密称取卡培他滨对照品约 15mg, 置 25ml 量瓶中, 加溶剂溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品溶液 ( 配制 2 份 ) 8.6 色谱条件与系统适用性试验 : 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ; 流动相 A 为 0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5), 流动相 B 为甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5), 流速为每分钟 1.0ml, 线性梯度洗脱 ; 柱温 40 ; 自动进样器温度 5 ; 检测波长 250nm 理论塔板数按卡培他滨峰计算不低于 操作方法 : 照 Q/SOP 液相色谱法操作规程 检测, 精密量取对照品溶液 10μl, 分别注入液相色谱仪 ( 一份进 2 针, 一份进 3 针 ), 在系统适用性试验符合上述要求的条件下, 调节检测灵敏度, 使对照品溶液主峰全量程显示 ; 再精密量取供试品溶液 10μl, 注入液相色谱仪 ( 每份各进 2 针 ), 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算, 即得 C对照品 对照品含量 % 8.8 计算公式 :(1) f A对照品式中 : f 校正因子 ; C 对招品 对照品溶液的浓度,mg/ml; A 对照品 对照品溶液主峰的峰面积 f 平均 A供试品 W平均片重 (2) 含量 % 100% C供试品 规格式中 : f 平均 平均校正因子 ; C 供试品 供试品溶液的浓度,mg/ml; A 供品试 供试品溶液主峰的峰面积 ; W 平均片重 平均片重 8.9 限度 : 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 应为标示量的 93.0%~105.0% 42 / 102

69 P.5.3 分析方法的验证 分析方法验证主要根据中国药典二部附录 ⅪⅩA 药品质量标准分析方法验证指导原则的要求进行, 对本品有关物质 含量测定 溶出度和微生物限度等进行了方法学验证 ; 性状和片重差异等项目参考中国药典 2010 版凡例和附录收载方法 具体方法学验证内容总结如下 : (1) 有关物质方法学验证总结项目 波长选择 专属性 系统适用性 检测限 溶液稳定性 耐用性 43 / 102 验证结果 (1) 卡培他滨与片剂的强制降解产物杂质 A 杂质 B 和杂质 C 在 250nm 左右均有较大吸收 (2) 辅料在 250nm 处基本无吸收, 不干扰样品测定 (1) 卡培他滨主峰与已知杂质 ( 起始原料, 杂质 A B C D 和杂质 E) 之间达到良好分离 ; (2) 卡培他滨片强制降解 ( 酸 碱 高温 氧化及光降解 ) 产物之间达到良好分离且峰纯度符合要求 出峰顺序依次为杂质 A B 卡培他滨和杂质 C, 杂质 A 峰与杂质 B 峰的分离度应不小于 1.0 卡培他滨检测限 0.21ng; 杂质 A 检测限 0.48ng; 杂质 B 检测限 0.31ng; 杂质 C 检测限 0.32ng 供试品溶液室温放置 小时杂质峰个数及含量没有变化, 结果显示有关物质测定溶液至少在 12 小时内是稳定的 将色谱条件中的参数作适度变化后, 如色谱条件中的流速 柱温及色谱柱的厂家等参数作微小调整对测定结果基本不会产生显著性影响, 方法的耐用性是可以接受的 有关物质方法学验证 采用高效液相色谱法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 Ⅴ D) 测定, 参照卡培他滨原料质 [1] 量标准以及美国药典 USP32 版卡培他滨片质量标准中有关物质检查方法, 确定了卡培他 滨片色谱条件, 具体如下 : 仪器 : 泵 :Waters e2695 四元泵 检测器 :Waters 2489 紫外吸收检测器 Waters 2998 二极管阵列检测器 工作站 :Empower 2 软件 色谱柱 :Welch Materials XB C-18( mm, 5μm) 流动相 :0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5) 为 A 相 甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5) 为 B 相 按下表进行线性梯度洗脱, 程序如下 : 时间 ( 分钟 ) 流动相 A (%) 流动相 B (%) 柱温 : 40 ; 自动进样器温度 :5 ; 流速 :1.0ml/min; 检测波长 : 250nm 溶剂 : 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)( 除另有规定外, 以下用到的溶剂均为此溶剂 ) 检测波长的选择 (1) 根据卡培他滨原料的研究结果, 选择 250 nm 作为检测波长, 具体试验详见原料资

70 料 3.2.S.4.3 分析方法的验证 (2) 片剂的破坏性试验结果与原料基本一致, 降解产物杂质 A B C 在 250nm 左右均有较大吸收 (3) 辅料在 250nm 处基本无吸收, 不干扰样品测定 因此, 本方法采用 250nm 作为检测波长比较合理, 并对已知杂质采用加校正因子的主成分自身对照法进行控制 专属性试验 杂质定位与分离试验 卡培他滨片与其原料药的有关物质测定条件一致, 已知杂质分离情况相同 出峰顺序依次为 5- 氟胞嘧啶 ( 原料合成的起始原料 ) 杂质 A B D( 原料中间体 ) 卡培他滨 C 和 E( 原料中间体 ), 并达到完全分离 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 3.2.S.4.3 分析方法的验证 -(1) 有关物质方法学验证 辅料干扰试验 称取卡培他滨片所用空白辅料 ( 按处方配比 ) 适量, 加溶剂超声处理并稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上清液 10μl 注入液相色谱仪中, 记录色谱图 结果表明 : 空白辅料不干扰本品有关物质测定 图谱见附图 ***** 卡培他滨片强制降解试验 ( 卡培他滨片批号 :100225) 卡培他滨片强制降解试验及物料平衡表分别见下 强制降解试验表 类型条件结果附图 酸破坏 碱破坏 高温破坏 氧化破坏 光照破坏 1mol/L 盐酸溶液 10ml, 室温 30 分钟 1mol/L 氢氧化钠溶液 10ml,60 20 分钟 小时 10% 双氧水溶液 10ml,50 60 分钟 溶剂溶解, 光照箱内 (4500lx±500lx) 照射 各杂质峰与主峰都能有效分离, 主要降解杂质峰保留时间为 3.637min( 杂质 B), 1-4~1-6 辅料经破坏后无干扰, 主峰色谱峰纯度符合要求 各杂质峰与主峰都能有效分离, 主要降解杂质峰保留时间分别为 3.277min( 杂质 A) 1-7~1-9 和 3.637min( 杂质 B), 辅料经破坏后无干扰, 主峰色谱峰纯度符合要求 各杂质峰与主峰都能有效分离, 主要降解杂质峰保留时间分别为 3.277min( 杂质 A) 1-10~1-12 和 min( 杂质 C), 辅料经破坏后无干扰, 主峰色谱峰纯度符合要求 各杂质峰与主峰都能有效分离, 主要降解杂质峰保留时间为 3.300min( 杂质 A), 1-13~1-15 辅料经破坏后无干扰, 主峰色谱峰纯度符合要求 各杂质峰与主峰都能有效分离, 没有产生 1-16~1-18 较大降解杂质, 辅料经破坏后无干扰, 主 44 / 102

71 24 小时峰色谱峰纯度符合要求 未破坏 / / 1-19~1-20 破坏性试验物料平衡结果样品酸破坏碱破坏高温破坏氧化破坏强光破坏 C(mg/ml) A 总 ( 校正后 ) A 总 ( 校正后 )/C 物料平衡 (%) 上表中根据 A 总 ( 校正后 )/ C [A 总 ( 校正后 ) 代表校正后的供试品溶液总峰面积, 其中杂质 A B 和 C 的峰面积分别乘以校正因子 和 0.91,C 代表供试品溶液的浓度 ] 来计算单位浓度的响应值, 以未破坏溶液 ( 见附图 ****) 的响应值为基数 ( 物料回收为 100%), 计算破坏溶液的物料回收率, 衡量物料是否平衡, 结果所有破坏试验物料基本平衡 1.3 系统适用性精密称取杂质 A B C 和卡培他滨对照品各适量, 用溶剂溶解并稀释制成每 1ml 中分别含 0.6μg 0.6μg 0.6μg 和 0.6mg 的混合溶液作为系统适用性试验溶液, 照上述色谱条件, 精密量取 10μl, 注入液相色谱仪, 记录色谱图 作定位已知杂质和计算物料平衡情况用, 图谱见附图 *** 1.4 检测限卡培他滨的检测限是 0.21ng; 杂质 A 的检测限是 0.48ng; 杂质 B 的检测限是 0.31ng; 杂质 C 的检测限是 0.32ng 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 -3.2.S.4.3 分析方法的验证 待测溶液稳定性试验 据原料的试验证明, 用水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5) 为溶剂, 原料待测溶液较为稳定, 对制剂的待测溶液稳定性做进一步研究 取小试样品 10 片, 置研钵中研细, 取细粉适量 ( 约相当于卡培他滨 15mg), 精密称定, 置 25ml 量瓶中, 加溶剂适量, 超声处理 5 分钟, 并稀释至刻度, 摇匀, 取上述溶液, 置具塞离心管中, 离心至澄清, 取上清液, 作为供试品溶液 照上述色谱条件, 于 0h 2 h 4 h 6 h 8 h 12 h 精密量取 10μl 注入液相色谱仪, 记录色谱图, 考察有关物质的变化情况 ( 面积归一化法 ), 试验结果见下表 待测溶液稳定性结果 测定时间 ( 小时 ) 杂质峰面积 总杂 (%) 杂质个数 结果表明 : 卡培他滨片有关物质待测溶液在 12 小时内稳定 耐用性 将色谱条件中的参数作适度变化后, 如色谱条件中的流速 柱温及色谱柱的厂家等参数作微小调整对测定结果基本不会产生显著性影响, 方法的耐用性是可以接受的 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 -3.2.S.4.3 分析方法的验证 -(1) 有关物质方法学验证 (2) 含量测定方法学验证总结项目 验证结果 45 / 102

72 专属性 线性和范围 定量限 准确度 精密度 溶液稳定性 耐用性 含量测定方法学验证 见有关物质方法学验证总结专属性项 在 1.196~11.960μg 范围内与峰响应值呈显著线性关系 设卡培他滨进样量为 X, 峰面积为 Y, 得线性方程 :Y= X , 相关系数 r= 定量限为 0.62ng, 符合检测要求 回收率均在 98.36%~99.40% 之间, 平均回收率为 98.83%, RSD(n=9) 为 0.34% 含量测定重复性试验平均含量为 100.2%,RSD(n=6) 为 0.31%; 中间精密度试验平均含量为 100.1%,RSD(n=12) 为 0.32% 供试品溶液放置 和 12 小时进样主成分峰面积无明显变化,RSD(n=6) 为 0.71%, 结果显示含量测定溶液至少在 12 小时内保持稳定 将色谱条件中的参数作适度变化后, 如色谱条件中的流速 柱温及色谱柱的厂家等参数作微小调整对测定结果基本不会产生显著性影响, 方法的耐用性是可以接受的 采用高效液相色谱法测定, 参照卡培他滨原料质量标准以及美国药典 USP32 版卡培他滨片质量标准中的含量测定方法, 具体色谱条件如下 : 仪器 1: 泵 :Waters e2695 四元泵 检测器 :Waters 2489 紫外吸收检测器 Waters 2998 二极管阵列检测器 工作站 :Empower 2 软件 仪器 2: 泵 : 岛津 LC-20AD 系列泵 检测器 : 岛津 SPD-20A 紫外吸收检测器 工作站 :LCsolution 工作站 色谱柱 :Welch Materials XB C-18( mm, 5μm) 流动相 :0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5) 为 A 相 甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5) 为 B 相 按下表进行线性梯度洗脱, 程序如下 : 时间 ( 分钟 ) 流动相 A (%) 流动相 B (%) 柱温 : 40 ; 自动进样器温度 :5 ; 流速 :1.0ml/min; 检测波长 :250nm 溶剂 : 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)( 除另有规定外, 以下用到的溶剂均为此溶剂 ) 专属性试验 该含量测定方法与有关物质测定方法一致, 专属性考察情况参见 有关物质验证 线性与范围 根据卡培他滨原料药的研究, 卡培他滨进样量在 1.196μg~11.960μg 范围内与其峰响应值呈显著线性关系, 线性方程为 :Y= X ,r= 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 3.2.S.4.3 分析方法的验证 -(2) 含量测定方法 46 / 102

73 学验证 1.3 定量限卡培他滨的定量限是 0.62ng 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 -3.2.S.4.3 分析方法的验证 -(2) 含量测定方法学验证 1.4 回收率试验 ( 准确度试验 ) 对照品溶液配制 : 取经水分测定的卡培他滨对照品适量, 精密称定, 加溶剂溶解并稀释制成每 1ml 中约含卡培他滨 0.6mg 的溶液, 摇匀, 作为对照品溶液 ; 供试品溶液配制 : 称取卡培他滨样品 ( 批号 :091202, 含量 :100.2%) 约 4.00g 5.00g 6.00g( 分别约为处方量的 8 倍 10 倍 12 倍 ), 分别置于 号研钵中, 再分别加入空白辅料 1.25g( 约为处方量的 10 倍 ), 混匀 ; 从 1 号研钵中精密称取细粉三份 ( 约相当于卡培他滨 12mg); 从 2 号研钵中精密称取细粉三份 ( 约相当于卡培他滨 15mg); 从 3 号研钵中精密称取细粉三份 ( 约相当于卡培他滨 18mg) 将上述 9 份细粉分别置于 25ml 量瓶中, 加溶剂适量, 超声处理 5 分钟, 使卡培他滨溶解, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀 ; 取上述溶液, 离心, 取上清液, 分别作为卡培他滨片的回收率 80% 100% 120% 的供试品溶液 分别精密量取对照品溶液及各供试品溶液 10μl, 注入色谱仪, 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算 回收率试验 样品 样品称样量 (mg) 卡培他滨称取量 (mg) 测得量 (mg) 回收率 (%) % % % 结论 : 本方法回收率较高 精密度试验 日内精密度 取片重差异项下的小试样品 20 片, 研细, 精密称取适量 ( 约相当于卡培他滨 15mg), 置 25ml 量瓶中, 加溶剂适量, 超声处理 5 分钟, 使卡培他滨溶解, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上清液作为供试品溶液, 重复制备 6 份供试品溶液 ; 照上述色谱条件, 精密量取上述供试品溶液 10μl, 注入液相色谱仪, 记录色谱图 ; 另取水分测定的卡培他滨对照品 ( 批号 :091208) 适量, 精密称定, 加溶剂溶解并稀释制成每 1ml 中约含 0.6mg 的溶液, 同法测定 按外标法以峰面积计算 日内精密度试验结果 No 含量 (%) 平均含量 (%) / 102

74 RSD(%) 0.31 结论 : 本方法日内精密度良好 中间精密度试验 取本品, 按照 日内精密度试验 项下方法, 由两个不同的分析人员使用不同的仪器进行测定, 分别配置 6 份相同浓度的供试品溶液, 所得 12 个含量数据的相对标准偏差应不大于 2.0%, 结果见下表 卡培他滨片中间精密度试验结果 分析人员 仪器 含量 (%) 平均含量 (%) RSD % Ⅰ 仪器 A Ⅱ 仪器 B 结论 : 本方法中间精密度良好 待测溶液稳定性试验 取小试样品 10 片, 研细, 精密称取适量 ( 约相当于卡培他滨 15mg), 置 25ml 量瓶中, 加溶剂适量, 超声处理 5 分钟, 使卡培他滨溶解, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上清液作为供试品溶液, 照上述色谱条件, 于 0h 2 h 4 h 6 h 8 h 12 h 精密量取 10μl 注入液相色谱仪, 记录色谱图, 考察主峰峰面积变化 试验结果见下表 待测溶液稳定性试验结果测定时间 0 小时 2 小时 4 小时 6 小时 8 小时 12 小时 峰面积 平均峰面积 / RSD(%) 0.71 结论 : 待测溶液在 12 小时内稳定 耐用性 含量测定与有关物质测定条件一致, 耐用性考察情况参见 有关物质验证 1.6 (3) 溶出度方法学验证总结项目验证结果 溶出方法的选择 溶出介质与体积的选择 测定波长的选择 辅料干扰试验 转速的的选择 精密度 选用 900ml 的水作为溶出介质 对照品紫外 - 可见分光光度法扫描结果显示 : 本品在 304nm 的波长处有最大紫外吸收 辅料在测定波长 304nm 处无吸收, 对测定结果无干扰 溶出度试验的转速选择 50rpm 溶出精密度试验 6 次重复测定吸光度值 RSD(n=6)=0.45%;

75 溶出介质中的稳定性 线性和范围 准确度 卡培他滨片溶出度方法学验证 溶出度测定法的确定 仪器 溶出溶液放置 和 8 小时吸光度值无明显变化,RSD (n=6) 为 0.25%, 结果显示溶出液在室温条件下至少在 8 小时内保持稳定 在浓度 2.50μg/ml~25.0μg/ml 的范围内与吸收值呈良好的线性关系 设卡培他滨进样量为 x, 峰面积为 y, 得线性方程 :y =0.0261x+0.001, 相关系数 r= 回收率均在 99.30%~101.29% 之间, 平均回收率为 %, RSD(n=9) 为 0.64% ZRS-8 智能溶出仪 : 天津大学无线电厂 UV2450 紫外 - 可见分光光度计 : 岛津公司 溶出方法的选择 参照片剂溶出度测定的一般方法, 本品选用桨法操作 ( 中国药典 2005 年版二部附录 XC 第二法 ) 参照 USP32/NF27 版中卡培他滨片的质量标准 [1], 以 900ml 水为溶出介质, 温度 37 ; 转速为每分钟 50 转 ; 经 30 分钟时取样 ; 采用紫外 - 可见分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二部附录 ⅣA) 测定 溶出介质和溶出介质体积的选择 溶出介质的体积选择, 主要是使药物符合漏槽条件, 使溶出到介质中的药物很快被介质稀释带走, 药物的溶出不受溶出介质中药物浓度的影响 一般大杯法的溶出介质体积在 500~1000ml, 以 900ml 为最普遍 同时参照 USP32/NF27 版卡培他滨片标准, 溶出介质采用 900ml 的水 卡培他滨原料在水中略溶, 在 900ml 的水中能完全溶解 ; 故溶出介质的体积选用 900ml 的水 吸收波长的选择 取卡培他滨对照品适量, 加水溶解并稀释, 制成每 1ml 中约含 16µg 的溶液, 在 200~400nm 进行紫外扫描, 扫描结果见附图 1-1 结果表明 : 本品在 304nm 的波长处有最大吸收 因此, 我们可以选用 304nm 作为溶出度的测定波长 辅料干扰试验 取空白辅料约 32mg, 置 100ml 量瓶中, 加适量水超声充分混合后, 加水稀释至刻度 ; 取上述溶液适量, 经 0.45µm 滤膜过滤, 取续滤液 3ml 至 50ml 量瓶, 加水稀释至刻度, 摇匀, 并在 200~400nm 的波长处扫描, 扫描图谱见附图 1-2 结果表明 : 辅料在测定波长 304nm 处无吸收, 对测定结果无干扰 取样点时间确认试验 参照美国 FDA 药品审评中心的仿制药办公室属下的生物等效部推荐的卡培他滨片溶出方法 : 第二法桨法, 溶出介质为 900ml 水, 转速 50rpm; 推荐的取样时间为 / 102

76 45min 在此基础础上经过试验, 最终选择本本品的溶出曲曲线取样时间间为 min 取希罗达 1 片, 照溶出度测定法 ( 中国药典 2005 年版二部部附录 XC 第二二法 ), 以 900ml 水为为溶出介质, 温度 37±0.5, 转速为每每分钟 50 转, 分别于 min 时取取出溶出液 10ml, 经 0.45µm 滤膜过过滤, 同时补补加同温等体体积溶出介质质 取续滤液 2ml 置 50ml 量瓶中, 并用水稀释释至刻度, 摇匀 在 304nm 波长处测测定吸光度值值 结果见下下表 图 取样时间试试验累积溶出出度测定结果时间 (min) 累积积溶出量 (%) 不同转转速溶出曲线比较 取样点时时间试验累积积溶出曲线 桨法常用的的转速为 50rpm 75rpm; 对比卡培他他滨片在这两两种转速条件件下的累积溶溶出曲线 取本品 ( 批号 :100225), 照溶出度测测定法 ( 中国国药典 2005 年版二部附录录 XC 第二法 ), 以 900ml 水为溶溶出介质, 转速分别为 50rpm 75rpm, 分别经 min 时, 取溶溶出液 10ml, 经 0.45μm 滤膜过滤, 同时补加同温等体积溶出介介质 精密量量取续滤液 2ml, 置 50ml 量瓶中, 用水稀释至至刻度, 摇匀, 作为供试试品溶液 另另取卡培他滨滨对照品适量, 加水溶溶解并定量稀稀释制成每 1ml 约含卡培他滨 16µg 的溶液, 摇匀, 作为对照照品溶液 分别取供试试品溶液与对对照品溶液, 照紫外 - 可见见分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二二部附录 IV A), 在 304nm 的波长处处分别测定吸吸光度值, 计算累积溶出出度并绘制累累积溶出曲线线 卡培他他滨片在两种种不同转速条条件下的累积溶溶出度及溶出出曲线结果见见下表 图 两种不不同转速条件件下的累积溶溶出度比较 (n=6) 时间 (min) 累积溶溶出度 (%) 50rpm 75rpm 两种不同转转速条件下溶溶出曲线对比 50 / 102

77 试验结果表表明 : 两种转转速条件下本品的溶出性质质基本一致, 而在 75rpmm 转速条件件下, 样品品的溶出速率率稍高于在 50rpm 转速条条件下的溶出速率 一般认为转转篮 100rpm 桨法 50rpm 小杯 35rpm, 相当于正正常胃肠道蠕蠕动状态 桨桨法常用的的转速在 50~75rpm 之间 同时参照 USP32/NF27 版卡培他滨片片标准中溶出出度测定方法 [1], 综合合考虑, 本品品溶出度试验验的转速选择 50rpm 溶出出度测定 取本品, 照溶出度测定法 ( 中国药典 2005 年版二二部附录 X C 第二法 ), 以 900ml 水为溶出介介质, 转速为 50rpm, 依法操作, 经 30 分钟时, 取溶出液适适量, 过滤, 精密量取续续滤液 2ml 置 50ml 量瓶瓶中, 加水稀稀释至刻度, 摇匀, 作为供供试品溶液 ; 另取卡培他他滨对照品适适量, 加水水溶解并稀释释制成每 1ml 中约含卡培他滨 16µg 的溶液, 摇匀, 作为对照照品溶液 分分别取供试试品溶液与对对照品溶液, 照紫外 - 可见见分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二二部附录 IV A), 在 304nm 的波长长处分别测定定吸光度值, 计算每片的的溶出量, 限度为标示量量的 80%, 应符合规定定 溶出出精密度试试验 取本品 ( 批号 :100225)1 片, 参照 1.2 溶出度度测定 项下操作, 取溶出出液, 经 0.45μm 滤膜膜过滤, 连续续精密量取续续滤液 2ml 分别于 6 个 50ml 量瓶中, 用水稀释至至刻度, 摇匀, 作为供供试品溶液 照紫外 - 可见见分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二二部附录 IV A), A 分别在 304nm 的波波长处分别别测定吸光度度值 精密度试验结结果 NO 平平均 RSD% 吸光度值 结果表明, 本方法精密度良好 溶出出供试溶液液稳定性试验取 1.3 溶出出精密度试验 项下溶出液, 经 0.45μm 滤膜过滤, 精密量取续续滤液 2ml 于 50ml 量瓶瓶中, 用水稀释至刻度, 摇匀, 作为供供试品溶液 照紫外 - 可见见分光光度法法 ( 中国药典 2005 年版版二部附录 IVA), 分别于 0h 1h 2h 3h 4h 8h 时, 在 304nm 波长长处测定其吸吸光度值 溶液液稳定性试验验结果时间 (h) 平均 RSD% 吸光度值 结果表明, 卡培他滨片的溶出溶液在 8 小时内稳稳定 51 / 102

78 滤膜膜吸附试验取 1.3 溶出出精密度试验 项下溶出液液适量, 采用用高速离心方方法, 取上清清液 2ml 置 50ml 量瓶瓶中, 用水稀稀释至刻度, 摇匀, 作为供供试品溶液 1; 另取 1.3 溶出精密度度试验 项下下溶出液适适量, 经 0.45μm 的微孔滤滤膜过滤, 取续滤液 2ml 至 50ml 量瓶, 用水稀释释至刻度, 混匀, 作为为供试品溶液 2 取供试品溶溶液, 照紫外 - 可见分光光度度法 ( 中国药药典 2005 年版版二部附录 IV A), 在 304nm 的波波长处分别测测定吸光度值值 滤膜吸附试验验结果 方法 供试品溶液 1 供试试品溶液 2 平均 RSD% 吸光度值 结果表明 : 滤膜对溶液液没有吸附作用, 采用滤膜膜过滤不会影影响溶出度的的测定 线性性和范围精密称取卡卡培他滨对照照品 50.27mg, 置 100ml 量瓶中, 加水溶解, 并并稀释至刻度度 精密量量取上述溶液液适量, 再用水水分别稀释, 摇匀, 使样样品中卡培他他滨的浓度分分别为 2.5μg/ /ml 5.0μg/ml 7.5μg/ml 10μg/ml 15μg/ml 20μg/ml 25μg/ml 照紫外 - 可见分分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二二部附录 IVA A), 在 304nm 的波长处测定吸收度 溶出度测测定线性和范范围试验结果浓度 (μg/ml) 吸收值 A 卡培培他滨溶出线线性图 线性方程 : y =0.0261x , 相关关系数 r= 结果表明, 卡培他滨溶液液在浓度 2.50μg/ml~25.0μg/ml 的范范围内与吸收收值呈良好的线性关系系 回收收率试验 ( 准确度试验 ) 回收率范围围一般规定为为限度的 ±20% %, 本品的溶溶出度限度定定为 80%, 所所以我们选择择回收率的的范围为 60% 80% 100% 对照品溶液液配制称取卡培他滨对照品适量, 加水溶解并并定量稀释制制成每 1ml 中约含卡卡培他滨 16μg 的溶液, 摇匀, 作为对对照品溶液 供试品溶液液配制称取卡培他滨原原料 ( 批号 :091128) 约 1.5g 2.0gg 2.5g( 分别约为 5 片中卡培他他滨量的 60% 80% 100%), 分别置置于 号研钵中中, 再分别加入空白辅辅料 3.375g( ( 约为 5 片的的空白辅料量 ), 研匀 从 1 号研钵中中精密称取细细粉三份 ( 约相当于卡卡培他滨 30mg); 从 2 号研研钵中精密称称取细粉三份 ( 约相当于于卡培他滨 48mg); 从 3 号研钵中中精密称取细细粉三份 ( 约相当于卡培他他滨 50mg) 将上述 9 份细粉分别置置于 100ml 量瓶中, 加入水适量, 超声处理使使卡培他滨完完全溶解, 放冷, 用水稀稀释至刻度, 摇匀 ; 取上上述溶 52 / 102

79 液, 经 0.45μm 滤膜过滤, 精密量取续滤液 3ml, 分别至 100ml 量瓶中, 用水稀释至刻度, 分别作为卡培他滨片的回收率 60% 80% 100% 的供试品溶液 取供试品溶液及对照品溶液, 照紫外 - 可见分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二部附录 IVA), 在 304nm 的波长处测定吸收度值, 计算回收率, 结果见下表 卡培他滨片溶出度回收率测定结果 样品称取量 (mg) 卡培他滨加入量 (mg) 测得量 (mg) 回收率 (%) % % % 结果表明 : 本方法准确度较高 (4) 微生物限度方法学验证项目 菌落计数方法的验证 控制菌大肠埃希菌检查方法 验证结果 平均回收率 (%) (n=9) RSD (%) 0.64 (n=9) 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌采用培养基稀释法平皿计数, 回收率均达到 70% 以上, 白色念珠菌和黑曲霉采用常规法平皿计数, 回收率均达到 70% 以上 试验组检出控制菌大肠埃希菌, 阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌, 说明此法可用于本品的控制菌检查 卡培他滨片微生物限度方法学研究一 培养基 营养肉汤培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公司 改良马丁培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公司 改良马丁琼脂培养基批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公司 营养琼脂培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公司 玫瑰红钠琼脂培养基批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公司 胆盐乳糖培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公司 MUG 培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公司 配制 : 自制 灭菌 :121 /15 分钟 二 试药 靛基质试液三 仪器设备 电热恒温培养箱四 菌种 水浴锅 大肠埃希菌 ATCC8739 第 代 金黄色葡萄球菌 ATCC6538 第 5 2 代 枯草芽孢杆菌 ATCC6633 第 5 代 白色念珠菌 ATCC10231 第 5 代 黑曲霉菌 ATCC15404 第 4 代 53 / 102

80 五 验证依据 中国药典 2005 年版二部附录 ⅥJ 微生物限度检查方法验证六 实验操作 菌液制备方法 大肠埃希菌 : CMCC(B)44102 第 代接种大肠埃希菌斜面培养物 1 白金耳至 10ml 营养肉汤, 置于 小时培养 取上述大肠埃希菌新鲜肉汤培养物 1ml 10-7 含菌量 cfu/ml 金黄色葡萄球菌 : CMCC(B)26003 第 5 2 代接种金黄色葡萄球菌斜面培养物 1 白金耳至 10ml 营养肉汤于 小时培养 取上述金黄色葡萄球菌新鲜肉汤培养物 1ml 10-7 含菌量 cfu/ml 枯草芽孢杆菌 : CMCC(B)63501 第 5 代接种枯草芽孢杆菌斜面培养物 1 白金耳至 10ml 营养肉汤置于 小时培养 枯草芽孢杆菌新鲜肉汤培养物 1ml 10-6 含菌量 cfu/ml 白色念珠菌 : CMCC(F)98001 第 5 代接种白色念珠菌斜面培养物 1 白金耳至 10ml 改良马丁培养基, 置于 小时培养 白色念珠菌新鲜改良马丁培养物 1ml 10-7 含菌量 cfu/ml 黑曲霉菌 : CMCC(F)98003 第 4 代黑曲霉的新鲜斜面培养物少许至 10ml 改良马丁琼脂斜面培养基 25 培养 7 天 使大量孢子形成, 加入 5ml0.9% 无菌氯化钠溶液, 将孢子洗脱并过滤孢子菌悬液至无菌试管内, 稀释至与细菌标准比浊管相同浊度后作为原液, 取菌液 1ml+9ml0.9% 无菌氯化钠溶液,10 倍稀释至 10-4, 孢子菌悬液为 cfu/ml 供试品溶液的制备 取供试品 10 g, 加 ph7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液至 100ml, 用 45 水浴加热溶解, 混匀, 作为 1:10 的供试液 菌落计数方法的验证 以下培养基培养条件 : 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌培养温度 35 时间 48 小时, 白色念珠菌 黑曲霉菌培养温度 25 时间 72 小时 常规法 试验组平皿法计数时, 取 1:10 的供试液 1 ml 和 50~100cfu 试验菌, 分别注入平皿中, 立即倾注琼脂培养基 ( 细菌注入营养琼脂培养基, 霉菌和酵母菌注入玫瑰红钠琼脂培养基 ), 每株试验菌平行制备 2 个平皿, 按常规法测定其菌数 菌液组 : 分别取上述相应菌悬液 1ml 注入个平皿, 立即倾注琼脂培养基, 培养 计数 供试品对照组取 1:10 的供试液 1ml, 注入平皿, 立即倾注琼脂培养基, 培养 计数, 按菌落计数方法测定供试品本底菌数 上述试验组 菌液组 供试品对照组均平行置备 2 个平皿 结果见表 1: 表 1 卡培他滨片细菌 霉菌和酵母菌回收率的测定 ( 常规法 )( 单位 cfu) 54 / 102

81 菌种类型试验组菌液组供试品对照组试验组回收率 大肠埃希菌 % 金黄色葡萄球菌 % 枯草芽孢杆菌 % 白色念珠菌 % 黑曲霉 % 评价 : 由上表可知卡培他滨片用常规法平皿菌落计数, 试验中白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收率都达到了 70% 以上, 说明常规法用于霉菌和酵母菌计数结果是准确的 上表中枯草芽孢杆菌菌落回收达到了 70% 以上, 但大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌菌落回收率未达到 70% 以上, 必须重新建立细菌菌落数的方法学验证 培养基稀释法 ( 细菌数测定 ) 试验组取 1:10 的供试液 1ml, 注入 5 平皿中 (0.2ml/ 皿 ), 每皿分别加 50~100cfu 试验菌 (1ml), 立即倾注营养琼脂培养基, 每株试验菌平行制备 10 个平皿, 测定其菌数 菌液组分别取上述相应菌悬液 1ml 注入平皿中 ( 平行制备 2 个平皿 ), 立即倾注营养琼脂培养基, 培养 计数 供试品对照组取 1:10 的供试液 1ml, 注入 5 个平皿, 立即倾注营养琼脂培养基, 培养 计数, 按菌落计数方法测定供试品本底菌数, 平行制备 10 个平皿 霉菌和酵母菌数测定 ( 常规法 ) 试验组平皿法计数时, 取 1:10 的供试液 1 ml 和 50~100cfu 试验菌, 分别注入平皿中, 立即倾注玫瑰红钠琼脂培养基, 每株试验菌平行制备 2 个平皿, 测定其菌数 菌液组分别取上述相应菌悬液 1ml 注入个平皿, 立即倾注琼脂培养基, 培养 计数 供试品对照组取 1:10 的供试液 1ml, 注入平皿, 立即倾注琼脂培养基, 培养 计数, 按菌落计数方法测定供试品本底菌数 上述试验组 菌液组 供试品对照组均平行置备 2 个平皿 上述方法平行试验 3 次结果见表 2: 卡培他滨片细菌 ( 培养基稀释法 ) 表 2 霉菌和酵母菌回收率的测定 ( 常规法 )( 单位 cfu) 菌种类型试验次数试验组菌液组供试品对照组试验组回收率 % 大肠埃希菌 % % 金黄色葡萄球菌 % % % 枯草芽孢杆菌 % 55 / 102

82 % % % 白色念珠菌 % % % 黑曲霉菌 % % 由表 2 可知 : 卡培他滨片细菌数测定采用培养基稀释法 霉菌和酵母菌采用常规法平皿菌落计数, 三次平行试验中大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收率都达到了 70% 以上, 说明用于细菌菌落数 霉菌和酵母菌计数结果是准确的 七 评价 由上述试验结果表明, 卡培他滨片细菌数测定采用培养基稀释法 霉菌 酵母菌检定用常规平皿法测定 八 控制菌检查方法的验证 大肠埃希菌检查方法验证 ( 常规法 ) 试验组取 1:10 的供试液 10 ml, 接种至 100ml 的胆盐乳糖培养基内, 加 10~100cfu/ml 大肠埃希菌 1ml, 36 培养 24 小时, 取上述培养液 0.2ml 接种至 5mlMUG 培养基的试管内, 培养 5 小时 24 小时, 在 366nm 紫外线下观察, 无荧光反应, 滴加靛基质试液, 液面呈试剂本色 即未检出控制菌大肠埃希菌 阴性菌对照组取 1:10 的供试液 10ml, 接种至 100ml 的胆盐乳糖培养基内, 加入 10~100cfu/ml 金黄色葡萄球菌 1ml, 置于 36 培养 24 小时, 取上述培养液 0.2ml 接种至 5mlMUG 培养基的试管内, 培养 5 小时 24 小时, 在 366nm 紫外线下观察, 无荧光反应, 滴加靛基质试液, 液面呈试剂本色 即未检出阴性对照菌金黄色葡萄球菌 结论 : 上述方法试验组未检出大肠埃希菌, 阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌 需重新确定控制菌大肠埃希菌检测方法 大肠埃希菌检查方法验证 ( 稀释法 ) 试验组取 1:10 的供试液 10 ml, 接种至 500ml 的胆盐乳糖培养基内, 加 10~100cfu/ml 大肠埃希菌 1ml, 36 培养 24 小时, 取上述培养液 0.2ml 接种至 5mlMUG 培养基的试管内, 培养 5 小时 24 小时, 在 366nm 紫外线下观察, 有荧光反应, 滴加靛基质试液, 液面呈玫瑰红色 即检出控制菌大肠埃希菌 阴性菌对照组取 1:10 的供试液 10ml, 接种至 100ml 的胆盐乳糖培养基内, 加入 10~100cfu/ml 金黄色葡萄球菌 1ml, 置于 36 培养 24 小时, 取上述培养液 0.2ml 接种至 5mlMUG 培养基的试管内, 培养 5 小时 24 小时, 在 366nm 紫外线下观察, 无荧光反应, 滴加靛基质试液, 液面呈试剂本色 即未检出阴性对照菌金黄色葡萄球菌 结论 : 上述方法试验组检出大肠埃希菌, 阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌 故该方法可以用于控制菌大肠埃希菌的检测 56 / 102

83 九 结论 根据上述验证试验结果确定卡培他滨片微生物限度检查 : 供试液制备 : 取供试品 10 g, 加 ph7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液至 100ml, 用 45 水浴加热溶解, 混匀, 作为 1:10 的供试液 细菌数测定 : 培养基稀释法 : 取 1:10 的供试液 1ml 等量分注 5 个平皿, 每平皿 0.2ml 供试液, 倾注营养琼脂培养基, 混匀, 平行制备 10 个平皿 霉菌及酵母菌数测定 : 常规法 : 取 1:10 的供试液 1ml 注入平皿, 倾注玫瑰红钠琼脂培养基, 混匀, 平行制备 2 个平皿 取上述 1:10 供试液用 ph7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液稀释 1:100 1:1000 的稀释级检测 取上述稀释级按中国药典 2005 年药典二部附录 XI J 微生物限度检查法平皿法进行菌落记数, 应符合规定 大肠埃希菌检查方法 : 取 1:10 的供试液 10 ml, 接种至 500ml 的胆盐乳糖培养基内, 置于 36 培养 24 小时, 取上述培养液 0.2ml 接种至 5mlMUG 培养基的试管内, 培养 5 小时 24 小时后, 按中国药典 2005 年药典二部附录 XI J 微生物限度检查法控制菌检查, 应符合规定 P.5.4 批检验报告 (1) 样品信息 2010 年 3 月 ~4 月连续制备了三批样品, 详细信息如下 : 批号 *** *** *** 生产地点 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 生产时间 *** *** *** 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 生产批量 3.5 万片 3.5 万片 3.5 万片 用途稳定性研究稳定性研究稳定性研究 (2) 检验结果批号放行标准 性状 鉴别 液相保留时间 IR 检查 有关物质 应为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 应与对照品溶液主峰的保留时间一致 在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 与对照品溶液主峰的保留时间一致 在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱与对照品的图谱一致 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 与对照品溶液主峰的保留时间一致 在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱与对照品的图谱一致 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 与对照品溶液主峰的保留时间一致 在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱与对照品的图谱一致 57 / 102

84 杂质 A 应 1.0% 0.03% 0.04% 0.03% 杂质 B 应 1.0% 未检出 0.01% 未检出 杂质 C 应 0.5% 0.01% 0.01% 0.01% 其他单个杂质应 0.1% 0.04% 0.02% 0.02% 未知总杂质应 0.5% 0.15% 0.04% 0.03% 总杂质应 2.0% 0.18% 0.10% 0.07% 重量差异应符合规定应符合规定应符合规定应符合规定 溶出度应为标示量的 80% 外观 微生物限度 含量测定 应完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 细菌数应 1000cfu/g 霉菌及酵母菌数应 100cfu/g 大肠埃希菌应不得检出 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 应为标示量的 93.0%~ 105.0% 96%,95%,96%, 96%,96%,96% 完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 细菌数 <10cfu/g 霉菌及酵母菌数 < 10cfu/g 大肠埃希菌未检出 95%,101%,98%, 103%,97%,101% 完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 细菌数 <10cfu/g 霉菌及酵母菌数 < 10cfu/g 大肠埃希菌未检出 100%,102%,98%, 101%,103%,99% 完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 细菌数 <10cfu/g 霉菌及酵母菌数 < 10cfu/g 大肠埃希菌未检出 98.5% 101.1% 101.6% (3) 分析三批样品有关物质 溶出度 含量没有明显波动 ; 性状 重量差异及微生物限度均符合规定 批次间质量稳定 可控 附批分析报告 P.5.5 杂质分析 3.2.P 制剂中杂质分析 杂质情况分析 58 / 102

85 杂质名称杂质结构杂质来源 杂质控制限度 是否定入质量标准 杂质 A:5'- 脱氧 -5- 氟胞嘧啶核苷 该杂质可由卡培他滨经水解反应降解产生 1.0% 是 杂质 B:5'- 脱氧 -5- 氟尿嘧啶核苷 该杂质可由卡培他滨经水解反应降解产生 1.0% 是 杂质 C:2', 3'-O- 羰基 -5'- 脱氧 -5- 氟 -N4-[( 戊氧基 ) 羰基 ] 胞嘧啶核苷 该杂质可由卡培他滨经高温降解产生 0.5% 是 3.2.P 原料中杂质分析卡培他滨原料药质量标准控制 A B C D 与 E 5 个已知杂质,A B C 结构式见上表,D E 结构式如下 : O N NH 2 O N NH O Me O N 杂质 D F Me 杂质 E O N F O AcO 杂质 D 与 OAc E 是原料药合成工艺中的中间体 Ⅰ 与中间体 Ⅱ, 从原料药的强制降解试验 稳定性试验及杂质本身结构分析, 杂质 D 与 E 只有可能是合成工艺过程中由于反应不完全 AcO OAc 带入, 不会通过降解产生 可归属为原料药中特有的杂质, 制剂工艺过程中不会产生, 故制剂未作为已知杂质进行研究 3.2.P 制剂中特性的杂质根据原料药中杂质 A B C 的来源与制剂稳定性试验结果分析, 杂质 A B C 在制剂与原料药的贮藏过程中易通过降解产生, 在制剂杂质研究中作为已知杂质进行控制 (1) 杂质 A 与 B: 通过水解产生杂质 5 - 脱氧 -5- 氟胞嘧啶核苷 ( 杂质 A) 和 5 - 脱氧 -5- 氟尿嘧啶核苷 ( 杂质 B), 降解途径如下图 H 3 C HO OH O N N F NH O O CH 3 水解 C H 3 HO OH O N N F 杂质 A NH 2 59 / 102

86 O N NH 2 O H N O H 3 C N F H 2 O H 3 C N F HO OH HO OH 杂质 B (2) 杂质 C: 原料及制剂的影响因素试验表明, 在高温条件下, 卡培他滨易降解产生杂质 2,3 -O- 羰基 -5 - 脱氧 -5- 氟 -N4-[( 戊氧基 ) 羰基 ] 胞嘧啶核苷 ( 杂质 C), 推测反应途径如下图 H 3 C HO O OH N N NH F O O CO 2 CH 3 H 3 C H O O O H O N N F NH 杂质 C 根据对杂质 A B 与 C 结构的分析, 在研究初始制备较纯杂质 A B 与 C 的对照品, 并进行了相应的结构确证 杂质 A B C 的制备与结构确证详细见原料药申报资料 3.2.S.3.2( 页码 :P47~P77) (3) 通过对卡培他滨片 ( )(0 天 ) 与相应原料 ( ) 的杂质谱进行对比分析 ( 面积归一化法 ), 卡培他滨片与相应原料的杂质 谱基本一致, 制剂过程中未见较大新杂质产生 结果见下表 三批制剂及相应原料中有关物质的对比 杂质峰 (%) 相对保留原料制剂时间 ( 杂质 A) ( 杂质 B) / / / / / / 0.01 / / 0.21 / / 0.01 / / / / / 0.05 / / ( 杂质 C) / / / / 0.01 / / 总杂 (%) 结合上述研究 : 将降解产物 ( 杂质 A B C) 在制剂的质量标准中作为已知杂质控制, 其他杂质均作为未知杂质控制 O O CH 3 60 / 102

87 P.5.6 质量标准制定依据 (1) 制定依据质控项目 制定依据 性状外观标准常规项目, 根据样品批检验及稳定性考察结果 (1) HPLC 鉴别 (2)IR 有关物质溶出度含量微生物限度重量差异 液相保留时间鉴别具有很高的专属性, 保留时间应与对照品一致 光谱法鉴别 : 在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致 根据杂质分析及本品稳定性研究情况, 表明杂质 A B C 在本品贮藏过 程中通过降解途径产生 将自制卡培他滨片与希罗达进行准确比较, 结果显示自制卡培他滨片有关物质 : 总杂 0.20%, 单一杂质 0.1%, 与希罗 达杂质谱基本一致 根据小试样品, 中试三批样品与稳定性试验结果, 并结合 USP32/NF27 版卡培他滨片质量标准, 将杂质 A~C 作为已知杂质订入标准, 并对其杂质 A~C 的限度作出如下规定 : 杂质 A 和杂质 B 限度 ( 1.0%,), 杂质 C( 0.5%), 未知单杂 ( 0.1%), 未知总杂 ( 0.5), 总杂 ( 2.0%) 各杂质限度保持与 USP32/NF27 版卡培他滨片质量标准一致 根据希罗达 自制样品溶出度的检查结果及中国药典 2010 年版二部附录中对溶出度的规定, 将本品的溶出度限度定为 30 分钟不得低于 80% 由于卡培他滨在紫外区有较强的吸收, 根据准确 简便 快速的原则, 在本品溶出的测定试验中, 首选紫外 - 可见分光光度法测定本品中主成分的溶出量, 并进行了方法学的研究 使用 HPLC 法测定, 采用外标法计算含量, 根据 USP32/NF27 版卡培他滨片质量标准 批分析积累数据 稳定性考察结果以及仪器系统误差影响等, 规定含量范围应为标示含量的 93.0%~105.0% 按照中国药典 2010 年版二部附录 Ⅺ J 微生物限度检查法, 进行了方法学的研究, 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌采用培养基稀释法平皿计数, 回收率均达到 70% 以上, 白色念珠菌和黑曲霉采用常规法平皿计数, 回收率均达到 70% 以上 试验组检出控制菌大肠埃希菌, 阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌, 说明此法可用于本品的控制菌检查 三批样品微生物限度均符合规定 取本品 20 片, 精密称定总重量, 求得平均片重后, 再分别精密称定每片的重量, 每片重量与平均片重相比较, 超出重量差异限度 (±5%) 的不得多于 2 片, 并不得有 1 片超出限度 1 倍 ( 中国药典 2010 年版二部附录 I A) 三批样品片重差异均符合规定 (2) 本品与希罗达对比将自制卡培他滨片与原研产品希罗达进行有关物质与溶出度对比 有关物质对比 : 自制片的有关物质, 杂质 A B 和 C 均 0.05%, 未知单杂 0.1%, 总杂 0.20%, 我公司制剂中检出的有关物质与希罗达基本一致 溶出度对比结果显示 : 自制片同希罗达在四种不同溶出介质中, 溶出行为一致 有关物质 溶出度的对比研究见 3.2.P 制剂相关特性 61 / 102

88 3.2. P.6 对照品 1. 卡培他滨对照品卡培他滨原原料药质量标标准收载于 USP32/NF27 版, 我公司在在开发本品过过程中使用了美国药典典对照品及自自制对照品, 美国药典对照照品批号 :F0G037, 自制对照品批号号 , 自制对照照品含量使用用美国药典对对照品进行标定 (1) 美国药典对对照品 ( 用于于含量测定 ) 名称 :Capecitabine reference standard 批号 :F0G037 来源 :U. S. Pharmacopeia 含量 :99.7%% 对照品标签 : 62 / 102

89 63 / 102

90 (2) 自制对照品名称 : 卡培他滨批号 : 制备时间 : 2009 年 12 月 8 日 64 / 102

91 来源 : 江苏正大天天晴药业股份有有限公司包装 : 棕色玻璃瓶贮藏 : 遮光, 密封, 常温 (10~30 ) 保存存 用途 : 鉴别 检查查与含量测定自制对照品品测定项目包包括 : 结构确证 : 元素分析 1 H-NMR 13 C-NMR MS 等测试, 见卡培他滨滨原料申报资料 2.3.S.3.1 结构构确证 比旋度 : o (c= =1.0, 甲醇 ) 熔点 (dec ):117.5 ~118.8 水分 : 0.1% 残留溶剂 : 含正己烷 %, 含乙乙酸乙酯 0.034%, 其他溶溶剂未检出 炽灼残渣 : 0.0% 重金属 : 20ppm 有关物质 : 0.07% 含量 : 采用了两种种经过验证的的不同方法进进行测定, 具体如下 : 方法 1: 电位滴定法取本品约 0.3g, 精密称定, 加冰醋酸 50ml 溶解解后, 照电位滴滴定法 ( 中国国药典 2010 年二部附附录 Ⅶ A), 用高氯酸滴定定液 (0.1mol/L) 滴定, 并将滴定的结结果用空白试试验校正 每 1ml 高氯氯酸滴定液 (0.1mol/L) 相当于 35.94mg 的 C 15 H22FN 2 3 O 6 结果 : 99.7%(n= 2) 方法 2: 用十八烷基硅硅烷键合硅胶胶为填充剂 ; 流动相 A 为 0.1% 醋酸酸溶液 - 甲醇 -乙腈 (60:35:5), 流动动相 B 为甲醇 -0.1% 醋酸酸溶液 - 乙腈 (80:15:5), 流速为每分钟钟 1.0ml, 按下表进行行梯度洗脱 ; 柱温 40 ; 自动进样器器温度 5 ; 检测波长为 250nm 供试品溶液 : 取本品适适量, 用溶剂 [ 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)] 溶解并定定量稀释成成每 1ml 中约约含 0.6mg 的溶液 ; 对照品溶液 : 取卡培他他滨 USP 对照品 ( 批号 :F0G037) 适量, 用溶剂 [ 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)] 溶解解并定量稀释释成每 1ml 中约约含 0.6mg 的溶液 ; 进样体积 : 10μl; 采集时间 : 40min; 结果 : 按外标法以峰面积计算,99.9% 两种方法测测定结果基本本一致, 我们暂暂时规定本品品采用电位滴滴定法测定含含量 自制对对照品含量量为 99.7% 2. 杂质对照品我公司在开开发本品过程程中, 所用杂质 A B 及 C 均为本公司司自制 (1) 杂质 A 对照照品名称 : 卡培他滨杂质 A 结构式 : 分子式 : C 9 H 12 FN 3 O4 分子量 : 化学名 : 5'- 脱氧 -5- 氟胞嘧啶核苷制备时间 : 2009 年 12 月 1 日批号 : 含量 : 99.2%(HPLC 法,***) 来源 : 江苏正大天天晴药业股份有有限公司包装 : 棕色玻璃瓶贮藏 : 遮光, 密封封保存 65 / 102

92 用途 : 用于系统适适用性试验 ( 杂质定位, 考察分离度 ) (2) 杂质 B 对照照品名称 : 卡培他滨杂质 B 结构式 : H 3 C HO O O N OH H N F O 分子式 : C 9 H 11 FN 2 O5 分子量 : 化学名 : 5'- 脱氧 -5- 氟尿嘧啶核苷制备时间 : 2009 年 12 月 5 日批号 : 含量 : 100.0%(HPLC 法,***) 来源 : 江苏正大天天晴药业股份有有限公司包装 : 棕色玻璃瓶贮藏 : 遮光, 密封封保存用途 : 用于系统适适用性试验 ( 杂质定位, 考察分离度 ) (3) 杂质 C 对照照品名称 : 卡培他滨杂质 C 结构式 : 分子式 : C 18 H 20 FN 3 O 7 分子量 : 化学名 : 2', 3'-O- 羰基 -5'- 脱氧 -5- 氟 -N4-[( 戊氧氧基 ) 羰基 ] 胞嘧嘧啶核苷制备时间 : 2009 年 12 月 9 日批号 : 含量 : 96.2%(HPLC 法,***) 来源 : 江苏正大天天晴药业股份有有限公司包装 : 棕色玻璃瓶贮藏 : 遮光, 冷藏藏保存用途 : 用于系统适适用性试验 ( 杂质定位 ) 卡培他滨杂杂质 A B 与 C 制备方法及及结构确证详详细信息参见见原料药申报资资料 3.2.S.3.2( 页码 : P47~P77) 卡培他滨杂杂质 A B 与 C 结构确证图谱参见卡培培他滨原料药药申报资料附件件四 66 / 102

93 3.2.P.7 稳定性 P.7.1 稳定性总结 (1) 试验样品批号 *** *** *** 规格 0.5g 0.5g 0.5g 0.5g 原料药来源及批号 江苏正大天晴药业股份有限公司批号 : 江苏正大天晴药业股份有限公司批号 : / 102 江苏正大天晴药业股份有限公司批号 : 江苏正大天晴药业股份有限公司批号 : 生产日期 *** *** *** 生产地点 连云港市新浦区巨龙北路 8 号研究院 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 批量 800 片 3.5 万片 3.5 万片 3.5 万片 内包装材料铝塑铝塑铝塑铝塑 (2) 研究内容卡培他滨片稳定性试验的条件和方法主要根据中国药典二部附录 ⅪⅩC 原料药与药物制剂稳定性试验指导原则的要求进行, 具体如下 : 影响因素试验 项目放置条件考察时间考察项目 高温 40 和 60 高湿 光照 其他 结论 25 RH 90%±5% 4500Lx±500Lx 天 性状 有关物质 含量 溶出度 分析方法及其验证 见 3.2.P.5 项下分析方法的验证 卡培他滨片 :1mol/L 的盐酸溶液, 室温 30 分钟, 主要降解产物为杂质 B( 约 12.4%); 用 1mol/L 氢氧化钠溶液,60 20 分钟, 主要降解杂质为杂质 A( 约 7.6%) 与 B( 约 2.1%); 经 小时, 主要降解杂质为杂质 A( 约 3.4%) 与 C( 约 1.7%);10% 双氧水,50 60 分钟, 主要降解杂质为杂质 A( 约 5.2%); 本品对光不敏感 经影响因素试验考察, 素片 包衣片经高温 (60 ) 高湿和强光照射 10 天, 有关物质中杂质 A 在 60 考察时从 0.03% 增加至 0.18%, 增幅 0.15%, 其他考察条件无明显变化 ; 杂质 B 在高湿试验 RH92.5% 考察 10

94 加速试验 长期试验 结论 天时略有增加 : 从 0 增加至 0.03%, 其他考察条件均未检出 ; 杂质 C 在 60 时从 0.01% 增加至 0.04%, 其他考察条件无明显变化 ; 总杂质在 60 考察 10 天从 0.17% 增加至 0.36%, 增幅 0.19%; 含量及溶出度考察结果没有明显差异, 表明高温对本品杂质有较大影响 40±2, RH75%±5% 30±2, RH65%±5% 月 月 性状 有关物质 含量 溶出度 微生物限度 性状 有关物质 含量 溶出度 微生物限度 见 3.2.P.5 项下分析方法的验证 见 3.2.P.5 项下分析方法的验证 卡培他滨片加速 6 个月与长期 12 个月试验结果 : 样品外观 含量 溶出度等项目与初始相比无变化 ; 有关物质在加速试验中, 杂质 A 由 0.04% 增加至 0.77%, 增幅 0.73%, 杂质 B 由 0.01% 增加至 0.25%, 增幅 0.24%, 杂质 C 由 0.01% 增加至 0.03%, 增幅 0.02%, 其他单个最大杂质基本不变, 总杂质由 0.10% 增加至 1.10%, 增幅 1.0%; 在长期试验中, 杂质 A 由 0.03% 增加至 0.13%, 增幅 0.10%, 杂质 B 在由 0 增加至 0.05%, 增幅 0.05%, 杂质 C 与其他单个最大杂质基本不变, 总杂质由 0.07% 增加至 0.23%, 增幅 0.16%, 含量在 98.2~101.6% 之间 ; 微生物限度 0 6 和 12 月检验均合格 根据影响因素试验和稳定性试验考核结果, 结合希罗达 (Xeloda ) 使用说明书中提示的贮藏条件 有效期, 将本品贮藏条件定为 : 密封, 常温 (10~30 ) 保存 ; 有效期 24 个月 使用中产品稳定性研究结果 不适用 (3) 研究结论 4.42 内包材 贮藏条件 有效期 对说明书中相关内容的提示 铝塑包装 密封, 常温 (10~30 ) 保存 24 个月 P.7.2 上市后的稳定性承诺和稳定性方案 本品上市后拟继续进行稳定性考察, 特提交如下承诺书 : 无 对上市后样品稳定性研究承诺书 68 / 102

95 国家食品药品监督管理局 : 我公司承诺将对批准上市后的卡培他滨片继续进行长期留样稳定性考察, 方式如下 : (1) 对上市后最初连续生产的三批样品进行长期留样稳定性考察 ; (2) 如正常生产, 此后每年将追加一批进行留样考察 ; (3) 留样包装为上市包装材料, 放置条件 : 温度 30 ±2, 相对湿度 65%±5% (4) 初检后, 其他取样检测时间点为第 个月 ; (5) 在稳定性考察期间, 如发现样品有异常情况, 将及时向当地食品药品监督管理局汇 报 江苏正大天晴药业股份有限公司 2011 年 08 月 69 / 102

96 P.7.3 稳定性数据汇总 (1) 影响因素试验 批号 : 批量 :800 片规格 :0.5g 素片 考察项目 限度要求 高湿试验 RH92.5%( 天 ) 高温试验 60 度 ( 天 ) 光照试验 (4500lx)( 天 ) 外观 应为白色或类白色片 白色片 白色片 白色片 白色片 白色片 白色片 白色片 白色片 白色片 溶出度 80% 杂质 A(%) 1.0% 杂质 B(%) 1.0% 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 杂质 C(%) 0.5% 未知最大单杂 (%) 0.1% 未知总杂 (%) 0.5% 总杂 (%) 2.0% 含量 (%) 应为标示量的 93.0~105.0% / 102

97 包衣片 考察项目 限度要求 高湿试验 RH92.5%( 天 ) 高温试验 60 度 ( 天 ) 光照试验 (4500lx)( 天 ) 外观 应为白色薄膜白色薄膜衣白色薄膜衣白色薄膜衣白色薄膜衣白色薄膜衣白色薄膜衣白色薄膜衣白色薄膜衣白色薄膜衣衣片, 除去包片, 除去包片, 除去包片, 除去包片, 除去包片, 除去包片, 除去包片, 除去包片, 除去包片, 除去包衣后显白色或衣后显白色衣后显白色衣后显白色衣后显白色衣后显白色衣后显白色衣后显白色衣后显白色衣后显白色类白色 溶出度 80% 杂质 A(%) 1.0% 杂质 B(%) 1.0% 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 杂质 C(%) 0.5% 未知最大单杂 (%) 0.1% 未知总杂 (%) 0.5% 总杂 (%) 2.0% 含量 (%) 应为标示量的 93.0~105.0% / 102

98 (2) 加速试验 1 批号 1:*** 批量 :3.5 万片规格 :0.5g 包装 : 铝塑考察条件 :40±2,RH75%±5% 考核项目限度要求 0 天加速 1 月加速 2 月加速 3 月加速 6 月应为白色薄膜衣白色薄膜衣片, 除白色薄膜衣片, 除白色薄膜衣片, 除白色薄膜衣片, 除白色薄膜衣片, 除外观片, 除去包衣后显去包衣后显白色去包衣后显白色去包衣后显白色去包衣后显白色去包衣后显白色白色或类白色溶出度 (%) 80% 杂质 A 1.0% 有关物质 (%) 杂质 B 1.0% 未检出 杂质 C 0.5% 其他单个最大杂质 0.1% 其他总杂质 0.5% 总杂 2.0% 微生物限度符合规定符合规定 / / / 符合规定 含量 (%) 应为标示量的 93.0%~105.0% 批号 2:*** 批量 :3.5 万片规格 :0.5g 包装 : 铝塑考察条件 :40±2,RH75%±5% 72 / 102

99 考核项目限度要求 0 天加速 1 月加速 2 月加速 3 月加速 6 月 外观 应为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 溶出度 (%) 80% 杂质 A 1.0% 有关物质 (%) 杂质 B 1.0% 杂质 C 0.5% 其他单个最大杂质 0.1% 其他总杂质 0.5% 总杂 2.0% 微生物限度符合规定符合规定 / / / 符合规定 含量 (%) 应为标示量的 93.0%~105.0% 批号 3:*** 批量 :3.5 万片规格 :0.5g 包装 : 铝塑考察条件 :40±2,RH75%±5% 考核项目限度要求 0 天加速 1 月加速 2 月加速 3 月加速 6 月 73 / 102

100 外观 应为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 溶出度 (%) 80% 杂质 A 1.0% 有关物质 (%) 杂质 B 1.0% 未检出 杂质 C 0.5% 其他单个最大杂质 0.1% 其他总杂质 0.5% 总杂 2.0% 微生物限度符合规定符合规定 / / / 符合规定 含量 (%) 应为标示量的 93.0%~105.0% (3) 长期试验 1 批号 1:*** 批量 :3.5 万片规格 :0.5g 包装 : 铝塑考察条件 :30±2,RH65%±5% 考核项目限度要求 0 天长期 3 月长期 6 月长期 9 月长期 12 月 74 / 102

101 外观 应为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 溶出度 (%) 80% 杂质 A 1.0% 有关物质 (%) 杂质 B 1.0% 未检出 杂质 C 0.5% 0.01 未检出 其他单个最大杂质 0.1% 其他总杂质 0.5% 总杂 2.0% 微生物限度符合规定符合规定 / 符合规定 / 符合规定 含量 (%) 应为标示量的 93.0%~105.0% 批号 2:*** 批量 :3.5 万片规格 :0.5g 包装 : 铝塑考察条件 :30±2,RH65%±5% 考核项目限度要求 0 天长期 3 月长期 6 月长期 9 月长期 12 月 外观 应为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 75 / 102

102 溶出度 (%) 80% 杂质 A 1.0% 有关物质 (%) 杂质 B 1.0% 杂质 C 0.5% 其他单个最大杂质 0.1% 其他总杂质 0.5% 总杂 2.0% 微生物限度符合规定符合规定 / 符合规定 / 符合规定 含量 (%) 应为标示量的 93.0%~105.0% 批号 3:*** 批量 :3.5 万片规格 :0.5g 包装 : 铝塑考察条件 :30±2,RH65%±5% 考核项目限度要求 0 天长期 3 月长期 6 月长期 9 月长期 12 月 外观 应为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 溶出度 (%) 80% / 102

103 杂质 A 1.0% 有关物质 (%) 杂质 B 1.0% 未检出 杂质 C 0.5% 其他单个最大杂质 0.1% 其他总杂质 0.5% 总杂 2.0% 微生物限度符合规定符合规定 / 符合规定 / 符合规定 含量 (%) 应为标示量的 93.0%~105.0% / 102

104 卡培他滨片 CTD 格式药学研究资料 目录 3.2.P.1 剂型及产品组成 P.2 产品开发 P.2.1 处方组成 P 原料药 P 辅料 P.2.2 制剂研究 P 处方开发过程 P 制剂相关特性 P.2.3 生产工艺的开发 P.2.4 包装材料 / 容器 P.2.5 相容性 P.3 生产 P.3.1 生产商 P.3.2 批处方 P.3.3 生产工艺和工艺控制 P.3.4 关键步骤和中间体的控制 P.3.5 工艺验证和评价 P.4 原辅料的控制 P.5 制剂的质量控制 P.5.1 质量标准 P.5.2 分析方法 P.5.3 分析方法的验证 P.5.4 批检验报告 P.5.5 杂质分析 / 97

105 3.2.P.5.6 质量标准制定依据 P.6 对照品 P.7 稳定性 P.7.1 稳定性总结 P.7.2 上市后的稳定性承诺和稳定性方案 P.7.3 稳定性数据汇总 / 97

106 正文 3.2.P.1 剂型及产品组成 (1) 我公司研制开发的卡培他滨片, 剂型为片剂, 规格 :0.5g, 处方中 的辅料为乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 羟丙甲纤维素 硬脂酸镁 二氧化硅 胃溶型薄膜包衣预混剂 卡培他滨片单位剂量的处方组成如下 : 成分用量过量加入作用执行标准 片芯 mg % 卡培他滨 无主药企业标准 乳糖 无稀释剂中国药典 2010 年版 微晶纤维素 无稀释剂 JX***** 羟丙甲纤维素 (5cps) 约 无粘合剂 JX 中国药典 2010 年版 交联羧甲基纤维素钠 无崩解剂 JX 二氧化硅 无润滑剂中国药典 2010 年版 硬脂酸镁 无润滑剂中国药典 2010 年版 包衣 注 1 胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 纯化水注 2 ( 工艺中使用到并最终去除的溶剂 ) / 无包衣粉沪 Q/WS / 无包衣溶剂中国药典 2010 年版 注 1: 胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 配方成份 : 聚乙烯醇 二氧化钛 滑石粉 聚乙二醇 大豆磷脂 注 2: 纯化水为粘合剂配制用溶剂和包衣粉的分散介质, 在工艺过程中去除 (2) 本品为片剂, 无附带专用溶剂 (3) 本品使用的包装材料为铝箔和聚氯乙烯 / 聚偏二氯乙烯固体药用复 合硬片 (PVC/PVDC) 3 / 97

107 3.2.P.2 产品开发 3.2.P.2.1 处方组成 参照原研产品希罗达的处方组成, 同时考虑到主药卡培他滨约占处方组成 的 80%, 且流动性较差, 增加了助流剂二氧化硅, 按一定比例将原辅料混合 进行相容性实验, 选择出合适的辅料 3.2.P 原料药 卡培他滨由瑞士罗氏 (Roche) 制药公司原研开发, 于 1998 年 4 月以商品 名希罗达 (Xeloda) 在美国获准上市,2000 年获得 SFDA 批准进口, 上市剂型 为片剂, 规格 0.15g 0.5g, 铝塑包装 我公司仿制的卡培他滨片, 剂型同原研厂家罗氏制药的希罗达, 规格 0.5g (1) 原料药和辅料的相容性试验 FDA 官方网站 Xeloda ( 希罗达 1 ) 使用说明书, 希罗达为桃色或浅桃色薄 膜衣, 其非活性成分包括无水乳糖, 交联羧甲基纤维素钠, 羟丙甲纤维素, 微 晶纤维素, 硬脂酸镁, 纯化水 ; 桃色或浅桃色薄膜衣含羟丙甲纤维素 滑石粉 钛白粉 合成氧化铁黄 氧化铁红 日本上市的卡培他滨片 2, 商品名 :Xeloda, 规格 0.3g, 白色薄膜衣片, 其非活性成分包括无水乳糖, 交联羧甲基纤维素钠, 羟丙甲纤维素, 微晶纤维 素, 硬脂酸镁, 滑石粉 二氧化钛 参照希罗达的辅料成份, 同时考虑到主药卡培他滨约占处方组成的 80%, 且流动性较差 ( 休止角约 44 度 ), 选用固体制剂常用辅料乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 羟丙甲纤维素 硬脂酸镁 二氧化硅, 分别与主药按一 定比例混合后, 取适量, 分别在强光照射 (4500±500Lx) 高温 (60 ) 高 湿 ( 相对湿度 92.5%,25 ) 的条件下放置 10 天, 考察辅料与卡培他滨原料 药的相容性 结果 : 乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 羟丙甲纤维素 硬脂酸 镁 二氧化硅与卡培他滨的相容性良好, 可用来进行卡培他滨片的处方筛选 包衣材料选用常用的水溶性胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 4 / 97

108 卡培他滨与辅料的相容性试验结果 辅料 主药 辅料 条件 外观 有关物质 (%) 杂质 A 杂质 B 杂质 C 未知最大单杂未知总杂总杂 吸湿增重 (%) 0 天白色粉末 0.01 未检出 卡培他滨 / 乳糖 1 5 强光 10 天 白色粉末 0.02 未检出 天 白色粉末 0.06 未检出 高湿 10 天 白色粉末 0.03 未检出 天 白色粉末 0.01 未检出 强光 10 天 白色粉末 0.02 未检出 未检出 天 白色粉末 0.07 未检出 高湿 10 天 白色粉末 天 白色粉末 0.01 未检出 微晶纤维素羟丙甲纤维素交联羧甲基纤维素钠 :1 强光 10 天 白色粉末 天 白色粉末 高湿 10 天 白色粉末 天 白色粉末 0.01 未检出 强光 10 天 白色粉末 0.02 未检出 天 白色粉末 0.05 未检出 高湿 10 天 白色粉末 0.04 未检出 天 类白色粉末 0.01 未检出 强光 10 天 类白色粉末 0.02 未检出 天 类白色粉末 0.05 未检出 高湿 10 天 类白色粉末 / 97

109 硬脂酸镁 二氧化硅 天 白色粉末 0.01 未检出 强光 10 天 白色粉末 0.02 未检出 天 白色粉末 0.05 未检出 高湿 10 天 白色粉末 0.04 未检出 天 白色粉末 0.01 未检出 强光 10 天 白色粉末 天 白色粉末 高湿 10 天 白色粉末 (2) 卡培他滨为白色或类白色结晶性粉末 ; 无臭 卡培他滨在甲醇中极易溶解, 在水中略溶 6 / 97

110 3.2.P 辅料采用与卡培他滨相容性良好的辅料, 设计不同的组方, 从填充剂用量 粘合剂浓度 崩解剂用量 润滑剂与助流剂的用量 中间体颗粒的休止角与流动性及可压性 片子的溶出行为等进行处方筛选, 并与希罗达的溶出行为进行对比, 从而确定处方中的辅料组成 (1) 辅料种类选择依据参考希罗达的辅料种类, 并结合辅料相容性试验结果, 选择乳糖 微晶纤维素 羟丙基纤维素 交联羧甲基纤维素钠 二氧化硅 硬脂酸镁作为自制卡培他滨片的辅料 包衣材料选用的是常用的胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 我们选择的卡培他滨片辅料种类基本同原研产品希罗达 详见 3.2.P 原料药 原料药与辅料的相容性实验 (2) 辅料用量选择依据选用与卡培他滨相容性良好的辅料, 在常规用量范围内, 进行组方, 以中间体物料休止角 流动性 可压性 片剂外观性状 溶出速度等项目为指标, 进行初步处方筛选 根据实验结果, 逐步调整处方中辅料用量, 使自制片与希罗达的溶出行为 ( 溶出曲线 ) 接近 取原研产品希罗达多片称重, 片重约 630~645mg 片剂包衣增重一般 3%; 据此推算, 希罗达素片的片重约 611~625mg 自制片的片芯片重控制同希罗达, 在 615~625mg 硬度在 13~15kg/mm 2 取希罗达, 溶出条件参照 USP32 3 测定溶出, 约 25min 全部溶出 在处方筛选过程中, 自制片片重 溶出控制参照希罗达 本品的处方筛选汇总如下 : 7 / 97

111 原辅料名称 处方用量 (g/100 片 ) 处方 1 处方 2 处方 3 处方 4 处方 5 处方 6 卡培他滨 乳 糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠 % 羟丙甲纤维素 (5cps) 溶液 48 ml 2% 羟丙甲纤维素 (5cps) 溶液 40 ml 44 ml 39 ml 3% 羟丙甲纤维素 (5cps) 溶液 28ml 27ml 二氧化硅 硬脂酸镁 片剂基本项目考察结果 测定项目处方 1 处方 2 处方 3 处方 4 处方 5 处方 6 颗粒性状颗粒较好细粉较多细粉较多细粉较多颗粒较好颗粒较好 是否粘冲粘冲粘冲否否否否 外观 裂片, 侧面粗糙 裂片, 侧面粗糙 良好裂片光洁光洁 可压性好好好不好好好 硬度 (kg) 流动性 ( 休止角, 度 ) 溶出度 (%) 处方 1 2 存在的问题 : 处方 1 2 中间体的流动性较差, 压片有粘冲现象 ; 乳糖和微晶纤维素的用量不同对中间体物料性质影响不大 解决方案 : 在处方 1 2 的基础上微调乳糖和微晶纤维素的用量, 处方 3 采用 1% 羟丙甲纤维素 (5cps) 溶液做粘合剂, 润滑剂增加硬脂酸镁用量, 同时增加了二氧化硅, 以改善粘冲现象 处方 4 粘合剂仍使用 2% 羟丙甲纤维素 (5cps) 溶液, 仅增加润滑剂硬脂酸镁用量处方 3 4 实验结论 存在的问题 : 处方 3 中间体的细粉较多, 可压性良好, 流动性较差, 片的外观良好 ; 处方 4 流动性 可压性较差, 粘冲 将处方 3 的片与希罗达, 参照 USP32 的溶出条件 [3], 取样点参考 FDA 网站卡培他 8 / 97

112 [4] 滨片溶出度数据进行和希罗达的溶出行为比较, 结果自制片的溶出较希 罗达快 因此应减少处方中崩解剂交联羧甲基纤维素钠用量 希罗达每片含无水乳糖 52mg 5, 相当于乳糖约 54mg 因此调整乳糖 用量约 54mg/ 片 改进方法 : 在处方 3 的基础上调整, 设计处方 5 6, 考虑到物料的流 动性较差, 为使物料的流动性改进, 需要粘合剂浓度为 3%; 同时崩解剂交 联羧甲基纤维素钠考察不同用量的对溶出的影响 处方 5 6 中间体颗粒流动性 可压性都得到明显改善, 片剂外观较好 取处方 5 处方 6 的片子与希罗达进行溶出速度 ( 溶出曲线 ) 测试, 处方 5 与希罗达溶出行为基本一致, 处方 6 的溶出快于希罗达 处方组成初步确认处方 P.2.2 制剂研究 3.2.P 处方开发过程 选用与卡培他滨相容性良好的辅料, 进行处方研究, 最终确定自制卡 培他滨片的处方, 详细参照 3. 2.P 辅料部分 按上述初步确定的处方 5, 配制卡培他滨片 ( 批号 :100122), 取其中 一半采用胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 进行薄膜包衣, 包 衣增重约为片芯重量 3% 将素片和包衣片, 同时进行影响因素考察以考察 包衣对本品稳定性的影响, 确定本品的处方工艺 影响因素试验考察结果显示 : 素片 包衣片经高温 (60 ) 高湿 (25, RH92.5%) 和强光照射 (25,4500±500Lx)10 天, 有关物质 含量 溶 出度考察结果没有明显区别 详见 3.2.P.7.3 稳定性数据 按照上述确定的处方工艺进行三批样品的放大, 批号 : , , , 对自制样品与希罗达在 4 种溶出介质中的溶出行为进 行了对比研究 详见 3.2. P 制剂相关特性的溶出行为比较部分 从 自制卡培他滨片与原研产品希罗达在四种溶出介质中的累积溶出曲线看, 两者体外溶出行为基本一致 确定的自制卡培他滨片与对照药品希罗达的处方组成比较见下表 : 9 / 97

113 希罗达 ( 原研产品 ) 自制卡培他滨片 主药卡培他滨卡培他滨 稀释剂 乳糖 乳糖 微晶纤维素 微晶纤维素 粘合剂 羟丙甲纤维素 羟丙甲纤维素 崩解剂交联羧甲基纤维素钠交联羧甲基纤维素钠 润滑剂硬脂酸镁硬脂酸镁 助流剂 / 二氧化硅 包衣材料 羟丙甲纤维素 滑石粉 钛白粉 合成氧化铁黄 氧化铁红 胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 配方组分 : 聚乙烯醇 二氧化钛 滑石粉 聚乙二醇 大豆磷脂 ) 在药品开发阶段中处方组成变化汇总, 见下表 : 处方组成变化汇总 小试处方 中试处方 大生产处方 主要变化及原因 支持依据 批量 800 片 / 3.5 万片 本品从小试到放大, 处方组成没有变化 / 本品中原辅料均不存在过量投料现象 3.2.P 制剂相关特性为进一步验证我们的处方工艺, 将自制样品与希罗达进行了体外溶出行为和有关物质的对比 原研产品 : 由上海罗氏制药有限公司为瑞士巴塞尔豪夫迈 罗氏有限公司生产 ; 商品名 : 希罗达 (Xeloda ); 规格 :0.5g; 铝塑包装 批号 :SH0189, 生产日期 , 有效期至 ; 批号 :SH0329, 生产日期 , 有效期至 ; (1) 自制样品与对照药品不同溶出介质中的溶出行为对比自制卡培他滨片批号 , 规格 0.5g, 铝塑包装, 来源 : 江苏正大天晴药业股份有限公司 溶出条件 : 溶出介质 : 分别以 900ml 水 ph1.2 盐酸溶液 ph4.0 醋酸盐缓冲液 10 / 97

114 ph6.8 磷酸盐缓冲液作为溶出介质方法 : 中国药典 2010 年版二部附录 X C 第二法桨法转速 : 每分钟 50 转取样点 : 分别经 min 时, 取溶出液 10ml, 经 0.45μm 滤膜滤过, 同时补加等量同温溶剂, 测定方法 : 精密量取续滤液 2ml, 置 50ml 容量瓶中, 分别用相对应的溶出介质稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液 ; 另取卡培他滨对照品适量, 加相应溶出介质溶解制成每 1ml 中约含 16µg 卡培他滨的溶液, 作为对照品溶液 分别取供试品溶液及对照品溶液, 照紫外 - 可见分光光度法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 ⅣA), 在 304nm 波长处测定吸光度, 计算溶出度并绘制累积溶出曲线 在四种溶出介质中的累积溶出度及溶出曲线结果见表 ** 及图 ** 表 ** 卡培他滨片 批水中溶出曲线测定结果 (n=6) 累积溶出度 (%) 时间 min 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 图 ** 卡培他滨片 批水中溶出曲线 (n=6 ) 批水中溶出曲线 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 时间 (min) 11 / 97

115 表 ** 卡培他滨片 批 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线数据 (n=6) 时间 min 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 图 ** 卡培他滨片 批 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线 (n=6) 批 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线 100 累积溶80 出度60 (% ) 时间 (min) 片 1 片 2 片 4 片 5 片 6 表 ** 卡培他滨片 批 ph4.0 醋酸盐缓冲液溶出曲线数据 (n=6) 时间 min 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% / 97

116 累积溶出度图 ** 卡培他滨片 批 ph4.0 醋酸盐缓冲液溶出曲线 (n=6) 批 PH4.0 醋酸盐缓冲液溶出曲线 (50 % )30 10 片 1 片 2 片 4 片 5 片 时间 (min) 表 ** 卡培他滨片 批 ph6.8 磷酸盐缓冲液溶出曲线数据 (n=6) 累积溶出度 (%) 时间 min 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 图 ** 卡培他滨片 批 ph6.8 磷酸盐缓冲液溶出曲线 (n=6) 批 ph6.8 磷酸盐缓冲液溶出曲线(累90 % )积溶出度 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 时间 (min) 13 / 97

117 时间 min 表 ** 希罗达水中溶出曲线测定结果 (n=6) 希罗达 批号 :SH0189 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 时间 min 希罗达 累积溶出度 (%) 批号 :SH0329 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 图 5 希罗达水中溶出曲线 (n=6) rsd% rsd% 希罗达 SH0189 水中溶出曲线 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 时间 (min) 希罗达 SH0329 水中溶出曲线 100 (累80 % )积溶出度 片 1 片 2 片 3 片 4 片 时间 (min) 14 / 97

118 表 ** 希罗达 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线测定结果 (n=6) 希罗达 批号 :SH0189 时间累积溶出度 (%) min 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 时间 min 希罗达 累积溶出度 (%) 批号 :SH0329 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 图 ** 希罗达 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线 (n=6) 希罗达 SH0189 ph1.2 盐酸溶液溶出曲线(累100 % )积溶出度 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 时间 (min) 15 / 97

119 累积溶出度(% ) 10 希罗达 SH0329 ph1.2 盐酸中溶出曲线 时间 (min) 片 1 片 2 片 (% )表 * 希罗达 ph4.0 醋酸盐盐缓冲液溶溶出曲线数据 (n=6) 90 希罗达 批号 :SH0189 时间 min 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 希罗达 批号 :SH0329 时间 min 片 1 片 2 片 3 累积溶出出度 (%) 片 4 片 5 片 6 平均 图 * 希罗达 ph4.0 醋酸盐缓冲液液溶出曲线 (n=6) 110 累积溶出度 时间 (min) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 60 rsd% rsd% / 97

120 (累% )120 希罗达 SH0329 ph4.0 醋酸中溶出曲线 100 积溶出度 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 时间 (min) 表 * 希罗达 ph6.8 磷酸盐缓冲液溶出曲线数据 (n=6) 希罗达 批号 :SH0189 时间 累积溶出度 (%) rsd% min 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 希罗达 批号 :SH0329 时间 min 累积溶出度 (%) 片 1 片 2 片 3 片 4 片 5 片 6 平均 rsd% 17 / 97

121 累累(% )0 (% )图 * 希罗达 ph6.8 磷酸盐缓冲液液溶出曲线 (n=6) 片 2 60 片 片 1 片 2 50 片 3 片 4 30 片 5 片 6 10 时间 (min) 希罗达 SH0329 ph6.8 磷酸盐缓冲液中中溶出曲线 80 片 1 40 片 4 0 积溶出度累积溶出度0 20 片 5 片 时间 ( min) 18 / 97

122 表 * 卡培他滨片 (*** 批 ) 同希罗达在四种介质中溶出曲线 测定结果比较 (n=6) 溶出 介质 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批希罗达 SH0189 希罗达 SH 水 ph1.2 盐酸溶液 ph4.0 醋酸盐缓冲液 ph6.8 磷酸盐缓冲液 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批 希罗达 SH0189 希罗达 SH 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批 希罗达 SH0189 希罗达 SH 累积溶出量 (%) 时间 min *** 批 希罗达 H0189 希罗达 SH / 97

123 累积溶出度(% )注 :(1) 本品在盐酸溶液累积溶出量在溶出 30 分钟后有降低趋势, 推测与本品在盐酸 溶液中不稳定, 发生降解有关 (2) 在自制片 *** 批和希罗达 SH0189 批的溶出曲线测定中 15min 没有取样 图 10 卡培他滨片 (*** 批 ) 与希罗达在水中溶出曲线的比较 (40 % )水中溶出曲线 20 SH0329 SH 时间 (min) 卡培他滨片 (*** 批 ) 与希罗达在 ph1.2 盐酸溶液中 溶出曲线的比较 累积溶出度pH1.2 盐酸溶液中溶出曲线 (50 % )SH SH 时间 (min) 20 / 97

124 累积溶出度卡培他滨片 (*** 批 ) 与希罗达 在 ph4.0 醋酸盐缓冲液中溶出曲线的比较 120 ph4.0 醋酸溶液中溶出曲线 (% )40 20 SH0189 SH0329 SH 时间 (min) 卡培他滨片 (*** 批 ) 与希罗达 在 ph6.8 磷酸盐缓冲液中溶出曲线的比较 ph6.8 磷酸溶液中溶出曲线 100 累积溶80 出度60 (40 % )20 SH0189 SH 时间 (min) 从四种溶出介质中的累积溶出曲线看, 我公司研制的卡培他滨片与希 罗达的体外溶出行为基本一致 计算 f2 相似因子, 溶出达到 85% 以上的 时间点只能选取一个, 且时间点不少于 3 个 因此选择 min 的 溶出数据, 结果如下 : 溶出介质 **** 批与希罗达 SH0189 **** 批与希罗达 SH0329 f2 相似因子 水 ph1.2 盐酸溶液 ph4.0 醋酸盐缓冲液 ph6.8 磷酸盐缓冲液 / 97

125 因自制样品与对照药品希罗达 SH0189 在水的溶出曲线各时间点相差在 2%~5% 之间, 因此在水中两者的 f2 相似因子在 65~83 之间 结论 : 自制样品与希罗达在 4 种不同的溶出介质中溶出曲线的 f2 相似因子均大于 50, 说明自制样品与希罗达溶出曲线具有相似性 (2) 有关物质比较 自制卡培他滨片 批号 :100225;**** 批,**** 批 **** 批 规格 :0.5g, 铝塑包装, 来源 : 江苏正大天晴药业股份有限公司 有关物质测定方法详见 3.2.P.5.2 分析方法 自制卡培他滨片与希罗达有关物质测定结果 批号 杂质 (A%) 杂质 B (%) 杂质 C (%) 最大未知单杂 (%) 未知总杂 (%) 总杂 (%) 未检出 **** 批 0.03 未检出 **** 批 **** 批 0.03 未检出 希罗达 (SH0189) 0.05 未检出 希罗达 (SH0329) 另外, 将自制卡培他滨片的有关物质与希罗达的有关物质杂质谱进 行了详细的对比分析 ( 面积归一化 ), 结果见下表 自制卡培他滨片与希罗达有关物质杂质谱比较 杂质峰 (%) 相对保留时间 **** 批 **** 批 **** 批 希罗达 (SH0189) 希罗达 (SH0329) 0.18( 杂质 A) ( 杂质 B) / / / / / / / / / / / 0.38 / / / / 0.03 / / 0.67 / / / / / ( 杂质 C) / 0.01 / / / / 97

126 1.19 / / / / / / / / 未知最大单杂 (%) 总杂 (%) 将自制卡培他滨片与希罗达进行对比, 结果显示自制卡培他滨片有关 物质总杂 <0.20%, 单一杂质 <0.10%, 与希罗达杂质谱基本一致 3.2.P.2.3 生产工艺的开发根据本品处方组成, 考虑到主药卡培他滨流动性较差且在处方中约占总重的 80%, 选择了常规的湿法制粒 压片 薄膜包衣工艺 小试工艺参数在实验 经验基础上, 确定各工序的参数控制 ; 根据小试工艺 生产设备的一些常用参数, 进行 3 批放大生产并同步工艺验证, 确定主要工序 制粒 总混的工艺控制参数 对 3 批放大样品的片重差异 溶出度 有关物质 含量等主要测定项目结果看, 没有明显差异 ; 并通过自制样品批内溶出均一性 批间溶出重现性以及与希罗达溶出行为比较, 来考察工艺稳定性, 最终确定生产工艺 (1) 小试工艺 : 1 预处理原辅料预处理过筛去除结块, 获得均匀粒子群, 利于后续制粒 混合 压片等工序的进行 根据原料药卡培他滨 乳糖 微晶纤维素的性状 粒度, 选择常规 60 目筛 2 制粒根据主药特性, 本品选择湿法制粒工艺, 改善物料的流动性 可压性 小试原辅料手工混合, 加粘合剂制软材, 制粒选择常规 20 目筛网, 手工制粒 经多批小试制备的颗粒较为均一, 能重现 3 烘干 整粒烘干温度通常根据药物性质制定, 一般为 40~60 卡培他滨原料药 60 放置 5 天有关物质没有明显变化, 表明对温度不敏感 ; 制粒使用水做润湿剂, 为保证干燥效率拟定烘干温度 / 97

127 一般干燥颗粒水分控制在 3% 左右 多批小试的烘干终点均根据水分测定结果 ( 干燥失重法 ) 确认, 水分在 0.8~1.8% 之间, 压片外观 硬度批内 批间没有差异 因此控制干燥水分不超过 2.0%, 干燥终点以水分控制结果为准 整粒可使干燥过程中结块 粘连的颗粒分散开, 得到大小均匀的颗粒 筛网选择一般比制粒的筛网稍小, 本品制粒 20 目筛, 故整粒拟选择 24 目筛网 在小试中整粒采用 目筛, 对松密度 休止角等项目进行对比如下 : 整粒筛目松密度 g/ml 休止角 ( 度 ) 可压性片重差异 (%) 20 目 35~37 32 良好 ±5 24 目 37~38 34 良好 ±4 因此确定烘干温度 60, 整粒 24 目筛 4 总混小试采用塑料袋手工混合, 参照公司多个产品总混时间, 选择 10~15min 中间体含量检测, 与理论值基本相同, 说明混合 10~15min 能保证混合均匀 中间体的含量理论值约 80%, 多批样品的中间体含量见下表 : 批号 中间体含量 (%) 考虑大生产, 并参照成品的含量控制范围, 暂定中间体含量范围 74.6%--84.3% 5 压片片重控制 : 本品片重大于 0.5g, 按照中国药典附录片重差异应控制在 ±5.0%, 从小试情况看, 片重控制可以在 ±4.0%, 因此暂定压片阶段片重差异控制 ±4.0% 硬度 : 片硬度较低 ** kg/mm 2 时, 脆碎度大于 0.1%, 崩解时限 ( 片溶出时间 ) 较快约 15~20min; 硬度大于 ** kg/mm 2 设备负荷过大, 生产不可行 因此压片选择压力控制 **~**kg/mm 2 压片速度 : 压片小试采用 DP 亚力单冲压片机, 根据模具形状 设备运行情况 压片的片重检测, 压片速度控制在 10~20 片 /min 范围内, 24 / 97

128 能保证压片的质量 小试阶段的压片速度一直控制在此范围 6 包衣使用 BG1-5 高效包衣机, 热风温度 60 主机转速 4~7 转 /min 雾化压力约 0.5Mpa 包衣液喷液速度( 决定于蠕动泵速度 ) 均是参照经验参数 7 铝包使用 In-pack 铝包机, 热合温度 120~140 压缩空气压力约 0.6Mpa 均参照经验使用参数 (2) 放大生产各主要参数 1 预处理采用 FZB-150 粉碎整粒机将原辅料过筛, 筛网 60 目 2 预混 制粒大生产采用 LHS-200 湿法混合制粒机, 此设备常用预混搅拌 ***rpm 剪切 ***rpm, 时间 5min, 加入粘合剂制粒, 制粒参数 : 搅拌 **rpm; 剪切 **rpm; 雾化压力 0.25~0.35Mpa, 至软材中有明显颗粒时, 制粒结束 将制好的软材在线湿整粒, 筛网孔径 :3 3mm 启动流化床, 将湿颗粒在线传输至流化床 三批放大样品, 预混后在 5 个不同位置取样检测含量, 含量均匀性较好,RSD 在 0.2~0.4% 之间 确认预混搅拌 ***rpm 剪切 ***rpm 时间 **min, 湿整粒筛网 3*3mm 3 烘干 整粒放大生产采用 FZ-60 沸腾制粒机, 进风温度参照小试设定为 60, 干燥风量 Hz, 可根据物料流化状态 批量进行调整风量 干燥终点水分参照小试不超过 *%, 干燥终点根据水分测定结果确定 整粒机采用设备常用参数, 筛网 1.2*1.2mm, 根据整粒后颗粒状况可适当调整转速 4 总混大生产采用 HTD-200 料斗混合机, 固定转速 15rpm, 混合 min 在 5 个不同位置取样测定含量, 结果含量均匀度 RSD 均 <1% 干颗粒水分控制不超过 2.0%, 总混加入硬脂酸镁 二氧化硅, 因此中间体水分控制 25 / 97

129 不超过 3.0% 5 压片大生产采用 ZPY-124 旋转式压片机, 硬度 片重控制参照小试, 三批样品硬度在 **~**kg/mm 2 之间, 片重差异能控制在 ±2% 之内, 压片速度控制 2~4 万片 / 小时, 能保证压片质量 考虑大生产压片硬度控制 **~**kg/mm 2, 片重差异控制 ±4% 6 包衣包衣采用 BG40B 高效包衣机, 热风温度 60, 主机转速 4~7 转 /min, 雾化压力约 0.5Mpa, 均是经验参数 三批放大样品按照上述参数包衣, 外观光洁 无粘连 本品为薄膜包衣, 增重控制不超过 3% 在包衣结束每批随即抽样 12 片, 检测溶出度, 证明包衣对溶出度没有影响 产品的溶出曲线批内均一性 批间重现性, 证明包衣工序对产品质量没有影响 因此包衣参数可行 7 铝包铝包机 DPS250DⅠ 自动泡罩包装机, 热合温度 120~160, 压缩空气压力 0.6Mpa, 均是经验参数 按照上述参数进行三批放大样品的铝包, 经密封性实验, 无一漏水, 确定铝包参数 (2) 按上述工艺放大生产 3 批样品, 同步工艺验证 主要项目的检测结果如下 : 卡培他滨片三批放大样品主要项目检测结果批号 **** 批 **** 批 **** 批 检查 片重差异 符合规定 符合规定 符合规定 有关物质 杂质 A 0.03% 0.04% 0.03% 杂质 B 未检出 0.01% 未检出 杂质 C 0.01% 0.01% 0.01% 其他单个杂质 0.04% 0.02% 0.02% 未知总杂质 0.15% 0.04% 0.03% 总杂质 0.18% 0.10% 0.07% 溶出度 96% 99% 100% 含量测定 26 / 97

130 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 应为标示量的 93.0~ 105.0% 98.5% 101.1% 101.6% 从 3 批样品主要项目的检测结果看, 工艺较为稳定 (4) 溶出均一性试验自制卡培他滨片批号 :****, 溶出介质 : 以 900ml 水为溶出介质方法 : 中国药典 2010 年版二部附录 X C 第二法桨法转速 : 50 转 /min 取样点 : 分别经 min 时, 取溶出液 10ml, 经 0.45μm 滤膜滤过, 同时补加等量同温溶剂 测定方法同 3.2.P 制剂相关特性 --- 溶出行为的溶出曲线测定方法 结果见表 12, 溶出曲线见图 14 表 12 **** 批溶出均一性测定结果 (n=6) 编号 累积溶出度 (%) 10min 20min 30min 45min 60min 平均值 % RSD% / 97

131 图 14 卡培他他滨片 ( 批号 :****) 累计溶出出曲线图 (5) 批间溶出出重现性为考察拟定工艺的稳稳定性, 对 3 批放大样样品进行溶出行为的考考察 溶出介质 : 以 900ml 水为溶出出介质 方法 : 中国药典 2010 年版二部部附录 X C 第二法 桨法 转速 : 50 转 /min 取样点 : 分别经 min 时, 取溶出液 10ml, 经 0.45μm 滤膜膜滤过, 同时补加等量量同温溶剂, 测定方法同 3.2.P 制剂相关关特性 --- 溶出行为的溶溶出曲线测测定方法 结果果见表 13, 溶出曲线见见图 15 表 13 三批自自制样品溶出度重现性性试验结果 (n=6) 时间 (min) **** 批 累积溶出出度 (%) **** 批 **** 批 平均值 RSD% / 97

132 图 15 三批自制制样品累计计溶出曲线 f2 相似因因子比较 : 采用单点比较法, 自制三批卡卡培他滨片的的在水中溶溶出曲线的每每个时间点得得差异在 2~ ~5% 之间, f2 相似因子子在 65~83 (6) 与希罗达达溶出行为为比较对 **** 批与希罗达达在四种溶溶出介质中的的溶出行为为进行比较, 确认生生产工艺 详见 3..2.P 制剂相关特性性 (7) 生产工艺艺变化汇总和批分析汇汇总本品在研研制过程中, 随着批量量的增加, 生产地点由实验室逐渐渐转为车间生生产线, 原辅料预处理理 制粒 烘干整粒 压片 包包衣 铝包等等设备也发生生了相应的变化, 具体体见下表 : 29 / 97

133 生产工艺变化汇总 小试工艺 中试生产工艺 大生产工艺 主要变化 支持依据 批量 800 片 / 3.5 万片 批量增加 逐步放大 预处理 手工 60 目筛 / FZB-150 粉碎整粒机 60 目 制粒 20 目筛 / LHS-200 湿法混合制粒机筛网孔径 3*3mm 干燥 DGG-9053A 电热恒温鼓风干燥箱 60 终点判断 : 水分 2.0% / FZ-60 沸腾制粒机进风温度 60, 风量 30~40Hz, 根据物料流化状态适当调整终点判断 : 水分 2.0% 整粒 20 目筛 / ZL-450 干整粒机孔径 1.2mm 随批产量增加, 生 设备及参数 总混 压片 包衣 塑料袋手工混合 15min 中间体含量 79.61% 休止角约 33 / DP 亚力单冲压片机硬度 13~15kg/mm 2 片重差异 ±4% BG1-5 高效包衣机热风温度 60 主机转速 4~7 转 /min 雾化压力约 0.5Mpa / / HTD-200 料斗混合机混合 15min 中间体含量 79.7%~80.6% 休止角约 36 ZPY-124 旋转式压片机硬度 14~17kg/mm 2 片重差异 ±4% BG40B 高效包衣机热风温度 60 主机转速 4~7 转 /min 雾化压力约 0.5Mpa 随批产量增加, 生产地点从实验室转移到车间, 生产设备发生变化 产设备发生变化 中间体含量 休止角等参数与小试基本相同, 对压片工艺没有明显影响 溶出行为与原研产品基本一致 铝包 In-pack 铝包机热合温度 120~140 压缩空气压力约 0.6Mpa / DPS250DⅠ 自动泡罩包装机热合温度 120~160 压缩空气压力约 0.6Mpa 30 / 97

134 卡培他滨片批分析汇总 批号生产日期生产地点规模收率样品用途 样品质量 含量 (%) 杂质 (%) 溶出度 杂质 A 0.03 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 84.9% 工艺验证, 稳定性考察 98.5 杂质 B 未检出 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.04 未知总杂 0.15 符合规定 总杂 0.18 杂质 A 0.04 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 89.7% 工艺验证, 稳定性考察 杂质 B 0.01 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.02 未知总杂 0.04 符合规定 总杂 0.10 杂质 A 0.03 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 88.9% 工艺验证, 稳定性考察 杂质 B 未检出 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.02 未知总杂 0.03 符合规定 总杂 / 97

135 杂质 A 0.10 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 82.4% 生产现场核查 杂质 B 0.01 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.03 未知总杂 0.08 符合规定 总杂 0.20 杂质 A 0.08 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 85.2% 生产现场核查 98.1 杂质 B 0.02 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.05 未知总杂 0.08 符合规定 总杂 0.19 杂质 A 0.08 **** 批 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 3.5 万片 89.7% 生产现场核查 杂质 B 0.02 杂质 C 0.01 未知最大单杂 0.05 未知总杂 0.08 符合规定 总杂 / 97

136 3.2.P.2.4 包装材料 / 容器 项目包装容器配件 注 1 包材类型 包材生产商 聚氯乙烯 / 聚偏二氯乙烯固体药用复合硬片 (PVC/PVDC) 江苏琼花高科技股份有限公司 药品包装用铝箔 (PTP) 江苏中金玛泰医药包装有限公司 包材注册证号国药包字 国药包字 不适用 包材注册证有效期至 2015 年 2 月 11 日至 2011 年 10 月 9 日 包材质量标准编号 YBB YBB 注 1: 铝塑泡罩包装, 组成为 : PVC/PVDC/ 铝 包材的检验报告 ( 包材生产商 ) 见下页 (2) 参照对照药品希罗达的包装, 选择铝塑包装 铝塑包装为固体制剂常用的包装形式, 便于携带, 减少药品携带和服用过程中的污染, 对水 气 光具有良好的阻隔性能 (3) 卡培他滨片直接接触药品的包装材料为聚氯乙烯 / 聚偏二氯乙烯固体药用复合硬片和药品包装用铝箔, 为固体制剂常用的包装材料, 具有良好的防潮 抗氧化功能 本品稳定性试验所用样品均采用铝塑包装, 经 40±2 /RH75±5% 加速 6 个月试验 30±2 /RH65±5% 长期留样 12 月稳定性试验考察, 质量稳定 结果表明, 本品选择的包装材料是合理的, 能满足贮藏 使用要求 33 / 97

137 34 / 97

138 35 / 97

139 3.2.P.2.5 相容性 本品为片剂, 无附带溶剂或者给药装置, 因此不进行该项目的研究 本部分参考文献 : 1 FDA 网站希罗达说明书 2 希罗达日文说明书 3 美国药典 USP32 版中卡培他滨片标准 4 FDA 网站卡培他滨片溶出曲线数据 5 希罗达处方中乳糖用量 36 / 97

140 3.2.P.3 生产 3.2. P.3.1 生产商生产商的名称 : 江苏正大天晴药业股份有限公司注册地址 : 江苏省连云港市新浦区巨龙北路 8 号电话 : 传真 : 生产地址 : 江苏省连云港市新浦区巨龙北路 8 号电话 : 传真 : P.3.2 批处方 成分用量 % 过量加入 作用 执行标准 片芯 卡培他滨 17.5kg 无主药企业标准 乳糖 1890g 8.67 无稀释剂中国药典 2010 年版 微晶纤维素 1575g 7.22 无稀释剂 JX 羟丙甲纤维素 (5cps) 约 315g 1.44 无粘合剂 交联羧甲基纤维素钠 210g JX 中国药典 2010 年版 0.96 无崩解剂 JX 二氧化硅 210g 0.96 无润滑剂中国药典 2010 年版 硬脂酸镁 105g 0.48 无润滑剂中国药典 2010 年版 包衣胃溶型薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 纯化水 *( 工艺中使用到并最终去除的溶剂 ) 655g / 无包衣粉沪 Q/WS g / 无包衣溶剂中国药典 2010 年版 共制成 3.5 万片 注 : 纯化水为粘合剂配制用溶剂和包衣粉的分散介质, 在工艺过程中去除 本品中原辅料不存在过量投料现象 3.2.P.3.3 生产工艺和工艺控制 (1) 工艺流程图 : 37 / 97

141 卡培他滨 微晶纤维素 乳糖 交联羧甲基纤维素钠 60 目过筛 60 目过筛 60 目过筛 3% 羟丙基甲基纤维素溶液 混合制粒 60 干燥 干 燥 二氧化硅 整 粒 时间 :15 分 总 混 硬脂酸镁 压 片 中间体检验 片重差异 :±4.0% 内包材料 内包装 外包材料 外包装 30 万级 检 验 入 库 (2) 工艺描述以工艺验证批 **** 批为例 (3.5 万片 / 批 ): 1 原辅料预处理工序将卡培他滨 乳糖 微晶纤维素分别过 60 目筛 2 制粒工序 38 / 97

142 粘合剂的制备 : 按羟丙基甲基纤维素 (5cps): 纯化水 =3:97(W:W) 的比例配制成 3% 的溶液 将过筛后卡培他滨 乳糖 微晶纤维素 交联羧甲基纤维素钠加入湿法混合制粒机中, 进行预混, 预混参数 : 搅拌 **rpm, 剪切 **rpm, 时间 **min 预混结束加入黏合剂进行制粒, 制粒参数 : 搅拌 **rpm; 剪切 **rpm; 雾化压力 0.25~0.35Mpa, 至软材中有明显颗粒时, 制粒结束 将制好的软材在线湿整粒, 筛网孔径 :3 3mm 启动流化床, 将湿颗粒在线传输至流化床 3 干燥工序使用沸腾干燥机进行干燥, 进风温度为 60, 干燥风量设定 30~40HZ, 应使全部颗粒应整体翻动, 必要时调整风量 用红外快速水分测定仪测定水分, 水分 2.0%, 干燥结束, 收料 4 整粒工序将烘干后的干颗粒进行在线整粒, 筛网孔径 1.2mm 5 总混工序将整粒后的干颗粒 硬脂酸镁 二氧化硅于混合机中混合 15 分钟, 取样检测中间体含量 水分 水分 3.0%, 中间体含量含卡培他滨应为 76.0%--84.0% 6 压片工序根据中间体含量, 折算标准片重, 压片 片重差异控制 ±4.0%; 压力范围 **~**kg/mm 2 7 包衣工序按胃溶型薄膜包衣预混剂 : 纯化水 =1:6.7(W:W) 的比例配制包衣液 包衣锅主机转速控制在 4~7 转 /min 包衣机热风温度设为 65, 预热至出风温度 48 开始包衣 蠕动泵转速 5~10rpm, 雾化压力 0.40~0.60Mpa, 喷枪到片床距离控制在 20~40cm, 喷射角度与片床平面成 90 度, 包衣过程控制负压在 60~100pa 包衣过程中出风温度控制在 48 ~55 之间 包衣增重约约 3.0% 8 包装工序铝塑包装参数设定 : 热合温度设定为 140, 压缩空气压力 0.6Mpa, 39 / 97

143 可根据室温和铝塑包装材料的不同, 可适当上下调整设定温度, 密封合格为宜 包装规格 :12 片 / 板,11 板 / 盒,25 板 / 盒 (2) 主要的生产设备 生产设备 型号 生产厂家 生产能力 湿法混合制粒机 LHS-200 迦南科技集团 60kg/ 批次 沸腾制粒机 FZ-60 迦南科技集团 30kg/ 批次 干整粒机 ZL-450 迦南科技集团 - 料斗混合机 HTD-200 迦南科技集团 60kg/ 批次 旋转式压片机 ZPY-124 上海天和制药机械厂 6 万片 / 小时 高效包衣机 BG40B 北京航空制造工程研究所 40kg/ 批次 自动泡罩包装机 DPS250DⅠ 江南包装机械有限公司 15 万片 / 小时 (3) 大生产的拟定规模 : 我公司卡培他滨片注册批规模最大为 3.5 万片 / 批, 拟定的大生产批量为 2.5 万片 ~7 万片 3.2.P.3.4 关键步骤和中间体的控制 (1) 关键步骤及其工艺参数控制范围 工序 检查项目 合格标准 预混 搅拌 **rpm, 剪切 **rpm, 时间 **min 制 粒 制粒 搅拌 **rpm; 剪切 **rpm; 雾化压力 0.25~0.35Mpa, 至软材中有明显颗粒时, 制粒结束 湿颗粒整粒 筛网孔径 :3 3mm 干燥进风温度 60 干 燥 风量 30~40Hz, 应使全部颗粒应整体翻动, 必要时调整风量 干燥终点 以颗粒水分检测结果为准, 颗粒水分控制在 2.0% 整粒筛网目数 mm 混 合 混合时间 混合转速 ** 分钟 15rpm 性状 白色或类白色颗粒和粉末 中间体 卡培他滨含量 76.0%--84.0% 水分 3.0% 40 / 97

144 工序检查项目合格标准 素片外观 表面完整光洁, 边缘整齐 压 片 片重差异 ±4% 硬 度 **~**kg/mm 2 包衣锅转速 4-7 转 / 分 ; 包衣机热风温度设为 65, 预热至出 风温度 48 开始包衣 蠕动泵转速 5~10rpm, 雾化压力 0.40~ 包衣参数 0.60Mpa, 喷枪到片床距离控制在 20~40cm, 喷射角度与片床 包衣 平面成 90 度, 包衣过程控制负压在 60~100pa 包衣过程中出 包衣增重约 3.0% 风温度控制在 48 ~55 之间 外观 色泽均匀, 表面光滑, 无粘连 无包衣液脱落等现象 根据实验小试, 放大 3 批工艺验证的参数, 制定各工序控制参数标准控制 ; 并根据工艺验证, 缩小中间体含量控制范围 (2) 中间体的控制检查项目方法合格标准性状目测观察白色或类白色颗粒和粉末水分 水分测定法操作规程 Q/SOP % 含量 液相色谱法操作规程 Q/SOP 含卡培他滨应为 74.6%--84.3% 本品中间体含量的测定方法同卡培他滨片的含量测定方法, 方法学研究参照 3.2.P.5.3 分析方法的验证 --- 含量方法学验证 1. 水分 1.1 仪器与用具 : 快速红外水分测定仪 1.2 操作方法 : 取供试品 2g, 置快速红外水分测定仪中, 依法测定, 从仪器显示屏上直接读取供试品中水分的含量 1.3 限度 : 应小于 3.0% 2. 中间体含量测定 2.1 试剂与试液 : 甲醇 乙腈 醋酸 卡培他滨对照品 2.2 仪器与用具 : 电子分析天平 十八烷基硅烷键合硅胶柱 高效液相色谱仪 量筒 容量瓶 2.3 流动相的配制 : 流动相 A:0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5); 流动 41 / 97

145 相 B: 甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5); 按下表梯度洗脱 : 时间 流动相 A (%) 流动相 B (%) 供试品溶液的配制 : 取供试品适量 ( 约相当于卡培他滨 15mg), 置 25ml 量 瓶中, 加溶剂 [ 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)] 适量, 超声 5 分钟, 用溶剂稀释至刻 度, 摇匀, 离心, 取上层离心液作为供试品溶液 ( 配制 2 份 ) 2.5 对照品溶液 : 精密称取经水分测定的卡培他滨对照品适量, 加溶剂溶解并定 量稀释制成每 1ml 中约含 0.6mg 的溶液, 作为对照品溶液 ( 配制 2 份 ) 2.6 色谱条件与系统适用性试验 : 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ; 流动相 A 为 0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5), 流动相 B 为甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5), 流速为每分钟 1.0ml, 线性梯度洗脱 ; 柱温 40 ; 样品温度 5 ; 检测波长为 250nm 理论塔板数按卡培他滨峰计算不低于 操作方法 : 照 Q/SOP 高效液相色谱法操作规程 检测, 精密量 取对照品溶液 10μl, 分别注入液相色谱仪 ( 一份进 2 针, 一份进 3 针 ), 在系统 适用性试验符合上述要求的条件下, 调节检测灵敏度, 使对照品溶液主峰全量程 显示 ; 再精密量取供试品溶液 10μl, 注入液相色谱仪 ( 每份各进 2 针 ), 记录色 谱图, 按外标法以峰面积计算, 即得 C对照 ( 1 水对照 %) 对照品含量 % f A 2.8 计算公式 :(1) 对照 式中 : f 校正因子 ; C 对照 对照品溶液的浓度,mg/ml; A 对照 对照品溶液主峰的峰面积 ; 水对照 % 对照品所含水分的百分数 式中 : f 平均 平均校正因子 ; f 平均 A供试品 (2) 含量 % 100% C 供试品 42 / 97

146 C 供试品 供试品溶液的浓度,mg/ml; A 供品试 供试品溶液主峰的峰面积 3.2.P.3.5 工艺验证和评价卡培他滨片工艺验证方案 ( 编号 :YZ , 版本号 :01) 和工艺验证报告 ( 编号 :YZ , 版本号 :01), 详见附件二 三 我公司于 2010 年 3 月 30 日 ---4 月 1 日在本公司九车间进行三批卡培他滨片 ( 批号 :**,**,**) 放大, 每批配制量 3.5 万片, 并同时对预处理工序 制粒工序 烘干工序 总混工序 压片工序 包衣工序 铝塑包装工序等关键的工艺步骤进行验证 验证总结如下 : 工序 预混制粒工序 烘干 总混 压片 验证结果 在制粒机中干粉预混 5min 后, 在 5 个不同位置取样, 每个位置取样 2g, 检测各取样点样品含量 检测结果 : 各取样点的含量均匀性较好,RSD 均在 0.2%~0.4% 之间 通过对烘干过程中水分的监测, 从 30 分钟开始每隔 10 分钟取样检测水分, 直至生产结束, 可以看出颗粒的水分随着烘干时间的延长, 水分成梯度下降, 并且 3 批数据稳定, 说明现行的生产设备和生产工艺满足生产要求, 并且在 50 分钟时水分均符合要求 含量 : 在总混 5 分钟 10 分钟 15 分钟时在 5 各不同位置取样, 检测中间体含量, 结果显示三批样品的中间体含量均匀性较好, 其 RSD 值均在 0.2%~ 0.4% 结果表明, 总混时间控制为 * 分钟, 可以确保物料混合均匀 水分 : 在总混结束后在 5 个不同位置取样, 各取样点 2g, 对总混工序中的物料水分进行检查 结果表明 : 三批产品的水分均在 1.4%~1.6% 之间 结果表明 : 中间体的水分控制在 3.0% 以内, 符合工艺规定 堆密度和休止角 : 在总混结束后在混合机中部取样 100g, 检测样品的堆密度和休止角 结果显示 : 三批中间体松密度均在 40g/100ml~65g/100ml 范围之内, 三批中间体休止角均在 30 ~40 范围之内, 物料的流动性良好, 保证压片工序顺利进行 在压片过程中, 检测卡培他滨片的片重差异 硬度 溶出度 脆碎度 片重差异 : 在压片运行正常以后, 每 15 分钟取 20 片, 直至生产结束, 对其片重差异进行检查 三批样品的片重差异结果显示, 最大正偏差为 0.41, 最大负偏差为 0.42 表明卡培他滨片的片重差异在可控范围之内, 符合工艺要求硬度 : 在压片运行正常以后, 每 15 分钟取 6 片, 对其硬度进行检查 三批样品的硬度检查结果均在 **~**kg/mm 2, 符合工艺要求 溶出度 : 在压片开始阶段 中间阶段 结束阶段各取样 12 片, 检测样品的溶出度 三批样品的溶出度测定结果均在 90% 以上, 符合工艺要求 脆碎度 : 在压片开始阶段 中间阶段 结束阶段各取样 12 片, 检测样品 43 / 97

147 包衣 铝塑包装 的脆碎度 三批样品的脆碎度检测结果 : 减失重量均为 0.1%, 符合工艺要求 通过对压片过程中的片重差异 硬度 溶出度 脆碎度的测定, 可以看出, 压片设备, 以及中间体的颗粒性质能够满足工艺要求, 压片生产工艺稳定可靠, 并且为下一道包衣工序提供符合包衣要求的片剂 在包衣结束后随机抽取 12 片, 检测成品的溶出度 三批样品的溶出度均在 90% 以上, 符合工艺要求 在包装开始 结束阶段各取样 6 板, 检验密封性 三批均无一片渗水, 表明包装材料和包装设备以及包装工艺满足工艺要求 综上所述, 按照 卡培他滨片工艺规程 和 卡培他滨片工艺验证方案, 对连续生产的三批卡培他滨片进行验证, 各工序的各项数据均符合工艺要求, 生 产过程中无偏差, 确认了各工序工艺关键参数 ; 按照此工艺条件生产的三批样品, 经检验, 各项检验结果均在可控的范围之内, 符合卡培他滨片质量标准 表明卡 培他滨片既定的工艺参数符合工艺要求, 生产工艺能够生产要求, 具有良好的重 现性和稳定性 3.2.P.4 原辅料的控制 成分生产商批准文号 / 注册证号质量标准 卡培他滨 连云港润众制药有限公司 同期申报 自拟质量标准 微晶纤维素日本旭化成株式会社注册证号 F***** JX***** 乳糖 羟丙甲基纤维素 (5cps) 交联羧甲基纤维素钠 硬脂酸镁 上海华茂药业有限公司 陶氏化学公司 泰安瑞泰纤维素有限公司 美国 FMC Biopolymer,INC. 湖州展望药业有限公司 沪卫药准字 (1998) 第 号 中国药典 2010 年版 注册证号 F JX 鲁药准字 (2005) 第 号 中国药典 2010 年版 注册证号 F JX 浙药准字 F 号 中国药典 2010 年版 二氧化硅湖州展望药业有限公司浙药准字 F 中国药典 2010 年版 胃溶性薄膜包衣预混剂 ( 欧巴代 85G68918) 上海卡乐康薄膜包衣有限公司 沪卫药准字 (1998) 第 号 沪 Q/WS 江苏正大天晴药业股份纯化水 中国药典 2010 年版有限公司注 : 纯化水为粘合剂配制用溶剂和包衣粉的分散介质, 在工艺过程中去除 附 : 1) 卡培他滨原料药质量标准 检验报告书 2) 微晶纤维素生产商检验报告书及自检报告书 44 / 97

148 3) 乳糖生产商检验报告书及自检报告书 4) 羟丙甲纤维素(5cps) 生产商检验报告书及自检报告书 5) 交联羧甲基纤维素钠生产商检验报告书及自检报告书 6) 硬脂酸镁生产商检验报告书及自检报告书 7) 二氧化硅生产商检验报告书及自检报告书 8) 胃溶型薄膜包衣预混剂生产商检验报告书及自检报告书 45 / 97

149 3.2.P.5 制剂的质量控制 3.2.P.5.1 质量标准 检查项目方法放行标准限度货架期标准限度 性状 目检 本品为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 本品为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 鉴别 检查 (1) (2) 有关物质 溶出度 微生物限度 其他 重量差异 含量测定 HPLC 峰保留时间 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ) IR 法 红外分光光度法操作规程 (Q/SOP ) 液相色谱法操作规程 (Q/SOP ) 溶出度测定法操作规程 (Q/SOP ) 微生物限度检查法操作规程 (Q/SOP ) 中国药典 2010 年版二部附录 I A 中国药典 2010 年版二部附录 I A 液相色谱法操作规程 (Q /SOP ) 供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致 供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致 在 1760~1500cm -1 区间的 在 1760~1500cm -1 区间的红 红外光吸收图谱应与对照 外光吸收图谱应与对照品的 品的图谱一致 图谱一致 杂质 A 应 1.0% 杂质 A 应 1.0% 杂质 B 应 1.0% 杂质 B 应 1.0% 杂质 C 应 0.5% 杂质 C 应 0.5% 单个杂质应 0.1% 单个杂质应 0.1% 未知总杂应 0.5% 未知总杂应 0.5% 总杂质应 2.0% 总杂质应 2.0% 限度为标示量的 80% 限度为标示量的 80% 细菌数应 1000cfu/g 细菌数应 1000cfu/g 霉菌及酵母菌数 100cfu/g 霉菌及酵母菌数 100cfu/g 大肠埃希菌应不得检出 大肠埃希菌应不得检出 应完整光洁, 色泽均匀, 有 应完整光洁, 色泽均匀, 有 适宜的硬度和耐磨性 适宜的硬度和耐磨性 应为平均片重 (1±5%) 应为平均片重 (1±5%) 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 应为标示量的 93.0%~ 应为标示量的 93.0% ~ 105.0% 105.0% 注 : 卡培他滨片质量标准主要是参照 USP32/NF27 版中的卡培他滨片质量标准并结合自制样品的研究情况而制定的 在加速及长期稳定性试验中 ( 目前长期试验已完成至 12 个月 ), 各考察项均没有发现明显的变化趋势, 故目前暂定放行标准与货架期标准一致 3.2.P.5.2 分析方法 1. 性状 目检 : 本品为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 46 / 97

150 2. 鉴别 2.1 试剂与试液 : 醋酸 甲醇 乙腈 溴化钾 卡培他滨对照品 2.2 仪器与用具 : 傅里叶变换红外仪 高效液相色谱仪 2.3 操作方法 在含量测定项下记录的色谱图中, 供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致 取供试品约 1~1.5mg 溴化钾约 200~300mg( 与供试品的比约为 200:1), 置玛瑙研钵中, 研磨均匀, 压制成透明的溴化钾片, 将溴化钾片放在红外光谱仪中, 照 Q/SOP 红外分光光度法操作规程 检测, 录制光谱图, 即得 供试品在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致 3 有关物质 3.1 试剂与试液 : 甲醇 乙腈 醋酸 杂质 A 杂质 B 杂质 C 卡培他滨对照品 3.2 仪器与用具 : 电子分析天平 十八烷基硅烷键合硅胶柱 高效液相色谱仪 量筒 容量瓶 移液管 3.3 流动相的配制方法 : 流动相 A:0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5); 流动相 B: 甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5); 按下表梯度洗脱 : 时间流动相 A (%) 流动相 B (%) 供试品溶液的配制 : 取供试品 10 片, 精密称定, 研细, 精密称取 19mg( 约相当于卡培他滨 15mg), 置 25ml 量瓶中, 加溶剂 [ 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)] 适量, 超声处理 5 分钟, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上清液作为供试品溶液 ( 配制 1 份 ) 3.5 对照溶液的配制 : 精密量取供试品溶液 1ml, 置 100ml 量瓶中, 加溶剂 [ 水 - 47 / 97

151 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)] 稀释至刻度, 摇匀, 再精密量取 1ml, 置 10ml 量瓶中, 加溶剂稀释至刻度, 作为对照溶液 ( 配制 1 份 ) 3.6 系统适用性试验溶液的配制 : 精密称取杂质 A B C 对照品各 12mg, 置 100ml 量瓶中, 加溶剂溶解并稀释至刻度, 摇匀, 精密量取 1ml 置 10ml 量瓶, 加溶剂稀释至刻度, 摇匀, 作为混合对照品溶液 ; 精密称取卡培他滨对照品 12mg, 置 20ml 量瓶中, 再精密量取混合对照品溶液 1ml, 置同一 20ml 量瓶中, 加溶剂溶解并稀释至刻度, 摇匀, 制成每 1ml 中分别含 0.6μg 0.6μg 0.6μg 和 0.6mg 的混合溶液, 作为系统适用性试验溶液 ( 配制 1 份 ) 3.7 色谱条件与系统适用性试验 : 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ; 流动相 A 为 0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5), 流动相 B 为甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5), 流速为每分钟 1.0ml, 线性梯度洗脱 ; 柱温 40 ; 自动进样器温度 5 ; 检测波长 250nm 系统适用性试验溶液的出峰顺序依次为杂质 A B 卡培他滨 杂质 C, 杂质 A 峰与杂质 B 峰的分离度应不小于 操作方法 : 照 Q/SOP 液相色谱法操作规程 测定, 精密量取对照溶液 10μl, 注入液相色谱仪 ( 进样 1 针 ), 在系统适用性试验符合上述要求的条件下, 调节检测灵敏度, 使主成分峰高为满量程的 15~25%; 再精密量取对照溶液和供试品溶液各 10μl 注入液相色谱仪 ( 各进样 1 针 ), 记录色谱图, 供试品溶液记录的色谱图中如有 A B C 杂质峰, 杂质 A B 的峰面积与校正因子的乘积不得大于对照溶液主峰面积的 10 倍 (1.0%), 杂质 C 的峰面积与校正因子的乘积不得大于对照溶液主峰面积的 5 倍 (0.5%), 其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积 (0.1%), 各未知杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的 5 倍 (0.5%), 杂质 A,B,C 经校正后的峰面积与未知总杂质的峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的 20 倍 (2.0%) 供试品溶液中峰面积小于对照溶液主峰面积 0.05 倍的杂质峰不计 ( 杂质峰校正因子 :A=1.05 B=0.81 C=0.91) A单个杂质 3.9 计算公式 : 单个杂质 % 0.1% A 对照主峰 A未知总杂未知总杂质 % 0.1% A 对照主峰 48 / 97

152 A总杂质总杂质 % 0.1% A 对照主峰 式中 :A 单个杂质 供试品溶液色谱图中最大未知单个杂质峰的峰面积 ( 用于计算 单个杂质 ) 或供试品溶液色谱图中杂质 A B C 校正后的峰面 积 ( 用于计算杂质 A 杂质 B 和杂质 C);; A 未知总杂 供试品溶液色谱图中未知杂质峰的峰面积之和 ( 不包括溶剂峰 ); A 总杂质 供试品溶液 A B 和 C 经校正后的峰面积与未知总杂质的峰面 积的和 ( 不包括溶剂峰 ); A 对照主峰 对照溶液主峰的峰面积 3.10 限度 : 杂质 A 应 1.0%, 杂质 B 应 1.0%, 杂质 C 应 0.5%, 其他单个杂质 应 0.1%, 各未知杂质的和应 0.5%, 总杂质应 2.0% 4 溶出度 4.1 试剂与试液 : 卡培他滨对照品 4.2 仪器与用具 : 溶出仪 紫外 - 可见分光光度计 量筒 注射器 容量瓶 移液 管 4.3 供试品溶液 : 取供试品 6 片, 照 Q/SOP 溶出度测定法操作规程 检测, 以 900ml 水为溶出介质, 转速为每分钟 50 转, 依法操作, 经 30 分钟时, 取溶液适量, 滤过, 精密量取续滤液 2ml, 置于 50ml 量瓶中, 加水稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液 4.4 对照品溶液 : 取卡培他滨对照品约 16mg, 精密称定, 置 50ml 量瓶中, 加水 溶解稀释至刻度, 精密量取 1ml, 置 20ml 量瓶中, 加水稀释至刻度, 作为对照 品溶液 4.5 操作方法 : 取上述两种溶液, 照 Q/SOP 紫外 - 可见分光光度法操 作规程 检测, 在 304nm 的波长处分别测定吸光度, 计算每片的溶出量 A供试品 C对照品 对照品含量 % 4.6 计算公式 : 溶出度 %= 100% A C 式中 : 对照品 A 供试品 供试品溶液的吸光度 ; A 对照品 对照品溶液的吸光度 ; 49 / 97 供试品

153 C 对照品 对照品溶液的浓度 (mg/ml); C 供试品 供试品溶液的浓度 (mg/ml); 4.7 限度 : 不小于标示量的 80% 5 其他 片剂外观应完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 6 重量差异 6.1 仪器与用具 : 电子分析天平 镊子 6.2 操作方法 : 取供试品 20 片, 精密称定总重量, 求得平均片重后, 再分别精密 称定每片的重量, 每片重量与平均片重相比较, 超出重量差异限度的不得多于 2 片, 并不得有 1 片超出限度的 1 倍 6.3 限度 : 平均片重 (1±5%) 7 微生物限度 7.1 细菌数 霉菌及酵母菌数检查 : 取供试品 10g, 加 ph7.0 无菌氯化钠 - 蛋白 胨缓冲液至 100ml, 置 45 水浴加热溶解, 混匀, 作为 1:10 的供试品, 照 Q/SOP 微生物限度检查法操作规程 检查 细菌数检测采用培养基稀释法 (1ml 平均加入 5 个皿, 每皿 0.2ml); 霉菌及酵母菌数检测采用平皿法 ( 每皿 1ml), 应符合规定 7.2 大肠埃希菌检查 : 取 1:10 供试液加入 500ml 胆盐乳糖培养基中, 照 Q/SOP 微生物限度检查法操作规程 大肠埃希菌检查 ; 应符合规定 7.3 限度 : 每 1g 供试品中细菌数不得过 1000 cfu 霉菌及酵母菌数不得过 100cfu, 不得检出大肠埃希菌 8 含量测定 8.1 仪器与用具 : 电子分析天平 十八烷基硅烷键合硅胶柱 高效液相色谱仪 量筒 容量瓶 移液管 8.2 试剂与试液 : 甲醇 乙腈 醋酸 卡培他滨对照品 8.3 流动相的配制方法 : 流动相 A:0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5); 流 动相 B: 甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5); 按下表梯度洗脱 : 50 / 97

154 时间流动相 A (%) 流动相 B (%) 供试品溶液的配制 : 取供试品 10 片, 精密称定, 研细, 精密称取约 19mg( 约相当于卡培他滨 15mg), 置 25ml 量瓶中, 加溶剂 [ 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)] 适量, 超声处理 5 分钟, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上清液作为供试品溶液 ( 配制 2 份 ) 8.5 对照品溶液的配制 : 精密称取卡培他滨对照品约 15mg, 置 25ml 量瓶中, 加溶剂溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品溶液 ( 配制 2 份 ) 8.6 色谱条件与系统适用性试验 : 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ; 流动相 A 为 0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5), 流动相 B 为甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5), 流速为每分钟 1.0ml, 线性梯度洗脱 ; 柱温 40 ; 自动进样器温度 5 ; 检测波长 250nm 理论塔板数按卡培他滨峰计算不低于 操作方法 : 照 Q/SOP 液相色谱法操作规程 检测, 精密量取对照品溶液 10μl, 分别注入液相色谱仪 ( 一份进 2 针, 一份进 3 针 ), 在系统适用性试验符合上述要求的条件下, 调节检测灵敏度, 使对照品溶液主峰全量程显示 ; 再精密量取供试品溶液 10μl, 注入液相色谱仪 ( 每份各进 2 针 ), 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算, 即得 8.8 计算公式 :(1) f C 对照品 对照品含量 % A 对照品 式中 : f 校正因子 ; C 对招品 对照品溶液的浓度,mg/ml; A 对照品 对照品溶液主峰的峰面积 f 平均 A供试品 W平均片重 (2) 含量 % 100% C 规格 供试品 51 / 97

155 式中 : f 平均 平均校正因子 ; C 供试品 供试品溶液的浓度,mg/ml; A 供品试 供试品溶液主峰的峰面积 ; W 平均片重 平均片重 8.9 限度 : 含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 应为标示量的 93.0%~105.0% 3.2.P.5.3 分析方法的验证 分析方法验证主要根据中国药典二部附录 ⅪⅩA 药品质量标准分析方法验 证指导原则的要求进行, 对本品有关物质 含量测定 溶出度和微生物限度等进 行了方法学验证 ; 性状和片重差异等项目参考中国药典 2010 版凡例和附录收载 方法 具体方法学验证内容总结如下 : (1) 有关物质方法学验证总结 项目 波长选择 专属性 系统适用性 检测限 溶液稳定性 耐用性 52 / 97 验证结果 (1) 卡培他滨与片剂的强制降解产物杂质 A 杂质 B 和杂质 C 在 250nm 左右均有较大吸收 (2) 辅料在 250nm 处基本无吸收, 不干扰样品测定 (1) 卡培他滨主峰与已知杂质 ( 起始原料, 杂质 A B C D 和杂质 E) 之间达到良好分离 ; (2) 卡培他滨片强制降解 ( 酸 碱 高温 氧化及光降解 ) 产物之间达到良好分离且峰纯度符合要求 出峰顺序依次为杂质 A B 卡培他滨和杂质 C, 杂质 A 峰与杂质 B 峰的分离度应不小于 1.0 卡培他滨检测限 0.21ng; 杂质 A 检测限 0.48ng; 杂质 B 检测限 0.31ng; 杂质 C 检测限 0.32ng 供试品溶液室温放置 小时杂质峰个数及含量没有变化, 结果显示有关物质测定溶液至少在 12 小时内是稳定的 将色谱条件中的参数作适度变化后, 如色谱条件中的流速 柱温及色谱柱的厂家等参数作微小调整对测定结果基本不会产生显著性影响, 方法的耐用性是可以接受的 有关物质方法学验证 采用高效液相色谱法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 Ⅴ D) 测定, 参照卡培 [1] 他滨原料质量标准以及美国药典 USP32 版卡培他滨片质量标准中有关物质检 查方法, 确定了卡培他滨片色谱条件, 具体如下 :

156 仪器 : 泵 :Waters e2695 四元泵检测器 :Waters 2489 紫外吸收检测器 Waters 2998 二极管阵列检测器工作站 :Empower 2 软件色谱柱 :Welch Materials XB C-18( mm, 5μm) 流动相 :0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5) 为 A 相甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5) 为 B 相按下表进行线性梯度洗脱, 程序如下 : 时间 ( 分钟 ) 流动相 A (%) 流动相 B (%) 柱温 : 40 ; 自动进样器温度 :5 ; 流速 :1.0ml/min; 检测波长 : 250nm 溶剂 : 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)( 除另有规定外, 以下用到的溶剂均为此溶剂 ) 1.1 检测波长的选择 (1) 根据卡培他滨原料的研究结果, 选择 250 nm 作为检测波长, 具体试验详见原料资料 3.2.S.4.3 分析方法的验证 (2) 片剂的破坏性试验结果与原料基本一致, 降解产物杂质 A B C 在 250nm 左右均有较大吸收 (3) 辅料在 250nm 处基本无吸收, 不干扰样品测定 因此, 本方法采用 250nm 作为检测波长比较合理, 并对已知杂质采用加校正因子的主成分自身对照法进行控制 1.2 专属性试验 杂质定位与分离试验卡培他滨片与其原料药的有关物质测定条件一致, 已知杂质分离情况相同 出峰顺序依次为 5- 氟胞嘧啶 ( 原料合成的起始原料 ) 杂质 A B D( 原料中间 53 / 97

157 体 ) 卡培他滨 C 和 E( 原料中间体 ), 并达到完全分离 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 3.2.S.4.3 分析方法的验证 -(1) 有关物质方法学验证 辅料干扰试验称取卡培他滨片所用空白辅料 ( 按处方配比 ) 适量, 加溶剂超声处理并稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上清液 10μl 注入液相色谱仪中, 记录色谱图 结果表明 : 空白辅料不干扰本品有关物质测定 图谱见附图 ***** 卡培他滨片强制降解试验 ( 卡培他滨片批号 :100225) 卡培他滨片强制降解试验及物料平衡表分别见下 强制降解试验表类型条件结果附图各杂质峰与主峰都能有效分离, 主要降解 酸破坏 1mol/L 盐酸溶液 10ml, 室温 30 分钟 杂质峰保留时间为 3.637min( 杂质 B), 辅料经破坏后无干扰, 主峰色谱峰纯度符 1-4~1-6 合要求 各杂质峰与主峰都能有效分离, 主要降解 碱破坏 1mol/L 氢氧化钠溶液 10ml,60 20 分钟 杂质峰保留时间分别为 3.277min( 杂质 A) 和 3.637min( 杂质 B), 辅料经破坏后无 1-7~1-9 干扰, 主峰色谱峰纯度符合要求 各杂质峰与主峰都能有效分离, 主要降解 高温破坏 小时 杂质峰保留时间分别为 3.277min( 杂质 A) 和 min( 杂质 C), 辅料经破坏后 1-10~1-12 无干扰, 主峰色谱峰纯度符合要求 各杂质峰与主峰都能有效分离, 主要降解 氧化破坏 10% 双氧水溶液 10ml,50 60 分钟 杂质峰保留时间为 3.300min( 杂质 A), 辅料经破坏后无干扰, 主峰色谱峰纯度符 1-13~1-15 合要求 溶剂溶解, 光照箱内 各杂质峰与主峰都能有效分离, 没有产生 光照破坏 (4500lx±500lx) 照射 较大降解杂质, 辅料经破坏后无干扰, 主 1-16~ 小时 峰色谱峰纯度符合要求 未破坏 / / 1-19~ / 97

158 破坏性试验物料平衡结果样品酸破坏碱破坏高温破坏氧化破坏强光破坏 C(mg/ml) A 总 ( 校正后 ) A 总 ( 校正后 )/C 物料平衡 (%) 上表中根据 A 总 ( 校正后 )/ C [A 总 ( 校正后 ) 代表校正后的供试品溶液总峰面积, 其中杂质 A B 和 C 的峰面积分别乘以校正因子 和 0.91,C 代表供试品溶液的浓度 ] 来计算单位浓度的响应值, 以未破坏溶液 ( 见附图 ****) 的响应值为基数 ( 物料回收为 100%), 计算破坏溶液的物料回收率, 衡量物料是否平衡, 结果所有破坏试验物料基本平衡 1.3 系统适用性精密称取杂质 A B C 和卡培他滨对照品各适量, 用溶剂溶解并稀释制成每 1ml 中分别含 0.6μg 0.6μg 0.6μg 和 0.6mg 的混合溶液作为系统适用性试验溶液, 照上述色谱条件, 精密量取 10μl, 注入液相色谱仪, 记录色谱图 作定位已知杂质和计算物料平衡情况用, 图谱见附图 *** 1.4 检测限卡培他滨的检测限是 0.21ng; 杂质 A 的检测限是 0.48ng; 杂质 B 的检测限是 0.31ng; 杂质 C 的检测限是 0.32ng 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 -3.2.S.4.3 分析方法的验证 1.5 待测溶液稳定性试验据原料的试验证明, 用水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5) 为溶剂, 原料待测溶液较为稳定, 对制剂的待测溶液稳定性做进一步研究 取小试样品 10 片, 置研钵中研细, 取细粉适量 ( 约相当于卡培他滨 15mg), 精密称定, 置 25ml 量瓶中, 加溶剂适量, 超声处理 5 分钟, 并稀释至刻度, 摇匀, 取上述溶液, 置具塞离心管中, 离心至澄清, 取上清液, 作为供试品溶液 照上述色谱条件, 于 0h 2 h 4 h 6 h 8 h 12 h 精密量取 10μl 注入液相色谱仪, 记录色谱图, 考察有关物质的变化情况 ( 面积归一化法 ), 试验结果见下表 待测溶液稳定性结果 55 / 97

159 测定时间 ( 小时 ) 杂质峰面积 总杂 (%) 杂质个数 结果表明 : 卡培他滨片有关物质待测溶液在 12 小时内稳定 1.6 耐用性 将色谱条件中的参数作适度变化后, 如色谱条件中的流速 柱温及色谱柱的 厂家等参数作微小调整对测定结果基本不会产生显著性影响, 方法的耐用性是可 以接受的 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 -3.2.S.4.3 分析方法的验证 -(1) 有关 物质方法学验证 (2) 含量测定方法学验证总结项目验证结果专属性见有关物质方法学验证总结专属性项 在 1.196~11.960μg 范围内与峰响应值呈显著线性关系 设卡培他滨进线性和范围样量为 X, 峰面积为 Y, 得线性方程 :Y= X , 相关系数 r= 定量限定量限为 0.62ng, 符合检测要求 回收率均在 98.36%~99.40% 之间, 平均回收率为 98.83%, 准确度 RSD(n=9) 为 0.34% 含量测定重复性试验平均含量为 100.2%,RSD(n=6) 为 0.31%; 中间精密度精密度试验平均含量为 100.1%,RSD(n=12) 为 0.32% 供试品溶液放置 和 12 小时进样主成分峰面积无明显变溶液稳定性化,RSD(n=6) 为 0.71%, 结果显示含量测定溶液至少在 12 小时内保持稳定 将色谱条件中的参数作适度变化后, 如色谱条件中的流速 柱温及色耐用性谱柱的厂家等参数作微小调整对测定结果基本不会产生显著性影响, 方法的耐用性是可以接受的 含量测定方法学验证采用高效液相色谱法测定, 参照卡培他滨原料质量标准以及美国药典 USP32 版卡培他滨片质量标准中的含量测定方法, 具体色谱条件如下 : 56 / 97

160 仪器 1: 泵 :Waters e2695 四元泵检测器 :Waters 2489 紫外吸收检测器 Waters 2998 二极管阵列检测器工作站 :Empower 2 软件仪器 2: 泵 : 岛津 LC-20AD 系列泵检测器 : 岛津 SPD-20A 紫外吸收检测器工作站 :LCsolution 工作站色谱柱 :Welch Materials XB C-18( mm, 5μm) 流动相 :0.1% 醋酸溶液 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5) 为 A 相甲醇 -0.1% 醋酸溶液 - 乙腈 (80:15:5) 为 B 相按下表进行线性梯度洗脱, 程序如下 : 时间 ( 分钟 ) 流动相 A (%) 流动相 B (%) 柱温 : 40 ; 自动进样器温度 :5 ; 流速 :1.0ml/min; 检测波长 :250nm 溶剂 : 水 - 甲醇 - 乙腈 (60:35:5)( 除另有规定外, 以下用到的溶剂均为此溶剂 ) 1.1 专属性试验该含量测定方法与有关物质测定方法一致, 专属性考察情况参见 有关物质验证 线性与范围根据卡培他滨原料药的研究, 卡培他滨进样量在 1.196μg~11.960μg 范围内与其峰响应值呈显著线性关系, 线性方程为 :Y= X ,r= 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 3.2.S.4.3 分析方法的验证 -(2) 含量测定方法学验证 1.3 定量限 57 / 97

161 卡培他滨的定量限是 0.62ng 详细信息参见卡培他滨原料药申报资料 -3.2.S.4.3 分析方法的验证 -(2) 含量测定方法学验证 1.4 回收率试验 ( 准确度试验 ) 对照品溶液配制 : 取经水分测定的卡培他滨对照品适量, 精密称定, 加溶剂溶解并稀释制成每 1ml 中约含卡培他滨 0.6mg 的溶液, 摇匀, 作为对照品溶液 ; 供试品溶液配制 : 称取卡培他滨样品 ( 批号 :091202, 含量 :100.2%) 约 4.00g 5.00g 6.00g( 分别约为处方量的 8 倍 10 倍 12 倍 ), 分别置于 号研钵中, 再分别加入空白辅料 1.25g( 约为处方量的 10 倍 ), 混匀 ; 从 1 号研钵中精密称取细粉三份 ( 约相当于卡培他滨 12mg); 从 2 号研钵中精密称取细粉三份 ( 约相当于卡培他滨 15mg); 从 3 号研钵中精密称取细粉三份 ( 约相当于卡培他滨 18mg) 将上述 9 份细粉分别置于 25ml 量瓶中, 加溶剂适量, 超声处理 5 分钟, 使卡培他滨溶解, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀 ; 取上述溶液, 离心, 取上清液, 分别作为卡培他滨片的回收率 80% 100% 120% 的供试品溶液 分别精密量取对照品溶液及各供试品溶液 10μl, 注入色谱仪, 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算 回收率试验 样品 80% 100% 120% 样品称样量卡培他滨称取量 (mg) (mg) 测得量 (mg) 回收率 (%) 结论 : 本方法回收率较高 1.5 精密度试验 日内精密度 58 / 97

162 取片重差异项下的小试样品 20 片, 研细, 精密称取适量 ( 约相当于卡培他滨 15mg), 置 25ml 量瓶中, 加溶剂适量, 超声处理 5 分钟, 使卡培他滨溶解, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上清液作为供试品溶液, 重复制备 6 份供试品溶液 ; 照上述色谱条件, 精密量取上述供试品溶液 10μl, 注入液相色谱仪, 记录色谱图 ; 另取水分测定的卡培他滨对照品 ( 批号 :091208) 适量, 精密称定, 加溶剂溶解并稀释制成每 1ml 中约含 0.6mg 的溶液, 同法测定 按外标法以峰面积计算 日内精密度试验结果 No 含量 (%) 平均含量 (%) RSD(%) 0.31 结论 : 本方法日内精密度良好 中间精密度试验取本品, 按照 日内精密度试验 项下方法, 由两个不同的分析人员使用不同的仪器进行测定, 分别配置 6 份相同浓度的供试品溶液, 所得 12 个含量数据的相对标准偏差应不大于 2.0%, 结果见下表 卡培他滨片中间精密度试验结果 分析 人员 仪器 含量 (%) 平均含量 (%) RSD % Ⅰ 仪器 A Ⅱ 仪器 B 结论 : 本方法中间精密度良好 1.6 待测溶液稳定性试验取小试样品 10 片, 研细, 精密称取适量 ( 约相当于卡培他滨 15mg), 置 25ml 量瓶中, 加溶剂适量, 超声处理 5 分钟, 使卡培他滨溶解, 用溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心, 取上清液作为供试品溶液, 照上述色谱条件, 于 0h 2 h 4 h 6 h 8 h 12 h 精密量取 10μl 注入液相色谱仪, 记录色谱图, 考察主峰峰面积变化 59 / 97

163 试验结果见下表 待测溶液稳定性试验结果 测定时间 0 小时 2 小时 4 小时 6 小时 8 小时 12 小时 峰面积 平均峰面积 RSD(%) 0.71 结论 : 待测溶液在 12 小时内稳定 1.7 耐用性 含量测定与有关物质测定条件一致, 耐用性考察情况参见 有关物质验证 1.6 (3) 溶出度方法学验证总结 项 目 验证结果 溶出介质与体积的选择 选用 900ml 的水作为溶出介质 溶出方法对照品紫外 - 可见分光光度法扫描结果显示 : 本品在 304nm 的波测定波长的选择的选择长处有最大紫外吸收 辅料干扰试验 辅料在测定波长 304nm 处无吸收, 对测定结果无干扰 转速的的选择 溶出度试验的转速选择 50rpm 精密度 溶出精密度试验 6 次重复测定吸光度值 RSD(n=6)=0.45%; 溶出溶液放置 和 8 小时吸光度值无明显变化,RSD 溶出介质中的稳定性 (n=6) 为 0.25%, 结果显示溶出液在室温条件下至少在 8 小时内 保持稳定 在浓度 2.50μg/ml~25.0μg/ml 的范围内与吸收值呈良好的线性关 线性和范围 系 设卡培他滨进样量为 x, 峰面积为 y, 得线性方程 :y =0.0261x+0.001, 相关系数 r= 准确度 回收率均在 99.30%~101.29% 之间, 平均回收率为 %, RSD(n=9) 为 0.64% 卡培他滨片溶出度方法学验证 1.1 溶出度测定法的确定 仪器 ZRS-8 智能溶出仪 : 天津大学无线电厂 UV2450 紫外 - 可见分光光度计 : 岛津公司 溶出方法的选择 60 / 97

164 参照片剂溶出度测定的一般方法, 本品选用桨法操作 ( 中国药典 2005 年版二部附录 XC 第二法 ) 参照 USP32/NF27 版中卡培他滨片的质量标准 [1], 以 900ml 水为溶出介质, 温度 37 ; 转速为每分钟 50 转 ; 经 30 分钟时取样 ; 采用紫外 - 可见分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二部附录 ⅣA) 测定 溶出介质和溶出介质体积的选择溶出介质的体积选择, 主要是使药物符合漏槽条件, 使溶出到介质中的药物很快被介质稀释带走, 药物的溶出不受溶出介质中药物浓度的影响 一般大杯法的溶出介质体积在 500~1000ml, 以 900ml 为最普遍 同时参照 USP32/NF27 版卡培他滨片标准, 溶出介质采用 900ml 的水 卡培他滨原料在水中略溶, 在 900ml 的水中能完全溶解 ; 故溶出介质的体积选用 900ml 的水 吸收波长的选择取卡培他滨对照品适量, 加水溶解并稀释, 制成每 1ml 中约含 16µg 的溶液, 在 200~400nm 进行紫外扫描, 扫描结果见附图 1-1 结果表明: 本品在 304nm 的波长处有最大吸收 因此, 我们可以选用 304nm 作为溶出度的测定波长 辅料干扰试验取空白辅料约 32mg, 置 100ml 量瓶中, 加适量水超声充分混合后, 加水稀释至刻度 ; 取上述溶液适量, 经 0.45µm 滤膜过滤, 取续滤液 3ml 至 50ml 量瓶, 加水稀释至刻度, 摇匀, 并在 200~400nm 的波长处扫描, 扫描图谱见附图 1-2 结果表明 : 辅料在测定波长 304nm 处无吸收, 对测定结果无干扰 取样点时间确认试验参照美国 FDA 药品审评中心的仿制药办公室属下的生物等效部推荐的卡培他滨片溶出方法 : 第二法桨法, 溶出介质为 900ml 水, 转速 50rpm; 推荐的取样时间为 min 在此基础上经过试验, 最终选择本品的溶出曲线取样时间为 min 取希罗达 1 片, 照溶出度测定法 ( 中国药典 2005 年版二部附录 XC 第二法 ), 以 900ml 水为溶出介质, 温度 37±0.5, 转速为每分钟 50 转, 分别于 min 时取出溶出液 10ml, 经 0.45µm 滤膜过滤, 同时补加同温等体积溶出介质 取续滤液 2ml 置 50ml 量瓶中, 并用水稀释至刻度, 摇匀 61 / 97

165 在 304nm 波长长处测定吸光光度值 结结果见下表 图 取样时间试试验累积溶出度测定结结果 时间 (min) 累积积溶出量 (%) 取样点时间试验累积积溶出曲线 不同转转速溶出曲线比较 桨法常用的转速为 50rpm 75rpm; 对比比卡培他滨片片在这两种种转速条件下下的 累积积溶出曲线 取本品 ( 批号 :100225), 照溶溶出度测定定法 ( 中国药药典 2005 年版二部附附录 XC 第二法 ), 以 900ml 水为溶出介介质, 转速分别为 50rpm 75rpm, 分别经 min 时, 取溶出液 10ml, 经 0.45μm 滤膜膜过滤, 同同时补加同温温等体积积溶出介质 精密量取取续滤液 2ml, 置 50ml 量瓶中, 用水稀释至至刻度, 摇匀, 作为为供试品溶溶液 另取卡卡培他滨对对照品适量, 加水溶解解并定量稀稀释制成每 1ml 约含含卡培他滨 16µg 的溶溶液, 摇匀, 作为对照照品溶液 分别取供供试品溶液与与对照品溶溶液, 照紫外 - 可见分光光光度法 ( 中国药典 2005 年版版二部附录 IV A), 在 304nm 的波波长处分别别测定吸光度度值, 计算算累积溶出度度并绘制制累积溶出曲线 卡培培他滨片在两两种不同转转速条件下的的累积溶出出度及溶出曲曲线结果果见下表 图 62 / 97

166 两种不同同转速条件件下的累积溶溶出度比较 (n=6) 时间 (min) 累积溶溶出度 (%) rpm rpm 两种不同转速速条件下溶溶出曲线对比 试验结果表明 : 两种种转速条件下下本品的溶溶出性质基本本一致, 而而在 75rpm 转速条件件下, 样品的溶出速率率稍高于在 50rpm 转速速条件下的的溶出速率 一般认为为转篮 100rpm 桨法 50rpm 小杯 35rpm, 相当于正常常胃肠道蠕动动状态 桨法常用的转速在 50~75rpm 之间 同时时参照 USP32/NF27 版版卡培他滨片片标准中中溶出度测定方法 [1], 综合考虑, 本品溶出出度试验的转转速选择 50rpm 1.2 溶出度测测定取本品, 照溶出度测定法 ( 中国药药典 2005 年版二部附附录 X C 第二二法 ), 以 900ml 水为为溶出介质, 转速为 50rpm, 依法法操作, 经 30 分钟时, 取溶出液液适量, 过滤, 精密密量取续滤滤液 2ml 置 50ml 量瓶中, 加水稀释释至刻度, 摇匀, 作为为供试品溶液 ; 另取取卡培他滨滨对照品适量, 加水溶溶解并稀释制制成每 1ml 中约含卡培培他滨 16µ µg 的溶液, 摇匀, 作为对照品品溶液 分分别取供试品品溶液与对对照品溶液, 照紫外 - 可见分光光光度法 ( 中国药典 2005 年版二二部附录 IV A), 在 304nm 3 的波波长处分别测测定吸光光度值, 计算每片的溶溶出量, 限度为标示量量的 80%, 应符合规定定 1.3 溶出精密密度试验 取本品 ( 批号 :100225)1 片, 参照 / 97 溶出度测定 项下操作作, 取溶出液,

167 经 0.45μm 滤膜过滤, 连续精密量取续滤液 2ml 分别于 6 个 50ml 量瓶中, 用水稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液 照紫外 - 可见分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二部附录 IV A), 分别在 304nm 的波长处分别测定吸光度值 精密度试验结果 NO 平均 RSD% 吸光度值 结果表明, 本方法精密度良好 1.4 溶出供试溶液稳定性试验取 1.3 溶出精密度试验 项下溶出液, 经 0.45μm 滤膜过滤, 精密量取续滤液 2ml 于 50ml 量瓶中, 用水稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液 照紫外 - 可见分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二部附录 IVA), 分别于 0h 1h 2h 3h 4h 8h 时, 在 304nm 波长处测定其吸光度值 溶液稳定性试验结果时间 (h) 平均 RSD% 吸光度值 结果表明, 卡培他滨片的溶出溶液在 8 小时内稳定 1.5 滤膜吸附试验取 1.3 溶出精密度试验 项下溶出液适量, 采用高速离心方法, 取上清液 2ml 置 50ml 量瓶中, 用水稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液 1; 另取 1.3 溶出精密度试验 项下溶出液适量, 经 0.45μm 的微孔滤膜过滤, 取续滤液 2ml 至 50ml 量瓶, 用水稀释至刻度, 混匀, 作为供试品溶液 2 取供试品溶液, 照紫外 - 可见分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二部附录 IV A), 在 304nm 的波长处分别测定吸光度值 滤膜吸附试验结果方法供试品溶液 1 供试品溶液 2 平均 RSD% 吸光度值 结果表明 : 滤膜对溶液没有吸附作用, 采用滤膜过滤不会影响溶出度的测定 64 / 97

168 1.6 线性和范范围 精密称取取卡培他滨对对照品 mg, 置 100ml 量瓶瓶中, 加水水溶解, 并稀稀释 至刻刻度 精密密量取上述溶溶液适量, 再用水分别别稀释, 摇匀, 使样品品中卡培他他滨的浓浓度分别为 2.5μg/ml 5.0μg/ml 7.5μg/ml 10μg/ml 15μg/ml 20μg/ml 25μg/ml 照紫紫外 - 可见分分光光度法 ( 中国药典 2005 年版版二部附录 IVA), 在 304nm 的波波长 处测测定吸收度 溶出度测定定线性和范范围试验结果 浓度 (μg/ml) 吸收值 A 卡培他他滨溶出线线性图 线性方程 :y =0.0261x+0.001, 相关系数 r= 结果表明, 卡培他滨滨溶液在浓度 2.50μg/ml~25.0μg/ml 的范围围内与吸收值值呈良好好的线性关关系 1.7 回收率试试验 ( 准确度度试验 ) 回收率范范围一般规定定为限度的 ±20%, 本品的溶出度度限度定为为 80%, 所以以我们选选择回收率率的范围为 60% 80% 100% 对照品溶溶液配制 称取卡培培他滨对照品品适量, 加水水溶解并定定量稀释制成成每 1ml 中约含卡培培他滨 16μg 的溶液, 摇匀, 作为对照品溶溶液 供试品溶液配制 称取卡培培他滨原料 ( 批号 :091128) 约 1..5g 2.0g 2.5g ( 分别约为 5 片中卡培他他滨量的 60% 80% 100%), 分别置于 号研钵中, 再分别加入空白辅辅料 3.375g( 约为 5 片的空白辅辅料量 ), 研研匀 从 1 号研 65 / 97

169 钵中精密称取细粉三份 ( 约相当于卡培他滨 30mg); 从 2 号研钵中精密称取细粉三份 ( 约相当于卡培他滨 48mg); 从 3 号研钵中精密称取细粉三份 ( 约相当于卡培他滨 50mg) 将上述 9 份细粉分别置于 100ml 量瓶中, 加入水适量, 超声处理使卡培他滨完全溶解, 放冷, 用水稀释至刻度, 摇匀 ; 取上述溶液, 经 0.45μm 滤膜过滤, 精密量取续滤液 3ml, 分别至 100ml 量瓶中, 用水稀释至刻度, 分别作为卡培他滨片的回收率 60% 80% 100% 的供试品溶液 取供试品溶液及对照品溶液, 照紫外 - 可见分光光度法 ( 中国药典 2005 年版二部附录 IVA), 在 304nm 的波长处测定吸收度值, 计算回收率, 结果见下表 卡培他滨片溶出度回收率测定结果 样品称取量 (mg) 卡培他滨加入量 (mg) 测得量 (mg) 回收率 (%) % % % 结果表明 : 本方法准确度较高 平均回收率 (%) (n=9) RSD (%) 0.64 (n=9) (4) 微生物限度方法学验证 项目 验证结果 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌采用培养基稀释法平皿计数, 菌落计数回收率均达到 70% 以上, 白色念珠菌和黑曲霉采用常规法平皿计数, 回收方法的验证率均达到 70% 以上 控制菌大肠埃希菌检查方法 试验组检出控制菌大肠埃希菌, 阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌, 说明此法可用于本品的控制菌检查 卡培他滨片微生物限度方法学研究 一 培养基 营养肉汤培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公司 改良马丁培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公司 66 / 97

170 改良马丁琼脂培养基批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公司 营养琼脂培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发 公司玫瑰红钠琼脂培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发 公司胆盐乳糖培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发 公司 MUG 培养基 批号 : 厂家 : 北京三药科技开发公 司 配制 : 自制 灭菌 :121 /15 分钟 二 试药 靛基质试液 三 仪器设备 电热恒温培养箱 水浴锅 四 菌种 大肠埃希菌 ATCC8739 第 代 金黄色葡萄球菌 ATCC6538 第 5 2 代 枯草芽孢杆菌 ATCC6633 第 5 代 白色念珠菌 ATCC10231 第 5 代 黑曲霉菌 ATCC15404 第 4 代 五 验证依据 中国药典 2005 年版二部附录 ⅥJ 微生物限度检查方法验证 六 实验操作 6.1 菌液制备方法 大肠埃希菌 : CMCC(B)44102 第 代 接种大肠埃希菌斜面培养物 1 白金耳至 10ml 营养肉汤, 置于 小时 培养 取上述大肠埃希菌新鲜肉汤培养物 1ml 10-7 含菌量 cfu/ml 67 / 97

171 6.1.2 金黄色葡萄球菌 : CMCC(B)26003 第 5 2 代接种金黄色葡萄球菌斜面培养物 1 白金耳至 10ml 营养肉汤于 小时培养 取上述金黄色葡萄球菌新鲜肉汤培养物 1ml 10-7 含菌量 cfu/ml 枯草芽孢杆菌 : CMCC(B)63501 第 5 代接种枯草芽孢杆菌斜面培养物 1 白金耳至 10ml 营养肉汤置于 小时培养 枯草芽孢杆菌新鲜肉汤培养物 1ml 10-6 含菌量 cfu/ml 白色念珠菌 : CMCC(F)98001 第 5 代接种白色念珠菌斜面培养物 1 白金耳至 10ml 改良马丁培养基, 置于 小时培养 白色念珠菌新鲜改良马丁培养物 1ml 10-7 含菌量 cfu/ml 黑曲霉菌 : CMCC(F)98003 第 4 代黑曲霉的新鲜斜面培养物少许至 10ml 改良马丁琼脂斜面培养基 25 培养 7 天 使大量孢子形成, 加入 5ml0.9% 无菌氯化钠溶液, 将孢子洗脱并过滤孢子菌悬液至无菌试管内, 稀释至与细菌标准比浊管相同浊度后作为原液, 取菌液 1ml +9ml0.9% 无菌氯化钠溶液,10 倍稀释至 10-4, 孢子菌悬液为 cfu/ml 6.2 供试品溶液的制备取供试品 10 g, 加 ph7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液至 100ml, 用 45 水浴加热溶解, 混匀, 作为 1:10 的供试液 6.3 菌落计数方法的验证以下培养基培养条件 : 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌培养温度 35 时间 48 小时, 白色念珠菌 黑曲霉菌培养温度 25 时间 72 小时 68 / 97

172 6.4 常规法 试验组平皿法计数时, 取 1:10 的供试液 1 ml 和 50~100cfu 试验菌, 分别注入平皿中, 立即倾注琼脂培养基 ( 细菌注入营养琼脂培养基, 霉菌和酵母菌注入玫瑰红钠琼脂培养基 ), 每株试验菌平行制备 2 个平皿, 按常规法测定其菌数 菌液组 : 分别取上述相应菌悬液 1ml 注入个平皿, 立即倾注琼脂培养基, 培养 计数 供试品对照组取 1:10 的供试液 1ml, 注入平皿, 立即倾注琼脂培养基, 培养 计数, 按菌落计数方法测定供试品本底菌数 上述试验组 菌液组 供试品对照组均平行置备 2 个平皿 结果见表 1: 表 1 卡培他滨片细菌 霉菌和酵母菌回收率的测定 ( 常规法 )( 单位 cfu) 菌种类型试验组菌液组供试品对照组试验组回收率大肠埃希菌 % 金黄色葡萄球菌 % 枯草芽孢杆菌 % 白色念珠菌 % 黑曲霉 % 评价 : 由上表可知卡培他滨片用常规法平皿菌落计数, 试验中白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收率都达到了 70% 以上, 说明常规法用于霉菌和酵母菌计数结果是准确的 上表中枯草芽孢杆菌菌落回收达到了 70% 以上, 但大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌菌落回收率未达到 70% 以上, 必须重新建立细菌菌落数的方法学验证 6.5 培养基稀释法 ( 细菌数测定 ) 试验组取 1:10 的供试液 1ml, 注入 5 平皿中 (0.2ml/ 皿 ), 每皿分别加 50~100cfu 试验菌 (1ml), 立即倾注营养琼脂培养基, 每株试验菌平行制备 10 个平皿, 测定其菌数 菌液组 69 / 97

173 分别取上述相应菌悬液 1ml 注入平皿中 ( 平行制备 2 个平皿 ), 立即倾注营养琼脂培养基, 培养 计数 供试品对照组取 1:10 的供试液 1ml, 注入 5 个平皿, 立即倾注营养琼脂培养基, 培养 计数, 按菌落计数方法测定供试品本底菌数, 平行制备 10 个平皿 6.6 霉菌和酵母菌数测定 ( 常规法 ) 试验组平皿法计数时, 取 1:10 的供试液 1 ml 和 50~100cfu 试验菌, 分别注入平皿中, 立即倾注玫瑰红钠琼脂培养基, 每株试验菌平行制备 2 个平皿, 测定其菌数 菌液组分别取上述相应菌悬液 1ml 注入个平皿, 立即倾注琼脂培养基, 培养 计数 供试品对照组取 1:10 的供试液 1ml, 注入平皿, 立即倾注琼脂培养基, 培养 计数, 按菌落计数方法测定供试品本底菌数 上述试验组 菌液组 供试品对照组均平行置备 2 个平皿 上述方法平行试验 3 次结果见表 2: 卡培他滨片细菌 ( 培养基稀释法 ) 表 2 霉菌和酵母菌回收率的测定 ( 常规法 )( 单位 cfu) 菌种类型试验次数试验组菌液组供试品对照组试验组回收率 % 大肠埃希菌 % % 金黄色 葡萄球菌 % % % % 枯草芽孢杆菌 % % 70 / 97

174 % 白色念珠菌 % % % 黑曲霉菌 % % 由表 2 可知 : 卡培他滨片细菌数测定采用培养基稀释法 霉菌和酵母菌采用常规法平皿菌落计数, 三次平行试验中大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收率都达到了 70% 以上, 说明用于细菌菌落数 霉菌和酵母菌计数结果是准确的 七 评价由上述试验结果表明, 卡培他滨片细菌数测定采用培养基稀释法 霉菌 酵母菌检定用常规平皿法测定 八 控制菌检查方法的验证 8.1 大肠埃希菌检查方法验证 ( 常规法 ) 试验组取 1:10 的供试液 10 ml, 接种至 100ml 的胆盐乳糖培养基内, 加 10~100cfu/ml 大肠埃希菌 1ml, 36 培养 24 小时, 取上述培养液 0.2ml 接种至 5mlMUG 培养基的试管内, 培养 5 小时 24 小时, 在 366nm 紫外线下观察, 无荧光反应, 滴加靛基质试液, 液面呈试剂本色 即未检出控制菌大肠埃希菌 阴性菌对照组取 1:10 的供试液 10ml, 接种至 100ml 的胆盐乳糖培养基内, 加入 10~100cfu/ml 金黄色葡萄球菌 1ml, 置于 36 培养 24 小时, 取上述培养液 0.2ml 接种至 5mlMUG 培养基的试管内, 培养 5 小时 24 小时, 在 366nm 紫外线下观察, 无荧光反应, 滴加靛基质试液, 液面呈试剂本色 即未检出阴性对照菌金黄色葡萄球菌 结论 : 上述方法试验组未检出大肠埃希菌, 阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌 需重新确定控制菌大肠埃希菌检测方法 8.2 大肠埃希菌检查方法验证 ( 稀释法 ) 试验组 71 / 97

175 取 1:10 的供试液 10 ml, 接种至 500ml 的胆盐乳糖培养基内, 加 10~100cfu/ml 大肠埃希菌 1ml, 36 培养 24 小时, 取上述培养液 0.2ml 接种至 5mlMUG 培养基的试管内, 培养 5 小时 24 小时, 在 366nm 紫外线下观察, 有荧光反应, 滴加靛基质试液, 液面呈玫瑰红色 即检出控制菌大肠埃希菌 阴性菌对照组取 1:10 的供试液 10ml, 接种至 100ml 的胆盐乳糖培养基内, 加入 10~100cfu/ml 金黄色葡萄球菌 1ml, 置于 36 培养 24 小时, 取上述培养液 0.2ml 接种至 5mlMUG 培养基的试管内, 培养 5 小时 24 小时, 在 366nm 紫外线下观察, 无荧光反应, 滴加靛基质试液, 液面呈试剂本色 即未检出阴性对照菌金黄色葡萄球菌 结论 : 上述方法试验组检出大肠埃希菌, 阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌 故该方法可以用于控制菌大肠埃希菌的检测 九 结论根据上述验证试验结果确定卡培他滨片微生物限度检查 : 供试液制备 : 取供试品 10 g, 加 ph7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液至 100ml, 用 45 水浴加热溶解, 混匀, 作为 1:10 的供试液 细菌数测定 : 培养基稀释法 : 取 1:10 的供试液 1ml 等量分注 5 个平皿, 每平皿 0.2ml 供试液, 倾注营养琼脂培养基, 混匀, 平行制备 10 个平皿 霉菌及酵母菌数测定 : 常规法 : 取 1:10 的供试液 1ml 注入平皿, 倾注玫瑰红钠琼脂培养基, 混匀, 平行制备 2 个平皿 取上述 1:10 供试液用 ph7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液稀释 1:100 1:1000 的稀释级检测 取上述稀释级按中国药典 2005 年药典二部附录 XI J 微生物限度检查法平皿法进行菌落记数, 应符合规定 大肠埃希菌检查方法 : 取 1:10 的供试液 10 ml, 接种至 500ml 的胆盐乳糖培养基内, 置于 36 培 72 / 97

176 养 24 小时, 取上述培养液 0.2ml 接种至 5mlMUG 培养基的试管内, 培养 5 小时 24 小时后, 按中国药典 2005 年药典二部附录 XI J 微生物限度检查法控制菌检查, 应符合规定 3.2.P.5.4 批检验报告 (1) 样品信息 2010 年 3 月 ~4 月连续制备了三批样品, 详细信息如下 : 批号 *** *** *** 生产地点 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 连云港市新浦区巨龙北路 8 号九车间 生产时间 *** *** *** 生产批量 3.5 万片 3.5 万片 3.5 万片 用途稳定性研究稳定性研究稳定性研究 (2) 检验结果 批号放行标准 性状 鉴别 液相保留时间 IR 检查 有关物质 应为白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色或类白色 应与对照品溶液主峰的保留时间一致 在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 与对照品溶液主峰的保留时间一致 在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱与对照品的图谱一致 73 / 97 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 与对照品溶液主峰的保留时间一致 在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱与对照品的图谱一致 白色薄膜衣片, 除去包衣后显白色 与对照品溶液主峰的保留时间一致 在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱与对照品的图谱一致 杂质 A 应 1.0% 0.03% 0.04% 0.03% 杂质 B 应 1.0% 未检出 0.01% 未检出 杂质 C 应 0.5% 0.01% 0.01% 0.01% 其他单个杂质应 0.1% 0.04% 0.02% 0.02% 未知总杂质应 0.5% 0.15% 0.04% 0.03% 总杂质应 2.0% 0.18% 0.10% 0.07% 重量差异应符合规定应符合规定应符合规定应符合规定 溶出度应为标示量的 80% 96%,95%,96%, 96%,96%,96% 95%,101%,98%, 103%,97%,101% 100%,102%,98%, 101%,103%,99%

177 外观 微生物限度 含量测定 应完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性细菌数应 1000cfu/g 霉菌及酵母菌数应 100cfu/g 大肠埃希菌应不得检出含卡培他滨 (C 15 H 22 FN 3 O 6 ) 应为标示量的 93.0%~ 105.0% 完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 完整光洁, 色泽均匀, 有适宜的硬度和耐磨性 细菌数 <10cfu/g 细菌数 <10cfu/g 细菌数 <10cfu/g 霉菌及酵母菌数 < 霉菌及酵母菌数 < 霉菌及酵母菌数 < 10cfu/g 10cfu/g 10cfu/g 大肠埃希菌未检出 大肠埃希菌未检出 大肠埃希菌未检出 98.5% 101.1% 101.6% (3) 分析三批样品有关物质 溶出度 含量没有明显波动 ; 性状 重量差异及微生物限度均符合规定 批次间质量稳定 可控 附批分析报告 74 / 97

178 3.2.P.5.5 杂质分析 3.2.P 制剂中杂质分析 杂质情况分析 杂质名称杂质结构杂质来源 该杂质可由 杂质控 制限度 是否定入 质量标准 杂质 A:5'- 脱氧 -5- 氟胞嘧啶核苷 卡培他滨经 水解反应降 1.0% 是 解产生 该杂质可由 杂质 B:5'- 脱氧 -5- 氟尿嘧啶核苷 卡培他滨经水解反应降 1.0% 是 解产生 杂质 C:2', 3'-O- 羰 该杂质可由 基 -5'- 脱氧 -5- 氟 -N4-[( 戊氧基 ) 羰基 ] 卡培他滨经高温降解产 0.5% 是 胞嘧啶核苷 生 3.2.P 原料中杂质分析 卡培他滨原料药质量标准控制 A B C D 与 E 5 个已知杂质,A B C 结构式见上表,D E 结构式如下 : Me O O N N NH 2 Me O O N N NH F O O F AcO OAc 杂质 D AcO OAc 杂质 E 杂质 D 与 E 是原料药合成工艺中的中间体 Ⅰ 与中间体 Ⅱ, 从原料药的强制 75 / 97

179 降解试验 稳定性试验及杂质本身结构分析, 杂质 D 与 E 只有可能是合成工艺过程中由于反应不完全带入, 不会通过降解产生 可归属为原料药中特有的杂质, 制剂工艺过程中不会产生, 故制剂未作为已知杂质进行研究 3.2.P 制剂中特性的杂质根据原料药中杂质 A B C 的来源与制剂稳定性试验结果分析, 杂质 A B C 在制剂与原料药的贮藏过程中易通过降解产生, 在制剂杂质研究中作为已知杂质进行控制 (1) 杂质 A 与 B: 通过水解产生杂质 5 - 脱氧 -5- 氟胞嘧啶核苷 ( 杂质 A) 和 5 - 脱氧 -5- 氟尿嘧啶核苷 ( 杂质 B), 降解途径如下图 O N NH O O N NH 2 H 3 C N F O CH 3 C H 3 N F HO OH 水解 HO OH 杂质 A O N NH 2 O H N O H 3 C N F H 2 O H 3 C N F HO OH HO OH 杂质 B (2) 杂质 C: 原料及制剂的影响因素试验表明, 在高温条件下, 卡培他滨易降解产生杂质 2,3 -O- 羰基 -5 - 脱氧 -5- 氟 -N4-[( 戊氧基 ) 羰基 ] 胞嘧啶核苷 ( 杂质 C), 推测反应途径如下图 N O O N O NH CH 3 NH O O H 3 C N CH 3 N O H 3 C F H F H CO 2 O O 杂质 C OH HO O 根据对杂质 A B 与 C 结构的分析, 在研究初始制备较纯杂质 A B 与 C 的对照品, 并进行了相应的结构确证 杂质 A B C 的制备与结构确证详细见原料药申报资料 3.2.S.3.2( 页码 : P47~P77) (3) 通过对卡培他滨片 ( )(0 天 ) 与相应原 76 / 97

180 料 ( ) 的杂质谱进行对比分析 ( 面积归一化法 ), 卡培 他滨片与相应原料的杂质谱基本一致, 制剂过程中未见较大新杂质产生 结果见 下表 三批制剂及相应原料中有关物质的对比 杂质峰 (%) 相对保留 时间 原料 制剂 ( 杂质 A) ( 杂质 B) / / / / / / 0.01 / / 0.21 / / 0.01 / / / / / 0.05 / / ( 杂质 C) / / / / 0.01 / / 总杂 (%) 结合上述研究 : 将降解产物 ( 杂质 A B C) 在制剂的质量标准中作为已 知杂质控制, 其他杂质均作为未知杂质控制 77 / 97

181 3.2.P.5.6 质量标准制定依据 (1) 制定依据 质控项目 制定依据 性状外观标准常规项目, 根据样品批检验及稳定性考察结果 (1) HPLC 鉴别 (2)IR 有关物质溶出度含量微生物限度重量差异 液相保留时间鉴别具有很高的专属性, 保留时间应与对照品一致 光谱法鉴别 : 在 1760~1500cm -1 区间的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致 根据杂质分析及本品稳定性研究情况, 表明杂质 A B C 在本品贮藏过 程中通过降解途径产生 将自制卡培他滨片与希罗达进行准确比较, 结果显示自制卡培他滨片有关物质 : 总杂 0.20%, 单一杂质 0.1%, 与希罗 达杂质谱基本一致 根据小试样品, 中试三批样品与稳定性试验结果, 并结合 USP32/NF27 版卡培他滨片质量标准, 将杂质 A~C 作为已知杂质订入标准, 并对其杂质 A~C 的限度作出如下规定 : 杂质 A 和杂质 B 限度 ( 1.0%,), 杂质 C( 0.5%), 未知单杂 ( 0.1%), 未知总杂 ( 0.5), 总杂 ( 2.0%) 各杂质限度保持与 USP32/NF27 版卡培他滨片质量标准一致 根据希罗达 自制样品溶出度的检查结果及中国药典 2010 年版二部附录中对溶出度的规定, 将本品的溶出度限度定为 30 分钟不得低于 80% 由于卡培他滨在紫外区有较强的吸收, 根据准确 简便 快速的原则, 在本品溶出的测定试验中, 首选紫外 - 可见分光光度法测定本品中主成分的溶出量, 并进行了方法学的研究 使用 HPLC 法测定, 采用外标法计算含量, 根据 USP32/NF27 版卡培他滨片质量标准 批分析积累数据 稳定性考察结果以及仪器系统误差影响等, 规定含量范围应为标示含量的 93.0%~105.0% 按照中国药典 2010 年版二部附录 Ⅺ J 微生物限度检查法, 进行了方法学的研究, 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌采用培养基稀释法平皿计数, 回收率均达到 70% 以上, 白色念珠菌和黑曲霉采用常规法平皿计数, 回收率均达到 70% 以上 试验组检出控制菌大肠埃希菌, 阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌, 说明此法可用于本品的控制菌检查 三批样品微生物限度均符合规定 取本品 20 片, 精密称定总重量, 求得平均片重后, 再分别精密称定每片的重量, 每片重量与平均片重相比较, 超出重量差异限度 (±5%) 的不得多于 2 片, 并不得有 1 片超出限度 1 倍 ( 中国药典 2010 年版二部附录 I A) 三批样品片重差异均符合规定 (2) 本品与希罗达对比 将自制卡培他滨片与原研产品希罗达进行有关物质与溶出度对比 有关物质对比 : 自制片的有关物质, 杂质 A B 和 C 均 0.05%, 未知单杂 78 / 97

182 0.1%, 总杂 0.20%, 我公司制剂中检出的有关物质与希罗达基本一致 溶出度对比结果显示 : 自制片同希罗达在四种不同溶出介质中, 溶出行为一致 有关物质 溶出度的对比研究见 3.2.P 制剂相关特性 79 / 97

183 3.2. P.6 对照品 1. 卡培他滨对照照品卡培他滨滨原料药质量量标准收载载于 USP32/NF27 版, 我公司在开开发本品过程程中使用用了美国药药典对照品及及自制对照照品, 美国药药典对照品品批号 :F0G037, 自制制对照品品批号 , 自制对对照品含量量使用美国药药典对照品品进行标定 (1) 美国药典典对照品 ( 用于含量测测定 ) 名称 :Capecitabine reference standard 批号 :F0G037 来源 :U. S. Pharmacopeia 含量 :99.7% 对照品标标签 : 80 / 97

184 81 / 97

185 82 / 97