草芽孢杆菌作为益生菌制剂的研究已较为成熟, 有报道称在其代谢过程中可产生蛋白酶 脂 肪酶 淀粉酶等活性物质, 同时能产生多种抗菌素 [1], 因此常被用于改善动物肠道功能 促 进动物生长和预防疾病 粪肠球菌是肠道内的主要菌群之一, 在肉鸡饮水中添加适量粪肠球 菌, 能够促进免疫器官的生长发育, 提高

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1 复合益生菌制剂对保育猪生产性能的影响 1 杜红方郭玉光 王敏翁晓辉汪兴玉杨怀亮 ( 广东省饲料添加剂生物工程技术研究开发中心, 广东溢多利生物科技股份有限公司, 广 东珠海 ) 摘要 : 为研究不同添加量的复合益生菌对保育猪生长性能的影响, 将复合益生菌分别以 150g/t 200g/t 和 250g/t 的水平添加到基础日粮中组成试验日粮 2 3 和 4, 同时以基础日粮 作为对照 选取 96 头体重为 11.36±0.35kg 的杜长大三元杂交保育猪, 随机分为 4 组, 分别 饲喂上述日粮, 进行为期 42 d 的饲养试验 结果表明, 日粮中添加复合菌能够有效提高保 育猪的日增重 降低料重比和增重成本, 其中 200g/t 的效果最佳, 日增重显著大于不添加 复合菌的日粮组 (p<0.05), 且料重比和增重成本最低 ;150g/t 添加量的提高生长性能 降 低增重成本的效果优于 250g/t 本研究结果说明, 日粮中添加复合益生菌能够提高保育猪的 生产性能, 添加量以 200g/t 为最佳, 高水平添加未能进一步促进生产性能 关键词 : 复合益生菌 保育猪 生产性能 Effects of multi-probiotics on growth performance of the growing pigs Du hongfang, Guo yuguang, Wang min, Weng xiaohui, Wang xinyu, Yang huailiang 近年来, 滥用抗生素造成的耐药性问题 抗生素残留问题及造成畜禽机体的免疫力下降 等问题逐渐引起关注 同时随着欧盟禁止饲料中使用抗生素, 我国也渐渐将禁抗提上日程 作为一种可望取代抗生素的天然生物活性制剂, 益生菌制剂因其无毒副作用, 无耐药性, 无 药物残留, 具有保健 促进生长 提高饲料利用率等功效而越来越受到人们的青睐, 是当前 最具发展前景的新型绿色饲料添加剂 肠道是猪消化吸收的重要场所, 肠道健康对于营养物质的消化与吸收 猪的生长发育和 健康状况具有非常重要的作用 在养猪生产中, 有很多致病菌通过感染猪肠道使之出现病变 另外, 早期断奶 环境和营养成分的变化能够引起猪肠道黏膜屏障功能受损, 制约了养猪业 的生产效率 因此, 通过各种调控措施, 维持猪肠道健康, 对于提高生产性能, 保证动物健 康和养猪业的可持续发展就显得尤其重要 而益生菌制剂是由活体微生物制成的生物活性制 剂, 能够有效地改善消化道菌群平衡, 提高机体饲料的消化吸收能力和免疫力 目前关于枯 作者简介 : 杜红方 (1976--), 男, 河北隆尧县人, 博士 @qq.com 1

2 草芽孢杆菌作为益生菌制剂的研究已较为成熟, 有报道称在其代谢过程中可产生蛋白酶 脂 肪酶 淀粉酶等活性物质, 同时能产生多种抗菌素 [1], 因此常被用于改善动物肠道功能 促 进动物生长和预防疾病 粪肠球菌是肠道内的主要菌群之一, 在肉鸡饮水中添加适量粪肠球 菌, 能够促进免疫器官的生长发育, 提高免疫器官指数, 同时显著提高循环抗体的水平, 促 进仔鸡的生长发育, 降低料重比 [2] 酿酒酵母是常见的饲料蛋白原料, 随着对其生物学功能 [3] 的了解, 酿酒酵母逐渐被应用于微生物添加剂中 Mathew 等 试验表明, 断奶仔猪日粮中 添加活体酵母能够提高仔猪的日增重和采食量, 但对仔猪肠道微生物菌群结构没有显著影 [4] 响 Heugten 等同样研究证实, 断奶仔猪饲喂活性酵母可以提高生产性能 但是 Jurgens [5] 也曾报道, 断奶仔猪日粮中添加活性酵母会降低仔猪的生产性能 畜禽日粮中单独添加枯草 芽孢杆菌 粪肠球菌和酿酒酵母的报道数见不鲜, 但单独一种微生物添加剂往往不能完全激 发动物的生长潜能, 达到最佳的生产改善作用, 而复合微生物制剂的研究较少, 且缺乏对添 加量的探讨 本研究旨在通过由枯草芽孢杆菌 粪肠球菌和酿酒酵母组成的复合益生菌制剂在保育猪 上的实际应用效果, 探究枯草芽孢杆菌 粪肠球菌和酿酒酵母之间的组合效果, 并通过不同 梯度的添加效果分析最佳添加量, 旨在为畜禽养殖中益生菌的规模化使用提供科学依据 1 试验材料与方法 1.1 试验动物 选择 45 日龄, 体重相近 (11.36±0.35kg) 的同批次杜长大三元杂交猪 96 头, 公母各半 由珠海丰源猪场提供 1.2 试验材料 试验样品 广东溢多利生物科技股份有限公司研发的仔猪专用益生菌制剂 溢康能 C-1002, 主 要成分为枯草芽孢杆菌 粪肠球菌和酿酒酵母等 试验日粮 试验配方见表 1 表 1 饲料配方 原料用量 (%) 营养指标营养水平 玉米 Cp8.3% 64.2 干物质 % 大豆粕 Cp44% 27.1 猪消化能 MC/Kg

3 小麦麸 Cp15.7% 3.42 粗蛋白 % 大豆油 1.95 粗纤维 % 3.03 食盐 0.31 粗脂肪 % 4.70 石粉 Ca35% 0.97 亚油酸 % 2.40 磷酸氢钙 1.15 钙 % 0.72 苏氨酸 总磷 % 0.55 蛋氨酸 有效磷 % 0.34 赖氨酸 食盐 % 0.30 罗氏仔猪复合多维 0.03 粗灰分 % 5.06 仔猪复合微量 0.1 赖氨酸 % 1.07 氯化胆碱 50% 0.1 蛋氨酸 % 0.38 抗敌素 10% 0.02 蛋胱氨酸 % 0.66 杆菌肽锌 10% 0.08 苏氨酸 % 0.76 抗氧化剂 33% 0.03 防霉剂 0.05 酸化剂 ( 乳酸灵 ) 0.2 合计 试验分组选择体重均匀健康肉猪 96 头, 随机分为 4 个处理, 各有 4 个重复组, 每个重复组各有 6 头猪, 公母各半 试验为期 49 天, 试验结束以重复为单位称试验猪的空腹重 试验设计具体分组如下 : 试验 1 组为对照组,2 3 4 组为试验组 表 2 试验分组 试验组 日粮 添加量 (g/t) 1 基础日粮 0 2 基础日粮 + 溢康能 C 基础日粮 + 溢康能 C 基础日粮 + 溢康能 C 试验饲养管理在溢多利生物科技股份有限公司动物试验基地试验育肥猪舍, 按常规生产方式管理, 自由采食, 自动饮水, 水泥地面栏养, 按 6 头 / 栏饲养, 定期进行严格的消毒 按常规的免疫程序进行免疫 1.5 试验测定指标 3

4 每周记录每重复组的采食量 ( 投料量和余料量 ), 记录试猪发病 腹泻和死亡淘汰数量 ; 记录每头猪试验始 末的重量 ; 核算增重成本 1.6 试验数据统计试验数据用 SPSS 统计分析软件进行统计分析和差异显著性检验, 试验数据以 平均值 ± 标准差 表示 2 试验结果与分析 2.1 生长性能如表 3 所示, 各试验组之间除日增重外, 其他指标均差异不显著 (p>0.05) 试验期间, 除第一周由于更换环境 饲料引起的应激外, 其余时间猪体况健康, 无死亡 表 3 复合菌种对保育猪生长性能的影响 试验组 初重 (kg/ 头 ) 末重 (kg/ 头 ) 日增重 (g/ 头 ) 日采食量 (g/ 头 ) 料重比 成活率 (%) ± ± ±43.5b ± ± ± ± ±61.2ab ± ± ± ± ±80.9a ± ± ± ± ±52.6b ± ± 注 : 列中肩标有相同字母的数据为差异不显著 (p>0.05), 肩标不同的为差异显著 (p<0.05) 添加复合菌的试验 组的末重 日增重 日采食量 料重比均优于不添加复合菌的试验 1 组, 日增重较试验 1 组分别提高 6.25% 9.04% 1.04%, 其中试验 3 组的与试验 1 组差异显著 (p<0.05); 日采食量方面, 试验 组的相接近, 试验 4 组的较其它组降低约 3.7%, 差异不显著 (p>0.05); 料重比方面试验 1 组的最大, 试验 组的分别降低 5.78% 9.78% 4.44%, 差异不显著 (p>0.05) 2.2 经济效益评定经济效益评定根据中国饲料工业协会制定的饲料酶制剂生物学综合评定技术规程, 采用增重饲料成本, 按重复计算, 公式为 : 成本 ( 元 /kg)= 全期配合饲料平均消耗费 ( 元 / 头 )+ 全期酶制剂平均用量 (g/ 头 ) 酶制剂单价 ( 元 /g) 全期平均增重 (kg/ 头 ) 4

5 如表 4 所示, 根据饲料原料价格 已知的复合菌价格, 计算出保育猪的增重成本 : 试验 组的增重成本比试验 1 组的降低 0.46 元 /kg 0.71 元 /kg 0.37 元 /kg 表 4 复合菌种对保育猪增重成本的影响 试验组 添加样品 (g/t) 饲料价格 ( 元 /kg) 增重成本 ( 元 /kg) 讨论 日粮中添加活体益生菌能够提高仔猪的生产性能 本研究发现, 在仔猪日粮中添加由枯 草芽孢杆菌 粪肠球菌和酿酒酵母组成的复合益生菌能够有效的提高保育猪的日增重 降低 [6] 料重比和增重成本 类似研究中, 华均超在断奶仔猪日粮中添加复合益生菌 ( 枯草芽孢杆 菌 粪肠球菌和酿酒酵母 ) 同样得到生产性能提高的结果 芽孢杆菌为兼性厌氧菌, 进入肠 道后迅速消耗游离氧, 造成低氧环境, 促进肠道厌氧菌群 ( 如 : 乳酸杆菌 ) 的繁殖, 同时抑 制好氧致病菌的生长, 改善肠道菌群平衡 有报道称, 日粮中添加枯草芽孢杆菌后, 仔猪盲 肠中的乳酸杆菌等有益菌的数量增加, 大肠杆菌和沙门氏菌等有害菌的数量减少, 消化道的 微生物区系得到改善 [7] 此外, 大量研究表明, 乳酸杆菌或芽孢杆菌均可促进小肠上皮细胞 的免疫功能 日粮中添加枯草芽孢杆菌可提高肉鸡血清和肝脏中的 T-AOC 和抗氧化酶活性, 降低 MDA 和 NO 水平, 提高法氏囊指数 胸腺指数及血清 IgG 水平 [8] 活体酵母同样具有 改善消化道的微生物区系的效果, 研究发现, 在仔猪日粮中添加活体酵母后, 仔猪的小肠绒 毛高度和隐窝深度得到明显提高 粪肠球菌是乳酸菌的一种, 在肠道内迅速繁殖, 在调节肠 道微生态平衡的同时, 产生具有杀菌抑菌作用的生理乳酸和短链脂肪酸 ; 此外, 粪肠球菌的 代谢产物具有蛋白酶 脂肪酶 淀粉酶活性, 有助于饲料的消化利用 研究表明, 含有粪肠 球菌的复合益生菌能够显著提高仔猪的日采食量, 降低料重比, 降低腹泻率 [9] 但是也有研 [10] 究得出不同结果 :Taras 等报道称屎肠球菌对 28 日龄断奶仔猪的体重 采食量和料重比没 [11] 有显著影响, 但是能够显著降低仔猪腹泻率 ;Broom 等试验结果表明, 日粮中添加粪肠 球菌并不能显著影响断奶仔猪的生长性能 造成上述研究结果不同的原因可能有两方面 一 5

6 方面是菌种在肠道内的定值需要一定的时间, 试验周期过短可能不能覆盖菌种的作用时间 ; 另一方面也可能是由于添加量不足, 外界摄入的菌种数量不足以辅助肠道对应土著菌种形成 优势菌落 目前, 益生菌的添加存在的主要问题是尚无益生菌制剂的药代动力学的系统描述, 益生 菌在肠道发挥作用的有效剂量及定植所需剂量无法明确 有研究结果显示, 在断奶仔猪日粮 中分别添加 0.01% 0.05% 和 0.10% 的枯草芽孢杆菌, 均能够提高仔猪的生产性能, 其中枯 草芽孢杆菌的添加量为 0.10% 组效果最好, 优于其它两组, 作者认为, 益生菌的添加量越多, 对猪生产性能的提高效果越明显 [12] 这一结果与张董燕等 [13] [14] Nousiainen 等报道一致, 通过加大益生菌使用量可以进一步改善仔猪的生产性能 而本研究发现, 日粮中使用复合菌 的三种不同添加量, 其中 200g/t 的效果最佳,150g/t 添加量的效果次之, 最大添加量 (250g/t) 组对仔猪生长性能和增重成本的改善效果反而垫底 类似的研究中, 潘宝海等研究日粮中添 加酿酒酵母对断奶仔猪生产性能的影响, 结果发现日粮中添加 0.1% 的活体酵母对断奶仔猪 的生长性能促进效果显著高于添加 0.05% 和 0.15% 活体酵母组 [15], 同样说明益生菌需要适量 添加 Maloney 等报道, 断奶仔猪的日增重和料重比随着日粮中酵母添加量的增加呈二次曲 [16] 线增长 陈生龙 等同样研究发现, 在断奶仔猪日粮中添加 CFU/g 的活体酵母能 够有效的提高仔猪的日采食量和日增重, 而当活体酵母的添加量增加到 CFU/g 时生 产性能反而具有二次曲线下降趋势 益生菌的添加需适量, 日粮中过量添加活菌体可能会在 一定程度上抵消益生菌对畜禽生产性能的提高效果 有研究发现, 日粮中添加 10cfu/g 的枯 草芽孢杆菌与添加 50mg/kg 的吉他霉素相比, 空肠黏膜胰蛋白和淀粉酶活性均显著提高, 但蔗糖酶 麦芽糖酶和脂肪酶活性显著降低 [17], 脂肪等营养物质消化率降低或许是过量添 加益生菌并没有进一步改善生产性能的原因之一 结论 日粮中添加枯草芽孢杆菌 粪肠球菌和酿酒酵母组成的复合菌能够提高保育猪的日增 重 降低料重比和增重成本, 其中 200g/t 的效果最佳,150g/t 添加量的提高生长性能 降低 增重成本的效果优于 250g/t 日粮中益生菌的添加量并不是越多越好, 应以实际情况适量添 加 参考文献 [1] 利明日粮中添加芽孢杆菌对肉仔鸡生产性能和免疫功能影响的研究 [D] 内蒙古农业大学 2009 [2] 温建新, 邵峰, 单虎. 乳酸 L-68 型粪肠球菌对肉鸡生产性能和免疫功能的影响 [J]. 中国微 生态学杂志, 2008, 20(2):

7 [3] Mathew A., Chattin S., Robbins C., et al. Effects of a direct-fed yeast culture on enteric microbial populations, fermentation acids, and performance of weanling pigs[j]. Journal of animal science, 1998, 76(8): [4] Van Heugten E., Funderburke D., Dorton K. Growth performance, nutrient digestibility, and fecal microflora in weanling pigs fed live yeast[j]. Journal of animal science, 2003, 81(4): [5] Jurgens M., Rikabi R., Zimmerman D. The effect of dietary active dry yeast supplement on performance of sows during gestation-lactation and their pigs[j]. Journal of animal science, 1997, 75(3): [6] 华均超屎肠球菌培养条件的优化及其复合益生菌在猪中饲用效果的研究 [D] 安徽农业大学 2012 [7] 倪学勤, 曹希亮, 曾东, et al. 猪源约氏乳酸杆菌 JJB3 和枯草芽孢杆菌 JS01 对仔猪肠道分泌型免疫球蛋白和菌群的影响 [J]. 动物营养学报, 2008, 20(3): [8] 余东游, 毛翔飞, 秦艳, et al. 枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能及其抗氧化和免疫功能的影响 [J]. 中国畜牧杂志, 2010, (3): [9] 华均超, 张邦辉, 周明, et al. 屎肠球菌 T013 复合制剂在断奶仔猪生产中的应用研究 [J]. 安徽农业科学, 2012, 40(11): [10] Taras D., Vahjen W., Macha M., et al. Performance, diarrhea incidence, and occurrence of virulence genes during long-term administration of a probiotic strain to sows and piglets[j]. Journal of Animal Science, 2006, 84(3): [11] Broom L., Miller H., Kerr K., et al. Effects of zinc oxide and Enterococcus faecium SF68 dietary supplementation on the performance, intestinal microbiota and immune status of weaned piglets[j]. Research in veterinary science, 2006, 80(1): [12] 黄雪泉. 添加枯草芽孢杆菌制剂对仔猪生产性能的影响 [J]. 中国畜牧兽医, 2010, (7): [13] 张董燕, 季海峰, 王晶, et al. 猪源罗伊氏乳酸杆菌对断奶仔猪生长性能和血清指标的影响 [J]. 动物营养学报, 2011, 23(9): [14] Nousiainen J., SetäläJ., Salminen S., et al. Lactic acid bacteria as animal probiotics[j]. Lactic acid bacteria., 1993: [15] 潘宝海, 孙鸣, 孙冬岩, et al. 酿酒酵母对仔猪生产性能和消化道微生物区系的影响 [J]. 饲料研究, 2010, (1): [16] 陈生龙活酵母对断奶仔猪生产性能, 免疫功能和肠道微生物区系的影响 [D] 福建农林大学 2009 [17] 卞国顺, 崔志文, 姚庞, et al. 枯草芽孢杆菌替代抗生素对肉鸡生产性能和肠道黏膜酶活的影响 [J]. 饲料工业, 2012, (9):

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