NutritionandFeedstufs 营养饲料采集基础日粮样品备用基础日粮配方及营养成分前期后期 !"# $% & '

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1 叶酸水平对断奶仔猪生长性能及血清组织中蛋白质代谢的指标影响杨光波, 陈代文, 余冰 ( 四川农业大学动物营养研究所, 四川雅安 ) 摘要 : 试验旨在研究日粮中添加不同剂量的叶酸对断奶仔猪生长性能及血清和组织中蛋白质代谢相关指标的影响试验选择 25 日龄断奶仔猪 160 头 (80 头纯种大白和 80 头纯种长白, 公母各半 ), 随机分为 5 个处理组, 每个处理 4 个重复, 每个重复 8 头猪, 进行 28d 的饲养试验 5 种日粮分别在基础日粮上添加 mg/kg 和 10mg/kg 叶酸结果明 : 添加 2.5mg/kg 叶酸仔猪的全期日增重较基础日粮组有显著提高 ( <0.05), 提高了血清蛋白质浓度 ( <0.05), 降低了血清尿素氮浓度 ( <0.01), 并提高了肝脏 DNA RNA 和蛋白质的含量 (<0.05) 以及肌肉 RNA/DNA 和 RNA/ 蛋白质值 ( <0.05), 而添加更高水平叶酸时却使仔猪生长性能下降本试验结果显示, 仔猪日粮中叶酸适宜添加量为 2.5mg/kg, 叶酸不足或者过高都将影响动物的生长关键词 : 叶酸 ; 生长性能 ; 蛋白质代谢 ; 断奶仔猪中图分类号 :S828.5 文献标识码 :A 文章编号 : (2011) 断奶仔猪的快速生长, 伴随着动物机体蛋白质的沉积叶酸是合成 DNA 前体的重要物质, 对嘌呤和嘧啶的合成起着重要作用首先甘氨酸苏氨酸丝氨酸组氨酸和蛋氨酸都是叶酸携带的一碳单位的重要来源, 叶酸对于蛋白质的合成影响包括核苷酸的合成和 DNA 的复制 DNA 的稳定性等多个环 [1] [2] 节 Birn 等提出哺乳动物细胞虽然能够合成喋啶环, 但却不能把它与其他复合物结合起来从而合成叶酸, 因此需要外源添加叶酸来满足体内需要 NRC 关于仔猪的叶酸推荐量是 0.3mg/kg [3], 但叶酸剂量试验在断奶仔猪上的研究较少叶酸作为水溶性维生素, 被认为是无毒无害的, 其添加上限一直没有定论另外, 目前关于不同叶酸剂量对断奶仔猪蛋白质代谢影响的研究尚未见报道本试验旨在研究不同叶酸水平对断奶仔猪生长性能及蛋白质代谢的影响, 为确定断奶仔猪最适叶酸需要量及研究叶酸对动物机体蛋白质代谢的影响提供理论依据材料与方法 1.1 试验设计本试验采用单因子设计试验分为收稿日期 : ; 修回日期 : 资助项目 : 中国高校创新研究团队项目 (IRT0555) 作者简介 : 杨光波 (1984-), 男, 四川成都人, 在读硕士 * 通讯作者 5 个处理, 每个处理 4 个重复, 每个重复 8 头仔猪 ( 包括 4 头纯种大白仔猪和 4 头纯种长白仔猪, 公母各半 ), 共计 160 头断奶仔猪处理 1 为基础日粮 ( 多维里不添加叶酸 ), 处理和 5 分别在基础日粮中添加 mg/kg 和 10mg/kg 叶酸 1.2 试验动物本试验选用 25 日龄健康的纯种大白和长白断奶仔猪共 160 头 ( 纯种大白 80 头纯种长白 80 头 ), 公母各半试验在广西壮族自治区桂牧叮原种猪场进行 1.3 试验日粮基础日粮以玉米 - 豆粕 - 乳清粉为基础, 参照 NRC(1998) 断奶仔猪营养需要试验日粮分为前后 2 种, 每种日粮饲喂 2 周, 基础日粮组成如饲养管理适应期仔猪断奶后转入清洗消毒后的漏缝高床保育舍内, 室温为 26~28, 每个处理都饲喂基础日粮, 在此期间观察仔猪的排粪粪量和采食饮水规律采食量饮水量及其精神状况, 预试期为 3d 试验期在预试期的最后一天 20:00 停料, 第 2 天开始正式试验, 试验期为 28d 正试期 07:00 空腹称重, 按照体重和性别随机分组,09:00 左右开始饲喂相应的试验日粮在试验第 28 天 20:00 停料, 第 29 天 07:00 空腹称重后结束试验 1.5 样品收集和处理饲料样品的采集试验开始时四分法均匀 24

2 NutritionandFeedstufs 营养饲料采集基础日粮样品备用基础日粮配方及营养成分前期后期 !"# $% & ' ()* , # /( "/( /( "# * /( "/( "/( 89/( /( :; ( 注 : 预混料向每千克基础日粮提供 : 维生素 A15000IU, 维生素 D IU, 维生素 E100IU, 维生素 K 3 3mg, 维生素 B 1 3mg, 维生素 B 2 7mg, 维生素 B 6 6mg, 维生素 B mg, 烟酸 40mg, 泛酸 12mg, 生物素 0.1mg, 铁 165mg, 铜 200mg, 锌 145mg, 锰 65mg, 硒 0.18mg, 碘 0.38mg 血样的制备在试验第 1 天第 15 天和第 29 天清晨, 每个圈各选 1 头大白公猪进行前腔静脉空腹采血 10mL,3000r/min 下离心 20min, 提取血清所采血清样放入 -20 冰箱冷冻, 用于血清中的生化指标测定组织样品的采集饲养试验结束后, 对每个重复, 即每个圈选择之前采血的大白公猪进行屠宰取肝脏和肌肉, 生理盐水冲洗后用锡箔纸包裹置液氮保存, 而后放置 -80 超低温冰箱保存待测 1.6 测定指标与方法生产性能指标在试验第 1 15 天和 29 天 08:00 对试验猪进行空腹称重, 分别计算各日粮处理组平均日增重 (ADG) 平均日采食量 (ADFI) 及饲料增重比 (F/G) 饲料叶酸含量采用放射免疫法检测基础 [4] 日粮中叶酸含量, 方法参照文献血清生化指标血清总蛋白 (TP): 双缩脲法, 试剂盒由四川迈克生物科技公司提供血清白蛋白 (ALB): 溴甲酚绿比色法, 试剂盒由四川迈克生物科技公司提供血清球蛋白 (GLOB):TP-ALB 血清尿素氮 (SUN):Fearon 反应法, 试剂盒由四川迈克生物科技公司提供血清天冬氨酸转氨酶 (AST) 和丙氨酸转氨酶 (ALT): 赖氏法, 试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供组织指标测定肝脏肌肉中总蛋白含量, 方法采用考马斯亮蓝 G-250 法肝脏肌肉中 DNA RNA 含量, 用苯酚法提取 RNA, 浓盐法提取 DNA 1.7 统计分析采用 SPSS13.0 统计软件进行方差分析 (ANOVA), 并用 Duncan's 法进行多重比较, 结果均以平均值 ± 标准差示结果 2.1 不同叶酸水平对断奶仔猪生长性能的影响从 2 可以看出, 试验前 2 周, 添加不同水平叶酸对断奶仔猪的日增重和日采食量没有显著影响 ( >0.05), 2.5mg/kg 组的仔猪日增重和日采食量高于其他组试验后 2 周,2.5mg/kg 组的仔猪日增重显著高于基础日粮组 5mg/kg 和 10mg/kg 组 ( <0.05), 其日采食量极显著高于基础日粮组 5mg/kg 和 10mg/kg 组 ( <0.01) 全期来看,2.5mg/kg 组的仔猪日增重显著高于基础日粮组和 10mg/kg 组 ( <0.05), 2.5mg/kg 组的仔猪末重高于其他组 ( =0.06), 不同叶酸水平对饲料增重比没有产生显著影响 ( >0.05) 2.2 不同叶酸水平对断奶仔猪血清生化指标的影响从 3 可以看出,2.5mg/kg 组的仔猪血清总蛋白和白蛋白在试验结束时显著高于基础日粮组 ( < 0.05), 而血清尿素氮则极显著低于基础日粮组 ( < 0.01) 2.5mg/kg 和 5mg/kg 组的血清谷丙转氨酶在试验结束时显著高于基础日粮组 ( <0.05), 不同叶酸水平对血清球蛋白和谷草转氨酶没有显著影响 ( >0.05) 25

3 不同叶酸水平对断奶仔猪生长性能的影响结果项目基础日粮 0.5mg/kg 叶酸 2.5mg/kg 叶酸 5mg/kg 叶酸 10mg/kg 叶酸初重 /kg 7.320± ± ± ± ±0.64 末重 /kg ± ± ± ± ±1.38 1~2 周 ADG/g ± ± ± ± ± ~4 周 ADG/g ±41.05 b ±25.57 ab ±16.03 a ±39.34 b ±22.94 b 1~4 周 ADG/g ±27.21 b ±21.08 ab ±21.32 a ±28.88 ab ±11.45 b 1~2 周 ADFI/g ± ± ± ± ±9.15 3~4 周 ADFI/g ±39.89 c ±21.73 ac ±22.46 a ±47.99 c ±19.19 c 1~4 周 ADFI/g ± ± ± ± ± ~2 周 F/G 1.29± ± ± ± ±0.05 3~4 周 F/G 1.51± ± ± ± ±0.04 1~4 周 F/G 1.44± ± ± ± ±0.03 注 : 同行数据肩标字母相邻者示差异显著 ( <0.05), 相间者示差异极显著 ( <0.01) 下同叶酸添加水平对断奶仔猪血清生化指标的影响结果项目断奶天数 /d 基础日粮 0.5mg/kg 叶酸 2.5mg/kg 叶酸 5mg/kg 叶酸 10mg/kg 叶酸 ± ± ± ± ±3.63 TP/(g L -1 ) ± ± ± ± ± ±7.40 b 60.45±6.69 ab 62.68±6.26 a 59.88±7.56 ab 60.05±6.99 ab ± ± ± ± ±1.92 ALB/(g L -1 ) ± ± ± ± ± ±3.61 b 32.30±3.08 ab 32.63±1.64 a 31.78±2.06 ab 32.23±4.09 ab ± ± ± ± ±2.10 GLOB/(g L -1 ) SUN/(mmol L -1 ) ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.20 c 2.21±0.17 ac 2.17±0.13 a 2.22±0.19 ac 2.26±0.18 ac ± ± ± ± ±2.26 ALT/(U L -1 ) ± ± ± ± ± ±2.32 b 47.31±2.51 ab 50.56±2.90 a 50.32±2.08 a 48.87±1.27 ab ± ± ± ± ±2.64 AST/(U L -1 ) ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± 叶酸水平对断奶仔猪肝脏肌肉中 RNA 和 DNA 含量的影响从 4 中可以看出,2.5mg/kg 叶酸组的仔猪肝脏 DNA 含量显著高于基础日粮组和 10mg/kg 组 ( <0.05), 而 RNA 含量显著高于 10mg/kg 组 ( <0.05) 0.5mg/kg 和 2.5mg/kg 组仔猪肌肉 RNA/ DNA 显著高于基础日粮组 ( <0.05) 不同叶酸水平对仔猪肝脏 RNA/DNA 以及肌肉中 DNA 和 RNA 的含量没有显著影响 ( >0.05) 2.4 叶酸水平对断奶仔猪肝脏肌肉中蛋白质含量的影响从 5 中可以看出,2.5mg/kg 叶酸组的仔猪肝脏蛋白质含量显著高于基础日粮组 ( <0.05), 肌肉中 RNA/ 蛋白质的值也显著高于基础日粮组 26

4 NutritionandFeedstufs 营养饲料叶酸水平对断奶仔猪肝脏肌肉中和含量以及的影响添加水平 /(mg kḡ 1 ) 肝脏肌肉 DNA/(mg ḡ 1 ) RNA/(mg ḡ 1 ) RNA/DNA DNA/(mg ḡ 1 ) RNA/(mg ḡ 1 ) RNA/DNA ±0.371 b 7.371±0.581 ab 2.372± ± ± ±0.213 b ±0.305 ab 7.817±0.747 ab 2.422± ± ± ±0.292 a ±0.343 a 7.947±0.875 a 2.409± ± ± ±0.316 a ±0.443 ab 7.581±0.866 ab 2.372± ± ± ±0.167 ab ±0.350 b 7.297±0.646 b 2.310± ± ± ±0.241 ab 叶酸水平对断奶仔猪肝脏肌肉中蛋白质含量以及蛋白质的影响添加水平 /(mg kḡ 1 ) 肝脏蛋白质 /(mg ḡ 1 ) RNA/ 蛋白质 /(g ḡ 1 ) 蛋白质 /(mg ḡ 1 ) RNA/ 蛋白质 /(g ḡ 1 ) 肌肉 ±69.02 b 13.77± ± ±0.462 b ±53.04 ab 13.78± ± ±0.429 ab ±48.15 a 13.87± ± ±0.537 a ±67.97 ab 13.86± ± ±0.270 ab ±56.95 ab 13.23± ± ±0.250 ab ( <0.05) 不同叶酸水平对仔猪肝脏 RNA/ 蛋白质以及肌肉蛋白质的含量没有显著影响 ( >0.05) 讨论 3.1 叶酸添加水平对试验猪生长性能的影响叶 [5] 酸能够提高动物的生长性能 Lindemann 等观察到, 在仔猪玉米 - 豆粕型日粮中添加叶酸 0.5mg/kg, 日增重 [6] 得到改善 Wong 等报道, 给日本鹌鹑补充叶酸可 [7] 以提高体增重和饲料效率葛文霞等研究发现, 添加叶酸显著提高了 1 日龄艾维茵商品肉鸡的日增重和日采食量这明叶酸作为快速生长的现代集约化饲养的畜禽体内合成嘌呤嘧啶的必需物质和有效的甲基载体可促进机体的生长发育高生长速度和高产量的个体需要更高的叶酸水平, 因此添加足够量的叶酸将能提高现代品系畜禽的生长速度本研究明, 过高的叶酸添加水平相比基础日粮组对仔猪的生长性能并没有显著改善, 有可能是因为过高的叶酸浓度抑制了叶酸结合蛋白以及 5,10- 亚甲基四氢叶酸还原酶的达, 从而干扰了叶酸在体内的转运和代谢, 抑制了嘧啶和嘌呤的合成, 从而没有提高蛋白质的合成关于叶酸对动物生长性能, 尤其是对动物采食量的影响有待更进一步的研究 3.2 叶酸添加水平对血清生化指标的影响本试验中,25 日龄仔猪断奶后, 血清 TP ALB GLOB 等都有明显下降, 明断奶应激对仔猪的生理生化指标产生了一定影响添加 2.5mg/kg 的叶酸较基础日粮组显著提高了血清 TP 和 ALB, 明添加一定剂量的叶酸促进了血清蛋白质的合成, 与 El-Demerdash [8] [9] [10] 等葛文霞等和段赛星等的研究相一致血清蛋白质主要包括 ALB 和 GLOB,ALB 由肝脏合成, 叶酸主要在肝脏中参与机体反应, 促进了体内嘌呤和嘧啶碱基的生物合成, 另外叶酸作为有效的甲基供体, 参与蛋氨酸循环, 加强了氨基酸之间的互换, 如丝氨酸与甘氨酸蛋氨酸与同型半胱氨酸以及组氨酸与谷氨酸等, 提高了氨基酸的利用率血清尿素氮 (SUN) 是机体氮代谢的重要指标, 谷丙转氨酶 (ALT) 和谷草转氨酶 (AST) 是动物体内参与氨基酸代谢的重要酶, 它们可以较为有效地反映体内蛋白质代谢情况本试验中, 适宜叶酸添加剂量显著降低了 SUN 浓度, 提高了 ALT 浓度, 明适宜叶酸水平能够提高体内的蛋白质利用率, 从而使仔猪体内氨基酸趋于平衡, 延长了氮在机体内的留存时间, 加快了蛋白质的合成 3.3 叶酸添加水平对肝脏和肌肉中 RNA DNA 和蛋白质含量的影响断奶仔猪的快速生长伴随着组织中核酸和蛋白质的沉积从本试验可以看出, 27

5 2.5mg/kg 叶酸添加组的仔猪肝脏 DNA 和 RNA 含量显著高于基础日粮组和 10mg/kg 添加组, 说明适宜叶酸添加剂量显著促进了肝脏中核酸的含量这是因为叶酸参与核酸的嘧啶和嘌呤的合成叶酸在肝脏中经过 MTHFR 还原成有活性的四氢叶酸, 而在 dump 转化为 dtmp 的过程中就需要四氢叶酸传递一碳基团, 如果叶酸缺乏或者不足,dTMP 的合成受到限制, 使得 DNA 合成受到障碍叶酸可能还会影响转录后 RNA 的修饰和加工由 S- 腺苷蛋氨酸 (SAM) 进行甲基化产生的帽子结构在翻译过程中起到了识别和稳定 mrna 的作用, 避免 5 端受到核酸外切酶的降解, 从而稳定了 RNA RNA/ 蛋白质示核糖体的数量或蛋白质的合成潜力或者 RNA 的转录效率, 也是衡量组织蛋白质合成的重要指标本试验中, 如果叶酸添加量过高, 反而会降低肝脏和肌肉中核酸和蛋白质的含量, 明过高的剂量将影响嘧啶和嘌呤的生物合成, 对 DNA 和 RNA 的合成产生干扰, 进而影响组织蛋白质的含量结论从本试验来看, 断奶仔猪日粮中叶酸适宜添加量为 2.5mg/kg 叶酸不足或者过量将通过影响动物机体的蛋白质代谢从而影响到机体蛋白质的合成, 进而对动物的生长性能产生影响参考文献 : 石若夫 3 叶酸与蛋白质合成 3 生命科学 /11 ( <)= >>1 >>/3 / % ( 3 +" 6 2"-, % / 2 " + " = *+(* "(? ("*" ( ( ( 6", 2 *(( "( ( A+- ;" A+- /11. /< = B// B>.3 > ; 3 ( " ("C (" "! " D E + = *2" - A(" <<43 张静韩慧兰钟高仁等 3 低叶酸饲料对小鼠血清叶酸浓 3 实验动物与比较医学 /110 /07/9= 1. 1<3 0 2" D 3 B * * 2 22!" 2 " 3 )* <4..>7 3 9= >03. E A +( A, (?"( B 3 +" " ("C (" " ( "( *+ *6 2 C 7 ( * ( *9 3 A )* < 0.= 40/ 4.13 葛文霞张文举向春和等 3 不同水平叶酸对肉仔鸡生产性能和胴体品质的影响 3 上海畜牧兽医通讯 /11. (/)= > 3 4 " "(2 + B D " D '!2 B D3 % *+" * 2- +" ( "*," ( " * * 2 ( (" "2! + *+( 7 '9 3, ( )* " A( % /11. = >.3 < 葛文霞张文举柳旭伟 3 叶酸对 > 3 饲料博览 /11.,( )= /<> 3 1 段赛星陈兴乾杨膺白等 3 3 现代农业科技 /11< 7< = //4//<3 EfectsofDietarySupplementationofFolicAcidonGrowthPerformanceandIndicatorsRelatedwith ProteinMetabolism ofserum andtisuesinpiglets!" # $ % &' " ( ) *+ ( * ( $,"( - ) *+./01 + Abstract: +" " "( "! * 2* "2 2" "( " +" " "* 2 " (- " " * * 2 (! + "( ( *" 2 2 * ( (" "2! + ( " " "( 2 " " 3.1 " +" " /0 2-!"(" (2-2, 2"2 0 (" " "*+ (" " * "2 (" * "! + 4 " 3 +"," (" "!"(" "2! + +" 2 " " " "2! / * * 23 +" " "( " "2 ( / " (" +!"2 + "2 2 " " " "2! + /30 56 * * 2 ("! "( + + " * ( ( " " " /30 56 * * 2 +" 2 " *(" "2 "( ( " * *" ( & ("2*"2 "( (" ( " * *" ( & : (","( +" 22 /30 56 * * 2 2 " (,"2 +","( ; 2 ( " * " & * " ; 5 2 ; 5 ( ", " & !","( " *"," * * 2 " "! 2 2"* " (! + "( ( *"3 ) +" * * 2 " " ( "! /30 56 * " ( *+ * * 2! "* +" (! + 3 Keywords: * * 2 (! + "( ( *" ( " " " 28

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动物营养学报卷! 的生物素共种试验日粮表基础日粮组成和营养水平风干基础 8),..((.---(,-),,).98)(, 项目 #, 原料 #-,(,- 玉米.- 大豆油 4.18,-.() 膨化豆粕 :,.18,-,) 膨化大豆 :,.18,- (18(6 含动物营养学报圆环病毒攻击下日粮中生物素的添加水平及其对仔猪部分免疫指标及生产性能的影响陈宏张克英丁雪梅徐志文陈代文四川农业大学动物营养研究所雅安教育部动物抗病营养重点实验室雅安四川农业大学生物技术中心雅安摘要本试验旨在确定猪圆环病毒型攻击下玉米豆粕型日粮中生物素的适宜添加水平及其对仔猪部分免疫指标及生产性能的影响将日龄断奶抗体检测阴性的杜长大三元杂交仔猪

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