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1 动物营养学报 日粮类型及肠液储存条件对鸭空肠液组成与特性的影响 郑卫宽 赵 峰 张宏福 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 动物营养学国家重点实验室 北京 摘 要 本试验旨在通过研究日粮类型及肠液的体外储存条件对鸭空肠液组成的影响 为人工鸭小肠液的制备提供参考 试验一探讨日粮类型对鸭空肠液组成的影响 采用完全随机设计 将 只安装有空肠 型套管的成年公鸭随机分成 组 每组 个重复 每个重复 只鸭 分别饲喂玉米 豆粕型日粮和玉米 豆粕 菜粕 棉粕型日粮 试验期 试验二利用 个储存温度 和 个储存时间 和 完全随机设计 研究鸭空肠液有效生物学活性的适宜储存条件 结果表明 种日粮条件下鸭空肠液在胰蛋白酶 糜蛋白酶的活性及 和!" 浓度上有显著差异 而在淀粉酶和脂肪酶活性 $ %& 和!& 浓度及 ' 上无显著影响 肠液的储存温度对鸭空肠液的 ' 有显著影响 而对消化酶活性无显著影响 肠液的储存时间对玉米 豆粕 菜粕 棉粕型日粮条件下鸭空肠液胰蛋白酶和淀粉酶活性以及 种日粮条件下空肠液 ' 有显著或极显著影响 或 由此可见 日粮类型是影响鸭空肠液生物学特性的主要因素之一 储存条件对鸭空肠液生物学特性的影响因日粮类型的不同而有所差异 关键词 鸭 空肠液 消化酶 离子浓度 ' 小肠是饲料养分消化吸收的主要场所 肠液是饲料养分在肠道消化过程中所处的主要介质 因此 要建立以人工模拟鸭肠液为基础的鸭饲料养分生物学效价的体外评定方法 首先需要研究与消化相关的鸭小肠液的组成成分 并探讨其生物学特性 许多研究表明畜禽肠道各段的消化与消化酶的表达 量 离子浓度及 ' 密切相关 肠液中这些物质的组成除受动物自身生理状态的影响外 主要受日 粮营养水平的影响 在体外研究肠液的消化生物 学特性中 肠液的组成还受储存条件的影响 在以胃蛋白酶 人工鸭肠液为体系的鸭饲料养分生物学效价酶学评定方法中 为了使人工鸭肠液的设计不脱离鸭内源小肠液的生物学特性 本研究设计了营养水平一致但蛋白质来源不同的两种日粮 以探讨日粮类型及体外储存条件对鸭空肠液组成的影响 为人工鸭小肠液的制备提供参考 材料与方法 试验设计及饲养管理 试验一采用单因素完全随机设计 选用健 康 体重相近 安装有空肠套管的 周龄成年公鸭 只 随机分成 组 每组 个重复 每个重复 只鸭 饲养于代谢笼 1) 1) 1) 中 单笼饲养 试验前的第 天饲喂基础日粮 第 天 组分别饲喂玉米 豆粕日粮和玉米 豆粕 菜粕 棉粕日粮 鸭的饲养管理按照动物营养学国家重点实验室的常规饲养管理程序进行 代谢室的温度维持在 自由饮水 采食 自然通风 光照 试验二采用 种储存温度 种储存时间 完全随机设计 每组 个重复 研究鸭空肠液在和 和 两种温度下 储存 和 的消化酶活性及 ' 试验日粮 种试验日粮及基础日粮的组成及营养水平参照 %! 鸭的营养需要量配制 表 其中玉米 豆粕型日粮以豆粕为主要蛋白质来源 玉米 豆粕 菜粕 棉粕型日粮以豆粕 菜粕和棉粕为主要蛋白质来源 收稿日期 基金项目 北京市自然科学基金项目 基本科研业务费专项 作者简介 郑卫宽 男 河南郑州人 硕士研究生 主要从事饲料养分生物学效价评定 ()&*"+,-./1) 通讯作者 张宏福 研究员 博士生导师 ()&*",-&/-*/&*'1)

2 期 郑卫宽等 日粮类型及肠液储存条件对鸭空肠液组成与特性的影响 项目 4.) 表 日粮组成及营养水平 风干基础 &".!)'**/&//2*./".."*. 玉米 豆粕日粮!2/.&/).&"*. 玉米 豆粕 菜粕 棉粕日粮!2/.&/).&"2&'... ).&"1/..).&"*. &*22&*3 基础日粮 5&&"*. 原料 4/2.*./ 玉米!2/ 豆粕 6.&/).&" 菜粕 &'...).&" 棉粕!/..).&"!" 蛋氨酸!". " 赖氨酸 "7 磷酸氢钙!&89 石粉 7*)./. 食盐 %&!" 大豆油 6.&/*" 预混料 82.)*: 合计 &" 营养水平 %2*./".." 干物质 ; 代谢能 ( + 粗蛋白质!8 粗脂肪 (( 钙!& 总磷 8 总赖氨酸 &"7 总蛋氨酸 &". 预混料可为每千克全价料提供 -.'2.)*:'2*."*/'.2+*.4;4(4 $) 5) 5) 5) 5 泛酸 '&/-./*1&1*) 烟酸 /*&1*/) 叶酸 "*1&1*) 生物素 **/) 氯化胆碱 1-"*/.1-"2*.)!).) /) /) 6.) 4) 干物质 粗蛋白质和粗脂肪为实测值 其余为计算值 ;!8&/((.2.).&2.&".&/-.2/2*./"..".2.1&"1"&.&". 样品的采集与制备试验期第 天 第 天和第 天的 用收集瓶在低温条件下 收集空肠食糜 摇匀后全部转入 )7 离心管中 于 条件下 离心 )*/ 结束后将上清液分装转入 )7 离心管中 暂存 待整个试验结束后 将每个重复内各时间段收集的样品等体积混合后各取 份 )7 空肠液分别装于 )7 离心管中 分别于 和 保存 分析指标及方法 胰蛋白酶根据 <*2/ 等方法测定 以 ( 6*)& 为底物 其活性单位 )7 定义为 在 ' 为 条件下 每 )*/ 释放 )" 对 甲苯磺酰 " 精氨酸所具有的活性 糜蛋白酶根据 <*2/ 等 方法测定 以 5((6*)&5 为底物 其活性单位 )7 定义为 在 ' 为 条件 下 每 )*/ 释放 )" 苯甲酰 " 酪氨酸所具有的活性 淀粉酶根据 ;&-"=* 方法测定 以可溶性淀粉为底物 其活性单位 )7 定义为 在 ' 为 条件下 每 )*/ 释放 )" 麦芽糖所具有的活性 脂肪酶根据 /. 等方法测定 以 甲基试卤灵脂为底物 其活性单位 7 定义为 在 ' 为 条件下 每 )*/ 释放 ))" 的 甲基试卤灵所具有的活性 %& $!& 和!" 离子浓度分别采用朗道 &/:%8!> 和!4 试剂盒测定 空肠液 ' 用 %%4 型 ' 计在 恒温水浴条件下测定 数据处理试验一按照完全随机设计 用 66 软件的. 模块对数据进行 检验 试验二采用 双因素试验设计 用 66 的 >7 模块对数据进行方差分析 以 ;/1&/ 氏法进行多重比较 结

3 动 物 营 养 学 报 卷 果以平均值? 标准差 结果与分析 日粮类型对鸭空肠液中消化酶活性 离子浓度和 的影响从玉米 豆粕型日粮与玉米 豆粕 菜粕 棉粕型 日粮条件下鸭空肠液组成的差异看 表 玉米 豆粕 菜粕 棉粕型日粮显著的提高了鸭空肠液中胰蛋白酶 糜蛋白酶活性和!" 浓度 而 种日粮条件下 鸭空肠液中的淀粉酶 脂肪酶活性和 %&!& 和 $ 浓度以及 ' 差异均不显著 表 日粮类型对鸭空肠液中消化酶活性 离子浓度和 ' 的影响 &".(.1*.&2'./-.&1***.*.*../,).*/1/1./2&*/&/'@.@/&"@*1.*/1+ ))"7 项目 4.) 玉米 豆粕日粮!2/.&/).&"*. 玉米 豆粕 菜粕 棉粕日粮!2/.&/).&"2&'... ).&"1/..).&"*. 胰蛋白酶 2'*/ )7 & 糜蛋白酶!-)2'*/ )7? & 淀粉酶 )"&.)7? 脂肪酶 7*'&.7? '!"? &!& & %& $ 同行数据肩注小写字母不同者表示差异显著 4/-.&).2&".*-*.2./)&""..2'.212*').&/*/**1&/*.2./1. 储存条件对鸭空肠液中消化酶活性和 的影响 从储存条件对鸭空肠液消化酶活性和 ' 的影响看 表 储存温度对 种日粮条件下鸭空肠液的消化酶活性无显著影响 而对肠液的 ' 有显著影响 条件保存的肠液 ' 显著地高于 条件下保存的肠液 ' 储存时间对 种日粮条件下鸭空肠液 ' 有极显著影响 鸭空肠液的 ' 随着保存时间的延长而升高 储存时间对鸭空肠液消化酶活性的影响因日粮类型不同而有所差异 在试验鸭采食玉米 豆粕型日粮时 储存时间对鸭空肠液消化酶活性无显著影响 而在试验鸭采食玉米 豆粕 菜粕 棉粕型日粮时 随着储存时间的延长 空肠液的胰蛋白酶 淀粉酶活性显著升高 储存温度和储存时间 而对 ' 有交互作用 讨 论 日粮类型与鸭空肠液组成的关系家禽胃肠道内的消化酶来自于胃腺 胰腺及肠腺的分泌液 %& $!& 和!" 等电解质 离子主要来自食物和内分泌腺的分泌 由于禽类的采食与饮水呈间息式 从而使得不同肠段的食糜中消化酶的活性及电解质离子的浓度受采食及饮水的影响程度与肠道所处的位置有关 本研究通过套管多次采集空肠食糜 使得食糜样品均来自于小肠的同一相对位置 排除了传统屠宰方法因肠段位置的差异对测试结果的干扰 增加了试验结果的可比性 对空肠液中 种消化酶的活性无交互作用

4 期 郑卫宽等 日粮类型及肠液储存条件对鸭空肠液组成与特性的影响 表 储存时间和储存温度对鸭空肠液中的消化酶活性和 ' 的影响 日粮类型 '.*. 储存温度 储存时间 62&. 62&.*)..)'.2&2. 胰蛋白酶 2'*/ )7 糜蛋白酶!-)2'*/ )7 淀粉酶 )"&. )7 脂肪酶 7*'&. 7 ' 玉米 豆粕日粮!2/.&/ ).&"*. 值 &". 玉米 豆粕 菜粕 棉粕日粮!2/.&/ ).&"2&'... ).&"1/.. ).&"*. 值 &".???????? 5 5???????? 5 5 表示储存温度 和 间的比较 5 表示储存时间 和 间的比较 5 表示储存温度和储存时间之间的互作 表示 的显著水平 表示 的显著水平 ).&/-.1)'&2&* /2&..)'.2&2.&/ 5 ).&/-.1)'&2&* /2&.*).&/5).&/*/.2&1*/.../2&..)'.2&2.&/2&.*). ).&/ ).&/ 日粮中营养物质的含量能诱导畜禽肠道内消化酶的表达 从而呈现不同日粮营养水平条件下 胰腺 及肠液中消化酶的活性有显著差异 然而 在同一营养水平条件下 日粮的组成对动物胰腺及食糜中消化酶的活性也有一定的影响 但报道结果并 不一致 本研究中 种日粮的能量 蛋白质 水平一致 氨基酸组成也相近 此 种日粮条件下鸭空肠液的淀粉酶及脂肪酶的活性没有显著差异 这是由于 种日粮中作为主要碳化水化合物的玉米的含量非常接近 粗脂肪含量的差异也较少而不足引 起鸭空肠液中淀粉酶及脂肪酶活性的改变 同时也表明本试验条件下 日粮蛋白质品质的差异并没

5 动 物 营 养 学 报 卷 有引起鸭空肠液中这 种消化酶活性的变异 但是 在鸭空肠液蛋白酶活性的变异上 玉米 豆粕 菜粕 棉粕型日粮条件下的鸭空肠液中胰蛋白酶和糜蛋白酶活性要显著高于玉米 豆粕型日粮条件下鸭空肠液的相应值 这表明日粮中蛋白质饲料的品质是鸭空肠液中蛋白酶活性变异的主要限制性 因素 电解质离子在肠道内主要起稳定肠液正常渗透压和 ' 参与消化酶消化食物和营养物质的吸收 的作用 在动物的空肠和回肠中 %& $ 和!& 等阳离子和阴离子的浓度受日粮的影响较少 呈相对稳定的状态 本试验中 种日粮条件下鸭空肠液中的 %& $ 和!& 浓度没有显著差异 这表明日粮的类型对鸭空肠液中这 种离子的浓度无明显的影响 然而 玉米 豆粕 菜粕 棉粕粕日粮条件下鸭空肠液中 和!" 浓度都显著的高于玉米 豆粕型日粮条件下鸭空肠液中的相应值 这可能主要与鸭空肠液中胰蛋白酶的活性的升高有 关 本研究中 种日粮条件下对鸭空肠液的 ' 没有显著的差异 这说明了鸭空肠液具有较强的缓冲能力 这一特性与其他动物空肠内的 ' 比 较稳定的结论一致 也表明了鸭空肠中稳定的 ' 对其正常生理功能的发挥有着重要的作用 鸭空肠液适宜储存条件的探讨在体外条件下 储存温度及储存时间是影响肠液消化生物学活性的主要因素之一 本试验 种低温 和 保存条件下 鸭空肠液中消化酶的活性没有显著的差异 这说明 储存条件能保证鸭空肠液中消化酶活性的稳定 在储存时间 对肠液中消化酶活性的影响上 2& 等研究发现 猪小肠液在 条件下保存 后没有降低其对饲料的粗蛋白质和干物质的水解率 在主要消化酶的活性上 保存期 内并没有出现猪小肠 液酶活性显著下降的现象 本试验中 玉米 豆粕型日粮条件下鸭小肠液在 保存时间内未出现消化酶活性的显著改变 而玉米 豆粕 菜粕 棉粕型日粮条件下鸭空肠液在储存 后胰蛋白酶 淀粉酶的活性显著地高于储存 的相应值 这是否与肠液在保存过程中某些物质 如 ' 的改变有关还需作进一步研究 肠液的 ' 表示肠液中各离子盐总的解离程 度 对消化酶的活性有重要影响 本研究中储存温度和储存时间均对空肠液 ' 有显著影响 这表明储存温度和时间对鸭空肠液有某些细微的影响 这些影响是否会对肠液的消化生物学活性有显著的 影响尚需进一步研究 结 论 同一营养水平条件下 日粮中蛋白质饲料的品质对鸭空肠液中蛋白酶的活性有显著影响 而对碳水化合物酶的活性影响不大 储存条件对鸭空肠液组成的影响因日粮类型不同而有所差异 总体来看 储存温度与储存时间对鸭空肠液消化酶活性影响较小 而对 ' 影响较大 参考文献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张蔚云 张子仪 不同加工条件及不同保存条件下 84 冻干粉效价的变化! 中国农业科学院畜牧研究所科学研究年报 第 报 <*2/2'*/).&2.)./*-/'"./.

6 期 郑卫宽等 日粮类型及肠液储存条件对鸭空肠液组成与特性的影响 "/""&2*/*/. ).-"..2&2&.! 4/5.2)..2.-(/,)&*1/&" *<.*/-.*).2"&1-.)*.>.2)&/ <*2/!-)2'*/).&2.)./*-/./," "2*/.-"..2&2&.!4/5.2)..2.-(/,)&*1 /&"*<.*/-.*).2"&1-.)*.>.2)&/& /. <*1-$>")&/(&"&*/-. 1"2*).2*1"*=*&&2'&/12.&*1"*'&./* &1-*&/&",.2*/1"*/*1&"1./2.*/ (2'.!"*/*1&"!-.)*2&/7&2&2.*1*/. 陈 杰 家畜生理学 北京 中国农业出版社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