实验 样品描述 从当地超市采购一组用纸和纸板包装的食 品, 将食品从包装中取出, 切成小块, 并 充分混合 样品包括早餐谷物 意大利 面 冷冻鱼 蛋糕和其它烘焙产品 将一部分混合的样品 (5 g) 内标物 d 10 - 苯 甲酮 (100 µl,1 mg/ml) 和乙醇 (20 ml) 加 入样品瓶

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1 [ 应用纪要 ] 使用 UPLC/Q-Tof 液质仪的 MS E 功能和 MassFragment 软件对食品包装纸和纸板中的潜在迁移物进行鉴别和结构分析 Malcolm Driffield 1 Antony Lloyd 1 Emma Bradley 1 Dominic Roberts 2 1 食品与环境研究所 ( 英国约克 ) 2 沃特世公司 ( 英国曼彻斯特 ) 应用优势 MS E 数据采集模式, 可以一次进样同时得到母离子及其碎片离子数据, 从而提高化合物鉴定的可信度 此外它还具有数据溯源的功能 ChromaLynx XS 软件可以对复杂混合物中的所有组分进行快速检测 鉴定和确认 用户可以通过精确质量数信息确定化学式, 然后, 在化合物数据库中进行搜索 确认结构式 MassFragment 是一种智能型软件工具, 能够自动匹配碎片结构, 极大简化了数据处理, 并且可在无标准品的情况下进行确认 沃特世解决方案 ACQUITY UPLC 系统 ACQUITY UPLC HSS T3 色谱柱 SYNAPT G2 HDMS 系统 ChromaLynx XS 软件 MassFragment 软件关键词 简介回收纸和纸板有利于环境清洁, 还可以缓解森林资源的压力 降低废物处理量 目前, 进入回收环节的纸和纸板类型具有一定的限用管制 回收的纸和纸板最终可以用于要求较低的应用领域, 例如报纸和杂志 纸板箱和纸板盒, 以及要求较高的应用领域, 例如食品包装 近年来, 科学文献和媒体报道过一些有关回收纸和纸板用于食品包装时出现的问题 食品中检测到来自回收纸和纸板的污染物 印刷报纸和杂志的油墨中发现了矿物烃类化合物, 1-2 以及邻苯二甲酸盐, 例如目录和手册所用粘合剂中的邻苯二甲酸二异丁酯, 3 以及印刷在纸和纸板外表面的光引发剂和其它成分 4 这些类型的化学物在经过回收处理后仍会存在 本研究是一个大型研究项目中的一部分, 此研究项目将调查用于再生型食品包装的纸和纸板来源 5 实验检测了四种不同类型的纸来源 ( 纯白色打印纸 报纸和杂志 瓦楞纸板和食品包装纸 ), 并确定了潜在的污染物 配备有高分辨率质谱检测器的超高效液相色谱 (UltraPerformance LC )(UPLC /HR-MS) 是一种有效的工具, 有助于鉴定食品接触材料和其它领域中的未知化合物 6 精确质量数 同位素谱图和碎片信息 ( 如果存在 ) 可用于预测元素组成, 然后可将其与含有其潜在结构的数据库进行对比, 如果结构匹配, 鉴定结果将更加可信 所使用的仪器必须有足够的灵敏度和精确度以确保能够准确鉴定化合物 本文介绍了如何使用 ACQUITY UPLC/SYNAPT G2 HDMS 系统以及相关软件检测色谱峰 确定精确质量数并获得元素组分 实验将获得的分析结果与用户准备的含 6000 多种食品接触材料组分和污染物的数据库进行对比, 通过 MS E 获得的碎片信息, 在未使用确证标准品的情况下确定了其中一个待分析的化合物的化学结构 飞行时间质谱筛查 数据库搜索 结构表征 纸 纸板 食品包装 邻苯二甲酸酯 1

2 实验 样品描述 从当地超市采购一组用纸和纸板包装的食 品, 将食品从包装中取出, 切成小块, 并 充分混合 样品包括早餐谷物 意大利 面 冷冻鱼 蛋糕和其它烘焙产品 将一部分混合的样品 (5 g) 内标物 d 10 - 苯 甲酮 (100 µl,1 mg/ml) 和乙醇 (20 ml) 加 入样品瓶中, 盖好盖子并震摇过夜 取一 部分上清液直接进行分析 UPLC 条件 系统 : ACQUITY UPLC 色谱柱 : ACQUITY UPLC HSS T3 ( 部件号 ) mm,1.8 µm 柱温 : 45 流速 : 0.45 ml/min 进样体积 : 1 µl 流动相 A: 水 +0.1% 甲酸 流动相 B: 乙腈 + 0.1% 甲酸 梯度 : 时间 (min) %A %B MS 条件 MS 系统 : SYNAPT G2 HDMS 采集模式 : MS E 电离模式 : 电喷雾正离子 检测的质量数范围 : 50 至 1200 Da 锥孔电压 : 25 V 毛细管电压 : 1.0 kv 脱溶剂气温度 : 500 源温度 : 120 碰撞能量 : 低能量 CE = 6 ev, 高能量 CE = ev 碰撞气体 : 氩气 LockMass: 亮氨酸脑啡肽, m/z 数据管理 : ChromaLynx XS 和 MassFragment 软件 2

3 结果与讨论 混合食品包装样品的乙醇提取物的基峰离子色谱图 (BPI) 如图 1 所示 图 1. 纸和纸板食品包装乙醇提取物的基峰离子色谱图 ( 低能量电喷雾离子化正离子模式 ) ChromaLynx XS 软件可以反卷积解析色谱图, 检测出现的所有色谱组分, 并为每种确认的组分生成精确的谱图 这些操作均在 目标模式 下进行, 将生成一系列单个峰, 然后软件会将这些峰与包含潜在结构的数据库进行对比 软件提取了 1380 个组分, 比 TIC 图中目测到的要多 充分显示了该软件在极低浓度条件下检测组分的优势 ChromaLynx XS 将提取目标化合物的准确质谱图, 确定它们是否存在 3

4 用户的数据库包含食品接触材料中可能存在的 6000 多种已知成分 潜在污染物以及衍生和分解产物 列表包括化合物名称和化学式, 软件将在其中进行搜索并报告匹配结果 如果具有用标准品进行过分析, 则该化合物的保留时间和碎片离子信息也会包含在数据库中 图 2 为 ChromaLynx XS 处理数据的示例, 包括 :(A) 总离子流图 (B) 目标物列表 (C) 提取离子色谱图和 (D)13.6min 处, 峰的相关质谱图, 这是一个完整的鉴定过程示例 本样品用含 6000 种化合物的库进行筛查, 最终根据精确质量数总共鉴定出 45 种化合物 在没有分析标准品的条件下, 这些鉴定结果由其同时采集的碎片信息确认 A B C D 图 2. ChromaLynx XS 在 13.6min 处输出的质谱图, 与数据库中的对二甲氨基苯甲酸异辛酯的匹配 A) 总离子流色谱图 B) 目标物列表 C) 13.6min 处的提取离子色谱图 (m/z ) 和 D) 13.6min 处色谱峰的质谱图 ( 低能量 ) 图 3 显示 : 其母离子的质荷比为 , 化学式为 C 17 H 27 NO 2 这与数据库中的对二甲氨基苯甲酸异辛酯相匹配, 该化合物可以用作喷涂至纸和纸板底物的紫外光固化油墨中的胺助引发剂 [M+H]+ 母离子的理论精确质量数为 m/z , 与检测结果之间仅存在 0.7 ppm 的差异 在分析食品包装样品时, 并未分析对二甲氨基苯甲酸异辛酯的确证标准品进行鉴定确认 SYNAPT G2 HDMS 的运行模式为 MS E 采集模式, 可以一次进样, 同时收集该化合物的母离子及碎片离子信息, 从而提高了化合物鉴定的可信度 4

5 图 3 所示为低能量和高能量质谱图, 在较高能量下, 母离子的强度降低, 生成碎片离子 A B 图 min 处色谱峰的质谱图 A) MS E 高能量谱图 : 显示碎片离子,B) MS E 低能量谱图 : 显示分子加合物 [M+H]+ 与分子一样, 碎片离子的精确质量数也可用于确定潜在的元素组成 MassFragment 软件将利用这些潜在的元素组成, 根据建议的化合物化学结构 ( 例如对二甲氨基苯甲酸异辛酯 ) 来确认该结构 该软件使用系统化的键断裂信息和一套计分系统, 此系统以键断裂的类型和发生的可能性为基础, 信息输入程序的过程简单.mol 文件可以从 ChemSpider 商业库中下载, 也可从最常用的化学绘图包得到, 然后将其与提供碎片离子信息的 MS E 质谱图一起导入即可 5

6 根据用户的具体需要, 可以对参数进行相应更改 质量数窗口的限值范围非常重要, 使用的范 围越小, 结构匹配的可信度就越高 在本示例中, 使用的值是 +/- 1 mda 图 4 是软件针对 13.6min 处色谱峰所生成的结果, 系统建议的化合物为对二甲氨基苯甲酸异辛酯 图 4. MassFragment 输出的报告, 其中所示为五个碎片离子的建议结构, 增加了鉴定结果的可信度 所测的五个碎片离子均验证了建议的母体结构 对二甲氨基苯甲酸异辛酯中不同键断裂后 所得的离子的可能结构, 这一结果提高了 13.6min 处色谱峰鉴定的可信度 图 5 所示为标记有 MassFragment 结构的 MS E 质谱图 此化合物很可能来自纸和纸板上的油墨, 7 相似化学类型的化合 物经过回收处理后也仍会存在 现在, 碎片离子和保留时间均与此化合物匹配, 它们被反馈到 数据库中, 从而使得后面的鉴定更加可信 图 min 处色谱峰的 MS E 质谱图, 标记有 MassFragment 鉴定结果 6

7 结论本实验采用具有色谱分离 高分辨率地测定准确质量数功能的 ACQUITY UPLC/SYNAPT G2 HDMS 系统, 对食品包装纸和纸板提取物进行分析 此分析可对之前未知的 可能会迁移到食品中的化合物作出值得信赖的鉴定 使用 MS E 数据采集模式, 可以同时收集母离子和碎片离子的信息, 采集的数据经过 ChromaLynx XS 和 MassFragment 软件的处理后, 可获得具有高可信度的鉴定结果 参考文献 1. Dima G, Verzera A, Grob K. Migration of mineral oil from party plates of recycled paperboard into foods:1. Is recycled paperboard fit for the purpose?2. Adequate testing procedure.food Additives and Contaminants Part A.2011; 28(11): Vollmer A, Biedermann M, Grundbock F, Ingenhoff JE, Biedermann-Brem S, Altkofer W, Grob K. European Food Research and Technology. 2011; 232: Gartner S, Balski M, Koc h M, Nehls I. Analysis and migration of phthalates in infant food packed in recycled paperboard.journal of Agricultural and Food Chemistry. 2009; 57(22): Koivikko R, Pastorelli S, dequiros ARB, Paseiro-Cerrato R, Paseiro-Losada P, Simoneau C. Food Additives and Contaminants Part A. 2010; 27(10): Driffield M, Lloyd AS, Lister L, Leak J, Speck D, Bradley EL.Manuscript in preparation Driffield M, Bradley EL, Castle L, Coulier L. Identification of unknown migrants from food contact materials.mass Spectrometry in Food Safety, Methods and Protocols. 2011; Food Standards Agency (2011) Food Survey Information Sheet 03/11. Migration of selected ink components from printed packaging materials into foodstuffs and screening of printed packaging for the presence of mineral oils. Waters ACQUITY UPLC SYNAPT Ultra Performance LC 和 UPLC 是沃特世公司的注册商标 ChromaLynx MassFragment HDMS 和 The Science of What's Possible 是沃特世公司的商标 其他所有商标均归各自的拥有者所有 2013 年沃特世公司 印制于中国 2013 年 2 月 ZH AG-PDF 沃特斯中国有限公司沃特世科技 ( 上海 ) 有限公司 北京 : 上海 : 广州 : 成都 : 香港 : 免费售后服务热线 :800 (400)

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