Western印迹法
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- 泔 谈
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1 Western-Blot 操作流程 试剂配制 ( 一 ) 母液 1.0mol/L Tris HCl Tris (MW121.14) 30.29g 蒸馏水 200ml 溶解后, 用浓盐酸调 ph 至所需点 ( 见下所示 ), 最后用蒸馏水定容至 250ml, 高温灭菌后室 温下保存 PH HCl 7.4 约 17ml 7.5 约 16m 7.6 约 15ml 8.0 约 10ml 1.74mg/ml (10mmol/L)PMSF PMSF 0.174g 异丙醇 溶解后, 分装于 1.5ml 离心管中,-20 保存 0.2mol/L NaH2PO4 NaH2PO4(MW119.98) 12g 500ml 溶解后, 高压灭菌, 室温保存 0.2mol/LNa2HPO4 Na2HPO4 12H2O(MW ) 71.6g 溶解后, 高压灭菌, 室温保存 10%SDS SDS 10g 50 水浴下溶解, 室温保存 如在长期保存中出现沉淀, 水浴溶化后, 仍可使用 10% 过硫酸胺 (AP) 过硫酸胺 0.1g 超纯水 1.0ml 溶解后,4 保存, 保存时间为 1 周 ( 可先将过硫酸胺干粉称好分量后放在 EP 管中, 一次性多装几管, 使用时加入超纯水即可 ) 1.5mol/L Tris HCl(pH8.8) Tris (MW121.14) 45.43g 超纯水 200ml 溶解后, 用浓盐酸调 ph 至 8.8, 最后用超纯水定容至 250ml, 室温下保存 0.5mol/L Tris HCl(pH6.8) Tris (MW121.14) 15.14g 超纯水 200ml 溶解后, 用浓盐酸调 ph 至 6.8, 最后用超纯水定容至 250ml, 室温下保存
2 40%Acr/Bic(37.5:1) 丙稀酰胺 (Acr) 37.5g 甲叉双丙稀酰胺 (Bic) 1g 超纯水至 溶解后 4 保存 使用时恢复至室温且无沉淀 20%Tween20 Tween20 20ml 混匀后 4 保存 ( 二 ) 使用液单去污剂裂解液 (PMSF): 1mol/L Tris HCl(pH8.0) 2.5ml NaCl 0.438g TritonX ml 50ml 混匀后 4 保存 使用时, 加入 PMSF 至终浓度为 100μg/ml(0.87ml 裂解液加入 1.74mg/ml PMSF50μl) ( 一般实际用的比较多的其实是 RIPA 裂解配方 :50 mm Tris-HCl ph mm NaCl 1 mm PMSF 1 mm EDTA 1% Triton x-100 1% 脱氧胆酸钠 0.1% SDS 至于其中每个要加多少量那就自己去算吧, 因为本人已经算好的配方表无意间弄丢了 ) 0.01mol/L PBS( ph ) 0.2 mol/l NaH2PO4 19ml 0.2 mol/l Na2HPO4 81ml NaCl 17g 2000ml ( 如果用 TBST 进行洗膜的话, 其实 PBS 用得很少, 大可不必自己配制, 向试剂公司购买 20 的 PBS 浓缩液即可,500ml 的浓缩液不到 50 元, 很方便 ) G250 考马斯亮蓝溶液 ( 蛋白定量专用 ) 考马斯亮蓝 G mg 95% 乙醇 50ml 磷酸 配制时, 先用乙醇溶解考马斯亮蓝染料, 再加入磷酸和水, 混匀后, 用滤纸过滤,4 保存 0.15 mol/l NaCl NaCl(MW58.44) 0.877g 100 ml 高温灭菌后, 室温保存 100mg/ml 牛血清白蛋白 (BSA) BSA 0.1g 0.15 mol/l NaCl 1ml 溶解后 -20 保存 制作蛋白标准曲线时, 用 0.15 mol/l NaCl 进行 100 倍稀释成 1mg/ml, -20 保存
3 10% 分离胶和 4% 浓缩校 10% 分离胶 ( 两块胶,10ml) 4% 浓缩胶 ( 两块胶,5ml) 超纯水 4.85ml 3.16ml 40%Acr/Bic(37.5:1) 2.5ml 0.5ml 1.5 mol/l Tris HCl(pH8.8) 2.5ml mol/l Tris HCl(pH6.8) ml 10%SDS 100 μl 50 μl 10%AP( 过硫酸胺 ) 50 μl 25 μl TEMED 5 μl 5 μl 加 TEMED 后, 立即混匀即可灌胶 ( 为了加快凝胶, 可以将过硫酸胺和 TEMED 量加大, 一般加至原来的 2-3 倍, 根据实验当时 的温度适当调整 ) 还原型 5XSDS 上样缓冲液 0.5 mol/l Tris HCl(pH6.8) 2.5ml 二硫叔糖醇 (DTT,MW154.5) 0.39g SDS 0.5g 溴酚蓝 甘油 2.5ml 混匀后, 分装于 1.5ml 离心管中,4 保存 电泳液缓冲液 Tris(MW121.14) 3.03g 甘氨酸 (MW75.07) 18.77g SDS 1g 溶解后室温保存, 次溶液可重复使用 3~5 次 ( 电泳液可以回收重复利用, 一般将回收的电泳液加入垂直电泳槽的下半部分, 上半部分最 好使用新鲜的电泳缓冲液 ) ( 可以配制成 10 电泳液缓冲液进行保存, 稀释 10 倍使用 ) 转移缓冲液 甘氨酸 (MW75.07) 2.9g Tris(MW121.14) 5.8g SDS 0.37g 甲醇 200ml 溶解后室温保存, 次溶液可重复使用 3~5 次 ( 次溶液最好保存在 4 度冰箱, 最多使用 5 次 左右, 不然影响转移效率 ) ( 先用蒸馏水溶解甘氨酸 Tris 和 SDS, 然后再加入甲醇, 最后补足液体 如果先加入甲醇, 溶解甘氨酸 Tris 和 SDS 等比较困难 ) ( 可以配制成 2 转移缓冲液进行保存, 稀释后使用 ) 10X 丽春红染液 丽春红 S 2g 三氯乙酸 30g 磺基水杨酸 30g
4 使用时将其稀释 10 倍 TBS 缓冲液 1 mol/l Tris HCl(pH7.5) 10ml NaCl 8.8g ( 可以配制成 10 TBS 缓冲液进行保存, 稀释 10 倍使用 ) TBST 缓冲液 20%Tween ml TBS 700ml 混匀后即可使用, 最好现用现配 封闭液 脱脂奶粉 ( 国产, 光明牌 ) 5g TBST 最好现用现配 洗脱抗体缓冲液 14.4 mol/l 2- Mercaptoethanol(β- 巯基乙醇 ) 700 μl( 通风厨里加 ) SDS 2g 0.5mol/L Tris HCl(pH6.8) 12.5ml 超纯水至 配制时, 在通风厨内进行 4 保存 可重复使用 1 次 ( 可用可不用 ) 显影液 (5X) 自来水 ( 加热至 50 ) 375ml ( 以下药品加到温水中 ) 米吐尔 1.55g 亚硫酸钠 ( 无水 ) 22.5g 碳酸钠 ( 无水 ) 33.75g 溴化钾 20.95g 补水至 500ml 配制时, 上述药品应逐一加入, 待一种试剂溶解后, 再加入后一种试剂 4 保存 使用时 用自来水稀释至 1 倍 ( 不需要自己配制, 有钱的直接买柯达的显影液, 上千 ; 没钱的到专业的照相器材市场购买 即可, 很便宜, 一包 5 毛钱左右 ) 定影液 自来水 (50~60 ) 700ml ( 以下药品按顺序加入前者溶解后再加后者 ) 硫代硫酸钠 240g 亚硫酸钠 ( 无水 ) 15g 冰乙酸 12.6ml 硼酸 7.5g 钾明矾 15g( 水温冷至 30 以下时再加入 ) 加水定容至, 室温保存 ( 不需要自己配制, 有钱的直接买柯达的定影液, 上千 ; 没钱的到专业的照相器材市场购买 即可, 很便宜, 一包 5 毛钱左右 ) 抗体用 TBST 稀释至一定浓度使用, 建议使用杂交袋 ( 小商品市场购买, 很便宜, 可以多
5 买一点, 但是务必注意质量, 千万不能漏, 不然抗体就浪费了, 在使用之前先检查一下杂交袋的完整性 ) 化学发光试剂分 A 和 B 两种试剂, 有钱可以购买 Amersham Pierce 或者 Santa Cruz 的, 没钱的话碧云天的 ECL 也能凑合 操作步骤 ( 一 ) 蛋白样品制备 (1) 单层贴壁细胞总蛋白的提取 : 1 倒掉培养液, 并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液 ( 或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走 ) 2 每瓶细胞加 3ml 4 预冷的 PBS(0.01M ph7.2~7.3) 平放轻轻摇动 1min 洗涤细胞, 然后弃去洗液 重复以上操作两次, 共洗细胞三次以洗去培养液 将 PBS 弃净后把培养瓶置于冰上 3 按 1ml 裂解液加 10 μl PMSF(100mM), 摇匀置于冰上 (PMSF 要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合 ) 4 每瓶细胞加 400 μl 含 PMSF 的裂解液, 于冰上裂解 30min, 为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动 5 裂解完后, 用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧 ( 动作要快 ), 然后用枪将细胞碎片和裂解液移至 1.5ml 离心管中 ( 整个操作尽量在冰上进行 ) 6 于 4 下 12000rpm 离心 5min ( 提前开离心机预冷 ) 7 将离心后的上清分装转移倒 0.5min 的离心管中放于 -20 保存 ( 个人感觉上述方法可操作性有待加强, 细胞中蛋白本来就很少, 一瓶 50ml 的细胞有时按照实验要求只能加 μl 的裂解液, 按照上述操作, 直接用 200μl 裂解液进行裂解, 根本就不够瓶壁上沾的 本人是先用预冷的 PBS( 一般数毫升 ) 加入后, 用细胞刮刮下细胞, 转移至试管中, 如果数瓶细胞是收集同一蛋白的, 可以放在同一试管, 离心后再将蛋白转移到 EP 管中, 这样可操作性就比较强 ) (2) 组织中总蛋白的提取 : 1 将少量组织块置于 1~2ml 匀浆器中球状部位, 用干净的剪刀将组织块尽量剪碎 2 加 400 μl 单去污剂裂解液裂 ( 含 PMSF) 于匀浆器中进行匀浆 然后置于冰上 3 几分钟后再碾一会儿再置于冰上, 要重复碾几次使组织尽量碾碎 4 裂解 30 min 后, 即可用移液器将裂解液移至 1.5ml 离心管中, 然后在 4 下 12000rpm 离心 5min, 取上清分装于 0.5ml 离心管中并置于 -20 保存 (3) 加药物处理的贴壁细胞总蛋白的提取 : 由于受药物的影响, 一些细胞脱落下来, 所以除按 ( 一 ) 操作外还应收集培养液中的细胞 以下是培养液中细胞总蛋白的提取 : 1 将培养液倒至 15ml 离心管中, 于 2500rpm 离心 5min 2 弃上清, 加入 4ml PBS 并用枪轻轻吹打洗涤, 然后 2500rpm 离心 5min 弃上清后用 PBS 重复洗涤一次 3 用枪洗干上清后, 加 100 μl 裂解液 ( 含 PMSF) 冰上裂解 30min, 裂解过程中要经常弹一弹以使细胞充分裂解
6 4 将裂解液与培养瓶中裂解液混在一起 rpm 离心 5min, 取上清分装于 0.5ml 离心管中并置于 -20 保存 ( 二 ) 蛋白含量的测定 (1) 制作标准曲线 1 从 -20 取出 1mg/ml BSA, 室温融化后, 备用 2 取 18 个 1.5ml 离心管,3 个一组, 分别标记为 0μg,2.5μg,5.0μg,10.0μg, 20.0μg,40.0μg 3 按下表在各管中加入各种试剂 0μg 2.5μg 5.0μg 10.0μg 20.0μg 40.0μg 1mg/ml BSA - 2.5μl 5.0μl 10.0μl 20.0μl 40.0μl 0.15mol/L NaCl 100μl 97.5μl 95.0μl 90.0μl 80.0μl 60.0μl G250 考马斯亮蓝溶液 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 4 混匀后, 室温放置 2min 在生物分光光度计上比色分析 (2) 检测样品蛋白含量 1 取足量的 1.5ml 离心管, 每管加入 4 储存的考马斯亮蓝溶液 1ml 室温放置 30min 后即可用于测蛋白 2 取一管考马斯亮蓝加 0.15mol/L NaCl 溶液 100 μl, 混匀放置 2 分钟可做为空白样品, 将空白倒入比色杯中在做好标准曲线的程序下按 blank 测空白样品 3 弃空白样品, 用无水乙醇清洗比色杯 2 次 ( 每次 0.5ml), 再用无菌水洗一次 4 取一管考马斯亮蓝加 95 μl 0.15mol/L NaCl NaCl 溶液和 5μl 待测蛋白样品, 混匀后静置 2min, 倒入扣干的比色杯中按 sample 键测样品 注意 : 每测一个样品都要将比色杯用无水乙醇洗 2 次, 无菌水洗一次 可同时混合好多个样品再一起测, 这样对测定大量的蛋白样品可节省很多时间 测得的结果是 5 μl 样品含的蛋白量 ( 上述方法只是一家之言, 可以自我变通, 本人就不是按照上述方法进行的 ) ( 三 ) SDS-PAGE 电泳 (1) 清洗玻璃板 : 一只手扣紧玻璃板, 另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗 两面都擦洗过后用自来水冲, 再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干 (2) 灌胶与上样 1 玻璃板对齐后放入夹中卡紧 然后垂直卡在架子上准备灌胶 ( 可以用 1% 琼脂糖在垂直电泳槽的左 右和下部封边, 五分钟后重复一次, 这样可以保证基本不漏胶 ) 2 按前面方法配 10% 分离胶, 加入 TEMED 后立即摇匀即可灌胶 灌胶时, 可用 10ml 枪吸取 5ml 胶沿玻璃放出, 待胶面升到绿带中间线高度时即可 然后胶上加一层水, 液封后的胶凝的更快 ( 灌胶时开始可快一些, 胶面快到所需高度时要放慢速度 操作时胶一定要沿玻璃板流下, 这样胶中才不会有气泡 加水液封时要慢, 否则胶会被冲变型 ) 3 当水和胶之间有一条折射线时, 说明胶已凝了 再等 3min 使胶充分凝固就可倒去胶上层水并用吸水纸将水吸干 4 按前面方法配 4% 的浓缩胶, 加入 TEMED 后立即摇匀即可灌胶 将剩余空间灌满浓缩胶然后将梳子插入浓缩胶中 灌胶时也要使胶沿玻璃板流下以免胶中有气泡产生 插梳子时要使梳子保持水平 由于胶凝固时体积会收缩
7 减小, 从而使加样孔的上样体积减小, 所以在浓缩胶凝固的过程中要经常在两边补胶 ( 其实说经常有点过了, 补 1-2 次就行了, 不补胶问题也不大 ) 待到浓缩胶凝固后, 两手分别捏住梳子的两边竖直向上轻轻将其拔出 5 用水冲洗一下浓缩胶, 将其放入电泳槽中 ( 冲洗的话个人感觉可以使用 5ml 的针筒, 当然操作不能太粗暴了 ) 6 测完蛋白含量后, 计算含 20-50μg 蛋白 ( 根据自己的实验需要进行选择, 没有固定的量 ) 的溶液体积即为上样量 取出上样样品至 200μl 的 EP 管中, 加入 5 SDS 上样缓冲液至终浓度为 1 ( 上样总体积一般不超过 15μl, 加样孔的最大限度可加 20μl 样品 )( 其实大一点的垂直电泳槽每孔最大上样量可以达到 40μl, 胶做得很好的话 50μl 也是问题不大的 ) 上样前要将样品于沸水中煮 5-10min 使蛋白变性 ( 本人心得 : 可以使用 PCR 仪进行变性, 加快速度, 这样就不用将水煮沸了, 同时在水中煮蛋白样品有下面弊端 :1.EP 管容易炸开, 样品丢失 2. 容易进水, 使样品体积增加, 超过电泳最大上样量 ) 7 加足够的电泳液后开始准备上样 ( 电泳液至少要漫过内测的小玻璃板 ) 用微量进样器贴壁吸取样品, 将样品吸出不要吸进气泡 将加样器针头插至加样孔中缓慢加入样品 ( 加样太快可使样品冲出加样孔, 若有气泡也可能使样品溢出 加入下一个样品时, 进样器需在外槽电泳缓冲液中洗涤数次, 以免交叉污染 ) (3) 电泳 : 电泳时间一般 4~5 h, 电压为 40V 较好, 也可用 60V ( 本人为了加快速度, 浓缩胶时用 V 跑, 到分离胶以后用 跑, 结果也不错, 总时间 2h 左右 ) 电泳至溴酚兰刚跑出即可终止电泳, 进行转膜 ( 如果目的条带比较大的话, 最好使用可视的蛋白 marker,fermentas 的 0441 和 0671 比较好, 就是有点贵 一般要让目的条带跑过分离胶的 1/3 比较好, 不要局限于此说明 ) ( 四 ) 转膜 (1) 转一张膜需准备 6 张 7.0~8.3cm 的滤纸和 1 张 7.3~8.6cm 的硝酸纤维素膜 切滤纸和膜时一定要戴手套, 因为手上的蛋白会污染膜 将切好的硝酸纤维素膜置于水上浸 2 h 才可使用 ( 用镊子捏住膜的一边轻轻置于有超纯水的平皿里, 要使膜浮于水上, 只有下层才与水接触 这样由于毛细管作用可使整个膜浸湿 若膜沉入水里, 膜与水之间形成一层空气膜, 这样会阻止膜吸水 )( 个人感觉其实转膜之前浸湿一下就 ok 了, 没有多大问题, 可能按照上述操作结果会更好 ) (2) 在加有转移液的搪瓷盘里放入转膜用的夹子 两块海绵垫 一支玻棒 滤纸和浸过的膜 (3) 将夹子打开使黑的一面保持水平 在上面垫一张海绵垫, 用玻棒来回擀几遍以擀走里面的气泡 ( 一手擀另一手要压住垫子使其不能随便移动 ) 在垫子上垫三层滤纸 ( 可三张纸先叠在一起在垫于垫子上, 注 : 个人感觉就垫 1 张滤纸也没问题呀 ), 一手固定滤纸一手用玻棒擀去其中的气泡 (4) 要先将玻璃板撬掉才可剥胶, 撬的时候动作要轻, 要在两个边上轻轻的反复撬 ( 应该边撬边用流水缓缓冲洗 ) 撬一会儿玻璃板便开始松动, 直到撬去玻板 ( 撬时一定要小心, 胶很易裂, 要用巧劲 ) 除去小玻璃板后, 将浓缩胶轻轻刮去 ( 浓缩胶影响操作 ), 要避免把分离胶刮破 小心剥下分离胶盖于滤纸上, 用手调整使其与滤纸对齐, 轻轻用玻棒擀去气泡 将膜盖于胶上, 要盖满整个胶 ( 膜盖下后不可再移动 ) 并除气泡 在膜上盖 3 张滤纸并除去气泡 最后盖上
8 另一个海绵垫, 擀几下就可合起夹子 整个操作在转移液中进行, 要不断的擀去气泡 膜两边的滤纸不能相互接触, 接触后会发生短路 ( 转移液含甲醇, 操作时要戴手套, 实验室要开门以使空气流通 )( 最后做成的 三明治 千万不能形成短路, 不然有可能会短路烧坏转膜装置 ( 价格不菲, 尤其是进口的 ), 第一次做的应请老手指教 ) (5) 将夹子放入转移槽槽中, 要使夹的黑面对槽的黑面, 夹的白面对槽的红面 电转移时会产热, 在槽的一边放一块冰来降温 一般用 60V 转移 2 h 或 40V 转移 3 h (1. 实际上应该根据蛋白分子量的大小确定转膜时间, 对于小分子量的蛋白, 转膜时最好垫两块硝纤膜, 以免转膜过头, 因为如果第一张膜上蛋白质已经转过了, 第二张膜上还有蛋白质可以进行检测 ; 对于大分子量的蛋白, 转膜时电压要高一点, 一般 V, 时间也要延长一点, 开始最好也用两块膜, 特别是务必注意加强降温措施 当然转膜是要摸条件的, 最好刚开始做的时候摸个转膜的时间梯度 如果由于时间原因来不及做下面实验, 可以在 4 度下 12V 转膜过夜 )(2. 硝纤膜建议使用 0.22μm 的小孔径膜, 不容易转膜过头 )(3. 不同的转膜装置, 转移效率是不一样的, 所以换用转膜装置, 最好再摸个条件 )(4. 转膜时电极方向注意是膜正胶负 ) (6) 转完后将膜用 1 丽春红染液染 5min( 于脱色摇床上摇 ) 然后用水冲洗掉没染上的染液就可看到膜上的蛋白 将膜晾干备用 ( 一般不需要做这步 ) ( 五 ) 免疫反应 ( 个人建议 : 还是使用杂交袋进行一抗和二抗的孵育, 节约抗体 ) (1) 将膜用 TBS 从下向上浸湿后, 移至含有封闭液的平皿中, 室温下脱色摇床上摇动封闭 1h (2) 将一抗用 TBST 稀释至适当浓度 ( 在 1.5ml 离心管中 ); 撕下适当大小的一块儿保鲜膜铺于实验台面上, 四角用水浸湿以使保鲜膜保持平整 ; 将抗体溶液加到保鲜膜上 ; 从封闭液中取出膜, 用滤纸吸去残留液后, 将膜蛋白面朝下放于抗体液面上, 掀动膜四角以赶出残留气泡 ; 室温下孵育 1~2h 后, 用 TBST 在室温下脱色摇床上洗两次, 每次 10min; 再用 TBS 洗一次,10min (3) 同上方法准备二抗稀释液并与膜接触, 室温下孵育 1~2h 后, 用 TBST 在室温下脱色摇床上洗两次, 每次 10min; 再用 TBS 洗一次,10min, 进行化学发光反应 ( 六 ) 化学发光, 显影, 定影 (1) 将 A 和 B 两种试剂在保鲜膜上等体积混合 ;1min 后, 将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触 ;1min 后, 将膜移至另一保鲜膜上, 去尽残液, 包好, 放入 X- 光片夹中 (2) 在暗室中, 将 1 显影液和定影液分别到入塑料盘中 ; 在红灯下取出 X- 光片, 用切纸刀剪裁适当大小 ( 比膜的长和宽均需大 1cm); 打开 X- 光片夹, 把 X- 光片放在膜上, 一旦放上, 便不能移动, 关上 X- 光片夹, 开始计时 ; 根据信号的强弱适当调整曝光时间, 一般为 1min 或 5min, 也可选择不同时间多次压片, 以达最佳效果 ; 曝光完成后, 打开 X- 光片夹, 取出 X- 光片, 迅速浸入显影液中显影, 待出现明显条带后, 即刻终止显影 显影时间一般为 1~2min(20~25 ), 温度过低时 ( 低于 16 ) 需适当延长显影时间 ; 显影结束后, 马上把 X- 光片浸入定影液中, 定影时间一般为 5~10min, 以胶片透明为止 ; 用自来水冲去残留的定影液后, 室温下晾干 ( 如果使用柯达的显影定影液, 时间很快的, 显影结束后最好先用事先准备好的自来水洗一下片子, 然后再放到定影液中进
9 行定影, 这样可以延长定影液使用时间, 从而节约定影液 ) 应注意的是 : 显影和定影需移动胶片时, 尽量拿胶片一角, 手指甲不要划伤胶片, 否则会对结果产生影响 ( 七 ) 凝胶图象分析 : 将胶片进行扫描或拍照, 用凝胶图象处理系统分析目标带的分子量和净光密度值
鉴定抗体流程.doc
Western blot 标准操作流程 试剂的配制 ( 一 ) 母液 1.0mol/L Tris HCl 1000 ml 体积 Tris (MW121.14) 121.1g 蒸馏水 800ml 溶解后, 用浓盐酸调 ph 至所需点 ( 见下所示 ), 最后用蒸馏水定容至 1000ml, 高温灭菌后 室温下保存 PH HCl 7.4 约 70ml 7.6 约 60ml 8.0 约 42ml 250ml
Western Blot 实验报告 项目名称 : 人皮肤成纤维细胞 sirna 瞬转 WB 验证 客户姓名 : 石小玉 报告时间 : 2013 年 08 月 26 日 报告人 : 蒋楠 复核人 : 如您对本报告有异议, 请于 10 个工作日内联系我们 杭州赫贝科技有限公司技术部
Western Blot 实验报告 项目名称 : 人皮肤成纤维细胞 sirna 瞬转 WB 验证 客户姓名 : 石小玉 报告时间 : 2013 年 08 月 26 日 报告人 : 蒋楠 复核人 : 如您对本报告有异议, 请于 10 个工作日内联系我们 1. 实验材料人皮肤成纤维细胞 CCC-ESF-1: 中国医学科学院基础医学研究所基础医学细胞中心 DMEM-H 培养基,Lipofectamine
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin( 氨卡青霉素 )(100 mg/ml) 100 mg/ml Ampicillin 50 ml 配制方法 1. 称量 Ampicillin 置于 50 ml 离心管中 ; 2. 加入 40 ml 灭菌水, 充分混合溶解后, 定容至 50 ml; 3. 用 0.22 µm 过滤膜过滤除菌 ; 4. 小份分装 (1 ml/ 份 ) 后,-20 保存 IPTG(
11. SDS 12. 过硫酸胺 (AP) 13. Tris base (FW:121.14) 14. 浓盐酸 15. TEMED (N,N,N N 四甲基乙二胺 ) 注 :TEMED 催化过硫酸铵形成自由基而加速两种丙稀酰胺的聚合 ph 太低时, 聚合反应受到抑制 16. Tris-HCl 17.
Western Blot 宗伟, 程赛凤, 马斯琦, 熊立仲 * 作物遗传改良国家重点实验室, 华中农业大学, 武汉 * 通讯作者邮箱 :lizhongx@mail.hzau.edu.cn 引用格式 : 宗伟, 程赛凤, 马斯琦, 熊立仲. (2018). Western Blot. Bio-101 e1010130. Doi: 10.21769/BioProtoc.1010130. How to
蛋白印迹技术(Western blotting)
Western Blotting 全攻略 蛋白免疫印迹 (Western blotting 或 Immunoblotting) 一般由凝胶电泳 样品的印迹和 免疫学检测三个部分组成 第一步是做 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳, 使待测样品中的蛋白质 按分子量大小在凝胶中分成带 第二步把凝胶中已分成条带的蛋白质转移到一种固相支持物 上, 用得最多的材料是硝酸纤维素膜 (NC 膜 ) 和 PVDF 膜, 蛋白转移的方法多用电泳转移
Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : Buffer 标准 1 标准 2 样品 试剂 ( 荧光染色 ) 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng
Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng/μl 100 ng/μl 待测 200 测定时要求浓度 未知 0 ng/μl 5000ng/ml 0~5000 ng/ml 1 备注 -Buffer:Qubit dsdna
兽医临床诊断学实验指导
兽 医 临 床 诊 断 学 实 验 指 导 河 北 科 技 师 范 学 院 动 物 科 学 系 临 床 兽 医 学 实 验 室 2009 年 2 月 目 录 学 生 实 验 守 则... 3 实 习 一 动 物 的 接 近 保 定 和 基 本 检 查 法...4 实 习 二 临 床 基 本 检 查 法 及 一 般 检 查...10 实 习 三 循 环 系 统 的 临 床 检 查...15 实 习 四
细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 40 94 88 82 77 72 67 62 57 53 48 44 40 37 33 29 26 23 20 17 14 11 8 39 94 88 82 77 71 66 61 57 52 48 44 40 36 32 28 25 22 18 15 12 9 7 38 94 88
校园之星
x x x x x x C H N O V x B x x x x S S x mm cm cm cm cm x x x x x x x x A A B X B B ml x x B
分子生物学中使用的缓冲液和贮存液的配制 ph 缓冲液 酶贮存液 酶稀释缓冲液 酶反应缓冲液 杂交缓冲液 预杂交和杂交
ph 缓冲液 酶贮存液 酶稀释缓冲液 酶反应缓冲液 杂交缓冲液 预杂交和杂交溶液 抽提 / 裂解缓冲液和溶液 电泳和凝胶加样缓冲液 特殊的电泳缓冲液 凝胶加样缓冲液 ph 缓冲液 磷酸缓冲盐溶液 (PBS) 137 mol/l NaCl 2.7 mmol/l KCl 10 mmol/l Na 2 HPO 4 2 mmol/l KH 2 PO 4 用 800 ml 蒸馏水溶解 8 g NaCl, 0.2
Western blotting 实验详细步骤 : 一 蛋白样品的制备 ( 蛋白抽提 ) 1. 培养细胞蛋白样品的制备 (1) 细胞培养至 80% 左右密度时, 以含 0.05% 胰蛋白酶 (AR1007) 消化经细胞刮处理, 细胞经预冷的 PBS(AR0030) 漂洗两次,3000 g/min 离
WB 实验流程 培养细胞总蛋白提取试剂 \ 哺乳动物组织总蛋白提取试剂 蛋白抽提 细菌总蛋白提取试剂 细胞胞浆和胞核蛋白提取试剂 细胞真核膜蛋白提取试剂盒细胞线粒体提取试剂盒红细胞裂解液快速沉淀和浓缩蛋白试剂盒 蛋白定量 BCA 蛋白定量试剂盒微量 BCA 蛋白定量试剂盒考马斯亮蓝增强型蛋白定量试剂盒 蛋白酶抑制剂 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液 上样 电泳 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 SDS-PAGE
9. 条 件 的 摸 索 10. 方 法 的 介 绍 11. 结 果 分 析 一 原 理 1975 年,Southern 建 立 了 将 DNA 转 移 到 硝 酸 纤 维 素 膜 (NC 膜 ) 上, 并 利 用 DNA-RNA 杂 交 检 测 特 定 的 DNA 片 段 的 方 法, 称 为 S
Western Blot 详 解 ( 原 理 分 类 试 剂 步 骤 及 问 题 解 答 ) Western 免 疫 印 迹 (Western Blot) 是 将 蛋 白 质 转 移 到 膜 上, 然 后 利 用 抗 体 进 行 检 测 对 已 知 表 达 蛋 白, 可 用 相 应 抗 体 作 为 一 抗 进 行 检 测, 对 新 基 因 的 表 达 产 物, 可 通 过 融 合 部 分 的 抗 体
SurePAGE TM 10 8 预制胶 版本 : Ⅰ 简介 1 Ⅱ 凝胶选择指导 2 Ⅲ 兼容的电泳槽 3 Ⅳ 预制胶使用简介 4 Ⅴ 凝胶染色 10 Ⅵ Western Blot 操作步骤.. 11 Ⅶ Dot Blot 操作步骤 12 Ⅷ 凝胶实例 13 Ⅸ 问题分析及解决方
SurePAGE TM 10 8 预制胶 版本 : 06272017 Ⅰ 简介 1 Ⅱ 凝胶选择指导 2 Ⅲ 兼容的电泳槽 3 Ⅳ 预制胶使用简介 4 Ⅴ 凝胶染色 10 Ⅵ Western Blot 操作步骤.. 11 Ⅶ Dot Blot 操作步骤 12 Ⅷ 凝胶实例 13 Ⅸ 问题分析及解决方法 14 X 相关产品和订购信息 15 I. 简介金斯瑞 SurePAGE 预制胶是 Express
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SurePAGE TM 10 8 预制胶 版本 : 02018 Ⅰ 简介 1 Ⅱ 凝胶选择指导 2 Ⅲ 兼容的电泳槽 4 Ⅳ 预制胶使用简介 4 Ⅴ 凝胶染色 9 Ⅵ Western Blot 操作步骤.. 10 Ⅶ Dot Blot 操作步骤 11 Ⅷ 凝胶实例 12 Ⅸ 问题分析及解决方法 13 X 相关产品和订购信息 14 I. 简介金斯瑞 SurePAGE 预制胶是 Express Plus
生物技术通报 材料 方法
生物技术通报 高曰文 朱耀明 王艳林 朱晨宇 秦烨 胡汉卿 韩钰 旨在探讨盐酸普鲁卡因 对人结肠癌 细胞 基因甲基化及表达的影响 应用巢式双重 甲基化特异性聚合酶链反应 检测盐酸普鲁卡因处理前后 细胞中 基因启动子的甲基 化水平 逆转录 聚合酶链反应 和蛋白印迹技术观察 细胞内 基因表达情况 检测发现人结肠癌 细胞中 基因存在甲基化 经盐酸普鲁卡因处理能够使 基因甲基化水平下降 和蛋白印迹分析结果显
(Microsoft Word - \254\354\256i\(1\).doc)
神 奇 的 滅 孑 師 太 ~~ 探 討 日 常 生 活 常 用 水 溶 液 及 植 物 對 於 消 滅 孑 孓 之 成 效 壹 研 究 動 機 春 眠 不 覺 曉, 處 處 蚊 子 咬, 夜 來 巴 掌 聲, 蚊 子 死 多 少? 夏 天 即 將 到 來, 蚊 子 的 惡 夢 一 直 困 擾 著 我 們 了, 班 上 同 學 舉 起 手 腳 指 著 一 個 一 個 紅 豆 冰 咒 念, 真 是 令
甲醇 ml 0.02 ml 蒸馏水 ml 0.64 ml
Phosbind 丙烯酰胺实验步骤 第一部分 Mn2+-Phosbind SDS-PAGE 1 Phosbind SDS-PAGE 试剂的准备 丙烯酰胺溶液 Sol. A 30 w/v 丙烯酰胺溶液 30 T 3.3 C 丙烯酰胺-----------------------------------------------------------------29.0 g N N'-亚甲基双丙烯酰胺----------------------------------------------1.0
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乳酸脱氢酶 (LDH) 测试盒 Cat numberkgt02424/kgt02448 Store at -20 for 3 months For Research Use Only( 科研专用 ) 说明书修订日期 2015.07.13 一. 测定原理乳酸脱氢酶 (Lactate dehydrogenase LDH) 能催化乳酸生成丙酮酸, 丙酮酸与 2,4- 二硝基苯肼反应生成丙酮酸二硝基苯腙,
实验一 氨基酸的分离鉴定—纸层析法
生 物 化 学 实 验 讲 义 内 蒙 古 科 技 大 学 生 物 与 化 学 工 程 学 院 基 础 生 物 教 学 部 2010 年 1 月 目 录 实 验 一 氨 基 酸 的 分 离 鉴 定 纸 层 析 法 2 实 验 二 琼 脂 糖 电 泳 法 分 离 DNA...3 实 验 三 乳 中 酪 蛋 白 的 分 离.5 实 验 四 3,5 二 硝 基 水 杨 酸 法 测 定 还 原 糖.6 实
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模 块 三 饲 料 及 其 加 工 利 用 模 块 目 标 了 解 饲 料 的 有 关 概 念 及 国 际 饲 料 分 类 中 八 大 类 饲 料 的 分 类 标 准 ; 掌 握 青 饲 料 粗 饲 料 青 贮 饲 料 能 量 饲 料 蛋 白 质 饲 料 矿 物 质 饲 料 饲 料 添 加 剂 的 营 养 特 性 和 利 用 特 点 ; 掌 握 各 类 饲 料 中 常 用 饲 料 原 料 的 种 类
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TAS - 990 TAS -990 TAS -990 TAS -990 ＷＷＷ ＰＧＥＮＥＲＡＬ ＣＯＭ 优异的可扩展性 使您轻松应对多种分析需求 ＡＳＣ ９００ 原子吸收 火焰自动进样器 ＴＡＳ ９９０ 系列原子吸收分光光度计火 焰法检测专用自动进样附件主要功 能 自动清洗 校零 自动进样 ６０个样 品杯 ８ 个标样杯 ＡＳＣ ９００ 石墨炉 自动控温 自动进样器 冷却循环水装置 ＴＡＳ ９９０系列原子吸收分光光度计石
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附 表 一 : 统 一 定 价 药 品 表 金 额 : 元 定 价 目 1 293 追 风 透 骨 片 48 片 追 风 透 骨 片 24 片 追 风 透 骨 片 24 片 ( 薄 膜 追 风 透 骨 片 48 片 ( 薄 膜 ( 瓶 ) 30.0 * ( 瓶 ) 15.4 ( 瓶 ) 16.9 ( 瓶 ) 33.0 追 风 透 骨 丸 水 蜜 丸 6g 袋 1.8 * 追 风 透 骨 丸 水 蜜
Microsoft PowerPoint - 第4章 营养调查.ppt
第 四 章 营 养 调 查 一 概 述 ( 一 ) 定 义 营 养 调 查 (Nutritional survey): 运 用 科 学 手 段 来 了 解 某 一 人 群 或 个 体 的 膳 食 和 营 养 水 平, 以 此 判 断 其 膳 食 结 构 是 否 合 理 和 营 养 状 况 是 否 良 好 ( 二 ) 营 养 调 查 的 目 的 了 解 不 同 地 区 不 同 年 龄 组 人 群 的
细胞凋亡检测 doc
[ - 1 - ] cell apoptosis detection BMS306FI rh Annexin V FITC KIT 300 test 5000 ANNEXIN V rh Annexin V FITC KIT 200 test 4880 BMS306FI/100T rh Annexin V FITC KIT 100 test 2850 BMS306FI/c rh Annexin V FITC
实验指导编写模板
顾 勇 编 著 2008 年 3 月 目 录 前 言 2 动 物 生 物 学 实 验 守 则 3 实 验 一 : 动 物 的 细 胞 和 组 织 及 多 细 胞 动 物 的 胚 胎 发 育 5 实 验 二 : 原 生 动 物 系 列 实 验 9 实 验 三 : 蛔 虫 和 环 毛 蚓 的 比 较 解 剖 13 实 验 四 :( 或 日 本 沼 虾 ) 和 棉 蝗 的 比 较 解 剖 与 观 察 18
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, 90, 6000 t, 1333 ha,, 500 600 t,, 131.3 ha,,,,,,,,,, ,, 9 10, 11 12, 3 4,,,,, 0.067ha 500 1000kg,, 0.067ha 2000 3000kg, 4000 5000kg,,,,,,,,,,,,,,,, ,, ( ),,,,, : 1.,,,,,,,,,,,,, 2., 11, 23 31 , 7, 37,,,
GB 15973—1995麻风病诊断标准及处理原则
炭 疽 诊 断 标 准 及 处 理 原 则 前 言 GB 17015 1997 炭 疽 (Anthrax) 是 由 炭 疽 芽 孢 杆 菌 (Bacillus anthracis) 引 起 的 一 种 人 与 动 物 共 患 传 染 病, 主 要 存 在 于 食 草 动 物 和 牲 畜 群 落 之 中, 并 能 造 成 环 境 的 广 泛 污 染 由 于 炭 疽 芽 孢 具 有 对 外 界 环 境
实验前需准备的材料 离心机 已灭菌的 1.5 ml 离心管 水浴锅 无水乙醇 异丙醇 不同体积样品 DNA 的收获量 材料来源样品量收获量 人全血 (DNA 收获量会因为白细胞的量而有差别 ) 300 μl 5-15 μg 5 ml μg 10 ml μg 12 ml
VER:1010 盐析法血液基因组 DNA 提取试剂盒 (GD2516 EZgene TM SQ Blood gdna Kit) 产品组成 成分 GD2516-00 GD2516-01 GD2516-02 GD2516-03 Total Blood Volume 10 ml 50 ml 150 ml 300 ml 4 x Buffer ML* 15 ml 75 ml 225 ml 450 ml Buffer
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AxyPrep 总 RNA 小量制备试剂盒 本试剂盒用于从各种动物组织 植物组织 细胞 细菌 酵母和丝状真菌中提取总 RNA 提取的总 RNA 分子完整 纯度高, 适用于 Northern Blot RT-PCR 体外翻译 Primer Extension S1 核酸酶作图 RNase 保护测定 构建 cdna 文库等各种分子生物学实验 一 试剂盒组成 贮存 稳定性 Cat. No. AP-MN-MS-RNA-4
动物学
2007 5 1 2 2..2 3..3 4..4 5 6 6..12 1...15 1 1 1 2 3 4 2 1 2 3 4 1 2 1 1 2 3 1% 4 70% 5 0.05 0.2% 6 2 2 1 7 10% 3 5% 2 0.3 5% 3 70 80% 4 5 90% 40% 9 1 80% 70% 6 40% 15 5 1 12 24 70% 70% 7 70% 2% 1 2 3
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第 三 章 皮 肤 病 的 防 治 和 护 理 学 习 要 点 皮 肤 病 的 预 防 不 同 的 皮 肤 病 要 采 取 相 应 的 预 防 措 施, 多 数 皮 肤 病 要 通 过 去 除 病 因, 避 免 诱 发 因 素, 切 断 传 播 途 径 等 措 施 来 预 防 皮 肤 病 的 治 疗 了 解 内 服 药 物 的 适 应 证 和 不 良 反 应, 掌 握 外 用 药 物 的 性 能 和
Microsoft Word - 蛋白质Western Blotting技术手册.doc
蛋白免疫印迹杂交 (Western Blot) 技术手册 蛋白免疫印迹杂交 (Western Blot WB) 是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离, 再转移到杂交膜 (blot) 上, 然后通过一抗 / 二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法 WB 是进行蛋白质分析最流行和成熟的技术之一 本指南讨论 Western Blot 操作方法及常见问题分析, 有助于成功完成 WB A 蛋白样本提取制备
Microsoft Word - 多肽水解氨基酸测定 doc
测试报告 样品信息 样品名称 多肽水解氨基酸测定 编号 W20140504-001 样品重量 \ 剂型 \ 收样日期 2014/05/04 测试期间 2014/05/04-05/08 样品描述 测试需求 测试成分 含测 参考标准 参考标准高效液相色谱法标样有 仪器信息 测试仪器高效液相色谱仪仪器型号安捷伦 1260 色谱条件 : 色谱柱 : 流动相 : 检测波长 : 月旭 Amino Acid,4.6
ExpressPlus TM 10 8 预制胶 技术手册 No. TM0645 版本 : Ⅰ 简介 1 Ⅱ 凝胶选择指导 2 Ⅲ 兼容的电泳槽 3 Ⅳ 预制胶使用简介 4 Ⅴ 凝胶染色 10 Ⅵ 蛋白转印 11 Ⅶ 凝胶实例 11 Ⅷ 问题分析及解决方法 12 Ⅸ 相关产品和订购信
ExpressPlus TM 10 8 预制胶 技术手册 No. TM0645 版本 : 05312017 Ⅰ 简介 1 Ⅱ 凝胶选择指导 2 Ⅲ 兼容的电泳槽 3 Ⅳ 预制胶使用简介 4 Ⅴ 凝胶染色 10 Ⅵ 蛋白转印 11 Ⅶ 凝胶实例 11 Ⅷ 问题分析及解决方法 12 Ⅸ 相关产品和订购信息 13 I. 简介金斯瑞 ExpressPlus TM 预制胶是一款高性能的小型聚丙烯酰胺凝胶, 能满足客户上样量大的需求
第一章 化学反应中的质量关系和能量关系
第 章酸碱反应和沉淀反应习题参考答案 解 :(1)pHlg (H )1.00 ()0.050mol HOA 溶液中, HOA H OA 平 /(mol ) 0.050 (H ) (OA ) a 1.8 (HOA ) 0.050 (H ) 9.5 mol ph lg (H ).0. 解 :(1)pH 1.00 (H ) 0.mol ph.00 (H ) 0.0mol 等体积混合后 :(H ) (0.mol
DP
Order: 010-59822688 Toll-free: 800-990-6057 /400-810-6057 TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD 版本号 : DP181214 RelaxGene Blood DNA System (0.1-20 ml) 血液基因组 DNA 提取系统 (0.1-20 ml) ( 非离心柱型 ) 目录号 :DP349 产品内容 产品组成
FZ1.s92
第 一 章 服 装 制 作 工 艺 基 础 知 识 第 一 节 服 装 术 语 服 装 术 语 是 服 装 技 术 专 用 语, 如 服 装 的 每 一 个 品 种 服 装 上 的 每 一 块 裁 片 服 装 制 作 过 程 中 每 一 种 操 作, 以 及 所 使 用 的 工 具 服 装 制 作 过 程 中 出 现 的 各 种 弊 病 和 要 达 到 的 某 些 质 量 要 求 等, 都 有 其
並 責 成 各 里 幹 事 下 里 服 勤 宣 導 病 媒 防 治 知 識, 協 助 各 家 戶 清 除 病 媒 孳 生 源 ( 積 水 容 器 ), 降 低 棲 群 密 度, 預 防 傳 染 病 之 發 生, 以 確 保 民 眾 身 體 健 康 及 居 家 生 活 品 質 訂 定 每 月 最 後
541 94.4.6 臺 北 市 文 山 區 都 市 計 畫 案 通 盤 檢 討 主 要 計 畫 暨 細 部 計 畫 案 542 94.5.5 都 市 計 畫 道 路 用 地 變 更 為 可 發 展 用 地 免 予 回 饋 原 則 附 件 三 溫 泉 產 業 特 定 專 用 區 都 市 計 畫 案 召 集 人 本 案 案 情 複 雜, 且 為 求 審 議 效 益, 委 請 陳 委 員 武 正 擔 任
討論
MTT cell viability assay 1 [45] succinate dehydrogenase MTT Kreb s cycle 2 MTT 3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide DMSO 570 nm 15 3 MTT solution MTT Sigma Cat. M-2128 ( PBS ) 5
Annexin V-EGFP凋亡检测试剂盒
ATP 酶测试盒 ( 组织及细胞膜需高速离心 ) Cat number:kgt02550-kgt025100 Store at -20 for for 6 months For Research Use Only( 科研专用 ) 说明书修订日期 :2016.04.22 此试剂盒可测试高速冷冻离心后的红细胞膜 组织细胞膜 线粒体 微粒体的 ATPase 一 测定意义 : ATP 酶存在与组织细胞及细胞器的膜上,
第十一章 颈部疾病病人的护理
第 十 一 章 颈 部 疾 病 病 人 的 护 理 学 习 目 标 1. 了 解 颈 部 常 见 肿 块 病 人 的 身 体 状 况 及 处 理 原 则 ; 能 提 出 甲 状 腺 肿 瘤 甲 状 腺 功 能 亢 进 病 人 的 护 理 诊 断 并 制 定 出 护 理 措 施 2. 熟 悉 甲 状 腺 肿 瘤 甲 状 腺 功 能 亢 进 病 人 的 身 体 状 况 手 术 适 应 证 3. 掌 握
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第 3 章 孵 化 技 术 本 章 按 照 种 蛋 孵 化 的 程 序, 介 绍 了 蛋 的 构 造 与 形 成 种 蛋 的 管 理 家 禽 的 胚 胎 发 育 人 工 孵 化 的 条 件 和 控 制 孵 化 机 的 构 造 与 管 理 孵 化 效 果 的 检 查 与 分 析 以 及 初 生 雏 的 处 理 等 内 容 对 种 蛋 的 选 择 与 消 毒 孵 化 条 件 的 标 准 与 控 制 孵
材料與方法
10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20
Western Blotting 实验原理及应用 免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术, 在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物, 然后利用抗原 - 抗体的特异性反应, 从蛋白混合物中检测出目标蛋白, 从而定量或定性的确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况 Weste
Western Blotting 实验指南 Western Blotting 实验原理及应用 Western Blotting 检测操作手册 Western Blotting Q&A Troubleshooting for Western Blotting 1 Western Blotting 实验原理及应用 免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术, 在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物,
1 2 3 3.1 3.2 3.3 PM10 3.4 TVOC 4 4.1 4.2 1 1 1 (m 3 /h. ) 3~5 30 1~2 20 20 20 20 30 10 20 20 20 25 4.3 2 2 PM10 0.08 mg/m 3 500 cfu/m 3 500 cfu/m 3 β- 4.4 3 3 20 g/m 2 00 cfu/cm 2 00 cfu/cm 2 2 4.5 4.5.1
Ps22Pdf
,,,,, ; 4,, 2 ; 4,,,,,, ; 6, 4 2,,, ; 1,, 2, 2,, 1, 1,, 1 2,, 375 3200,,, 95 425, 124 9,, 1 , : ; ; ; ( );,,,,,,,,,, 2 :,? 2040,,,,,,,,,,,,,,, 0.09, 46, 57 20 25, 12 20, 15, 30 10 22,, - 5, - 7.5 2 5,
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一 H-E 技 术 操 作 规 范 1. 及 时 固 定 组 织 : 免 疫 组 化 的 病 理 制 片 技 术 的 规 范 应 采 用 10%~20% 甲 醛 液 (10% 甲 醛 液 即 用 浓 甲 醛 液 1 份 加 蒸 馏 水 9 份 稀 释 ) 固 定 组 织, 因 甲 醛 易 氧 化 成 甲 酸, 因 此 多 会 偏 酸 性, 最 理 想 的 是 配 成 中 性 甲 醛 液 巨 大 组
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
40 20% 没 没 1
40 20% 没 没 1 () () : () 0.25mm () () () 却 2 () () 1-15 d m σ g σ π d = mg σ = mg π d N( )m( )dyne( )cm( ) dyne( )cm( σ mg 3 () 2. 3. 4. 5. 6. 7. 50 8. 4 5 1. 6 7 1. 1 2 0 3 4 2 1 2 0 3 4 2 B ml ma () ml
过, 同 样 加 快 了 扩 散 速 度 溶 剂 则 是 从 低 浓 度 溶 液 中 通 过 渗 透 膜 向 高 浓 度 溶 液 中 扩 散 溶 液 的 浓 度 越 高, 渗 透 压 就 愈 大 随 着 温 度 升 高, 渗 透 压 逐 渐 增 加, 导 致 蛋 黄 失 水 率 增 加 [4] 因
![过, 同 样 加 快 了 扩 散 速 度 溶 剂 则 是 从 低 浓 度 溶 液 中 通 过 渗 透 膜 向 高 浓 度 溶 液 中 扩 散 溶 液 的 浓 度 越 高, 渗 透 压 就 愈 大 随 着 温 度 升 高, 渗 透 压 逐 渐 增 加, 导 致 蛋 黄 失 水 率 增 加 [4] 因](/thumbs/42/22980499.jpg "过, 同 样 加 快 了 扩 散 速 度 溶 剂 则 是 从 低 浓 度 溶 液 中 通 过 渗 透 膜 向 高 浓 度 溶 液 中 扩 散 溶 液 的 浓 度 越 高, 渗 透 压 就 愈 大 随 着 温 度 升 高, 渗 透 压 逐 渐 增 加, 导 致 蛋 黄 失 水 率 增 加 [4] 因")
F * 迟 玉 杰, 胥 伟, 刘 振 宇 150030 摘 要 : 关 键 词 : 近 年 来, 世 界 蛋 品 开 发 和 蛋 制 品 加 工 有 了 长 足 的 发 展, 欧 美 发 达 国 家 投 入 大 量 的 资 金 和 科 技 力 量 进 行 研 究 和 开 发, 许 多 发 达 国 家 禽 蛋 制 品 深 加 工 比 重 已 达 其 禽 蛋 总 量 的 20-25%, 其 产 品 多
2017 7, (1),, 1.3 [12~14], 1 40,,, 3,200 g 1.1 5min 2mg 1 ml, min,, : 10mL15%, 40 min Mark:18~94ku, Thermo, 4 ml3%, : 800U/mg, Bioreagen
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2017 7 Vol.33,No.7 Jul.2017 DOI:10.13652/j.issn.1003-5788.2017.07.002 Analysisofglycosylatedcaseininwholemilkpowder SUN Jing-li LI Lin-qiang ZHU Li-li TANG Lu WU Yuan (, 710119) (Colegeof Food Engineering
374 新乡医学院学报 htp:// 年第 33 卷 目前, 骨肉瘤患者多采用以顺铂为主的联合化学治疗 1995 年, 世界卫生组织对近百种抗癌药物进行评价, 顺铂的疗效 市场等综合评价得分位居第 2 卡铂为 20 世纪 80 年代开发的第 2 代铂族抗癌药物
第 33 卷第 5 期 2016 年 5 月 新乡医学院学报 JournalofXinxiangMedicalUniversity Vol.33 No.5 May2016 373 欁欁 本文引用 : 刘星, 刘思源, 刘晓钰. 顺铂与卡铂对骨肉瘤细胞株作用的分子机制 [J]. 新乡医学院学报,2016,33 (5):373 378.DOI:10.7683/xxyxyxb.2016.05.008. 顺铂与卡铂对骨肉瘤细胞株作用的分子机制
9.1.乳房炎
1. 1 3 4 5 -- -- 1 3 2 3,, 3 4 2. : 1 2 3 4 6~12h 2 1~2d (1) 15~18 7~15b 70% 2%~5% 2 3 2. 1 2 3. 3-7d 3-4 ( ) 1 2 3% 2 3 2% 1% 2 3 3 5 10mg 10% 4. (1) (2) (3) (4) (5) (1) (2) 3
12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL
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( )2017 57 5JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2017,Vol.57No.5 11 LY294002, (, 330006) : LY294002 PI3K/AKT 0 10 15 20 25 30μmol L -1 LY294002(LY294002 ) A549,PBS CCK8 LY294002 A549 ; Westernblot
去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶
![去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶](/thumbs/42/23090277.jpg "去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶")
第 一 节 细 胞 培 养 的 相 关 技 术 1 细 胞 的 复 苏 概 述 复 苏 细 胞 要 求 快 速 融 化 的 手 段, 这 样 可 以 保 证 细 胞 外 结 晶 在 很 短 的 时 间 内 即 融 化 避 免 由 于 缓 慢 融 化 使 水 分 渗 入 细 胞 内 形 成 胞 内 再 结 晶 对 细 胞 造 成 损 害 用 品 培 养 液 吸 管 离 心 管 培 养 瓶 步 骤 [1]
GBZ －2004.doc
C 52 GBZ GBZ/T 160.30 2004 Methods for determination of inorganic phosphorus compounds in the air of workplace 2004 5 21 2004 12 1 GBZ/T 160.30-2004 GBZ 1 GBZ 2 [ Phosphorus pentoxide Phosphorus pentasulfide
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目 录 热 菜... 4 酸 菜 鱼... 4 可 乐 鸡 翅... 6 小 白 菜 熬 洋 芋... 7 糖 醋 排 骨... 8 醋 溜 白 菜... 10 酱 排 骨... 10 干 炸 肉... 11 五 香 熏 鱼... 12 豆 角 丝 炒 肉... 12 小
www.xxhjy.com 菜 谱 www.xxhjy.com 目 录 热 菜... 4 酸 菜 鱼... 4 可 乐 鸡 翅... 6 小 白 菜 熬 洋 芋... 7 糖 醋 排 骨... 8 醋 溜 白 菜... 10 酱 排 骨... 10 干 炸 肉... 11 五 香 熏 鱼... 12 豆 角 丝 炒 肉... 12 小 炒 肉... 13 香 菜 炒 鸡 蛋... 14 烧 鸡 块...
X MGC X 22 X 23 X MGC X BALB/c 26 X MGC X MGC X MGC X..
1 0 3 8 4 9726023 UDC X MGC80-3 2000 7 2000 7 2000 7 2000 6 22.3.4...11..11 12 13 15 15 20 20 X MGC80-3. 22 X 22 X 23 X MGC80-3.23 X BALB/c 26 X MGC80-3.27 X MGC80-3 28 29 29 30 31 32 33 X MGC80-3 34 X..34.35.36
幻灯片 1
蛋白穿越重现之旅 Western Blot 技术 Western Blot 的起源和应用及原理 Western Blot 实验流程详解 Western Blot 实验中的常见问题分析 Western Blot 的起源 应用及原理 Western Blot 实验流程详解 Western Blot 实验中的常见问题分析 Western Blot 起源 Renart, J., J. Reiser, G.
國防大學國防醫學院生理學研究所碩士論文
1. 6-8 Lewis 20 5 4 2. (dark adaptation) 24 (5A) 3. 24 (6) 1, 6, 12, 24 800-900 lux (dark recovery) 24 (5B) 1. 6-8 Lewis 20 5 4 2. (dark adaptation) 24 (5A) 3. 24 1, 6, 12, 24 800-900 lux (dark recovery)
卫生检验学实习指导.doc
2007.3 1 ... 1 V B2... 4... 7... 9... 12... 14... 17... 19... 25... 29... 31... 34 2 1. 2. 3. ph= 3-9( ph=5-6) Fe 2+ lgk =21.3 510nm, 1.1 10 4 Fe 2+ Fe 3+ Fe 2+ Fe 2+ 1. 1 cm l ml2m15ml 25ml 2. 1. 000
幻灯片 1
蛋白穿越重现之旅 Western Blot 技术 北京全式金生物技术有限公司 Western Blot 的起源和应用及原理 Western Blot 实验流程详解 Western Blot 实验中的常见问题分析 Western Blot 蛋白质印迹法 又称免疫印迹试验, 它是分子生物学 生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法 基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色 通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息
中国化学制药工业协会
中 国 化 学 制 药 工 业 协 会 药 协 便 字 [2014]3 号 关 于 征 求 对 中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院 发 布 的 口 服 固 体 制 剂 参 比 制 剂 确 立 原 则 ( 草 案 ) 等 意 见 的 通 知 各 会 员 单 位 : 国 家 食 品 药 品 监 督 管 理 局 关 于 开 展 仿 制 药 质 量 一 致 性 评 价 工 作 的 通 知 ( 国 食
(CIP) : /. :, 2004 ISBN T S CIP (2004) (1 : ) : * : : :
(CIP) : /. :, 2004 ISBN 7 5045 4510 4.... T S974. 2 CIP (2004) 044759 (1 : 100029 ) : * 787 1092 16 8. 25 176 2004 6 1 2004 6 1 : : 15. 00 : 010 64929211 : 010 64911190 : http: / / www. class. com. cn
附件四：作品送展表（夾於作品說明書第一頁，請勿裝訂）
嘉 義 市 第 31 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 生 活 與 應 用 科 學 科 組 別 : 國 小 組 作 品 名 稱 : 果 真 有 酵 - 水 果 酵 素 的 應 用 關 鍵 詞 : 水 果 酵 素 環 保 編 號 : 1 摘 要 本 研 究 主 要 的 目 的 是 蒐 集 常 見 的 水 果, 利 用 多 餘 的 果 皮 和 剩 餘 的 果 肉 製 造
Protein Labeling and Detection
ECL plex Product Specialist 1/ Western Blot 2/ Western Blotting- PI 3/ Western Blotting 1. 2 1 2. 3. 4. Y 3 4 5. 4/ 1. SDS- (SDS-PAGE) SDS ( β- ) --SDS 5/ SDS-PAGE - - - (Tris-HCL ph 6.8) glycine/chloride
哈尔滨电力职业技术学院2011年教学质量报告
哈 尔 滨 电 力 职 业 技 术 学 院 高 等 职 业 教 育 质 量 年 度 报 告 (2015) 2014 年 学 院 深 入 贯 彻 落 实 国 务 院 关 于 加 快 发 展 现 代 职 业 教 育 的 决 定 教 育 部 教 育 部 关 于 全 面 提 高 高 等 教 育 质 量 的 若 干 意 见 等 文 件 精 神, 适 应 职 业 教 育 加 强 内 涵 建 设 提 高 办 学
3 案 件 受 理 3.1 刑 事 案 件 的 送 检 人 员 需 提 供 公 检 法 司, 以 及 保 卫 部 门 的 盖 有 公 章 的 鉴 定 委 托 书 或 公 函, 并 出 示 本 人 的 工 作 证 民 事 案 件 的 送 检 人 员 需 提 供 委 托 单 位 或 个 人 的 委 托
法 庭 科 学 DNA 实 验 室 检 验 规 范 GA-T383-2002 1 范 围 本 标 准 规 定 了 法 庭 科 学 DNA 实 验 室 检 验 应 遵 守 的 基 本 要 求 本 标 准 适 用 于 所 有 从 事 法 庭 科 学 检 验 的 DNA 实 验 室 2 定 义 本 标 准 采 用 下 列 定 义 2.1 前 期 检 验 prior examination DNA 检 验
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骨 有 明 訊 肌 動 蛋 白 絲 與 細 胞 形 態 關 係 之 研 究 科 別 : 生 物 科 第 48 屆 科 學 展 覽 北 二 區 佳 作 作 者 : 呂 苹 瑋 范 競 勻 指 導 老 師 : 陳 季 瑄 老 師 壹 摘 要 本 研 究 以 人 類 的 子 宮 頸 癌 細 胞 (HeLa cell) 為 細 胞 骨 架 的 觀 察 對 象, 經 過 培 養 與 繼 代, 利 用 免 疫
期 王秀 兰 种 新 试荆 在 岩石 牡 含 量 测 定 中 的应 用 吸取 稀至 刻 度 舍 牡溶 液于 试 司 容量 瓶中 加 乙 放 置 却 分钟 在 验 盐酸 型 分 光 光度 计 上 于 欲 夕 草酸 及 处 侧定 其 吸 光 度 布 全 显 色 荆 用 蒸馏水 显色 吸 收 曲线 的侧
期 王秀 兰 种 新 试荆 在 岩石 牡 含 量 测 定 中 的应 用 吸取 稀至 刻 度 舍 牡溶 液于 试 司 容量 瓶中 加 乙 放 置 却 分钟 在 验 盐酸 型 分 光 光度 计 上 于 欲 夕 草酸 及 处 侧定 其 吸 光 度 布 全 显 色 荆 用 蒸馏水 显色 吸 收 曲线 的侧 定 按 照 操 作手 续 以水的 式剂 空 白 为 参 用 不 同 的 波长侧定 其吸 光 度 结 果
Method
PfNPC 5% O 10% AB 4, RPMI 5% CO 2 37 5 100% 30 sec 10% Giemsa 15 mins 100x oil-immersion lens parasitemia parasitemia 10 15% Parasitemia multiple invasion 4 Panel A B C parasitemia parasitemia 2% *Parasitemia
润 滑 油 系 统 是 一 个 封 闭 的 体 系, 其 中 射 油 器 将 油 箱 内 的 润 滑 油 提 供 给 各 个 轴 承, 主 油 泵 为 射 油 器 提 供 动 力 油, 冷 油 器 负 责 对 高 温 回 油 进 行 冷 却, 管 道 及 阀 门 负 责 连 接 各 个 系 统 设
经 典 收 藏 润 滑 油 系 统 常 见 故 障 分 类 大 全 润 滑 油 系 统 在 汽 轮 机 中 担 任 着 润 滑 冷 却 和 密 封 的 作 用, 其 正 常 工 作 是 保 证 汽 轮 机 安 全 运 行 的 必 要 条 件 在 此 收 集 部 分 汽 轮 机 润 滑 油 系 统 的 故 障 实 例, 分 类 研 究 现 今 国 内 汽 轮 机 润 滑 油 系 统 发 生 的 系 统
目 录 运 动 解 剖 学 实 验 讲 义 ( 王 蕊 ) 人 体 生 理 学 实 验 讲 义 ( 王 建 设 ) 运 动 生 理 学 实 验 讲 义 ( 王 建 设, 党 晓 云 ) 生 物 化 学 实 验 讲 义 ( 翟 鹏 飞 ) 运 动 生 物 化 学 实 验 讲 义 ( 翟 鹏 飞 ) 体
运 动 人 体 科 学 实 验 指 导 河 南 师 范 大 学 体 育 学 院 运 动 人 体 科 学 实 验 室 2010.5 目 录 运 动 解 剖 学 实 验 讲 义 ( 王 蕊 ) 人 体 生 理 学 实 验 讲 义 ( 王 建 设 ) 运 动 生 理 学 实 验 讲 义 ( 王 建 设, 党 晓 云 ) 生 物 化 学 实 验 讲 义 ( 翟 鹏 飞 ) 运 动 生 物 化 学 实 验 讲
一 概 述 ( 一 ) 兽 药 和 兽 药 残 留 的 概 念 掌 握 典 型 的 兽 药 : 是 指 用 于 预 防 和 治 疗 畜 禽 疾 病 的 药 物 但 是, 随 着 集 约 化 养 殖 生 产 的 开 展, 一 些 化 学 的 生 物 的 药 用 成 分 被 开 发 成 具 有 某 些
食 品 中 兽 药 残 留 检 验 一 概 述 二 兽 药 残 留 的 检 验 一 概 述 ( 一 ) 兽 药 和 兽 药 残 留 的 概 念 掌 握 典 型 的 兽 药 : 是 指 用 于 预 防 和 治 疗 畜 禽 疾 病 的 药 物 但 是, 随 着 集 约 化 养 殖 生 产 的 开 展, 一 些 化 学 的 生 物 的 药 用 成 分 被 开 发 成 具 有 某 些 功 效 的 动 物 保
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UCallM 实验技术手册 NO.4 --Western Blot 专题 您的需求, 我们的追求 Your needs, our career. 细胞免疫技术交流群 :212421479 1 2 目录 第一部分试剂配方...4 第二部分操作流程图...7 第三部分实验操作...7 一 实验原理... 7 二 蛋白制备及浓度测定... 8 1 蛋白制备... 8 2 蛋白浓度测定... 12 三 凝胶电泳...
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倒 不 出 來 的 果 汁 探 討 果 汁 變 果 凍 的 原 因 及 生 活 上 的 應 用 摘 要 打 果 汁 自 行 飲 用 在 民 眾 的 生 活 中 極 其 常 見, 但 為 增 加 果 汁 的 營 養 價 值 和 口 感 常 會 依 個 人 的 偏 好 加 入 水 果 以 外 的 成 份, 如 在 果 汁 中 加 入 奶 粉, 則 會 使 果 汁 發 生 結 凍 的 現 象, 針 對 結
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DAB 70 1 S-100 2 3 EMA 4 Ig κλ B B Ig κ+/λ+ Ig κ+λ+ bcl-2 90% bcl-2 bcl-2 5 6 7 8 c-erb-2cmycp53 nm23 EGFR PCNAKi-67 Ki-67 PCNA EGFR 9 10 6 T B 10 CMVHPVHSV HBV 1 1.1 5~10 1.2 1~2ml HankRPMI-1640 500r/min
目录
1 2 目 录 第 一 篇 植 物 学 实 验 实 验 1 植 物 细 胞 的 基 本 形 态 与 结 构 实 验 2 植 物 组 织 实 验 3 种 子 和 幼 苗 实 验 4 植 物 的 营 养 器 官 根 的 形 态 结 构 及 其 发 育 实 验 5 植 物 的 营 养 器 官 茎 的 形 态 结 构 及 其 发 育 实 验 6 植 物 的 营 养 器 官 叶 的 形 态 结 构 及 其 发
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第 3 章 肉 用 牛 生 产 技 术 本 章 提 要 本 章 主 要 介 绍 了 肉 用 牛 品 种, 肉 用 牛 的 体 型 外 貌 特 征 及 选 择 方 法, 繁 殖 母 牛 的 饲 养 管 理 技 术, 重 点 介 绍 了 肉 用 牛 的 肥 育 技 术 学 完 本 章, 要 求 了 解 优 良 肉 用 牛 品 种 特 征 和 育 肥 牛 的 选 择 要 求, 掌 握 肉 用 牛 生 产
<4D6963726F736F667420576F7264202D203036D2A9C6B7BEADD3AAD3EBB9DCC0EDBDCCD1A7B4F3B8D92E646F63>
药 品 经 营 与 管 理 专 业 教 学 大 纲 广 东 化 工 制 药 职 业 技 术 学 院 管 理 系 二 〇 〇 六 年 九 月 十 三 日 目 录 专 业 基 础 课 基 础 化 学 (1) 教 学 大 纲. 1 基 础 化 学 (2) 教 学 大 纲 10 药 物 化 学 教 学 大 纲 19 药 物 质 量 概 述 教 学 大 纲. 26 药 剂 基 础 知 识 教 学 大 纲..35
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AxyPrep 总 RNA 大量制备试剂盒 本试剂盒用于从各种动物组织 植物组织 细胞 细菌 酵母和丝状真菌中提取总 RNA 提取的总 RNA 分子完整 纯度高, 适用于 Northern Blot RT-PCR 体外翻译 Primer Extension S1 核酸酶作图 RNase 保护测定 构建 cdna 文库等各种分子生物学实验 一 试剂盒组成 贮存 稳定性 Cat. No. AP-MX-MS-RNA-2
材料导报 研究篇 年 月 下 第 卷第 期 种球的制备 单步溶胀法制备分子印迹聚合物微球 洗脱处理 种子溶胀聚合机理 种球用量的影响
水相中 组氨酸单分散分子印迹聚合物微球的合成 表征及其识别性能研究 李思平等 李思平 徐伟箭 较佳工艺条件下 在水性体系中选用无皂乳液聚合法制得的单分散微米级聚苯乙烯微球为种球 分别以组氨酸 甲基丙烯酸 或丙烯酸胺 乙二醇二甲基丙烯酸酯 为模板分子 功能单体和交联剂 合成了 组氨酸分子印迹聚合物微球 研究了形貌 粒径及其分布以及模板分子与功能单体之间的相互作用 分别以 激光粒度分析仪紫外分光光度法和红外光谱表征功能单体与交联剂之间的共聚情况
596.doc
2005596 4 3 2794 2796 51 2800 51 238 238 1. 238 238 1 2. 3 2 2 6 3. 238 238 4. 238 2 238 1. 4 3 2. 3. 1. 2005107 2. 238 1. 238 2. 3. 1 238 2 238 238 238 1. 0.8mm 1.6mm 10 55 Hz 1Hz /min 95±5 min 24 ±4
3. 非特异性条带 原因 : 一抗非特异性与蛋白结合 解决办法 : 更换一抗 经验 : 此种情况绝大多数是因为一抗不好, 你无法判断那一条是目的条带 如果实在没有更好的抗体, 建议采用阴性对照 (?) 和阳性对 照 (?) 来确定上述哪个条带是目的条带 当然这种情况下有一种很小几率的可能是一抗浓度太
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Ni NTA Magarose Beads
Ni NTA Magarose Beads 目录 1. 产品介绍...1 2. 注意事项...2 3. 纯化流程...3 4. 订购信息及相关产品.4 1. 产品介绍 Ni NTA Magarose Beads 是专为高效 / 快速纯化组氨酸标签蛋白而设计的新型磁性微球产品, 可以在磁场作用下直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白, 极大的简化了纯化工艺和提高纯化效率, 适合科研和工业客户高通量地进行组氨酸标签蛋白的纯化
LYC239A.S72
第 三 章 黄 酒 酿 造 工 艺 黄 酒 是 我 国 的 民 族 特 产 和 传 统 食 品, 也 是 世 界 上 最 古 老 的 饮 料 酒 之 一, 是 以 谷 物 为 主 要 原 料, 利 用 酒 药 麦 曲 或 米 曲 中 含 有 的 多 种 微 生 物 的 共 同 作 用, 酿 制 而 成 的 发 酵 酒 第 一 节 原 料 和 辅 料 黄 酒 生 产 的 主 要 原 料 是 酿 酒 用
P3 膠體電泳法
Polyacrylamide Gel Electrophoresis 聚 丙 烯 醯 胺 膠 体 電 泳 莊 榮 輝 3.1 電 泳 原 理 帶 電 分 子 在 電 場 中 能 夠 移 動, 稱 作 泳 動, 泳 動 的 程 度 稱 為 泳 動 率 (mobility).. 泳 動 率 ~ ( 所 外 加 電 壓 mv) ( 分 子 之 淨 電 荷 ) 分 子 與 介 質 間 之 摩 擦 力 上 述
金斯瑞 ExpressPlus TM 预制胶参数 类别 10 8 凝胶 凝胶 凝胶成分 聚丙烯酰胺 聚丙烯酰胺 凝胶尺寸 7.4 cm 8.4 cm( 高 宽 ) 8.6 cm 8.0 cm( 高 宽 ) 凝胶厚度 1.0 mm 1.0 mm 分离胶高度 6 cm 6.5 cm 胶板尺寸
ExpressPlus TM 10 10 预制胶 版本 : 03072016 Ⅰ 简介 1 Ⅱ 凝胶选择指导 2 Ⅲ 兼容的电泳槽 4 Ⅳ 预制胶使用指导 4 Ⅴ 凝胶染色 10 Ⅵ 蛋白转印 10 Ⅶ 凝胶实例 11 Ⅷ 问题分析及解决方法 12 Ⅸ 相关产品和订单信息 13 I. 简介金斯瑞 ExpressPlus TM 预制胶是高性能的聚丙烯酰胺小型预制胶, 专门为较大上样量而设计 其独一无二的胶板设计提供了更好的条带分辨率并且显著提高了样品在上样孔里的分布状态,
奶牛饲养管理
( 成 海 荣 编 ) 奶 牛 饲 养 管 理 奶 牛 的 饲 养 管 理 是 指 对 奶 牛 生 产 的 全 过 程 进 行 饲 养 管 理, 包 括 从 犊 牛 到 成 年 牛 从 交 配 开 始, 经 过 妊 娠 产 犊 直 到 再 次 交 配 ; 从 产 奶 开 始 经 过 干 奶 直 至 再 次 产 奶 的 整 个 过 程 奶 牛 产 奶 量 的 高 底, 主 要 由 产 奶 遗 传 性
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蛋白质电泳 目的 : 分离蛋白质混合物 蛋白质等电点 张四洋 蛋白质分子量 中国医科大学三部 一维电泳 (One dimensional gel electrophoresis,1de), 垂直板十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 二维电泳 (two-dimensional gel,2de), 又称双向电泳, 包括第一向等电聚焦电泳 (isoelectric focusing,ief)
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TM CommaXP N96 Plasmid Kit N96 质粒小提纯化试剂盒 本说明书适用于货号为 MNP019-1 的产品 所有的技术文献均可以从本公司网站 www.biocomma.cn 得到 请访问本公司网站以确保您所使用的技术手册为最新版本 版本号 :BP061-1 www.biocomma.com TM CommaXP N96 Plasmid Kit N96 质粒小提纯化试剂盒 产品概述
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
PCR 条形码试剂盒方案器材和耗材 Oxford NANOPORE Technologies Oxford Nanopore Technologies Oxford Science Park, Oxford OX4 4GA, UK
PCR 条形码试剂盒方案器材和耗材 Nanopore Technologies Science Park, OX4 4GA, UK support@nanoporetech.com www.nanoporetech.com PCR 条形码试剂盒的器材和耗材 PCR 条形码基因组 DNA 英文 器材 Hula mixer (gentle rotator mixer) Hula 混匀仪 ( 低速旋转式混匀仪
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知 识 目 标 : 了 解 药 物 鉴 别 的 意 义 学 习 目 标 理 解 药 物 鉴 别 试 验 的 项 目 掌 握 药 物 鉴 别 试 验 的 常 用 方 法 能 力 目 标 : 能 熟 练 应 用 药 物 鉴 别 的 常 用 方 法 对 药 物 进 行 鉴 别 第 一 节 概 述 药 物 的 鉴 别 试 验 是 根 据 药 物 的 组 成 分 子 结 构 和 理 化 性 质, 采 用 化
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Western Blot 应用操作手册 杭州弗德 物科技有限公司 目 弗德 物 WB 录 1 Western Blot 简介... 1 1.1 Western Blot 原理... 1 1.2 Western Blot 优点... 1 1.3 Western Blot 应用... 1 1.4 Western Blot 成功要素... 1 2 Western Blot 基本流程... 2 2.1 蛋白样品的提取...
Microsoft Word - 092003.htm
09200 食 品 檢 驗 分 析 丙 級 工 作 項 目 01: 食 品 分 析 1.(2) 濃 度 2N 的 硫 酸 溶 液 與 下 列 何 者 濃 度 相 等 2.(1) 王 水 是 由 下 列 何 種 試 劑 配 製 3.(4) 配 製 1N NaOH 1000mL 需 用 多 少 量 之 NaOH 400g 0.4g 4g 40g (Na:23,O:16,H:1) 4.(2) 比 重 1.84