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1 知 识 目 标 : 了 解 药 物 鉴 别 的 意 义 学 习 目 标 理 解 药 物 鉴 别 试 验 的 项 目 掌 握 药 物 鉴 别 试 验 的 常 用 方 法 能 力 目 标 : 能 熟 练 应 用 药 物 鉴 别 的 常 用 方 法 对 药 物 进 行 鉴 别 第 一 节 概 述 药 物 的 鉴 别 试 验 是 根 据 药 物 的 组 成 分 子 结 构 和 理 化 性 质, 采 用 化 学 物 理 化 学 或 生 物 学 方 法 来 判 断 药 物 的 真 伪 它 是 药 品 质 量 检 验 中 的 首 项 工 作, 只 有 在 药 物 真 伪 鉴 别 无 误 的 情 况 下, 进 行 药 品 的 杂 质 检 查 含 量 测 定 等 分 析 才 有 意 义 中 国 药 典 和 世 界 各 国 药 典 所 收 载 的 药 品 项 下 的 鉴 别 试 验 方 法, 均 是 用 于 证 实 贮 藏 在 有 标 签 容 器 中 的 药 物 是 否 为 其 所 标 示 的 药 物, 而 不 是 对 未 知 物 进 行 鉴 别 因 为 这 些 试 验 方 法 虽 有 一 定 的 专 属 性, 但 不 完 全 代 表 对 该 药 物 化 学 结 构 的 确 证, 决 不 能 将 某 一 鉴 别 试 验 作 为 判 断 的 唯 一 根 据, 应 联 系 其 他 有 关 项 目 全 面 考 察 一 种 药 品 药 物 的 鉴 别 试 验 一 般 收 载 于 药 品 质 量 标 准 鉴 别 项 下, 对 于 原 料 药, 还 应 结 合 性 状 项 下 的 外 观 和 物 理 常 数 等 进 行 确 认 第 二 节 鉴 别 试 验 的 项 目 药 物 鉴 别 试 验 的 项 目 主 要 包 括 性 状 一 般 鉴 别 试 验 和 专 属 鉴 别 试 验 等 内 容 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 中 鉴 别 项 下 规 定 的 鉴 别 方 法, 仅 适 用 于 鉴 别 药 物 的 真 伪, 对 于 原 料 药 还 应 结 合 性 状 项 下 的 外 观 溶 解 度 和 物 理 常 数 进 行 确 认 一 性 状 药 物 的 性 状 反 映 了 药 物 特 有 的 物 理 性 质, 一 般 包 括 外 观 臭 味 溶 解 度 和 物 理 常 数 等 ( 一 ) 外 观 臭 味 外 观 是 对 药 物 的 色 泽 和 外 表 的 感 观 规 定, 包 括 药 品 的 聚 集 状 态 晶 型 颜 色 以 及 臭 味 等 45

2 性 质 臭 是 药 物 本 身 固 有 的 或 应 有 的 臭 味 味 是 具 有 特 殊 味 觉 的 药 物, 应 记 述, 但 毒 剧 麻 药 不 作 味 记 述 ( 不 主 张 用 嘴 尝 试 ) 如 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 对 阿 司 匹 林 的 描 述 为 本 品 为 白 色 结 晶 或 结 晶 性 粉 末 ; 无 臭 或 微 带 醋 酸 臭, 味 微 酸 ; 遇 湿 气 即 缓 缓 水 解 对 维 生 素 B2 的 描 述 为 本 品 为 橙 黄 色 结 晶 性 粉 末 ; 微 臭, 味 微 苦 ; 溶 液 易 变 质, 在 碱 性 溶 液 中 或 遇 光 变 质 更 快 ( 二 ) 溶 解 度 溶 解 度 是 药 物 的 一 种 物 理 性 质, 一 定 程 度 上 能 反 映 其 纯 度 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 采 用 极 易 溶 解 易 溶 溶 解 略 溶 微 溶 极 微 溶 解 几 乎 不 溶 或 不 溶 来 描 述 药 物 在 不 同 溶 剂 中 的 溶 解 性 能, 并 可 作 为 药 物 精 制 或 制 备 溶 液 时 的 参 考 依 据 如 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 二 部 对 维 生 素 C 的 描 述 为 本 品 在 水 中 易 溶, 在 乙 醇 中 略 溶, 在 三 氯 甲 烷 或 乙 醚 中 不 溶 对 红 霉 素 的 描 述 为 本 品 在 甲 醇 乙 醇 或 丙 酮 中 易 溶, 在 水 中 极 微 溶 解 试 验 法 : 除 另 有 规 定 外, 称 取 研 成 细 粉 的 供 试 品 或 量 取 液 体 供 试 品, 于 (25 ± 2) 一 定 容 量 的 溶 剂 中, 每 隔 5 min 强 力 振 摇 30 s ; 观 察 30 min 内 的 溶 解 情 况, 如 无 目 视 可 见 的 溶 质 颗 粒 或 液 滴 时, 即 视 为 完 全 溶 解 ( 三 ) 物 理 常 数 物 理 常 数 是 评 价 药 物 质 量 的 重 要 指 标 其 测 定 结 果 不 仅 对 药 物 具 有 鉴 别 意 义, 同 时 也 反 映 了 该 药 物 的 纯 度 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 收 载 的 物 理 常 数 有 : 相 对 密 度 馏 程 熔 点 凝 点 比 旋 度 折 光 率 黏 度 吸 收 系 数 酸 值 碘 值 皂 化 值 等 具 体 内 容 参 见 第 二 章 二 一 般 鉴 别 试 验 一 般 鉴 别 试 验 是 依 据 某 一 类 药 物 的 化 学 结 构 或 理 化 性 质 的 特 征, 通 过 化 学 反 应 来 鉴 别 药 物 的 真 伪 对 无 机 药 物 主 要 是 根 据 阴 阳 离 子 的 特 殊 反 应 进 行 鉴 别, 而 对 有 机 药 物 则 大 都 采 用 典 型 官 能 团 反 应 因 此, 一 般 鉴 别 试 验 只 能 证 实 是 某 一 类 药 物, 而 不 能 证 实 是 哪 一 种 药 物, 应 结 合 正 文 中 的 其 他 鉴 别 试 验 和 性 状 项 下 描 述, 才 能 证 实 其 真 伪 通 常 一 般 鉴 别 试 验 仅 供 确 认 药 品 质 量 标 准 中 单 一 的 化 学 药 物, 若 为 数 种 化 学 药 物 的 混 合 物 或 有 干 扰 物 质 存 在 时, 除 另 有 规 定 外, 一 般 是 不 适 用 的 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 二 部 附 录 项 下 的 一 般 鉴 别 试 验 所 包 括 的 项 目 有 : 水 杨 酸 盐 丙 二 酰 脲 类 有 机 氟 化 物 类 亚 硫 酸 盐 或 亚 硫 酸 氢 盐 亚 锡 盐 托 烷 生 物 碱 类 汞 盐 芳 香 第 一 胺 类 苯 甲 酸 盐 乳 酸 盐 枸 橼 酸 盐 钙 盐 钠 盐 钡 盐 酒 石 酸 盐 钾 盐 铁 盐 铵 盐 银 盐 铜 盐 锂 盐 硫 酸 盐 硝 酸 盐 锌 盐 锑 盐 铝 盐 氯 化 物 溴 化 物 碘 化 物 硼 酸 盐 碳 酸 盐 与 碳 酸 氢 盐 镁 盐 醋 酸 盐 磷 酸 盐 现 以 几 个 典 型 的 无 机 离 子 及 有 机 物 官 能 团 为 例 来 阐 明 一 般 鉴 别 试 验 原 理 ( 一 ) 无 机 酸 根 (1) 氯 化 物 : 方 法 :1 取 供 试 品 溶 液, 加 稀 硝 酸 使 成 酸 性 后, 滴 加 硝 酸 银 试 液, 即 生 成 白 色 凝 乳 状 沉 淀 ; 分 离, 沉 淀 加 氨 试 液 即 溶 解, 再 加 稀 硝 酸 酸 化 后, 沉 淀 复 生 成 如 供 试 品 为 生 物 碱 或 其 他 有 机 碱 的 盐 酸 盐, 须 先 加 氨 试 液 使 成 碱 性, 将 析 出 的 沉 淀 滤 过 除 去, 取 滤 液 进 行 试 验 2 取 供 试 品 少 量, 置 试 管 中, 加 等 量 的 二 氧 化 锰, 混 匀, 加 硫 酸 湿 润, 缓 缓 加 热, 即 发 生 氯 气, 能 使 用 水 湿 润 的 碘 化 钾 淀 粉 试 纸 显 蓝 色 46

3 第 二 节 鉴 别 试 验 的 项 目 课 堂 活 动 氯 化 物 的 鉴 别 试 验 仅 用 一 种 方 法 能 行 吗? 为 什 么? (2) 硫 酸 盐 : 方 法 :1 取 供 试 品 溶 液, 滴 加 氯 化 钡 试 液, 即 生 成 白 色 沉 淀 ; 分 离, 沉 淀 在 盐 酸 或 硝 酸 中 均 不 溶 解 2 取 供 试 品 溶 液, 滴 加 醋 酸 铅 试 液, 即 生 成 白 色 沉 淀 ; 分 离, 沉 淀 在 醋 酸 铵 试 液 或 氢 氧 化 钠 试 液 中 溶 解 3 取 供 试 品 溶 液, 加 盐 酸, 不 生 成 白 色 沉 淀 ( 与 硫 代 硫 酸 盐 区 别 ) (3) 硝 酸 盐 : 方 法 :1 取 供 试 品 溶 液, 置 试 管 中, 加 等 量 的 硫 酸, 小 心 混 合, 冷 后, 沿 管 壁 加 硫 酸 亚 铁 试 液, 使 成 两 液 层, 接 界 面 显 棕 色 2 取 供 试 品 溶 液, 加 硫 酸 与 铜 丝 ( 或 铜 屑 ), 加 热, 即 发 生 红 棕 色 的 蒸 气 3 取 供 试 品 溶 液, 滴 加 高 锰 酸 钾 试 液, 紫 色 不 应 褪 去 ( 与 亚 硝 酸 盐 区 别 ) ( 二 ) 无 机 金 属 盐 (1) 钠 盐 : 方 法 :1 取 铂 丝, 用 盐 酸 湿 润 后, 蘸 取 供 试 品, 在 无 色 火 焰 中 燃 烧, 火 焰 即 显 鲜 黄 色 2 取 供 试 品 约 100 m g, 置 10 ml 试 管 中, 加 水 2 ml 溶 解, 加 15 % 碳 酸 钾 溶 液 2 ml, 加 热 至 沸, 应 不 得 有 沉 淀 生 成 ; 加 焦 锑 酸 钾 试 液 4 ml, 加 热 至 沸 ; 置 冰 水 中 冷 却, 必 要 时, 用 玻 棒 摩 擦 试 管 内 壁, 应 有 致 密 的 沉 淀 生 成 (2) 钾 盐 : 方 法 :1 取 铂 丝, 用 盐 酸 湿 润 后, 蘸 取 供 试 品, 在 无 色 火 焰 中 燃 烧, 火 焰 即 显 紫 色 ; 但 有 少 量 的 钠 盐 混 存 时, 须 隔 蓝 色 玻 璃 透 视, 方 能 辨 认 2 取 供 试 品, 加 热 炽 灼 除 去 可 能 杂 有 的 铵 盐, 放 冷 后, 加 水 溶 解, 再 加 0 畅 1 % 四 苯 硼 钠 溶 液 与 醋 酸, 即 生 成 白 色 沉 淀 (3) 铵 盐 : 方 法 :1 取 供 试 品, 加 过 量 氢 氧 化 钠 试 液, 加 热, 即 分 解, 发 生 氨 臭 ; 遇 用 水 湿 润 的 红 色 石 蕊 试 纸, 能 使 之 变 蓝 色, 并 能 使 硝 酸 亚 汞 试 液 湿 润 的 滤 纸 显 黑 色 2 取 供 试 品 溶 液, 加 碱 性 碘 化 汞 钾 试 液 1 滴, 即 生 成 红 棕 色 沉 淀 ( 三 ) 有 机 酸 盐 (1) 水 杨 酸 盐 : 方 法 :1 取 供 试 品 的 稀 溶 液, 加 三 氯 化 铁 试 液 1 滴, 即 显 紫 色 其 反 应 方 程 式 为 : 2 取 供 试 品 溶 液, 加 稀 盐 酸, 即 析 出 白 色 水 杨 酸 沉 淀 ; 分 离, 沉 淀 在 醋 酸 铵 试 液 中 溶 解 (2) 酒 石 酸 盐 : 方 法 :1 取 供 试 品 的 中 性 溶 液, 置 洁 净 的 试 管 中, 加 氨 制 硝 酸 银 试 液 数 滴, 置 水 浴 中 加 热, 银 即 游 离 并 附 在 试 管 的 内 壁 形 成 银 镜 其 反 应 方 程 式 为 : 2 取 供 试 品 溶 液, 加 醋 酸 成 酸 性 后, 加 硫 酸 亚 铁 试 液 1 滴 和 过 氧 化 氢 试 液 1 滴, 待 溶 液 退 色 47

4 后, 用 氢 氧 化 钠 试 液 碱 化, 溶 液 即 显 紫 色 (3) 苯 甲 酸 盐 : 方 法 :1 取 供 试 品 的 中 性 溶 液, 加 三 氯 化 铁 试 液, 即 生 成 赭 色 沉 淀 ; 再 加 稀 盐 酸, 变 为 白 色 沉 淀 其 反 应 方 程 式 为 : 2 取 供 试 品, 置 干 燥 试 管 中, 加 硫 酸 后, 加 热, 不 炭 化, 但 析 出 苯 甲 酸, 并 在 试 管 内 壁 凝 结 成 白 色 升 华 物 ( 四 ) 有 机 氟 化 物 方 法 : 取 供 试 品 约 7 m g, 照 氧 瓶 燃 烧 法 进 行 有 机 破 坏, 用 水 20 ml 与 0 畅 01 m ol/l 氢 氧 化 钠 溶 液 6 畅 5 ml 为 吸 收 液, 俟 燃 烧 完 毕 后, 充 分 振 摇 ; 取 吸 收 液 2 ml, 加 茜 素 氟 蓝 试 液 0 畅 5 ml, 再 加 12 % 醋 酸 钠 的 稀 醋 酸 溶 液 0 畅 2 ml, 用 水 稀 释 至 4 ml, 加 硝 酸 亚 铈 试 液 0 畅 5 ml, 即 显 蓝 紫 色 ; 同 时 做 空 白 对 照 试 验 其 反 应 方 程 式 为 : ( 五 ) 芳 香 第 一 胺 类 方 法 : 取 供 试 品 约 50 m g, 加 稀 盐 酸 1 ml, 必 要 时 缓 缓 煮 沸 使 溶 解, 放 冷, 加 0 畅 1 m ol/l 亚 硝 酸 钠 溶 液 数 滴, 滴 加 碱 性 β 萘 酚 试 液 数 滴, 视 供 试 品 不 同, 生 成 由 橙 黄 色 到 猩 红 色 沉 淀 其 反 应 方 程 式 为 : ( 六 ) 托 烷 生 物 碱 类 方 法 : 取 供 试 品 约 10 mg, 加 发 烟 硝 酸 5 滴, 置 水 浴 上 蒸 干, 得 黄 色 的 残 渣, 放 冷, 加 乙 醇 2 ~ 3 滴 湿 润, 加 固 体 氢 氧 化 钾 一 小 粒, 即 显 深 紫 色 其 反 应 方 程 式 为 : 48

5 第 三 节 鉴 别 试 验 方 法 类 型 三 专 属 鉴 别 试 验 药 物 的 专 属 鉴 别 试 验 是 证 实 某 一 种 药 物 的 依 据, 它 是 根 据 每 一 种 药 物 化 学 结 构 的 差 异 及 其 所 引 起 的 物 理 化 学 特 性 不 同, 选 用 某 些 特 有 的 灵 敏 的 定 性 反 应, 来 鉴 别 药 物 的 真 伪 甾 体 激 素 类 药 物 含 有 环 戊 烷 并 多 氢 菲 母 核, 主 要 的 结 构 差 别 在 A 环 和 D 环 的 取 代 基 不 同, 可 利 用 这 些 结 构 特 征 进 行 鉴 别 如 黄 体 酮 与 亚 硝 基 铁 氰 化 钠 试 液 在 一 定 反 应 条 件 下, 显 蓝 紫 色, 其 他 常 用 甾 体 激 素 均 不 显 蓝 紫 色, 而 呈 现 淡 橙 色 或 不 显 色 因 此, 一 般 鉴 别 试 验 是 以 某 些 类 别 药 物 的 共 同 化 学 结 构 为 依 据, 根 据 其 相 同 的 理 化 性 质 鉴 别 药 物 的 真 伪, 以 区 别 不 同 类 别 的 药 物 而 专 属 鉴 别 试 验, 则 是 在 一 般 鉴 别 试 验 的 基 础 上, 利 用 各 种 药 物 的 化 学 结 构 差 异, 来 鉴 别 药 物, 以 区 别 同 类 药 物 或 具 有 相 同 化 学 结 构 部 分 的 各 个 药 物 单 体, 达 到 最 终 确 证 药 物 真 伪 的 目 的 第 三 节 鉴 别 试 验 方 法 类 型 药 物 的 鉴 别 方 法 要 求 有 专 属 性 强, 重 现 性 好, 灵 敏 度 高, 操 作 简 便 快 速 等 常 用 的 鉴 别 试 验 方 法 有 化 学 法 光 谱 法 色 谱 法 和 生 物 学 方 法 等, 可 根 据 药 物 具 体 特 点 加 以 选 用 一 化 学 鉴 别 法 化 学 鉴 别 法 一 般 是 特 定 官 能 团 或 特 定 结 构 化 合 物 的 特 性 反 应, 与 其 他 鉴 别 方 法 结 合 使 用, 可 使 鉴 别 方 法 的 专 属 性 更 加 突 出 该 法 专 属 性 强 反 应 迅 速 现 象 明 显, 实 验 成 本 低, 是 药 物 分 析 中 最 常 用 的 鉴 别 方 法 ( 一 ) 呈 色 反 应 鉴 别 法 鉴 别 试 验 中 常 用 的 呈 色 反 应 类 型 如 下 (1) 三 氯 化 铁 反 应 : 多 用 于 鉴 别 含 有 酚 羟 基 或 水 解 后 产 生 酚 羟 基 的 药 物 (2) 异 羟 肟 酸 铁 反 应 : 多 用 于 鉴 别 含 芳 酸 及 其 酯 类 酰 胺 类 结 构 的 药 物 49

6 (3) 茚 三 酮 呈 色 反 应 : 多 用 于 鉴 别 含 脂 肪 氨 基 结 构 的 药 物 (4) 重 氮 化 偶 合 反 应 : 多 用 于 鉴 别 芳 伯 氨 基 或 能 产 生 芳 伯 氨 基 结 构 的 药 物 (5) 氧 化 还 原 反 应 及 其 他 颜 色 反 应 ( 二 ) 沉 淀 反 应 鉴 别 法 鉴 别 试 验 中 常 用 的 沉 淀 反 应 类 型 如 下 (1) 与 硫 氰 化 铬 铵 ( 雷 氏 盐 ) 的 沉 淀 反 应 : 多 用 于 鉴 别 生 物 碱 及 其 盐 类 药 物 和 具 有 芳 香 环 的 有 机 碱 及 其 盐 类 药 物 (2) 与 重 金 属 离 子 的 沉 淀 反 应 : 在 一 定 条 件 下, 药 物 和 重 金 属 离 子 反 应, 生 成 不 同 沉 淀 (3) 其 他 沉 淀 反 应 ( 三 ) 气 体 生 成 反 应 鉴 别 法 (1) 产 生 氨 气 : 多 用 于 鉴 别 胺 类 药 物 酰 胺 类 药 物 及 酰 脲 类 药 物, 这 些 药 物 经 强 碱 处 理 后, 加 热, 发 生 氨 气 (2) 产 生 硫 化 氢 气 体 : 利 用 其 特 殊 的 气 味 鉴 别 多 用 于 鉴 别 化 学 结 构 中 含 硫 的 药 物, 这 类 药 物 经 强 酸 处 理 后, 加 热, 发 生 硫 化 氢 气 体 (3) 另 外, 含 碘 有 机 药 物, 直 火 加 热 后, 可 产 生 紫 色 碘 蒸 气 ; 含 乙 酸 酯 和 乙 酰 胺 类 药 物, 经 硫 酸 水 解 后, 加 乙 醇 可 产 生 乙 酸 乙 酯 的 香 味 这 类 可 生 成 气 体, 且 较 容 易 分 辨 的 反 应 均 可 用 于 鉴 别 ( 四 ) 荧 光 反 应 鉴 别 法 可 用 荧 光 反 应 鉴 别 的 药 物 如 下 (1) 药 物 本 身 在 可 见 光 下 发 射 荧 光 如 马 来 酸 麦 角 新 碱 的 水 溶 液 显 蓝 色 荧 光 ; 维 生 素 B : 水 溶 液 在 透 射 光 下 有 强 烈 的 黄 绿 色 荧 光 (2) 药 物 溶 液 加 硫 酸 呈 酸 性 后, 在 可 见 光 下 发 射 荧 光 如 甲 睾 酮 加 硫 酸 乙 醇 溶 解, 即 显 黄 色 并 带 有 黄 绿 色 荧 光 (3) 药 物 和 溴 反 应 后, 遇 可 见 光 下 发 射 荧 光 (4) 药 物 和 间 苯 二 酚 反 应 后, 经 加 热 可 发 射 荧 光 如 糖 精 钠 与 间 苯 二 酚 反 应, 显 绿 色 荧 光 二 光 谱 法 ( 一 ) 红 外 光 谱 鉴 别 法 红 外 吸 收 光 谱 (4 000 ~ 400 cm - 1 ) 是 物 质 分 子 的 振 动 转 动 能 级 跃 迁 产 生 的 吸 收 光 谱 利 用 红 外 吸 收 光 谱 进 行 分 析 的 方 法 称 为 红 外 分 光 光 度 法 有 机 药 物 在 红 外 光 区 有 特 征 吸 收, 当 药 物 分 子 的 组 成 结 构 官 能 团 不 同 时, 其 红 外 光 谱 也 不 同 该 法 具 有 专 属 性 强 准 确 度 高 的 特 点, 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 对 组 分 单 一 结 构 明 确 的 原 料 药 鉴 别 中 作 为 首 选, 也 特 别 适 合 于 用 其 他 方 法 不 易 区 分 的 同 类 药 物 用 本 法 鉴 别 药 物 时, 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 采 用 标 准 图 谱 对 照 法, 即 参 照 药 典 委 员 会 编 制 枟 药 品 红 外 光 谱 集 枠, 比 较 被 测 药 物 的 红 外 光 谱 图 与 对 照 图 谱 是 否 一 致, 如 果 峰 位 峰 形 相 对 强 度 都 一 致 时, 即 为 同 一 种 药 物 如 阿 司 匹 林 的 鉴 别 方 法 是 本 品 的 红 外 光 吸 收 图 谱 应 与 对 照 的 图 谱 ( 光 谱 集 5 图 ) 一 致 乙 琥 胺 的 鉴 别 方 法 为 本 品 的 红 外 光 吸 收 图 谱 应 与 对 照 的 图 谱 ( 光 谱 集 4 图 ) 一 致 ( 如 不 一 致 时, 可 用 无 水 乙 醇 处 理 后 测 定 ) 枟 美 国 药 典 枠 采 用 对 照 品 比 较 法, 规 定 用 供 试 50

7 第 三 节 鉴 别 试 验 方 法 类 型 品 和 对 照 品 同 时 绘 制 红 外 光 谱, 供 试 品 图 谱 中 的 最 大 吸 收 波 数 应 与 对 照 品 图 谱 一 致 枟 英 国 药 典 枠 则 主 要 采 用 与 标 准 红 外 光 谱 对 比 法, 也 用 对 照 品 对 比 法 如 果 药 物 存 在 多 晶 型 现 象, 且 需 鉴 别 其 有 效 晶 型, 红 外 光 谱 图 谱 可 以 反 映 其 有 效 晶 型 特 点 时, 本 法 又 是 一 种 有 效 而 简 便 易 行 的 鉴 别 方 法 制 剂 中 则 因 辅 料 影 响, 在 提 取 过 程 可 能 导 致 晶 型 变 化, 因 此 一 般 不 采 用 红 外 光 谱 法, 而 采 用 所 受 影 响 因 素 较 少 的 紫 外 可 见 分 光 光 度 法 ( 二 ) 紫 外 光 谱 鉴 别 法 紫 外 光 谱 鉴 别 法 是 通 过 测 定 药 物 在 紫 外 可 见 光 区 (200 ~ 760 nm) 的 吸 收 光 谱 特 征 对 药 物 进 行 鉴 别 的 方 法, 其 适 用 范 围 为 含 有 共 轭 双 键 生 色 团 和 助 色 团 的 药 物 本 法 具 有 一 定 的 灵 敏 度 和 专 属 性, 应 用 范 围 广, 使 用 频 率 高, 专 属 性 远 不 如 红 外 光 谱 法, 但 对 于 已 知 药 物 的 确 认, 仍 然 是 一 种 较 好 的 鉴 别 手 段 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 二 部 中 只 用 紫 外 光 谱 鉴 别 法 鉴 别 的 药 物 很 少, 大 都 与 其 他 方 法 结 合 进 行 鉴 别 常 用 的 紫 外 光 谱 鉴 别 法 有 :1 测 定 最 大 吸 收 波 长, 或 同 时 测 定 最 小 吸 收 波 长 ;2 规 定 一 定 浓 度 的 供 试 液 在 特 定 吸 收 波 长 处 的 吸 光 度 ;3 规 定 几 个 特 定 吸 收 波 长 及 其 吸 光 度 比 值 ( 峰 值 峰 值 比 峰 值 谷 值 比 谷 值 谷 值 比 ) ;4 规 定 几 个 特 定 吸 收 波 长 和 其 吸 收 系 数 ;5 经 化 学 处 理 后, 测 定 其 反 应 产 物 的 吸 收 光 谱 特 征 因 末 端 吸 收 所 受 影 响 因 素 较 多, 在 应 用 紫 外 光 谱 鉴 别 法 鉴 别 时 需 注 意 :1 一 般 不 宜 用 小 于 220 nm 的 波 长 处 的 吸 收 特 征 作 鉴 别 ;2 因 反 应 的 结 构 信 息 少, 一 般 也 尽 量 不 用 单 一 吸 收 峰 作 鉴 别 依 据 ;3 为 提 高 专 属 性, 可 将 上 述 几 个 方 法 结 合 起 来 使 用 如 盐 酸 氯 丙 嗪 的 鉴 别 : 取 本 品, 加 盐 酸 溶 液 ( ) 制 成 每 1 ml 中 含 5 μ g 的 溶 液, 照 紫 外 可 见 分 光 光 度 法 测 定, 在 254 nm 与 306 nm 的 波 长 处 有 最 大 吸 收, 在 254 nm 的 波 长 处 吸 光 度 约 为 0 畅 46 在 建 立 鉴 别 方 法 时, 应 首 先 绘 制 药 物 的 紫 外 吸 收 光 谱, 以 确 定 最 大 吸 收 和 最 小 吸 收 波 长 另 外, 溶 剂 对 紫 外 吸 收 光 谱 往 往 有 显 著 影 响, 所 以 应 考 察 溶 剂 对 紫 外 吸 收 光 谱 的 影 响 根 据 药 物 的 溶 解 性 质 及 溶 剂 的 影 响, 选 择 适 合 的 溶 剂 溶 解 样 品, 常 用 的 溶 剂 有 水 乙 醇 ( 或 甲 醇 ) 盐 酸 溶 液 氢 氧 化 钠 溶 液 等 三 色 谱 鉴 别 法 利 用 不 同 物 质 在 不 同 色 谱 条 件 下, 各 自 色 谱 行 为 ( 比 移 值 或 保 留 时 间 ) 的 不 同, 并 与 对 照 品 在 相 同 条 件 下 进 行 色 谱 分 离, 比 较 其 色 谱 行 为 是 否 一 致 来 鉴 别 药 物 的 真 伪 此 法 操 作 时 间 较 长, 一 般 在 检 查 或 含 量 测 定 项 下 已 采 用 色 谱 法 的 情 况 下, 采 用 此 法 鉴 别 常 用 的 方 法 有 以 下 两 种 ( 一 ) 薄 层 色 谱 鉴 别 法 薄 层 色 谱 法 用 于 鉴 别, 以 比 移 值 和 斑 点 颜 色 作 为 鉴 别 依 据, 来 把 握 供 试 品 与 对 照 品 的 同 一 性 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 有 以 下 要 求 (1) 供 试 品 与 同 浓 度 对 照 品 溶 液 颜 色 ( 或 荧 光 ) 与 位 置 ( Rf ) 应 一 致, 而 且 主 斑 点 大 小 与 颜 色 深 浅 应 大 致 相 同 (2) 供 试 品 溶 液 与 对 照 品 溶 液 等 体 积 混 合, 应 显 示 单 一 紧 密 的 斑 点 (3) 选 用 与 供 试 品 化 学 结 构 相 似 的 药 物 对 照 品 溶 液 与 供 试 品 溶 液 的 主 斑 点 比 较, 两 者 值 应 不 同 51

8 (4) 将 上 种 方 法 项 下 两 种 溶 液 等 体 积 混 合, 应 显 示 两 个 清 晰 分 离 的 斑 点 如 诺 氟 沙 星 的 鉴 别 : 取 本 品 与 诺 氟 沙 星 对 照 品 适 量, 加 三 氯 甲 烷 甲 醇 (1 1) 制 成 每 1 ml 中 含 2 畅 5 m g 的 溶 液, 作 为 供 试 品 溶 液 和 对 照 品 溶 液, 照 薄 层 色 谱 法 试 验, 吸 取 上 述 两 种 溶 液 各 10 μl, 分 别 点 于 同 一 硅 胶 G 薄 层 板 上, 以 三 氯 甲 烷 甲 醇 浓 氨 溶 液 ( ) 为 展 开 剂, 展 开 后, 晾 干, 置 紫 外 光 灯 (365 nm) 下 检 视 供 试 品 溶 液 所 显 主 斑 点 的 位 置 与 荧 光 应 与 对 照 品 溶 液 主 斑 点 的 位 置 与 荧 光 相 同 ( 二 ) 高 效 液 相 色 谱 法 高 效 液 相 色 谱 法 是 用 高 压 输 液 泵 将 具 有 不 同 极 性 的 单 一 溶 剂 或 不 同 比 例 的 混 合 溶 剂 缓 冲 液 等 流 动 相 泵 入 装 有 固 定 相 的 色 谱 柱, 经 进 样 阀 注 入 供 试 品, 由 流 动 相 带 入 柱 内, 在 柱 内 各 成 分 基 于 它 们 在 吸 附 分 配 离 子 交 换 亲 和 力 或 分 子 尺 寸 等 性 质 上 存 在 的 微 小 差 别, 经 过 成 千 上 万 次 的 结 合 交 换 后, 依 次 进 入 检 测 器, 色 谱 信 号 由 记 录 仪 或 积 分 仪 记 录 该 法 具 有 分 析 速 度 快 分 离 效 能 高 自 动 化 等 优 点 被 应 用 到 药 物 的 鉴 别 中 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 一 般 规 定 按 供 试 品 的 含 量 测 定 或 有 关 物 质 项 下 已 采 用 高 效 液 相 色 谱 法 时, 可 按 相 应 色 谱 条 件, 利 用 对 照 品 与 供 试 品 色 谱 峰 与 内 标 物 质 的 保 留 时 间 的 一 致 性 作 为 鉴 别 依 据, 不 必 专 门 增 加 实 验 以 提 高 鉴 别 专 属 性 实 际 操 作 中 还 可 将 供 试 品 溶 液 与 对 照 品 溶 液 等 量 混 合, 进 样 后 出 现 单 一 色 谱 峰 作 为 鉴 别 依 据, 对 多 次 进 样 时 同 一 物 质 在 完 全 相 同 的 色 谱 系 统 中 保 留 时 间 不 一 致 的 情 况 可 作 弥 补 如 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 阿 莫 西 林 采 用 高 效 液 相 色 谱 法 进 行 鉴 别, 其 鉴 别 方 法 为 : 在 含 量 测 定 项 下 记 录 的 色 谱 图 中, 供 试 品 溶 液 主 峰 的 保 留 时 间 应 与 对 照 品 溶 液 主 峰 的 保 留 时 间 一 致 四 生 物 学 鉴 别 法 生 物 学 鉴 别 法 是 利 用 微 生 物 或 实 验 动 物 进 行 鉴 别 的 方 法 主 要 用 于 抗 生 素 生 化 药 物 及 生 物 制 品 的 鉴 别 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 附 录 收 载 有 抗 生 素 微 生 物 检 定 法 肝 素 生 物 测 定 法 胰 岛 素 生 物 测 定 法 洋 地 黄 生 物 测 定 法 等 本 章 小 结 52

9 同 步 测 试 同 步 测 试 一 单 项 选 择 题 1 畅 药 物 的 鉴 别 试 验 的 主 要 目 的 是 ( ) A 畅 判 断 药 物 的 优 劣 B 畅 判 断 药 物 的 真 伪 C 畅 判 断 未 知 物 的 真 伪 D 畅 判 断 药 物 的 疗 效 2 畅 在 水 杨 酸 稀 溶 液, 加 三 氯 化 铁 试 液 1 滴, 即 显 ( ) A 畅 红 色 B 畅 黄 色 C 畅 紫 色 D 畅 蓝 色 3 畅 托 烷 生 物 碱 类 药 物 能 发 生 ( ) A 畅 重 氮 化 偶 合 反 应 B 畅 紫 脲 酸 铵 反 应 C 畅 绿 奎 宁 反 应 D 畅 维 他 立 反 应 4 畅 药 物 结 构 中 含 脂 肪 氨 基, 宜 采 用 的 化 学 鉴 别 法 是 ( ) A 畅 三 氯 化 铁 反 应 B 畅 异 羟 肟 酸 铁 反 应 C 畅 茚 三 酮 呈 色 反 应 D 畅 重 氮 化 偶 合 反 应 5 畅 药 物 分 析 中 最 常 用 的 鉴 别 方 法 是 ( ) A 畅 化 学 鉴 别 法 B 畅 紫 外 可 见 分 光 光 度 法 C 畅 高 效 液 相 色 谱 法 D 畅 薄 层 色 谱 法 二 多 项 选 择 题 1 畅 药 物 鉴 别 试 验 的 项 目 包 括 ( ) A 畅 性 状 B 畅 疗 效 C 畅 一 般 鉴 别 试 验 D 畅 专 属 鉴 别 试 验 2 畅 枟 中 国 药 典 枠 (2010 年 版 ) 收 载 物 理 常 数 有 ( ) A 畅 相 对 密 度 B 畅 旋 光 度 C 畅 折 光 率 D 畅 吸 收 系 数 3 畅 下 列 说 法 正 确 的 是 ( ) A 畅 一 般 鉴 别 试 验 只 能 证 实 是 某 一 种 药 物, 而 不 能 证 实 是 哪 一 类 药 物 B 畅 一 般 鉴 别 试 验 只 能 证 实 是 某 一 类 药 物, 而 不 能 证 实 是 哪 一 种 药 物 C 畅 专 属 鉴 别 试 验 只 能 证 实 是 某 一 类 药 物, 而 不 能 证 实 是 哪 一 种 药 物 D 畅 专 属 鉴 别 试 验 可 以 证 实 是 某 一 种 药 物 4 畅 可 用 荧 光 反 应 鉴 别 的 药 物 有 ( ) A 畅 药 物 本 身 在 可 见 光 下 发 射 荧 光 B 畅 药 物 溶 液 加 硫 酸 呈 酸 性 后, 在 可 见 光 下 发 射 荧 光 C 畅 药 物 和 溴 反 应 后, 遇 可 见 光 下 发 射 荧 光 D 畅 药 物 和 间 苯 二 酚 反 应 后, 经 加 热 可 发 射 荧 光 5 畅 常 用 的 紫 外 光 谱 鉴 别 法 有 ( ) 53

10 A 畅 测 定 最 大 吸 收 波 长, 或 同 时 测 定 最 小 吸 收 波 长 B 畅 规 定 一 定 浓 度 的 供 试 液 在 特 定 吸 收 波 长 处 的 吸 光 度 C 畅 规 定 几 个 特 定 吸 收 波 长 及 其 吸 光 度 比 值 D 畅 经 化 学 处 理 后, 测 定 其 反 应 产 物 的 吸 收 光 谱 特 征 三 问 答 题 1 畅 药 物 鉴 别 试 验 的 项 目 有 哪 些? 2 畅 药 物 鉴 别 试 验 常 用 的 方 法 类 型 有 哪 些? 54

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