Western Blotting 实验原理及应用 免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术, 在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物, 然后利用抗原 - 抗体的特异性反应, 从蛋白混合物中检测出目标蛋白, 从而定量或定性的确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况 Weste
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1 Western Blotting 实验指南 Western Blotting 实验原理及应用 Western Blotting 检测操作手册 Western Blotting Q&A Troubleshooting for Western Blotting 1
2 Western Blotting 实验原理及应用 免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术, 在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物, 然后利用抗原 - 抗体的特异性反应, 从蛋白混合物中检测出目标蛋白, 从而定量或定性的确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况 Western blotting 还可用于蛋白 - 蛋白 蛋白 -DNA 和蛋白 -RNA 相互作用的后续分析, 作为一种廉价 便捷 可靠的研究工具, 将与质谱和蛋白质芯片等技术一起在蛋白质组时代发挥重要作用 Western Blotting 的 protocol 种类繁多, 但大同小异, 基本为上述几个步骤 要得到一个完美的实验结果, 不仅需要优质的抗体, 同时应对整个实验流程和体系进行严格的质量控制, 才能最终达到你的实验目的 影响免疫印迹成败的一个主要因素是抗原分子中可被抗体识别的表位性质 因为涉及到抗原样品的变性, 只有那些识别变性表位的抗体可以与抗原结合 多数多克隆抗体中或多或少含有这种类型的抗体, 所以在免疫印迹中常选用多克隆抗体 第二个影响因素是蛋白原液中抗原的浓度 一些表达量低的蛋白在免疫印迹前常需要通过免疫沉淀, 亚细胞分离等手段富集 2
3 Western Blotting 检测操作手册 一. 实验器材 : 1. 实验器具 : 电泳仪 转膜仪 移液枪, 摇床, 暗盒, 杂交盒, 50 ml 离心管,2/4 ml EP 管 2. 实验试剂 :1 电泳缓冲液, 蛋白样品, 蛋白预染 marker,2 loading buffer, 1% 丽春红,1 PBST( 含 0.1% 的 Tween-20), 5% 脱脂牛奶 ( 溶于 1 PBST), 75% 酒精, 甲醇, 转膜液 (Tris- 甘氨酸 PH8.0) 二. 实验步骤 : 1. 制胶 : 按照分子克隆上面的配方, 依据实验验证蛋白的分子量大小选择制备相应浓度的 SDS-PAGE 胶 2. 蛋白样品预处理 : 已经融化的待检测蛋白样品等体积加入 2 loading buffer,100,5 min( 注意 : 如果是膜蛋白裂解液, 不可进行高温加热操作, 置于 37 培养箱中, 温浴 30 min ) 将加热完毕的样品在室温平衡 1-2 min, 加热后的样品涡旋混匀 30s, 然后进行离心, 在高速离心机上 rpm 2 分钟 按顺序放置在架子上待用 3. 上样 : 从 4 取出蛋白预染 marker, 待溶解后, 按照实验需要和顺序上样 ( 样品上样量 : 以过表达 WB 实验为例, 蛋白样品浓度 >1mg/ml,20μl/ 孔 ) 每块胶上样完毕后需用 2 loading 补齐 marker 和空白的胶孔 (marker 胶孔 内补 5 μl, 空白胶孔内补上和左右孔相同体积 2 loading), 4. 电泳 : 开始设置为恒压 150 V( 大约电流为 300mA) 待前沿 ( 溴酚蓝 ) 进入分离胶 1cm 左右, 将电压调高到 180 V, 根据实验验证的蛋白大小控制电泳时间 5. 膜的活化 : 将膜放在甲醇中, 放置 2 min 6. 转膜 : 本实验采用天能湿转转膜仪 300mA 恒流转移 1h( 客户也可根据自身蛋白大小和实验需要设置转膜电压 / 电流和转膜时间 ) 7. 丽春红预染 : 将已转上蛋白的 PVDF 膜, 用 1% 的丽春红, 预染 2min, 以显示转膜结果 8. 洗膜 : 在杂交盒里倒上 1 PBST 溶液, 将适当大小的 PVDF 膜放入杂交盒中, 在摇床上 80 rpm,5 min 洗膜 然后 关闭摇床, 倒去 1 PBST, 加入甲醇, 40 rpm, 活化 5 min 然后倒出甲醇溶液, 先用 1 PBST 润洗一下, 再用 1 PBST 洗 3 次 每次 80 rpm,5 min 9. 封闭 : 在杂交盒里倒上 1 PBST 溶液, 将由丽春红预染的 PVDF 膜, 在摇床上 80 rpm,5 min 洗膜 ( 洗去丽春红 ), 再换新的 1 PBST 洗 3 次 每次 80 rpm,5 min 随后倒掉 1 PBST, 在杂交盒中用 5% 脱脂牛奶, 水平摇床上 40 rpm 室温封闭 1 h 10. 一抗稀释 : 按照实验要求用 5% 脱脂牛奶稀释一抗 11. 膜的活化 : 在杂交盒里倒上 1 PBST 溶液, 将适当大小的 PVDF 膜放入杂交盒中, 在摇床上 80 rpm,5 min 洗膜 然后关闭摇床, 倒去 1 PBST, 加入甲醇, 40 rpm, 活化 5 min 然后倒出甲醇溶液, 先用 1 PBST 润洗一下, 3
4 再用 1 PBST 洗 3 次 每次 80 rpm,5 min 12. 一抗孵育 : 用微型台式真空泵或滴管等吸尽封闭液, 立即加入稀释好的一抗, 室温或 4 在侧摆摇床上缓慢摇 动孵育一小时 如果一抗孵育一小时效果不佳, 可以 4 缓慢摇动孵育过夜 或根据抗体的说明选择适当的孵育 温度和时间 13. 二抗孵育 : 先用 1 PBST,80 rpm,10min 洗膜 3 次, 按实验要求将稀释好的二抗加入相应的杂交盒中, 在摇床上 40rpm, 反应 30min 14. 洗涤 : 吸除剩余的二抗, 换新鲜的 1 PBST 洗 3 次, 每次 10 min 15. 曝光 : 此过程公司选用的显色系统是 GE Healthcare ECL Plus Western blotting Reagent Pack( 在模式系统 用胶片可检测到 5pg 蛋白量样品, 扫描仪可检测到 40pg 蛋白量样品 ), 采取胶片手工曝光 Western Blotting Q&A Q : Western Blotting 一般用于什么样的实验? A: Western blotting 是一个用于蛋白质分析的常规技术, 它可以从蛋白混合物中检测出目标蛋白, 从而半定量或定性 ( 无法绝对定量 ) 的确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况 另外,Western blotting 还可用于蛋白 - 蛋白 蛋白 -DNA 和蛋白 -RNA 相互作用的后续分析, 并结合组分分离技术, 检测目标蛋白的定位情况, 成为免疫荧光实验的补充 同时, 在后基因组时代, 随着质谱和蛋白质芯片等技术的不断完善, 作为一种廉价 便捷 可靠的研究工具,Western blotting 将与其他技术一起相互配合, 发挥更重要的作用 Q : Western Blotting 的实验结果如何优化? A: Western Blotting 由于实验步骤较多, 每一步操作都会对最终结果产生影响 样品制备时, 样品量多少非常重要, 如果目标蛋白的绝对量较少, 则需通过组分分离 IP 等方法进行富集 ; 上样量应适中, 过多会导致信号过强, 分辨率降低, 过少会导致信号过弱 电泳时, 应选择合适的胶浓度和电压电流参数, 确保蛋白有效分离, 条带清晰整齐 转膜时, 应根据蛋白大小, 选择合适的转膜体系及电流参数和时间, 通过调整缓冲液成分, 提高转膜效率及蛋白与膜的结合力 封闭时, 应根据实际情况, 选择合适的封闭物和缓冲液, 以及封闭液浓度和封闭时间, 以降低非特异性反应, 达到最高的信噪比 选择抗体时, 有条件的话可以尝试多种抗体 ( 单抗 多抗, 甚至可以使用多种抗体联用 ), 不同的稀释比例 反应温度和时间, 以确定一个最佳的组合 显色时, 可以尝试不同灵敏度的显色液以及信号采集系统, 力争获得分辨率 对比度和区分度最佳的结果 Q: 如何较好地设置 Western Blotting 内参? A: 内参即是内部参照, 对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白, 它们在各组织和细胞中的表达相对恒定, 在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物 其作用是校正蛋白定量 上样过程中存在的实验误差, 保证实验结果的准确性 在 Western-Blotting 中使用内参其实就是在 WB 过程中另外用内参对应的抗体 4
5 检测内参, 这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达, 由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定, 借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差, 这样半定量的结果才更为可信 此外使用内参可以作为空白对照, 检测蛋白转膜情况是否完全 整个 Western-Blotting 显色或者发光体系是否正常 常用的蛋白内参有 GAPDH 和细胞骨架蛋白 beta-actin 或 beta-tubulin 一般要选择一个在处理因素作用的条件下蛋白含量不会发生改变的蛋白作内参 为了让实验更加严谨有更说服力都要设计对照实验, 对照分为 : 阳性对照 ( 最好有标准品 ( 如 β-actin GAPDH 或阳性血清 ); 阴性对照 ( 测血时用相应小鼠未免疫血清 ( 即正常血 ); 空白对照 ( 不加一抗, 用 PBS 代替 ); 无关对照 ( 用无关抗体 ) Q: 我该选择什么样的抗体? A: 由于抗体及公司种类繁多, 针对同一种蛋白常常会有多种不同的抗体 首先应根据自己的实验需要 (WB,IF, IP,IHC 等 ) 进行筛选, 不同实验目的的抗体有时无法通用 ( 参照抗体说明书 ); 其次, 可以参照已发表文献中所用抗体, 或向已用实验者进行征询 ; 如果目标蛋白无相应的商业化抗体, 或商业化抗体效果均不佳, 可考虑寻找合适的抗体公司进行定制 常见问题及解决办法 问题 可能原因 可采取的措施 电泳条带呈笑脸状 凝胶不均匀冷却, 中间冷却不好 ; 电泳系统温度偏高 重新制胶, 电泳时电压可适当降低 可能是由于装置不合适, 特别可能是 电泳条带呈皱眉状 凝胶和玻璃挡板底部有气泡, 或者两 重新电泳, 注意气泡问题 边聚合不完全 电泳条带拖尾 样品溶解不好 重新溶解样品, 上样前可离心 电泳条带纹理 ( 纵向条纹 ) 样品中含有不溶性颗粒 重新溶解样品, 上样前可离心 电泳条带偏斜 电极不平衡或者加样位置偏斜 确保电极水平 电泳条带两边扩散 加样量过多 减少上样量 膜封闭不够 延长封闭的时间 ; 选择更加适合的封闭液 一抗稀释度不适宜 对抗体进行滴度测试, 选择最适宜的抗体稀释度 Western blot 结果中背景较高 一抗孵育的温度偏高 建议 4 结合过夜 选择的膜容易产生高背景 一般硝酸纤维素膜的背景会比 PVDF 膜低 膜在实验过程中干过 实验过程中要注意保持膜的湿润 检测时曝光时间过长 减少曝光时间 5
6 Western blot 结果中杂带较多 Western blot 结果中无信号或显示信号弱仅局部区域有信号 目的蛋白有多个修饰位点 ( 磷酸化位点 糖基化位点 乙酰化位点等 ), 本身可以呈现多条带 目的蛋白有其它剪切本样本处理过程中目的蛋白发生降解上样量过高, 太敏感一抗特异性不高一抗不纯一抗或者二抗浓度偏高检测样本不表达目的蛋白检测样本低表达目的蛋白转移不完全或过转移抗体不能识别测试种属的相关蛋白一抗孵育时间不足二抗与一抗不匹配洗膜过度转膜不完全 查阅文献或进行生物信息学分析, 获得蛋白序列的修饰位点信息, 通过去修饰确定蛋白实际大小 查阅文献或生物信息学分析可能性 加入蛋白酶抑制剂 ; 样本处理时在冰上操作 适当减少上样量 重新选择或制备高特异性的抗体 纯化抗体降低抗体浓度 选择表达量高的细胞作为阳性对照, 用于确定检测样本是否为阴性 提高上样量, 裂解液中注意加入蛋白酶抑制剂 可以用丽春红染膜并结合染胶 ( 考马斯亮蓝 ) 后确定条带是否转至膜上或转移过头 ; 适当调整转膜的时间和电流 购买抗体前应当认真阅读抗体说明书, 确定其是否能够交叉识别测试种属的对应蛋白 建议 4 结合过夜 选择针对一抗来源的种属的抗体 洗膜时间不宜过长, 加入的去垢剂不宜过强或过多, 建议使用 0.1% 的弱去垢剂 Tween-20 确保在胶和膜之间没有气泡根据厂商指导将膜彻底浸润避免徒手操作, 应配戴手套, 使用镊子更换新膜膜过多时, 应避免相互堆叠 6
Western Blotting 实验原理及应用 免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术, 在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物, 然后利用抗原 - 抗体的特异性反应, 从蛋白混合物中检测出目标蛋白, 从而定量或定性的确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况 Weste
艾比玛特生物医药 ( 上海 ) 有限公司 Western Blotting 实验指南 Western Blotting 实验原理及应用 Western Blotting 检测操作手册 Western Blotting Q&A Troubleshooting for Western Blotting 1 Western Blotting 实验原理及应用 免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术, 在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物,
>500 5 第二部分 : 蛋白质的印迹和检测蛋白质的印迹和检测包括五个步骤 : 转膜 封闭 孵育一抗 孵育二抗 蛋白检测 ( 显色 ) 和分析 1. 转膜蛋白质印迹首先是要将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体 ( 膜 ) 上, 即转膜 最常用的固相载体 ( 膜 ) 主要是硝酸纤维素 (NC)
WB 实验基本原理 免疫印迹检测法 (Western blotting), 又称蛋白质印迹, 是分子生物学 生物化学和免疫遗传学等生命科学研究中常用的的一种实验方法, 其基本原理是通过 SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳区分待测样品不同的组分, 再在电流的作用下, 使蛋白质从凝胶转移至固相载体 ( 膜 ) 上, 通过特异性抗体作为探针, 对靶抗原蛋白质进行检测, 通过分析特异性反应的位置和强度获得特定蛋白质在所分析的细胞或
Western Blot 实验报告 项目名称 : 人皮肤成纤维细胞 sirna 瞬转 WB 验证 客户姓名 : 石小玉 报告时间 : 2013 年 08 月 26 日 报告人 : 蒋楠 复核人 : 如您对本报告有异议, 请于 10 个工作日内联系我们 杭州赫贝科技有限公司技术部
Western Blot 实验报告 项目名称 : 人皮肤成纤维细胞 sirna 瞬转 WB 验证 客户姓名 : 石小玉 报告时间 : 2013 年 08 月 26 日 报告人 : 蒋楠 复核人 : 如您对本报告有异议, 请于 10 个工作日内联系我们 1. 实验材料人皮肤成纤维细胞 CCC-ESF-1: 中国医学科学院基础医学研究所基础医学细胞中心 DMEM-H 培养基,Lipofectamine
材料 方法
生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人
Protein Labeling and Detection
ECL plex Product Specialist 1/ Western Blot 2/ Western Blotting- PI 3/ Western Blotting 1. 2 1 2. 3. 4. Y 3 4 5. 4/ 1. SDS- (SDS-PAGE) SDS ( β- ) --SDS 5/ SDS-PAGE - - - (Tris-HCL ph 6.8) glycine/chloride
生命科学研究 房 蓓 武泰存 王景安 以玉米沈单 号为材料 用溶液培养的方法研究了缺锌 低锌和正常供锌对玉米生长发育的影响 进一步明确了一定量低锌比缺锌对玉米的伤害更大 并对其 同工酶谱及蛋白质表达进行了分析 结果表明 一定浓度的低锌培养使玉米生长受抑及受害最重 且地上部分比地下部分更敏感 低锌和缺锌处理时 种同工酶的酶谱和蛋白表达与正常供锌时均有明显的差异 尤其在一定量低锌浓度时 有些同工酶的表达增强或被特异性诱导
蛋白上样量的归一化 在同一张膜上比较不同泳道上的蛋白条带信号时, 需要知道每条泳道中总的蛋白上样量 最好的方式是 : 将感兴趣的蛋白与表达量稳定的看家蛋白如 actin 的蛋白量关联, 通过这样的方式, 可以比较不同泳道中的蛋白表达量的差异 归一化也可以消除不同泳道间上样量不同所带来的信号差异 (
厌倦了 Yes Or No 的结果? 定量 Western Blotting 带来全新体验! 对于一些常规的 Western blotting 应用, 有或无 的结果往往就可以满足实验要求了 然而随着科研水平的发展和进步, 以及对实验结果要求的不断提高,Western blotting 不再局限于定性的结果, 而是向着定量, 并且是高精确定量进步 高质量的 Western blotting 试剂,
张红丽 等 部分功能域基因的原核表达与分析 第６期 发表序列 ＡＹ８１９６５０ 同源性为 １００ 与国外 １０ 株 同源性为 ９８畅 ８ 有 １３ 个碱基发生了突 变 其中 ４ 个是有意义的突变 这 ４ 个有意义的 突变分别为第 ２５７ 位 Ｔ Ｃ 第 ５０５ 位 Ａ Ｃ 第 ９０８ 位 Ａ Ｇ 第 １０１２ 位 Ｇ Ｃ 图 ４ 这些差异可 能是捻转血矛线虫株间存在地域差异所致 ２畅 ５ ＨＰＳ 原核表达与鉴定
兽医临床诊断学实验指导
兽 医 临 床 诊 断 学 实 验 指 导 河 北 科 技 师 范 学 院 动 物 科 学 系 临 床 兽 医 学 实 验 室 2009 年 2 月 目 录 学 生 实 验 守 则... 3 实 习 一 动 物 的 接 近 保 定 和 基 本 检 查 法...4 实 习 二 临 床 基 本 检 查 法 及 一 般 检 查...10 实 习 三 循 环 系 统 的 临 床 检 查...15 实 习 四
生物技术通报 材料 方法
生物技术通报 高曰文 朱耀明 王艳林 朱晨宇 秦烨 胡汉卿 韩钰 旨在探讨盐酸普鲁卡因 对人结肠癌 细胞 基因甲基化及表达的影响 应用巢式双重 甲基化特异性聚合酶链反应 检测盐酸普鲁卡因处理前后 细胞中 基因启动子的甲基 化水平 逆转录 聚合酶链反应 和蛋白印迹技术观察 细胞内 基因表达情况 检测发现人结肠癌 细胞中 基因存在甲基化 经盐酸普鲁卡因处理能够使 基因甲基化水平下降 和蛋白印迹分析结果显
幻灯片 1
碧云天 Western Blot 检测服务介绍 Western Blot Services by Beyotime 碧云天网站 微信公众号 碧云天生物技术 /Beyotime Biotechnology 订购热线 :400-168-3301 或 800-8283301 技术咨询 :info@beyotime.com 技术服务 :service@beyotime.com 网址 :http://www.beyotime.com
12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL
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( )2017 57 5JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2017,Vol.57No.5 11 LY294002, (, 330006) : LY294002 PI3K/AKT 0 10 15 20 25 30μmol L -1 LY294002(LY294002 ) A549,PBS CCK8 LY294002 A549 ; Westernblot
目 弗德 物 WB 录 1 Western Blot 简介 Western Blot 原理 Western Blot 优点 Western Blot 应用 Western Blot 成功要素 Western Blo
Western Blot 应用操作手册 杭州弗德 物科技有限公司 目 弗德 物 WB 录 1 Western Blot 简介... 1 1.1 Western Blot 原理... 1 1.2 Western Blot 优点... 1 1.3 Western Blot 应用... 1 1.4 Western Blot 成功要素... 1 2 Western Blot 基本流程... 2 2.1 蛋白样品的提取...
动物学
2007 5 1 2 2..2 3..3 4..4 5 6 6..12 1...15 1 1 1 2 3 4 2 1 2 3 4 1 2 1 1 2 3 1% 4 70% 5 0.05 0.2% 6 2 2 1 7 10% 3 5% 2 0.3 5% 3 70 80% 4 5 90% 40% 9 1 80% 70% 6 40% 15 5 1 12 24 70% 70% 7 70% 2% 1 2 3
05Cv1.mps
第 三 章 皮 肤 病 的 防 治 和 护 理 学 习 要 点 皮 肤 病 的 预 防 不 同 的 皮 肤 病 要 采 取 相 应 的 预 防 措 施, 多 数 皮 肤 病 要 通 过 去 除 病 因, 避 免 诱 发 因 素, 切 断 传 播 途 径 等 措 施 来 预 防 皮 肤 病 的 治 疗 了 解 内 服 药 物 的 适 应 证 和 不 良 反 应, 掌 握 外 用 药 物 的 性 能 和
细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应
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蛋白质相关产品选择指南 在生物体内, 蛋白质扮演着构筑生命大厦的 砖块 角色, 随着破译生命密码的人类基因组计划进入尾声, 一个以蛋白质为研究重点的 后基因组时代 已经拉开序幕, 蛋白质将是今后的重点研究方向之一 从 2005 年开始,TIANGEN 公司陆续推出蛋白系列相关产品, 包括抗体, 蛋白质分子量标准, 蛋白质显色试剂, 蛋白胶快速染色液 蛋白质定量试剂盒等, 力争为蛋白质学研究技术的不断进步和完善发挥力量
1549 1. 2. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 50% 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 1. 2. 1 21/3 1/3 15 35 20 30 15 20 3 200 400cm 2 15 25 20 30 1 15 20
1548 1. 2. / 3. 4. 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 1. 2. 3. 4. 0.05 0.2mA/cm 2 0.02 0.03mA/cm 2 5. 6. 15 20 1 10 20 7. 8. 9. 1549 1. 2. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 50% 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 1. 2. 1 21/3 1/3
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
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蛋白印迹技术讲座 WB Michael Wong 王士奇 Scientific Support Specialist 科学支援专家 Abcam (Hong Kong) Ltd 讲座内容概览 1. 什么是 western blotting? 2. 实验程序 3. 常见问题和解决方法 什么是 western blotting? 用电泳把细胞或组织蛋白作质量分离 Anti-GAP43 antibody -
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
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蛋白穿越重现之旅 Western Blot 技术 北京全式金生物技术有限公司 Western Blot 的起源和应用及原理 Western Blot 实验流程详解 Western Blot 实验中的常见问题分析 Western Blot 蛋白质印迹法 又称免疫印迹试验, 它是分子生物学 生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法 基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色 通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息
幻灯片 1
蛋白穿越重现之旅 Western Blot 技术 Western Blot 的起源和应用及原理 Western Blot 实验流程详解 Western Blot 实验中的常见问题分析 Western Blot 的起源 应用及原理 Western Blot 实验流程详解 Western Blot 实验中的常见问题分析 Western Blot 起源 Renart, J., J. Reiser, G.
材料與方法
10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20
國防大學國防醫學院生理學研究所碩士論文
1. 6-8 Lewis 20 5 4 2. (dark adaptation) 24 (5A) 3. 24 (6) 1, 6, 12, 24 800-900 lux (dark recovery) 24 (5B) 1. 6-8 Lewis 20 5 4 2. (dark adaptation) 24 (5A) 3. 24 1, 6, 12, 24 800-900 lux (dark recovery)
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骨 有 明 訊 肌 動 蛋 白 絲 與 細 胞 形 態 關 係 之 研 究 科 別 : 生 物 科 第 48 屆 科 學 展 覽 北 二 區 佳 作 作 者 : 呂 苹 瑋 范 競 勻 指 導 老 師 : 陳 季 瑄 老 師 壹 摘 要 本 研 究 以 人 類 的 子 宮 頸 癌 細 胞 (HeLa cell) 為 細 胞 骨 架 的 觀 察 對 象, 經 過 培 養 與 繼 代, 利 用 免 疫
Western blotting 实验详细步骤 : 一 蛋白样品的制备 ( 蛋白抽提 ) 1. 培养细胞蛋白样品的制备 (1) 细胞培养至 80% 左右密度时, 以含 0.05% 胰蛋白酶 (AR1007) 消化经细胞刮处理, 细胞经预冷的 PBS(AR0030) 漂洗两次,3000 g/min 离
WB 实验流程 培养细胞总蛋白提取试剂 \ 哺乳动物组织总蛋白提取试剂 蛋白抽提 细菌总蛋白提取试剂 细胞胞浆和胞核蛋白提取试剂 细胞真核膜蛋白提取试剂盒细胞线粒体提取试剂盒红细胞裂解液快速沉淀和浓缩蛋白试剂盒 蛋白定量 BCA 蛋白定量试剂盒微量 BCA 蛋白定量试剂盒考马斯亮蓝增强型蛋白定量试剂盒 蛋白酶抑制剂 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液 上样 电泳 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 SDS-PAGE
Microsoft Word - 蛋白质Western Blotting技术手册.doc
蛋白免疫印迹杂交 (Western Blot) 技术手册 蛋白免疫印迹杂交 (Western Blot WB) 是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离, 再转移到杂交膜 (blot) 上, 然后通过一抗 / 二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法 WB 是进行蛋白质分析最流行和成熟的技术之一 本指南讨论 Western Blot 操作方法及常见问题分析, 有助于成功完成 WB A 蛋白样本提取制备
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
SurePAGE TM 10 8 预制胶 版本 : Ⅰ 简介 1 Ⅱ 凝胶选择指导 2 Ⅲ 兼容的电泳槽 4 Ⅳ 预制胶使用简介 4 Ⅴ 凝胶染色 9 Ⅵ Western Blot 操作步骤.. 10 Ⅶ Dot Blot 操作步骤 11 Ⅷ 凝胶实例 12 Ⅸ 问题分析及解决方法 13
SurePAGE TM 10 8 预制胶 版本 : 02018 Ⅰ 简介 1 Ⅱ 凝胶选择指导 2 Ⅲ 兼容的电泳槽 4 Ⅳ 预制胶使用简介 4 Ⅴ 凝胶染色 9 Ⅵ Western Blot 操作步骤.. 10 Ⅶ Dot Blot 操作步骤 11 Ⅷ 凝胶实例 12 Ⅸ 问题分析及解决方法 13 X 相关产品和订购信息 14 I. 简介金斯瑞 SurePAGE 预制胶是 Express Plus
11. SDS 12. 过硫酸胺 (AP) 13. Tris base (FW:121.14) 14. 浓盐酸 15. TEMED (N,N,N N 四甲基乙二胺 ) 注 :TEMED 催化过硫酸铵形成自由基而加速两种丙稀酰胺的聚合 ph 太低时, 聚合反应受到抑制 16. Tris-HCl 17.
Western Blot 宗伟, 程赛凤, 马斯琦, 熊立仲 * 作物遗传改良国家重点实验室, 华中农业大学, 武汉 * 通讯作者邮箱 :lizhongx@mail.hzau.edu.cn 引用格式 : 宗伟, 程赛凤, 马斯琦, 熊立仲. (2018). Western Blot. Bio-101 e1010130. Doi: 10.21769/BioProtoc.1010130. How to
关于western blot原理和常见故障分析
关于 western blot 原理和常见故障分析 关于 western blot 原理 : 通过电泳区分不同的组分, 并转移至固相支持物, 通过特异性试剂 ( 抗体 ) 作为探针, 对靶物质进行检测, 蛋白质的 Western 印迹技术结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定的特异敏感等多种特点, 可检测到低至 1~5ng( 最低可到 10-100pg) 中等大小的靶蛋白 一 抗原的选择和制备 A:
Ps22Pdf
, 90, 6000 t, 1333 ha,, 500 600 t,, 131.3 ha,,,,,,,,,, ,, 9 10, 11 12, 3 4,,,,, 0.067ha 500 1000kg,, 0.067ha 2000 3000kg, 4000 5000kg,,,,,,,,,,,,,,,, ,, ( ),,,,, : 1.,,,,,,,,,,,,, 2., 11, 23 31 , 7, 37,,,
2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告
PCR PCR PCR RT-PCR PCR (Polymerase Chain Reaction,PCR) 80 DNA, DNA PCR PCR PCR DNA PCR -- -- DNA DNA 93 DNA PCR DNA DNA ( ) DNA 55 DNA DNA -- TaqDNA dntp DNA -- -- PCR PCR DNA DNA Y (1 X) n Y DNA X (Y)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 40 94 88 82 77 72 67 62 57 53 48 44 40 37 33 29 26 23 20 17 14 11 8 39 94 88 82 77 71 66 61 57 52 48 44 40 36 32 28 25 22 18 15 12 9 7 38 94 88
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知 识 目 标 : 了 解 药 物 鉴 别 的 意 义 学 习 目 标 理 解 药 物 鉴 别 试 验 的 项 目 掌 握 药 物 鉴 别 试 验 的 常 用 方 法 能 力 目 标 : 能 熟 练 应 用 药 物 鉴 别 的 常 用 方 法 对 药 物 进 行 鉴 别 第 一 节 概 述 药 物 的 鉴 别 试 验 是 根 据 药 物 的 组 成 分 子 结 构 和 理 化 性 质, 采 用 化
校园之星
x x x x x x C H N O V x B x x x x S S x mm cm cm cm cm x x x x x x x x A A B X B B ml x x B
westernC2
Western Blotting 实验操作指南 2015 年 3 月修订版 提高实验效率! 目录 Western Blotting 检测的操作方法及注意事项 1. 电泳 (SDS-PAGE) 2. 转膜 3. 封闭 4. 一抗反应 5. 二抗反应 6. 检测 ( 化学发光法 ) Troubleshooting Western Blotting 关联试剂 HRP 底物 (Luminol) 发光 HRP
LYC239A.S72
第 三 章 黄 酒 酿 造 工 艺 黄 酒 是 我 国 的 民 族 特 产 和 传 统 食 品, 也 是 世 界 上 最 古 老 的 饮 料 酒 之 一, 是 以 谷 物 为 主 要 原 料, 利 用 酒 药 麦 曲 或 米 曲 中 含 有 的 多 种 微 生 物 的 共 同 作 用, 酿 制 而 成 的 发 酵 酒 第 一 节 原 料 和 辅 料 黄 酒 生 产 的 主 要 原 料 是 酿 酒 用
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
Odyssey Western Protocol 目 录 Ⅰ. 需要的试剂 Ⅱ. Western 检测方法 Ⅲ. 双色检测指南 Ⅳ. 膜的 Stripping Ⅴ. Western 检测优化 Ⅵ. 常用提示..
Odyssey 近红外双色激光成像系统 Western Blot Protocol ( 中文版 ) 基因有限公司 2007 年 1 月 Odyssey Western Protocol 目 录 Ⅰ. 需要的试剂... - 1 - Ⅱ. Western 检测方法... - 2 - Ⅲ. 双色检测指南... - 4 - Ⅳ. 膜的 Stripping... - 4 - Ⅴ. Western 检测优化...
附件四：作品送展表（夾於作品說明書第一頁，請勿裝訂）
嘉 義 市 第 31 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 生 活 與 應 用 科 學 科 組 別 : 國 小 組 作 品 名 稱 : 果 真 有 酵 - 水 果 酵 素 的 應 用 關 鍵 詞 : 水 果 酵 素 環 保 編 號 : 1 摘 要 本 研 究 主 要 的 目 的 是 蒐 集 常 見 的 水 果, 利 用 多 餘 的 果 皮 和 剩 餘 的 果 肉 製 造
Method
PfNPC 5% O 10% AB 4, RPMI 5% CO 2 37 5 100% 30 sec 10% Giemsa 15 mins 100x oil-immersion lens parasitemia parasitemia 10 15% Parasitemia multiple invasion 4 Panel A B C parasitemia parasitemia 2% *Parasitemia
去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶
![去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶](/thumbs/42/23090277.jpg "去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶")
第 一 节 细 胞 培 养 的 相 关 技 术 1 细 胞 的 复 苏 概 述 复 苏 细 胞 要 求 快 速 融 化 的 手 段, 这 样 可 以 保 证 细 胞 外 结 晶 在 很 短 的 时 间 内 即 融 化 避 免 由 于 缓 慢 融 化 使 水 分 渗 入 细 胞 内 形 成 胞 内 再 结 晶 对 细 胞 造 成 损 害 用 品 培 养 液 吸 管 离 心 管 培 养 瓶 步 骤 [1]
20.?? (25) 21.? (26) 22.?? (26) 23.?? (27) 24.?? (28) 25.??? (29) 26.??? (29) 27.?? (31) 28.?? (32) 29.?? (33) 30.?? (34) 31.??? (35) 32.?? (35) 33.?
1.?? ( 3) 2.? ( 4) 3.?? ( 5) 4.? ( 6) 5.? ( 7) 6.? ( 8) 7.? (10) 8.?? (13) 9.??? (14) 10.? (15) 11.? (16) 12.?? (16) 13.? (18) 14.?? (19) 15.??? (21) 16.?? (21) 17.? (22) 18.? (23) 19.? (24) 1 20.?? (25)
目 录 第 一 章 实 验 室 安 全 管 理 概 论... 1 第 二 章 消 防 安 全... 2 第 三 章 电 气 安 全... 5 第 四 章 仪 器 设 备 安 全... 10 第 五 章 环 境 安 全... 12 第 六 章 化 学 品 放 射 性 物 品 安 全... 16 第 七
实 验 室 安 全 知 识 汇 编 编 委 会 主 任 : 郑 爱 榕 编 委 会 副 主 任 : 郭 祥 阳 陈 丽 丹 编 委 会 成 员 : 许 鹭 芬 张 朝 霞 郑 雪 红 林 智 勇 方 旅 平 责 任 编 辑 : 方 旅 平 责 任 校 对 : 黄 妙 琴 厦 门 大 学 海 洋 与 环 境 学 院 目 录 第 一 章 实 验 室 安 全 管 理 概 论... 1 第 二 章 消 防
第六章 肠梗阻
第 六 章 肠 梗 阻 第 一 节 概 述 肠 内 容 物 不 能 顺 利 通 过 肠 道, 称 为 肠 梗 阻 肠 梗 阻 是 外 科 常 见 的 急 腹 症 之 一, 诊 断 困 难, 发 展 快 病 情 重, 常 需 急 症 处 置 仅 次 于 急 性 阑 尾 炎, 胆 道 疾 病, 占 第 三 位 病 情 严 重 的 绞 窄 性 肠 梗 阻 的 死 亡 率 仍 达 10% 左 右 一 分 类
WB画册_180725
访问我们的官网 :www.yeasen.com, 了解更多信息 免疫印迹产品 选择指南 Western Blot Selection Guide 上海翊圣生物科技有限公司 Yeasen Biotech Co., Ltd. 上海市浦东新区国际医学园区天雄路 166 号 1 号楼 302 Service Hotline: 400-6111-883 Web: www.yeasen.com Technical
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产 品 明 细 及 功 效 [ 名 称 ]: 都 市 翡 翠 红 枣 粉 (100 克 ) [ 功 效 ]: 瘦 身, 美 白, 防 止 衰 老, 肌 肤 红 润 [ 原 理 ]: 红 枣 有 促 进 肠 蠕 动 的 功 能, 因 此 可 以 预 防 便 秘, 还 有 一 定 的 减 肥 作 用 红 枣 富 含 美 白 因 子, 经 常 使 用 能 让 暗 黄 的 肌 肤 加 速 美 白, 有 效
Microsoft Word - 广州市番禺区2014年新型农村合作医疗管理办法实施细则.doc
广 州 市 番 禺 区 人 力 资 源 和 社 会 保 障 局 文 件 番 人 社 2014 2 号 广 州 市 番 禺 区 人 力 资 源 和 社 会 保 障 局 关 于 印 发 2014 年 新 型 农 村 合 作 医 疗 实 施 细 则 的 通 知 各 有 关 单 位 : 现 将 广 州 市 番 禺 区 2014 年 新 型 农 村 合 作 医 疗 实 施 细 则 印 发 给 你 们, 请 认
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生 活 中 来 的 健 康 手 册 ( 中 ) 黄 宁 斌 编 著 中 国 少 年 儿 童 出 版 社 书 名 生活中来的健康手册 中 作 者 黄宁斌 出 版 社 中国少年儿童出版社 发行许可证号 ２００６ 第０２５３９６号 出版日期 ２００６年２月第１版 ＩＳＢＮ ７ ５００７ ３３１７ ４ Ｇ ２５０９ 定 价 ５ ００元 目 录 第 二 篇 药 膳 与 食 疗 篇 一 药 膳 与 食 疗 原
写 花 都 区 新 型 农 村 合 作 医 疗 特 殊 情 况 报 销 申 请 表, 经 村 镇 区 三 级 审 核, 同 意 后 方 可 办 理 报 销 ; 在 医 疗 机 构 住 院 者, 出 院 后 3 个 月 内 仍 未 办 理 报 销, 不 再 予 以 办 理 报 销 2. 住 院 医 疗
广 州 市 花 都 区 新 型 农 村 合 作 医 疗 就 医 指 南 一 参 加 新 型 农 村 合 作 医 疗 的 对 象 花 都 区 农 业 户 口, 以 户 为 单 位 自 愿 参 加 已 参 加 城 镇 职 工 基 本 医 疗 保 险 或 城 镇 居 民 基 本 医 疗 保 险 ( 以 下 简 称 职 工 医 保 和 居 民 医 保 ) 的 参 保 人, 不 能 再 参 加 新 型 农 村
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
kidney GCT
糖尿病肾病轻度症状 夜尿增多 如果糖尿病病人发现自己的尿液出现异常 如尿液泡沫过多 颜 色浑浊 应立刻到医院检查肾脏是否出现了问题 正常情况下 尿液泡沫在便池一会儿就会消失 颜色在喝水少的情况下 才有 发黄 浑浊的现象 假如不是这样 很有可能是肾脏疾病的早期 症状 糖尿病首先伤害的就是血管 而肾脏内血管密集 所以从 病人患上糖尿病的那一天开始 肾脏就被损及了 糖尿病患者都 有潜在的肾病 只不过有的人患病时间长
(Microsoft Word - \254\354\256i\(1\).doc)
神 奇 的 滅 孑 師 太 ~~ 探 討 日 常 生 活 常 用 水 溶 液 及 植 物 對 於 消 滅 孑 孓 之 成 效 壹 研 究 動 機 春 眠 不 覺 曉, 處 處 蚊 子 咬, 夜 來 巴 掌 聲, 蚊 子 死 多 少? 夏 天 即 將 到 來, 蚊 子 的 惡 夢 一 直 困 擾 著 我 們 了, 班 上 同 學 舉 起 手 腳 指 著 一 個 一 個 紅 豆 冰 咒 念, 真 是 令
煤 炭 学 报 仪器与药品 黏土矿物的提纯 黏土样品的制备 红外光谱 分析 射线衍射 分析 射线光电子能谱 分析
张明青 刘炯天 单爱琴 刘汉湖 为了深刻认识煤泥水中 同黏土矿物颗粒之间的相互作用 笔者用 溶液在不同 值条件下分别同高岭土和蒙脱土作用 测定黏土作用前后的 射线衍射 红外光谱和 射线光电子能谱 实验证实了在 溶液中 在黏土表面以静电形式吸附 在 溶液中 以 沉淀和静电形式吸附 此外 在 以上的溶液中还可能存在一 羟基络合吸附形式 提出了 沉淀吸附和一羟基络合吸附的吸附过程模式 黏土颗粒表面的 沉淀使颗粒间形成的非选择性
9. 条 件 的 摸 索 10. 方 法 的 介 绍 11. 结 果 分 析 一 原 理 1975 年,Southern 建 立 了 将 DNA 转 移 到 硝 酸 纤 维 素 膜 (NC 膜 ) 上, 并 利 用 DNA-RNA 杂 交 检 测 特 定 的 DNA 片 段 的 方 法, 称 为 S
Western Blot 详 解 ( 原 理 分 类 试 剂 步 骤 及 问 题 解 答 ) Western 免 疫 印 迹 (Western Blot) 是 将 蛋 白 质 转 移 到 膜 上, 然 后 利 用 抗 体 进 行 检 测 对 已 知 表 达 蛋 白, 可 用 相 应 抗 体 作 为 一 抗 进 行 检 测, 对 新 基 因 的 表 达 产 物, 可 通 过 融 合 部 分 的 抗 体
上海浦~1
上 海 浦 发 银 行 参 与 高 等 职 业 教 育 人 才 培 养 年 度 报 告 ( ) 一 校 企 合 作 概 况 ( 一 ) 企 业 简 介 上 海 浦 东 发 展 银 行 股 份 有 限 公 司 ( 以 下 简 称 : 浦 发 银 行 ) 是 1992 年 8 月 28 日 经 中 国 人 民 银 行 批 准 设 立 1993 年 1 月 9 日 开 业 1999 年 在 上 海 证 券
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UCallM 实验技术手册 NO.4 --Western Blot 专题 您的需求, 我们的追求 Your needs, our career. 细胞免疫技术交流群 :212421479 1 2 目录 第一部分试剂配方...4 第二部分操作流程图...7 第三部分实验操作...7 一 实验原理... 7 二 蛋白制备及浓度测定... 8 1 蛋白制备... 8 2 蛋白浓度测定... 12 三 凝胶电泳...
11JR3.mps
模 块 三 饲 料 及 其 加 工 利 用 模 块 目 标 了 解 饲 料 的 有 关 概 念 及 国 际 饲 料 分 类 中 八 大 类 饲 料 的 分 类 标 准 ; 掌 握 青 饲 料 粗 饲 料 青 贮 饲 料 能 量 饲 料 蛋 白 质 饲 料 矿 物 质 饲 料 饲 料 添 加 剂 的 营 养 特 性 和 利 用 特 点 ; 掌 握 各 类 饲 料 中 常 用 饲 料 原 料 的 种 类
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蛋白质电泳 目的 : 分离蛋白质混合物 蛋白质等电点 张四洋 蛋白质分子量 中国医科大学三部 一维电泳 (One dimensional gel electrophoresis,1de), 垂直板十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 二维电泳 (two-dimensional gel,2de), 又称双向电泳, 包括第一向等电聚焦电泳 (isoelectric focusing,ief)
5. Phos-tag TM 方法的原理 注意 :BTL-111 有很大的亲水空间, 所以在免疫印迹实验中灵敏度最高 6. Phos-tag TM 方法需配置的溶液 溶液 A:Tris 盐缓冲液 (10 TBS,1L,pH7.5) # Tris(0.10mol/L) 12.1g # NaCl(1.0
免疫印迹法检测磷酸化蛋白 使用生物素标记的 Phos-tag TM 进行化学发光法检测 Ver.6(2012/1) 1. 背景磷酸化是翻译后修饰的一种重要形式, 与目标蛋白的功能调解 定位和特异性结合有关 检测磷酸化蛋白方法 ( 比如磷酸蛋白质组学 ) 在评估生物多样性和生理状态方面是非常重要的 2002 年,Koike 教授的团队 ( 日本广岛大学 ) 发现了一种双环的金属复合体 (1,3-bis[bis(pyridin-2-ylmethyl)amino]propan-2-olato
40 20% 没 没 1
40 20% 没 没 1 () () : () 0.25mm () () () 却 2 () () 1-15 d m σ g σ π d = mg σ = mg π d N( )m( )dyne( )cm( ) dyne( )cm( σ mg 3 () 2. 3. 4. 5. 6. 7. 50 8. 4 5 1. 6 7 1. 1 2 0 3 4 2 1 2 0 3 4 2 B ml ma () ml
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臺 北 縣 立 樟 樹 國 中 96 學 年 度 第 二 學 期 區 域 性 自 然 科 學 領 域 資 賦 優 異 教 育 方 案 實 施 計 劃 一 依 據 : ( 一 ) 特 殊 教 育 法 第 二 十 九 條 ( 二 ) 特 殊 教 育 法 施 行 細 則 第 四 條 第 二 項 ( 三 ) 身 心 障 礙 及 資 賦 優 異 學 生 鑑 定 標 準 二 目 的 : ( 一 ) 推 廣 資
國立中山大學學位論文典藏.PDF
國 立 中 山 大 學 中 國 文 學 系 ( 暑 期 專 班 ) 碩 士 在 職 專 班 碩 士 論 文 漢 初 異 姓 諸 侯 王 研 究 研 究 生 : 林 裕 斌 撰 指 導 教 授 : 劉 文 強 教 授 中 華 民 國 97 年 5 月 摘 要 本 篇 論 文 探 究 的 對 象 是 漢 朝 初 年 八 位 異 姓 諸 侯 王, 並 涵 蓋 與 操 縱 他 們 興 盛 殞 落 息 息 相
商 周 三 代 年 代 學 的 研 究 經 過 近 五 年 的 努 力, 完 成 夏 商 周 年 表 本 大 事 概 覽 中 夏 商 周 三 代 的 大 事 紀 年, 即 採 用 夏 商 周 斷 代 工 程 的 考 論 成 果 對 於 無 法 考 證 年 份 的 史 事 或 發 生 在 史 前 時
中 外 歷 史 大 事 概 覽 編 者 說 明 : 1. 傳 說 時 代 與 夏 商 周 年 表 : 人 類 在 未 有 文 字 記 事 之 前, 口 耳 相 傳 的 神 話 傳 說, 是 先 民 對 自 然 變 化 的 體 驗 與 歷 史 經 歷 的 口 述 這 些 傳 說, 或 者 存 有 誇 張 和 穿 鑿, 隨 著 考 古 文 物 的 出 土 與 歷 史 學 家 的 努 力, 汰 偽 存 真,
第 三 条 实 验 室 技 术 安 全 工 作 贯 彻 以 人 为 本 安 全 第 一 预 防 为 主 综 合 治 理 的 方 针 各 单 位 及 教 职 工 学 生 应 树 立 安 全 意 识, 履 行 安 全 义 务 承 担 安 全 责 任 第 四 条 实 验 室 技 术 安 全 工 作 坚 持
校 发 2015 28 号 北 京 科 技 大 学 实 验 室 技 术 安 全 管 理 规 定 第 一 章 总 则 第 一 条 为 加 强 学 校 实 验 室 安 全 管 理, 防 止 实 验 室 安 全 事 故 发 生, 保 障 教 职 工 及 学 生 的 人 身 财 产 安 全, 促 进 学 校 各 项 事 业 健 康 稳 定 发 展, 根 据 国 家 相 关 法 律 法 规, 结 合 学 校
2015年全国硕士研究生入学考试
2015 年 全 国 硕 士 研 究 生 入 学 考 试 佛 山 科 学 技 术 学 院 自 命 题 考 试 科 目 考 试 大 纲 ( 科 目 名 称 : 农 业 知 识 综 合 二 科 目 代 码 :340 ) 一 考 查 目 标 农 业 知 识 综 合 二 侧 重 于 动 物 生 产 类 综 合 知 识 的 考 查 考 试 内 容 应 主 要 涵 盖 动 物 遗 传 学 动 物 生 理 学 动
中国商人必胜宝典--各地商人性格特征剖析
-- 13 -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- - 1 - - 2 - 570 350-3 - - 4 - (1) (2) (3) 100-5 - ! ( ) 1985-6 - 20 21 300 600-7 - (1) (2) (3) (4) ( ) - 8 - 24-9 - - 10 - ! 20 20 30 100 1994 5 5 5! - 11 -
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???? 19 16 * 4 16 500 C ~ C 2 20 20 1 29 12 5 2 50 5 3 5 20 40 30 ** 10 5 6 10 3 3 N 39 4 10 4 * ** ** 21 -, 3 2 9 9 9 11 13 13! >! 167 500 500 2 21 21 2 210 32 10 ~ ~ 100 ~ 2 16 100 4 8 5 35 4 29
臧晓南 张学成 王高歌 刘金姐 张晓辉 刘 滨 对两种丝状蓝藻 钝顶节旋藻和盐泽螺旋藻 在基因工程中常用作选择试剂的 种抗生素 氯霉素 氨苄青霉素 红霉素 链霉素 卡那霉素 庆大霉素和新霉素 的敏感性作比较实验 结果表明 两种蓝藻对抗生素的敏感性既有共同的特点 也有 明显的差异 它们对红霉素 氯霉素和链霉素最敏感 致死浓度分别为 和 两种蓝藻对氨苄青霉素比较敏感 的氨苄青霉素即可抑制 和 的生长 但
1 2 3 3.1 3.2 3.3 PM10 3.4 TVOC 4 4.1 4.2 1 1 1 (m 3 /h. ) 3~5 30 1~2 20 20 20 20 30 10 20 20 20 25 4.3 2 2 PM10 0.08 mg/m 3 500 cfu/m 3 500 cfu/m 3 β- 4.4 3 3 20 g/m 2 00 cfu/cm 2 00 cfu/cm 2 2 4.5 4.5.1
作 品 名 稱 : 讓 地 球 酵 起 來 摘 要 化 學 製 品 充 斥 市 面, 如 何 使 用 更 天 然 環 保 的 製 品 替 代 市 面 上 的 化 學 製 劑, 使 我 們 的 環 境 更 美 好, 接 觸 環 保 酵 素 後 心 中 的 疑 問 似 乎 有 解, 但 疑 惑 的 是
金 門 地 區 第 56 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 組 別 : 化 學 科 別 : 國 小 組 作 品 名 稱 : 讓 地 球 酵 起 來 關 鍵 詞 : 環 保 酵 素 去 汙 力 清 潔 編 號 : 作 品 名 稱 : 讓 地 球 酵 起 來 摘 要 化 學 製 品 充 斥 市 面, 如 何 使 用 更 天 然 環 保 的 製 品 替 代 市 面 上 的 化 學
摘 要 我 們 一 開 始 參 加 科 展 就 以 能 食 用 為 目 的, 之 前 在 課 餘 時 間 曾 做 過 一 次 膨 糖, 覺 得 好 吃 又 新 奇, 決 定 以 膨 糖 為 主 題, 進 行 相 關 研 究 實 驗 過 程 中, 我 們 發 現 要 成 功 做 出 膨 糖 和 糖 水
新 北 市 103 學 年 度 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 物 理 組 別 : 國 小 作 品 名 稱 :" 膨 了 一 聲 飛 出 了 糖 之 濃 不 濃 差 很 大 關 鍵 詞 : 膨 糖 糖 水 溶 液 編 號 : 摘 要 我 們 一 開 始 參 加 科 展 就 以 能 食 用 為 目 的, 之 前 在 課 餘 時 間 曾 做 過 一 次 膨 糖, 覺 得
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Microsoft Word - 愛吐沙的蛤蜊
編 號 :A311 組 別 : 國 小 組 科 別 : 自 然 科 類 別 : 生 物 作 品 名 稱 : 愛 吐 沙 的 蛤 蠣 作 者 : 黃 柏 慎 黃 映 慈 易 秋 蓉 指 導 老 師 : 賴 敏 婉 李 愛 雯 作 者 學 校 : 桃 園 縣 平 鎮 市 忠 貞 國 民 小 學 桃 園 縣 平 鎮 市 第 46 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 自 然
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我 可 以 向 你 们 保 证 以 下 的 内 容 100% 真 实, 请 您 一 定 耐 心 看 完 从 医 15 年 来, 我 也 反 复 告 诉 病 人 这 些 事 实 但 是 没 有 人 愿 意 去 听, 更 没 有 人 愿 意 去 相 信 或 许, 我 们 的 同 胞 们 真 的 需 要
保 健 : 顶 尖 专 家 谈 癌 症 2014-03-22 权 健 3813 服 务 中 心 环 境 污 染 不 良 生 活 方 式 与 现 代 社 会 生 活 造 成 的 精 神 压 力 等 等 原 因, 使 得 我 国 癌 情 汹 涌, 人 们 也 日 益 变 得 谈 癌 色 变 最 新 数 据 显 示, 中 国 每 天 8550 人 成 为 癌 症 患 者 ; 中 国 癌 症 患 者 年 轻
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權 能 的 來 源 安 童 牧 師 事 工 简 介 : -- 摘 自 安 童 牧 師 2013 年 9 月 8 日 主 日 信 息 神 呼 召 他, 最 初 在 街 上 接 納 養 育 得 痲 瘋 的 孩 子, 神 藉 着 一 个 单 纯 顺 服 的 仆 人 做 了 极 大 的 事 工, 現 在,8000 印 度 兒 童 參 與 他 的 服 事 目 前, 二 萬 三 千 多 兒 童 參 與 他 的
