ICS 点击此处添加 ICS 号 点击此处添加中国标准文献分类号 GB 中华人民共和国国家标准 GB 代替 SN/T 食品安全国家标准植物源性食品中取代脲类农药残留量的测定液相色谱 - 质谱法 National food safety standard
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- 胜浪洁 柏
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1 ICS 点击此处添加 ICS 号 点击此处添加中国标准文献分类号 GB 中华人民共和国国家标准 代替 SN/T 食品安全国家标准植物源性食品中取代脲类农药残留量的测定液相色谱 - 质谱法 National food safety standards Determination of substituted ureas pesticides residue in plant-derived foods Liquid chromatography - mass spectrometry 发布 实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会中华人民共和国农业部国家食品药品监督管理总局 发布
2 前 言 本标准代替 SN/T 进出口植物源性食品中取代脲类农药残留量的测定液相色谱 - 质谱 / 质谱法 本标准与 SN/T 相比, 主要变化如下 : 标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式 ; 标准名称中 进出口植物源性食品 改为 植物源性食品 ; 标准范围中增加 其它食品可参照执行 本标准所代替标准的历次版本发布情况为 : SN/T I
3 食品安全国家标准 植物源性食品中取代脲类农药残留量的测定液相色谱 - 质谱法 1 范围 本标准规定了植物源性食品中 15 种取代脲类农药 ( 见附录 A) 残留量的液相色谱 - 质谱联用检测方法 本标准适用于玉米 大豆 橙子 大米和大白菜中 15 种取代脲类农药残留的定量测定, 其他食品可参照执行, 其它食品可参照执行 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件 凡是不注日期的引用文件, 其最新版本 ( 包括所有的修改单 ) 适用于本文件 GB 2763 食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样用乙腈提取,HLB 固相萃取柱净化, 液相色谱 - 质谱联用仪测定和确证, 外标法定量 4 试剂和材料 除另有规定外, 所有试剂均为分析纯, 水为符合 GB/T 6682 中规定的一级水 4.1 试剂 甲醇 (CH 3 OH, ): 色谱纯 乙腈 (CH 3 CN, ): 色谱纯 氯化钠 (NaCl, ): 乙酸 (CH 3 COOH, ): 色谱纯 4.2 溶液配制 乙酸 - 水溶液 (1 1000): 准确吸取 1 ml 乙酸于 ml 容量瓶中, 加水定容至刻度线, 摇匀备用 乙酸 - 甲醇溶液 (7+3): 准确量取 70 ml 乙酸 - 水溶液 (1 1000) 和 30 ml 甲醇, 摇匀备用 4.3 标准品 取代脲类农药标准物质 : 参见附录 A, 纯度大于 标准溶液配制 取代脲类农药标准储备溶液 (100 mg/l): 分别准确称取 10.0mg 取代脲类农药标准物质, 用乙腈溶解, 转移至 100 ml 容量瓶中, 用乙腈定容 标准溶液避光于 -18 保存, 保存期为 6 个月 取代脲类农药标准中间液 (1.0 mg/l): 分别准确吸取 1.00 ml 各取代脲类标准储备溶液 (100 mg/l) 至 100 ml 容量瓶中, 用乙腈定容 4 避光保存, 保存期为 1 个月 4.5 材料 HLB 固相萃取柱 :6 ml 500 mg, 或相当者 微孔滤膜 :0.22 µm, 有机相型 5 仪器和设备 5.1 液相色谱 - 质谱联用仪, 配电喷雾离子源 (ESI) 5.2 分析天平 : 感量 0.01 g 和 g 5.3 粉碎机 5.4 组织捣碎机 5.5 离心机 : r/min 5.6 均质器 5.7 吹氮浓缩仪 5.8 涡旋混匀器 1
4 5.9 固相萃取装置, 带真空泵 5.10 移液器 : L, L 5.11 聚丙烯离心管 :15mL,50 ml, 具塞 5.12 容量瓶 :25 ml,100 ml 6 试样制备与保存 6.1 试样制备 玉米 大豆 大米取有代表性样品 500 g, 用粉碎机充分粉碎, 样品全部过 425 µm 的标准网筛 混匀, 制备好的试样均分为两份, 装入洁净的盛样容器内, 密封并标明标记 橙子 大白菜取有代表性样品 100 g, 将其切碎后 ( 不可用水洗 ), 用捣碎机将样品加工成匀浆 制备好的试样均分为两份, 装入洁净的盛样容器内, 密封并标明标记 注 : 以上样品取样部位按 GB 2763 附录 A 执行 6.2 试样保存玉米 大豆和大米样品常温保存 ; 橙子 大白菜等试样于 -18 以下冷冻保存 在制样的操作过程中, 应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化 7 分析步骤 7.1 提取对玉米 大豆 大米样品, 称取 5 g 试样 ( 精确至 0.01 g) 于 50 ml 具塞离心管中, 加入 10 ml 水, 混匀后放置 1 h; 对橙子 大白菜样品, 称取 5 g 试样 ( 精确至 0.01 g) 于 50 ml 具塞离心管中 加入过量氯化钠, 使水溶液达到饱和, 再加入 15 ml 乙腈高速均质提取 3 min,5 000 r/min 离心 5 min, 将乙腈层转移至 25 ml 容量瓶中 残渣再用 10 ml 乙腈重复提取一次, 合并提取液, 并用乙腈定容至 25 ml 取 5 ml 提取液于 15 ml 离心管中,45 下氮气吹至 2 ml 待净化 7.2 净化将 HLB 固相萃取柱安装在固相萃取的真空抽滤装置上, 先用 5 ml 乙腈预淋洗萃取柱, 弃去全部预淋洗液 将提取液转入 HLB 固相萃取柱中, 以约 1 滴 /s 的流速使样液全部通过固相萃取柱, 再用 2 ml 乙腈淋洗并抽干固相萃取柱, 收集全部流出液于 15 ml 离心管中,45 以下用氮气吹至近干, 残渣用乙酸 - 甲醇溶液定容至 1.0 ml 旋涡混匀后, 过微孔滤膜, 供液相色谱 - 质谱联用仪测定 7.3 仪器参考条件 液相色谱参考条件 a) 色谱柱 :Acquity BEH C18 色谱柱,50 mm 2.1 mm (i.d.),1.7 µm, 或相当者 ; b) 柱温 :40 ; c) 进样量 :10 µl; d) 流动相 流速及梯度洗脱条件见表 1 表 1 流动相 流速及梯度洗脱条件 时间 min 流速 ml/min 乙酸 - 水溶液 (1 1000) 甲醇 质谱条件 a) 离子化模式 : 电喷雾离子源 ; b) 扫描方式 : 正离子扫描 ; c) 检测方式 : 多反应监测 (MRM); d) 分辨率 : 单位分辨率 ; 其它参考质谱条件见附录 B 7.4 标准工作曲线 2
5 准确吸取适量的取代脲类农药标准中间液 (1.0 mg/l), 用空白试样提取液配成浓度为 µg/l 的基质混合标准工作溶液 临用配制 供液相色谱 - 质谱联用仪测定, 以峰面积为纵坐标, 基质混合标准工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线 7.5 测定 定性测定每种被测组分选择 1 个母离子,2 个以上子离子, 在相同实验条件下, 样品中待测物质的保留时间, 与基质标准溶液的保留时间偏差在 ±2.5 之内 ; 且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较, 偏差不超过表 2 规定的范围, 则可判定为样品中存在对应的待测物 表 2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 >50 >20 至 50 >10 至 允许的最大偏差 ±20 ±25 ±30 ± 定量测定在仪器最佳工作条件下, 对基质混合标准工作溶液进样, 以峰面积为纵坐标, 基质混合标准工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线, 用标准工作曲线对样品进行定量, 样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内 15 种取代脲类农药标准物质的多反应监测 (MRM) 色谱图参见附录 C 中的图 C 空白实验除不加试样外, 均按上述测定步骤进行 8 结果计算和表述 按下式 (1) 计算试样中各取代脲类农药的含量 : X i ci V m (1) 式中 : Xi 试样中各取代脲类农药的残留含量, 单位为微克每千克 ( g/kg); Ci 从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度, 单位为微克每升 ( g/l);; V 样液最终定容体积, 单位为毫升 (ml); m 最终样液所代表的试样量, 单位为克 (g) 注 : 计算结果须扣除空白值, 测定结果用平行测定的算术平均值表示, 保留两位有效数字 9 精密度 9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值 ( 百分率 ), 应符合附录 E 的要求 9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值 ( 百分率 ), 应符合附录 F 的要求 10 定量限和回收率 10.1 定量限本方法对 15 种取代脲类农药的定量限为 10.0 µg/kg 10.2 回收率当添加水平为 µg/kg 时,15 种取代脲类农药在不同基质中的添加回收率参见附录 D 3
6 附录 A ( 资料性附录 ) 15 种取代脲类农药的基本信息 表 A.1 15 种取代脲类农药的基本信息 农药名称 英文名 CAS 号 分子式 分子量 非草隆 fenuron C 9 H 12 N 2 O 甲氧隆 metoxuron C 10 H 13 ClN 2 O 灭草隆 monuron C 9 H 11 ClN 2 O 绿麦隆 chlorotoluron C 10 H 13 ClN 2 O 甲基苯噻隆 methabenzthiazuron C 10 H 11 N 3 OS 氟草隆 fluometuron C 10 H 11 F 3 N 2 O 敌草隆 diuron C 9 H 10 Cl 2 N 2 O 环莠隆 cycluron C 11 H 22 N 2 O 异丙隆 isoproturon C 12 H 18 N 2 O 异草完隆 isonoruron C 13 H 22 N 2 O 环草隆 siduron C 14 H 20 N 2 O 炔草隆 buturon C 12 H 13 ClN 2 O 利谷隆 linuron C 9 H 10 Cl 2 N 2 O 枯莠隆 difenoxuron C 16 H 18 N 2 O 枯草隆 chloroxuron C 15 H 15 ClN 2 O
7 附录 B ( 资料性附录 ) 1 参考质谱条件 B.1 电喷雾电压 :3000 V; B.2 辅助气流速 :700 L/h; B.3 碰撞气 : 氩气 ; B.4 幕帘气流速 :50 L/h; B.5 离子源温度 :105 ; B.6 辅助气温度 :350 ; B.7 定性离子对 定量离子对, 采集时间 锥孔电压及碰撞能量见表 B.1 表 B.1 取代脲类农药测定的质谱参数 质谱分段采集时间设置 分析物 参考保留时间 /min 母离子 子离子 采集时间 /s 锥孔电压 /V 碰撞能量 /ev 0 ~ 2 min 2 ~ 3.5 min 2.8 ~ 6min 非草隆 甲氧隆 灭草隆 绿麦隆 甲基苯噻隆 氟草隆 敌草隆 环莠隆 异丙隆 异草完隆 环草隆 炔草隆 利谷隆 * * * * * * * * * * * * * 非商业性声明 : 附录 A 所列参考质谱条件是在 Waters Quattro Premier 型液质联用仪上完成的, 此处列出试验用仪器型号仅为提供参考, 并不涉及商业目的, 鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器 5
8 枯莠隆 * 枯草隆 * * 为定量离子, 对于不同质谱仪器, 仪器参数可能存在差异, 测定前应将质谱参数优化到最佳 6
9 附录 C ( 资料性附录 ) 标准的多反应监测 (MRM) 色谱图 氟草隆 氟草隆 环莠隆 环莠隆 图 C µg/l 取代脲类农药标准溶液多反应监测 (MRM) 色谱图 1
10 附录 D ( 资料性附录 ) 不同基质中 15 种取代脲类农药的添加回收率 化合物名称非草隆甲氧隆灭草隆绿麦隆甲基苯噻隆氟草隆敌草隆环莠隆异丙隆异草完隆环草隆 表 D.1 不同基质中 15 种取代脲类农药的添加回收率 玉米大豆橙子大米大白菜添加水平回收率范围回收率范围回收率范回收率范围回收率范围 µg/kg 围 ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ` ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~80.9 2
11 炔草隆利谷隆枯莠隆枯草隆 ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~78.5 3
12 附录 E ( 规范性附录 ) 实验室内重复性要求 表 E.1 实验室内重复性要求 被测组分含量 mg/kg 精密度 > > > >1 14 4
13 被测组分含量 mg/kg 附录 F ( 规范性附录 ) 实验室间再现性要求 表 F.1 实验室间再现性要求 精密度 > > > >1 19 5
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