标题

Size: px

Start display at page:

Download "标题"

侵滋戎
5 years ago
Views:

1 中华人民共和国国家标准 GB 食品安全国家标准食品中杂色曲霉素的测定发布实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布

2 前言本标准代替 GB/T 植物性食品中杂色曲霉素的测定和 SN/T 进出口粮谷中柄曲霉素含量检测方法液相色谱法本标准与 GB/T 相比, 主要变化如下 : 标准名称修改为食品安全国家标准食品中杂色曲霉素的测定 ; 增加了液相色谱 - 串联质谱法 ; 增加了液相色谱法 Ⅰ

3 食品安全国家标准食品中杂色曲霉素的测定 1 范围本标准规定了液相色谱 - 串联质谱法和高效液相色谱法测定杂色曲霉素的测定方法本标准适用于大米玉米小麦黄豆及花生中杂色曲霉素的测定第一法液相色谱 - 串联质谱法 2 原理试样中的杂色曲霉素乙腈 - 水溶液提取, 经涡旋超声离心, 取上清液经稀释, 通过固相萃取柱或免疫亲和柱净化浓缩甲醇 - 水溶液定容微孔滤膜过滤, 液相色谱分离, 电喷雾离子源离子化, 多反应离子监测检测, 同位素内标法定量 3 试剂和材料除非另有说明, 本方法使用的试剂均为分析纯, 水为 GB/T6682 规定的一级水 3.1 试剂乙腈 (CH3CN): 色谱纯甲醇 (CH3OH): 色谱纯氯化钠 (NaCl) 磷酸氢二钠 (Na2HPO4) 磷酸二氢钾 (KH2PO4) 盐酸氯化钾 (KCl) 3.2 试剂配制乙腈 - 水溶液 (80+20): 取 800mL 乙腈, 加 200mL 水, 混匀乙腈 - 水溶液 (40+60): 取 400mL 乙腈, 加 600mL 水, 混匀甲醇 - 水溶液 (40+60): 取 400mL 甲醇, 加 600mL 水, 混匀甲醇 - 水溶液 (70+30): 取 700mL 甲醇, 加 300mL 水, 混匀磷酸盐缓冲溶液 ( 以下简称 PBS): 称取 8.0g 氯化钠,1.2g 磷酸氢二钠 ( 或 2.92g 十二水磷酸氢二钠 ),0.2g 磷酸二氢钾,0.2g 氯化钾, 用 900 ml 水溶解, 用盐酸调节 ph 至 7.4, 用水定容至 1000mL 1

4 3.3 标准品杂色曲霉素标准品 (C18H12O6,CAS 号 : ): 纯度 99%, 或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质 C18- 杂色曲霉素同位素内标 :25μg/mL, 或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质 3.4 标准溶液配制标准储备溶液 (100μg/mL): 准确称取杂色曲霉素标准品 1.00 mg( 准确至 0.01 mg), 用甲醇溶解并定容至 10mL 溶液转移至试剂瓶中后, 密封后 -20 下保存, 保存期 6 个月标准工作液 (1μg/mL): 准确移取 1.00mL 的杂色曲霉素标准储备溶液至 100mL 容量瓶中, 用甲醇定容 -20 下保存, 保存期 3 个月同位素内标工作液 (1.0μg/mL): 准确移取杂色曲霉素同位素内标 (25μg/mL)0.40 ml 至 10mL 容量瓶中, 用甲醇定容 -20 下保存, 保存期 3 个月标准系列工作溶液 : 准确移取标准工作液适量至 5mL 容量瓶中, 加入 50μL1.0μg/mL 的同位素内标工作液, 用甲醇 - 水溶液 (70+30) 定容至刻度 ( 含杂色曲霉素浓度为 1ng/mL 2ng/mL 5ng/mL 10ng/mL 20ng/mL 30ng/mL 40ng/mL 50ng/mL 系列标准溶液 ), 临用前配制 3.5 材料免疫亲和柱 : 柱容量 600ng( 柱容量验证方法参见 B.2) 固相萃取柱 :N- 乙烯吡咯烷酮和二乙烯基苯共聚物填料柱 (200 mg/6 ml), 或相当者使用前分别用 5mL 甲醇和 5mL 水活化微孔滤膜 :0.22μm 4 仪器和设备 4.1 液相色谱 - 串联质谱仪 : 配电喷雾离子源 4.2 高速粉碎机 4.3 涡旋混合器 4.4 超声波发生器 4.5 天平 : 感量为 0.01g 和 g 4.6 离心机 : 转速 6000r/min 4.7 固相萃取装置 ( 带真空泵 ) 4.8 氮吹仪 4.9 试验筛 :1mm~2mm 孔径 5 分析步骤 5.1 试样制备样品用高速粉碎机将其粉碎后过 1mm~2mm 孔径试验筛, 混合均匀后取试样 100g 用于检测 5.2 试样提取称取 5g 均质试样 ( 精确至 0.01g) 至 50mL 离心管中 ( 花生和黄豆样品 : 称取 2g 均质试样 ), 加入 2

5 100μL 同位素内标工作液, 加入 20.0mL 乙腈 - 水溶液 (80+20), 涡旋混匀后超声 10min, 在 6000r/min 下离心 10min, 取上清液备用 5.3 净化固相萃取柱净化准确移取 2.0mL 上述上清液用水稀释至 8mL 待上样将上样液转移至活化好的固相萃取柱中, 控制样液以约 3mL/min 的速度稳定下滴上样完毕后, 依次加入 5mL 的乙腈 - 水溶液 (40+60) 5mL 的甲醇 - 水溶液 (40+60) 淋洗待淋洗结束后, 用真空泵抽干固相萃取柱, 加入 6mL 乙腈洗脱, 控制流速为约 3 ml/min, 用真空泵抽干固相萃取柱, 收集洗脱液在 60 下用氮气缓缓吹至干, 用甲醇 - 水溶液 (70+30) 定容至 1.0 ml, 涡旋 30s 溶解残留物, 0.22μm 滤膜过滤, 收集滤液于进样瓶中以备进样按同一操作方法做空白试验免疫亲和柱净化准确移取 2mL 上述上清液, 加入 28mLPBS 混匀将 50mL 一次性注射器筒与亲和柱的顶部相连将上述样液移至注射器筒中, 调节下滴速度, 控制样液以约 3mL/min 的速度稳定下滴待样液滴完后, 往注射器筒内依次加入 10mLPBS 和 10 ml 水, 以稳定流速淋洗免疫亲和柱待水滴完后, 用真空泵抽干亲和柱在亲和柱下部放置 10 ml 刻度试管, 取下 50mL 的注射器筒, 加入 2mL 乙腈洗脱亲和柱, 控制约 3mL/min 的自然下滴速度, 收集全部洗脱液至刻度试管中, 用真空泵抽干亲和柱在 60 下用氮气缓缓地将洗脱液吹至干, 用甲醇 - 水溶液 (70+30) 定容至 1.0mL, 涡旋 30s 溶解残留物,0.22μm 滤膜过滤, 收集滤液于进样瓶中以备进样按同一操作方法做空白试验注 : 可根据实验室实际情况, 选择上述净化方法中的一种净化方法即可 5.4 仪器参考条件色谱参考条件 a) 液相色谱柱 :C18 柱, 柱长 100mm, 内径 2.1mm, 粒径 1.8μm, 或相当色谱柱 ; b) 流动相 :A 相 : 水,B 相 : 甲醇 ; c) 梯度洗脱条件 :70% B(0min~5min),100% B(5min~8min),70% B(8min~12min); d) 流速 :0.2mL/min; e) 色谱柱柱温 :40 ; f) 进样量 :10μL 质谱参考条件 a) 检测方式 : 多离子反应监测 (MRM); b) 质谱条件及离子选择参数参见表 A.1; c) 子离子扫描图参见图 A.1~ 图 A.2; d) 液相色谱 - 质谱图见图 A 标准曲线制作将标准系列工作溶液按浓度由低到高注入液相色谱 - 串联质谱仪中, 测得相应色谱峰的峰面积, 以标准系列工作溶液中杂色曲霉素的浓度为横坐标, 杂色曲霉素色谱峰的峰面积与同位素内标色谱峰的峰面积的比值为纵坐标, 绘制标准曲线 3

6 5.6 试样溶液的测定将试样溶液注入液相色谱 - 串联质谱仪中, 测得相应色谱峰的峰面积, 根据标准曲线得到试样溶液中杂色曲霉素的浓度如试样溶液中杂色曲霉素的浓度超出线性范围, 则需适当减少取样量按处理试样后重新测定 5.7 定性试样中目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较, 变化范围在 ±2.5% 之内待测化合物定性离子色谱峰的信噪比 3, 定量离子色谱峰的信噪比 10 每种化合物的质谱定性离子必须出现, 至少应包括一个母离子和两个子离子, 而且同一检测批次, 对同一化合物, 样品中目标化合物的两个子离子的相对丰度比与浓度相当的标准溶液相比, 其允许偏差不超过表 1 规定的范围表 1 定性时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 >50% >20%~50% >10%~20% 10% 允许相对偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 6 分析结果的表述试样中杂色曲霉素的含量按式 (1) 计算 : 式中 : X 试样中杂色曲霉素的含量, 单位为微克每千克 ( μ g/kg); X = ρ V m f (1 ) ρ 由标准曲线得到的试样溶液中杂色曲霉素的浓度, 单位为纳克每毫升 (ng/ml); V 最终定容体积, 单位毫升 (ml); m 试样的称样量, 单位克 (g); f 稀释倍数 (f=10); 计算结果保留三位有效数字 7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 20% 8 其他称取大米玉米及小麦试样 5g 时, 其检出限为 0.6μg/kg, 定量限为 2μg/kg; 称取黄豆及花生试样 2g 时, 其检出限为 1.5μg/kg, 定量限为 5μg/kg 4

7 第二法液相色谱法 9 原理样品中的杂色曲霉素用乙腈 - 水溶液提取, 经均质涡旋超声离心等处理, 取上清液用磷酸盐缓冲液稀释, 免疫亲和柱净化洗脱, 氮气吹干浓缩流动相定容微孔滤膜过滤, 液相色谱分离紫外检测器检测外标法定量 10 试剂和溶液除非另有说明, 本方法使用试剂均为分析纯, 水为 GB/T6682 规定的一级水 10.1 试剂和标准样品乙腈 (CH3CN): 色谱纯甲醇 (CH3OH): 色谱纯氯化钠 (NaCl) 磷酸氢二钠 (Na2HPO4) 磷酸二氢钾 (KH2PO4) 盐酸氯化钾 (KCl) 10.2 试剂配制乙腈 - 水溶液 (80+20): 取 800mL 乙腈, 加 200mL 水, 混匀乙腈 - 水溶液 (50+50): 取 500mL 乙腈, 加 500mL 水, 混匀磷酸盐缓冲溶液 ( 以下简称 PBS): 称取 8.0g 氯化钠,1.2g 磷酸氢二钠 ( 或 2.92g 十二水磷酸氢二钠 ),0.2g 磷酸二氢钾,0.2g 氯化钾, 用 900 ml 水溶解, 用盐酸调节 ph 至 7.4, 用水定容至 1000mL 10.3 标准品杂色曲霉素标准品 (C18H12O6,CAS 号 : ): 纯度 99%, 或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质 10.4 标准溶液配制标准储备溶液 (100μg/mL): 准确称取杂色曲霉素标准品 1.0 mg( 准确至 0.01 mg), 用乙腈溶解并定容至 10mL 溶液转移至试剂瓶中后, 密封后 -20 下保存, 保存期 6 个月标准工作液 (1μg/mL): 准确移取 100μL 的杂色曲霉素标准储备溶液至 10 ml 容量瓶中, 用乙腈定容此溶液浓度为 1μg/mL -20 下保存, 保存期 3 个月标准系列工作溶液 : 准确移取标准工作液适量至 5mL 容量瓶中, 用乙腈 - 水溶液 (50+50) 定容至刻度 ( 含杂色曲霉素浓度为 5ng/mL 10ng/mL 25ng/mL 50ng/mL 75ng/mL 100ng/mL 系列标准溶液 ), 临用前配制 5

8 10.5 材料免疫亲和柱 : 柱容量 600ng( 柱容量验证方法参见 B.2) 微孔滤膜 :0.22μm 11 仪器和设备 11.1 液相色谱仪 : 配紫外检测器 11.2 高速粉碎机 11.3 涡旋混合器 11.4 超声波发生器 11.5 天平 : 感量为 0.01g 和 g 11.6 离心机 : 转速 6000r/min 11.7 固相萃取装置 ( 带真空泵 ) 11.8 氮吹仪 11.9 试验筛 :1mm~2mm 孔径 12 分析步骤使用不同厂商的免疫亲和柱, 在样品的上样淋洗和洗脱的操作方面可能略有不同, 应该按照供应商所提供的操作说明书要求进行操作 12.1 试样制备样品用高速粉碎机将其粉碎后过 1mm~2mm 孔径试验筛, 混合均匀后取试样 100g 用于检测 12.2 试样提取称取 5g 已均质试样 ( 精确至 0.01g) 至 50 ml 离心管中, 加入 20.0 ml 乙腈 - 水 (80+20), 涡旋混匀后超声 10min, 在 6000r/min 下离心 10min, 取上清液备用 12.3 试样净化准确移取 2mL 上述上清液, 加入 28mLPBS 混匀将 50mL 一次性注射器筒与亲和柱的顶部相连将上述样液移至 50mL 注射器筒中, 调节下滴速度, 控制样液以约 3mL/min 的速度稳定下滴待样液滴完后, 往注射器筒内依次加入 10 mlpbs 和 10mL 水, 以稳定流速淋洗免疫亲和柱待水滴完后, 用真空泵抽干亲和柱在亲和柱下部放置 10mL 刻度试管, 取下 50mL 的注射器筒, 加入 2mL 乙腈洗脱亲和柱, 控制约 3mL/min 的自然下滴速度, 收集全部洗脱液至刻度试管中, 用真空泵抽干亲和柱在 60 下用氮气缓缓地将洗脱液吹至干, 用乙腈 - 水 (50+50) 定容至 1.0mL, 涡旋 30s 溶解残留物,0.22μm 滤膜过滤, 收集滤液于进样瓶中以备进样按同一操作方法做空白试验 12.4 仪器参考条件 a) 液相色谱柱 :C18 柱, 柱长 150mm, 内径 4.6mm, 粒径 3.5μm, 或相当者 ; b) 流动相 :A 相 : 水,B 相 : 乙腈 ; c) 梯度洗脱条件 :55% B(0 min~7.5 min),100% B(7.5 min~10 min),55% B(10 min~ 6

9 15min); d) 流速 :0.8mL/min; e) 色谱柱柱温 :40 ; f) 进样量 :100μL; g) 紫外检测器条件 : 检测波长为 325nm 12.5 标准曲线的制作将标准系列工作溶液按浓度由低到高注入液相色谱仪进行测定, 测得相应色谱峰的峰面积, 以标准系列工作溶液中杂色曲霉素的浓度为横坐标, 杂色曲霉素色谱峰的峰面积为纵坐标, 绘制标准曲线 12.6 试样溶液的测定将试样溶液注入液相色谱仪进行测定, 测得相应色谱峰的峰面积, 根据标准曲线得到试样溶液中杂色曲霉素的浓度 13 分析结果的表述试样中杂色曲霉素的含量按式 (2) 计算 : 式中 : X 试样中杂色曲霉素的含量, 单位为微克每千克 ( μ g/kg); X = ρ V m f (2 ) ρ 根据试样中杂色曲霉素的色谱峰面积, 经计算所得的浓度, 单位为纳克每毫升 (ng/ml); V 最终定容体积, 单位毫升 (ml); m 试样的称样量, 单位克 (g); f 稀释倍数 (f=10) 计算结果保留三位有效数字 14 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 20% 15 其他称取大米玉米小麦黄豆及花生 5g 时, 其检出限为 6μg/kg, 定量限为 20μg/kg 第三法薄层色谱法 16 原理试样中的杂色曲霉素经提取净化浓缩薄层展开后, 用三氯化铝显色, 再经加热产生一种在紫外光下显示黄色荧光的物质, 根据其在薄层上显示的荧光最低检出量来测定样品中杂色曲霉素的含量 7

10 17 试剂和溶液除非另有说明, 本方法使用试剂均为分析纯, 水为 GB/T6682 规定的一级水 17.1 试剂和材料三氯甲烷 (CHCl3) 正己烷 (C6H14) 甲醇 (CH3OH) 苯 (C6H6) 冰乙酸 (CH3COOH) 甲酸 (HCOOH) 17.2 试剂配制乙酸溶液 : 取 95mL 乙酸和 5mL 水混匀氯化钠浓度 (40g/L): 称取 4g 氯化钠 (NaCl) 溶于 100mL 乙醇中, 混匀三氯化铝 - 乙醇溶液 (200g/L): 称取 20g 三氯化铝 (AlCl3 6H2O) 溶于 100mL 乙醇中, 过滤, 备用杂色曲霉素标准使用液 : 用苯将 10μg/mL 的杂色曲霉素标准溶液稀释成每毫升相当于 1.0μg 和 0.40μg 的杂色曲霉素标准溶液避光, 放置于 4 冰箱中保存 18 仪器和设备 18.1 小型粉碎机 18.2 样筛 ( 筛孔尺寸为 0.850mm 和 2mm) 18.3 电动振荡器 18.4 全玻璃浓缩器 18.5 玻璃板 :10cm 10cm 与 10cm 18.5cm 两种 18.6 展开槽 : 内长 10cm 宽 4.5cm 高 17cm 与内长 11.5cm 宽 60cm 高 19cm 18.7 玻璃喷雾器 18.8 空气泵或油泵 19 分析步骤 19.1 提取大米玉米小麦黄豆及花生 : 称取 20.00g 过 0.85 mm 筛孔的大米玉米小麦及黄豆粉碎样品 ( 花生粉碎样品过 2 mm 的筛孔 ), 置于具塞锥形瓶中, 加 80 ml 甲醇 - 氯化钠溶液 (90+10), 振荡 30min, 过滤收集样品液 40mL( 黄豆花生样品则取 20mL, 加入 20mL 提取剂 ), 移入 250mL 分液漏斗中, 再加入 25mL 氯化钠溶液 ( 使甲醇与水之体积比为 55+45) 和 25mL 石油醚, 振摇 2min, 静置分层上层石油醚溶液置锥形瓶中, 下层溶液仍移入原分液漏斗中, 再用 25 ml 石油醚提取一次最后将两次上层的石油醚溶液合并, 加入 25mL 甲醇 - 氯化钠溶液 (55+45)[ 黄豆花生样品则加入 25mL 甲醇 - 氯化钠溶液 (70+30), 振摇 30s], 将下层并于原甲醇水层中, 重复用甲醇 - 氯化钠溶液 (55+45) 提 8

11 取两次 [ 黄豆花生样品重复用甲醇 - 氯化钠溶液 (70+30) 提取 1 次 ], 以提取该层的杂色曲霉素下层溶液合并后加 30mL 三氯甲烷 ( 黄豆花生样品除加三氯甲烷外, 再加 13 ml 氯化钠溶液, 使甲醇与水的体积比为 55+45), 振摇 2min, 静置待上层混浊液有部分澄清时, 即可将下层溶液经放有约 10g 无水硫酸钠的定量慢速滤纸过滤于蒸发皿中于分液漏斗中再加 10 ml 三氯甲烷, 重复提取 1 次, 将该下层溶液和用少量三氯甲烷洗滤器的洗液一并放入蒸发皿中将蒸发皿放置于 65 水浴上挥干, 然后再在冰浴上放置 2min~3min, 加 1.0mL 苯将残留物充分混匀, 置入小试管中或将以上蒸发皿中残留物用三氯甲烷移于浓缩管中, 于 65 用减压吹气法浓缩至干, 加入 1.0 ml 苯, 供色谱测定, 此 1mL 大米玉米及小麦样液各相当于 10g 样品,1mL 黄豆与花生样液则各相当于 5g 样品 19.2 测定单向展开法薄层板的制备称取约 5g 硅胶 G, 加相当于硅胶量 2 倍 ~3 倍左右的水, 用力研磨 1 min~2min 至成糊状后立即倒于涂布器内, 推成 10cm 10cm, 厚度 0.3mm 的薄层板五块在空气中干燥约 15min 后, 在 100 活化 2h, 取出, 放干燥器中保存一般可保存 2d~3d, 若放置时间较长, 可再活化后使用点样取两块 10cm 10cm 薄层板, 在距板下端各 0.8cm~1cm 基线上滴加标准使用液与样液如下 : 距左边缘 0.8cm~1cm 处各滴加 10μL 标准使用液 (0.4μg/mL), 在距左边缘 4cm 处各滴加 80μL 样液 ( 黄豆花生样品为 40μL), 然后在第二块板的样液点上加滴 10μL 标准使用液 (0.4μg/mL), 在滴加样液时可用吹风机冷风边吹边加展开横向展开 : 展开剂是乙醚 - 正己烷 - 苯 - 三氯甲烷 - 甲酸 ( )15.6 ml( 由于此混合液不成一相, 每一展开槽的用量须单独配制 ) 用前充分摇匀, 一并倒入槽内使用将靠近标准点的一边, 放入槽内展至 9cm 左右取出挥干纵向展开 : 展开剂为苯 - 甲醇 - 冰乙酸 ( 或 )15 ml 将靠近标准点与样液点的一边放入槽内, 展开 9cm 左右取出挥干显荧光在薄层板上喷三氯化铝 - 乙醇溶液 (200g/L), 置 80 加热 10min, 立即在紫外光灯 ( 波长 365nm) 下观察结果, 待薄层板冷却后再薄薄的喷第 2 次 ( 不需加热 ), 可直接观察结果观察与评定结果在紫外光灯下观察, 若第 2 板的第 2 点在标准点的相应处出现最低检出量, 而在第 1 板的相同位置上未出现荧光点, 则样品中杂色曲霉素含量在 5μg/kg( 黄豆花生样品为 20μg/kg); 若出现荧光强度与标准点的最低检出量的荧光强度相等, 而且此荧光点又同第二板样液的标准点相重叠, 则样品中杂色曲霉素含量为 5μg/kg( 黄豆花生样品为 20μg/kg); 若出现荧光强度比标准点的最低检出量强, 则根据其荧光强度估计减少滴加微升数, 或将样液稀释后再滴加不同微升数, 直至样液点的荧光强度与最低检出量的荧光强度一致为止在喷三氯化铝第 1 2 次后分别进行观察评定, 两次结果应一致若结果为阳性, 则将薄层板放暗处 10 min, 再观察一次, 如样品仍为阳性, 进一步作确证试验, 即在距薄层板 (10cm 18.5cm) 下端 3cm 的基线上滴加一个点的 10μL 标准使用液 (0.4μg/mL) 与 3 个点的样液, 9

12 每点 16μL 在样液的一个点上再加滴 10μL 标准使用液 (0.4μg/mL), 另一点上再加滴 10μL 标准使用液 (1μg/mL) 于各点上再加一小滴三氟乙酸, 放暗处反应 10 min, 热风吹 5 min, 使薄层板上的温度不高于 40, 用冰乙酸 - 苯 (10+90) 展开 1 次 ~2 次, 直至杂色曲霉素衍生物与杂质分开为止展开时要避光, 以下显荧光步骤同最后将板在紫外光灯下观察, 如样液为阳性, 应产生与杂色曲霉素标准重叠的衍生物确证法的最低检出量 : 大米玉米小麦均为 25μg/kg( 黄豆花生样品均为 50μg/kg) 19.3 分析结果的表述试样中杂色曲霉素的含量按式 (3) 计算 : 式中 : X X =0.004 V1 D V m 杂色曲霉素的含量, 单位为微克每千克 ( μ g/kg); 杂色曲霉素的最低检出量, 单位为微克 ( μ g); V1 样液浓缩后体积, 单位为毫升 (ml); D 浓缩样液的总稀释倍数 ; V2 出现最低荧光时滴加样液的体积, 单位为毫升 (ml); 1000 换算系数 ; m 浓缩样液中所相当的试样质量, 单位为克 (g) 结果表示到测定值的整数位 (3 ) 10

13 附录 A 质谱条件及离子源控制条件 A.1 质谱参考条件如下 : a) 离子源 : 电喷雾电离源 (ESI), 正离子监测 ; b) 毛细管电压 :3.5kV; c) 锥孔电压 :145V; d) 干燥器温度 :325 ; e) 干燥器流速 :480L/h; f) 雾化器压力 :172kPa; g) 鞘气温度 :350 ; h) 鞘气流速 :600L/h; i) 喷嘴电压 :500V; j) 电子倍增管电压 :+300V A.2 离子选择参数见表 A.1 表 A.1 离子选择参数表化合物名称母离子 (m/z) 定量离子 (m/z) 碰撞能量 ev 定性离子 (m/z) 碰撞能量 ev 离子化方式杂色曲霉素 ESI + 13 C18- 杂色曲霉素 ESI + A.3 杂色曲霉素的离子扫描图见图 A.1 图 A.1 杂色曲霉素的离子扫描图 11

14 A.4 13 C18- 杂色曲霉素的离子扫描图见图 A.2 图 A.2 13 C18- 杂色曲霉素的离子扫描图 A.5 杂色曲霉素及其同位素标准溶液的子离子质谱图见图 A.3 图 A.3 杂色曲霉素及其同位素标准溶液的子离子质谱图 12

15 附录 B 液相色谱图 B.1 杂色曲霉素标准溶液的液相色谱图杂色曲霉素标准溶液的液相色谱图见图 B.1 图 B.1 100ng/mL 杂色曲霉素标准溶液的液相色谱图 B.2 免疫亲和柱柱容量验证方法在 90mL 的 PBS 中加入 18μL100μg/mL 杂色曲霉素标准储备溶液, 充分混匀分别取同一批次 3 根免疫亲和柱, 每根柱的上样量为 30 ml 经上样淋洗洗脱, 收集洗脱液, 氮气吹干, 用乙腈 - 水溶液 (50+50) 定容至 1.0mL, 用液相色谱仪分离测定杂色曲霉素的含量结果判定 : 结果杂色曲霉素 480ng( 即回收率 80%) 为可用柱 13

标题

中华人民共和国国家标准 GB 5009.222 2016 食品安全国家标准食品中桔青霉素的测定 2016-12-23 发布 2017-06-23 实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布前言本标准代替 GB/T5009.222 2008 红曲类产品中桔青霉素的测定 SN/T2426 2010 进出口粮谷中桔霉素含量检测方法液相色谱法和 SN/T2916 2011