农 药 学 学 报 莲雾 原产马来西亚 印度尼西亚和印度 为桃金娘科蒲桃属热带常绿乔木果树 世纪我国台湾最早引种 是著名的热带水果 我国广东 海南 福建 广西 云南和四川等省区均有栽培 莲雾性喜高温 高湿气候 种植过程中易发生炭疽病 果腐病 藻斑病 果蝇 金龟子及蚧壳虫等病虫害 多用化学进行防治 在

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1 学学报 研究论文 超高效液相色谱 串联质谱法测定莲雾中多菌灵 噻菌灵和甲霜灵残留 李春丽 乐 渊 尹桂豪 阳辛凤 黎舒怀 刘春华 中国热带农业科学院 分析测试中心 海口 摘 要 建立了莲雾中多菌灵 噻菌灵和甲霜灵残留的超高效液相色谱 串联质谱 的快速检测方法 样品直接用乙腈匀浆提取 过 滤膜后 在电喷雾正离子模式下以多反应监测 模式测定 基质匹配标准溶液外标法定量 结果表明 方法的线性范围为 决定系数 在 和 个添加水平下 方法的平均回收率为 相对标准偏差为 定量限均为 该方法样品前处理简单 快速 分析时间短 灵敏度 准确度和精密度均符合残留检测要求 关键词 超高效液相色谱 串联质谱 莲雾 多菌灵 噻菌灵 甲霜灵 残留中图分类号 文献标志码 文章编号 收稿日期 录用日期 作者简介 李春丽 女 硕士 助理研究员 主要从事残留与食品质量安全研究 刘春华 通信作者 女 硕士 副研究员 主要从事残留与食品质量安全研究

2 农 药 学 学 报 莲雾 原产马来西亚 印度尼西亚和印度 为桃金娘科蒲桃属热带常绿乔木果树 世纪我国台湾最早引种 是著名的热带水果 我国广东 海南 福建 广西 云南和四川等省区均有栽培 莲雾性喜高温 高湿气候 种植过程中易发生炭疽病 果腐病 藻斑病 果蝇 金龟子及蚧壳虫等病虫害 多用化学进行防治 在防治过程中 种植者往往会选用一些混配 或多种混合施用 由于莲雾皮可食 若残留超标则存在较大的质量安全风险 因此 建立可同时测定莲雾中常见残留量的分析方法非常必要 多菌灵 化学名称为 苯并咪唑基 氨基甲酸甲酯 是一种广谱性杀菌剂 对多种作物的病害有防治效果 噻菌灵 化学名称为 噻唑基 苯并咪唑 属苯咪唑类杀菌剂 能防治多种作物的真菌病害 亦可用于防治水果和蔬菜采后的某些病害 甲霜灵 化学名称为 二甲基苯基 甲氧基乙酰 是特效杀菌剂 可有 效防治多种作物霜霉病 瓜果蔬菜类的疫霉病 谷子白发病 多菌灵 噻菌灵及甲霜灵的结构 式见 目前关于多菌灵 噻菌灵和甲霜灵的检测方法主要有液相色谱法 气相色谱法 液相色谱 串联质谱法以及气相色谱 串联质谱法 但所测基质与莲雾存在很大差异 其前处理方法并不适于莲雾中残留的提取 张群等运用气相色谱 串联质谱法测定了莲雾中灭蚁灵和哒螨灵的残留 但其前处理采用了毒性较高的甲苯 且操作相对繁琐 目前 针对于莲雾中多菌灵 噻菌灵和甲霜灵同时测定的检测方法未见报道 近几年 残留分析的样品前处理趋于简单化和环境友好 本研究采用乙腈提取样品 定容后直接用高效液相色谱 串联质谱 分析 简化了前处理步骤 操作简单 提取效率高 且试剂消耗少 在 内即可完成莲雾中多菌灵 噻菌灵和甲霜灵残留的定性与定量检测 材料与方法 仪器 药剂与试剂 超高效液相色谱 串联质谱仪 美国 公司 电子顶载天平 日本岛津公司 旋涡混合器 江苏海门其林医用仪器厂 有机系滤膜 天津美瑞泰克公司 多菌灵 噻菌灵 和甲霜灵 标准品 纯度 农业部环境质量监督检验测试中心 天津 乙腈和甲醇 级 美国 公司 色谱柱 美国 公司 乙酸铵 分析纯 广州试剂公司 超纯水 美国 公司 检测条件 色谱条件 色谱柱 柱温 进样量 流动相及梯度洗脱条件见表 时间 表 梯度洗脱条件 流速 流动相体积分数 乙酸铵水溶液 甲醇 质谱条件 离子源 电喷雾电离 毛细管电压 离子源温度 脱溶剂气温度 脱溶剂气流量 锥孔气流量 碰撞气流量 种的质谱采集参数见表 样品提取 参考文献 的方法 将莲雾鲜果于食品

3 李春丽等 超高效液相色谱 串联质谱法测定莲雾中多菌灵 噻菌灵和甲霜灵残留 料理机中搅碎 混匀 准确称取 样品于烧杯中 加入 乙腈 高速匀浆 静置 过滤至装有 氯化钠的具塞量筒中 剧烈振 摇 静置 准确吸取 上层乙腈溶液 加入 的 甲醇 水 溶液 过 滤膜后 按 节条件测定 表 种质谱采集参数 保留时间 定量离子对 定性离子对 锥孔电压 碰撞电压 多菌灵 噻菌灵 甲霜灵 标准溶液配制与标准曲线绘制分别准确吸取多菌灵 噻菌灵和甲霜灵标准品 精确至 以甲醇溶解配制成 的单标储备液 于 冷冻避光保存 使用时准确移取适量单标储备液 用甲醇将其分别稀释成 和 的混合标准储备液 于 冷冻避光保存 备用 取空白样品基质提取液逐级稀释混合标准储备液 配制成 和 的基质标准工作液 同时 用 甲醇 水 溶液逐级稀释混合标准储备液 配制成 和 的试剂标准工作液 按 节条件测定 分别以多菌灵 噻菌灵和甲霜灵质量浓度 为横坐标 对应色谱峰面积 为纵坐标 绘制标准曲线 添加回收试验称取不含上述 种的空白样品 分别以 和 个添加水平进行添加回收试验 每个水平重复 次 按 节的方法提取和 节的条件测定 计算添加回收率和相对标准偏差 结果与讨论 样品提取溶剂的选择本研究考察了丙酮 甲醇 乙腈和乙酸乙酯 种溶剂的提取效果 结果表明 以丙酮和甲醇作为提取溶剂时 其提取范围较广 质谱测定的基质影响较大 乙酸乙酯在水中的溶解度很小 而这 种的极性均较强 很难转移到有机相中 回收率不理想 以乙腈作为提取溶剂 基质干扰较小 且回收率 灵敏度 精密度均满足残留分析的要求 因此本方法最终选择乙腈作为提取溶剂 液相色谱条件选择本研究使用 色谱柱进行分离 并对流动相进行了筛选 分别以乙腈 超纯水 甲醇 超纯水 乙腈 的乙酸铵和甲醇 的乙酸铵作为流动相 为了降低杂质干扰 采用梯度洗脱法对标准溶液进行进样分析 结果发现 以甲醇 的乙酸铵为流动相进行梯度洗脱时 响应值最高 因此选用甲醇 的乙酸铵作为流动相 详见表 质谱条件优化分别配制 的多菌灵 噻菌灵和甲霜灵标准溶液 在电喷雾离子正离子模式下 采用全扫描和子离子扫描方式进行分析 分别得到母离子和子离子 然后优化各自锥孔电压和碰撞能量 选择特征离子峰进行二级质谱分析 以响应值最大的碎片离子 子离子 为定量离子 次级响应离子为定性离子 经反复测试和优化 得到 种的质谱条件 表 对 种的定量离子对及定性离子对进行质谱扫描分析 图 从图 可以看出 各化合物的峰形尖锐 确证性强 灵敏度高 运行过程中采用柱后阀切换模式进样质谱 有助于降低对离子源的污染 线性方程 检出限和定量限 准确度和精密度 线性方程 结果 表 显示 在 范围内 种标准溶液的质量浓度与峰面积间呈良好的线性关系 检出限和定量限 分别以 倍信噪比和 倍信噪比确定作为被测物质的检出限和定量限 莲雾中 种的检出限均为 定量限均为 根据实际添加回收试验 确定多菌灵 噻菌灵和甲霜灵的定量限均为 平均添加回收率分别为 和

4 农 药 学 学 报 图 种的定量 与定性 离子图 相对标准偏差分别为 和 表 表 种的线性方程及其决定系数 多菌灵 线性范围 线性方程 噻菌灵 甲霜灵 决定系数 准确度 精密度和稳定性 结果 表 表明 在 和 个添加水平下 种的平均回收率在 之间 相对标准偏差 在 之间 均满足残留分析的要求 对相同浓度的标准溶液进行稳定性测试 同日内每间隔 的时间段 次重复进样 多菌灵 噻菌灵和甲霜灵峰面积的相对标准偏差分别为 和 表明本方法的重复性良好 基质效应 在相同的色谱条件下 对基质标准工作液和试剂标准工作液进行分析 制作拟合曲线方程 根据公式 用斜率比 来评价基质效应 若 值 大于 说明基质增强了待测物的离子响应强度 为基质增强效应 反之 若 值小于 则为基质减弱效应 式中 为基质标准工作液曲线斜率 为试剂标准工作液曲线斜率 表 种的添加平均回收率和相对标准偏差 多菌灵 噻菌灵 甲霜灵 添加水平 平均回收率 相对标准偏差 从表 可以看出 多菌灵 噻菌灵 值均大于 说明存在基质增强效应 而甲霜灵的 值小于 表明存在基质减弱效应 从 值的大小来看 虽然基质效应不是十分明显 但为了提高定量

5 李春丽等 超高效液相色谱 串联质谱法测定莲雾中多菌灵 噻菌灵和甲霜灵残留 的准确性 本试验仍采用基质标准工作液对样品进行定量分析 基质 表 基质效应 线性方程 多菌灵甲醇 水 基质效应 莲雾 噻菌灵甲醇 水 莲雾 甲霜灵甲醇 水 实际样品测定 莲雾 运用本研究建立的方法对海口市售的 个莲雾样品进行测定 均未检出多菌灵 噻菌灵和甲霜灵 今后还会继续加强对莲雾样品中多菌灵 噻菌灵和甲霜灵残留情况的监测 结论 本研究建立了莲雾中多菌灵 噻菌灵和甲霜灵残留的 快速检测分析方法 样品无需经过复杂的前处理 提取后即可进样测定 该方法操作简单 高效快捷 灵敏度高 准确性强 在实际检测中具有较强的可行性和实用性 是莲雾中多菌灵 噻菌灵和甲霜灵残留检测比较理想的方法 参考文献 肖邦森 谢江辉 孙光明 等 莲雾优质高效栽培技术 北京 中国农业出版社 黄雪芬 台湾黑珍珠莲雾引种表现及其栽培技术 东南园艺 高洁 胡德禹 黄荣茂 法检测黄瓜及土壤中多菌灵的残留量 山地农业生物学报 杨楠 张琦 权伍英 等 前处理方法结合液相色谱 串联质谱技术检测蔬菜中的多菌灵 中国卫生检验杂志 赵其阳 焦必宁 王成秋 等 气相色谱法同时测定柑桔中抑霉唑 噻菌灵和嘧霉胺残留 现代科学仪器 张群 刘春华 吴南村 等 气相色谱 串联质谱法同时测定龙眼中的噻菌灵 多效唑 己唑醇 郑雪虹 潘永波 吕岱竹 等 高效液相色谱法对西瓜和香蕉中甲霜灵残留的测定 热带农业科学 乐渊 尹桂豪 刘春华 等 超高效液相色谱 串联质谱法测定香草兰中多菌灵和甲霜灵残留 广东农业科学 多菌灵原药 北京 中国标准出版社 付新梅 张丽静 封顺 等 高效液相色谱法同时测定甜瓜样品中的抑霉唑和噻菌灵 分析化学 甲霜灵原药 北京 化学工业出版社

6 农 药 学 学 报 刘杰 杨春亮 查玉兵 等 高效液相色谱法 荧光检测器同时检测龙眼中多菌灵和噻菌灵残留 广东农业科学 胡梅 王骏 张卉 等 超高效液相色谱 串联质谱测定蒜苔中多菌灵和噻菌灵的残留量 山东农业科学 陈红平 刘新 汪庆华 等 气相色谱 串联质谱检测水果 蔬菜中抗蚜威 甲霜灵和克螨特残留量 质谱学报 张群 吴南村 刘春华 等 气相色谱 串联质谱法测定莲雾中的灭蚁灵和哒螨灵残留 学学报 郑姝宁 李凌云 林桓 等 超快速液相色谱 串联质谱法快速筛查蔬菜中 种的残留量 色谱 刘春华 乐渊 阳辛凤 等 超高效液相色谱 串联质谱法快速测定生咖啡豆中多菌灵等残留 广东农业科学 残留试验准则 北京 中国农业出版社 张月 吕岱竹 韩丙军 等 超高效液相色谱 串联质谱法测定咖啡鲜果中草铵膦及其代谢产物残留 学学报 责任编辑 曲来娥

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