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朔赵
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1 新型瘦肉精多残留胶体金检测卡的研制罗奕铭 ( 广州瑞森生物科技股份有限公司, 广东广州 ) 摘要 : 本文研究建立一种检测新型瘦肉精多残留胶体金检测卡的方法, 能对大量样品进行定量检测应用胶体金免疫层析技术, 采用柠檬酸钠还原法, 标记新型瘦肉精多克隆抗体并喷于玻璃纤维上, 新型瘦肉精偶联 OVA 抗原和羊抗鼠 IgG 分别结合于硝酸纤维膜上, 依次将样品垫胶体金垫硝酸纤维素膜和吸水纸组装切割成新型瘦肉精多残留胶体金检测卡通过灵敏度假阳性假阴性试验测试, 梯度浓度显色结果表明, 该检测卡的灵敏度分别为克伦特罗 3 ng/ml 莱克多巴胺 5 ng/ml 沙丁胺醇 3 ng/ml 西马特罗 5 ng/ml 班布特罗 5 ng/ml 妥布特罗 5 ng/ml 特布他林 8 ng/ml 氯丙那林 5 ng/ml 马布特罗 5 ng/ml 溴布特罗 8 ng/ml, 检测时间为 3 min, 检测滴加的最优尿液量为 70~90 μl, 批内和批间重复性为 100%, 假阳性率和假阴性率均为 0 联检技术能实现现场快速检测, 提高检测速度和准确性降低检测成本, 可作为生产过程监管和大批量样本的筛选关键词 : 新型瘦肉精 ; 胶体金免疫层析 ; 多残留胶体金检测卡文章篇号 : (2018) DOI: /j.mfst Development of a Multi-Residue Colloidal Gold Detection Card for New Type Lean Meat Powder LUO Yi-ming (Guangzhou Ruisen Biotechnology Co., Ltd., Guangzhou , China) Abstract: A new method of multi-residue colloidal gold detection card for detecting lean meat powder was estiblished and could be used for quantitative detection of a large number of samples. Applicated, Be used Colloidal gold immunochromatography assay and sodium citrate reduction method were used to mark the new type lean meat powder antibody, which was then sprayed onto a glass fiber. The new type lean meat powder was coupled with OVA and goat anti-mouse IgG on nitrocellulose membrane, and the sample pad, colloidal gold pad, nitrocellulose membrane and absorbent paper were assembled and cut into multi-mesidue colloidal gold detection cards for new type lean meat powder. The gradient color results obtained by investigating sensitivity, false positiveand false negative, showed that the sensitivities of the detection card were as follows: clenbuterol, 3 ng/ml, ractopamine, 5 ng/ml, salbutamol, 3 ng/ml, sima Tero, 5 ng/ml, bambuterol, 5 ng/ml, tulobuterol, 5 ng/ml, terbutaline, 8 ng/ml, clorprenaline, 5 ng/ml, mabuterol 5 ng/ml, brombuterol 8 ng/ml. The detection time was 3 min, and the optimal urine volume was 70~90 ml. In addition, the intra-and inter-reproducibility was 100%, and the false positive rate and false negative rates were both 0. The joint inspection technology, which could be used to supervise the production process and screen large quantities of samples, could realize rapid detection, improve the detection speed and accuracy and reduce the cost. Key words: new type lean meat powder; colloidal gold immunochromatography; multi-residue colloidal gold detection card 进入 21 世纪以来, 食品安全问题受到越来越多人的重视, 我国多起瘦肉精中毒事件的频繁发生, 引起 [1,2] 社会对食品安全监管的强烈不满瘦肉精是一类药物, 而不是一种特定的物质, 是指能够促进瘦肉生长的药物添加剂, 例如盐酸克伦特罗沙丁胺醇莱克多巴胺苯乙醇胺 A 溴布特罗马布特罗马贲特 [3,4] 罗塞曼特罗齐帕特罗妥布特罗和特布他林收稿日期 : 基金项目 : 科技型中小企业技术创新资金专项项目 (2014J ) 作者简介 : 罗奕铭 (1985-), 男, 研究生, 硕士, 研究方向 : 食品质量与安全等瘦肉精能使猪提高生长速度, 增加瘦肉率, 猪毛色红润光亮, 收腹, 卖相好 ; 屠宰后, 肉色鲜红, 脂肪层极薄, 往往是皮贴着瘦肉, 瘦肉丰满但对人体会产生副作用 [5], 轻则导致心律不整, 严重一点就会导致心脏病 [6] 目前检测瘦肉精主要有方法有色谱技术和免疫分析技术等方法色谱法包括高效液相色谱法和气质联用色谱法高效液相色谱 (HPLC) 法的优点是检测精密度高, 假阳性率低, 但存在样品处理时间长检测过程繁琐仪器昂贵难于操作等缺点, 在实际应用中受到一定的限制而气质联用法 (GC-MS) 检测前 233

2 需要对分子上的羟基氨基等极性基团衍生化, 难以 0.1 M 碳酸钾溶液和 0.1 M 盐酸溶液调胶体金溶液 ph 作为常规方法应用, 不能进行现场检测值至 8.2 再称取 mg 的新型瘦肉精多克隆抗体免疫分析检测包括放射性免疫分析技术酶免疫加入到胶体金溶液内, 振荡混匀, 室温放置 20 min 后分析技术和金标免疫分析技术等放射性免疫分析技加入 0.02 ml 10% BSA 溶液, 振荡混匀, 室温放置 20 术具有特异性强灵敏度高准确快速操作简便 min 后, 把金标记的抗体溶液分装到离心管内,11000 易于标准化等优点 [7~9] 但其所用仪器昂贵, 且使用的 r/min 离心 15 min 吸取上清液再加入 10 ml 0.1 M 放射性同位素存在辐射和污染, 其废弃物不易处理, 磷酸盐缓冲液将沉淀混匀, 于 r/min 离心 15 限制了此种方法的广泛应用酶联免疫法和金标免疫 min, 吸取上清液后加入 4 ml 金标缓冲液将沉淀混匀, 法是目前检测瘦肉精较高效的免疫分析技术, 但常规得到金标记新型瘦肉精多克隆抗体溶液的酶联免疫检测一次只能检测一种瘦肉精, 所以如果金标抗体结合垫的制备要对多种瘦肉精进行检测则需要进行多次实验, 操作量取 0.42 ml 金标新型瘦肉精多克隆抗体溶液倒繁琐费时, 常规的金标免疫检测也有此缺陷, 且传统入洁净小离心管内设定喷金仪主机程序 : 喷金浓度的检测方法只能进行粗略的阴性与阳性判定, 且判定为 20 μl/cm, 平台移动速度为 132 mm/s, 再将玻璃纤时间相对较短, 因此, 我们需要一种能够同时检测多维膜放置于喷金仪平台, 按设定程序将金标抗体均匀种瘦肉精的新型检测方法 [10,11] 喷洒于玻璃纤维膜上将喷好的金标抗体结合垫放置本研究建立一种快速有效高灵敏度的新型瘦于真空干燥箱内室温抽干 6 h 后, 再放于有干燥剂的肉精多残留胶体金检测卡 [12], 试验根据胶体金免疫层析原理, 实现特异性免疫检测 1 材料和方法 1.1 材料与设备主要试剂和仪器 : 牛血清白蛋白 (BSA)( 天津正将高科公司 ); 聚乙二醇 (PEG) 三羟甲基氨基甲烷 (Tris)( 北京鼎国生物 ); 柠檬酸三钠碳酸氢钠碳酸钾碳酸钠叠氮钠磷酸氢二钠磷酸二氢钠吐温 -20 盐酸( 广州化学试剂厂 ); 氯金酸 ( 上海国药 ); 羊抗鼠抗体 ( 武汉博士德 ); 新型瘦肉精多克隆抗体瘦肉精 -BSA( 瑞森生物 ); 硝酸纤维素膜 (Sartorius); 聚酯膜玻璃纤维 (Pall); 吸水纸磁白板 ( 上海金标 ); 塑料卡铝箔袋 ( 广州 ) 三维划膜喷金仪 HM3030 金标试纸分切机 WM-100( 上海金标 ); 连续点膜机 R5DD-2( 韩感 ); 磁力搅拌器 ( 国产 ) 1.2 试验方法胶体金溶液的制备量取 40 ml 纯水于洁净的圆底烧杯, 用磁力搅拌器加入至沸腾, 加入 0.04 ml 10% 氯金酸溶液沸腾 5 min 后加入 ml 10% 柠檬酸三钠溶液, 保持沸腾 10 min 待溶液温度降至室温后装入棕色密封容量瓶中, 避光保存金标记新型瘦肉精多克隆抗体的制备量取 20 ml 胶体金溶液, 倒入洁净离心管内, 用自封袋中保存备用划膜称取 mg 瘦肉精 -BSA 原液于洁净离心管内, 加入划膜缓冲液稀释至终浓度为 1 mg/ml, 称取 1.79 mg 羊抗鼠二抗溶液于另一离心管内, 加入划膜缓冲液稀释终浓度为 2 mg/ml 将硝酸纤维素膜放置于划膜仪平台, 两端用压条固定, 设定划膜仪主机程序 : 划膜浓度为 2 μl/cm, 平台移动速度为 128 mm/s 按设定程序将瘦肉精 -BSA 按一定比例混合后和二抗划于硝酸纤维素膜上后置于真空干燥箱内室温抽干 6 h, 干燥后封袋保存备用使瘦肉精 -BSA 所划线标记为检测线 T, 羊抗鼠二抗所划线标记为质控线 C 胶体金免疫层析新型瘦肉精多残留胶体金检测卡组装将样品垫胶体金垫已包被好抗原抗体的 NC 膜吸水纸依次粘贴到 PVC 底板上, 切割成条, 装卡封口密封, 置于干燥器中常温保存备用样品制备阴性样品的制备经 GC-MS 法 ( 农业部 1031 号公告中的猪肝和猪尿中 β- 受体激动剂残留检测 - 气相色谱 - 质谱法 ) 检测克伦特罗莱克多巴胺沙丁胺醇西马特罗班布特罗妥布特罗特布他林氯丙那林马布特罗溴布特罗阴性的 80 份尿液克伦特罗 ( 莱克多巴胺沙丁胺醇西马特罗班布特罗妥布特罗特布他林氯丙那林马布特罗溴布特罗 ) 添加阳性样品的制备见表 1 234

3 表 1 标准品配制 Table 1 Preparation of Standards 序号样品名称配置浓度 /(μg/l) 配置方法 1 克伦特罗克伦特罗工作液 μl 于 μl 阴性猪尿中混匀 2 莱克多巴胺莱克多巴胺工作液 μl 于 μl 阴性猪尿中混匀 3 沙丁胺醇沙丁胺醇工作液 μl 于 μl 阴性猪尿中混匀 4 西马特罗西马特罗工作液 μl 于 μl 阴性猪尿中混匀 5 班布特罗班布特罗工作液 μl 于 μl 阴性猪尿中混匀 6 妥布特罗妥布特罗工作液 μl 于 μl 阴性猪尿中混匀 7 特布他林特布他林工作液 μl 于 μl 阴性猪尿中混匀 8 氯丙那林氯丙那林工作液 μl 于 μl 阴性猪尿中混匀 9 马布特罗马布特罗工作液 μl 于 μl 阴性猪尿中混匀 10 溴布特罗溴布特罗工作液 μl 于 μl 阴性猪尿中混匀实测阳性样品的准备 10 份经 GC-MS 检测克伦特罗为阳性的实际猪尿样品 ( 浓度均大于 3 μg/l) 10 份经 GC-MS 检测莱克多巴胺为阳性的实际猪尿样品 ( 浓度均大于 5 μg/l) 10 份经 GC-MS 检测沙丁胺醇为阳性的实际猪尿样品 ( 浓度均大于 3 μg/l) 10 份经 GC-MS 检测西马特罗为阳性的实际猪尿样品 ( 浓度均大于 5 μg/l) 10 份经 GC-MS 检测班布特罗为阳性的实际猪尿样品 ( 浓项目表 2 实际猪尿样品 Table 2 Pratical urine sample of pig 度均大于 5 μg/l) 10 份经 GC-MS 检测妥布特罗为阳性的实际猪尿样品 ( 浓度均大于 5 μg/l) 10 份经 GC-MS 检测特布他林为阳性的实际猪尿样品 ( 浓度均大于 8 μg/l) 10 份经 GC-MS 检测氯丙那林为阳性的实际猪尿样品 ( 浓度均大于 5 μg/l) 10 份经 GC-MS 检测马布特罗为阳性的实际猪尿样品 ( 浓度均大于 3 μg/l) 10 份经 GC-MS 检测溴布特罗为阳性的实际猪尿样品 ( 浓度均大于 8 μg/l) 见表 2 GC-MS 测定 /(μg/l) 克伦特罗 (Clenbuterol,CLEN) 莱克多巴胺 (Ractopamine,RAC) 沙丁胺醇 (Salbutamol,SAL) 西马特罗 (Sima Tero,SIT) 班布特罗 (Bambuterol,BUT) 妥布特罗 (Tulobuterol,BBT) 特布他林 (Terbutaline,TER) 氯丙那林 (Clorprenaline,CLOR) 马布特罗 (Mabuterol,MAT) 溴布特罗 (Brombuterol,BUB) 灵敏度取 3 批次新型瘦肉精多残留胶体金检测卡分别检测添加克伦特罗 / 沙丁胺醇浓度为 0 μg/l 1 μg/l 3 μg/l 和 5 μg/l 的猪尿样 ; 添加莱克多巴胺 / 西马特罗 / 班布特罗 / 妥布特罗 / 氯丙那林 / 马布特罗浓度为 0 μg/l 3 μg/l 5 μg/l 和 8 μg/l 的猪尿样 ; 添加特布他林 / 溴布特罗为 0 μg/l 5 μg/l 8 μg/l 和 10 μg/l 的猪尿样各 10 份室温条件下操作, 肉眼观测进行判定假阳性率试验新型瘦肉精多残留胶体金检测卡对 80 份经 GC-MS 检测为阴性的猪尿进行检测, 并分别以含克伦特罗 / 沙丁胺醇为 0 和 3 μg/l 的猪尿 ; 特布他林 / 溴布特罗为 0 和 8 μg/l 的猪尿 ; 莱克多巴胺 / 西马特罗 / 班布特罗 / 妥布特罗 / 氯丙那林 / 马布特罗为 0 和 5 μg/l 的猪尿为阴性对照和阳性对照, 计算假阳性率假阴性率试验新型瘦肉精多残留胶体金检测卡对 40 份阳性猪尿 (10 份为 3 μg/l 克伦特罗 / 沙丁胺醇阳性添加样品, 10 份为 8 μg/l 特布他林 / 溴布特罗阳性添加样品,10 份为 5 μg/l 莱克多巴胺 / 西马特罗 / 班布特罗 / 妥布特罗 / 氯丙那林 / 马布特罗阳性添加样品,10 份为浓度均大于 3 μg/l 实测克伦特罗 / 沙丁胺醇阳性样品,10 份为 235

浓度均大于 8 μg/l 实测特布他林 / 溴布特罗阳性样品, 免疫反应, 即在质控区出现红色线 10

马布特罗阳性样品 ) 进行检测, 并分别以含克伦特罗 / 沙丁胺醇 0 和 3 μg/l 尿样 ;

妥布特罗 / 氯丙那林 / 马布特罗 0 和 5 μg/l 尿样为阴性对照和阳性对照, 计算假阴性率 1.

4 浓度均大于 8 μg/l 实测特布他林 / 溴布特罗阳性样品, 免疫反应, 即在质控区出现红色线 10 份为浓度均大于 5 μg/l 实测莱克多巴胺 / 西马特罗 / 班布特罗 / 妥布特罗 / 氯丙那林 / 马布特罗阳性样品 ) 进行检测, 并分别以含克伦特罗 / 沙丁胺醇 0 和 3 μg/l 尿样 ; 特布他林 / 溴布特罗 0 和 8 μg/l 尿样 ; 莱克多巴胺 / 西马特罗 / 班布特罗 / 妥布特罗 / 氯丙那林 / 马布特罗 0 和 5 μg/l 尿样为阴性对照和阳性对照, 计算假阴性率新型瘦肉精多残留胶体金检测卡的批内和批间重复将同批和不同批次的新型瘦肉精多残留胶体金检测卡分别检测上述阴性样品阳性样品实测阳性样品, 每个浓度重复 10 次, 观察其重复性 2 结果与讨论 2.1 灵敏度与滴尿量图 1 试纸条结构示意图 Fig.1 Structure diagram of colloidal gold strip 胶体金免疫试纸条的作用原理主要有双抗夹心和竞争结合两种本试验研制的新型瘦肉精多残留胶体金检测卡采用了竞争原理, 如图 1 所示拆开卡壳的试纸条, 底板为 PVC 底板 ( 双面胶白色塑料板 ), 从加样处开始分别为样品吸收垫胶体金垫 ( 玻璃纤维 ) 硝酸纤维素膜 (NC 膜 ) 和吸水垫胶体金垫上喷涂胶体金标记的新型瘦肉精多克隆抗体,NC 膜上分别喷涂偶联新型瘦肉精 -BSA( 检测线 T) 和羊抗鼠 IgG( 质控线 C) 该法检测线 T 出现红色条带, 结果显示为新型瘦肉精阴性 ; 检测线无条带, 结果显示为新型瘦肉精阳性这是因为当被检物质溶液中不含新型瘦肉精时, 玻璃纤维上释放的胶体金标记新型瘦肉精多克隆抗体便会被检测线处的偶联抗原新型瘦肉精 -BSA 物质识别并结合, 因而被截留在该处, 当累积到一定程度便出现红色线, 但弱阳性时会出现反应强度减弱的检测线 ; 当被检物质溶液中新型瘦肉精的浓度达到一定时, 新型瘦肉精与胶体金标记的全部多抗体的反应位点结合, 这样当免疫胶体金到达检测线时不能再与偶联抗原发生反应, 因而不出现红色线无论被检测物质中有无新型瘦肉精, 胶体金标记的新型瘦肉精多克隆抗体都会与喷涂在 NC 膜上的羊抗鼠 IgG 发生图 2 梯度浓度显色结果 Fig.2 the results of color gradient concentration 试验结果如图 2 所示, 三个批号各梯度浓度的检测卡在 3 min 内结果呈梯度变化,CLEN 3 μg/l RAC 5 μg/l SAL 3 μg/l SiT 5 μg/l BUT 5 μg/l BBT 5 μg/l TER 8 μg/l CLOR 5 μg/l MAT 5 μg/l BUB 236

5 8 μg/l 的添加样品质控带显色, 检测带无明显显色 ; CLEN 5 μg/l RAC 8 μg/l SAL 5 μg/l SiT 8 μg/l BUT 8 μg/l BBT 8 μg/l TER 10 μg/l CLOR 8 μg/l MAT 8 μg/l BUB 10 μg/l 的添加样品质控带显色, 检测带无显色 ;0 μg/l, 样品质控带和检测带均显色表明胶体金免疫层析试验具有良好的敏感性和特异性, 故该胶体金检测试纸卡的检测限可定为 CLEN 3 μg/l RAC 5 μg/l SAL 3 μg/l SiT 5 μg/l BUT 5 μg/l BBT 5 μg/l TER 8 μg/l CLOR 5 μg/l MAT 5 μg/l BUB 8 μg/l 滴尿量约为 70~90 μg/l, 对判读效果无大影响, 但发现滴尿量超过 200 μg/l 以上, 胶体金检测卡会出现死金现象或者层析垫因浸泡太多液体而出现假阳性, 通过图示可知, 三个批次的稳测, 对监管检测工作提供便捷的检测利器 2.2 假阳性率试验一般检测猪尿出现假阳性现象主要由以下因素导致 : 喂养的兽药会产生干扰性物质, 饲料中金属离子浓度过高, 过夜未保存好的猪尿影响检测结果, 尿液含有特殊的或者其他新型瘦肉精导致交叉反应等现对 80 份经 GC-MS 法检测为阴性的猪尿进行检测, 以该方法检测限 CLEN 3 μg/l RAC 5 μg/l SAL 3 μg/l SiT 5 μg/l BUT 5 μg/l BBT 5 μg/l TER 8 μg/l CLOR 5 μg/l MAT 5 μg/l BUB 8 μg/l 为判定限进行判断,80 份尿样均为阴性, 该 80 份样品的假阳性率为 0 见表 3 定性及色度辨析达到判读要求, 可以实现现场快速检表 3 猪尿阴性样本检测结果 Table 3 Results of negative samples of pig urine 样品测定结果 (80 份样品 ) 阴性空白猪尿 2.3 假阴性率试验新型瘦肉精多残留胶体金检测卡对 160 份阳性猪尿进行检测, 以该方法检测限 CLEN 3 μg/l RAC 5 μg/l SAL 3 μg/l SiT 5 μg/l BUT 5 μg/l BBT 5 μg/l TER 8 μg/l CLOR 5 μg/l MAT 5 μg/l BUB 8 μg/l 为判定限进行判断,160 份尿样均为阳性, 该 160 份样品的假阴性率为 0 见表 4 表 4 猪尿阳性样本检测结果 Table 4 Results of positive samples of pig urine 样品方法测定结果 CLEN 阳性添加样品添加浓度 /(μg/l) 实测 CLEN 阳性样品 GC-MS 测定 /(μg/l) RAC 阳性添加样品实测 RAC 阳性样品 GC-MS 测定 /(μg/l) SAL 阳性样品添加浓度 /(μg/l) 实测 SAL 阳性样品 GC-MS 测定 /(μg/l) SIT 阳性样品实测 SIT 阳性样品 GC-MS 测定 /(μg/l) 转下页 237

6 接上页 BUT 阳性样品实测 BUT 阳性样品 GC-MS 测定 /(μg/l) BBT 阳性样品实测 BBT 阳性样品 GC-MS 测定 /(μg/l) TER 阳性样品添加浓度 /(μg/l) 实测 TER 阳性样品 GC-MS 测定 /(μg/l) CLOR 阳性样品实测 CLOR 阳性样品 GC-MS 测定 /(μg/l) MAT 阳性样品实测 MAT 阳性样品 GC-MS 测定 /(μg/l) BUB 阳性样品添加浓度 /(μg/l) 实测 BUB 阳性样品 GC-MS 测定 /(μg/l) 总结本文研究成功建立检测新型瘦肉精多残留胶体金检测卡的方法, 通过大量样本的测试, 梯度浓度显色结果表明 : 新型瘦肉精多残留胶体金检测卡的灵敏度分别为 CLEN 3 μg/l RAC 5 μg/l SAL 3 μg/l SiT 5 μg/l BUT 5 μg/l BBT 5 μg/l TER 8 μg/l CLOR 5 μg/l MAT 5 μg/l BUB 8 μg/l, 浓度梯度性可以有效确认样本的半定量结果, 其检测最快观察时间为 3 min, 若想显色更加稳定, 可以在 5 min 后进行判读, 本研究没有体系化的测试检测卡的保质期, 没法确保产品在长期保存时间下的稳定性, 后续应进行保质期稳定性测试, 通过大批实际样品及加标样品的测试, 批内和批间重复性为 100%, 假阳性率和假阴性率均为 0, 达到预期的测试效果, 同时, 测通过测试, 检测滴加的最优尿液量为 70~90 μl 该方法应用胶体金免疫层析技术, 实现一个样本可同时检测 8 种类似的激素, 大大降低了检测时间和检测成本, 比单检技术更有优势, 这方法既简捷又可靠, 是一种值得推广的定性筛选方法, 可作为液相色谱等仪器法的补充, 通 [12] 过与孙晓亮针对猪尿中 30 种不同瘦肉精的药物残留进行比对, 虽没达到全面覆盖所有的新型瘦肉精, 但适合现场检测, 本方法属于快速检测法, 是猪尿初筛的便捷途径, 能有广泛应用于全国基础检测, 减少资源的浪费, 同时, 也作为新型瘦肉精快速检测的利器, 在我国家禽生产场动物性食品加工厂国家和地方的检验 / 监督部门食品卫生与安全检验 / 监察部门等行业领域推广应用, 将为我国农药 / 兽药残留检测和监控计划提供技术支撑, 促进我国农业全面发展, 提升食品安全和质量等级提高市场竞争力和增加进出口贸易参考文献 [1] Zhang G, Guo J, Wang X. Immunochromatographiclateral flow strip tests [J]. Methods Mol. Bio1., 2009, 504: [2] Harkins J D, Woods W E, Lehner A F, et a1. Clenbuterol in the horse: urinary concentrations determ ined by ELISA and GC/MS after clinical doses [J]. J Vet. Pharmacol. Ther., 2001, 24(1): 7-14 [3] 农业部. 猪尿液中克伦特罗检测方法 - 酶联免疫吸附测定法 [J]. 中国兽药杂志,2002,36(12):12-13 Ministry of agriculture. Methods for the detection of clenbuterol in swine urine -an enzyme-linked immunosorbent assay [J]. Chinese Journal of Veterinary Drug, 2002, 36(12): [4] Du W, Zhao G, Fu Q, et al. Combined microextraction by packed sorbent and high-performance liquid chromatography-ultraviolet detection for rapid analysis of ractopamine in porcine muscle and urine samples [J]. Food Chem., 2014, 145: ( 下转第 133 页 ) [5] Shiu T C, Chong Y H. A cluster of clenbuterol poison-ing associated with the pork and pig ofal in Hong Kong [J]. 238

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Microsoft Word 张璐琪-二校

Microsoft Word 张璐琪-二校 7 5 Vol. 7 No. 5 2016 5 Journal of Food Safety and Quality May, 2016 3 β- 张璐琪 1*, 王凤美 2, 张鸿伟 2, 徐彪 2, 梁成珠 (1., 266003; 2., 266002) 2 摘要 : 目的 3 - 方法 (CLB) (RAC) (SAL)3 β-, - (LC-MS/MS) 结果 - - LC-MS/MS 83.3

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