基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作
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- 览球 胡
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1 16 李 莹 莹 1, 吴 彩 娥 1, *, 杨 剑 婷 2, 范 龚 健 1 (1. 南 京 林 业 大 学 森 林 资 源 与 环 境 学 院, 江 苏 南 京 ;2. 安 徽 科 技 学 院 食 品 药 品 学 院, 安 徽 凤 阳 ) 对 白 果 的 主 要 过 敏 蛋 白 进 行 鉴 定, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析 以 SDS-PAGE 和 Western-Blotting 分 析 鉴 定 白 果 蛋 白 提 取 液 中 的 蛋 白 质 组 分 和 过 敏 蛋 白, 通 过 间 接 ELISA 法 检 测 过 敏 小 鼠 血 清 中 sige 的 效 价 白 果 的 蛋 白 质 条 带 主 要 有 13 条, 其 中 以 21kD 和 32kD 含 量 最 多 Western-Blotting 分 析 结 果 表 明, 白 果 蛋 白 中 存 在 3 条 过 敏 原 蛋 白, 分 子 质 量 分 别 为 kD 当 酶 标 二 抗 稀 释 度 为 1:1000, 白 果 蛋 白 包 被 质 量 浓 度 为 50μg/mL, 间 接 ELISA 测 得 过 敏 小 鼠 血 清 中 sige 的 效 价 为 1:6400 对 白 果 蛋 白 进 行 分 析 鉴 定, 明 确 了 白 果 中 存 在 的 过 敏 原 蛋 白 白 果 ; 过 敏 蛋 白 ;SDS-PAGE;Western-Blotting; 间 接 ELISA Identification and Allergenicity of Allergic Proteins in Ginkgo Seeds LI Ying-ying 1,WU Cai-e 1, *, YANG Jian-ting 2,FAN Gong-jian 1 (1.College of Forest Resources and Environment, Nanjing Forestry University, Nanjing , China; 2.College of Food and Drug, Anhui Science and Technology University, Fengyang , China) Abstract :SDS-PAGE and Western-Blotting were used to identify the protein composition and allergic proteins of ginkgo seed extract, respectively. A total of 13 bands were observed in the SDS-PAGE pattern, and the fractions of 21 kd and 32 kd exhibited the highest content. Western-Blotting analysis indicated that ginkgo seeds had 3 allergic proteins, whose molecular weights were 21, 32 kd and 36 kd, respectively. When the enzyme secondary antibody concentration was 1:1000 and the ginkgo protein coating concentration was 50μg/mL, the serum IgE titer of mice allergic to ginkgo seeds was detected to be 1:6400 by indirect ELISA. Key words:ginkgo seed;allergic protein;sds-page;western-blotting;indirect ELISA 中 图 分 类 号 :Q816 文 献 标 识 码 :A 文 章 编 号 : (2011) 食 物 过 敏 是 指 当 人 体 摄 入 某 种 特 定 的 食 物 后 在 体 内 发 生 的 由 E 型 抗 体 (IgE) 介 导 的 液 体 免 疫 反 应 在 过 敏 反 应 中, 有 90% 以 上 是 由 蛋 类 花 生 乳 类 大 豆 小 麦 树 生 坚 果 ( 杏 板 栗 腰 果 等 ) 贝 类 ( 包 括 甲 [1] 壳 类 和 软 体 动 物 ) 鱼 等 8 类 食 物 引 起 的 一 般 食 物 中 [2] 使 机 体 产 生 过 敏 并 与 IgE 等 抗 体 结 合 的 都 为 蛋 白 质 银 杏 为 裸 子 植 物 门 银 杏 纲 银 杏 植 物 (Gingko bilba L.), 为 一 科 一 属 一 种 的 特 殊 植 物, 是 我 国 特 有 的 古 老 珍 贵 树 [3] 种 之 一 银 杏 种 实 去 掉 肉 质 外 种 皮 后 的 部 分 俗 称 白 果 白 果 富 含 淀 粉 蛋 白 质 和 脂 肪 等 营 养 物 质 以 及 银 [4] 杏 酸 白 果 酚 五 碳 多 糖 胆 固 醇 等 功 能 成 分, 自 古 以 来 被 当 作 养 生 延 年 的 上 品 但 是, 生 食 白 果 或 进 食 太 多, 会 引 起 过 敏 反 应, 临 床 表 现 为 恶 心 呕 吐 腹 痛 腹 泻 烦 躁 不 安 昏 迷 抽 搐 呼 吸 困 难 [5] 瞳 孔 放 大 伴 随 着 对 光 反 应 迟 钝, 乃 至 死 亡 Baron- [6] Ruppert 等 研 究 认 为 导 致 白 果 过 敏 主 要 物 质 是 烷 基 酚 类 [7] 化 合 物,Arenz 等 研 究 认 为 4-O - 甲 基 吡 哆 醇 (4-O - [8] Methylpyridoxine,MPN) 可 能 有 致 敏 作 用 杨 剑 婷 等 通 过 对 白 果 过 敏 的 相 关 数 据 分 析, 认 为 白 果 中 可 能 存 在 其 他 类 型 的 致 敏 物 质 白 果 中 含 有 8.7%~13.4% 的 蛋 白 质, 其 氨 基 酸 组 成 丰 富 合 理, 属 于 优 质 蛋 白 近 年 来, 关 于 白 果 蛋 [9] 白 的 研 究 主 要 集 中 于 白 果 蛋 白 组 成 及 其 功 能 上 Uwe 等 在 1989 年 从 白 果 中 分 离 出 一 种 类 似 豆 球 蛋 白 的 物 质 牛 [10] 卫 宁 等 报 道 了 从 白 果 中 提 取 得 到 的 蛋 白 具 有 抗 菌 作 [11] 用 黄 文 等 应 用 不 同 的 提 取 方 法, 分 离 出 白 果 清 蛋 收 稿 日 期 : 基 金 项 目 : 教 育 部 博 士 点 基 金 项 目 ( ) 作 者 简 介 : 李 莹 莹 (1984 ), 女, 硕 士 研 究 生, 研 究 方 向 为 经 济 植 物 资 源 加 工 利 用 及 其 安 全 控 制 njliyingying@yahoo.com.cn * 通 信 作 者 : 吴 彩 娥 (1963 ), 女, 教 授, 博 士, 研 究 方 向 为 食 品 活 性 成 分 提 取 及 食 品 安 全 控 制 sxwucaie@163.com
2 基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作 用 有 研 究 表 明, 食 物 中 90% [12] 的 过 敏 原 是 蛋 白 质, 郭 红 彦 等 研 究 发 现, 银 杏 枝 条 中 的 32 36kD 贮 藏 蛋 白 具 有 免 疫 原 性 本 课 题 组 在 此 基 础 上, 已 应 用 豚 鼠 为 实 验 动 物, 明 确 了 白 果 蛋 白 具 [13] 有 致 敏 性, 并 建 立 了 白 果 蛋 白 过 敏 反 应 的 小 鼠 模 型, 本 研 究 正 是 基 于 此 模 型, 初 步 鉴 定 白 果 中 的 过 敏 蛋 白, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析, 旨 在 明 确 白 果 中 的 过 敏 蛋 白 及 其 过 敏 原 性, 以 期 为 过 敏 性 疾 病 的 特 异 性 诊 断 以 及 白 果 食 品 的 安 全 开 发 提 供 指 导 1 材 料 与 方 法 1.1 材 料 与 试 剂 材 料 白 果 为 大 佛 指 品 种, 购 自 江 苏 泰 兴 试 剂 与 仪 器 HRP( 辣 根 过 氧 化 物 酶 ) 标 记 的 羊 抗 鼠 IgE 抗 体 SDS- PAGE 凝 胶 电 泳 所 用 试 剂 美 国 Sigma 公 司 ; 低 分 子 质 量 蛋 白 标 准 葡 萄 糖 牛 血 清 蛋 白 上 海 生 化 试 剂 公 司 ; 邻 苯 二 胺 (OPD) 二 氨 基 联 苯 胺 (DAB) 显 色 试 剂 华 美 公 司 ; 其 他 试 剂 均 为 国 产 分 析 纯 TU-1800PC 紫 外 - 可 见 分 光 光 度 计 北 京 普 析 通 用 仪 器 有 限 责 任 公 司 ;GL-20G- II 型 冷 冻 离 心 机 上 海 安 亭 科 学 仪 器 厂 ;PHS-25 型 ph 计 上 海 智 光 仪 器 仪 表 有 限 公 司 ;DYY-6C 型 电 泳 仪 DYCZ-24D 垂 直 板 电 泳 槽 北 京 六 一 仪 器 厂 ;BIO-RAD 电 泳 自 动 成 像 仪 BIO-RAD 半 干 式 转 印 仪 美 国 BIO-RAD 生 化 科 技 有 限 公 司 ; Thermo354 型 酶 标 仪 96 孔 酶 标 板 Thereto Labsystem 公 司 动 物 小 鼠, 健 康 成 年 昆 明 种 小 白 鼠, 雄 性, 体 质 量 (20 ±2)g, 由 南 京 江 宁 区 青 龙 山 动 物 繁 殖 场 提 供 1.2 方 法 白 果 蛋 白 粗 提 液 的 制 备 取 白 果 50g, 冷 冻 干 燥 后, 研 磨 过 筛,5 倍 体 积 石 油 醚 脱 脂 至 脱 脂 完 全 为 止, 待 石 油 醚 完 全 挥 发 后, 以 1:20 (m/v) 的 比 例 加 入 ph mol/L Tris-HCl 溶 液 进 行 蛋 白 提 取,4 下 磁 力 搅 拌 24h,12000r/min 冷 冻 离 心 20min, 上 清 液 通 过 40~80g/100mL 饱 和 度 的 (NH4)2SO4 沉 淀,12000r/min 离 心 10min, 沉 淀 用 ph mol/L 磷 酸 盐 缓 冲 液 (PBS) 溶 解, 采 用 透 析 袋 用 PBS 进 行 透 析 透 析 完 全 后,4 贮 存 备 用 免 疫 小 鼠 模 型 的 建 立 成 年 小 鼠 分 成 3 组, 每 组 40 只 雄 性 实 验 组 分 为 阴 性 对 照 组 白 果 蛋 白 组 阳 性 对 照 组, 具 体 如 下 : 阴 性 对 照 组 :0.2mol/L ph 7.4 的 Tris-HCl 经 口 灌 胃 致 敏 和 腹 腔 注 射 激 发 ; 白 果 蛋 白 组 :100mg/mL 白 果 蛋 白 经 口 灌 胃 致 敏 200mg/mL 白 果 蛋 白 经 口 灌 胃 激 发 ; 阳 性 对 照 组 :0.50mg/mL 的 卵 白 蛋 白 经 口 灌 胃 致 敏 1.0mg/mL 卵 白 蛋 白 腹 腔 注 射 激 发 每 组 小 鼠 均 在 第 天 致 敏, 第 21 天 激 发 致 敏 激 发 剂 量 均 为 0.3mL/10g 体 质 量 末 次 激 发 后 第 14 天 采 血, 收 集 的 血 清 放 置 在 室 温 中 自 然 凝 固 3~4h 待 血 液 凝 固 血 块 收 缩 后, 用 毛 细 滴 管 吸 取 血 清 于 3000r/min 离 心 15min, 取 上 清, 分 装 后 置 4 冰 箱 中 保 存 备 用 测 定 时, 取 5mL 血 清 与 等 量 的 生 理 盐 水 混 合 后, 缓 慢 加 入 20g/100mL 的 硫 酸 铵 使 有 沉 淀 产 生 充 分 混 合 后,4 放 置 30min; 后 于 3000r/min 离 心 20min, 弃 沉 淀, 上 清 液 中 继 续 加 入 硫 酸 铵 至 浓 度 为 50g/100mL,4 放 置 30min, 经 5000r/min 离 心 30min, 收 集 沉 淀 溶 于 10mL 的 生 理 盐 水, 加 入 硫 酸 铵 至 终 浓 度 为 33g/100mL, 4 放 置 30min, 后 于 3000r/min 离 心 20min, 沉 淀 以 33g/100mL 饱 和 度 的 硫 酸 铵 溶 液 洗 涤 两 次 后, 溶 解 于 l0ml 生 理 盐 水 中, 置 于 透 析 袋 中 在 生 理 盐 水 中 透 析 过 夜, 处 理 好 的 血 清 用 于 IgE 测 定 SDS-PAGE 分 析 调 整 白 果 蛋 白 粗 提 物 质 量 浓 度 为 1mg/mL, 将 白 果 蛋 白 提 取 液 与 样 品 缓 冲 液 按 1:1 的 比 例 混 合,100 煮 沸 5min,12000r/min 离 心 5min, 上 样 20μL,12% 分 离 胶,3.9% 浓 缩 胶 开 始 电 流 10mA, 进 入 分 离 胶 后 为 20mA, 电 泳 时 间 为 2.5~3.5h 考 马 斯 亮 蓝 R-250 染 色, 过 夜, 放 入 脱 色 液 中 脱 色, 直 至 胶 片 背 景 蓝 色 完 全 透 明 状 BIO-RAD 电 泳 自 动 成 像 仪 拍 照, 蛋 白 质 分 子 质 量 运 用 Quality one 软 件 进 行 分 析 Western-Blotting 分 析 使 用 BIO-RAD 半 干 式 转 印 仪 将 SDS-PAGE 凝 胶 中 的 蛋 白 条 带 转 移 至 PVDF( 聚 偏 氟 乙 烯 ) 膜 上 ; 转 移 结 束 后, 0.01mol/L PBS 洗 膜,5min 3 次, 将 膜 用 5g/100mL OVA ( 卵 蛋 白 ) 封 闭 2h;PBST 漂 洗, 加 入 抗 血 清 ( 按 1:100 稀 释 ), 设 阴 性 对 照,4 放 置 12h 以 上 ;PBST 漂 洗,5min 3 次, 加 入 羊 抗 鼠 IgE-HRP( 按 1:500 稀 释 ), 室 温 孵 育 2h, PBST 漂 洗,5min 3 次 加 入 DAB 显 色 液, 显 色 后 用 水 终 止 反 应, 结 果 拍 照 保 存 间 接 ELISA 检 测 抗 血 清 中 sige 用 包 被 缓 冲 液 将 白 果 蛋 白 稀 释 至 一 定 质 量 浓 度, 加 到 96 孔 酶 标 板,100μL/ 孔,4 过 夜 ; 次 日 用 PBST 液 洗 涤 3 次, 拍 干 ; 将 酶 标 板 孔 内 加 入 封 闭 液,200μL/ 孔, 37 恒 温 箱 中 孵 育 2h, 同 上 洗 涤 ; 将 一 定 质 量 浓 度 的
![藏 蛋 白 具 有 免 疫 原 性 本 课 题 组 在 此 基 础 上, 已 应 用 豚 鼠 为 实 验 动 物, 明 确 了 白 果 蛋 白 具 [13] 有 致 敏 性, 并 建 立 了 白 果 蛋 白 过 敏 反 应 的 小 鼠 模 型, 本 研 究 正 是 基 于 此 模 型, 初 步 鉴 定 白 果 中 的 过 敏 蛋 白, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析, 旨 在 明 确](/docs-images/43/23115739/images/page_2.jpg "白 果 中 的 过 敏 蛋 白 及 其 过 敏 原 性, 以 期 为 过 敏 性 疾 病 的 特 异 性 诊 断 以 及 白 果 食 品 的 安 全 开 发 提 供 指 导 1")
3 18 抗 血 清 加 入 板 孔,100μL/ 孔,37 恒 温 箱 中 孵 育 2h, 同 上 洗 涤 ; 加 入 羊 抗 鼠 IgE-HRP,100μL/ 孔,37 恒 温 箱 中 孵 育 2h, 同 上 洗 涤 ; 再 加 现 配 制 的 OPD 底 物 显 色 液,37 避 光 显 色 30 min; 加 入 2mol/L 的 H2SO4 终 止 液, 每 孔 50μL, 用 ELISA 酶 标 仪 于 492nm 波 长 处, 以 空 白 对 照 孔 调 零 后 测 定 各 孔 OD 值 结 果 判 定 : 计 算 待 检 测 孔 与 阴 性 对 照 孔 的 OD492nm 之 比 (P/N), 当 P/N 2.1 时, 为 阳 性 ; 当 P/N < 2.1 时, 为 阴 性 酶 标 二 抗 浓 度 的 确 定 按 照 ELISA 操 作 步 骤, 用 包 被 缓 冲 液 将 抗 血 清 稀 释 为 1:200 1:400 1:800 1:1600 1:3200 1:6400; 将 羊 抗 鼠 IgE-HRP, 分 别 稀 释 为 1:500 1:1000 1:2000, 依 次 加 入 酶 标 板, 两 者 37 作 用 2h 后, 再 加 底 物 液 作 用 30min, 加 终 止 液, 在 酶 标 仪 上 读 取 OD492nm 值 抗 原 最 佳 包 被 质 量 浓 度 和 抗 血 清 最 佳 稀 释 度 的 确 定 采 用 棋 盘 法 将 包 被 抗 原 稀 释 为 μg/mL 和 100μg/mL, 加 入 到 酶 标 板 中, 每 行 1 个 稀 释 度,4 过 夜 ; 将 抗 血 清 稀 释 为 1:200 1:400 1:800 1:1600 1:3200 1:6400 1:12800 加 入 酶 标 板 中, 每 一 列 为 1 个 稀 释 度,37 孵 育 2h 其 余 反 应 同 ELISA 操 作 步 骤, 测 定 各 孔 OD492nm 抗 血 清 sige 效 价 的 测 定 将 抗 血 清 按 照 1:200 1:400 1:800 1:1600 1:3200 1:6400 1:12800 的 比 例 稀 释, 采 用 间 接 ELISA 法 测 定 其 效 价 以 阳 性 血 清 和 阴 性 血 清 的 OD492nm 之 比 (P/N) 大 于 2.1 的 血 清 最 高 稀 释 倍 数 作 为 抗 体 的 效 价 蛋 白 质 量 浓 度 的 测 定 [14] 应 用 Bradford 法, 以 牛 血 清 蛋 白 为 标 准 蛋 白, 标 准 曲 线 方 程 为 Y=8.2134X (R 2 =0.9985) 1.3 统 计 学 分 析 数 据 采 用 DPS(version 3.01) 统 计 软 件 进 行 统 计 分 析, 设 置 显 著 水 平 分 别 为 P < 0.05 及 P < 0.01 所 有 实 验 设 3 次 重 复, 结 果 均 为 平 均 值, 以 平 均 值 ± 标 准 误 表 示, 并 进 行 方 差 分 析 和 Duncan, s 检 验 2 结 果 与 分 析 2.1 白 果 蛋 白 粗 提 液 SDS-PAGE 电 泳 分 析 对 白 果 蛋 白 提 取 液 进 行 SDS-PAGE 凝 胶 电 泳, 如 图 1 所 示 白 果 的 蛋 白 质 条 带 主 要 有 13 条, 其 分 子 质 量 介 于 10~100kD 之 间, 白 果 蛋 白 分 子 质 量 最 大 为 99kD, 最 小 的 为 13kD, 其 中 含 量 高 的 有 6 条, 分 子 质 量 分 别 为 kD, 其 中 以 21kD 和 32kD 含 量 最 多 白 果 的 蛋 白 条 带 主 要 集 中 在 31~100kD, 占 蛋 白 总 条 数 的 77%, 其 余 蛋 白 条 带 集 中 在 13~22kD 范 围 内, 可 见 白 果 蛋 白 多 以 大 分 子 的 结 构 存 在, 蛋 白 质 带 表 现 出 了 良 好 的 多 态 性 白 果 中 蛋 白 种 类 丰 富, 主 要 存 在 分 子 质 量 为 21kD 和 32kD 的 两 种 蛋 白, 以 及 十 余 种 含 量 略 低 的 其 他 蛋 白, 大 分 子 蛋 白 较 多 97.0kD 66.2kD 43.0kD 31.0kD 20.1kD 14.4kD M 1 2 M. 蛋 白 质 分 子 质 量 标 准 ;1 2. 白 果 蛋 白 图 1 白 果 蛋 白 提 取 液 的 SDS-PAGE 结 果 Fig.1 SDS-PAGE of ginkgo seed proteins 2.2 Western-Blotting 分 析 鉴 定 白 果 的 主 要 过 敏 蛋 白 Western-Blotting 是 将 经 过 SDS-PAGE 分 离 的 蛋 白 质 样 品, 转 移 到 固 相 载 体 (PVDF 膜 ) 上, 以 固 相 载 体 上 的 蛋 白 质 作 为 抗 原, 与 对 应 的 抗 体 起 免 疫 反 应, 再 与 酶 标 记 的 第 二 抗 体 起 反 应, 经 过 底 物 显 色 以 检 测 电 泳 分 离 的 特 异 性 的 蛋 白 成 分 将 白 果 蛋 白 进 行 Western-Blotting 分 析, 结 果 如 图 2 所 示 97.0kD 66.2kD 43.0kD 31.0kD 20.1kD 14.4kD M 1 2 过 敏 小 鼠 血 清 经 免 疫 印 迹 检 测 均 有 阳 性 区 带 产 生, 而 阴 性 对 照 血 清 未 显 示 特 异 性 IgE 结 合 区 带 白 果 蛋 白 组 分 中 可 与 过 敏 小 鼠 抗 血 清 中 的 IgE 特 异 性 结 合 的 主 要 有 3 种 蛋 白 组 分, 其 分 子 质 量 分 别 为 kD, 可 初 步 确 定 其 为 白 果 中 主 要 的 过 敏 原 蛋 白 据 报 道, 大 豆 中 的 3 种 主 要 致 敏 原 是 Glym Bd 30k Glym Bd 28k 和 β- 伴 大 豆 球 蛋 白, 其 分 子 质 量 分 别 为 30 28kD, 而 大 米 中 已 分 离 得 到 的 6 种 过 敏 蛋 白, 分 子 质 量 分 别 为 kD 和 56kD [15], 可 见, 白 果 过 敏 蛋 白 与 其 他 核 果 类 过 敏 原 中 存 在 的 主 要 过 敏 原 蛋 白 在 分 子 质 量 上 具 有 一 定 的 相 似 性 M. 蛋 白 质 分 子 质 量 标 准 ;1. 白 果 蛋 白 免 疫 印 迹 阳 性 条 带 ;2. 阴 性 对 照 图 2 白 果 蛋 白 的 Western-Blotting 结 果 Fig.2 Western-Blotting of ginkgo seed proteins
4 基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No 间 接 ELISA 检 测 抗 血 清 中 sige 酶 标 二 抗 浓 度 的 确 定 分 别 将 羊 抗 鼠 IgE-HRP 稀 释 为 1:500 1:1000 和 1:2000, 在 不 同 的 抗 血 清 稀 释 度 下 测 得 的 OD492nm 如 图 3 所 示 OD492nm :200 1:400 1:800 1:1600 1:3200 1:6400 抗 血 清 稀 释 度 1:500 1:1000 1:2000 图 3 不 同 血 清 稀 释 度 下 HRP- 羊 抗 鼠 IgE 稀 释 度 的 OD492nm Fig.3 Plot of OD492nm versus different dilutions of antiserum with different dilutions of goat anti-mouse IgE-HRP 随 着 羊 抗 鼠 IgE-HRP 稀 释 度 增 大, 各 孔 OD 值 逐 渐 减 小 当 羊 抗 鼠 IgE-HRP 稀 释 至 1:2000 时,OD 值 较 稀 释 度 1:500 和 1:1000 显 著 降 低 (P > 0.05) 但 羊 抗 鼠 IgE- HRP 稀 释 为 1:500 和 1:1000,OD492nm 值 较 接 近 一 般 情 况 下,ELISA 检 测 仪 在 检 测 OD 值 时,OD 值 为 1.0 左 [16] 右 时 误 差 最 小, 反 应 最 灵 敏 羊 抗 鼠 IgE-HRP 在 稀 释 度 1:1000, 血 清 稀 释 度 为 1:400 时,OD492nm 为 0.992, 接 近 1.0, 另 外 从 节 约 成 本 角 度 考 虑, 本 实 验 确 定 酶 标 二 抗 的 最 佳 工 作 稀 释 度 为 1: 抗 原 最 佳 包 被 质 量 浓 度 和 抗 血 清 最 佳 稀 释 度 的 确 定 通 过 以 不 同 质 量 浓 度 的 白 果 蛋 白 包 被 酶 标 板, 然 后 加 入 不 同 稀 释 度 的 抗 血 清, 再 通 过 酶 标 二 抗 的 作 用, 不 同 质 量 浓 度 的 过 敏 原 与 不 同 稀 释 度 的 抗 血 清 作 用 的 OD492nm 值, 结 果 见 图 4 随 着 抗 血 清 稀 释 度 的 增 加, 不 同 抗 原 包 被 质 量 浓 度 下 测 得 的 OD 值 逐 渐 减 小, 当 包 被 的 白 果 蛋 白 质 量 浓 度 为 50μg/mL 和 100μg/mL 时 测 得 的 OD 值 较 高, 当 包 被 的 白 果 蛋 白 质 量 浓 度 为 50μg/mL, 血 清 稀 释 度 为 1:500 时,OD492nm 为 0.997, 接 近 1.0, 且 此 时 阳 性 血 清 和 阴 性 血 清 的 OD492nm 的 比 值 P/N 为 8.982, 其 值 远 远 大 于 2.1, 因 此 确 定 抗 原 的 最 佳 包 被 质 量 浓 度 为 50μg/mL, 包 被 是 ELISA 实 验 中 关 键 的 一 步, 如 果 质 量 浓 度 过 低, 包 被 液 中 的 蛋 白 质 不 能 完 全 覆 盖 固 相 载 体 表 面, 随 后 加 入 的 特 异 性 抗 体 和 酶 标 二 抗 就 有 可 能 直 接 被 吸 附 到 固 相 载 体 上, 最 后 产 生 非 特 异 性 显 色 而 使 检 [17] 测 结 果 偏 高 ; 质 量 浓 度 过 高, 蛋 白 质 分 子 的 相 互 作 用 影 响 聚 苯 乙 烯 与 蛋 白 质 之 间 的 吸 附, 以 至 在 随 后 的 抗 原 抗 体 反 应 洗 涤 等 步 骤 中, 部 分 抗 原 或 与 抗 体 结 合 释 放 到 洗 涤 液 中 被 弃 去, 或 直 接 释 放 到 洗 涤 液 中 造 成 抗 原 [18] 的 浪 费, 本 实 验 确 定 抗 原 的 最 佳 包 被 质 量 浓 度 为 50μg/mL, 取 得 了 较 好 的 包 被 效 果 OD492nm :200 1:400 1:800 1:1600 1:3200 1:64001:12800 抗 血 清 稀 释 度 100μg/mL 50μg/mL 10μg/mL 5μg/mL 阴 性 对 照 图 4 白 果 蛋 白 不 同 包 被 质 量 浓 度 时 不 同 稀 释 度 血 清 的 OD492nm Fig.4 Plot pf OD492nm versus different dilutions of antiserum with different coating concentrations of ginkgo seed proteins 2.4 抗 血 清 sige 效 价 的 测 定 本 实 验 采 用 间 接 ELISA 法 测 定 经 白 果 蛋 白 免 疫 后 的 过 敏 小 鼠 血 清 中 sige 的 效 价, 以 阳 性 血 清 和 阴 性 血 清 的 OD492nm 之 比 (P/N) 大 于 2.1 的 血 清 最 高 稀 释 倍 数 作 为 抗 体 的 效 价, 结 果 见 表 1 表 1 抗 血 清 IgE 效 价 测 定 结 果 Table 1 Determination results of mouse serum IgE titer 序 号 稀 释 比 例 OD492nm P/N 阳 / 阴 性 反 应 1 1: ± : ± : ± : ± : ± : ± : ± 阴 性 对 照 ± 将 抗 血 清 按 照 一 定 的 比 例 稀 释 后, 除 抗 血 清 稀 释 度 为 1:12800 外, 其 余 稀 释 度 中 各 反 应 皆 为 阳 性 反 应, 阳 性 血 清 和 阴 性 血 清 的 OD492nm 之 比 P/N 都 大 于 2.1, 因 此 确 定 抗 血 清 中 sige 的 效 价 为 1:6400 本 实 验 测 得 的 sige [17] 的 效 价 较 报 道 的 其 他 过 敏 原 效 价 较 低, 分 析 原 因, 可 能 是 因 为 酶 联 免 疫 是 很 强 的 非 特 异 性 吸 附 反 应, 而 制 得 的 多 克 隆 抗 体 只 经 过 硫 酸 铵 沉 淀 未 经 过 层 析 法 进 一 步 纯 化, 使 得 制 得 的 多 克 隆 抗 体 中 除 了 一 些 特 异 性 的 抗 体 以 外, 还 有 存 在 某 些 杂 质 和 其 他 抗 体 成 分, 这 些 物 质 的 [19] 存 在 一 定 程 度 上 降 低 了 特 异 性 抗 体 的 灵 敏 性 目 前, 测 定 抗 体 效 价 的 方 法 很 多, 结 果 比 较 粗 放, 采 用 琼 脂 扩 散 的 方 法 比 较 多, 但 由 于 影 响 因 素 比 [20] 较 多, 而 且 敏 感 度 比 较 低 间 接 酶 联 免 疫 的 方 法 克 服 了 这 些 缺 点, 而 且 操 作 简 便 由 于 多 克 隆 抗 体 存 在 大 量 的 抗 原 决 定 簇, 很 容 易 和 抗 体 进 行 结 合, 特 别 适 合 于 用 酶 联 免 疫 的 方 法 检 测, 而 且 在 检 测 过 程 中 经 常 采 用 酶 联 免 疫 的 方 法, 能 够 对 以 后 检 测 过 程 中 抗 体 的 使 用 提 供 直 接 的 指 导
5 20 3 结 论 3.1 通 过 Tris-HCl 法 提 取 白 果 蛋 白, 并 采 用 SDS-PAGE 分 析 白 果 蛋 白 的 分 子 组 成 及 其 分 子 质 量, 结 果 表 明, 白 果 的 蛋 白 质 条 带 主 要 有 13 条, 其 中 以 21kD 和 32kD 含 量 最 多 3.2 通 过 Western-Blotting 分 析 鉴 定 白 果 的 主 要 过 敏 原, 结 果 初 步 表 明 白 果 中 主 要 存 在 3 种 蛋 白 过 敏 原, 其 分 子 质 量 分 别 为 kD 3.3 采 用 间 接 ELISA 法 测 定 经 白 果 蛋 白 免 疫 后 的 过 敏 小 鼠 血 清 中 sige 的 效 价, 结 果 表 明 当 酶 标 二 抗 浓 度 为 1:1000, 白 果 蛋 白 包 被 质 量 浓 度 为 50μg/mL 时, 测 得 过 敏 小 鼠 血 清 中 sige 的 效 价 为 1:6400 参 考 文 献 : [1] HEIMO B, CLARE M. Plant food allergens:structural and functional aspects of allergenicity[j]. Biotechnology Advances, 2005, 23: [2] 聂 凌 鸿. 食 物 过 敏 原 研 究 进 展 [J]. 生 命 的 化 学, 2002, 22(5): [3] 曹 福 亮. 中 国 银 杏 志 [M]. 北 京 : 中 国 林 业 出 版 社, [4] 钱 丙 炎. 银 杏 的 功 效 [M]. 邳 州 : 邳 州 市 银 杏 科 学 研 究 所, [5] van BEEK T A. Chemical analysis of Ginkgo biloba leaves and extracts [J]. Journal of Chromatography A, 2002, 967: [6] BARON-RUPPERT G, LUEPKE N P. Evidence for toxic effects of alkylphenols from Ginkgo biloba in the hen, s egg test[j]. Phytomedicine, 2001, 8, [7] ARENZ A, KLEIN M, FIEHE K, et al. Occurrence of neurotoxic 4'-Omethylpyridoxine in Ginkgo biloba leaves, ginkgo medications and Japanese ginkgo food[j]. Planta Med, 1996, 62: [8] 杨 剑 婷, 吴 彩 娥. 白 果 致 过 敏 成 分 及 其 致 敏 机 理 研 究 进 展 [J]. 食 品 科 技, 2009, 34(6): [9] UWE J, HEIKE B. Legumin-like proteins in gymnosperms[j]. Phytochemistry, 1989, 28(5): [10] 牛 卫 宁, 郭 霭 光. 银 杏 种 仁 中 抗 菌 蛋 白 的 纯 化 及 性 质 [J]. 西 北 植 物 学 报, 2003, 23(9): [11] 黄 文, 谢 笔 钧, 王 益, 等. 白 果 蛋 白 的 分 离 纯 化 理 化 特 性 及 其 抗 氧 化 活 性 研 究 [J]. 中 国 农 业 科 学, 2004, 37(10): [12] 郭 红 彦. 银 杏 营 养 贮 藏 蛋 白 质 的 分 离 鉴 定 及 特 性 研 究 [D]. 南 京 : 南 京 林 业 大 学, [13] 杨 剑 婷, 吴 彩 娥, 李 莹 莹, 等. 白 果 蛋 白 过 敏 动 物 模 型 的 试 验 研 究 [J]. 中 国 农 业 科 学, 2010, 43(17): [14] BRADFORD M M. Rapid and sensitive method for quantitation of microgram quantities of protein utilizing principle of protein:dye binding [J]. Analytical Biochemistry, 1976, 72: [15] 卢 大 用. 食 品 中 的 蛋 白 过 敏 原 及 其 检 测 [J]. 食 品 研 究 与 开 发, 2000, 21(2): [16] 刘 合 义, 孙 留 霞, 王 进 轶, 等. 牛 冠 状 病 毒 重 组 N 蛋 白 间 接 ELISA 检 测 方 法 的 建 立 [J]. 中 国 预 防 兽 医 学 报, 2009, 31(8): [17] 李 金 明. 临 床 酶 免 测 定 技 术 [M]. 北 京 : 人 民 军 医 出 版 社, [18] 张 也, 刘 以 祥. 酶 联 免 疫 技 术 与 食 品 安 全 快 速 检 测 [J]. 食 品 科 学, 2003, 24(8): [19] 李 文 敏. 酶 联 免 疫 吸 附 反 应 的 技 术 进 展 及 应 用 [J]. 中 国 动 物 检 疫, 2003, 6(4): [20] 朱 立 平, 陈 学 清. 免 疫 学 常 用 实 验 方 法 [M]. 北 京 : 人 民 军 医 出 版 社, 2000.
![3 采 用 间 接 ELISA 法 测 定 经 白 果 蛋 白 免 疫 后 的 过 敏 小 鼠 血 清 中 sige 的 效 价, 结 果 表 明 当 酶 标 二 抗 浓 度 为 1:1000, 白 果 蛋 白 包 被 质 量 浓 度 为 50μg/mL 时, 测 得 过 敏 小 鼠 血 清 中 sige 的 效 价 为 1:6400 参 考 文 献 : [1] HEIMO B, CLARE M.](/docs-images/43/23115739/images/page_5.jpg "Plant food allergens:structural and functional aspects of allergenicity[j]. Biotechnology Advances, 2005, 23: 395-399. [2] 聂 凌 鸿. 食 物 过 敏 原 研 究 进 展 [J]. 生 命 的 化 学, 2002, 22(5): 474-477. [3] 曹 福 亮.")
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21 11 2011 11 COMPUTER TECHNOLOGY AND DEVELOPMENT Vol. 21 No. 11 Nov. 2011 510006 PEN3 5 PCA + PCA+LDA 5 5 100% TP301 A 1673-629X 2011 11-0177-05 Application of Electronic Nose in Discrimination of Different
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目 录 C O N T E N T S 21 世 纪 的 养 生 大 趋 势 寻 找 最 自 然 的 自 我 保 健 法 1. 新 世 纪, 新 期 望, 需 要 新 的 养 生 观 点 / 2 2. 生 物 节 律 养 生 应 运 而 生 / 3 3. 注 重 生 物 节 律 养 生, 为 健 康 加 油 / 5 第 课 探 索 充 满 节 律 的 世 界 课 前 热 身 : 判 断 2 分 钟
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1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法
![1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法](/thumbs/40/22057924.jpg "1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法")
1448 相 对 校 正 因 子 在 中 药 多 指 标 测 定 中 的 应 用 研 究 进 展 1, 罗 祖 良 2, 仇 峰 1 1,, 韦 日 伟 2 1,, 覃 禹 2, 张 坤 1, 覃 洁 萍 2, 杨 美 华 1. 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京 100193 2. 广
220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原
![220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原](/thumbs/42/22870184.jpg "220 20, Vol. 32, No. 6 食 品 科 学 分 析 检 测 荡 体 系 被 用 来 检 测 和 鉴 别 组 成 极 其 复 杂 的 中 药 2007 年 [7-20] 张 泰 铭 等 提 出 了 中 药 非 线 性 化 学 指 纹 图 谱 的 概 念, 并 对 其 形 成 的 原")
29 赵 哲, 张 泰 铭, *, 方 宣 启 2, 向 凤 琴, 乔 君 喜, 朱 蓉 (. 中 南 大 学 化 学 化 工 学 院, 湖 南 长 沙 40083;2. 湖 南 省 食 品 质 量 监 督 检 验 所, 湖 南 长 沙 40002) 通 过 向 稳 态 体 系 溴 酸 钠 - 硫 酸 锰 - 硫 酸 - 丙 酮 中 加 入 不 同 的 茶 饮 料, 获 得 来 自 不 同 产 家
4期
中 国 农 学 通 报 2013,29(04):39-43 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 药 荆 芥 最 新 研 究 进 展 1,2 1,2 赵 立 子, 魏 建 和 ( 1 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 北 京 100193; 2 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京
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土 壤 (Soils), 2014, 46(5): 875 880 1 缺 钾 对 油 菜 主 序 产 量 性 状 的 影 响 及 施 钾 效 果 * ( 430070) (+K) ( K) 1 321 kg/hm 2 111% 50.1% 9.2% 33.6% 21.6% 10.3% 69.6% 41.7% 20.1% 124.4% S143.3 57.2% [1] [2] [3] [4 6] 2005
GB 15973—1995麻风病诊断标准及处理原则
炭 疽 诊 断 标 准 及 处 理 原 则 前 言 GB 17015 1997 炭 疽 (Anthrax) 是 由 炭 疽 芽 孢 杆 菌 (Bacillus anthracis) 引 起 的 一 种 人 与 动 物 共 患 传 染 病, 主 要 存 在 于 食 草 动 物 和 牲 畜 群 落 之 中, 并 能 造 成 环 境 的 广 泛 污 染 由 于 炭 疽 芽 孢 具 有 对 外 界 环 境
4.1 液 相 色 谱 - 三 重 四 极 杆 质 谱 联 用 仪 4.2 天 平 4.3 超 声 波 清 洗 仪 4.4 离 心 机 4.5 涡 旋 混 合 仪 5 分 析 步 骤 5.1 标 准 系 列 溶 液 的 制 备 分 别 精 密 吸 取 10.0 µg/ml 的 标 准 工 作 溶 液
附 件 1 化 妆 品 中 丙 烯 酰 胺 的 检 测 方 法 ( 征 求 意 见 稿 ) 1 范 围 本 方 法 规 定 了 化 妆 品 中 丙 烯 酰 胺 的 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 测 定 方 法 本 方 法 适 用 于 液 态 水 基 类 液 态 油 基 类 凝 胶 类 膏 霜 乳 液 类 粉 类 化 妆 品 中 丙 烯 酰 胺 的 测 定 2 方 法 提 要 样 品 提 取 净
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06 Chinese Journal of Information on TCM Mar.202 Vol.9 No.3 蛋 黄 油 的 现 代 研 究 进 展 严 建 业,2, 王 璐, 李 顺 祥, 胡 珀, 刘 立 鹃. 湖 南 中 医 药 大 学 药 学 院 中 药 现 代 化 教 育 厅 重 点 实 验 室, 湖 南 长 沙 40208; 2. 湖 南 省 中 医 药 研 究 院 中 药 新
2001,30(1):1-4
Subtropical Plant Science 2015,44(3): 188~192. 三 种 植 物 生 长 调 节 剂 对 楝 叶 吴 茱 萸 光 合 作 用 的 影 响 董 奇 妤 1, 张 亮 2, 张 亨 3, 王 婧 1, 陈 红 跃 (1. 华 南 农 业 大 学 林 学 与 风 景 园 林 学 院, 广 东 广 州 510642;2. 广 东 省 林 业 调 查 规 划 院,
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微 生 物 学 通 报 FEB 20, 2008, 35(2) 306~30 Microbiology 2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@im.ac.cn 生 物 实 验 室 响 应 面 分 析 法 优 化 副 溶 血 性 弧 菌 生 长 条 件 刘 代 新 宁 喜 斌 * 张 继 伦 2 (. 200090) (2. 20202) 摘 要
杭 州 安 鸿 科 技 股 份 有 限 公 司 财 务 报 表 附 注 2013 年 1 月 1 日 至 2015 年 10 月 31 日 一 公 司 基 本 情 况 杭 州 安 鸿 科 技 股 份 有 限 公 司 ( 以 下 简 称 公 司 或 本 公 司 ) 前 身 系 杭 州 安 鸿 科 技 有 限 公 司 ( 以 下 简 称 安 鸿 有 限 公 司 ), 安 鸿 有 限 公 司 系 由 谢
380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂
![380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂](/thumbs/43/23114460.jpg "380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂")
中 国 细 胞 生 物 学 学 报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(4): 379-384 http://www.cjcb.org 全 小 麦 啤 酒 酵 母 菌 株 的 诱 变 育 种 及 应 用 研 究 袁 仲 1* 张 百 胜 1 张 慎 举 1 马 绮 云 2 陈 柯 羽 2 ( 1 商 丘 职 业 技 术 学 院 园 林 食 品 加 工 系,
中华人民共和国国家环境保护标准
中 华 人 民 共 和 国 国 家 环 境 保 护 标 准 HJ 809-2016 水 质 亚 硝 胺 类 化 合 物 的 测 定 气 相 色 谱 法 Water quality-determination of nitrosamine compounds Gas chromatography ( 发 布 稿 ) 本 电 子 版 为 发 布 稿 请 以 中 国 环 境 科 学 出 版 社 出 版 的
第 33 卷 第 2 期 2010 年 4 月 - 149 - 脱 蛋 白 较 好 的 方 法 是 Sevag 法, 它 是 根 据 蛋 白 质 在 氯 仿 等 有 机 溶 剂 中 变 性 的 特 点, 使 蛋 白 质 变 性 成 胶 状, 此 法 条 件 温 和, 可 避 免 多 糖 的 降 解
- 148 - Drug Evaluation Research Vol.33 No.2 April 2010 植 物 多 糖 的 研 究 进 展 陶 遵 威 1, 郑 夺 1, 邸 明 磊 2, 单 晓 菊 1 天 津 市 医 药 科 学 研 究 所, 天 津 300020; 2 天 津 中 医 药 大 学, 天 津 300073 2 摘 要 多 糖 是 由 单 糖 连 接 而 成 的 多 聚 物,
P3 膠體電泳法
Polyacrylamide Gel Electrophoresis 聚 丙 烯 醯 胺 膠 体 電 泳 莊 榮 輝 3.1 電 泳 原 理 帶 電 分 子 在 電 場 中 能 夠 移 動, 稱 作 泳 動, 泳 動 的 程 度 稱 為 泳 動 率 (mobility).. 泳 動 率 ~ ( 所 外 加 電 壓 mv) ( 分 子 之 淨 電 荷 ) 分 子 與 介 質 間 之 摩 擦 力 上 述
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中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 8 期 2013 年 4 月 989 养 阴 清 肺 糖 浆 指 纹 图 谱 研 究 1, 姜 姗 2, 冯 丽 君 2, 孔 慧 2, 曲 昌 海 2, 尹 兴 斌 2, 倪 健 1. 北 京 中 医 药 大 学 教 务 处, 北 京 100029 2. 北 京 中 医 药 大 学 中 药 学
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神 奇 的 滅 孑 師 太 ~~ 探 討 日 常 生 活 常 用 水 溶 液 及 植 物 對 於 消 滅 孑 孓 之 成 效 壹 研 究 動 機 春 眠 不 覺 曉, 處 處 蚊 子 咬, 夜 來 巴 掌 聲, 蚊 子 死 多 少? 夏 天 即 將 到 來, 蚊 子 的 惡 夢 一 直 困 擾 著 我 們 了, 班 上 同 學 舉 起 手 腳 指 著 一 個 一 個 紅 豆 冰 咒 念, 真 是 令
Taiwan Forestry Journal 寫 給 志 工 夥 伴 的 一 段 話 : 能 有 這 樣 的 機 會 與 這 些 真 實 無 偽 珍 愛 萬 物 的 朋 友 相 識, 是 工 作 中 的 快 樂 泉 源 這 群 以 天 為 幕 以 地 為 床 為 自 然 與 人 之 間 搭 起 親
志 工 森 情 快 樂 志 工 永 續 山 林 側 寫 林 務 局 志 工 保 母 暨 典 範 志 工 ( 二 ) 文 圖 邢 玉 玫 林 務 局 國 家 森 林 志 願 服 務 計 畫 修 訂 暨 推 展 活 化 計 畫 共 同 主 持 人 新 竹 林 區 管 理 處 於 85 年 7 月 召 幕 第 一 期 解 說 志 工, 至 今 已 召 募 四 期, 培 訓 服 勤 123 名 解 說 志
12-1b T Q235B ML15 Ca OH Table 1 Chemical composition of specimens % C Si Mn S P Cr Ni Fe
* - - 100084 Q235B ML15 Ca OH 2 DOI 10. 13204 /j. gyjz201508023 STUDY OF GALVANIC CORROSION SENSITIVITY BETWEEN ANY COUPLE OF STUD WELDMENT OR BEAM Lu Xinying Li Yang Li Yuanjin Department of Civil Engineering
太 平 人 寿 [2015] 意 外 伤 害 保 险 67 号 太 平 附 加 守 护 天 使 意 外 伤 害 保 险 条 款 请 扫 描 以 查 询 验 证 条 款 特 别 提 示 感 谢 您 选 择 了 太 平 人 寿 保 险 有 限 公 司 为 了 方 便 您 更 好 地 理 解 保 险 条 款, 我 们 提 供 了 以 下 常 用 的 基 本 名 词 释 义 基 本 名 词 释 义 : 投
2月5期aa
中 国 农 学 通 报 212,28():2-27 Chinese Agricultural cience Bulletin 血 清 11 型 鸭 疫 里 默 氏 菌 的 分 离 鉴 定 1,2 2, 2, 2, 2, 2, 2, 杨 晓 辉, 程 龙 飞, 陈 红 梅, 施 少 华, 傅 光 华, 万 春 和, 黄 瑜 ( 1 福 建 省 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 研 究 所, 福 州
DOI /j.issn Food Research And Development UPLC-MS/MS 5 0.
118 217 5 38 1 DOI 1.3969/j.issn.5-6521.217.1.28 Food Research And Development 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 1. 731 2. 731 - UPLC-MS/MS 5. 1 mol/l ProElut PXC 5 % - Thermo Hypersil Gold mm 2.1 mm 1.9 μm ESI
2 期 王 华 等 : 猕 猴 桃 果 肉 提 取 物 抗 氧 化 活 性 研 究 145 2 1. 1 1. 4 1. 2 DPPH 1 1-mg 70% 50-2- TBA ml 70% 0. 52 K 2 S 2 O 8 TPTZ 2 4 6- Sigma Folin- 70% 3. 00 m
华 北 农 学 报 2013,28 ( 2 ) : 1 44-1 4 9 300072 OH DP- PH O 2 - FRAP 4 3. 19 ± 0. 53 mg /g 0. 26 ± 0. 07 mg /g OH DPPH O 2-2 g /ml OH DPPH 84. 5% 82. 2% 1 g /ml O 2-90. 7% DPPH O 2 - OH S663. 4 A 1000-7091
目 錄 第 一 章 緒 論 第 一 節 研 究 背 景 與 動 機... 2 第 二 節 研 究 目 的... 2 第 三 節 研 究 方 法... 2 第 二 章 溫 泉 的 歷 史... 3 第 三 章 溫 泉 法 律 與 分 布 第 一 節 溫 泉 的 法 律 / 定 義... 5 第 二 節
修 平 科 技 大 學 應 用 日 語 系 題 目 : 日 本 の 温 泉 と 台 湾 の 温 泉 指 導 教 師 : 古 瀨 和 彥 老 師 姓 名 : 袁 緣 姓 名 : 楊 錡 學 號 :BX99063 學 號 :BX99512 中 華 民 國 103 年 01 月 10 日 目 錄 第 一 章 緒 論 第 一 節 研 究 背 景 與 動 機... 2 第 二 節 研 究 目 的... 2 第
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EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 分 期 的 关 系 蔡 永 林, 郑 裕 明, 成 积 儒, 李 军, 莫 永 坤, 钟 青 燕 ( 广 西 梧 州 市 红 十 字 会 医 院, 梧 州 市 肿 瘤 防 治 研 究 所, 广 西 梧 州 543002) 摘 要 : 目 的 探 讨 EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 临 床 分 期 的 关 系 方 法 用 酶
% 8. 48% 3 80 Alcalase Novozymes Alcalase 2. 4 L Bacillus licheniformis 2. 4 AU /g 1. 2 Hitachi S-4700 JEOL JEM-1200EX Olympus Bu
2011 33 6 1117-1121 http / /xuebao. jxau. edu. cn Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E - mail ndxb7775@ sina. com * 311400 Alcalase 2. 4 L TS225. 1 + 6 A 1000-2286 2011 06-1117 - 05 A Study on
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗
1338 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 九 味 肝 泰 胶 囊 对 高 脂 饮 食 诱 导 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 陈 菲 1 2,, 艾 国 3, 盛 柳 青 1, 麻 佳 蕾 1, 黄 正 明 1. 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院, 浙 江 金 华
2010............... 1 1 2010...1 2 2010...5 3 2010...6 4 2010...7 5 2010...8 6 2010...9 7 2010 500...10 8 2010...20 9 2010...50 2010.........52 1 2010
2010 2010............... 1 1 2010...1 2 2010...5 3 2010...6 4 2010...7 5 2010...8 6 2010...9 7 2010 500...10 8 2010...20 9 2010...50 2010.........52 1 2010...52 2 2010...55 I 3 2010...56 4 2010...57 5
最新监狱管理执法全书（二百零五）
.............................. I ........................... II ................................. III 1996 1994 5 16 1 2 1997 12 29 84 1996 1994 5 16
% GIS / / Fig. 1 Characteristics of flood disaster variation in suburbs of Shang
20 6 2011 12 JOURNAL OF NATURAL DISASTERS Vol. 20 No. 6 Dec. 2011 1004-4574 2011 06-0094 - 05 200062 1949-1990 1949 1977 0. 8 0. 03345 0. 01243 30 100 P426. 616 A Risk analysis of flood disaster in Shanghai
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第 24 卷 第 5 期 2015 年 5 月 碘 131 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(5):643 647. Chinese Journal of
林学 园艺
中国农学通报 2015,31(10):153-157 Chinese Agricultural Science Bulletin 蚬壳花椒资源繁育与有效成分研究进展 杨 辉 李 猛 王 平 孙吉康 代明龙 中南林业科技大学生命科学与技术学院 长沙 410004 摘 要 总结了蚬壳花椒的一般特性及生长发育特征 地理分布差异 组织培养 扦插嫁接 有性繁育 遗 传多样性分析 药用成分的种类 有效成分的分离纯化方法
泰康附加意外住院津贴收入保障保险条款
泰 康 养 老 [2011] 医 疗 保 险 058 号 泰 康 附 加 新 生 活 少 儿 意 外 津 贴 医 疗 保 险 条 款 阅 读 指 引 请 扫 描 以 查 询 验 证 条 款 本 阅 读 指 引 有 助 于 您 理 解 条 款, 对 本 附 加 合 同 内 容 的 解 释... 凡 条 款 已 有 约 定 的, 以 条 款 约 定 为 准... 您 拥 有 的 重 要 权 益 本 附
2014-目录6期.indd
50 0, Vol.5, No.06 食 品 科 学 工 艺 技 术 猪 股 骨 头 胶 原 蛋 白 降 血 压 肽 的 分 离 纯 化 刘 小 红, 李 诚 *, 付 刚, 苏 赵 ( 四 川 农 业 大 学 食 品 学 院, 四 川 雅 安 650) 摘 要 : 依 次 采 用 碱 性 蛋 白 酶 木 瓜 蛋 白 酶 和 风 味 蛋 白 酶 对 猪 股 骨 头 胶 原 蛋 白 进 行 酶 解,
13期
中 国 农 学 通 报,9():- Chinese Agricultural Science Bulletin 药 百 合 种 子 萌 发 及 染 色 体 倍 性 检 测 吴 昀, 马 怡 迪, 张 琳, 夏 宜 平 ( 浙 江 大 学 农 业 与 生 物 技 术 学 院 园 艺 系 / 农 业 部 园 艺 植 物 生 长 发 育 与 品 质 调 控 重 点 开 放 实 验 室, 杭 州 ) 摘 要
50 2011, Vol. 32, No. 18 食 品 科 学 工 艺 技 术 对 象, 立 足 改 善 产 品 耐 煮 性 和 食 用 品 质, 在 已 有 单 螺 杆 挤 压 的 工 艺 参 数 方 面 的 基 础 上, 适 当 添 加 对 人 体 有 利 又 能 改 善 产 品 食 用 品
49 熊 善 波 1, 张 志 清 1, *, 李 远 志 2, 姚 艳 艳 1 (1. 四 川 农 业 大 学 食 品 学 院, 四 川 雅 安 625014;2. 重 庆 博 食 米 业 有 限 公 司, 重 庆 402660) 以 米 粉 为 主 要 原 料, 通 过 单 螺 杆 挤 压 机 生 产 工 程 重 组 米 在 单 因 素 试 验 基 础 上, 通 过 对 工 程 重 组 米 生
13期
中 国 农 学 通 报 2012,28(13):271-275 Chinese Agricultural Science Bulletin 磷 石 膏 改 良 基 质 中 Cd Zn 在 内 的 富 集 和 迁 移 特 征 王 运 长 1, 李 金 娟 1, 解 田 2, 杨 丽 萍 2 1, 郭 兴 强 ( 1 贵 州 大 学 资 源 与 环 境 工 程 学 院, 贵 阳 550025; 2 瓮
115 的 大 量 废 弃 物 被 丢 弃 或 直 接 燃 烧 [3] 此 外, 海 南 省 文 昌 鸡 年 产 量 约 8 0 只, 鸡 粪 年 产 量 超 过 100 万 t 这 些 富 含 养 分 的 固 体 有 机 废 弃 物 不 进 行 处 理, 不 仅 会 极 大 浪 费 大 量 养 分
![115 的 大 量 废 弃 物 被 丢 弃 或 直 接 燃 烧 [3] 此 外, 海 南 省 文 昌 鸡 年 产 量 约 8 0 只, 鸡 粪 年 产 量 超 过 100 万 t 这 些 富 含 养 分 的 固 体 有 机 废 弃 物 不 进 行 处 理, 不 仅 会 极 大 浪 费 大 量 养 分](/thumbs/40/22009911.jpg "115 的 大 量 废 弃 物 被 丢 弃 或 直 接 燃 烧 [3] 此 外, 海 南 省 文 昌 鸡 年 产 量 约 8 0 只, 鸡 粪 年 产 量 超 过 100 万 t 这 些 富 含 养 分 的 固 体 有 机 废 弃 物 不 进 行 处 理, 不 仅 会 极 大 浪 费 大 量 养 分")
广东农业科学 16 43 6 114-118 Guangdong Agricultural Sciences doi 10.16768/j.issn.1004-874X.16.06.0 刘军 董存明 吕诗锦 等. 腐熟菌剂不同添加量对鸡粪椰糠高温堆肥的影响 [J]. 广东农业科学 16 43 6 114-118. 腐熟菌剂不同添加量对鸡粪 椰糠高温堆肥的影响 刘 军 董存明 吕诗锦 阮云泽 王蓓蓓
(4) 持 学 习 驾 驶 证 学 习 驾 车 时, 无 教 练 员 随 车 指 导, 或 者 不 按 指 定 时 间 路 线 学 习 驾 车 7.6 无 有 效 行 驶 证 指 下 列 情 形 之 一 : (1) 机 动 车 被 依 法 注 销 登 记 的 ; (2) 未 依 法 按 时 进 行
泰 康 新 生 活 意 外 伤 害 保 险 条 款 责 任 免 除 因 下 列 情 形 之 一 导 致 被 保 险 人 身 故 或 者 残 疾 的, 我 们 不 承 担 给 付 保 险 金 的 责 任 : (1) 投 保 人 对 被 保 险 人 的 故 意 杀 害 故 意 伤 害 ; (2) 被 保 险 人 故 意 自 伤 故 意 犯 罪 抗 拒 依 法 采 取 的 刑 事 强 制 措 施 或 者
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
2012年18期
中 国 农 学 通 报 212,28(18):266-27 Chinese Agricultural Science Bulletin 滇 重 楼 地 上 茎 叶 可 利 用 性 分 析 曾 卫 民 1 2, 赵 庭 周 ( 1 云 南 民 族 大 学 科 技 处, 昆 明 655; 2 云 南 白 药 集 团 中 药 材 优 质 种 源 繁 育 有 限 责 任 公 司, 云 南 武 定 6516)
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投 稿 類 別 : 文 學 類 篇 名 : 嚐 一 口 萬 花 筒 淺 析 蔡 珠 兒 之 飲 食 文 學 創 作 特 色 作 者 : 蘇 妤 涵 國 立 新 竹 女 中 高 二 1 班 指 導 老 師 : 曾 久 榕 老 師 壹 前 言 日 漸 講 求 精 緻 細 膩 的 現 代, 對 於 食 比 起 過 去 的 能 吃 就 是 福 還 要 更 加 講 究 文 人 作 家 也 因 應 而 興 起
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 51 其 他 试 剂 均 为 分 析 纯 对 照 品 栀 子 苷 ( 批 号 1109-201115) 甘 草 苷 ( 批 号 1110-201106) 连 翘 酯 苷
50 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 5 卷 第 1 期 201 年 1 月 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱 研 究 * 胡 建 兰, 邵 萌, 余 林 中 南 方 医 科 大 学 中 医 药 学 院, 广 东 广 州 510515 摘 要 : 目 的 研 究 凉 膈 散 汤 剂 HPLC-DAD 指 纹 图 谱, 建
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中 华 人 民 共 和 国 公 安 部 令 第 123 号 修 订 后 的 机 动 车 驾 驶 证 申 领 和 使 用 规 定 已 经 2012 年 8 月 21 日 公 安 部 部 长 办 公 会 议 通 过, 现 予 发 布, 自 2013 年 1 月 1 日 起 施 行, 第 五 章 第 四 节 自 发 布 之 日 起 施 行 公 安 部 部 长 孟 建 2012 年 9 月 12 日 机 动
作 品 名 稱 : 讓 地 球 酵 起 來 摘 要 化 學 製 品 充 斥 市 面, 如 何 使 用 更 天 然 環 保 的 製 品 替 代 市 面 上 的 化 學 製 劑, 使 我 們 的 環 境 更 美 好, 接 觸 環 保 酵 素 後 心 中 的 疑 問 似 乎 有 解, 但 疑 惑 的 是
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1965 20 4 37 19 1985 28 19 4 45 1986 38 4 61 1 1 4 114 2 1 1 4 141 4 104 2 3 171 2 3 4 3 4 3 146 3 1956 133 1974 4 1960 1974 4 1965 5 1977 1 1 1984 6 3 1965 5 1959 1961 2 1950 5 1951 1974 8 4 105 19
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< 篇 名 > 本 經 逢 原 書 名 : 本 經 逢 原 作 者 : 張 璐 朝 代 : 清 年 份 : 西 元 1617-1700 年 < 目 錄 > < 篇 名 > 小 引 內 容 : 醫 之 有 本 經 也, 猶 匠 氏 之 有 繩 墨 也 有 繩 墨 而 後 有 規 矩, 有 規 矩 而 後 能 變 通 變 通 生 乎 智 巧, 又 必 本 諸 繩 墨 也 原 夫 炎 帝 本 經, 繩 墨
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< 篇 名 > 雷 公 炮 製 藥 性 解 書 名 : 雷 公 炮 製 藥 性 解 作 者 : 李 士 材 朝 代 : 明 年 份 : 西 元 1588~1655 年 < 目 錄 > < 篇 名 > 序 內 容 : 余 讀 仲 景 之 敘 醫, 輒 為 之 掩 卷, 蓋 其 感 生 死 之 芒 忽, 篤 君 父 之 危 殆 賤 名 利 之 浮 榮, 冀 年 壽 以 沒 世 傷 哉 其 言, 焉 得
親鸞和懺悔道的哲學
輔 仁 宗 教 研 究 第 二 十 期 (2010 年 春 )127-177 頁 台 灣 宗 教 行 政 研 究 的 回 顧 鄭 志 明 輔 仁 大 學 宗 教 學 系 教 授 提 要 有 關 宗 教 行 政 的 學 術 研 究, 大 約 是 最 近 十 年 來 才 逐 漸 地 發 展, 獲 到 學 者 們 的 關 注 與 重 視, 可 是 成 果 仍 相 當 有 限 本 文 將 對 既 有 研 究
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< 篇 名 > 本 草 述 鉤 元 書 名 : 本 草 述 鉤 元 作 者 : 楊 時 泰 朝 代 : 清 年 份 : 西 元 1644-1911 年 < 目 錄 > < 篇 名 > 武 進 陽 湖 合 志 內 容 : 楊 時 泰 字 穆 如 嘉 慶 己 卯 舉 人 工 醫 事 自 明 以 來 江 南 言 醫 者 類 宗 周 慎 齋 慎 齋 善 以 五 行 制 化 陰 陽 升 降 推 人 髒 氣 而
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< 篇 名 > 本 草 求 真 書 名 : 本 草 求 真 作 者 : 黃 宮 繡 朝 代 : 清 年 份 : 西 元 1644-1911 年 < 目 錄 > < 篇 名 > 凡 例 內 容 : 一 本 草 一 書 首 宜 分 其 形 質 氣 味 次 宜 辨 其 經 絡 臟 腑 終 宜 表 其 證 治 功 能 曆 觀 諸 書 無 不 備 載 然 理 道 不 明 意 義 不 疏 徒 將 治 效 彰 著
江 苏 科 技 大 学 809 机 械 设 计 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 >......18 江 苏 科 技 大 学 810 机 械 原 理 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 >......19 江 苏 科 技 大 学 机 械 原
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太 原 科 技 大 学 811 西 方 哲 学 史 全 套 考 研 资 料 ... 2 太 原 科 技 大 学 836 运 筹 学 全 套 考 研 资 料 ... 2 太 原 科 技 大 学 835 管 理 学 全 套 考 研 资 料 ... 3 太 原 科 技 大 学 612
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國 立 臺 北 大 學 中 國 語 文 學 系 2007 年 10 月 第 三 屆 中 國 文 哲 之 當 代 詮 釋 學 術 研 討 會 會 前 論 文 集 第 1~24 頁 葉 榮 鐘 先 生 早 年 文 集 析 探 : 葉 氏 之 文 學 觀 國 立 台 北 大 學 司 仲 敖 摘 要 葉 榮 鐘 先 生 是 日 治 前 後 出 生 的 二 世 文 人, 漢 文 日 文 俱 佳 因 自 幼 接
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丘 遲 與 陳 伯 之 書 篇 旨 及 其 藝 術 特 色 探 析 丘 遲 與 陳 伯 之 書 篇 旨 及 其 藝 術 特 色 探 析 國 立 楊 梅 高 中 國 文 科 教 師 章 正 忠 摘 要 本 文 嘗 試 以 章 法 學 的 角 度 切 入, 探 析 丘 遲 < 與 陳 伯 之 書 > 的 文 學 內 涵 章 法 學 對 文 章 結 構 的 分 析 方 式, 較 傳 統 偏 重 於 段 落
苏 州 科 技 学 院 825 管 理 学 原 理 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 > 1-1 825 管 理 学 原 理 真 题 2012-2014, 历 年 真 题 主 要 用 来 研 究 考 研 的 考 点, 重 点 和 出 题 思 路, 为 考 研 最 重 要
苏 州 科 技 学 院 825 管 理 学 原 理 全 套 考 研 资 料 ... 2 苏 州 科 技 学 院 815 水 分 析 化 学 全 套 考 研 资 料 ... 2 苏 州 科 技 学 院 829 有 机 化 学 全 套 考 研 资 料 ... 3 苏 州 科 技
重 庆 邮 电 大 学 数 据 结 构 802 初 试 内 部 精 华 资 料 1-1 数 据 结 构 2007, 暂 无 答 案 2-1 考 研 复 习 规 划 指 导 全 年 专 业 课 复 习 计 划, 指 导 考 生 科 学 时 间 分 配, 提 高 备 考 效 率, 免 费 赠 送 2-2
重 庆 邮 电 大 学 数 据 结 构 802 初 试 内 部 精 华 资 料...2 重 庆 邮 电 大 学 803 计 算 机 网 络 全 套 考 研 资 料 ......2 重 庆 邮 电 大 学 计 算 机 网 络 (803 803) 考 研 内 部 精 华 资 料...3 重 庆 邮 电 大 学 816 运 筹 学 全 套 考 研 资 料
海 军 大 连 舰 艇 学 院 807 有 机 化 学 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 > 2-2 有 机 化 学 笔 记, 此 笔 记 为 高 分 研 究 生 复 习 所 用, 借 助 此 笔 记 可 以 大 大 提 高 复 习 效 率, 把 握 报 考 院 校 2
海 军 大 连 舰 艇 学 院 807 有 机 化 学 全 套 考 研 资 料 ......2 海 军 大 连 舰 艇 学 院 804 自 动 控 制 全 套 考 研 资 料 ......2 海 军 大 连 舰 艇 学 院 806 理 论 力 学 全 套 考 研 资 料 ......2
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宇 宙 生 靈 學 修 行 者 第 十 一 部 人 道 行 ( 疏 第 二 十 七 篇 二 三 五 集 二 四 三 集 合 訂 本 ) 作 者 : 妙 航 玄 昊 玄 鑫 理 整 目 錄 第 二 三 五 集 人 類 天 敵 第 二 三 六 集 唯 我 獨 尊 第 二 三 七 集 人 天 合 第 二 三 八 集 天 羅 地 網 第 二 三 九 集 安 居 度 日 第 二 四 0 集 風 流 一 代 第
山 东 财 经 大 学 431 金 融 学 综 合 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 > 2-2 金 融 学 笔 记, 由 考 取 本 校 本 专 业 高 分 研 究 生 总 结 而 来, 重 点 突 出, 借 助 此 笔 记 可 以 大 大 提 高 复 习 2-3 金
山 东 财 经 大 学 431 金 融 学 综 合 全 套 考 研 资 料 ......2 山 东 财 经 大 学 802 管 理 学 全 套 考 研 资 料 ......2 山 东 财 经 大 学 714 马 克 思 主 义 基 本 原 理 概 论 全 套 考 研 资 料 ......3
喜 临 门 家 具 股 份 有 限 公 司 2016 年 第 二 次 临 时 股 东 大 会 会 议 议 程 会 议 召 集 人 : 公 司 董 事 会 现 场 会 议 时 间 :2016 年 6 月 16 日 ( 星 期 五 ) 下 午 14 时 现 场 会 议 地 点 : 浙 江 省 绍 兴 市
喜 临 门 家 具 股 份 有 限 公 司 2016 年 第 二 次 临 时 股 东 大 会 会 议 资 料 二 一 六 年 六 月 一 十 六 日 喜 临 门 家 具 股 份 有 限 公 司 2016 年 第 二 次 临 时 股 东 大 会 会 议 议 程 会 议 召 集 人 : 公 司 董 事 会 现 场 会 议 时 间 :2016 年 6 月 16 日 ( 星 期 五 ) 下 午 14 时 现
关于调整可充抵保证金证券的通知（2012-06-18）
关 于 标 的 证 券 权 益 的 通 知 日 期 :2016-05-05 市 场 证 券 代 码 证 券 名 称 信 息 类 型 信 息 内 容 深 圳 000543 皖 能 电 力 股 东 大 会 股 权 登 记 日 深 圳 000905 厦 门 港 务 股 东 大 会 股 权 登 记 日 深 圳 000917 电 广 传 媒 股 东 大 会 股 权 登 记 日 深 圳 000960 锡 业 股
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宇 宙 生 灵 学 修 行 者 第 二 部 月 下 行 ( 注 第 10 一 18 篇 ) 作 者 : 妙 航 玄 昊 玄 鑫 整 理 前 言 这 是 一 本 什 幺 书? 它 是 讲 人 有 没 有 灵 魂? 灵 魂 的 属 性 和 特 征 : 是 光 音 色 三 种 能 量 的 组 成 进 而 论 述 修 行 修 炼 的 本 质 : 是 提 高 大 灵 的 能 量 并 传 出 绝 世 功 法,
盐 田 区 2015 年 社 会 建 设 行 动 计 划 2015 年 是 全 面 深 化 改 革 的 关 键 之 年 全 面 推 进 依 法 治 区 的 开 局 之 年, 也 是 十 二 五 规 划 的 收 官 之 年 十 三 五 规 划 的 谋 划 之 年 结 合 省 市 年 度 社 会 工 作
中共深圳市盐田区委办公室 深盐办 2015 3 号 中共深圳市盐田区委办公室 深圳市盐田区 人民政府办公室关于印发 盐田区 2015 年 社会建设行动计划 的通知 各街道党工委 办事处 区委各部委办 区直各单位 区各人 民团体 驻盐各单位 区属各企业 现将 盐田区 2015 年社会建设行动计划 印发给你们 请 认真组织实施 中共深圳市盐田区委办公室 深圳市盐田区人民政府办公室 2015 年 5 月
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子 魚 作 文 教 學 流 程 與 實 務 文 / 子 魚 1 第 一 節 寫 日 記 一 說 明 : ( 一 ) 日 記 要 領 : 一 日 只 寫 一 件 事, 範 圍 縮 小, 比 較 好 回 想 切 割 生 活, 從 一 天 當 中 設 定 一 個 地 點 時 間, 將 發 生 的 事 情 寫 下 來 印 象 深 刻 做 記 錄 一 件 小 事, 都 值 得 寫 因 為 細 微 末 節 能
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证券代码：600893 证券简称：航空动力 公告编号：2011临-【】
证 券 代 码 :600038 证 券 简 称 : 哈 飞 股 份 临 :2012-33 哈 飞 航 空 工 业 股 份 有 限 公 司 关 于 召 开 2013 年 第 一 次 临 时 股 东 大 会 的 通 知 本 公 司 本 董 事 公 会 司 及 董 全 事 体 董 会 事 及 保 全 证 体 本 董 公 告 事 内 保 容 证 不 本 存 公 在 任 告 何 内 虚 容 假 不 记 存 载
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10 257 61 292 15 25 90 266 274 75 182 1 16 182 173 172 1 4243 253 61 94 63 185 9 245 348 7 323437 173 100 4 1 176 273 173 17 3 17 10 9 35 59 63 163164197 1959 1 1980 5 4 189 13 4 5 30 76 6 36 274 21
Microsoft Word - Book 3 巫山行.doc
宇 宙 生 靈 學 修 行 者 第 三 部 巫 山 行 ( 第 十 九 篇 一 六 三 集 至 一 七 一 集 合 訂 本 ) 作 者 : 妙 航 玄 昊 玄 鑫 整 理 目 錄 第 一 六 三 集 神 女 無 恙 第 一 六 四 集 旅 途 人 生 第 一 六 五 集 天 蒼 野 茫 第 一 六 六 集 虛 空 碧 影 第 一 六 七 集 青 潭 連 天 第 一 六 八 集 碧 霞 擁 日 第 一
Microsoft Word - 【預官_士_考選歷屆試題86~100】.doc
預 官 ( 士 ) 考 選 歷 屆 試 題 86~100 以 下 資 料料 均 為 網 路 上 搜 尋 整 理 的, 若若 有 錯 誤 之 處, 煩 請 告 知, 謝 謝! 86 ( )1. 下 列列 何 者 非 孫 子 兵 法 的 戰 略略 原 則? A 兵 者, 詭 道 也 B 兵 貴 勝, 不不 貴 久 C 勝 兵 先 戰, 而 後 求 勝 D 上 兵 伐 謀, 其 下 攻 城 ( )4. 韓
一、银行结售汇业务
国 际 收 支 业 务 办 事 指 南 一 银 行 结 售 汇 业 务...2 ( 一 ) 银 行 即 期 结 售 汇 业 务 市 场 准 入 和 退 出... 2 ( 二 ) 银 行 经 营 即 期 结 售 汇 业 务 机 构 信 息 变 更 指 南... 3 ( 三 ) 人 民 币 与 外 汇 衍 生 产 品 业 务 市 场 准 入... 5 ( 四 ) 合 作 办 理 远 期 结 售 汇 业
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第 六 章 不 動 產 廠 房 及 設 備 第 六 章 不 動 產 廠 房 及 設 備 25 1 各 項 不 動 產 廠 房 及 設 備 之 成 本 認 列 [6-2] 購 買 擴 建 廠 房 之 建 地 及 機 器 設 備, 相 關 的 各 項 支 出 如 下, 試 計 算 土 地 房 屋 及 建 築 與 機 器 設 備 之 成 本 支 出 內 容 土 地 成 本 房 屋 及 建 築 成 本 機
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第 1 頁, 共 5 頁 一 基 本 能 力 : 共 25 題, 每 題 2 分, 合 計 50 分, 答 錯 不 倒 扣 請 於 答 案 卷 ( 卡 ) 上 依 題 號 作 答 1. 甲 晉 乘 楚 杌 :ㄔㄥˊ; 乙 贗 品 :ㄧㄢˋ; 丙 侷 促 一 隅 :ㄡˇ; 丁 裨 海 紀 遊 :ㄅㄞˋ 上 列 中 字 詞 的 讀 音, 何 者 正 確? (A) 甲 (B) 乙 (C) 丙 (D) 丁
第 一 部 分 目 录 销 售 管 理 规 范 汇 编... 5 Ⅰ 销 售 资 格 管 理 篇...5 1.1 关 于 保 险 公 司 销 售 人 员 资 格 管 理 的 规 定... 5 1.2 关 于 银 邮 代 理 机 构 代 理 资 格 管 理 的 规 定... 6 1.3 关 于 银 邮
人 身 保 险 公 司 销 售 管 理 规 范 汇 编 (2012 版 ) 前 言 为 便 于 人 身 保 险 公 司 管 理 人 员 销 售 人 员 了 解 掌 握 销 售 管 理 环 节 相 关 规 定, 提 高 人 身 保 险 公 司 从 业 人 员 的 法 律 素 质, 进 一 步 做 好 人 身 保 险 销 售 误 导 综 合 治 理 工 作, 切 实 保 护 保 险 消 费 者 合 法
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国 家 文 件 关 部 门 制 定 并 实 施 与 当 地 经 济 发 展 水 平 和 校 车 服 务 需 求 相 适 应 的 校 车 服 务 方 案, 统 一 领 导 组 织 协 调 有 关 部 门 履 行 校 车 安 全 管 理 职 责 县 级 以 上 地 方 人 民 政 府 教 育 公 安 交
国家文件 中华人民共和国国务院令 第617号 校车安全管理条例 已经2012年3月28日国务院第197次常务会议通过 现予公 布 自公布之日起施行 总理 温家宝 二 一二年四月五日 校车安全管理条例 第一章 总 则 第一条 为了加强校车安全管理 保障 乘坐校车学生的人身安全 制定本条例 第二条 本条例所称校车 是指依照本 条例取得使用许可 用于接送接受义务教育 的学生上下学的7座以上的载客汽车 接送小学生的校车应当是按照专用校车