Microsoft Word 李莉-二校933
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1 7 3 Vol. 7 No Journal of Food Safety and Quality Mar., 2016 李莉, 曹进 *, 张庆生 (, ) 摘要 : 目的 方法 60%, Agilent ZORBAX SB-C 18 (4.6 mm 250 mm, 5 μm), 0.5%, 1.0 ml/min, 30, 237 nm 结果 5.0~100.0 g/ml (r=0.9999), 95%~101%, RSD 0.55%~1.96% 结论, 关键词 : ; ; Determination of geniposidic acid in herba cistanche by high performance liquid chromatography LI Li, CAO Jin *, ZHANG Qing-Sheng (National Institutes for Food and Drug Control, Beijing , China) ABSTRACT: Objective To establish a method for the determination of the content of geniposidic acid in herba cistanche by high performance liquid chromatography (HPLC). Methods Samples were extracted ultrasonically with 60% methanol as the solvent. An Agilent ZORBAX SB-C 18 column (4.6 mm 250 mm, 5 μm) was used with the mobile phase consisted of methanol and 0.5% acetic acid. The flow rate was 1.0 ml/min, and the column temperature was set at 30. The UV detection wavelength was 237 nm. Results There was a good linearity when the concentration of geniposidic acid was 5.0~100.0 mg/ml (r=0.9999). The average recovery was 95%~101%, and the RSD was 0.55%~1.96%. There were differences between the 3 different sources of hebra cistanehe (Cistanche deserticola, Cistanche tubulosa and Cistanche salsa) in geniposidic acid content. Conclusion This method is simple and accurate, and it can be used for determination of geniposidic acid in herba cistanche. KEY WORDS: hebra cistanehe; geniposidic acid; high performance liquid chromatography 1 引言 (hebra cistanehe) (Cistanche deserticola Y.C. Ma) [1],,,,, [2], 2005 (Cistanche tubulosa (Schrenk) Wight), * 通讯作者 :,, caojin@gmail.com *Corresponding author: CAO Jin, Researcher, National Institutes for Food and Drug Control, No. 2, Tiantanxili, Dongcheng District, Beijing , China. caojin@gmail.com
2 934 7 [3],, 2, (Cistanche salsa (C.A.Mey) G. Beck) [4] (geniposidic acid),,,, [5-8] ( ),,, [9-14], 3 ( ) 2 材料与方法 2.1 仪器与试剂 2695 ( 2998, Waters ); AL 204 ( METTLER ) XP 205 ( METTLER ); CR22GIII ( HITACHI ); KQ-3200DE ( ) (, ); (, ); ( ); (, : , 96%); (, Merk); (, ); 2.2 仪器条件 : Agilent ZORBAX SB-C 18 (4.6 mm 250 mm, 5 μm); : A:, B:0.5%,, 1; : 1.0 ml/min; : 30 ; : 10 μl; 237 nm 2.3 标准溶液的制备 10 mg 10 ml, 1.0 mg/ml 表 1 梯度洗脱比例 Table 1 Gradient elution ratio (min) A(%) B(%) 样品前处理 2 g, 60% 30 ml, 30 min, 60%,, 50 ml, 0.45 μm, 3 结果与讨论 3.1 前处理方法的优化 ( ), 3, 3,,, 60:40, ( min), 30 min, 30 min 3.2 液相色谱条件的优化 检测波长的选择 190~400 nm, 237 nm, 237 nm,,, 流动相的选择, - -,,,,,,,, +0.5%, 1
3 3, : Fig. 1 High performance liquid chromatograms of geniposidic acid a: ; b: a: Spectrum of geniposidic acid standard; b: Spectrum of sample 柱温的选择 ,, 方法学考察 线性关系考察, 60% 6, μg/ml 10 μl,, (Y) (X, g/ml) (r) Y=7139.4X (r=0.9999) 5.0~100.0 g/ml 加标回收试验, 3 ( g/g) ( 6 ), 2.4, 10 L,, 重复性 2.4 6, HPLC, RSD 1.02%, 精密度 5 μg/ml 100 μg/ml, 6,, RSD 0.14% 0.06%, 稳定性, h, HPLC, RSD 0.75%(n=6), 72 h 检测限和定量限,, 3, 10, 15 μg/g 50 μg/g
4 936 7 表 2 回收率测定结果 (n=6) Table 2 The results of recoveries (n=6) ( g/g) ( g/g) ( g/g) (%) (%) RSD(%) 样品测定, 3 3, [15] 表 3 实际样品测定结果 Table 3 The content of geniposidic acid in samples ( g/g) RSD(%) / / : / 4 结论,, 参考文献 [1]. ( )[M]. :, China Pharmacopoeia Committee. Chinese pharmacopoeia (2010 Edition) [M]. Beijing: Chinese Medical Science and Technology Press, [2],,,. [J]., 2004, 6(1): Sheng JH, Zhai ZX, Yang TX, et al. Study on biology of parasitism in Cistanche [J]. Rev China Agric Sci Technol, 2004, 6(1): [3],,,. [J]., 2012, 35(7): Jia XG, Ni H, Zhang J, et al. Present situation of research and
5 3, : 937 development of Cistanche tubulosa [J]. J Xinjiang Med Univ, 2012, 35(7): [4],,,. [J]., 2005, 4(8): Yang JH, Hu JP, ReNa KSM, et al. Studies on fingerprint of phenylethanoid glycosides in cultivated Cistanche salsa [J]. Chin Pharm J, 2005, 4(8): [5],,,. [J]., 2012, 10(9): Yan GH, Tian JH, Long BW, et al. Advances in research of phenylethanoid glycosides in Cistanche [J]. Central South Pharm, 2012, 10(9): [6],,. [J]., 2004, 30(3): Liu XH, Li Y, Zhang J. Advances in studies on chemical constituents of Herba cistanches [J]. J Lanzhou Med Coll, 2004, 30(3): [7],,. [J]., 2010, 28(1): Song XL, Jia XG, Xie HH. Advances in research of chemical constituents of Cistanche tubulosa [J]. Xinjiang J Tradit Chin Med, 2010, 28(1): [8],,,. [J]., 2003, 34(4): Lei L, Song ZH, Tu PF, et al. Studies on chemical constituents of Cistanche salsa [J]. Xinjiang J Tradit Chin Med, 2003, 34(4): [9],,,. HPLC [J]., 2011, 14(9): Cheng DY, Li MY, Wang YL, et al. Determination of geniposidic acid in Jiechangyan Qixiao granules by HPLC [J]. China Pharm, 2011, 14(9): [10],,. HPLC [J]., 2012, 243(8): Liu H, Zhang S, Liu Z. Simultaneous determination of geniposidic acid, chlorogenic acid, geniposide,and pinoresinol diglucoside in Eucommia ulmoides by HPLC [J]. Chin Tradit Herbal Drugs, 2012, 243(8): [11],,. RP-HPLC 3 [J]. ( ), 2008, 27(3): 5 7. LI Q, He JJ, Ma FX. Determination of the contents of geniposidic acid, chlorogenic acid and geniposid in Eucommia ulmoides granules by RP -HPLC [J]. J Henan Univ (Med Sci)Anti Infect Pharm, 2008, 27(3): 5 7. [12],,. [J]., 2014,11(4): Dang HZ, Liu LL, Zhao S. Determination of geniposidic acid and geniposide in Eucommia ulmoides cortex by HPLC [J]. Anti Infect Pharm, 2014, 11(4): [13],,,. [J]., 2012, 35(4): Zheng LS, Ni N, Liu XQ, et al. Study and application of geniposide and genipin [J]. Drug Eval Res, 2012, 35(4): [14],. [J]., 2011, 8(2): Song P, Tu PF. Research progress on quality control and assessment of Cistanche deserticola Y. C. Ma [J]. J North Pharm, 2011, 8(2): [15], 邠,,. RP-HPLC [J]., 1997, 32(4): Tu PF, Wang B, Zhang ZG, et al. Analysis of phenylethanoid glycosides of Herba Cistanchis by RP-HPLC [J]. ACTA Pharm Sin, 1997, 32(4): 作者简介 ( 责任编辑 : 杨翠娜 ) 李莉, 硕士, 助理研究员, 主要研究方向为食品安全检测 lili_nicpbp@126.com 曹进, 博士, 研究员, 主要研究方向为食品安全检测 caojin@nifdc.org.cn
g ml 10% ph 色谱条件 kinetex C μm 100 A 4. 6 mm 150 mm 25 5 μl A B 10 mmol /L ml /min
25 4 2013 8 监测技术 5 1 2 1 ( 1. 江苏省疾病预防控制中心, 江苏南京 210009; 2. 南京医科大学第二附属医院, 江苏南京 210029) 5 Phenomenex kinetex C 18 2. 6 μm 4. 6 mm 150 mm 10 mmol /L ph 2. 5 + 60 40 DAD 280 nm 5 20. 0 mg /L ~ 100 mg /L 0.
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