013,33(4) 王姝等 : 牛病毒性腹泻病毒 E 蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定 41 1 材料与方法 1.1 重组表达质粒 表达菌株 病毒株和抗血清 表达 BVDVBA 株 E 蛋白的重组表达质粒 pet30 E( 不含 E 蛋白的跨膜区及疏水区 ) [4] 与表达菌 BL1 由本实验室保存
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- 抛 熊
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1 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,013,33(4):40 45 牛病毒性腹泻病毒 E 蛋白单克隆抗体 的制备及初步鉴定 王 1, 姝 朱远茂 蔡 红 马 磊 史鸿飞 吕 闯 董秀梅 高欲燃 薛 飞 (1 东北农业大学动物医学学院哈尔滨 ) ( 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 / 大动物传染病研究室哈尔滨 ) 摘要为制备牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) 糖蛋白 E 单克隆抗体 (MAb), 利用原核表达并且纯化的重组糖蛋白 E(rE) 免疫 BALB/c 小鼠, 取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞 SP/0 融合 采用以 BVDV 为检测抗原的间接 ELISA 筛选阳性细胞克隆, 经 3 次克隆纯化后获得 株稳定分泌抗 E 特异性 MAb 的杂交瘤细胞株, 分别命名为 4E3 与 1G11 用 4E3 与 1G11 杂交瘤细胞株接种 BALB/c 小鼠制备腹水, 采用 re 及 BVDV 包被的 ELISA 测得的效价分别是 和 及 和 间接 ELISA Westernblot IFA 试验表明两株杂交瘤细胞所分泌的 MAb 具有良好的反应性和特异性 经抗体亚类鉴定 4E3 与 1G11 均为 IgM/κ 特异性试验表明 4E3 与 1G11 这 株 MAb 均不与牛传染性鼻气管炎病毒 牛副流感病毒 3 型 牛腺病毒 3 型反应 ; 其中 4E3 不与猪瘟病毒反应, 而 1G11 则可与猪瘟病毒发生交叉反应, 这种反应特性可试用于 BVDV 与猪瘟病毒的鉴别诊断 所制备的 4E3 与 1G11MAb 可以用于 BVDV 抗原的检测, 为建立检测 BVDVE 蛋白血清抗体的 ELISA 奠定了基础 关键词牛病毒性腹泻病毒 E 单克隆抗体 IgM 中图分类号 Q819 牛病毒性腹泻 / 粘膜病 (bovineviraldiarhea/ mucosaldisease,bvd/md) 是由牛病毒性腹泻病毒 (bovineviraldiarheavirus,bvdv) 引起的, 在牛群中以高热 白细胞减少 沉郁 不食 下痢 大量流涎 减奶以致停奶, 反刍停止 结膜炎, 口腔粘膜充血并出现溃疡斑为主要临床症状和致病特征的一种传染病 [1] BVDV 与猪瘟病毒 (CSFV) 绵羊边界病毒 (BDV) 同属黄病毒科瘟病毒属, 是黄病毒科瘟病毒属的代表株 BVD 呈世界性分布, 尤其是在很多养牛业发达国家中更为严重 BVDV 病毒的基因组为单股正链 RNA, 有感染性 其基因组编码的结构蛋白有 P14 gp48 gp5 gp53, 其收稿日期 : 修回日期 : 国家科技支撑计划子课题 (01BAD1B03 3) 中央级公益性科研院所基本科研业务费项目 ( ) 哈尔滨市科技攻关计划项目 (010AA6AN019;01AA6BN00) 资助项目 通讯作者, 电子信箱 :xuefeicnh@yahoo.com.cn 余为非结构蛋白 组成病毒囊膜结构的 3 种糖蛋白, 依次为 gp48(e0) gp5(e1) 和 gp53(e), 约位于 68 ~1060 氨基酸之间 [] E 是由 690~1060 位的 370 个氨基酸残基组成, 因糖基化程度的不同而使分子质量有所变化, 为 51~55kDa E 靠近 N 端的一半含有多种构像依赖性抗原结构域, 其 N 端伸出 BVDV 囊膜表面, 是决定 BVDV 抗原性的主要部位, 也是与 BVDV 抗体结合 介导免疫中和反应及宿主细胞识别 吸附的主要部位 糖蛋白 E 存在着 个高可变结构域, 位于病毒粒子的外表面, 是病毒引起机体免疫应答的重要保护性抗原决定簇 [3] 本研究利用大肠杆菌表达的 BVDV 重组 E 蛋白免疫 BALB/c 小鼠, 通过细胞融合和杂交瘤细胞株的筛选, 制备了针对重组 E 蛋白的单克隆抗体, 对其反应性和特异性进行了鉴定, 介绍如下
2 013,33(4) 王姝等 : 牛病毒性腹泻病毒 E 蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定 41 1 材料与方法 1.1 重组表达质粒 表达菌株 病毒株和抗血清 表达 BVDVBA 株 E 蛋白的重组表达质粒 pet30 E( 不含 E 蛋白的跨膜区及疏水区 ) [4] 与表达菌 BL1 由本实验室保存 ;BVDV BA 株 牛副流感病毒 3 型 (BPIV3) 牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV) 与牛腺病毒 3 型 (BAV3) 均由本实验室保存 ; 兔源 BVDV 的 E 蛋 [5] 白多克隆抗体由本实验室保存 1. 实验动物和细胞 6 周龄 ~8 周龄 BALB/c 雌性小鼠购自哈尔滨兽医研究所实验动物中心 ;SP/0 细胞与 MDBK 细胞由本实验室保存 1.3 试剂 蛋白质纯化试剂盒 (Ni NTA AgaroseKit) 购自 Invitrogen 公司 ; 弗氏完全佐剂 (FCA) 弗氏不完全佐剂 (FICA) HRP 羊抗鼠 IgG 聚乙二醇 (PEG,MW1450) HAT HT FITC 羊抗鼠 IgG 均购自 Sigma 公司 ;TMB 购自北京泰天河生物科技有限公司 ;MAb 亚类鉴定试剂盒购自 SouthernBiotech 公司 ;DAB 显色液购自北京中山金桥生物技术有限公司 ;DMEM 培养基购自 GIBCO 公司 ; 胎牛血清购自德国 Biochrom AG 公司 ; 超滤管 Corning Spin X UF0mlConcentrators 购自上海吉泰生物科技有限公司 1.4 重组 E 蛋白的表达纯化与鉴定 通过生物学软件 DNAstar 对 E 蛋白的抗原性 亲水性和表面展示率进行分析, 最终均是截取抗原性好 亲水性强及表面展示概率高的片段进行克隆及表达 参照已发表的 BVDV 的 VEDEVAC 毒株基因组序列, 利用 Oligo6 生物学软件设计扩增 E 基因的一对引物, 引入酶切位点并去掉 E 蛋白的跨膜区及疏水区 通过 RT PCR 扩增了长约 1000bp 的 E 基因片段, 克隆到 PMD18 T 载体上, 酶切并测序鉴定 然后将目的片段进一步定向克隆到 pet30a 表达载体, 转化 BL1 表达菌 经过转化菌培养, 并用 IPTG 诱导, 获得了以包涵体形式表达的重组蛋白, 大小为 46kDa [4] 将获得的重组 E 蛋白按蛋白纯化试剂盒推荐的使用说明书进行纯化, 并用超滤管进行复性, 去除尿素及杂蛋白 用 SDS PAGE 及 Westernbloting 对纯化的重组 E 蛋白进行鉴定, 用紫外分光光度计测定其浓度, 并于 -70 保存备用 1.5 MAb 的制备 动物免疫首免时, 取纯化的重组 E 蛋白与等体积的弗氏完全佐剂乳化均匀, 皮下多点注射, 100μg/ 只小鼠 首免后每隔两周进行第二 第三次免疫, 用纯化的重组 E 蛋白与弗氏不完全佐剂等体积乳化均匀, 腹腔注射,150μg/ 只小鼠 三免 7d 后检测抗体效价, 两周后进行加强免疫, 腹腔注射 150μg/ 只小鼠 加强免疫 3d 后取其脾细胞与 SP/0 进行融合 1.5. MAb 检测方法的建立将 BVDV 在 MDBK 细胞中增值, 反复冻融 3 次,5000r/min 离心 30min 后收集上清液 病毒上清液 TCID 50 测定结果为 /0.1ml, 作为包被抗原 ; 以免疫后的小鼠血清作为阳性血清, 未免疫后的小鼠血清作为阴性血清, 采用方阵法确定抗原最佳包被浓度 阳性血清最佳稀释度及判定标准, 建立间接 ELISA 根据阳性血清孔的 OD 值接近 1.0, 阴性血清 OD 值 <0.,P/N>.1 判定为阳性 细胞融合及阳性杂交瘤细胞的筛选按照常 [6] 规方法进行细胞融合 采用上述建立的间接 ELISA 筛选杂交瘤细胞, 有限稀释法进行阳性细胞筛选与克隆纯化 1.6 腹水的制备 将灭菌液体石蜡以 0.5ml/ 只腹腔注射 8 周龄 BALB/c 小鼠, 一周后将杂交瘤细胞以 个 / 只 ~ 个 / 只腹腔注射小鼠, 待小鼠腹腔明显增大时抽取腹水, 离心去除上层油脂和沉淀, 上清即为 MAb 腹水 1.7 MAb 的鉴定 腹水效价的鉴定用已建立的筛选阳性杂交瘤细胞的间接 ELISA 测定腹水效价, 同时设立 SP/0 细胞腹水作为阴性对照, 以 P/N 值 >.1 的抗体最大稀释度为 MAb 的腹水效价 1.7. MAb 亚型的鉴定按照抗体亚类试剂盒说明书进行 MAb 亚类鉴定 1.8 MAb 特异性的鉴定 Westernblot 分析将纯化后的 BVDV 及纯化的重组 E 蛋白进行 SDS PAGE, 转印至硝酸纤维素膜上,MAb 腹水 (1 50) 为一抗, 二抗为 HRP 标记羊抗鼠 IgG(1 1000), 用 DAB 显色判定结果 1.8. 间接免疫荧光试验 (IFA) 用 BVDV BPIV3 IBRV 与 BAV3 分别接种 MDBK 细胞, 用 CSFV 接种 PK15 细胞 分别在接种病毒后不同时间内用无水乙醇室温固定细胞, 同时以未接毒的 MDBK 和 PK15 细胞
![4 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology Vol.33No.4013 为阴性对照, 加入待检的 株单抗作用后, 进行间接免疫荧光检测, 操作步骤按照参考文献 [7] 进行 结果.](/docs-images/93/111418691/images/3-0.jpg "1 重组 E 蛋白的表达与纯化 用 pet30a E 重组表达质粒转化表达菌 BL1, 经 培养与诱导后表达 BVDV 的重组 E 蛋白 (re) 利用 蛋白纯化试剂盒纯化 re, 然后用离心柱去除尿素及杂 蛋白, 并进行蛋白复性, 经 SDS PAGE 及染色和脱色 图 1 纯化重组 E 蛋白的 Westernblot 分析 Fig.")
3 4 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology Vol.33No.4013 为阴性对照, 加入待检的 株单抗作用后, 进行间接免疫荧光检测, 操作步骤按照参考文献 [7] 进行 结果.1 重组 E 蛋白的表达与纯化 用 pet30a E 重组表达质粒转化表达菌 BL1, 经 培养与诱导后表达 BVDV 的重组 E 蛋白 (re) 利用 蛋白纯化试剂盒纯化 re, 然后用离心柱去除尿素及杂 蛋白, 并进行蛋白复性, 经 SDS PAGE 及染色和脱色 图 1 纯化重组 E 蛋白的 Westernblot 分析 Fig.1 Westernblotanalysisofthepurified 后, 纯化的 re 分子量约为 46kDa, 与以前的报道完全 recombinanteprotein 一致 [4] M:PrestainedproteinMarker;1:PurifiedEprotein;. 重组 E 蛋白 Westernblot 分析 :RefoldedpurifiedEprotein;3:Negetivecontrol 对纯化及复性的 re 进行 Westernblot 分析, 结果.3 筛选抗 EMAb 的间接 ELISA 的建立表明纯化及复性的 re 均能够被兔源 BVDV 的 E 蛋采用方阵法确定了抗原最佳包被浓度和阳性血清最白多克隆抗体特异性识别 ( 图 1) 佳稀释度, 建立了筛选 EMAb 的间接 ELISA( 表 1) 根 据方阵滴定结果, 可以初步确定最佳包被抗原浓度为 1 4 稀释的病毒液, 阳性血清最佳稀释倍数均为 表 1 最佳抗原包被量及阳性血清最佳稀释度的确定 Table1 Identificationofcoatingantigenandtiterofpositiveserum 阳性血清 阴性血清 病毒液 MAb 腹水抗体效价测定将收集的杂交瘤细胞 4E3 与 1G11 腹水分别用纯化的 re 及 BVDV 包被的 ELISA 板进行效价检测, 以 SP/0 细胞产生的腹水作为阴性对照 用 re 检测 4E3 与 1G11 腹水效价分别为 与 , 用 BVDV 检测 4E3 与 1G11 腹水效价分别为 与 MAb 亚型鉴定结果利用 SBAClonotyping TM System/HRP 抗体亚类试剂盒测得杂交瘤细胞株 4E3 与 1G11 所分泌的 MAb 抗体亚型均为 IgM, 轻链为 κ 链.6 Westernblot 检测结果将纯化的 re 与纯化后的 BVDV 作为抗原经 SDS PAGE 电泳后, 转印到 NC 膜上, 分别与 4E3 和 1G11 作用 ( 图 图 3), 结果表明两株杂交瘤细胞都能与纯化 的 re 及 BVDV 发生特异性反应, 与阴性对照的 SP/0 细胞腹水不发生反应 图 MAb4E3Westernblot 分析 Fig. WesternblotanalysisofMAb4E3 M:PrestainedproteinMarker;1:PurifiedEprotein; :PurifiedBVDV;3:Negetivecontrol
4 013,33(4) 王姝等 : 牛病毒性腹泻病毒 E 蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定 43 图 3 MAb1G11Westernblot 分析 Fig.3 WesternblotanalysisofMAb1G11 M:PrestainedproteinMarker;1:PurifiedEprotein; :PurifiedBVDV;3:Negativecontrol.7 IFA 检测结果用 4E3 与 1G11MAb 进行的 IFA 检测结果表明, 感染了 BVDVBA 株的 MDBK 细胞产生了绿色的特异性荧光 ( 图 4 1, 图 4 ), 而未接种病毒的 MDBK 细胞无荧光反应 ( 图 4 5) 同时,1G11MAb 可与接种猪瘟病毒 (CSFV) 的 PK15 细胞发生反应 ( 图 4 3), 但绿色荧光反应强度稍弱 ; 而 4E3 与猪瘟病毒则无反应 ( 图 4 4) 此外,4E3 与 1G11 MAb 与接种牛副流感病毒 3 型 (BPIV3) 牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV) 及牛腺病毒 3 型 (BAV3) 的 MDBK 细胞均无反应 ( 图 4 6, 图 4 7, 图 4 8) 图 4 4E3 与 1G11MAb 的 IFA 结果 Fig.4 ReactionofMAbs4E3and1G11withBVDVandCSFVinfectedMDBK cels 1:BVDVinfectedMDBKcelsreactedwith4E3;:BVDVinfectedMDBKcelsreactedwith1G11;3:CSFVinfectedPK15celsreactedwith 1G11;4:CSFVinfectedPK15celsreactedwith4E3;5:MDBKcelsreactedwith1G11;6:BPIV3infectedMDBKcelsreactedwith4E3;7: IBRinfectedMDBKcelsreactedwith4E3;8:BAV3infectedMDBkcelsreactedwith4E3 3 讨论 牛病毒性腹泻在许多养牛业发达国家的流行比较严重, 并呈世界性分布 国内自李佑民等于 1980 年从牛流产胎儿脾脏中首次分离到 BVDV 以来, 许多地区先后报道有该病毒感染引发的疾病 [8] 随着我国养牛业的迅速发展, 国外不同品种牛的不断引入, 该病在我国发生 流行呈上升趋势 E 蛋白是由牛病毒性腹泻 病毒基因组编码的主要保护性抗原, 可诱导宿主产生中和抗体, 保护实验动物不受同源毒株的攻击感染 E 蛋白具有中和活性, 含有病毒的主要抗原决定簇, 免疫原性最强, 是病毒引起机体免疫应答的重要保护性抗原 本研究大肠杆菌表达的 BVDV 重组 E 蛋白, 经复性后免疫 BALB/c 小鼠, 免疫鼠血清与纯化的 BVDV 和重组 E 蛋白具有良好的反应性, 用免疫鼠脾细胞成功
5 44 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology Vol.33No.4013 制备了 MAb 在建立筛选 MAb 的间接 ELISA 时, 尝试以高速离心 超速离心及 TritonX 100 SDS 裂解处理病毒悬液, 筛选结果几乎相当 [9 11] 最后选择粗分离的 BVDV 作为包被抗原, 建立了筛选 EMAb 的间接 ELISA, 筛选到两株稳定生长并分泌抗 BVDV 的 E MAb 的杂交瘤细胞株 4E3 和 1G11 经抗体亚类试剂盒鉴定,4E3 和 1G11 所分泌的 MAb 抗体亚型均为 IgM, 轻链为 κ 链 从 MAb 的亚型鉴定结果来看, 用真核系统表达的重组蛋白免疫融合后得到的大多数为 IgM, 虽然原核表达系统表达的重组蛋白在结构上不能完全趋近于天然结构, 但免疫融合的结果基本趋近于真核系统表达的重组蛋白 IgM 是个体发育过程中最早合成和分泌的抗体, 是初次体液免疫应答中最早出现的抗体, 因此本研究所获得的单抗可以通过建立固相阻断 ELISA 法检测到抗 BVDV 的抗体 此外, 本研究的间接免疫荧光试验表明 4E3 只能与 BVDV 发生反应, 与 CSFV BPIV3 IBRV 和 BADV3 不发生反应, 具有良好的反应性与特异性 ;1G11 则可以与 BVDV 和 CSFV 反应, 但不与 BPIV3 IBRV 和 BADV3 发生反应 BVDV 是组织细胞培养及生物制品中最为常见的外源性病毒, 特别是用胎牛睾丸等组织细胞培养生产猪瘟疫苗时,BVDV 是必需检测的一个重要外源病毒 因此,4E3 可试用于胎牛血清 培养的组织细胞及生物制品中污染的 BVDV 的检测 同时, 上述研究的初步结果表明 4E3 与 1G11 与 BVDV 和 CSFV 具有不同的反应特性, 这两种单抗的联合使用可试用于 BVDV 与 CSFV 的鉴别诊断, 特别是猪瘟疫苗中可能污染的 BVDV 的检测 本研究为 BVDV 的相关检测提供了便利 致谢在用本研究制备的 株 BVDV 单抗检测接种猪瘟病毒的 PK15 细胞的研究中获得了中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪病研究室仇华吉研究员与李素助理研究员的帮助, 在此一并表示感谢 参考文献 [1] 殷震, 刘景华. 动物病毒学. 第 版. 北京 : 科学出版社, YinZ,LiuJH.AnimalVirology. nd ed.beijing:sciencepres, [] 范进江, 薄新文, 钟发刚. 牛病毒性腹泻病毒基因组结构与蛋 白功能研究进展. 动物医学进展,008,9(5):68 7. FanJJ,BoXW,ZhongFG.Advanceingenomicstructureand protein function ofbovine viraldiarhea virus.progres in VeterinaryMedicine,008,(5): [3]WeilandE,StarkR,HaasB,etal.Pestivirusglycoproteinwhich inducesneutralizingantibodiesformspartofadisultide linked heterodimer.virology,1990,64: [4] 李娇, 薛飞, 朱远茂, 等. 牛病毒性腹泻病毒 E 蛋白的截短表达与鉴定. 中国预防兽医学报,008,30(3): LiJ,XueF,ZhuYM,etal.Expresionandcharacterizationof truncateeproteinofbovineviraldiarheavirusinescherichia coli.chinesejournalofpreventivevererinarymedicine,008,30 (3): [5] 高欲燃, 朱远茂, 康健, 等. 牛病毒性腹泻病毒 E 蛋白的多克隆抗体制备及鉴定. 中国预防兽医学报,011,33(3):7 31. Gao Y R, Zhu Y M, Kang J, etal. Preparation and characterizationofantiseraagainstrecombinante protein of bovine viral diarhea virus.chinese Journal of Preventive VererinaryMedicine,011,33(3):7 31. [6]NaundorS,PreithnerS,MayerP,etal.Invitroandinvivo activityofmt01, a fuly human monoclonalantibody for pancarcinomatreatment.intjcancer,00,100: [7]SamBrookJ,RuselD W.MolecularCloning:A Laboratory Manual.3 rd ed. Cold Spring Harbor, Cold Spring Harber LaboratoryPres,00. [8] 王新平, 任文陟, 朱维正, 等. 双抗体夹心 ELISA 检测牛病毒性腹泻病毒的研究. 中国兽医学报,1995,15(3): WangXP,RenW Z,ZhuW Z,etal.Detectionofbovineviral diarhenviruswithsandwichelisa.chinajournalofveterinary Scinece,115,15(3): [9]MarzoccaM P,SekiC,GiambiagiSM,etal.TruncatedEof bovineviraldiarheavirus(bvdv) expresed in Drosophila melanogastercels:a candidateantigenforabvdv ELISA.J VirolMethods,007,144: [10]ThomasC,YoungNJ,HeaneyJ,etal.Evaluationofeficacyof mammalian and baculovirus expresed E subunit vaccine candidatestobovineviraldiarhoeavirus.vaccine,009,7: [11] 沈敏, 王新华, 周鹏飞, 等.BVD MDV 细胞毒的快速粗提. 中国畜禽传染病,1997,4(95): ShenM,WangX H,ZhouP F,etal.Rapidextractionof cytotoxicbvdv/mdv.chinesejouralofanimaland Poultry InfectiousDiseases,1997,4(95):58 59.
6 013,33(4) 王姝等 : 牛病毒性腹泻病毒 E 蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定 45 PreparationandPreliminaryCharacterizationofMonoclonalAntibodies againsteproteinofbovineviraldiarrheavirus WANGShu 1, ZHUYuan mao CAIHong MALei SHIHong fei LVChuang DONGXiu mei 1, GAOYu ran XUEFei (1ColegeofVeterinaryMedicine,NortheastAgriculturalUniversity,Harbin ,China) (DivisionofLivestockInfectiousDiseases,StateKeyLaboratoryofVeterinaryBiotechnology,HarbinVeterinaryResearchInstituteof ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Harbin ,China) Abstract Topreparemonoclonalantibody(MAb)againstglycoproteinEofbovineviraldiarheavirus (BVDV),BALB/cmicewereimmunizedwithpurifiedrecombinantE(rE) expresedine.coliandtwo hybridomassecretingmabwerescreenedfrom fusingthesp/0celswiththespleencelsoftheimmunized BALB/cmicebyindirectELISAcoatedwithBVDV.ThetitersofMAb4E3and1G11inasciteswere , , ,and asdetectedbyreandbvdv,respectively.themabssecretedby hybridomas4e3and1g11hadhighlyreactivityandspecificityinindirectelisa,westernbloting,ifa and identifiedasigm withalightchainofκbyindirectelisa.thespecifictestsindicatedthatthemabs4e3and 1G11hadnoreactionwithbovineinfectiousrhinotracheitisvirus,bovineparainfluenzavirustype3andbovine adenovirustype3.meanwhilethemab4e3hadnoreactionwithclasicalswinefevervirus(csfv)andthemab 1G11hadreactionwithCSFV.ThereforetheMAbs4E3and1G11mightbeusedfordiferentiatingBVDVand CSFV.Ontheotherhand,theMAbs4E3and1G11couldbeusedforestablishdiagnosismethodforBVDV. Keywords Bovineviraldiarheavirus Eprotein Monoclonalantibody IgM 广告索引 北京中原领先科技有限公司 ( 封面 ), 伯乐生命医学产品 ( 上海 ) 有限公司 ( 封面拉页 ), 默克化工技术 ( 上海 ) 有限公司 ( 封二 ), 英潍捷基 ( 上海 ) 贸易有限公司 ( 彩 1), 通用电气医疗系统贸易发展 ( 上海 ) 有限公司 ( 彩 ), 默克化工技术 ( 上海 ) 有限公司 ( 彩 3), 上海森松制药设备工程有限公司 ( 彩 4), 宝生物工程 ( 大连 ) 有限公司 ( 彩 5), 镇江东方生物工程设备公司 ( 彩 6 7), 必蔼贸易 ( 上海 ) 有限公司 ( 彩 8), 第十三届世界制药原料中国展 ( 彩 9), 第十一届中国国际科学仪器及实验室装备展览会 ( 彩 10), 第十八届生物化学工程与分子工程国际大会 ( 彩 11), 颇尔过滤器 ( 北京 ) 有限公司 ( 目次对页 ), 上海派森诺生物科技有限公司 ( 中插 1), 上海国强生化装备工程有限公司 ( 中插 3), 伯乐生命医学产品 ( 上海 ) 有限公司 ( 中插 4), 安琪酵母股份有限公司 ( 封三 ), 江苏省科海生物工程设备有限公司 ( 封底 )
材料 方法
生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
材料 方法
生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人
福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析
福建农业学报 林 甦 朱春华 陈 珍 刘斌琼 施少华 江 斌 蔡国漳 林 羽 黄 瑜 甦 男 硕士 助理研究员 主要从事病毒学和动物传染病学研究 福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 福建农业学报 讨 论 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 责任编辑
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
张红丽 等 部分功能域基因的原核表达与分析 第６期 发表序列 ＡＹ８１９６５０ 同源性为 １００ 与国外 １０ 株 同源性为 ９８畅 ８ 有 １３ 个碱基发生了突 变 其中 ４ 个是有意义的突变 这 ４ 个有意义的 突变分别为第 ２５７ 位 Ｔ Ｃ 第 ５０５ 位 Ａ Ｃ 第 ９０８ 位 Ａ Ｇ 第 １０１２ 位 Ｇ Ｃ 图 ４ 这些差异可 能是捻转血矛线虫株间存在地域差异所致 ２畅 ５ ＨＰＳ 原核表达与鉴定
124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na
![124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na](/thumbs/91/105785327.jpg "124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na")
河南农业科学,2013,42(2):123-127 JournalofHenanAgriculturalSciences PCR PRRSV CSFV PCV2,, (, 450011) : 根据 TaqMan 复合荧光探针设计原则, 应用 Primer5.0 和 Oligo6.0 软件设计检测猪繁殖 与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 猪瘟病毒 (CSFV) 和猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 的特异性引物和探针,
材料 方法 载体构建 转基因植株的获得
生物技术通报 唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 邱德文 通过根癌农杆菌 介导转化法 将含有激发子基因 的植物表达载体 转化三生烟 获得了转基因烟草植株 用 检测确认了阳性转化株 用 杂交 和 杂交进一步证实了 基因的整合 转录和表达 对 代转基因阳性株进行 接种试验 结果显示 与非转基 因对照相比 表达 的烟草叶片枯斑数量减少 表明蛋白激发子基因 的表达提高了转基因烟草对 的抗性 激发子 基因 烟草 转化 材料
Microsoft Word 赵凯-二校 出4154
6 10 Vol. 6 No. 10 2015 10 Journal of Food Safety and Quality Oct., 2015 赵 1, 凯 2, 贾彦博 3*, 王啸 2, 丁枫芸 2, 肖海龙 3, 黄建萍 3 (1., 310058; 2., 310019; 3., 310022) 摘要 : 目的 ELISA 方法, Balb/c 4, ELISA,,, ELISA 结果,
2 中国生物工程杂志 5 8 方 法 重组质粒的构建及蛋白的表达 纯化和检测 () 基因序列来源于 81 数据库 在其 8 端添加 个 +, 的标签和 05 蛋白酶切位点 由生工生物工程有限公司 上海 全基因合成 总长度 0 " < 质粒为表达载体 构建 0 " "+," () 表达载体. 合成不含
中国生物工程杂志! 蛋白单克隆抗体的制备及其表征 李 孜 包欣晨 高向东 陆小冬 徐 晨 中国药科大学生命科学与技术学院 南京 北京三元基因工程有限公司 北京 摘要 目的 用 () 蛋白免疫小鼠 获得 () 特异性单克隆抗体 为 () 的含量测定提供基础 方法 通过全基因合成的方法获得目的基因序列 转化大肠杆菌 * 细胞诱导 +," () 及 () 蛋白表达 纯化后用作抗原免疫小鼠 取脾融合 筛选稳定分泌抗体的阳性细胞株
中国科学技术大学 材料工程 05 校外调剂 0870 化学工程 吉林大学 应用化学 05 校外调剂 0870 化学工程 四川大学 制药
045700000787 东北大学 07030 分析化学 05 校外调剂 07030 无机化学 68 66 94 04 34 063700000004 沈阳药科大学 07030 分析化学 04 校内跨专业调剂 070303 有机化学 73 56 9 00 30 0007008903 北京大学 0780Z 药学类 05 校外调剂 070303 有机化学 75 67 09 8 4 085750830 苏州大学
中 国 畜 牧 兽 医 卷 基因组的 89 区 开放阅读框 ( 约为 % 共编码 个氨基酸 由于 基因组中 含量过高 扩增全长较困难 因此通常截取含 有 & 蛋白抗原表位的一段基因片段进行表达 研究证实 & 蛋白是抗体的主要靶子 虽然在猪体内存在着 &&&1 核衣壳蛋白等抗体 但在行使免疫性和诱导免
中国畜牧兽医! " 猪伪狂犬病病毒 " 蛋白表达及免疫原性分析 贾 刚 樊梅娜 谷 巍 山东宝来利来生物工程股份有限公司研究院 泰安 泰安大凡神农制药有限公司研究院 泰安 摘 要 本试验旨在研究猪伪狂犬病病毒 '"%& 蛋白的表达并分析其免疫原性 以 病毒液为模板 设计特异性引物 扩增大小为 %' 的保守片段并测序 将其克隆到表达载体 '1" 中 转化表达菌 9)1 经诱导表达 纯化得到目的蛋白 进行
- 国际流行病学传染病学杂志 年 月第 卷第 期!" #$% & 流感病毒为 & 病毒 目前已有 余种亚 ( 型 且持续变异 对流感的防控带来巨大挑战 根据核蛋白 ) 和基质蛋白 * 抗原性的不同 流感病毒可分为甲乙丙三型 其中甲型流感病毒引起的 ( 病症最严重 ) 在不同亚型的甲型流感病毒中高度保
国际流行病学传染病学杂志 年 月第 卷第 期!" #$% & 论著 甲型流感病毒核蛋白单克隆抗体制备及其初步应用 张儒轩沃恩康丁建祖方迪陈帅帅杨新燕郭潮潭 (--( 杭州 浙江省医学科学院生物工程研究所通信作者 郭潮潭 ) 1"9))(" #
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1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 ss a c y e vg 13 14 15 16 17 18 19 H 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 发现生命的螺旋 克里克在提出 中心法则 时曾指出 遗传信息是沿 Ｄ Ｎ Ａ - Ｒ Ｎ Ａ - 蛋白质的方向流动的 遗传信息不可能从 Ｒ Ｎ Ａ 回到 Ｄ Ｎ
7 北京大学学报 医学版 # +94* 4 ' % 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0
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2015,35(4) 龚隆财等 :ctni linker TnC 融合蛋白的原核表达及鉴定 49 免疫反应鉴定, 表明重组表达的 ctni linker TnC 融合蛋白具有较好的免疫原性, 保存了 ctni 和 ctnc 单体的天然结构, 有望成为天然 ctni TnC 复合物的替代物, 为下一步
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2015,35(4):48 53 DOI:10.13523/j.cb.20150407 ctni linker TnC 融合蛋白的原核表达及鉴定 龚隆财 罗镇明 杨雁青 王振宇 向军俭 (1 暨南大学广东省分子免疫与抗体工程重点实验室广州 510632) 王 宏 (2 广州市疾病与食品安全免疫学快速检测重点实验室暨南大学分室广州 510632)
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Really Good Antibodies Bethyl 二抗产品册 超过 670 种抗小鼠 兔子 山羊和大鼠的二抗 bethyl.com Bethyl 公司 Bethyl Laboratories, Inc. ) 成立于1972年 一直秉承改善生活的理念致力于科学研究的理念 提供高质量的抗体产品 和抗体定制服务 Bethyl所销售的每一个抗体都是在德克萨斯州的蒙哥马利的唯一工厂生产 并且都经过Bethyl
福建农林大学硕士学位论文番茄抗叶霉菌相关基因的鉴定及 TRV 16K 基因的功能分析姓名 : 郑璐平申请学位级别 : 硕士专业 : 分子病毒学指导教师 : 吴祖建 ; 蔡新忠 20070401 番茄抗叶霉菌相关基因的鉴定及 TRV 16K 基因的功能分析 作者 : 郑璐平
364 水产学报 40 卷 ISKNV 细胞培养灭活疫苗及重组 MCP 亚单位疫苗 等疫苗有效抗原含量的检测靶标 本研究将重 组 ISKNV MCP 免疫小鼠 (Mus musculus), 筛选获 得 3 株单克隆抗体, 对制备的单克隆抗体部分特 性进行了鉴定, 为建立 ISKNV 疫苗抗原含量
第 40 卷第 3 期水产学报 Vol. 40, No. 3 2016 年 3 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Mar., 2016 文章编号 : 1000 0615(2016)03 0363 08 DOI: 10.11964/jfc. 20150709974 鳜传染性脾肾坏死病毒主衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 1, 2, 付小哲 3 1, 2, 3, 李宁求 *
期 刘茂军等 猪肺炎支原体 基因原核表达及免疫原性分析,')&%!&"! 7,,766*4,876,), 4* 猪支原体肺炎 *77,)3 (,>' 又称猪气喘病 地方流行性肺炎 该病分布广泛 发病率高 虽死亡率不高 但由于 7 能破坏呼吸道黏膜 纤毛屏障 从而继发其他致病菌的感染 主要表现为咳嗽
畜牧兽医学报 猪肺炎支原体 基因原核表达及免疫原性分析 刘茂军 张 悦 杜改梅 白 昀 王海燕 姜 平 邵国青 江苏省农业科学院兽医研究所 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室 国家兽用生物制品工程技术研究中心 南京 南京农业大学动物医学院 南京 摘 要 > 蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白 与其他支原体无交叉反应 常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白 本研究通过基因合成获得 基因中含有 个稀有密码子的前
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
第一章 图 １ １ 传染病的特征 ９ Ｔ ｈ１ Ｔ ｈ２ 细胞调节机制简图 正调节 负调节 细胞因子与细菌的相互作用机制目前尚未完全明了 有实验表明 细胞因子与细菌之间 存在有互利和互抑双重效应 例如 Ｔ Ｎ Ｆα 和 ＩＦＮγ 可抑制放线菌的生长而 ＩＬ ６ 的作用则 反之 ＩＬ １ ２ 和 ＧＭ ＣＳＦ 可促进某些致病性大肠杆菌生长而 ＩＬ １ｒａ 可抑制之 研究表 明 某些致病性大肠杆菌有与
猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定
吉林农业大学学报 2012,10 http://xuebao.jlau.edu.cn E-mail:jlndxb@vip.sina.com 猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白单克隆抗体的制备和 * 初步鉴定 米立娟 1,3 2, 吕宗吉 3, 张守峰 3, 刘晔, 王永志 4** 1,3**, 扈荣良 1. 吉林农业大学动物科学技术学院, 长春 130118;2. 佛山科学技术学院, 佛山 528200;3.
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生物研究试剂服务 CRO 抗体 业 我们承诺 : 对于任何宿主 由金斯瑞设计 合成并偶联多肽抗原的多克隆抗体服务,ELISA 效价达到 1:20,000 以上 对于任何宿主 任何蛋白抗原 (3 mg 以上, 纯度 > 85%,90% 更佳 ) 的多克隆抗体服务, 保证 Western blot 检测结果呈阳性且 ELISA 效价达到 1:20,000 以上 I. 畅销服务 SC1031: 抗原亲和纯化多克隆抗体制备服务
程汉良 夏德全 吴婷婷 孟学平 吉红九 董志国 陈淑吟 对文蛤 青蛤 硬壳蛤 江户布目蛤 薄片镜蛤 和菲律宾蛤仔 种帘蛤科贝类和 个地理种 群文蛤 大连 连云港 湛江 防城港 的细胞色素 氧化酶亚基 基因片段的核苷酸序列进行了分析 以探讨这一序列在种质鉴定 种群遗传结构和分子系统发生研究中的应用价值 测序结果 表明 所有物种扩增片段长度均为 序列 含量 明显高于 含量 物种间共有变异位点 个 其中简约信息位点
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : Buffer 标准 1 标准 2 样品 试剂 ( 荧光染色 ) 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng
Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng/μl 100 ng/μl 待测 200 测定时要求浓度 未知 0 ng/μl 5000ng/ml 0~5000 ng/ml 1 备注 -Buffer:Qubit dsdna
标题
962 中国人兽共患病学报 ChineseJournalofZoonoses 2017,33 (11) DOI:10.3969/j.issn.1002-2694.2017.11.003 论著 1 株猪鼻支原体特异性单克隆抗体的制备及鉴定 田瑞雨 1,4, 熊祺琰 1, 倪博 1, 王佳 1,2, 韦艳娜 1, 冯志新 1, 邵国青 1,3 摘要 : 目的制备与鉴定猪鼻支原体单克隆抗体, 用于猪鼻支原体诊断及致病机理的研究.
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44 生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology DOI: 10.13345/j.cjb.160221 关晓宇等 / 抗鸡白细胞介素 4 单克隆抗体的制备及鉴定 January 25, 2017, 33(1): 44 54 2017 Chin J Biotech, All rights reserved 动物及兽医生物技术 4 关晓宇, 徐志超, 王永强, 李晓齐,
)+ 国际流行病学传染病学杂志 年 月第 卷第 期!" #$ %&%$ '!"! 换是甲型流感经常暴发的重要原因 病毒包膜上的另外一种膜蛋白 蛋白由于其保守性高 已成为 ()* 疫苗开发和药物研究的热点 而 蛋白胞外域 在人甲型流感中高度保守 与禽流感及猪流感仅有少数氨基酸不同 蛋白前 + 个氨基酸
国际流行病学传染病学杂志 年 月第 卷第 期!" #$ %&%$ '!"! -= 甲型流感病毒 蛋白胞外域单克隆抗体的制备及其生物特性 刘亚辉沃恩康杨新燕徐琦杨灿邓冠聪郭潮潭 -- 杭州 浙江省医学科学院生物工程研究所通信作者 郭潮潭 +",$1+!+-$! %-
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生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology DOI: 10.13345/j.cjb.140225 孙明铭等 / 禽网状内皮组织增殖病病毒 gp90 蛋白单克隆抗体的制备及其识别区分析 January 25, 2015, 31(1): 75 85 2015 Chin J Biotech, All rights reserved 动物及兽医生物技术 75 gp90 孙明铭,
28 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology Vol.37No.7207 同时含有 T 细胞和 B 细胞的优势抗原表位的 HCMV 疫苗, 能同时诱导体液免疫和细胞免疫反应, 可以有效防治 HCMV 感染, 为今后相关疫苗研究及 HCMV 相关疾病的防治奠定基础 材料与方法. 材料
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,207,37(7):27 33 DOI:0.3523/j.cb.2070707 人巨细胞病毒抗原表位的重组表达及免疫原性分析 王 蒙 孙文辉 姬芳玲 蒲中机 2 李寅生 包永明 ( 大连理工大学生命科学与技术学院大连 6024 2 大连市药品检验所大连 6029) 摘要目的 : 用大肠杆菌表达系统表达人巨细胞病毒 (HCMV)pp65 蛋白和
12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL
![12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL](/thumbs/91/106935627.jpg "12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL")
( )2017 57 5JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2017,Vol.57No.5 11 LY294002, (, 330006) : LY294002 PI3K/AKT 0 10 15 20 25 30μmol L -1 LY294002(LY294002 ) A549,PBS CCK8 LY294002 A549 ; Westernblot
期 曾范利等 牛病毒性腹泻 黏膜病病毒 基因在卡介苗中的优化表达 6 6* 6; : 6* * ' 6 & :* * : 6 * 6*-**:- -6;: *; ;; ' ;; * *; '6 + 6 牛病毒性腹泻 黏膜病病毒 与猪瘟病毒 ' 和边界病病毒 同属于黄病毒科 * ;; 瘟病毒属 ; 主
畜牧兽医学报 牛病毒性腹泻 黏膜病病毒 基因在卡介苗中的优化表达 曾范利 张 云 张 梦 时 坤 李建明 刘 菲 李 晶 杜 锐 吉林农业大学中药材学院 长春 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 长春金赛药业有限责任公司 长春 吉林农业大学研究生学院 教育部动物生产及产品质量安全重点实验室 吉林省药用动物二级实验室 长春 摘 要 为构建牛病毒性腹泻 黏膜病病毒 基因工程活载体疫苗 根据已知的 ' 毒株
2017 年医学院 ( 含转化院 遗传所 ) 硕士研究生入学考成绩 准考证号 报考专业 外语政治业务 1 业务 2 总成绩 备注 病理学与病理生理学 病理学与病理生理学
2017 年医学院 ( 含转化院 遗传所 ) 硕士研究生入学考成绩 准考证号 报考专业 外语政治业务 1 业务 2 总成绩 备注 103357000912484 病理学与病理生理学 72 72 242 0 386 103357000912003 病理学与病理生理学 71 72 242 0 385 103357000911503 病理学与病理生理学 77 73 234 0 384 103357000911098
2014,34(12) 龙敏等 : 抗人 AEG 1 单克隆抗体可变区基因克隆及序列分析 11 IgG 为 SantaCruz 分装, 兔抗人 AEG 1 多克隆抗体购自 Proteintech 公司,50% PEG Giemsa 染液及秋水仙素为 Sigma 公司试剂,Mousemonoclona
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2014,34(12):10 15 DOI:10.13523/j.cb.20141202 抗人 AEG 1 单克隆抗体可变区 基因克隆及序列分析 龙敏董柯王希陈曦刘冲刘丽张惠中 ( 第四军医大学唐都医院西安 710038) 摘要 AEG 1 基因位于人染色体 8q22, 编码 582 个氨基酸, 参与多种信号转导途径并与多种恶性肿瘤的发生 发展及生物学表型密切相关
刘陈立 邵宗泽 以柴油为惟一碳源 从胜利油田黄河码头和厦门储油码头两个海水样品中富集得到两组柴 油降解菌 共 株细菌 株真菌 它们对柴油都有降解能力 鉴定结果表明这 株细菌 中有 株摩加夫芽孢杆菌 株施氏假单胞菌 株腊样芽孢杆菌 株反硝化产碱杆菌 株阿氏葡萄球菌 株食烷菌和 株类似很小海旋菌的未知新菌 其中 对柴油的降解能力最强 已 报道的食烷菌属中其他种的同源性最高 为 表明它是该属中的一个新种
%&%& 畜牧兽医学报 )3 卷 ;>M "#7 -" 06%% 5#' I;A# P -=#- #-# ;74MA %^.' &l%&) > #- A 3' /(l %&%&S/7# _% TH1& A )'.1-=/7S_% ' I; # #- # A ;Q? 7# -U0-"U A # " -
畜牧兽医学报 伏马菌素 ' 单克隆抗体的制备及免疫学检测方法初步应用 姚静静 胡骁飞 韩俊岭 李青梅 王方雨 邓瑞广 张改平 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室农业部动物免疫学重点实验室 郑州 新乡医学院第一附属医院 新乡 河南农业大学 郑州 摘 要 拟制备灵敏高 特异性强的抗伏马菌素 7 单克隆抗体 并初步应用于 的检测 以期为 的免疫学快速检测提供技术支持 采用碳二亚胺法 40 制备人工抗原
儿科学 儿科学 儿科学 儿科学 儿科学 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 儿科学 ( 专业学位 ) 耳鼻咽喉科学 ( 专业学位 ) 非定向 全国统考
2017 年医学院 ( 含转化院 遗传所 ) 硕士研究生上线考生名单 准考证号 报考专业 外语政治 业务 1 业务 2 总分 报考类别 考试方式 备注 103357000912484 72 72 242 0 386 非定向 全国统考 103357000912003 71 72 242 0 385 非定向 全国统考 103357000911503 77 73 234 0 384 非定向 全国统考 103357000911098
GB 15973—1995麻风病诊断标准及处理原则
炭 疽 诊 断 标 准 及 处 理 原 则 前 言 GB 17015 1997 炭 疽 (Anthrax) 是 由 炭 疽 芽 孢 杆 菌 (Bacillus anthracis) 引 起 的 一 种 人 与 动 物 共 患 传 染 病, 主 要 存 在 于 食 草 动 物 和 牲 畜 群 落 之 中, 并 能 造 成 环 境 的 广 泛 污 染 由 于 炭 疽 芽 孢 具 有 对 外 界 环 境
16 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology Vol.37No 供,TK1 阳 / 阴性血清取自郑州大学第一附属医院 表 1 引物序列 Table1 Primersequence Primername Primersequence(5 3 ) Restrictionenz
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2017,37(9):15 22 DOI:10.13523/j.cb.20170903 ThymidineKinase1(TK1) 重组蛋白的 表达 纯化及鉴定 1,2 王云龙 1 赵二霞 2,3 李玉林 (1 郑州大学生命科学学院郑州 450001 2 河南省生物工程技术研究中心郑州 450001) (3 郑州市生物制药重点实验室郑州 450001)
20 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology Vol.32No XhoI 为美国 NEB 公司产品 ; 质粒抽提及 DNA 片段快速胶回收试剂盒为美国 Axygen 公司产品 新生牛血清 (NCS) 胎牛血清 (FBS) 购自 Gibco 公司 HAT DMEM 培养基
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2012,32(5):19 23 EpCAM 蛋白的表达 纯化及其单克隆抗体的制备 孔娟高慧萍张鹏伟石必枝蒋华严瑾李宗海 ( 上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室上海 200032) 摘要目的 : 原核表达 EpCAM 蛋白并制备抗 EpCAM 特异性单克隆抗体, 初步鉴定相应单克隆抗体的特性 方法 :PCR
材料导报 研究篇 年 月 下 第 卷第 期 种球的制备 单步溶胀法制备分子印迹聚合物微球 洗脱处理 种子溶胀聚合机理 种球用量的影响
水相中 组氨酸单分散分子印迹聚合物微球的合成 表征及其识别性能研究 李思平等 李思平 徐伟箭 较佳工艺条件下 在水性体系中选用无皂乳液聚合法制得的单分散微米级聚苯乙烯微球为种球 分别以组氨酸 甲基丙烯酸 或丙烯酸胺 乙二醇二甲基丙烯酸酯 为模板分子 功能单体和交联剂 合成了 组氨酸分子印迹聚合物微球 研究了形貌 粒径及其分布以及模板分子与功能单体之间的相互作用 分别以 激光粒度分析仪紫外分光光度法和红外光谱表征功能单体与交联剂之间的共聚情况
福建农业学报 发酵最佳转速的确定 确定 发酵周期 培养基配方试验 最优培养条件下碳源筛选 最优培养条件下氮源筛选 结果与分析 均匀设计 最佳
福建农业学报 赵 健 高晓丹 邱荣洲 翁启勇 材料与方法 种子罐的制备 发酵条件单因素试验 发酵最佳 值的确定 发酵最佳温度的确定 福建农业学报 发酵最佳转速的确定 确定 发酵周期 培养基配方试验 最优培养条件下碳源筛选 最优培养条件下氮源筛选 结果与分析 均匀设计 最佳 赵 健等 应用均匀设计优化生防细菌 发酵培养基组分及条件研究 最佳温度 碳源 最佳转速 氮源 福建农业学报 均匀设计 讨 论 赵
,() 刘 鹏 展 等 :NT-proBNP 特 异 性 单 克 隆 抗 体 的 制 备 及 鉴 定 9 是 诊 断 心 力 衰 竭 的 一 个 具 有 划 时 代 意 义 的 客 观 标 志 物 [] 目 前 国 际 上 检 测 人 NT-proBNP 常 用 的 是 免 疫 学 方 法, 主 要
![,() 刘 鹏 展 等 :NT-proBNP 特 异 性 单 克 隆 抗 体 的 制 备 及 鉴 定 9 是 诊 断 心 力 衰 竭 的 一 个 具 有 划 时 代 意 义 的 客 观 标 志 物 [] 目 前 国 际 上 检 测 人 NT-proBNP 常 用 的 是 免 疫 学 方 法, 主 要](/thumbs/41/22594594.jpg ",() 刘 鹏 展 等 :NT-proBNP 特 异 性 单 克 隆 抗 体 的 制 备 及 鉴 定 9 是 诊 断 心 力 衰 竭 的 一 个 具 有 划 时 代 意 义 的 客 观 标 志 物 [] 目 前 国 际 上 检 测 人 NT-proBNP 常 用 的 是 免 疫 学 方 法, 主 要")
生物技术通报 BIOTECHNOLOGY 研究报告 BULLETIN, ():8-5 NT-proBNP 特异性单克隆抗体的制备及鉴定 刘鹏展 黄绮玲 何小维 李文美 张文琪 张赛. 华南理工大学食品科学与工程学院 广州 5. 广州万孚生物技术股份有限公司 广州 5 摘 要 旨在制备并鉴定抗人 NT-proBNP 特异性单克隆抗体 采用重组 NT-proBNP 蛋白免疫 Balb/c 小鼠 取血清效价高的
干细胞和再生医学 科学学位 免考 免考 非定向 干细胞和再生医学 科学学位 免考 85 非定向 干细胞和再生医学 科学学位 免考 69 非定向 护理学 科学学位 免考 免考 非定向 护理学 科学学位
2018 年秋季报考博士上线考生名单 序号 准考证号 报考专业名称 学位类型外语成绩专业基础课成绩报考类别 备注 1 180371 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 2 180393 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 3 180427 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 4 180436 病理学与病理生理学 科学学位 免考 免考 非定向 5 180474
<4D6963726F736F667420506F776572506F696E74202D20BC77B0EAB3C2AF6CA4CEA5FDA4D1A9CABC77B0EAB3C2AF6C32303037313028A477B1BEBAF429>
德 國 麻 疹 & 先 天 性 德 國 麻 疹 教 材 製 作 : 高 銓 吟 共 同 製 作 : 陳 如 欣 醫 師 楊 効 偉 醫 師 巫 坤 彬 科 長 簡 大 任 副 組 長 陳 昶 勳 組 長 聯 絡 方 式 電 話 :02-23959825 轉 3781 電 子 郵 件 :0918@cdc.gov.tw 製 作 日 期 :2006 年 3 月 更 新 日 期 :2007 年 10 月 大
食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 山药多糖研究进展 王洪新 王远辉 江南大学食品学院 江苏无锡 山药是药食兼用植物 山药多糖被认为是山药中重要的活性物质 综述山药多糖的提取分离工艺 纯化方法 化学结构分析和生理活性研究的现状 为未来研究山药多糖的新提取工艺 探讨构效关系 作用机制提供参考 山药多糖 研究进展 提取与分离 食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷 第 期 王洪新等 山药多糖研究进展
贾 园等 甲型 /3 流感病毒 /0 基因在昆虫细胞中的截短表达 # 共编码至少 种蛋白 许多研究已经证实 血凝素 /0 是流感病毒最重要的表面抗原 /0 含有 ( 个结构域 信号肽 胞浆区 跨膜区和胞外区 本实验设计去掉 /0 信号肽 跨膜域和胞内域个结构域的基因序列 通过昆虫杆状病毒表达系统表达
中国生物工程杂志! 甲型 流感病毒 基因在昆虫 细胞中的截短表达 贾 园 沈 阳 邱亚峰 史子学 邵东华 王晓杜 邓绪芳 王皓婷 赵福广 马志永 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 ( 吉林农业大学 长春 ) 摘要 目的 利用 "" * * +,-. 表达重组 /0 蛋白 1 及 0 方法鉴定其表达 方法 采用 方法扩增 0 2 ( #/3 /0 基因 将其克隆到 - /40 载体上 重组质粒 -
Microsoft Word 吴芬芳.doc
HEREDITAS (Beijing) 2012 4, 34(4): 465 471 ISSN 0253-9772 www.chinagene.cn 研究报告 DOI: 10.3724/SP.J.1005.2012.00465 日本七鳃鳗 (Lampetra japonica)vlrb 的克隆表达及单克隆抗体制备 吴芬芳 1,2, 马宁 1,2, 陈立勇 1,2, 苏鹏 1,2, 李庆伟 1., 116029;
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疾 病 名 柯 萨 奇 病 毒 感 染 英 文 名 coxsackie virus infections 缩 写 别 名 ICD 号 A08.3 概 述 柯 萨 奇 病 毒 感 染 是 由 柯 萨 奇 病 毒 引 起 的 病 毒 性 感 染 性 疾 病 临 床 表 现 复 杂 多 样, 有 无 菌 性 脑 膜 炎 脑 炎 心 肌 炎 心 包 炎 流 行 性 胸 肌 痛 疱 疹 性 咽 峡 炎 等,
< 1+1 <! " #$% &!"#$ %&' ( )( %&* ) + ), %&- )+. )../'0 ) 1 ) "' )!"#$%&' (1% ( )* " + + %,-.2(13/01 )' 扩增 &' 基因 煮沸获得铜绿假单胞菌 ) 基因组作为模板 ) )( 作为引物
213456!"# $ % # %557;&/55/?5,/ @@@!88>>!"#!$% &'()*+ 武汉市疾病预防控制中心 武汉 /&55, % 华中科技大学同济医学院病原生物学系微生物教研室 武汉 /&55&5 & 武汉市第十一医院 武汉 /&5555,- O ' 0 ' =! 6!, 2 M*34!. 5 '2 ' 0 0* 6) 7 88^9:;0, 6! 89-4 O?@ 7%58
上海交通大学学报 农业科学版 第 卷 24,'1,1%-%09.2.?-,&-210%;.)' %2-24' ',% ,%2%0&%2-&-2.%:.2.00%,..;" 伏马毒素,%2..2 是由串珠镰刀菌产生的真菌毒素 目前已知有 ) 种衍生物 分为 9$= 四类 其
第 卷第 期 年 月 上海交通大学学报 农业科学版!" # $ $"$"!%&'%' ' 文章编号 '('''''( 伏马毒素 9 单克隆抗体的制备及间接竞争 " 方法的建立 王雨晨 王 君 王元凯 严亚贤 上海交通大学农业与生物学院 上海市兽医生物技术重点实验室 上海 摘 要 采用戊二醛法将半抗原伏马毒素 9 分别与载体蛋白钥孔血蓝蛋白 和蛋白卵清白蛋白! 偶联成为完全抗原 9 和!9!9 作为包被抗原建立
第 4 期邱果等 : 抗 HCMVPp65 蛋白单克隆抗体的制备及性质研究 339 werescreenedandtheantibodytitersweredeterminedbyindirectelisa.andthenthemonoclonalantibodyspecificity forhcm
第 23 卷第 4 期 2014 年 8 月 激光生物学报 ACTA LASER BIOLOGY SINICA Vol.23No.4 Aug.2014 doi:10.3969/j.isn.1007 7146.2014.04.009 抗 HCMVPp65 蛋白单克隆抗体的制备及性质研究 邱果 ab, 许凤 a, 邱义兰 a, 廖 晶 b, 李烨 a, 刘胜姿 b, 李桑 a b, 刘如石 ( 湖南师范大学
pet28a + CD 1 3 ~ 4 NHL 85% ~ % B 2 CD B B B 3-4 CD 5 CD B Rituximab C2B8 CD IgG1 CHO FDA C2B8 Minibody IgG VL VH CH3 Linker VL-VH-CH3 Fc ADCC
35 3 12 9 JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY Natural Science Edition Vol 35 No 3 Sept 12 pet28a + CD 210046 Rituximab VL VH CH3 CD overlap PCR Rituximab VL VH Linker ScFv ScFv IgG1 CH3 IgG1 cdna pet28a
《实验用小型猪环境条件》编制说明
中国实验动物学会团体标准 实验动物小鼠诺如病毒诊断方法 编制说明 联系人 : 岳秉飞 联系电话 :010-67095401 编制单位 : 中国食品药品检定研究院 时 间 : 2016 年 10 月 20 日 1 2 ~ 3 4 ~ 5 6 A B α μ μ μ 7 8 μ μ μ μ 9 μ μ 表 3 ELISA 检测重复性实验 血清号第一次第二次第三次血清号第一次第二次第三次 1 + + +
11. Fab 867 (Infectious bursal disease IBD) IBD ().25 mmol/l IPTG 37 4 h [1] SDS-PAGE 1 Table 1 Primers used in the amplification of the target gene P
![11. Fab 867 (Infectious bursal disease IBD) IBD ().25 mmol/l IPTG 37 4 h [1] SDS-PAGE 1 Table 1 Primers used in the amplification of the target gene P](/thumbs/81/83370048.jpg "11. Fab 867 (Infectious bursal disease IBD) IBD ().25 mmol/l IPTG 37 4 h [1] SDS-PAGE 1 Table 1 Primers used in the amplification of the target gene P")
37 11 215 11 中国预防兽医学报 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Vol. 37 No.11 Nov. 215 doi: 1.3969/j.issn.8-589.215.11.12 张瑛杰 1, 尹杰超 1, 李天鹤 2, 周兵 3, 徐鹏飞 1, 荆燕 1,4, 任桂萍 1*, 李德山 1* (1. 153 2. 49
武楠 等 小鼠脾内免疫法制备重组弓形虫 抗原单克隆抗体 弓形虫呈全球性分布 专性寄生于有核细胞 引起人兽共患的弓形虫病 通常弓形虫感染者多无症状 但孕妇感染会造成流产 畸胎以及多种出生缺 陷 弓形虫病对免疫低下人群如骨髓移植 心脏移植 获得性免疫缺陷综合征 8 4"4! 16 患者常有致命威胁 美国
复旦学报 医学版 小鼠脾内免疫法制备重组弓形虫,$5) 抗原单克隆抗体 武 楠 周丹秋 阮 卫 吴丽桂 张慧涨 复旦大学附属金山医院检验科 上海 浙江省疾病预防与控制中心 杭州 摘要 目的 制备小鼠抗重组弓形虫 抗原单克隆抗体 用于早期弓形虫感染的抗原检测 方法 用弓形虫 /- 株重组抗原 进行常规免疫结合小鼠脾内免疫 杂交瘤技术制备单克隆抗体 ' 1 法筛选阳性克隆 经亚克隆建株 诱生腹水法制备抗体
4 : pcdna3.1(+) ;PLV-EF1A-EGFP(2A) 30s,41 30s,72 2min,35 ; Puro ; TG1; (Hu min 1% manembryonickidney293cels); (Ma- din-darbycaninekidneyce
33 4 2017 6 CHINESEJOURNALOF VIROLOGY Vol.33 No.4 June 2017 1# 2#,, 2, 2, 1 3* 1*,, (1., 511436; 2., 510230; 3., 510663) : HEK-293-HA RT-PCR HA, pcdna3.1(+ ), pcdna3.1(+ )-HA pcdna3.1(+)-ha PLV-EF1a-EGFP(2A)Puro
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微生物学通报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Feb. 20, 2018, 45(2): 322 333 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.170299 研究报告 抗酸土脂环酸芽孢杆菌 (Alicyclobacillus acidoterrestris) 单克隆抗体制备
148 激光生物学报第 25 卷 screening.result:therecombinantproteinwasthehumanprocalcitonin,whichhadgoodimmunoreacitvityandimmu nogenicity,and7monoclonalantibodie
第 25 卷第 2 期 2016 年 4 月 激光生物学报 ACTA LASER BIOLOGY SINICA Vol.25No.2 Apr.2016 doi:10.3969/j.isn.1007 7146.2016.02.009 降钙素原的原核表达及单克隆抗体制备 郑姣 1a,b, 邱义兰 1b, 廖 晶 1a, 李晓丹 1a, 张坚松 1a, 吴意 1c, 何赛 1b, 梁湘辉 2, 郭向荣 1b
54 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology Vol.37No 道 [14 16] 1~35 位氨基酸多肽 (EBOVNP1~35) 为上海吉尔生化公司合成 弗氏完全佐剂 弗氏不完全佐剂 50%PEG1450 溶液 HAT 和 HT 选择性培养基均为 Sigma 产品
![54 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology Vol.37No 道 [14 16] 1~35 位氨基酸多肽 (EBOVNP1~35) 为上海吉尔生化公司合成 弗氏完全佐剂 弗氏不完全佐剂 50%PEG1450 溶液 HAT 和 HT 选择性培养基均为 Sigma 产品](/thumbs/93/111418594.jpg "54 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology Vol.37No 道 [14 16] 1~35 位氨基酸多肽 (EBOVNP1~35) 为上海吉尔生化公司合成 弗氏完全佐剂 弗氏不完全佐剂 50%PEG1450 溶液 HAT 和 HT 选择性培养基均为 Sigma 产品")
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2017,37(10):53 59 檪檪 技术与方法 檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪 DOI: 10.13523/j.cb.20171007 抗埃博拉病毒核蛋白抗体的制备与双抗 夹心 ELISA 检测方法的建立 1 刘俊伟 1 常瑞恒 回 鹏 董士尚 王金凤 孙 1 波 (1 天津国际生物医药联合研究院天津 300457
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疾 病 名 马 尔 堡 病 毒 病 英 文 名 Marburg virus disease 别 名 Marburg disease; 马 堡 病 毒 病 ; 马 尔 堡 病 ICD 号 A98.3 病 因 和 发 病 机 制 研 究 的 进 展 1. 病 因 研 究 进 展 马 尔 堡 病 毒 病 (MVD) 是 由 丝 状 病 毒 科 马 尔 堡 病 毒 (MBV) 引 起 的 一 种 出 血 性
８ ８ 王海燕 等 猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白 Ｐ的原核表达及其单克隆抗体的制备 ３ 原核表达质粒的构建 按常规方法 取 ＰＣＲ扩增产物和原核表达载体 用 Ｅ ＲＩ Ｎ Ｉ双酶切 经凝胶回收后用 ＴＤＮＡ连接酶连 Ｐ经酶切鉴定和序列测定 接 重组质粒 ｐｇｅｘ ＧＳ Ｐ融合蛋白的表达与纯化 将
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2008,28(2):42~46 猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白 NSP2 的 原核表达及其单克隆抗体的制备 王海燕姜平 杜以军李玉峰李军星沈芳 ( 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京 210095) 摘要将猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)S1 株截短修饰的 NSP2 蛋白基因 (tnsp2), 克隆于 pgex6p1
目录 u 基本概念 u 杂交瘤技术的诞生及发展 u 杂交瘤技术的原理 u 杂交瘤技术的基本程序 u 单克隆抗体的生产
动物检疫检验技术 专业教学资源库 单克隆抗体技术 目录 u 基本概念 u 杂交瘤技术的诞生及发展 u 杂交瘤技术的原理 u 杂交瘤技术的基本程序 u 单克隆抗体的生产 一 基本概念 多克隆抗体 (polyclonal antibody) 简称多抗, 是针对多个不同抗原决定簇的抗体的混合物 本页图片源自百度搜索 单克隆抗体 (monoclonal antibody) 简称单抗, 是由一个 B 细胞克隆针对单一抗原决定簇产生
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5 3 Vol. 5 o. 3 2014 3 Journal of Food Safety and Quality Mar., 2014 李桂敏, 宁保安, 白家磊, 赵 * 丽, 赵翠娇, 高志贤 (,, 300050) 摘要 : 目的 (diazepam, DZP), 方法 1- -(3- ) [1-ethyl-3-(3-dimethyllaminopropyl) carbodi imide hydrochloride,
+
~ 1 ~ ~ 2 ~ 1-1 UHPLC-SEC 法对治疗性抗体的分析 TSKgel UP-SW3 UHPLC HPLC A TSKgel UP-SW3 2 μm (4.6 mm ID. 15 cm B UHPLC-SEC 1.7 μm (4.6 mm ID. 15 cm mmol/l (ph 6.7 + 2SO4 mmol/l Na +.5 % NaN3.35 ml/ 25 UV 28 nm 5
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微生物学通报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Oct. 20, 2018, 45(10): 2183 2190 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.171047 简报 西藏株小反刍兽疫病毒 H 蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备 于瑞嵩 1,2 高位相 1 李凤平
第 46 卷第 6 期 罗凯明等 : 透明质酸单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立 741 且得率低, 导致生产成本过高, 不能满足医药和化妆品生产的需求 目前主要利用兽疫链球菌 枯草芽孢杆菌 [8-10] [11-12] 大肠杆菌以及乳酸链球 [13-14] 菌的 HA 高产菌株发酵生产 HA 发
![第 46 卷第 6 期 罗凯明等 : 透明质酸单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立 741 且得率低, 导致生产成本过高, 不能满足医药和化妆品生产的需求 目前主要利用兽疫链球菌 枯草芽孢杆菌 [8-10] [11-12] 大肠杆菌以及乳酸链球 [13-14] 菌的 HA 高产菌株发酵生产 HA 发](/thumbs/91/107249813.jpg "第 46 卷第 6 期 罗凯明等 : 透明质酸单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立 741 且得率低, 导致生产成本过高, 不能满足医药和化妆品生产的需求 目前主要利用兽疫链球菌 枯草芽孢杆菌 [8-10] [11-12] 大肠杆菌以及乳酸链球 [13-14] 菌的 HA 高产菌株发酵生产 HA 发")
740 学报 JournalofChinaPharmaceuticalUniversity 2015,46(6):740-744 透明质酸单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立 罗凯明, 赵 虎, 高向东 ( 中国药科大学生命科学与技术学院, 南京 210009) 摘要将 1 氰基 4 二甲胺吡啶四氟硼酸盐 (CDAP) 活化后的透明质酸 (HA) 与牛血清白蛋白 (BSA) 共价偶联制备完全抗原 BSA
中 国 畜 牧 兽 医 卷,-&!-/"/"#%$'."/719*"#!"/"#& 头孢氨苄 '."/71 又称头孢菌素 先锋霉素 等 属于人兽共用的第一代人工半合成头孢菌素类抗生素 因其具有抗菌谱广 疗效确切 价格低廉等优点 在医学和兽医临床上都有着广泛 应用 但 1 的不合理使用 不仅会造成环境
中国畜牧兽医! " # 抗头孢氨苄单克隆抗体的制备与初步应用 张 伟 王 兴 刘金萍 徐声乐 秦海艳 刘若璇 蔡云虹 汝晓飞 侯 珂 王捍东 扬州大学兽医学院 扬州 张浦镇动物防疫站 昆山 摘 要 为制备抗头孢氨苄 '."/71 的单克隆抗体并建立鲜奶中 1 残留检测的 19* 方法 本试验采用戊二醛两步法分别将 1 与牛血清白蛋白 卵清白蛋白 (2 偶联 用合成的 1 作为免疫原免疫 9 雌鼠 次免疫后
矽 谷 為 例, 近 年 亦 逐 漸 發 展 家 庭 平 衡 相 關 協 助 措 施, 請 勞 動 部 一 併 研 議 加 強 對 企 業 人 力 資 源 部 門 的 性 別 平 等 教 育 訓 練 二 總 結 意 見 與 建 議 第 22 點 決 議 如 下 : ( 一 ) 本 次 討 論 第 2
審 查 各 機 關 對 CEDAW 第 2 次 國 家 報 告 總 結 意 見 與 建 議 初 步 回 應 會 議 ( 第 21 點 第 22 點 第 23 點 ) 會 議 紀 錄 時 間 :103 年 12 月 3 日 ( 星 期 三 ) 下 午 2 時 地 點 : 行 政 院 第 七 會 議 室 主 席 : 黃 處 長 碧 霞 記 錄 : 曾 春 暉 出 席 : 詳 如 簽 到 表 壹 主 席
标题
320 江苏农业学报 (Jiangsu J. of Agr. Sci. ),2010,26(2):320 ~ 324 冯志新, 迟灵芝, 刘茂军, 等. 猪肺炎支原体 P46 蛋白单克隆抗体制备 [J]. 江苏农业学报,2010,26(2):320 鄄 324. 猪肺炎支原体 P46 蛋白单克隆抗体制备 冯志新 1, 摇迟灵芝 2, 摇刘茂军 1, 摇王海燕 1, 摇甘摇源 1, 摇吴叙苏 1 1,
23 国药准字 S 长春生物制品研究所 国药准字 S 华兰生物工程 ( 苏州 ) 有限公司 国药准字 S 南京华辰生物工程有限公司 国药准字 S 河南省
人血白蛋白 来源 : 国药准字查询网网址 : https://www.yaozui.com/yaopin/791-renxiebaidanbai 剂型 类别 规格 注射剂 生物制品 2g/ 瓶 (10%,20ml) 批准文号 188 个 ID 批准文号 厂家 批准日期 1 国药准字 S20171002 华兰生物工程重庆有限公司 2017-05-17 2 国药准字 S20163004 武汉中原瑞德生物制品有限责任公司
生命科学研究 房 蓓 武泰存 王景安 以玉米沈单 号为材料 用溶液培养的方法研究了缺锌 低锌和正常供锌对玉米生长发育的影响 进一步明确了一定量低锌比缺锌对玉米的伤害更大 并对其 同工酶谱及蛋白质表达进行了分析 结果表明 一定浓度的低锌培养使玉米生长受抑及受害最重 且地上部分比地下部分更敏感 低锌和缺锌处理时 种同工酶的酶谱和蛋白表达与正常供锌时均有明显的差异 尤其在一定量低锌浓度时 有些同工酶的表达增强或被特异性诱导
主動學習快樂玩,韻文詩歌我在行
遊 戲 學 習 卡 趣 味! 學 海 無 盡 案 淘 沙 舊 浪 未 平 新 浪 高 ; 繁 華 落 盡 待 何 去? 返 本 培 元 即 創 造 我 們 認 為 創 意 教 學 的 價 值 不 是 在 教 案 或 課 程 上 的 形 式 改 變 而 已 若 能 回 歸 到 教 學 的 現 場 對 於 不 同 程 度 的 學 生 都 有 學 習 上 的 幫 助 那 才 是 更 有 意 義 的 這 樣
文 学 蓝 皮 书 迅 冯 俐 崔 涛 等 任 副 主 席, 徐 迅 任 秘 书 长 中 国 煤 矿 作 协 成 立 已 30 年, 1983 年 成 立 之 初 为 中 国 煤 矿 文 学 研 究 会, 1995 年 更 名 为 中 国 煤 矿 作 协 煤 炭 系 统 的 作 家 和 广 大 文
附 录 二 12 年 度 文 学 大 事 记 1 月 鲁 迅 文 学 院 第 十 八 届 中 青 年 作 家 高 级 研 讨 班 结 业 1 月 8 日, 鲁 迅 文 学 院 第 十 八 届 中 青 年 作 家 高 级 研 讨 班 全 体 学 员 顺 利 完 成 了 为 期 4 个 月 的 学 习 生 活, 在 京 举 行 了 结 业 典 礼 中 国 作 协 主 席 铁 凝, 党 组 书 记 李 冰,
(Microsoft Word - 03\300\243\244p.doc)
三 年 二 班 活 動 報 導 記 者 : 林 昱 慈 四 月, 黃 伯 伯 來 我 們 班 敎 布 袋 戲, 每 個 人 都 玩 得 好 開 心, 你 要 不 要 也 來 玩 玩 看 呀! 很 好 玩 唷! 藝 術 與 人 文 課 的 時 候 老 師 要 我 們 畫 燈 籠, 每 個 人 都 很 認 真 的 畫 燈 籠, 你 看, 我 們 畫 得 不 錯 吧! 藝 術 與 人 文 課 老 師 帶
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2013,33(5):62 67 抗肠炎沙门氏菌单链抗体制备及其特异性分析 1 王报贵 2 武晓丽 1 董素琴 甘 1 敏 1 陈星星 陈 1 飞 明 1 星 徐 1 锋 (1 南昌大学生命科学与食品工程学院中德联合研究院南昌
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,203,33(5):62 67 抗肠炎沙门氏菌单链抗体制备及其特异性分析 王报贵 2 武晓丽 董素琴 甘 敏 陈星星 陈 飞 明 星 徐 锋 ( 南昌大学生命科学与食品工程学院中德联合研究院南昌 330047 2 江西中医学院基础医学部南昌 330004) 摘要目的 : 利用基因工程技术制备抗肠炎沙门氏菌的单链抗体 方法 : 从抗肠炎沙门氏菌单克隆抗体的杂交瘤细胞中纯化
SNAT2 mrna SNAT2 mr- NA 2 SNAT SNAT2 12 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT pet28a+ pbk - CMVΔ SNAT2 - HA pbk - CMV -
4 2 5 Vol 42 No 5 2 0 1 3 1 0 Journal of Shanghai Normal UniversityNatural Sciences Oct 2 0 1 3 2SNAT2 1 1 2* 1 200234 2 110016 钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白 2( SNAT2) 属于 SLC38 家族, 参与小的中性氨基酸跨膜转运, 在哺乳动物组织中广泛表达 SNAT2
第 5 期梁艳等 :myh6 蛋白的表达 纯化及多克隆抗体制备 645 thefurtherstudiesofmyh6function. Keywords:myh6;fusionprotein;polyclonalantibody 构建形态有别的心房和心室是脊椎动物心脏形态发生时关键的一步, 随着心
第 19 卷第 5 期 2010 年 10 月 激光生物学报 ACTA LASER BIOLOGY SINICA Vol.19No.5 Oct.2010 doi:10.3969/j.isn.1007 7146.2010.05.014 myh6 蛋白的表达 纯化及多克隆抗体制备 梁艳, 宋怀婷, 李竞超, 吴秀山, 袁婺洲 ( 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室, 心脏发育研究中心,
Microsoft Word 聂雪梅.doc
4 4 Vol. 4 No. 4 2013 8 Journal of Food Safety and Quality Aug., 2013 聂雪梅 *, 李立, 孙利, 高飞 (, 100123) 摘要 : 2011 12,, 2007~2011,,,, 关键词 : ; ; ; ; Trade and notification situation on food import and export
标题
第 36 卷第 10 期西南大学学报 ( 自然科学版 ) 2014 年 10 月 Vol.36 No.10 JournalofSouthwestUniversity (NaturalScienceEdition) Oct. 2014 DOI:10.13718/j.cnki.xdzk.2014.10.013 家蚕核型多角体病毒 IE1 的 1 多克隆抗体制备及鉴定 董战旗 1, 张军 1, 胡楠 1,
Microsoft Word 王伟华校正.doc
5 6 Vol. 5 No. 6 2014 6 Journal of Food Safety and Quality Jun., 2014 icelisa 王伟华 1, * 田木星 1, 韩占江 2 (1. /, 843300; 2. /, 843300) 摘要 : 目的, icelisa( ) 方法, CPF-H1 CPF-H2,,, icelisa, 结果 ;, ; ; icelisa, : PBST,
中 国 畜 牧 兽 医 卷 交叉保护力弱 疫苗免疫常常失去预期的效果 D 是冠状病毒科 冠状病毒属的成员 为单股正链 病毒 该病毒基因组的高突变率导致了 新基因型和变异株不断出现 D 是冠状病毒科的代表株 外被囊膜 其基因组为不分节段的正链单股 全长约 主要编码 种结构蛋白 纤突蛋白 小囊膜蛋白 /
中国畜牧兽医! " 鸡传染性支气管炎病毒广西株 基因的克隆与序列分析 屈素洁 施开创 邹联斌 胡 杰 莫胜兰 尹彦文 张步娴 李 军 梁 媛 广西区动物疫病预防控制中心 南宁 摘 要 参照
中国生物工程杂志! 公司 2;3 和 $ 购自 ',5 公司 92$' 底物显色液购自天根公司 92 标记的二抗山羊抗鼠 3 购自中杉生物有限公司 质粒抽提试剂盒 纯化试剂盒购自 '3 公司 引物合成和测序均在军事医学科学院生物工程研究所六室完成 个 1 单抗均为本课题组自制 & 包被液 ",<6.
中国生物工程杂志! "# 幽门螺杆菌 1 串联融合表位的表面呈现表达 封小燕 王艳春 李平超 陶好霞 王 秡 袁盛凌 王令春 王 普 刘纯杰 浙江工业大学药学院 杭州 军事医学科学院生物工程研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室 北京 & 摘要 目的 应用表达载体. 表面呈现表达幽门螺杆菌 1 串联融合表位 方法 通过引入多克隆位点的方法改造表达呈现表达载体. 并用改造后的质粒表达幽门螺杆菌 1
附件2：
中国实验动物学会团体标准 实验动物肿瘤坏死因子 α 转基因关节炎小鼠模型饲养繁育规范 编制说明 联系人 : 李舸 联系电话 :15011983691 编制单位 : 广东省实验动物监测所 时 间 : 2016 年 10 月 25 日 中国实验动物学会团体标准 人肿瘤坏死因子 α 转基因关节 炎小鼠模型饲养繁育规范 编制说明 GB/T1.1 2009 1 2011A081401005 2013B040400007
Microsoft Word - 1-3陳詠琳-近代..
近 代 數 字 卦 研 究 考 述 陳 詠 琳 摘 要 所 謂 的 數 字 卦, 乃 指 出 土 文 物 上 某 種 奇 特 的 卜 筮 符 號, 有 學 者 表 示 這 些 符 號 為 數 字, 並 將 之 與 周 易 連 結, 遂 使 此 類 符 號 有 筮 數 易 卦 之 稱, 為 一 門 新 穎 的 易 學 研 究 議 題 張 政 烺 以 奇 數 為 陽, 偶 數 為 陰 的 原 則, 把
Microsoft Word doc
5 7 Vol. 5 No. 7 2014 7 Journal of Food Safety and Quality Jul., 2014 HTS-ELISA 甄玉萍, 裴世春 *, 高建伟 (, 161006) 摘要 :,,,,, HTS-ELISA, (Trailing), 关键词 : - ; ; ; Progress of monoclonal antibody secretion hybridoma
Microsoft Word gc170117蔡鑫娜
1276 生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology http://journals.im.ac.cn/cjbcn DOI: 10.13345/j.cjb.170117 蔡鑫娜等 / 猪繁殖与呼吸综合征病毒 nsp4 抗体制备与鉴定 August 25, 2017, 33(8): 1276 1283 2017 Chin J Biotech, All rights
Microsoft Word gc 周瑶琴.doc
44 生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology http://journals.im.ac.cn/cjbcn DOI: 10.13345/j.cjb.170220 动物及兽医生物技术 周瑶琴等 / 一种快速鉴定猪肺炎支原体免疫显性蛋白抗原的 ELISA 方法的建立 Jan. 25, 2018, 34(1): 44 53 2018 Chin J Biotech,
PCR专题改.doc
Primer3 http://frodowimitedu/cgi-bin/primer3/primer3_wwwcgi Primer5 Oligo665 Primer5 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=38536 Oligo667 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=40898 1 PCR 1
单克隆抗体技术是二十世纪七八十年代兴起并由 Kohler 和 Milstein 创立的分子生物学 [7] 技术, 两人于 1984 年获得诺贝尔奖 当时为获得大量单克隆抗体, 两人通过 PEG 或灭活仙台病毒将小鼠骨髓瘤细胞 (sp2/0) 与小鼠脾脏细胞 ( 被绵羊红细胞免疫过 ) 融合, 融合后
![单克隆抗体技术是二十世纪七八十年代兴起并由 Kohler 和 Milstein 创立的分子生物学 [7] 技术, 两人于 1984 年获得诺贝尔奖 当时为获得大量单克隆抗体, 两人通过 PEG 或灭活仙台病毒将小鼠骨髓瘤细胞 (sp2/0) 与小鼠脾脏细胞 ( 被绵羊红细胞免疫过 ) 融合, 融合后](/thumbs/88/116003915.jpg "单克隆抗体技术是二十世纪七八十年代兴起并由 Kohler 和 Milstein 创立的分子生物学 [7] 技术, 两人于 1984 年获得诺贝尔奖 当时为获得大量单克隆抗体, 两人通过 PEG 或灭活仙台病毒将小鼠骨髓瘤细胞 (sp2/0) 与小鼠脾脏细胞 ( 被绵羊红细胞免疫过 ) 融合, 融合后")
人源 CT55 蛋白原核表达及单克隆抗体的制备 任建委 1, 李军 2 1*, 李尚泽 (1. 西藏大学医学院, 西藏自治区拉萨 850000;2. 武汉大学生命科学学院湖北省武汉 430072;1*. 武汉大学中南医院, 湖北省武汉 430071;) 摘要 : 为制备 Cancer testis 55(CT55) 单克隆抗体, 需构建带有人源 CT55 片段的原核表达质粒, 把该质粒转化 Rosetta
誰 的 債 券 利 率 下 行 最 多? 一 方 面, 不 同 行 業 債 券 融 資 結 構 存 差 異 ; 另 一 方 面, 不 同 行 業 受 益 於 不 同 債 券 品 種 收 益 率 的 下 行 綜 合 而 言, 紡 織 服 裝 食 品 飲 料 行 業 受 益 較 大, 其 中 紡 織 服
2015 年 12 月 16 日 宏 觀 經 濟 尋 找 高 負 債 風 險 下 的 幸 運 兒 融 資 成 本 節 約 的 分 行 業 測 算 負 債 有 多 大? 非 金 融 上 市 企 業 總 負 債 約 23 萬 億, 有 息 負 債 達 10.5 萬 億 有 息 負 債 增 長 腳 步 雖 已 放 緩, 但 有 息 負 債 率 居 高 不 下,12 年 至 今 維 持 在 近 30% 的