第 5 期梁艳等 :myh6 蛋白的表达 纯化及多克隆抗体制备 645 thefurtherstudiesofmyh6function. Keywords:myh6;fusionprotein;polyclonalantibody 构建形态有别的心房和心室是脊椎动物心脏形态发生时关键的一步, 随着心

Size: px
Start display at page:

Download "第 5 期梁艳等 :myh6 蛋白的表达 纯化及多克隆抗体制备 645 thefurtherstudiesofmyh6function. Keywords:myh6;fusionprotein;polyclonalantibody 构建形态有别的心房和心室是脊椎动物心脏形态发生时关键的一步, 随着心"

Transcription

1 第 19 卷第 5 期 2010 年 10 月 激光生物学报 ACTA LASER BIOLOGY SINICA Vol.19No.5 Oct.2010 doi: /j.isn myh6 蛋白的表达 纯化及多克隆抗体制备 梁艳, 宋怀婷, 李竞超, 吴秀山, 袁婺洲 ( 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室, 心脏发育研究中心, 湖南长沙 ) 摘要 : 斑马鱼心脏发育模型中,myh6 编码是一种促进心室心肌细胞扩张的转录因子 为了进一步研究 myh6 在心脏发育和心脏疾病发生中的功能, 需要获得斑马鱼 myh6 蛋白并制备其抗体 从斑马鱼心脏组织中提取总 RNA, 通过反转录得到心脏组织特异表达基因的 cdna,pcr 扩增得到 myh6 部分编码区序列, 然后将其连接到 pgex 4T 载体上获得原核表达 经酶切及测序鉴定后, 转化 BL21 细菌, 并用 IPTG 诱导表达融合蛋白, 谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化, 将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体, 并用 Westernbloting 检测抗体的特异性 结果显示, 获得了 myh6 原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗 myh6 多克隆抗体, 为 myh6 功能的进一步研究提供了有力的工具 关键词 :myh6; 融合蛋白 ; 多克隆抗体中图分类号 :Q78 文献标识码 :A 文章编号 : (2010) Expresion,Purificationofmyh6FusionProteinandPreparation ofitspolyclonalantibody LIANGYan,SONGHuai ting,lijing chao,wuxiu shan,yuanwu zhou (TheCenterforHeartDevelopment,KeyLabofMOEforDevelopmentBiologyandProteinChemistry, HunanNormalUniversity,Changsha410081,Hunan,China) Abstract:InZebrafishheartdevelopmentmodel,myh6encodestranscriptionfactorswhichcanpromoteexpansionof ventricularmyocardialcels.inordertostudythefunctionofmyh6inheartdevelopmentandheartdisease,itisnecesa rytoobtianzebrafishmyh6proteinandmyh6antibody.thetotalrnaofzebrafishhearttisueswasextractedandwas reversetranscriptedintocdnaastemplatebyinversetranscriptionalpcr.myh6partialcodingsequencewasobtained bypcramplification,thenwasclonedintopgex 4T 1vectorandwasidentifiedwithrestrictionenzymedigestionand sequencing.therecombinantexpresionplasmidcontainingmyh6genewastransformedintobl21andgst myh6fusion proteinwasinducedbyiptg.thepurifiedproteinobtainedbytreatingthelysateswithimmobilizedglutathionesepha roseandthenwasusedtoimmunizethenewzealandwhiterabbitstogenerateantibody.theantibodytiterandspecifici tywasidentifiedbywesternblot.altheseresultsshowedthatgst myh6fusionproteinwaspurifiedsuccesfulyand thehighsensitivityandhighspecificityanti myh6polyclonalantibodywasgenerated,whichprovidedapowerfultoolfor 收稿日期 : ; 修回日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金项目 ( ); 湖南省普通高校学科带头人项目 ( 湘教通 ) 作者简介 : 梁艳 (1984 ), 女, 硕士研究生, 从事分子发育遗传学研究 ( 电话 ) ;( 电子邮箱 )liangy an2007succes@126.com 通讯作者 : 袁婺洲 (1966 ), 教授, 博士, 博士生导师 ( 电子邮箱 )yuanwuzhou@ yahoo.com.cn; 吴秀山 (1952 ), 教授, 博士, 博士生导师 ( 电子邮箱 )xiushanwu2003@yahoo.com.cn

2 第 5 期梁艳等 :myh6 蛋白的表达 纯化及多克隆抗体制备 645 thefurtherstudiesofmyh6function. Keywords:myh6;fusionprotein;polyclonalantibody 构建形态有别的心房和心室是脊椎动物心脏形态发生时关键的一步, 随着心脏原基的融合和随后线性心管的发生, 脊椎动物的心脏发生经历了一系列环化和成熟, 最终形成了 4 个腔并具有心房 心室和特化的传导系细胞的区域性特征 [1] 心房与心室各有其独特的形态建成及收缩节律 [2] 心房心室协调的收缩频率趋使血液从心房流入心室, 然后再通过脉管系统, 回到心房 心房与心室特定的大小及形状对其在高效的循环系统发挥特定功能至关重要 先天心脏缺陷病人中, 有相当一部分是心房或心室异常 [3] myh6(myosin,heavypolypeptide6,cardiacmus cle,alpha) 作为一种结构蛋白, 在心房中大量表达, 并在心脏发育及先天心脏病中发挥重要作用 [4] myh6 表达的下调也会引起房间隔缺陷 myh6 基因受多种基因的调控, 在多种基因突变体的心房缺陷表型中, 这些缺陷表型的出现均与 myh6 表达下调有关 如 myh6 可受 FGF2 或者 FGF4 的下调影响, 从而影响心房细胞的正常发育 [5] ; 斑马鱼 weakatrium (wea) 突变体, 由于干扰了斑马鱼 myh6 基因的正常表达, 导致心房收缩缺陷 [6] ;Mef2 缺失果蝇 myh6 表达下调, 出现肌球蛋白重链缺失 [7] ;TBX5 和 MEF2C 协同激活 myh6, 影响心脏的正常形态建成 [8] 为了进一步研究 myh6 在心脏发育和心脏疾病发生中的功能, 需要获得斑马鱼 myh6 蛋白并制备其抗体 本文报道 myh6 蛋白的表达及抗体制备情况, 结果表明本文制备的 myh6 抗体特异性好, 效价高, 可用于 myh6 功能的进一步研究 1 材料与方法 1.1 材料和试剂大肠杆菌 E.coliDH5α,E.coliBL21, 本实验室保种 ; 载体 pgex 4T 1 均为本实验室提供 ; 限制性内切酶 EcoRI 和 SalI,TaqDNA 聚合酶,10 Loadingbuf er 购自深圳晶美公司 ;pmd18 T 载体和连接酶购自大连宝生物公司 ;RNase 购自 Sangon 公司 ; 柱式 DNA 胶回收试剂盒购自 TIANGEN; 质粒提取试剂盒 ( 离心柱型 ) 购自 OMEGA;GlutathioneSepharose TM 4B 蛋白纯化试剂盒购自 PIERCE 公司 ; 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 丙烯酰胺 甲叉双丙烯酰胺 过硫酸铵 IPTG( 异丙基 в D 硫代半乳糖苷 ) 等购自上海生工公司 1.2 引物设计与合成根据巢式 PCR 的原理和 myh6 基因的序列设计引物, 第一对引物 :Z myh6 S:5 ATTGGACGACCTT GCCTCA3,Z myh6 A:5 TGCCACCTCTGTATTAGC 3, 第二对带有酶切位点的引物 :Z myh6 S2:5 GAATTCATTGGACGACCTTGCCTCA3 EcoRⅠZ myh6 A2:5 GTCGACTTGCCACCTCTGTATTAGC3 SalI 由上海生工公司合成 1.3 基因扩增及克隆首先从斑马鱼心脏组织中提取 RNA, 通过反转录得到心脏组织各种表达基因的 cdna 用第一对引物以反转录得到的 cdna 文库为模板进行 PCR 扩增, 再用第二对引物进行 myh6 的特异扩增 反应条件为 :94 变性 4min;94 30s,57 30s,72 30s, 反应 30 个循环 ;72 延伸 8min 所得 PCR 产物长 427bp, 经纯化连接 T 载体, 转化 DH5 大肠杆菌, 挑取克隆, 经 EcoRI 和 SalI 双酶切检测, 得到阳性克隆 用限制性内切酶 EcoRI 和 SalI 将所需 DNA 片断从 pmd18 T myh6 载体切下, 连入 pgex 4T 1 载体 ( 经 EcoRI 和 SalI 酶切并纯化 ), 转化 DH5 大肠杆菌, 经 EcoRI 和 SalI 双酶切检测, 得到阳性克隆, 并选择一个阳性克隆送至上海生工公司进行测序分析 1.4 myh6 融合蛋白诱导表达重组子 pgex 4T 1 myh6 转化 BL21 感受态细胞, 挑取单个菌落, 接种于 20mL 含 100μg/mL 氨苄青霉素的 LB 培养基含 37 培养, 至 OD 590 约为 0.6, 按 0.1mmol/mL 加 IPTG 诱导,30 继续培养,4h, 5h,6h,7h,8h 各取 1mL 菌液 以未加 IPTG 诱导的重组子细菌培养物为对照 1.5 myh6 融合蛋白亲和纯化将细菌超声裂解和液氮反复冻融后, 离心取上清 再将上清与经 PBS 漂洗活化后的 Glutathione Sepharose TM 4B 结合 30min, 低速离心, 使 GST myh6 蛋白随珠子一起沉淀下来 用 PBS 反复漂洗珠子去上清后用谷胱甘肽缓冲液缓慢混匀, 重悬珠子 30min,4 低速离心分离上清获得纯化的 GST myh6 融合蛋白 -80 保存备用

3 646 激光生物学报第 19 卷 1.6 myh6 多克隆抗体制备选取两只 20kg~21kg 成年健康雄性新西兰大白兔, 耳缘静脉取血约 5mL, 制备免疫前正常血清, 作为阴性对照 将纯化得到的 GST myh6 蛋白质按体积比 1 1 与弗氏完全佐剂 ( 购自 Sigma 公司 ) 在注射器中推成乳剂, 进行背部皮下免疫注射, 分散 个点 ; 注射速度尽量慢而均匀, 其分布位置也是如此, 尽量在大白兔身体背部的各个部位都有注射点 ; 在第 14d 第 21d 第 28d 再将溶于 0.5mL 生理盐水中的 0.5mg 抗原蛋白与弗氏不完全佐剂 ( 购自 Sigma 公司 ) 按体积比 1 1 在注射器中推成乳剂, 进行背部皮下多点注射 第 35d 主动脉取血 兔血放在 4 冰箱静置过夜, 以 3000g 离心 10min, 取血清分装保存于 myh6 多克隆抗体检测将 pgex 4T 1 myh6 转化 BL21 菌株, 诱导表达 myh6 蛋白 取 1mL 菌液,10000g 离心 5min 将细胞收获到 1.5mL 离心管 细胞收获后用 PBS 洗涤两次, 最后加入 200μLPBS, 吸打混匀 取 20μL 蛋白样品加入 16μL 上样缓冲液和 4μLDDT, 沸水煮 5min 12% 的 SDS PAGE 分离蛋白质后, 转膜到 PVDF 膜上, 然后进行蛋白免疫印迹反应 将膜置于含 5% 脱脂牛奶封闭缓冲液中 4 封闭 4h, 加 自制的抗 myh6 的兔血清 ( 一抗 ),4 轻摇孵育过夜,TBST 洗膜 3 次, 每次 15min, 后加入 ( 山羊抗兔 ) 的辣根过氧化物酶标记的二抗, 室温轻摇孵育 1h, 洗膜 3 次, 使用 ECL 试剂盒检测 2 结果 2.1 myh6 基因克隆至表达载体将 myh6 基因克隆到 pmd18 T 载体中, 再用 EcoRI 和 SalI 分别双酶切 pmd18 T myh6, 将 myh6 基因克隆到 pgex 4T 1, 并转化大肠杆菌 DH5α, 经 EcoRI 和 SalI 双酶切鉴定目的片段大小 440bp( 图 1) 及测序分析, 结果显示已经成功构建了 pgex 4T 1 myh6 2.2 myh6 融合蛋白诱导表达及纯化将重组子转化 BL21 大肠杆菌, 以低浓度 (0.1 mmol/ml)iptg 进行诱导,4h,5h,6h,7h,8h 各取 1mL 菌液进行检测, 可见一条相对分子量约为 42kD 大小的特异性, 与预期的 myh6 融合蛋白相对分子质量一致 ( 图 2) 融合蛋白经 GlutathioneSepharose TM 4B 亲和纯化后,SDS PAGE, 最后经考马斯亮蓝染色, 显示为单一的条带, 纯度为 80% 以上, 并且为可溶性蛋白 ( 图 4) 1,2,3:EcoRI/SalI 双酶切结果 ;M:DNAMaker 1,2,3:ResultofEcoRI/SalIdigestion;M:DNAMaker 图 1 双酶切鉴定及 pgex 4T 1 myh6 质粒示意图 Fig.1 DoubledigestionidentificationandSchematicrepresentationofpGEX 4T 1 myh6expresionplas mid

4 第 5 期梁艳等 :myh6 蛋白的表达 纯化及多克隆抗体制备 647 1: 未诱导的 pgex 4T 1 在 BL21 中的表达 ;2: 未诱导的 pgex 4T 1 myh6 在 BL21 中的表达 ;3: 加 IPTG 诱导 4h 后 pgex 4T 1 myh6 在 BL21 中的表达 ;4: 加 IPTG 诱导 5h 后 pgex 4T 1 myh6 在 BL21 中的表达 ;5: 加 IPTG 诱导 6h 后 pgex 4T 1 myh6 在 BL21 中的表达 ;6: 加 IPTG 诱导 7h 后 pgex 4T 1 myh6 在 BL21 中的表达 ;7: 加 IPTG 诱导 8h 后 pgex 4T 1 myh6 在 BL21 中的表达 ; M:Marker Lane1:BL21withpGEX 4T 1uninduced;Lane2:BL21withpGEX 4T 1 myh6uninduced;lane3:bl21 withpgex 4T 1 myh6inducedbyiptgfor4h;lane4:bl21withpgex 4T 1 myh6inducedbyiptgfor 5h;Lane5:BL21withpGEX 4T 1 myh6inducedbyiptgfor6h;lane6:bl21withpgex 4T 1 myh6 inducedbyiptgfor7h;lane7:bl21withpgex 4T 1 myh6inducedbyiptgfor8h;m:marker 图 2 重组子 pgex 4T 1 myh6 在 BL21 中表达 Fig.2 Therecombinantmyh6proteinexpresioninBL21withpGEX 4T myh6 多克隆抗体 Westrnbloting 鉴定将 pgex 4T 1 myh6 转化 BL21 菌株诱导表达的总蛋白进行 Westrnbloting 检测, 用自制的抗体 myh6 多克隆抗体 (1 1000) 稀释作为一抗进行检测, 可见 GST myh6 蛋白所在位置有一条 42kD 特异性的杂交带出现, 同时用空白血清和 GST 抗体分别做阴性和阳性对照 ( 如图 5) 说明产生的免抗 GST myh6 血清是 myh6 的特异性抗体 结果表明该抗体的特异性和敏感性均可达到今后实验需要 1: 纯化后的 GST myh6 蛋白 ;M:Marker 1:GST myh6fusionproteinafterpurification;m:mark er. 图 3 融合蛋白 GST myh6 的纯化 Fig.3 PurificationofGST myh6fusionprotein 图 4 myh6 多克隆抗体 Western bloting 鉴定 Fig.4 Western blotingofmyh6polyclonalantibody

5 648 激光生物学报第 19 卷 3 讨论为了获得 myh6 原核表达融合蛋白, 制备高效价和特异性好的兔抗 myh6 的多克隆抗体以用于 myh6 基因功能研究, 采用的 pgex 4T 1 载体其 S D 序列下游是谷胱甘肽巯基转移酶基因, 克隆的 myh6 基因与谷胱甘肽巯基转移酶基因相连, 形成融合体 当目的基因在上清中表达, 表达产物为谷胱甘肽巯基转移酶和目的基因产物的融合体, 可用 Glutathione Sepharose TM 4B 纯化出来 为使 myh6 融合蛋白在上清中表达, 我们在研究中改变了温度和 / 或调节 IPTG 浓度以及诱导时间长短, 对 BL21 大肠杆菌所表达的蛋白进行粗提, 超声反复冻融后, 上清可见目的蛋白 为维持质粒的稳定性, 我们在 LB 培养基中加入了终浓度为 1% 的葡萄糖 本研究中, 我们将所获得的 GST myh6 蛋白免疫新西兰大白兔 由于分子质量较大的蛋白型容易激活免疫, 所以我们保留了 GST 部分 SDS PAGE 显示, 所获得的融合蛋白特异性高, 杂蛋白少, 浓度高 末次免疫 1 周后, 分别将免疫后的兔血清按 稀释进行 Westernbloting 检测, 结果显示抗体的特异性和敏感性都较高, 为进行 myh6 基因的进一步研究奠定了基础 References [1] 吴秀山, 李永青, 王跃群, 等. 信号调控与心脏发育 [M]. 北京 : 化学工业出版社,2006: WU Xiu shan,liyong qing,wang Yue qun,etal.signal RegulationandHeartDevelopment[M].Beijing:ChemistryIn dustrypres,2006: [2] YELOND,STAINIERDY.PaterningduringOrganogenesis: GeneticAnalysisofCardiacChamberFormationSemin[J].Cel DevBiol,1999,10: [3] HOFFMANJI,KAPLANS.TheIncidenceofCongenitalHeart Disease[J].JAmColCardiol,2002,39, [4] CHINGYH,GHOSHTK,CROSSSJ,etal.MutationinMyo sinheavychain6causesatrialseptaldefect[j].natgenet, 2005,37: [5] LOPEZ SANCHEZC.InductionofCardiogenesisbyHensen s Nodeand FibroblastGrowth Factors[J]. CelTisueRes, 2002,309: [6] BERDOUGOE,COLEMAN1H.MutationofWeakAtrium/atrial MyosinHeavyChainDisruptsAtrialFunctionandInfluences VentricularMorphogenesisinZebrafish[J].Developmentand Disease,2003,130: [7] LINQ,SCHWARZJ,BUCANAC,etal.ControlofMouseCar diacmorphogenesisand Myogenesisby Transcription Factor MEF2C[J].Science,1997,276: [8] TUSHARK,GHOSH1,SONGFF,etal.PhysicalInteraction betweentbx5andmef2cisrequiredforearlyheartdevelop ment[j].molecularandcelularbiology,2009,29:

材料 方法

材料 方法 生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽

More information

材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析

材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析 生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌

More information

7 北京大学学报 医学版 # +94* 4 ' % 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0

7 北京大学学报 医学版 # +94* 4 ' % 论著!! # $ #% %&!%'!! $ ( )& * $ +,-.)/ ) 01  * ).  2)3 )01 ( / 433% /1  0 51  -.)/$ 6',)) 4.))%) 0 论著!! "# $ #% %"&!%'!! $ "( )& * $ +,-.)/ ) 01 " * ). " 2")3 )01 ( /" 433% /1 " 0 "51 " -.)/$ 6',)") 4.))%) 0 ".. " - 23 )"." ( ).)") 4. " ' $ 7 " #$%"$8 &' + +." 0"3 / 3 3( 0 ) %.% "(% 2). +.) ")( ) (

More information

材料 方法

材料 方法 生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人

More information

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法 实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin( 氨卡青霉素 )(100 mg/ml) 100 mg/ml Ampicillin 50 ml 配制方法 1. 称量 Ampicillin 置于 50 ml 离心管中 ; 2. 加入 40 ml 灭菌水, 充分混合溶解后, 定容至 50 ml; 3. 用 0.22 µm 过滤膜过滤除菌 ; 4. 小份分装 (1 ml/ 份 ) 后,-20 保存 IPTG(

More information

第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液

第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液 第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功

More information

福建农林大学硕士学位论文番茄抗叶霉菌相关基因的鉴定及 TRV 16K 基因的功能分析姓名 : 郑璐平申请学位级别 : 硕士专业 : 分子病毒学指导教师 : 吴祖建 ; 蔡新忠 20070401 番茄抗叶霉菌相关基因的鉴定及 TRV 16K 基因的功能分析 作者 : 郑璐平

More information

标题

标题 第 36 卷第 10 期西南大学学报 ( 自然科学版 ) 2014 年 10 月 Vol.36 No.10 JournalofSouthwestUniversity (NaturalScienceEdition) Oct. 2014 DOI:10.13718/j.cnki.xdzk.2014.10.013 家蚕核型多角体病毒 IE1 的 1 多克隆抗体制备及鉴定 董战旗 1, 张军 1, 胡楠 1,

More information

材料 方法 载体构建 转基因植株的获得

材料 方法 载体构建 转基因植株的获得 生物技术通报 唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 邱德文 通过根癌农杆菌 介导转化法 将含有激发子基因 的植物表达载体 转化三生烟 获得了转基因烟草植株 用 检测确认了阳性转化株 用 杂交 和 杂交进一步证实了 基因的整合 转录和表达 对 代转基因阳性株进行 接种试验 结果显示 与非转基 因对照相比 表达 的烟草叶片枯斑数量减少 表明蛋白激发子基因 的表达提高了转基因烟草对 的抗性 激发子 基因 烟草 转化 材料

More information

SNAT2 mrna SNAT2 mr- NA 2 SNAT SNAT2 12 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT pet28a+ pbk - CMVΔ SNAT2 - HA pbk - CMV -

SNAT2 mrna SNAT2 mr- NA 2 SNAT SNAT2 12 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT pet28a+ pbk - CMVΔ SNAT2 - HA pbk - CMV - 4 2 5 Vol 42 No 5 2 0 1 3 1 0 Journal of Shanghai Normal UniversityNatural Sciences Oct 2 0 1 3 2SNAT2 1 1 2* 1 200234 2 110016 钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白 2( SNAT2) 属于 SLC38 家族, 参与小的中性氨基酸跨膜转运, 在哺乳动物组织中广泛表达 SNAT2

More information

:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet

:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet 2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot

More information

Really Good Antibodies Bethyl 二抗产品册 超过 670 种抗小鼠 兔子 山羊和大鼠的二抗 bethyl.com

Really Good Antibodies Bethyl 二抗产品册 超过 670 种抗小鼠 兔子 山羊和大鼠的二抗 bethyl.com Really Good Antibodies Bethyl 二抗产品册 超过 670 种抗小鼠 兔子 山羊和大鼠的二抗 bethyl.com Bethyl 公司 Bethyl Laboratories, Inc. ) 成立于1972年 一直秉承改善生活的理念致力于科学研究的理念 提供高质量的抗体产品 和抗体定制服务 Bethyl所销售的每一个抗体都是在德克萨斯州的蒙哥马利的唯一工厂生产 并且都经过Bethyl

More information

生物技术通报 材料 方法

生物技术通报 材料 方法 生物技术通报 高曰文 朱耀明 王艳林 朱晨宇 秦烨 胡汉卿 韩钰 旨在探讨盐酸普鲁卡因 对人结肠癌 细胞 基因甲基化及表达的影响 应用巢式双重 甲基化特异性聚合酶链反应 检测盐酸普鲁卡因处理前后 细胞中 基因启动子的甲基 化水平 逆转录 聚合酶链反应 和蛋白印迹技术观察 细胞内 基因表达情况 检测发现人结肠癌 细胞中 基因存在甲基化 经盐酸普鲁卡因处理能够使 基因甲基化水平下降 和蛋白印迹分析结果显

More information

连接

连接 502 南方医科大学学报 J South Med Univ 202;32(4) 基础研究 小鼠前列腺干细胞抗原的原核表达 纯化及抗原活性检测 董金凯 2 罗 津 3 阎瑾琦 2 张 亮 2 高江平 于继云 2 中国人民解放军总医院泌尿外科 北京 00853 2 军事医学科学院基础医学研究所 北京 00850 3 湖南省永州 市人民医院 湖南 永州 425000 摘要 目的 RT-PCR 扩增小鼠前列腺干细胞抗原

More information

高 云 钟良军 张源明 周晓欢 梁 平 徐 隽 探讨兔牙周炎对动脉粥样硬化炎性因子的影响及抗生素对其的作用 将 只雄性新西兰大白兔随机分为 组 组为对照组 组为牙周炎组 组为动脉粥样硬化组 组为牙周炎 动脉粥样硬化组 组为干预组 牙周炎 动脉粥样硬化 替硝唑组 各组分别按照实验设计进行相应干预处理 周末处死动物 检测牙周指标 血清中总胆固醇 三酰甘油 高密度脂蛋白胆固醇 低密度脂蛋白胆固醇 反应蛋白

More information

150 微生物学通报 2009, Vol.36, No.1 (systemic lupus erythematosus, SLE), Sm(B B D1), Sm D1, SLE [1], Sm D1 (immunoblot, IBT) (enzyme linked immunosorbent as

150 微生物学通报 2009, Vol.36, No.1 (systemic lupus erythematosus, SLE), Sm(B B D1), Sm D1, SLE [1], Sm D1 (immunoblot, IBT) (enzyme linked immunosorbent as 微生物学通报 JAN 20, 2009, 36(1): 149~153 Microbiology tongbao@im.ac.cn 2009 by Institute of Microbiology, CAS 生物实验室 人 SmD1 抗原的酵母真核表达及其初步应用 * 杨湘越吴文冰兰小鹏 ( 350025) 摘要 : 通过 PCR 扩增 Sm D1 基因, 与酵母表达载体 ppic9k 重组, 构建表达质粒

More information

Invitrogen 1.4 pet-gr, ICE-LGR, PCR TA, pmd18-t/gr pet-21a(+) (Nde I Xho I), E. coli DH-5,,,, pet-gr GR ORF cdna, GR, : PU: 5 -GGAATTCCAT

Invitrogen 1.4 pet-gr, ICE-LGR, PCR TA, pmd18-t/gr pet-21a(+) (Nde I Xho I), E. coli DH-5,,,, pet-gr GR ORF cdna, GR, : PU: 5 -GGAATTCCAT 42 6 Vol.42, No.6 2011 11 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA Nov., 2011 南极衣藻 (Chlamydomonas sp. ICE-L) 谷胱 * 甘肽还原酶基因的原核表达及其条件优化 1 1 燏 1 1 2 (1. 524025; 2. 266061) RT-PCR GR ORF cdna, ; IPTG,, pet-gr BL21,

More information

Microsoft Word tb 于瑞嵩-简报..doc

Microsoft Word tb 于瑞嵩-简报..doc 微生物学通报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Oct. 20, 2018, 45(10): 2183 2190 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.171047 简报 西藏株小反刍兽疫病毒 H 蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备 于瑞嵩 1,2 高位相 1 李凤平

More information

标题

标题 Vol. 36 高 等 学 校 化 学 学 报 No. 5 2015 年 5 月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 摇 摇 摇 摇 摇 摇 886 ~ 892 摇 摇 doi: 10. 7503 / cjcu20140965 一 种 新 的 混 合 斑 精 子 分 离 方 法 伍 贤 军 1,2, 赵 摇 兵 2, 缪 摇 璇

More information

<4D6963726F736F667420506F776572506F696E74202D20332DC1D9B4B2504352BCECD1E9B1EAB1BEB5C4B4A6C0EDA1A2B1A3B4E6BCB0BACBCBE1CCE1C8A1B7BDB7A82DD5D4C9C6C4C8205BBCE6C8DDC4A3CABD5D>

<4D6963726F736F667420506F776572506F696E74202D20332DC1D9B4B2504352BCECD1E9B1EAB1BEB5C4B4A6C0EDA1A2B1A3B4E6BCB0BACBCBE1CCE1C8A1B7BDB7A82DD5D4C9C6C4C8205BBCE6C8DDC4A3CABD5D> 检 验 过 程 临 床 PCR 检 验 标 本 的 处 理 保 存 及 核 酸 提 取 方 法 医 师 申 请 检 验 项 目 申 请 患 者 准 备 患 者 识 别 样 本 采 集 样 本 运 送 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 分 析 测 定 样 本 处 理 分 析 前 分 析 中 分 析 后 报 告 临 床 应 用 烟 台 市 烟 台 山 医 院 赵 善 娜 结 合 临 床 资 料 分 析 结 果 并 确 认 出

More information

第 卷 第 期 年 月 水 生 生 物 学 报 肠 丫 搔蒸霎 原 位杂 交 和 原 位 技 术在 鱼 类基 因 定位 中 的 应 用 黄 袁仕 取 梅 朱作言 中 国科 学 院 水 生 生 物 研 究 所 淡 水 生 态 与 生 物 技 术 国 家 重 点 实验 室 武 汉 陕 西 师 范 大学 生 命 科 学 院 西 安 # 万 尸 了夭 如 趾 郑 人 扭寿 卿 关 键词 艺 只 妙 毛山知

More information

第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析

第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析 第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖

More information

< 1+1 <! " #$% &!"#$ %&' ( )( %&* ) + ), %&- )+. )../'0 ) 1 ) "' )!"#$%&' (1% ( )* " + + %,-.2(13/01 )' 扩增 &' 基因 煮沸获得铜绿假单胞菌 ) 基因组作为模板 ) )( 作为引物

< 1+1 <!  #$% &!#$ %&' ( )( %&* ) + ), %&- )+. )../'0 ) 1 ) ' )!#$%&' (1% ( )*  + + %,-.2(13/01 )' 扩增 &' 基因 煮沸获得铜绿假单胞菌 ) 基因组作为模板 ) )( 作为引物 213456!"# $ % # %557;&/55/?5,/ @@@!88>>!"#!$% &'()*+ 武汉市疾病预防控制中心 武汉 /&55, % 华中科技大学同济医学院病原生物学系微生物教研室 武汉 /&55&5 & 武汉市第十一医院 武汉 /&5555,- O ' 0 ' =! 6!, 2 M*34!. 5 '2 ' 0 0* 6) 7 88^9:;0, 6! 89-4 O?@ 7%58

More information

第十一章 颈部疾病病人的护理

第十一章  颈部疾病病人的护理 第 十 一 章 颈 部 疾 病 病 人 的 护 理 学 习 目 标 1. 了 解 颈 部 常 见 肿 块 病 人 的 身 体 状 况 及 处 理 原 则 ; 能 提 出 甲 状 腺 肿 瘤 甲 状 腺 功 能 亢 进 病 人 的 护 理 诊 断 并 制 定 出 护 理 措 施 2. 熟 悉 甲 状 腺 肿 瘤 甲 状 腺 功 能 亢 进 病 人 的 身 体 状 况 手 术 适 应 证 3. 掌 握

More information

Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : Buffer 标准 1 标准 2 样品 试剂 ( 荧光染色 ) 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng

Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : Buffer 标准 1 标准 2 样品 试剂 ( 荧光染色 ) 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng/μl 100 ng/μl 待测 200 测定时要求浓度 未知 0 ng/μl 5000ng/ml 0~5000 ng/ml 1 备注 -Buffer:Qubit dsdna

More information

第 卷 -.+$$$-+($-.(+"$(+$%"(+$#'$+(.$+*(.$+(%$%+.$$$+$$+-$( 7-($++$"$($(+'$+'$%*$$&$.$+$%+ $$".(+$+.$+'$+'( ".($#-$4$+" +'$".(+%+$$$++(* %$+$+$"(+'$%+$"

第 卷 -.+$$$-+($-.(+$(+$%(+$#'$+(.$+*(.$+(%$%+.$$$+$$+-$( 7-($++$$($(+'$+'$%*$$&$.$+$%+ $$.(+$+.$+'$+'( .($#-$4$+ +'$.(+%+$$$++(* %$+$+$(+'$%+$ 第 卷第 期 年 月 "## $%# - 基础医学 含 '- 野生及突变结合位点的胰岛素受体 '6,78&' 区报告基因载体的构建和鉴定 王美晨 王 璇 蓝 茜 李 癑 刘 莉 伊 静 李 靖 宋刘梅 马莎蕊 宁启兰 李冬民 西安交通大学医学部 遗传学与分子生物学系 环境与疾病相关基因教育部重点实验室 级临床医学七年制 级临床医学五年制 陕西西安 ( 摘要 目的 利用 6< *%&$%', :%''"D$"

More information

福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析

福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析 福建农业学报 林 甦 朱春华 陈 珍 刘斌琼 施少华 江 斌 蔡国漳 林 羽 黄 瑜 甦 男 硕士 助理研究员 主要从事病毒学和动物传染病学研究 福建农业学报 材料与方法 毒株 主要仪器 主要试剂 引物设计 的培养 反应条件的建立 荧光定量 检测临床样本 结果与分析 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 福建农业学报 讨 论 林 甦等 鸡 亚型白血病病毒荧光定量 检测方法的建立 责任编辑

More information

Microsoft Word - 007 ??:??.doc

Microsoft Word - 007 ??:??.doc 痤 瘡 的 治 療 概 況 王 雷 山 東 中 醫 大 學 研 究 生 痤 瘡 是 青 春 期 男 女 的 常 見 皮 膚 病 多 因 皮 脂 腺 分 泌 過 旺,; 或 過 食 辛 辣, 煎 炒 燥 熱 及 油 膩 食 品 而 生 輕 者 形 成 粉 刺 紅 色 丘 疹, 重 則 反 復 感 染 造 成 局 部 膿 瘡 炎 症 結 節 或 囊 腫 樣 皮 膚 損 害 [1] 痤 瘡 的 治 療 方

More information

二 外汇风险溢酬的度量及其时间序列模型

二 外汇风险溢酬的度量及其时间序列模型 外汇风险溢酬理论述评 郑振龙 邓弋威 一 外汇风险溢酬问题的提出 国家自然科学基金项目 非完美信息下基于观点偏差调整的资产定价 福建省自然科 学基金项目 卖空交易对证券市场的影响研究 教育部人文社科一般项目 市场有效性 价格发现与 定价权争夺 基于人民币即期汇率和远期汇率的研究 教育部留学回国人员科研启动基金 人民币 即期与远期汇率关系及外汇市场协同稳定机制研究 郑振龙 男 福建平潭人 厦门大学金融系教授

More information

Microsoft Word ?1709gc100186郑惠玲.doc

Microsoft Word ?1709gc100186郑惠玲.doc 生物工程学报 Chin J Biotech 2010, December 25; 26(12): 1704 1709 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn 2010 CJB, All rights reserved. 生物技术与方法 抗山羊 ΔfosB 基因表达产物抗体的制备及应用

More information

张红丽 等 部分功能域基因的原核表达与分析 第6期 发表序列 AY819650 同源性为 100 与国外 10 株 同源性为 98畅 8 有 13 个碱基发生了突 变 其中 4 个是有意义的突变 这 4 个有意义的 突变分别为第 257 位 T C 第 505 位 A C 第 908 位 A G 第 1012 位 G C 图 4 这些差异可 能是捻转血矛线虫株间存在地域差异所致 2畅 5 HPS 原核表达与鉴定

More information

程汉良 夏德全 吴婷婷 孟学平 吉红九 董志国 陈淑吟 对文蛤 青蛤 硬壳蛤 江户布目蛤 薄片镜蛤 和菲律宾蛤仔 种帘蛤科贝类和 个地理种 群文蛤 大连 连云港 湛江 防城港 的细胞色素 氧化酶亚基 基因片段的核苷酸序列进行了分析 以探讨这一序列在种质鉴定 种群遗传结构和分子系统发生研究中的应用价值 测序结果 表明 所有物种扩增片段长度均为 序列 含量 明显高于 含量 物种间共有变异位点 个 其中简约信息位点

More information

臧晓南 张学成 王高歌 刘金姐 张晓辉 刘 滨 对两种丝状蓝藻 钝顶节旋藻和盐泽螺旋藻 在基因工程中常用作选择试剂的 种抗生素 氯霉素 氨苄青霉素 红霉素 链霉素 卡那霉素 庆大霉素和新霉素 的敏感性作比较实验 结果表明 两种蓝藻对抗生素的敏感性既有共同的特点 也有 明显的差异 它们对红霉素 氯霉素和链霉素最敏感 致死浓度分别为 和 两种蓝藻对氨苄青霉素比较敏感 的氨苄青霉素即可抑制 和 的生长 但

More information

武洪庆 田 黎 张久明 温占波 用 方法对黄杆菌属产红色素菌株 的培养基进行了优化 首先用部分重复因子实验对培养基组分蛋白胨 酵母粉 葡萄糖及 浓度对菌株产红色素的影 响进行评价 找出主要影响因子为葡萄糖和 浓度 两者均为正影响 其他组分对色素含量的 影响不显著 第二步用最陡爬坡路径逼近最大响应区域 最后用中心组合设计及响应面分析确定主 要影响因子的最佳浓度 菌株在优化培养基中培养较初始培养基色素含量提高

More information

Microsoft Word - 6--李铁松_news_.doc

Microsoft Word - 6--李铁松_news_.doc 重组七鳃鳗 PHB2 蛋白的原核表达及纯化 李铁松, 王颖, 高杨, 李庆伟 (, 116081) 摘要 : 为了研究 PHB2 蛋白的生物学活性及后续抗体的制备, 作者以前期构建的 pmd18-t-lm-phb2 质粒为模板, PCR 扩增 Lm-PHB2 基因全长 CDS 区, PCR 产物经 Hind III 和 EcoR I 双酶切后连接至表达载体 pet-32a, 构建重组质粒 pet-32a-lm-phb2

More information

9.1.乳房炎

9.1.乳房炎 1. 1 3 4 5 -- -- 1 3 2 3,, 3 4 2. : 1 2 3 4 6~12h 2 1~2d (1) 15~18 7~15b 70% 2%~5% 2 3 2. 1 2 3. 3-7d 3-4 ( ) 1 2 3% 2 3 2% 1% 2 3 3 5 10mg 10% 4. (1) (2) (3) (4) (5) (1) (2) 3

More information



 本 期 导 读 警 示 : 左 氧 氟 沙 星 有 严 重 不 良 反 应 江 苏 降 低 就 医 基 金 起 付 标 准 社 区 看 病 可 报 门 诊 费 我 国 启 动 大 规 模 高 血 压 患 者 治 疗 现 状 调 查 地 方 药 企 成 医 改 最 大 受 益 方 中 小 企 业 遇 生 存 压 力 再 析 国 家 基 本 药 物 目 录 或 与 非 基 本 药 物 招 标 并 行 科

More information

2015,35(4) 龚隆财等 :ctni linker TnC 融合蛋白的原核表达及鉴定 49 免疫反应鉴定, 表明重组表达的 ctni linker TnC 融合蛋白具有较好的免疫原性, 保存了 ctni 和 ctnc 单体的天然结构, 有望成为天然 ctni TnC 复合物的替代物, 为下一步

2015,35(4) 龚隆财等 :ctni linker TnC 融合蛋白的原核表达及鉴定 49 免疫反应鉴定, 表明重组表达的 ctni linker TnC 融合蛋白具有较好的免疫原性, 保存了 ctni 和 ctnc 单体的天然结构, 有望成为天然 ctni TnC 复合物的替代物, 为下一步 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2015,35(4):48 53 DOI:10.13523/j.cb.20150407 ctni linker TnC 融合蛋白的原核表达及鉴定 龚隆财 罗镇明 杨雁青 王振宇 向军俭 (1 暨南大学广东省分子免疫与抗体工程重点实验室广州 510632) 王 宏 (2 广州市疾病与食品安全免疫学快速检测重点实验室暨南大学分室广州 510632)

More information

材料导报 研究篇 年 月 下 第 卷第 期 种球的制备 单步溶胀法制备分子印迹聚合物微球 洗脱处理 种子溶胀聚合机理 种球用量的影响

材料导报 研究篇 年 月 下 第 卷第 期 种球的制备 单步溶胀法制备分子印迹聚合物微球 洗脱处理 种子溶胀聚合机理 种球用量的影响 水相中 组氨酸单分散分子印迹聚合物微球的合成 表征及其识别性能研究 李思平等 李思平 徐伟箭 较佳工艺条件下 在水性体系中选用无皂乳液聚合法制得的单分散微米级聚苯乙烯微球为种球 分别以组氨酸 甲基丙烯酸 或丙烯酸胺 乙二醇二甲基丙烯酸酯 为模板分子 功能单体和交联剂 合成了 组氨酸分子印迹聚合物微球 研究了形貌 粒径及其分布以及模板分子与功能单体之间的相互作用 分别以 激光粒度分析仪紫外分光光度法和红外光谱表征功能单体与交联剂之间的共聚情况

More information

第 期 赵金莲等 荧光光谱法分析花茶对羟自由基 诱导的 氧化损伤的保护作用!!!!!!!! 花茶冲泡方法 荧光扫描方法 # 稳定性试验方法 重复性试验方法

第 期 赵金莲等 荧光光谱法分析花茶对羟自由基 诱导的 氧化损伤的保护作用!!!!!!!! 花茶冲泡方法 荧光扫描方法 # 稳定性试验方法 重复性试验方法 年 月 华南师范大学学报 自然科学版 年第 期 赵金莲 曾佑炜 李 宽 彭永宏 采用荧光光谱扫描法定性定量研究了 种花茶对羟自由基 诱导的 氧化损伤的保护作用 结果表明 桂花茶 复合花茶 绿茶和芍药花茶的保护作用要优于红玫瑰花茶和金莲花茶 且各花茶的保护作用在 范围内均随质量浓度的增加而增强 该方法的稳定性和重复性都较好 花茶 氧化损伤 荧光光谱扫描 第 期 赵金莲等 荧光光谱法分析花茶对羟自由基

More information

生命科学研究 房 蓓 武泰存 王景安 以玉米沈单 号为材料 用溶液培养的方法研究了缺锌 低锌和正常供锌对玉米生长发育的影响 进一步明确了一定量低锌比缺锌对玉米的伤害更大 并对其 同工酶谱及蛋白质表达进行了分析 结果表明 一定浓度的低锌培养使玉米生长受抑及受害最重 且地上部分比地下部分更敏感 低锌和缺锌处理时 种同工酶的酶谱和蛋白表达与正常供锌时均有明显的差异 尤其在一定量低锌浓度时 有些同工酶的表达增强或被特异性诱导

More information

162 激光生物学报第 27 卷 Keywords:gata1;polyclonalantibody;DNAimmunization GATA 家族是一类能够特异性识别受调控基因启动子内 GATA 基序并与其结合的转录调控因子 其共同特点除了对一致性的序列 (T/A)GATA(A/ G) 具有高度的

162 激光生物学报第 27 卷 Keywords:gata1;polyclonalantibody;DNAimmunization GATA 家族是一类能够特异性识别受调控基因启动子内 GATA 基序并与其结合的转录调控因子 其共同特点除了对一致性的序列 (T/A)GATA(A/ G) 具有高度的 第 27 卷第 2 期 2018 年 4 月 激光生物学报 ACTA LASER BIOLOGY SINICA Vol.27No.2 Apr.2018 doi:10.3969/j.isn.1007 7146.2018.02.009 利用 DNA 免疫技术制备 GATA1 蛋白多克隆抗体 郭芬 1, 曹灵慧 1, 陈宇霖 1, 欧柏青 2 1, 吴秀山 (1. 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,

More information

第 卷 第 期 年 月 半 导 体 学 报! " # $%&'%' $!&' #% #$1 /#1 $'! / ?/ ?/ / 3 0,?/ ) * +!!! '!,!! -. & ' $! '! 4% %&1)/1(7%&)03 (% )

第 卷 第 期 年 月 半 导 体 学 报!  # $%&'%' $!&' #% #$1 /#1 $'! / ?/ ?/ / 3 0,?/ ) * +!!! '!,!! -. & ' $! '! 4% %&1)/1(7%&)03 (% ) 第 卷 第 期 年 月!"# $%&'%' $!&'#%#$1/#1 $'! /18103 2?/03101?/18103 /3 0,?/0301.13 )*+!!! '!,!! -.&' $!'! 4%%&1)/1(7%&)03(%)%&,%*(1&0)%$-0*,%30)17*1*)0(+1(1+&1*+*),)1; &113(%44(10&.0701&0-&00*/)%;()1%-1+%&0)0*1*)%

More information

PCR专题改.doc

PCR专题改.doc Primer3 http://frodowimitedu/cgi-bin/primer3/primer3_wwwcgi Primer5 Oligo665 Primer5 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=38536 Oligo667 http://wwwbioonnet/dispbbsasp?boardid=25&id=40898 1 PCR 1

More information



 细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应

More information

12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL

12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL ( )2017 57 5JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2017,Vol.57No.5 11 LY294002, (, 330006) : LY294002 PI3K/AKT 0 10 15 20 25 30μmol L -1 LY294002(LY294002 ) A549,PBS CCK8 LY294002 A549 ; Westernblot

More information

荧光定量PCR

荧光定量PCR 荧 光 定 量 PCR 荧 光 定 量 PCR 原 理 荧 光 定 量 PCR 最 早 称 TaqMan PCR, 后 来 也 叫 Real-Time PCR, 是 美 国 PE(Perkin Elmer) 公 司 1995 年 研 制 出 来 的 一 种 新 的 核 酸 定 量 技 术 该 技 术 是 在 常 规 PCR 基 础 上 加 入 荧 光 标 记 探 针 或 相 应 的 荧 光 染 料

More information

张 伟 等 + 基于 0. 的神经胶质酸性蛋白质自身抗体的血清含量测定及其在脑胶质母细胞瘤诊断中的应用 ;!1 诊断技术因其高昂费用而无法得到广泛应用 因而发展基于临床血液样本且价格相对低廉的脑胶质瘤检测手段成为必须 早在 1" 年 % 就发现唾 4 液酸乳四糖神经酰胺可用于恶性脑胶质瘤的检测 随后

张 伟 等 + 基于 0. 的神经胶质酸性蛋白质自身抗体的血清含量测定及其在脑胶质母细胞瘤诊断中的应用 ;!1 诊断技术因其高昂费用而无法得到广泛应用 因而发展基于临床血液样本且价格相对低廉的脑胶质瘤检测手段成为必须 早在 1 年 % 就发现唾 4 液酸乳四糖神经酰胺可用于恶性脑胶质瘤的检测 随后 ;!" 复旦学报 医学版!"# 基于.7 & 的神经胶质酸性蛋白自身抗体的血清含量测定及其在脑胶质母细胞瘤诊断中的应用 张 伟 危 平 施 前 复旦大学生物医学研究院蛋白组学与系统生物学研究院 上海! 摘要 目的 发展基于 0. 的血清神经胶质酸性蛋白 ((, (%) '%. 自身抗体含量测定方法 用于脑胶质瘤患者的诊断 方法 克隆 12%' 基因至 ' = #' 载体 使用大肠埃希菌中纯化得到的.

More information

Thermo Scientific 分子克隆完全解决方案

Thermo Scientific 分子克隆完全解决方案 molecular biology 分子克隆完全解决方案 用于酶切 修饰和凝胶分析的工具 PCR 试剂和耗材 用于核酸纯化的试剂盒 Thermo Scientific 分子生物学工具 PCR 克隆试剂盒, 克隆酶和核酸纯化试剂盒 限制性内切酶 Thermo Scientific FastDigest 快速限制性内切酶品质优异, 用于快速 DNA 酶切 我们所有的 176 种 FastDigest 快速内切酶在

More information

网址 : 电话 : 客服电话微信 : 邮箱 : 地址 : 烟台市开发区珠江路 32 号留创园 3 号楼 E 栋 247 室 Gel Free cl

网址 :  电话 : 客服电话微信 : 邮箱 : 地址 : 烟台市开发区珠江路 32 号留创园 3 号楼 E 栋 247 室 Gel Free cl Gel Free cloning TM 不跑胶载体构建试剂盒 Gel Free Cloning TM Kit Gel Free cloning 技术是一种简单 快速并且高效的载体构建技术, 可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点 该技术不受酶切位点限制, 也不需要线性化质粒, 只需要两步 PCR 即可将目的片段构建到载体的任意位点, 具有省时, 简便的特点 克隆阳性率可达 90% 以上 Gel Free

More information

2 天津科技大学学报第 32 卷第期 绿色荧光蛋白 (green fluorescent protein,gfp) 于 [1] 1974 年由 Morise 等在水母中发现并分离出来. 该蛋白包含 238 个氨基酸, 第 65~67 位残基 (Ser-Tyr- Gly) 自发形成荧光发色基团为对羟基

2 天津科技大学学报第 32 卷第期 绿色荧光蛋白 (green fluorescent protein,gfp) 于 [1] 1974 年由 Morise 等在水母中发现并分离出来. 该蛋白包含 238 个氨基酸, 第 65~67 位残基 (Ser-Tyr- Gly) 自发形成荧光发色基团为对羟基 2016-12-01 11:04:23 http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1355.n.20161201.1104.006.html 第 32 卷第期 2017 年月 天津科技大学学报 Journal of Tianjin University of Science & Technology Vol. 32 No.. 2017 DOI:10.13364/j.issn.1672-6510.20160202

More information

pet28a + CD 1 3 ~ 4 NHL 85% ~ % B 2 CD B B B 3-4 CD 5 CD B Rituximab C2B8 CD IgG1 CHO FDA C2B8 Minibody IgG VL VH CH3 Linker VL-VH-CH3 Fc ADCC

pet28a + CD 1 3 ~ 4 NHL 85% ~ % B 2 CD B B B 3-4 CD 5 CD B Rituximab C2B8 CD IgG1 CHO FDA C2B8 Minibody IgG VL VH CH3 Linker VL-VH-CH3 Fc ADCC 35 3 12 9 JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY Natural Science Edition Vol 35 No 3 Sept 12 pet28a + CD 210046 Rituximab VL VH CH3 CD overlap PCR Rituximab VL VH Linker ScFv ScFv IgG1 CH3 IgG1 cdna pet28a

More information

124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na

124 河南农业科学第 42 卷, (HPS) ;PRRSV PCV2, [4] PRRSV CSFV ;20, PRRSV,CSFV [5-9],, 1.2 主要试剂和仪器 Real-timePCR PRRSV CSFV PCV2, 3 RotorGene, RG-3000; ND-1000 Na 河南农业科学,2013,42(2):123-127 JournalofHenanAgriculturalSciences PCR PRRSV CSFV PCV2,, (, 450011) : 根据 TaqMan 复合荧光探针设计原则, 应用 Primer5.0 和 Oligo6.0 软件设计检测猪繁殖 与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 猪瘟病毒 (CSFV) 和猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 的特异性引物和探针,

More information

中 国 畜 牧 兽 医 卷 基因组的 89 区 开放阅读框 ( 约为 % 共编码 个氨基酸 由于 基因组中 含量过高 扩增全长较困难 因此通常截取含 有 & 蛋白抗原表位的一段基因片段进行表达 研究证实 & 蛋白是抗体的主要靶子 虽然在猪体内存在着 &&&1 核衣壳蛋白等抗体 但在行使免疫性和诱导免

中 国 畜 牧 兽 医 卷 基因组的 89 区 开放阅读框 ( 约为 % 共编码 个氨基酸 由于 基因组中 含量过高 扩增全长较困难 因此通常截取含 有 & 蛋白抗原表位的一段基因片段进行表达 研究证实 & 蛋白是抗体的主要靶子 虽然在猪体内存在着 &&&1 核衣壳蛋白等抗体 但在行使免疫性和诱导免 中国畜牧兽医! " 猪伪狂犬病病毒 " 蛋白表达及免疫原性分析 贾 刚 樊梅娜 谷 巍 山东宝来利来生物工程股份有限公司研究院 泰安 泰安大凡神农制药有限公司研究院 泰安 摘 要 本试验旨在研究猪伪狂犬病病毒 '"%& 蛋白的表达并分析其免疫原性 以 病毒液为模板 设计特异性引物 扩增大小为 %' 的保守片段并测序 将其克隆到表达载体 '1" 中 转化表达菌 9)1 经诱导表达 纯化得到目的蛋白 进行

More information

中国生物工程杂志! 公司 2;3 和 $ 购自 ',5 公司 92$' 底物显色液购自天根公司 92 标记的二抗山羊抗鼠 3 购自中杉生物有限公司 质粒抽提试剂盒 纯化试剂盒购自 '3 公司 引物合成和测序均在军事医学科学院生物工程研究所六室完成 个 1 单抗均为本课题组自制 & 包被液 ",<6.

中国生物工程杂志! 公司 2;3 和 $ 购自 ',5 公司 92$' 底物显色液购自天根公司 92 标记的二抗山羊抗鼠 3 购自中杉生物有限公司 质粒抽提试剂盒 纯化试剂盒购自 '3 公司 引物合成和测序均在军事医学科学院生物工程研究所六室完成 个 1 单抗均为本课题组自制 & 包被液 ,<6. 中国生物工程杂志! "# 幽门螺杆菌 1 串联融合表位的表面呈现表达 封小燕 王艳春 李平超 陶好霞 王 秡 袁盛凌 王令春 王 普 刘纯杰 浙江工业大学药学院 杭州 军事医学科学院生物工程研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室 北京 & 摘要 目的 应用表达载体. 表面呈现表达幽门螺杆菌 1 串联融合表位 方法 通过引入多克隆位点的方法改造表达呈现表达载体. 并用改造后的质粒表达幽门螺杆菌 1

More information

中国临床医学 年 月 第 卷 第 期 )*8)$ 节 功能的影响 本课题组现有的蛋白激酶 如 酪蛋白激酶 蛋白激酶 等表达质粒都构建在 与 / 相同的载体 ) 质粒上 且携带相 同的 标签 这为利用表达标签的优势研究蛋 白激酶和 / 的相互作用带来了困难 因此 本研究将 / 构建到带 * 标签的 载

中国临床医学 年 月 第 卷 第 期 )*8)$ 节 功能的影响 本课题组现有的蛋白激酶 如 酪蛋白激酶 蛋白激酶 等表达质粒都构建在 与 / 相同的载体 ) 质粒上 且携带相 同的 标签 这为利用表达标签的优势研究蛋 白激酶和 / 的相互作用带来了困难 因此 本研究将 / 构建到带 * 标签的 载 )*8)$ 中国临床医学 年 月 第 卷 第 期 2- 论 著 -0. 融合蛋白对 外显子 * 可变剪接的影响 缪世琛 屈舒婷 陆 颖 唐 啸 任梁梁 顾建兰 南通大学医学院 南通 摘要 目的 构建带 * 标签的 / 及其截断体质粒 探讨 */ 融合蛋白对 外显子 可变剪接的影响 方法 采用 /) 法扩增 / 基因及其各截断体 将扩增产物和载体 双酶切后回收 连接载体和目的片段 获得重组质粒 在 +

More information

标题

标题 第 30 卷第 4 期 2011 年 8 月 华中农业大学学报 JuaHuazhgAguuaUvy V.30 N.4 Au2011,393~397 水稻纤维素合酶多克隆抗体的制备和鉴定 张苗苗 陶章生 陈婷婷 夏涛 2,3 彭良才,4 丰胜求 2,4 1. 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室, 武汉 430070;2. 华中农业大学生物质与生物能源研究中心, 武汉 430070; 3. 华中农业大学生命科学技术学院,

More information

标题

标题 第 35 卷第 3 期 2014 年 9 月 FOREIGN MEDICALSCIENCESECTION OF MEDGEOGRAPHY Vol.35No.3 Sep.2014 189 基础医学 含 mir-497 野生及突变结合位点的胰岛素受体 mrna3 UTR 区报告基因载体的构建和鉴定 王美晨 3 1,2 1,2 1,2 1,2, 王璇, 蓝茜, 李玥, 刘莉, 1,2 1,2 伊静, 李靖,

More information

北京市基本医疗保险政策解答

北京市基本医疗保险政策解答 首 都 经 济 贸 易 大 学 全 日 制 本 科 学 生 学 籍 管 理 规 定 首 经 贸 政 发 2013 60 号 第 一 章 总 则 第 一 条 根 据 教 育 部 普 通 高 等 学 校 学 生 管 理 规 定 和 首 都 经 济 贸 易 大 学 学 生 管 理 规 定, 结 合 我 校 实 际 情 况, 制 定 本 规 定 第 二 条 本 科 基 本 修 业 年 限 为 四 年, 实

More information

从美国 加拿大 英国 澳大利亚 韩国和日本图书馆学情报学学院的发展历程入手 介绍并分析国外图书馆学情报学研究生教育的改革与重组 教学目标与教学方法 专业设置与课程体系 师资队伍与学生情况 入学资格与毕业条件 进而对我国的图书馆学情报学研究生教育制度提出一些改进意见 图书馆学 情报学 研究生 教育 作者简介 葛敬民 男 年生 教授 硕士生导师 刘荣华 女 年生 硕士生 王林 男 年生 硕士生

More information

标题

标题 吉林农业大学学报 2016 38 1 87 91 Journal of Jilin Agricultural University http xuebao jlau edu cn E mail jlndxb vip sina com 神 经 生 长 因 子 mrna 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 130118

More information

期 江学斌等 猪源抗菌肽 在毕赤酵母中的表达及鉴定 剂来调节机体免疫系统 在抗感染中发挥重要作 用 抗菌肽成为新一代的抗菌 抗病毒 抗癌药物 但天然抗菌肽的来源少 成本高 无法满足临床试用和基础研究的需要 而人工合成成本高 所以 采用重组表达的方法可大量获得抗菌肽 以满足其抗菌作用机理研究及开发成一

期 江学斌等 猪源抗菌肽 在毕赤酵母中的表达及鉴定 剂来调节机体免疫系统 在抗感染中发挥重要作 用 抗菌肽成为新一代的抗菌 抗病毒 抗癌药物 但天然抗菌肽的来源少 成本高 无法满足临床试用和基础研究的需要 而人工合成成本高 所以 采用重组表达的方法可大量获得抗菌肽 以满足其抗菌作用机理研究及开发成一 中国畜牧兽医! " 猪源抗菌肽 / 2 在毕赤酵母中的表达及鉴定 江学斌 陈嘉蔚 杨 军 刘顺枝 肖安吉 卢志鹏 楚品品 黄朝远 蔡海明 马苗鹏 张玲华 广州大学生物工程研究所 广州 华南农业大学生命科学学院 广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室 广州 摘 要 本试验旨在实现猪 防御素 /&!!!1 在毕赤酵母中的表达 获得有抗菌活性的抗菌肽 1 根据 的氨基酸序列和酵母密码子偏好性 设计优化其核苷酸序列

More information

48 江苏农业科学 2018 年第 46 卷第 18 期 Rad 公司 ; 特异性引物由上海立菲生物技术有限公司合成 1.2 试验方法 原核表达载体 pgex-4t-1-atg8e 的构建根据拟南芥官方网站 TAIR(htps:// 公布的 AT

48 江苏农业科学 2018 年第 46 卷第 18 期 Rad 公司 ; 特异性引物由上海立菲生物技术有限公司合成 1.2 试验方法 原核表达载体 pgex-4t-1-atg8e 的构建根据拟南芥官方网站 TAIR(htps://  公布的 AT 江苏农业科学 2018 年第 46 卷第 18 期刘希, 李远凤, 齐亚飞, 等. 拟南芥自噬蛋白 ATG8e 的原核表达及多克隆抗体制备 [J]. 江苏农业科学,2018,46(18):47-51. doi:10.15889/j.isn.1002-1302.2018.18.012 47 拟南芥自噬蛋白 ATG8e 的原核表达及多克隆抗体制备 刘希, 李远凤, 齐亚飞, 郁飞 ( 旱区逆境生物学国家重点实验室

More information

誰 的 債 券 利 率 下 行 最 多? 一 方 面, 不 同 行 業 債 券 融 資 結 構 存 差 異 ; 另 一 方 面, 不 同 行 業 受 益 於 不 同 債 券 品 種 收 益 率 的 下 行 綜 合 而 言, 紡 織 服 裝 食 品 飲 料 行 業 受 益 較 大, 其 中 紡 織 服

誰 的 債 券 利 率 下 行 最 多? 一 方 面, 不 同 行 業 債 券 融 資 結 構 存 差 異 ; 另 一 方 面, 不 同 行 業 受 益 於 不 同 債 券 品 種 收 益 率 的 下 行 綜 合 而 言, 紡 織 服 裝 食 品 飲 料 行 業 受 益 較 大, 其 中 紡 織 服 2015 年 12 月 16 日 宏 觀 經 濟 尋 找 高 負 債 風 險 下 的 幸 運 兒 融 資 成 本 節 約 的 分 行 業 測 算 負 債 有 多 大? 非 金 融 上 市 企 業 總 負 債 約 23 萬 億, 有 息 負 債 達 10.5 萬 億 有 息 負 債 增 長 腳 步 雖 已 放 緩, 但 有 息 負 債 率 居 高 不 下,12 年 至 今 維 持 在 近 30% 的

More information

4 : pcdna3.1(+) ;PLV-EF1A-EGFP(2A) 30s,41 30s,72 2min,35 ; Puro ; TG1; (Hu min 1% manembryonickidney293cels); (Ma- din-darbycaninekidneyce

4 : pcdna3.1(+) ;PLV-EF1A-EGFP(2A) 30s,41 30s,72 2min,35 ; Puro ; TG1; (Hu min 1% manembryonickidney293cels); (Ma- din-darbycaninekidneyce 33 4 2017 6 CHINESEJOURNALOF VIROLOGY Vol.33 No.4 June 2017 1# 2#,, 2, 2, 1 3* 1*,, (1., 511436; 2., 510230; 3., 510663) : HEK-293-HA RT-PCR HA, pcdna3.1(+ ), pcdna3.1(+ )-HA pcdna3.1(+)-ha PLV-EF1a-EGFP(2A)Puro

More information

期王亚楠 等 半滑舌鳎生长因子 &!(" 的定点改造及原核表达 ""! 入手 研究其 基因是否存在同样的特殊功能活性 对于进一步研究 基因具有重要意义 本实验室从已经构建的半滑舌鳎 # 文库中筛选获得了 # 全长 发现其仅在成鱼的脑中表达 并参与胚胎的脑部发育过程 为进一步研究半滑舌鳎 基因的功能

期王亚楠 等 半滑舌鳎生长因子 &!( 的定点改造及原核表达 ! 入手 研究其 基因是否存在同样的特殊功能活性 对于进一步研究 基因具有重要意义 本实验室从已经构建的半滑舌鳎 # 文库中筛选获得了 # 全长 发现其仅在成鱼的脑中表达 并参与胚胎的脑部发育过程 为进一步研究半滑舌鳎 基因的功能 第 卷第 期! 年 月 " 水 " 产 " 学 " 报!"! 文章编号! # $!%! # # #! $ %!!! &$& 半滑舌鳎生长因子 的定点改造及原核表达 王亚楠! " 刘旭东! " 穆琳琳! " 刘志鹏! " 李春梅! " 于海洋!! " 张全启! 中国海洋大学海洋生命学院 海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室 山东青岛 "$$ 青岛市海洋与渔业局 山东青岛 "$$! 国家海洋局北海环境监测中心

More information

复旦学报 医学版 年 月 #!"$(" "!!!-!$ $,$"!!!# % %2"!! "- % $%%#% $$"$ ) &$2 #! % "$2"!!"$ "- $ % $!##$& %!"!! $! ""!" (% "! :!" %!$ %" $ % $! -$$!% $!"

复旦学报 医学版 年 月 #!$( !!!-!$ $,$!!!# % %2!! - % $%%#% $$$ ) &$2 #! % $2!!$ - $ % $!##$& %!!! $! ! (% ! :! %!$ % $ % $! -$$!% $! 复旦学报 医学版 人源吲哚胺 54 双加氧酶 4 的表达与纯化 李娟娟 李 洋 杨 青 复旦大学生命科学学院生物化学系 上海 云南天然产物与生物制药协同创新中心 昆明 摘要 目的 构建人源吲哚胺 双加氧酶 % 2 #! % 原核表达载体 表达 纯化获得 % 蛋白 方法 采用基因工程手段获得 % 原核表达载体并转化表达菌株 筛选合适的重组质粒及异丙基 硫代半乳糖苷!"" $%#$! 浓度进行蛋白表达

More information

自然科学版 预处理 视盘粗定位 视盘垂直坐标的粗定位 视盘水平坐标的粗定位

自然科学版 预处理 视盘粗定位 视盘垂直坐标的粗定位 视盘水平坐标的粗定位 自然科学版 文章编号 视网膜图像中视盘的快速自动定位方法 赵晓芳 林土胜 李碧 摘 要 基于眼底视网膜血管的分布结构及视盘本身的特点 提出一种快速自动定位视盘的方法 首先根据视网膜血管的网络分布结构大致定位视盘的垂直坐标 然后根据视盘 的亮度信息及视盘与血管的关系来定位视盘的水平坐标 最后把视盘限定在以粗定位的视盘为中心的一个小窗口内 用 变换精确定位视盘中心 该方法不需要事先分割视网膜血管 也不需要对算法进行训练

More information

连接

连接 doi 0.3969/j.issn.673-454.03.0.03 3 基础研究 小鼠VEGFR 小鼠 VEGFR 胞外 胞外 -4IgG IgG样结构域的原核表达 样结构域的原核表达 纯化及活性鉴定 王 伟 殷小涛 李云奇 田仁礼 阎瑾琦 高江平 于继云 解放军总医院泌尿外科 北京 00853 军事医学科学院基础医学研究所 北京 00850 摘要 目的 获得小鼠血管内皮生长因子Ⅱ型受体 mvegfr

More information

期 刘茂军等 猪肺炎支原体 基因原核表达及免疫原性分析,')&%!&"! 7,,766*4,876,), 4* 猪支原体肺炎 *77,)3 (,>' 又称猪气喘病 地方流行性肺炎 该病分布广泛 发病率高 虽死亡率不高 但由于 7 能破坏呼吸道黏膜 纤毛屏障 从而继发其他致病菌的感染 主要表现为咳嗽

期 刘茂军等 猪肺炎支原体 基因原核表达及免疫原性分析,')&%!&! 7,,766*4,876,), 4* 猪支原体肺炎 *77,)3 (,>' 又称猪气喘病 地方流行性肺炎 该病分布广泛 发病率高 虽死亡率不高 但由于 7 能破坏呼吸道黏膜 纤毛屏障 从而继发其他致病菌的感染 主要表现为咳嗽 畜牧兽医学报 猪肺炎支原体 基因原核表达及免疫原性分析 刘茂军 张 悦 杜改梅 白 昀 王海燕 姜 平 邵国青 江苏省农业科学院兽医研究所 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室 国家兽用生物制品工程技术研究中心 南京 南京农业大学动物医学院 南京 摘 要 > 蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白 与其他支原体无交叉反应 常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白 本研究通过基因合成获得 基因中含有 个稀有密码子的前

More information

未命名-1

未命名-1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 ss a c y e vg 13 14 15 16 17 18 19 H 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 发现生命的螺旋 克里克在提出 中心法则 时曾指出 遗传信息是沿 D N A - R N A - 蛋白质的方向流动的 遗传信息不可能从 R N A 回到 D N

More information

秘密大乘佛法(下)

秘密大乘佛法(下) 印 度 佛 教 史 (25) 101 / 12 / 24 釋 清 德 秘 密 大 乘 佛 法 ( 下 ) 印 度 佛 教 思 想 史 第 十 章 第 三 節 金 剛 乘 與 天 行 一 秘 密 大 乘 稱 金 剛 乘 採 取 表 徵 主 義 1 三 四 五 方 佛 大 乘 佛 法 興 起, 傳 出 十 方 現 在 的 無 數 佛 名 現 在 有 佛 在 世, 可 以 滿 足 佛 涅 槃 後, 佛 弟

More information

國立臺東高級中學102學年度第一學期第二次期中考高一國文科試題

國立臺東高級中學102學年度第一學期第二次期中考高一國文科試題 國 立 臺 東 高 級 中 學 102 學 年 度 第 一 學 期 第 二 次 期 中 考 高 一 國 文 科 試 題 卷 畫 答 案 卡 : 是 否 ( 班 級 座 號 科 目 代 號 畫 錯 扣 5 分 ) 適 用 班 級 :1-1 1-9 1-11 考 試 範 圍 : 梧 桐 樹 醉 翁 亭 記 古 橋 之 戀 樂 府 詩 選 論 語 選 一 默 寫 : 依 原 文 將 正 確 文 句 填 入

More information

!! :!!??!!?!??!!!... :... :'?'?! :' ' :'?' :'?' :'!' : :? Page 2

!! :!!??!!?!??!!!... :... :'?'?! :' ' :'?' :'?' :'!' : :?  Page 2 ??????...! ; --- --- --- : ---!!! ---!! ---?????... http://www.phpget.cn Page 1 !! :!!??!!?!??!!!... :... :'?'?! :' ' :'?' :'?' :'!' : :? http://www.phpget.cn Page 2 ---...?!... :...! :...?!!...!!?!?!...?!

More information

<D2B0D0C4D3C5D1C52DC8CED6BEC7BF202D20BCC7CAC2B1BE>

<D2B0D0C4D3C5D1C52DC8CED6BEC7BF202D20BCC7CAC2B1BE> 任 志 强 回 忆 录 哪 怕 一 个 再 渺 小 的 个 人, 也 可 以 为 一 段 历 史, 甚 至 一 段 很 重 要 的 历 史 背 书! 一 个 变 革 的 时 代, 一 群 过 河 的 人, 一 种 野 心 优 雅 的 实 现! 一 部 民 营 企 业 和 创 业 人 生 的 心 灵 史 生 死 书! 平 时 就 很 敢 说 的 任 志 强, 这 次 说 的 更 赤 裸! 历 时 两

More information

Microsoft Word - Sunday20130908

Microsoft Word - Sunday20130908 權 能 的 來 源 安 童 牧 師 事 工 简 介 : -- 摘 自 安 童 牧 師 2013 年 9 月 8 日 主 日 信 息 神 呼 召 他, 最 初 在 街 上 接 納 養 育 得 痲 瘋 的 孩 子, 神 藉 着 一 个 单 纯 顺 服 的 仆 人 做 了 极 大 的 事 工, 現 在,8000 印 度 兒 童 參 與 他 的 服 事 目 前, 二 萬 三 千 多 兒 童 參 與 他 的

More information

兽医临床诊断学实验指导

兽医临床诊断学实验指导 兽 医 临 床 诊 断 学 实 验 指 导 河 北 科 技 师 范 学 院 动 物 科 学 系 临 床 兽 医 学 实 验 室 2009 年 2 月 目 录 学 生 实 验 守 则... 3 实 习 一 动 物 的 接 近 保 定 和 基 本 检 查 法...4 实 习 二 临 床 基 本 检 查 法 及 一 般 检 查...10 实 习 三 循 环 系 统 的 临 床 检 查...15 实 习 四

More information

討論

討論 MTT cell viability assay 1 [45] succinate dehydrogenase MTT Kreb s cycle 2 MTT 3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide DMSO 570 nm 15 3 MTT solution MTT Sigma Cat. M-2128 ( PBS ) 5

More information

食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷

食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷 第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 山药多糖研究进展 王洪新 王远辉 江南大学食品学院 江苏无锡 山药是药食兼用植物 山药多糖被认为是山药中重要的活性物质 综述山药多糖的提取分离工艺 纯化方法 化学结构分析和生理活性研究的现状 为未来研究山药多糖的新提取工艺 探讨构效关系 作用机制提供参考 山药多糖 研究进展 提取与分离 食 品 与 生 物 技 术 学 报 第 卷 第 期 王洪新等 山药多糖研究进展

More information

658 解放军医学院学报 Acad J Chin PLA Med Sch Jul 207,38(7) 体外研究表明, 通过干扰 RNA 技术敲低 MET, 可抑制 HCC 增殖 集落形成和迁移 [] 多种 HCC 细胞系动物皮下成瘤实验中,

658 解放军医学院学报 Acad J Chin PLA Med Sch Jul 207,38(7)   体外研究表明, 通过干扰 RNA 技术敲低 MET, 可抑制 HCC 增殖 集落形成和迁移 [] 多种 HCC 细胞系动物皮下成瘤实验中, 解放军医学院学报 Acad J Chin PLA Med Sch Jul 207,38(7) http://jyjxxyxb.paperopen.com 657 人肝细胞生长因子受体原核载体的构建表达及纯化 邱栾, 赵珂 2, 董小明 2, 高瑞 2, 张飞翔 2, 张欣悦, 詹轶群 2, 李长燕 2, 李建雄 解放军总医院海南分院放射治疗科, 海南三亚 57203 ; 2 军事医学科学院放射与辐射研究所,

More information

科展作品說明書--情定水果 香邀你我

科展作品說明書--情定水果 香邀你我 中 華 民 國 第 四 十 四 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 國 小 組 生 活 與 應 用 科 學 科 080802 臺 北 縣 三 重 市 興 穀 國 民 小 學 指 導 老 師 姓 名 黃 小 紋 黃 書 卿 作 者 姓 名 邵 雅 慈 蔡 旻 真 許 瀚 心 王 澤 雄 黃 一 崧 中 華 民 國 第 四 十 四 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明

More information

i 1 1 1 2 5 7 10 15 19 19 20 21 22 25 28 29 30 31 32 32

i 1 1 1 2 5 7 10 15 19 19 20 21 22 25 28 29 30 31 32 32 紀 念 藥 師 佛 聖 誕 美 之 食 素 金 剛 乘 弟 子 集 資 捐 印 二 冊 佛 曆 三 三 七 年 歲 次 庚 寅 八 月 廿 五 日 i 1 1 1 2 5 7 10 15 19 19 20 21 22 25 28 29 30 31 32 32 34 36 38 40 41 41 42 44 46 48 49 50 51 51 52 53 54 54 56 58 58 60 60 62

More information

标题

标题 1. 眼 底 炎 症 辨 证 论 治 规 律 的 探 讨 湖 南 中 医 学 院 附 二 院 眼 科 一 眼 底 病 变 的 三 个 显 著 特 点 深 精 杂 深 指 它 的 位 置 眼 底 病 变 往 往 外 观 端 好, 中 医 统 称 为 内 障, 从 内 而 蔽, 外 不 见 证 精 指 它 的 组 织 结 构 眼 底 构 造 最 精 细, 有 富 于 血 管 的 脉 络 膜, 有 感 光

More information

Microsoft Word - 附件.doc

Microsoft Word - 附件.doc 附 件 : 紫 光 古 汉 000590- 置 出 1.72 亿 元 应 收 帐 款 明 细 清 单 客 户 金 额 湖 南 清 华 紫 光 古 汉 药 业 有 限 公 司 16,099,600.00 湖 南 清 华 紫 光 古 汉 药 业 有 限 公 司 14,339,504.00 广 东 省 揭 东 县 新 特 药 公 司 4,610,491.11 衡 阳 市 康 馨 医 药 有 限 责 任 公

More information

第 一 部 分 投 标 邀 请 一. 项 目 名 称 : 北 京 大 学 附 属 中 学 副 食 品 商 店 协 议 供 货 商 招 标 项 目 二. 项 目 内 容 : 北 京 大 学 附 属 中 学 采 购 中 心 现 就 学 校 副 食 品 商 店 的 供 货 协 议 商 进 行 招 标, 中

第 一 部 分 投 标 邀 请 一. 项 目 名 称 : 北 京 大 学 附 属 中 学 副 食 品 商 店 协 议 供 货 商 招 标 项 目 二. 项 目 内 容 : 北 京 大 学 附 属 中 学 采 购 中 心 现 就 学 校 副 食 品 商 店 的 供 货 协 议 商 进 行 招 标, 中 北 京 大 学 附 属 中 学 副 食 品 商 店 协 议 供 货 商 招 标 项 目 招 标 文 件 招 标 人 : 北 京 大 学 附 属 中 学 二 〇 一 五 年 十 一 月 第 一 部 分 投 标 邀 请 一. 项 目 名 称 : 北 京 大 学 附 属 中 学 副 食 品 商 店 协 议 供 货 商 招 标 项 目 二. 项 目 内 容 : 北 京 大 学 附 属 中 学 采 购 中 心

More information

我 可 以 向 你 们 保 证 以 下 的 内 容 100% 真 实, 请 您 一 定 耐 心 看 完 从 医 15 年 来, 我 也 反 复 告 诉 病 人 这 些 事 实 但 是 没 有 人 愿 意 去 听, 更 没 有 人 愿 意 去 相 信 或 许, 我 们 的 同 胞 们 真 的 需 要

我 可 以 向 你 们 保 证 以 下 的 内 容 100% 真 实, 请 您 一 定 耐 心 看 完 从 医 15 年 来, 我 也 反 复 告 诉 病 人 这 些 事 实 但 是 没 有 人 愿 意 去 听, 更 没 有 人 愿 意 去 相 信 或 许, 我 们 的 同 胞 们 真 的 需 要 保 健 : 顶 尖 专 家 谈 癌 症 2014-03-22 权 健 3813 服 务 中 心 环 境 污 染 不 良 生 活 方 式 与 现 代 社 会 生 活 造 成 的 精 神 压 力 等 等 原 因, 使 得 我 国 癌 情 汹 涌, 人 们 也 日 益 变 得 谈 癌 色 变 最 新 数 据 显 示, 中 国 每 天 8550 人 成 为 癌 症 患 者 ; 中 国 癌 症 患 者 年 轻

More information

, 1944 ( ), 13,,,,, ;, 5, 18, 1985,,, 1989, 10,,, 19 11,, 1991,, 6, 1997 2, 6,, 8, ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 1 2,?, :,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, :,,,,, :,,,,,,,,, : ( ), :,,,,, ( ) ( ),,,,,, ( ) ( ) : ( ),,,,,,

More information

Microsoft Word - 愛吐沙的蛤蜊

Microsoft Word - 愛吐沙的蛤蜊 編 號 :A311 組 別 : 國 小 組 科 別 : 自 然 科 類 別 : 生 物 作 品 名 稱 : 愛 吐 沙 的 蛤 蠣 作 者 : 黃 柏 慎 黃 映 慈 易 秋 蓉 指 導 老 師 : 賴 敏 婉 李 愛 雯 作 者 學 校 : 桃 園 縣 平 鎮 市 忠 貞 國 民 小 學 桃 園 縣 平 鎮 市 第 46 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 自 然

More information

antibody services0.ai

antibody services0.ai 生物研究试剂服务 CRO 抗体 业 我们承诺 : 对于任何宿主 由金斯瑞设计 合成并偶联多肽抗原的多克隆抗体服务,ELISA 效价达到 1:20,000 以上 对于任何宿主 任何蛋白抗原 (3 mg 以上, 纯度 > 85%,90% 更佳 ) 的多克隆抗体服务, 保证 Western blot 检测结果呈阳性且 ELISA 效价达到 1:20,000 以上 I. 畅销服务 SC1031: 抗原亲和纯化多克隆抗体制备服务

More information

上海浦~1

上海浦~1 上 海 浦 发 银 行 参 与 高 等 职 业 教 育 人 才 培 养 年 度 报 告 ( ) 一 校 企 合 作 概 况 ( 一 ) 企 业 简 介 上 海 浦 东 发 展 银 行 股 份 有 限 公 司 ( 以 下 简 称 : 浦 发 银 行 ) 是 1992 年 8 月 28 日 经 中 国 人 民 银 行 批 准 设 立 1993 年 1 月 9 日 开 业 1999 年 在 上 海 证 券

More information

标题

标题 第 35 卷第 期西南大学学报 ( 自然科学版 ) 3 年 月 Vol.35 No. JouralofSouthwestUiversity (NaturalScieceEditio) Feb. 3 文章编号 :673 9868(3) 69 4 一类积分型 Meyer-KiḡZeler-Bzier 算子的点态逼近 赵晓娣, 孙渭滨 宁夏大学数学计算机学院, 银川 75 摘要 : 应用一阶 DitziaṉTotik

More information