中国药师 年第 卷第 期 C P m V N 到时间 光强度 波长的三维谱图 目前关于杭白菊 木犀草素 奎尼酸 批号 不同部位三种以上多活性成分同时作为质量控制指 萄糖苷 批号 芹菜素 标的文献研究较少为体现中药多成分 多靶点的作 萄糖 苷 批 号 木 犀 草 素 批 号 用特点本试验首次建立了 H

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1 www HPLC DAD法同时测定杭白菊不同部位七种活性成分的含量 江珊珊 傅志红 唐密机 李彬 舟山医院中医骨伤院区药剂科 浙江舟山 舟山市食品药品检验检 测研究院 摘 要 目的建立 HPLC DAD法同时测定杭白菊不同部位 中绿原酸 芹菜素 木犀草素 金合欢素七种活性成分的含量 方法采用 D m C 素 mm mm μm 色谱柱流动相为乙腈 A 磷酸水溶液 B 梯度洗脱流速 m m 检测波长 m柱温 结果绿原酸 素 芹菜素 木犀草素 金 合欢素的质量浓度分别在 μ μ μ μ μ μ 和 μ 内与峰面积呈良好的线性关系 绿原酸 素 芹菜素 萄糖 苷 木 犀 草 素 金 合 欢 素 的 平 均 加 样 回 收 率 分 别 为 和 RS D分别为 和 结论该方法简便 准确 重复性好 可用于杭白菊药材不同部位多成分的质量控制研究 关键词 杭白菊 不同部位 绿原酸 蒙花苷 含量测定 中图分类号R 文献标识码A 文章编号 X S m D m S A C D P D M m Rm T HPLC DAD J S FZ T M j LB U D m Z P H Z j Z C Z I F D C ABSTRACT Oj T HPLC DADm m m D m m R m T M T m w m D m C m mm mm μm w m w w m T w w m m m w m R m C D O D β β w w μ μ μ μ μ μ μ T w RS Dw C T m m m D m m R m T KEYWORDS D m m R m T D C L C m 菊花为菊科植物菊 C mm m m 成分主要为木犀草素等黄酮类及绿原酸等有机酚酸 R m 的干燥头状具有散风清热平肝明 类成分 中药质量评价指标的选择应与其药效活性 目清热解毒之功效用于风热感冒 头痛眩晕 目赤 直接相关 中国药典 年版将绿原酸 按产地和加工 奎尼酸及木犀草苷三种成分作为菊花药材 方法的不同菊花可分为杭菊 杭白菊 杭黄菊 亳 质量控制指标成分 目前关于杭白菊质量控制的研 肿痛 眼目昏花 疮痈肿毒等证 杭白菊主产 究多集中在绿原酸和黄酮类成分 李丹霞等 于浙江为道地药材 浙八味 之一也为卫生部新 在前人研究基础上建立了 HPLC法测定杭白菊不同 批的药食两用资源 部位绿原酸 奎尼酸及木犀草苷三 菊 滁菊 贡菊 怀菊 川菊 资菊等 现代研究发现杭白菊主要含有黄酮类 有机酸 类 挥发油 维生素及微量元素等化学成分具有杀 菌 消炎 降压 抗心律失常等药理活性 通讯作者傅志红 其活性 T E m m 种成分的含量 DAD即为二极管阵列检测器 其可构成多通道并行工作通过 分光技术使所有波长的光在接收器上被检从而得

2 中国药师 年第 卷第 期 C P m V N 到时间 光强度 波长的三维谱图 目前关于杭白菊 木犀草素 奎尼酸 批号 不同部位三种以上多活性成分同时作为质量控制指 萄糖苷 批号 芹菜素 标的文献研究较少为体现中药多成分 多靶点的作 萄糖 苷 批 号 木 犀 草 素 批 号 用特点本试验首次建立了 HPLC DAD法同时测定 金 合 欢 素 对 照 品 批 号 批杭白菊药材 不同部位中绿原酸 购自中国食品药品检定研究院 甲醇 分析 素 纯天津康科德科技有限公司 磷酸 分析纯天津 木犀草素 金合 萄糖苷 芹菜素 市化学试剂三厂 乙腈 色谱纯天津康科德科技 欢素七种活性成分含量的方法为进一步完善杭白 有限公司 水为娃哈哈纯净水 菊药材的质量控制标准提供依据 种成分的化学 方法与结果 色谱条件与系统适应性试验 结构式见图 仪器与材料 A 高效液相色谱仪 UV LP二极 N型 管阵列检测器赛莫飞世尔科技公司 AB 万分之一天平 METTLER TOLEDO公司 AS 色 谱 柱D m C mm mm 磷酸水溶液 B 梯 μm 流动相为乙腈 A m 柱温 度洗脱程序见表 流速m 检测波长 m 进样量 μ 表 梯度洗脱程序 型超声仪 奥特宝恩斯仪器有限公司 XMTB型水 浴锅 巩义市予华仪器有限责任公司 二两装 高速万能粉碎机 瑞安市永历制药机械有限公司 时间 m 乙腈 磷酸水溶液 石门 灵安三个各种植基地经天津药物研究 院张 铁 军 研 究 员 鉴 定 为 菊 科 植 物 D 杭白菊药材于 年 月采于浙江省桐乡市 m m R m T 的地上部分将药材的 在上述色谱条件下绿原酸 奎 及花絮不同部位分开置鼓风干燥箱烘干粉 尼酸 蒙花苷 木犀草素 芹菜素 碎过一号筛 蒙花苷对照品为自制质量分数大于 木犀草素及金合欢素色谱峰与 其相邻色谱峰的分离度均大于 理论塔板数按 绿原酸 批号 图 绿原酸 奎尼酸 蒙花苷 木犀草素 木犀草素 金合欢素 的化学结构式 芹菜素

3 www 奎尼酸计不低于 对照品和样 线性关系的考察 品的典型色谱图见图 DAD光谱显示样品谱图中 取 项下配置的混合对照品溶液用甲醇 的绿原酸 逐级稀释成 倍浓度的混合对照 萄糖 苷 芹 菜 素 萄 糖 苷 素 木犀草素及金合欢素色谱峰均为单一组分峰 以对照品质量 Xμ 为横 品溶液分别进样 μ 坐标以峰面积 Y 为纵坐标绘制标准曲线得到 回归方程和相关系数见表 表 种活性成分的线型方程 相关系数和 线性范围 化合物 线性方程 Y X 线性范围 μ Y X 奎尼酸 蒙花苷 绿原酸 Y X 木犀草素 Y X 芹菜素 Y X 木犀草素 Y X 金合欢素 Y X 精密度试验 A对照品 B供试品 绿原酸 奎尼酸 蒙花苷 木犀草素 芹菜素 木犀草素 金合欢素 图 混合对照溶液和批号 部位 供试品溶液 HPLC色谱图 精密吸取混合对照品溶液 μ于 项下 色谱条件进行测定连续进样 次记录峰面积计 算 种被测成分峰面积的 RSD结果绿原酸 素 萄 糖苷 芹菜素 木犀草素及金合 对照品溶液的制备 分别精密称取绿原酸 m 欢素 的 RSD 分 别 为 奎尼 酸 m 蒙 花 苷 m 木 犀 草 素 和 结果表明仪器精密 萄 糖 苷 m 芹 菜 素 度良好 m 木犀草素 m 和金合欢素 m 对照 重复性试验 品分别置 m量瓶中用甲醇溶解并定容即得绿 原酸 m m 奎尼酸 m m 蒙花苷 m m 木犀草素 m m 芹菜素 m m 木犀草素 m及金合 萄糖苷 取同一批号样品 批号 按 项下方法 平行制备 份供试溶液在 项下色谱条件下 进样分析 以标准曲线法计算绿原酸 二咖 啡酰奎尼酸 蒙花苷 木犀草素 欢素 m m 的对照品储备液 分别精密量 芹菜素 木犀草素及金合欢素平 均含 量 分 别 为 取绿原酸 m 奎尼酸 m m RSD 分 别 为 蒙 花 苷 m 木 犀 草 素 和 结果表明方 m 芹菜素 m 木犀草 法重复性良好 素 m 及金合欢素 m 的对照品储备液置 稳定性试验 m量瓶中用甲醇定容至刻度得到混合对照品溶 取同一供试溶液 批号 室温放置分别于 液 在 项下色谱条件进样分析 供试品溶液的制备 计算绿原酸 精密称定各批号杭白菊药材 花絮不同部 素 芹菜素 木 位粉末 置 m锥形瓶中精密加入体积分 犀草素及金合欢素色谱峰面积的 RS D分别为 数为 的甲醇溶液 m 称定质量超声 和 提取 放置至室温再称定质量用 WH 内稳定 结果表明 供试溶液室温下放置 体积分数为 的甲醇补足损失的质量摇匀用 加样回收率试验 μm微孔滤膜滤过取续滤液作为供试品溶液 取已知含量的批号 杭白菊的部位样品

4 中国药师 年第 卷第 期 C P m V N 绿原酸 素 萄糖 苷 芹 菜 素 萄 糖 苷 芹菜素 木犀草 素 金 合 欢 素 的 平 均 加 样 回 收 率 分 别 为 木犀草 素 及 金 合 欢 素 的 含 量 依 次 为 和 m 粉末 份每 RS D 分 别 为 份 精密称定置 m锥形瓶中加入绿原 和 酸 素 供试品的含量测定 芹菜素 木犀草 项制成加 素及金合欢素对照品溶液适量按 密称定 按 项 下 方 法 制 备 供 试 品 溶 液在 样供试品溶液依 项色谱条件进行含量测定 项下色谱条件下进样分析记录色谱峰面积 计算各对照品的平均加样回收率及 RSD结果绿原 按标准曲线法计算供试品中 种成分的含量结果 酸 素 见表 取不同批号的杭白菊药材各部位粉末 精 表 杭白菊中 种活性成分的含量测定结果 m 批号 样品 产地 绿原酸 二咖啡 酰奎尼酸 蒙花苷 木犀草素 萄苷 芹菜素 木犀 草素 金合 欢素 石门 石门 灵安 讨论 检测波长的选择 根据绿原酸 奎尼酸 蒙花苷 流动相系统的选择 在流动相系统的考察中先后选择了 种流动 相系统乙腈 醋酸水溶液乙腈 磷酸水 木犀草素 芹菜素 萄 溶液甲醇 醋酸水溶液甲醇 磷酸水溶 糖苷 木犀草素及金合欢素 种成分的紫外光谱特 液结果 表 明使 用 乙 腈 醋 酸 水 溶 液 甲 醇 征以及杭白菊供试品 DAD全波长三维图谱认为 醋酸水及甲醇 磷酸水溶液溶液系统时 m下得到的色谱图基线较平稳且可兼顾 种 种成分难以达到基线分离且绿原酸 二咖 成分的检测灵敏度 因此选 m作为以上 种 磷酸水 啡酰奎尼酸的峰形不佳而使用乙腈 成分同时测定的检测波长 溶液时对照品和供试品中 种成分均达到了基线 供试品制备方法的选择 分离且峰形较好 通过流动相比例的摸索最终确 在供试品制备过程中分别考察了水 甲醇及体 积分数为 及 的甲醇溶液的提取效 甲醇对 种成分的提取 果结果表明体积分数 效果最好 对超声时间进行考察分别考察了 m 结果表明超声 m 即可提取完全因 此选择超声提取时间为 m 磷酸水溶液梯度洗脱种成分均能 定乙腈 达到较好的检测效果 结果分析 结果表明在以上 种活性成分中绿原酸及 奎尼酸的平均含量较其他成分要 高其次为蒙花苷等黄酮苷类成分而木犀草素等游

5 www 离黄酮类成分含量较低 杭白菊各种植基地及同一 材的质量控制规范化 标准化提供了理论依据 种植基地间活性成分含量差异较大其中和石 参 门基地的杭白菊药材中活性成分含量较灵安基地要 考 文 献 高 石门产的杭白菊药材中 奎尼酸 中国药典 S 年版一部 及木犀草素 的含量较其他基地 刘德军菊花 M 北京中国中医药出版社 高 比较不同部位的活性成分含量可知中活性 成分含量均高于中含量最低其中中绿原 张璐季巧遇周冬生等杭白菊的现代研究进展 江西中 医药 张洁枝张琳付红伟等杭白菊中两种黄酮 HPLC定量 奎尼酸的含量显著高于 酸及 分析及其特征指纹图谱研究 中国药师 提示也可能具有较高的药用价值值得进一步开 张因皎赵钰岚邹文韬等HPLC法同时测定不同产地杭白 发利用 药物分析杂 菊中 种抑制血管紧张素转化酶活性的含量 不同批药材因采收基地 采收时间及品种不同 等因素而导致有效成分含量差异较大故须建立规 志 邱娇英罗国海张慧芳不同加工法的杭白菊芦丁和绿原酸的 范的药材质量标准 杭白菊作为常用中药材及保健 食材而应用广泛本试验首次建立了 HPLC DAD法 含量比较研究 中医药导报 李丹霞王康才成明超等杭白菊 个品种主要化学成分分 中药材 布规律比较研究 同时测定杭白菊药材不同部位中绿原酸 二 收稿 修回 咖啡酰奎尼酸等 种活性成分的含量为杭白菊药 櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊 上接第 页 果综合评估药动学参数以拟定最佳化疗方法是提 高药物疗效和控制不良反应发生的有效途径是真 正实现个体化治疗的必经之路 参 考 文 献 C L GL C m P B V E T CYPB m m w m m NSCLC JC R C O D SW CZ W E m w 杨宝峰苏定冯周宏灏药理学 M 第 版北京人民卫生出 版社 于跃王军飞王长云等抗多药耐药紫杉烷类抗肿瘤药物研究 中国现代应用药学 进展 A m EMEL M S AT ZA P m w m m CYPE CYPA m m C m B I MSJ F I I m CYPA G é HK CYPC H C m w JP m S A á R ML MYS á B L W m CYPA m C C R SH mad E m J MK m w m m m m m C P m Y m m NK K S m O m I m I N w w m D X mp A M m KDM B RFH J J T m m m CYPA m m m m m m m JP mp m 基因多态性对抗肿瘤药物影响 宋俞方罗韩江敏等CYP 的研究进展 药物流行病学杂志 李东锋高惠静张华等紫杉醇血药浓度的监测及其群体药动 学的初步研究 华西药学杂志 钟皎赵文艳王丽萍高效液相色谱法测定非小细胞肺癌患者 血浆中紫杉醇浓度 中国医院药学杂志 陈瑶赵银刘青青等HPLC法测定人血浆黄总多西紫杉醇浓 度 中国药房 赵文艳钟皎高效液相色谱法测定人血浆中多西紫杉醇浓度 中国医院药学杂志 赵 惠紫 杉 醇 为 主 的 化 疗 药 学 监 护 河 北 医 药 闻晶马阳妹任天舒等乳腺癌蒽环类耐药伴多发转移患者的 中国药师 药学监护 收稿 修回

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