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1 第 卷第 期 年 月 西安交通大学学报 医学版!"#$## & $& 临床研究 宫颈上皮内瘤变及微浸润癌患者人乳头瘤病毒基因亚型分析 张忠明 崔绪琴 李 娜 张冠军 赵延红 刘润润 谢 琪 高宝霞 西安交通大学第一附属医院 妇产科 病理科 网络信息部 陕西西安 摘要 目的 明确陕西省宫颈上皮内瘤变 及微浸润癌 &%% 病例宫颈人乳头瘤病毒 感染的基因亚型分布特征 方法 选取 年 月至 年 月在西安交通大学第一附属医院病理确诊的 例陕西地区宫颈病变患者 其中 原位癌 %&&%% 分别为 例 采用凯普医用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术检测宫颈样本中高危型 () 种和低危型 *() 种 共 种 基因亚型 分析 基因分型检测结果 结果 总体 感染率为 +() 感染率,+ 占 阳性标本的,+ 总体 感染率和 () 感染率在 %&&%% 中分别为,+ 和 +,+ 和,,++ 和 +,+ 和,++ 和 + 各组间差异除 - 即 和 %& 与 &%% 组外均有统计学意义, 感染率最高者为 + 其他常见亚型为,++ ++,,+*() 感染率,+*() 感染率在前述各组中分别为 +,++++ 常见 *() 为,+,++ 高危 低危 混合感染率 + 组 基因亚型分布特征明显不同于其他病变组 结论 陕西地区宫颈病变中 感染水平符合疾病本质规律且随着病变加重显著增加 其基因型分布基本符合亚洲人群分布规律并具一定区域性差异 基因亚型分布特征在不同病变中的差异反映了不同亚型在宫颈病变发生中作用的不同 本结果对理解宫颈病变的发生机制 宫颈癌防治和疫苗研制具有指导意义 关键词 人乳头瘤病毒亚型 分布特征 宫颈上皮内瘤变 宫颈癌中图分类号 ( 文献标志码 /!"#$% &&%"&&& 0/'10")" %&#)2" *&'3 0/'1 1#3")#" 0/4 53")" *& (#")6#" &7 8 1/493)3 :$36$";1"$!3"4 $6!:$36$";3 :$36$";'$6&";63"$6/;3$3; 3"3""<$63"%"3 ''%"()*)*## +,'"+,$")###!,++$-#&" #" *# ""###"+,'+,'+,'+,$ "!,++#&*""/" (*0#("0#(&%*-)"( +1(" ("# &%#*&&,& *)"%1 %*###",&%)&#%"# 1% *&, "&,& ",,&& "&&, "&, & "&+,'+,'+,'+,$"!,++# *#*# 收稿日期 修回日期 基金项目 国家自然科学基金资助项目 '&, 陕西省自然基金资助项目 '&!, $"( ''$##/"+ '&,"'$##/"$- #'&!, 通讯作者 张忠明 &)-)&#) 优先出版 ***&#&#)"&&1&,&,&&),!" #$#!"

2 , 西安交通大学学报 医学版 第 卷 "),&=&&-#(*+,' - +,'"+,$"!,++&#*)%&*"( %,&%& % &% &"%, &,&&, *)** % 1%&1%#*&,&&& "& ( # &,*)%, &*"( % &," % && )-"#(1%"1% *&&#%*" (*+,'"& 1%##*#" ""(%$-)#)* *)"#&""(%###""# "#"% ##&" ")"# """####*##")& () * )) "(## +,'## ## 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤 中国每年有近 万宫颈癌新发病例 并出现年轻化和发病增加趋 势 宫颈癌是由宫颈上皮的不典型增生 宫颈上皮内瘤变 即 包括 及原位癌 %& 经微浸润癌!6"<3<$!3"!$6&%% 最终发展至临床浸润癌的连续病理过程 具有嗜上皮特性的人乳头瘤病毒 #3"33<6# 感 染是宫颈癌前病变和宫颈癌发生的核心病因 早期发现和处理宫颈癌前和早期病变是消除临床宫颈 癌的关键 在已发现的 余种 基因亚型中 余种属于宫颈癌密切相关亚型 即高危型 () 其致癌能力和人群分布存在显著的病毒谱特征和地域差异 进一步确切分析区域病 变人群中 基因亚型的分布特征 对于理解宫颈病变发生机制和制定地域宫颈癌防治策略至关重 ) 要 本研究以 年间 个大样本的 分型检测结果为对象 分析陕西省区域女性宫颈癌前和早期病变人群中 感染基因亚型的分布特征 + 资料与方法 ++ 研究对象 年 月至 年 月在西安交通大学第一附属医院行高频电刀宫颈锥切术 *77 的患者 例 %& &%% 分别为 例 年龄 岁 平均年龄,>,, 岁 各组详细年龄构成见表 表 + 各宫颈病变组诊断年龄统计结果?3?$3$;$3$""$!$6<!3$"6# 年龄 岁 %& &%% 总计 诊断年龄范围 平均年龄 > 标准差 > >,,>, > >,,>,, 研究对象选取自 例 *77 术病例 术前 月以内有宫颈刷取样本 基因分型检测结果的 例患者 排除现时妊娠 内有阴道用药或冲洗史, 内有性行为及月经期患者 受检者均来自陕西地区 病理诊断以本院高年资病理专家诊断为准 采用 9$$3 标准 同一病例术前与术后病理诊断不一致时 以病变级别较重结果作为最终诊断 +,- 标本采集和 / 分型检测方法 :'/ 提取 %( 扩增 导流杂交和结果判定等分型检测参照文献 和检测操作说明进行 采用凯普医用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术检测 种 亚型 包括 种 (),,, 和 种低危亚型 *(),%, 少部分病例检测结果来自前期其他可信医疗机构 其检测方法和上述方法相同 其在检测上述 种 亚型的同时 还检测另外 种 (), 和 种低危 *() 共计, 种亚型 +,0 统计学处理 应用, 统计学软件 差异比较采用 检验 以 为差异有统计学意义 - 结 果 -,+/ 总体感染状况 在 例受检病例中 例 检测阳性 总阳性率为 + 其中 () 感染率为,+*()!" #$#!"

3 期 张忠明 崔绪琴 李 娜 等 宫颈上皮内瘤变及微浸润癌患者人乳头瘤病毒基因亚型分析 感染率为,+ 高危和低危混合感染率为 +, - 及 %& 与 &%% 组总体 感染率差异无统计学意义 表 -/ 亚型在各类宫颈病变组的检测阳性率及分布状况, 而 组间差异有统计学意义, 总体 组与 &%% 组差异无统计学意义, 表?3?$<$636$<3$"!$;$"$3"$!$6<!3$"6# + 感染类型 %& &%% 总计 -,,, ()-,,,,, *()-,, %)-, - 总体 -()- 高危型 -*()- 低危 -%)- 高危和低危 复合 - -,-1/ 各亚型感染的检测结果,+ 的病例 例 () 检测结果为阳性 占 阳性病例的,+ - 与 &%% 组 () 总体阳性率比较 差异无统计学意义 其余各 组间差异有统计学意义, 总体 组与 &%% 组差异无统计学意义 表 在 () 各亚型中 的阳性率, + 最高 占 阳性标本的,+, 和高危阳性标本的 +, 在 - 和 &%% 组分别为 + ++, 和 + - 与 &%% 组 阳性率差异无统计学意义 各余各 组间差异有统计学意义 总体 组与 &%% 组差异也有统计学意义, 表 表 01/ 在各类宫颈病变组分布状况的检测结果 阳性率第 位的 () 亚型为, + 占 阳性标本的,+ 和高危阳性标本的,+ 各 组间阳性率比较差异无统计学意义 处于第 位的 () 亚型为 + 占 阳性标本的 + 和高危阳性标本的 + 和 组阳性率高于 - 和 &%% 组 差异有统计学意义 其余 种 () 亚型阳性率依次为, 阳性率分别为 ++,+ 表 以上 种 () 亚型,, 总体感染 例,+ 占全部 阳性标本的 + 和 () 阳性标本的 + 最少见 () 亚型为,+ 和 +?3?$$"$;)66#"3"$!$6<!3$"6# + 亚型 %& &%% 合计,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, 合计,,,,,!" #$#!"

4 西安交通大学学报 医学版 第 卷 -,01/ 各亚型感染的检测结果,+ 例 *() 检测结果为阳性 占 阳性病例的 + 与 - 和 与 -, *() 总体阳性率比较 差异有统计学意义 总体 组与 &%% 组差异无统计学意义 表 在 *() 亚型中, 阳性率 + 最高 占 阳性标本的 + 表 各类宫颈病变组 1/ 的阳性感染率和分布状况 和 *() 阳性标本的,+, 阳性率随病变加重而降低 组与其他各组比较 差异有统计学意义, 其他常见 *() 亚型依次为,+ 和 + 表, 这 种常见 *() 亚型感染总例数为 例 + 占全部 阳性标本的 + 和 *() 阳性标本的,+ 少见 *() 亚型为 各型的阳性率均为 + 表?3?$$"$;)66#"3"$!$6<!3$"6# + *() 亚型 %& &%% 合计,,,,,,, 总计,, -,/ 混合感染和感染种类例数状况 +, 例 患者同时检测到 () 和 *() 阳性 即混合型感染 分别占 阳性病例 () 阳性病例 *() 阳性病例的 + +,+ 表 () 和 *() 间差异有统计学意义 在 例 阳性病例中 例,+ 年龄,>, 岁 为单种 感染 例 + 年龄 > 表 各类宫颈病变组的 1/ 感染种类的检测结果 岁 为两种及以上 感染 其中有 例 年龄 > 岁 同时检测到 种 感染 () 和 *() 间单种感染差异无统计学意义 表 另外 在全部 例 *() 阳性病例中 单一种类 *() 为, 例 占 *() 阳性病例的 +() 和 *() 间多重感染差异无统计学意义?3?$$"$"# $6;)6"$!$6<!3$"3$" + 病变类型 亚型感染种类数目 种 合计,,, %&, &%%, 合计 高危占比 例数 + 合计 阳性占比 例数 +,,,,,, 高危占比 该种类数阳性的病例数占高危 阳性例数的百分比 阳性占比 该种类数阳性病例数占总体 阳性例数的百分比!" #$#!"

5 期 张忠明 崔绪琴 李 娜 等 宫颈上皮内瘤变及微浸润癌患者人乳头瘤病毒基因亚型分析 0 讨 论本研究通过一个区域医疗中心 年间的大样本病例分析 首先明确了宫颈病变总体 ()*() 感染率分别为 +,+,+ 表 进一步分析显示 - &%% 组的总体 感染率分别为,+,++ +() 感染率分别为 +,,+ ++ 而 *() 感染率分别为 +,+++ 表 可见随病变加重 主要是 () 感染率显著增加 这提示 () 感染是宫颈病变逐级加重的主要病因因素 进一步分层分析显示 在所有 感染中 阳性率最高 + 且占高危阳性标本的 + 表 阳性率在 - &%% 组分别为 ++++ 呈现更突出的逐级加重特征 种最常见高危亚型,, 总体感染率,+ 占全部 阳性标本的 + 和 () 阳性标本的 + 表 这表明在目前发现的 余种高危 亚型中 病因来源集中于上述 种最常见的高危亚型 其中 比例最大 与以往相关领域其他作者的研究结果比较 本研究 () 阳性率明显较高 而基因 ), 亚型谱基本一致 本研究致病性 亚型的分布谱中 种最常见高危亚型的阳性频度按降序依次为,, 表 不同于作者之前报道的 例同一地域基本人群 主要为非患病人群,, 的顺序 这说明各个 () 基因型致病力的差异 进一步分析还显示 在高危型感染中 单种类型 感染率在各类宫颈病变中总体阳性率为 + 组间差异无统计学意义 表 表明病变的性质 严重程度 主要只与有无高危型 亚型感染密切相关 而与感染亚型种类数的多少无关 大量基础研究表明 宫颈癌和癌前病变的发生基于 与宿主 :'/ 的整合导致致癌基因 7 7 异 常表达引起宿主细胞的非限制增生 这提示 基于 亚型致病力的差异 对于具体病例宫颈病变的发生应该是由单个致瘤力较强的 亚型负责 而与其他复合感染亚型关系不大 此外 本研究显示的 种最常见低危亚型的阳性频度按降序依次为, 表 不同于作者近前报道的基本人 群, 的顺序 这种差异同样反映了各个 *() 基因型致病力 主要是引起低级别宫颈病变 的差异 即与通常引起下生殖道疣状增生的 相比, 在宫颈上皮内瘤变 特别是 中作用更大 本研究显示 的 基因亚型分布 包括高危亚型感染率 低危亚型感染率 亚型分布谱等 明显不同于其他各组宫颈病变 主要表现为相对较低的 () 和较高的 *() 感染率以及明显不同的 分布谱 表 表 说明 从病因到病变性质均明显有别于其他高级别宫颈病变 即在 病变形成中虽然仍以高危 为主要病因 但参与度明显小于其在高级别宫颈病变中的作用 而且致瘤力较弱的 () 致病率较高 同时 *() 也发挥了一定作用 提示在临床上应区别对待 鉴于宫颈 %& 在病理学上异型细胞全层累及的特点和临床认知上的争议 本研究将 %& 作为一组独立病变进行分析 结果显示 基因亚型分布基本符合 的规律 表 表 提示新近国际临床指南对该种病变的临床病理定位更新 具有很好 ) 的合理性 &%% 属于最早期别的宫颈癌 目前缺乏相关 感染的单独研究报道 本研究显示 &%% 的总体 ()*() 感染率分别为 +++ 与 - 组者基本一致 表 表 唯其 种最常见高危亚型的阳性频度按降序依次为,, 其中, 位次较其他癌前病变组前移 表 此外 &%% 组 阳性病例具有 + 的 () 亚型占比 表 表 明显有别于癌前病变各组 更明确了高危 亚型是 &%% 的重要病因 且其病变形成与低危复合感染基本无关 同时 &%% 组的上述现象与其他作者揭示的典型的临床浸润癌病例分析结果也具有一定差异 表现为与后者比较相对稍低的 () 感染率和病毒谱的细微差异 提示了 &%% 这一介于 和典型临床宫颈,) 癌之间的宫颈病变发病和临床行为的特殊性 大量研究显示 感染的亚型分布具有明显地域性差异 和, 是熟知和公认的致癌型高危 亚型 其基因组件 7 7 是明确定义 ) 的致癌基因且被深入研究 但病毒流行病学研究显示 除欧美地区宫颈癌 及癌前病变 以, 亚型为主导基因亚型外 世界其他地区的 ),) 感染谱却明显不同 本结果显示 本地区宫颈病变中常见高危亚型的阳性频度按降序依次为,,, 等 表 其中除 仍居绝对优势 阳性率 + 高危占比 + 外, 阳性率 + 高危占比!" #$#!"

6 西安交通大学学报 医学版 第 卷,+ 和 阳性率 + 高危占比 + 有突出优势地位 而欧美地区的次要优势亚型的, 仅居本研究优势亚型的第 位 阳性率,+ 高危占比 + 这与欧美地区的 感染谱显著不同 但与亚洲大区域内的综合基本 ),) 特征相似 与国内区域比较 本结果更接近于周边地区山西 新疆 河南 四川等省份和浙江省的结果 但和北京 湖南 云南 港澳台地区普遍表现为超过 的 和, 基因型的高频度 ), 阳性率有明显差异 这尚需更进一步从更大区域和更深入的人群背景因素分析寻找线索和答案 基于大量病毒流行病学的多年调查结果 宫颈癌这一性传播性肿瘤预防的抗, 型双价疫苗已经在西方不少国家得以试用并显示出令人鼓舞的效 果 中国普适性 疫苗探索和定型也成为业界 关注的热点 由于 亚型分布的明显地域差异 这一双价疫苗对于中国人群显然防癌覆盖率十分有限 依据本研究的数据 双价疫苗对陕西地区人群而言仅有 + 的预防覆盖效率 而更适合陕西地区人群宫颈癌预防的推荐疫苗应该是至少涵盖最常见 种高危亚型,, 的多价疫苗 其预防效率将涵盖 + 以上病例人群 综上 本研究通过一个宫颈病变的临床大样本精确 分型分析 首次明确了陕西地区宫颈癌前病变和微浸润癌中 的分布特征 对于进一步了解宫颈病变发生机制 指导宫颈癌临床诊治和预防性 疫苗研制提供了重要依据 参考文献 +' 2'3 1455&+## +&+ +#+& $',51$$'413' 15,5!' 5& %)""######" ## )#&,& $'$$0 '!$/ 1$+6'!'' & "03")## "#" ####&,3 #0(,& +03&##4 '&$)) +### #"&0(3 #,,& 樊静 李娜 张忠明 等 & 陕西省宫颈人乳头瘤病毒感染亚型分布特征分析 & 中国妇幼健康研究,& 20 /5! 770,2&# ))"## +"(""&, +#,& '3 130,$!' 34&'*" #))#"" (#+&4!+,#5 &,3'00'$1,'&) ),%*)) )#####&,+# & '51$0' 01017!'011',1'5 % 017,'3 310&&% #" "(####") #-("" ) ',"&!"%,,& 03! ''$8!01 &# )))#*)* )### ")#*" )&$0,,& $$3!!,5 7& ("" ) ) %# *) )#" ( ))""## 1$&!"%,,& 2'3+17$31+!&3#"( "#)) &,#5& +'70 ++'!+&! #"())", ## *"*"&$ 0 &!170,2 1,1,$,' +&1"# ))% #) *) *%##"#"$' " ' -) $ &,#5,,& 92'3 28&)) ##"###+& #+#& 编辑 国 荣!" #$#!"

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