Microsoft Word

Size: px

Start display at page:

Download "Microsoft Word"

娴窕伏
5 years ago
Views:

1 2013 年第 58 卷第 27 期 :2803 ~ csb.scichina.com 中国科学杂志社 SCIENCE CHINA PRESS 上海地区 HPV 分型及高危型 HPV 负荷量与宫颈病变的关系舒慧敏 18, 陈华 1, 卫海滨 27, 卿志荣 3, 姚海宏 1, 王智丰 1, 熊苗 4, 王丽 5 6*, 杨宾烈 1 上海市浦东新区公利医院, 上海 ; 2 中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所, 上海 ; 3 上海孟德尔基因研究有限公司, 上海 ; 4 上海交通大学附属第六人民医院, 上海 ; 5 上海市第一人民医院, 上海 ; 6 上海市浦东新区人民医院, 上海 ; 7 上海市农业生物基因中心, 上海 ; 8 同济大学附属第一妇婴保健院, 上海同等贡献 * 联系人, yblfck@sina.com 收稿, 接受上海市浦东新区科委项目 (2007Y-02) 上海市浦东新区重点学科建设项目(Pwzxk ) 中国博士后科学基金面上项目( ) 和赛诺菲安万特 - 中国科学院上海生命科学研究院优秀青年人才奖励基金资助摘要目前发现已鉴定出的 100 多种 HPV 亚型在不同国家与地区的流行病学分布不同, 而 HPV 负荷量的高低与宫颈病变的严重程度存在相关性. 为了探讨上海地区 HPV 亚型的分布特征及高危型 HPV 负荷量与宫颈病变的关系, 收集了就诊于上海市浦东新区公利医院宫颈疾病门诊患者 515 例, 采用导流杂交基因芯片技术 (HybriMax) 对 HPV 进行基因诊断和分型 ; 并使用实时荧光定量 PCR 方法检测 HPV 负荷量, 统计分析负荷量与宫颈病变程度的相关性. 结果表明, 上海地区共检测出 18 种 HPV 亚型, 检出率大于 5% 的 HPV 亚型 (HPV-16, 58, 33, 52, 31, 18) 均属于高危型 ; 4 种高危型 HPV(16, 58, 33, 52) 与宫颈病变严重程度呈显著相关 ; Spearman 等级相关分析显示, HPV 负荷量与宫颈病变级别呈正相关 (r=0.318, P=0.000); 两种高危亚型 HPV-16 和 HPV-33 的负荷量为这种正相关性的主导因素. 本研究确定了上海地区 HPV 流行的主要亚型及 HPV 负荷量与宫颈病变程度的关系, 这为开发预防中国人群 ( 特别是上海地区 ) 常见 HPV 亚型的多价疫苗提供了有效证据, 为高 HPV 负荷量作为高级别宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌筛查的有意义指标提供了佐证. 关键词人乳头状瘤病毒 (HPV) 病毒负荷量宫颈上皮内瘤样病变 (CIN) 宫颈癌宫颈癌是危害妇女健康的主要恶性肿瘤之一, 全球每年约有 53 万的新发病例和 27 万的死亡病例, 其中 85% 发生在发展中国家, 尤其是近年来年轻妇女宫颈癌发病率有升高趋势, 据估计到 2020 年其发病速率将增至每年 66 万 [1,2]. 宫颈上皮内瘤样病变 (cervical intraepithelial neoplasia, CIN) 是宫颈癌的癌前病变, 而人乳头状瘤病毒 (human papillomavirus, HPV) 感染现已被认为是 CIN 和宫颈癌发生发展的关键因素 [3,4]. 依据 HPV 亚型与宫颈癌发生的危险性分为低危型 HPV 和高危型 HPV. WHO 于 1996 年将 HPV-16, 18, 31 和 33 认定为致瘤的高危亚型, 现在已经发现至少有 13 种 HPV 亚型可以导致宫颈癌, 其中引用格式 : 舒慧敏, 陈华, 卫海滨, 等. 上海地区 HPV 分型及高危型 HPV 负荷量与宫颈病变的关系. 科学通报, 2013, 58: Shu H M, Chen H, Wei H B, et al. Human papillomavirus genotyping and correlation of high-risk human papillomavirus viral load and cervical lesions in Shanghai (in Chinese). Chin Sci Bull (Chin Ver), 2013, 58: , doi: /

2 2013 年 9 月第 58 卷第 27 期 HPV16 为最常见的高危亚型, 它和 HPV18 的感染占所有宫颈癌患者的 71% [1,5]. 目前已鉴定出的 100 多种 HPV 亚型, 其分布地域性存在明显差异, 如 HPV45 型常见于非洲, HPV52 和 HPV58 则在亚洲妇女中检出率较高 [6,7]. 在我国也存在地区性差异, 而上海地区人口众多, 增长迅速, 其 HPV 感染的特异性尚未研究 ; 另一方面, 近年来 HPV-DNA 负荷量被作为高级别宫颈病变检测的标志物, 它与 CIN 及宫颈癌的关系引起了大量研究人员关注, 但仍未达成一致意见 [8~10]. 本文通过测定和分析不同级别宫颈病变中 HPV 亚型和 HPV-DNA 负荷量, 探讨上海地区 CIN 及宫颈癌患者感染的主要 HPV 亚型, 以及与 HPV 负荷量的关系, 为宫颈癌的防治提供理论依据. 1 材料与方法 (ⅰ) 病例资料. 选取 2007 年 1 月至 2008 年 12 月上海市浦东新区公利医院宫颈疾病门诊患者 252 例, 及 2011 年 1 月至 2011 年 12 月病例 263 例. 入选者年龄 19~64 岁, 平均岁, 在上海居住 2 年以上, 无宫颈手术史, 无肿瘤病史及全身免疫性疾病病史. 所有病例均经我院病理科确诊, 同时在治疗前进行 HPV 检测. 其中慢性宫颈炎患者 134 例 (HPV 阳性 91 例, 阴性 43 例 ); CIN I 患者 133 例 (HPV 阳性 98 例, 阴性 35 例 ); CIN II 患者 132 例 (HPV 阳性 117 例, 阴性 15 例 ); CIN III 患者 50 例 (HPV 阳性 43 例, 阴性 7 例 ); 宫颈癌患者 66 例 (HPV 阳性 62 例, 阴性 4 例 ). (ⅱ) 试剂及仪器. 基因组 DNA 提取试剂盒与 HPV 基因分型检测试剂盒购于凯普生物科技公司, 后者可检测 21 种 HPV 亚型, 包括 13 种高危亚型 (HPV-16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 和 68 型 ), 5 种低危亚型 (HPV-6, 11, 42, 43 和 44 型 ) 以及 3 种中国人群常见亚型 (HPV-53, 66 和 CP8304 型 ). HPV 实时荧光定量 PCR 试剂盒和 HHM-01A 型凯普 HybriMax 杂交仪来自凯普生物科技公司. 荧光定量 PCR 仪 LightCycler 2.0 购自 Roche 公司. (ⅲ) 研究方法. (1) 标本采集. 采用凯普生物科技公司提供的宫颈脱落细胞取样器, 将专用宫颈刷紧贴宫颈口黏膜, 顺时针或逆时针旋转 5 周, 取出后放入标有病人编号的取样管中 ( 预先加入凯普专用细胞保存液 ), 拧紧瓶盖, 放入 4 冰箱保存, 24 h 内进行检测, 剩余 DNA 样品存储于 20 备用, 样本避免反复冻融. (2) 标本 DNA 提取. 取保存有宫颈细胞的细胞保存液 0.5 ml, 以 r/min 离心 5 min, 弃上清液后, 利用基因组抽提试剂盒提取 DNA, 具体操作步骤依据凯普生物公司的试剂盒. (3) 标本 DNA 扩增. 将 PCR-Mix, Taq DNA 聚合酶和 DNA 模板按比例配成 25 L 扩增反应体系. PCR 反应条件为 min, 95 预变性 9 min; s s s 共 40 个循环, 72 延伸 5 min, 扩增结束后 4 保存. 扩增的设定条件依据凯普 HPV 基因分型检测试剂盒. (4) 导流杂交. 取 20 ul 的 PCR 产物, 于 95 加热 5 min 变性, 然后立即冰水浴 2 min. 在已变性 DNA 样品溶液中加入 0.5 ml 预热至 45 的杂交液, 混匀后加在导流 HybriMax 杂交仪的薄膜上, 合上盖板温育 10 min 后开泵进行导流杂交, 清洗除去未结合的 DNA, 整个杂交过程保持在 45 进行. (5) 酶标显色. 导流杂交仪温度调节至 25, 用 0.5 ml 封阻液封闭 5 min. 排出封阻液后关泵, 加入 0.5 ml 酶标液, 温育 3.5 min, 泵出所有溶液. 用冲洗缓冲液彻底冲洗膜, 除去未结合的酶标液, 后加入 0.5 ml NBT/BCIP 溶液, 于 36 保持至显色完成. (6) 结果分析. 在显色后 1 h 内肉眼观察检测结果. 阳性点呈现清晰可见的紫蓝色圆点, 根据膜条 HPV 分型分布图, 判断 HPV 亚型. (7) HPV-DNA 负荷量定量检测. 取 500 L 临床样本, g 离心 15 min, 弃上清液后加入 200 L PBS 缓冲液悬浮沉淀, 然后加入等体积裂解液煮沸 10 min, 将处理好的样本取 2 L 作为 PCR 扩增模板. 按照凯普 HPV 实时荧光定量 PCR 试剂盒说明书检测每份标本的 HPV-DNA 负荷量. 根据 Ct 值计算样本的起始拷贝数 ( 对照标准品 ). (8) 统计分析. 应用 2 检验和 Kruskal-Wallis H 检验方法对五组宫颈病变患者的 HPV 感染率及 HPV-DNA 负荷量进行统计分析. 使用 Spearman 等级相关分析, 检验 HPV 负荷量与宫颈病变严重程度的相关性. 统计分析结果中 P<0.05 说明差异具有统计学意义. 所有统计由 SPSS 13.0 统计分析软件完成. 2 结果 2.1 HPV 感染的基因型构成和分布 HPV 分型检测结果显示, 515 例患者标本中共检 2804

3 出 399 例 HPV 阳性感染者, 包括 295 例单一感染和 104 例多重感染者, 总感染率为 77.48% (399/515). 阳性感染者的 HPV 亚型构成表明, 共检出 541 株 HPV 亚型, 分别属于 18 种不同的 HPV 亚型, 包括 13 种高危型 HPV(16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 和 68), 2 种低危型 HPV(6 型和 11 型 ), 以及 3 种中国人常见 HPV 亚型 (53, 66 和 CP8304 型 ), 见表 1. 同时表 1 显示患者感染的 HPV 亚型集中分布于高危型 HPV, 主要以 HPV-16, 58, 33 为主, 检出率分别为 39.74%, 17.19%, 11.65%. 其他检出率大于 5% 的 HPV 亚型依次为 HPV-52, 31, 18. 这 6 种 HPV 亚型均属于高危型, 检出率总和高达 90%( 图 1), 提示高危型 HPV 感染在宫颈疾病发生发展中具有重要作用. 2.2 高危型 HPV 与宫颈病变级别的相关性对表 1 中 399 例 HPV 阳性感染者的 HPV 亚型与宫颈病变级别的相关性进行统计分析. 首先, 应用单向方差分析 Kruskal-Wallis H 方法, 比较不同级别宫颈病变患者中 HPV 亚型检出率的中位数差异, 2 值为 , P=0.000, 提示总体有差异, 即 HPV 亚型的总体分布与宫颈病变程度相关. 其次, 卡方统计分析 HPV 亚型在五组宫颈病变中的分布频数, 其中 4 种高危型 HPV(16, 58, 33, 52) 的检验 P 值小于 0.001, 差异有统计学意义. 统计分析结果表明高危型 HPV 在宫颈疾病病变中具有重要作用, 并提示在上海地区 4 种高危型 HPV(16, 58, 33, 52) 与宫颈病变严重程度呈显著相关. 2.3 HPV-DNA 负荷量与不同程度宫颈病变的相关性实时荧光定量 PCR 方法检测出 399 例 HPV 阳性感染者的 HPV-DNA 负荷量, 以 10 的倍数为分隔区间由低至高分为 6 组, 分组后的 HPV 负荷量在不同程度宫颈病变中的分布见表 2. 应用 Kruskal-Wallis H 检验宫颈病变不同级别分类中 HPV 负荷量分布的差异. 检验结果显示 2 值为 , P=0.000, 可认为 HPV 负荷量在 5 组宫颈病变患者中的总体分布有差异. 慢性宫颈炎至宫颈癌的 5 组宫颈病变的平均秩次 (Mean Rank) 分别为 , , , , 各组秩的均值存在显著差异, 表明 HPV 负荷量在不同级别分类中的总体分布有显著差异. 平均秩次依据宫颈病变程度的增加呈上升趋势, 宫颈癌 HPV 亚型慢性宫颈炎 (n=134) 表 1 不同级别宫颈病变中感染的 HPV 亚型分布 CIN I (n=133) CIN II (n=132) CIN III (n=50) a) 宫颈癌 (n=66) CIN 及宫颈癌 (n=381) 合计 (n=515) CP 合计 a) n 代表患者例数, 最后一行的数值表示检测到的 HPV 株数 2805

4 2013 年 9 月第 58 卷第 27 期图例宫颈脱落细胞样品中不同 HPV 亚型的感染率组的 HPV 负荷量显著高于其他 4 组患者, 提示 HPV 负荷量的增高可能增加宫颈病变的危险度. 为了检验 HPV 负荷量是否与宫颈病变严重程度呈现正相关, 使用 Spearman 等级相关分析. 相关系数为 r=0.318, 表明两者之间呈正相关 ; P=0.000 说明两者的正相关具有统计学意义. 随着宫颈病变级别升高, 高病毒负荷量检出率增加 ; 同时 HPV-DNA 负荷量值越高, 患宫颈病变高级别的可能性越大. 提示 HPV 负荷量可以作为宫颈病变危险程度的辅助监测指标. 2.4 高危型 HPV-DNA 负荷量与宫颈病变严重程度的关系统计检验 HPV 负荷量总体分布与宫颈病变级别的相关系数偏低, 因此有必要对上海地区与宫颈病变严重程度呈显著相关的 4 种高危型 HPV(16, 58, 33, 52), 分别进行 HPV 负荷量与宫颈病变级别关系的统计分析. Kruskal-Wallis H 检验的结果显示, 具有统计学意义的高危亚型为 HPV-16 和 HPV-33(P 值分别为和 0.012), 另外两种高危亚型 HPV-58 和 HPV- 52 的 P 值为和 0.183, 则不具备统计学意义. 另一方面, 4 种高危型 HPV-DNA 负荷量在 5 组宫颈病变不同级别范围内的中位数如表 3 所示. 我们发现 HPV-16 和 HPV-33 的病毒负荷量中位数具有相似的变化特征, 即随着宫颈病变程度的增加, HPV 负荷量的中位数相应升高, 与统计分析所得结果一致. 但是, HPV-58 和 HPV-52 的病毒负荷量中位数则没有随宫颈病变程度的增加而呈现增高的趋势. 说明上海地区 HPV 负荷量与宫颈病变严重程度呈现正相关性的主导因素为两种高危亚型 HPV-16 和 HPV 讨论研究现已证实高危型 HPV 持续感染是 CIN 及宫颈癌发生发展的主要致病因素, HPV 感染亚型在世界范围内的分布存在明显的地区差异 [11,12]. 全球范围内, HPV-16, 18, 33, 45 和 31 是宫颈癌最常见的亚型, 亚洲女性中 HPV-16 和 HPV-18 对浸润性宫颈癌的影响为 69.7% [13], 中国香港地区宫颈癌常见的前 5 位分别是 HPV-16, 18, 52, 58 和 33 [14]. 而本研究中上海地区的 HPV 分型结果表明, 宫颈病变中前 6 位依次为 HPV-16, 58, 33, 52, 31, 18, 检出率总和高达 90%( 图 1). 上海地区高危型 HPV 亚型的分布具有地 [13] 区性特征, 与 Bao 等人对中国人群的 Meta 分析结果类似. 研究报道的 HPV-18 亚型在本研究中所占比例较低, 仅排在第 6 位, 可能的原因是 HPV-18 常见于宫颈癌患者中, 而我们的样本中宫颈癌患者数目较少 [15]. 另外, 本研究发现上海地区 4 种高危型 HPV(16, 58, 33, 52) 与宫颈病变严重程度呈显著相关. 而现在问世的 2 种 HPV 预防性疫苗仅涵盖 HPV-16 和 18 型, 对其他高危型 HPV 的感染是否有交叉预防作用仍不明确, 这对现有疫苗在中国以及上海地区人群中的保护效果提出了挑战 [16]. 上海地区 HPV-58 和 52 有别于全球常见感染亚型, 但在中国香港及多个地区感染率都较高, 尤其南部地区比其他地区更 HPV 负荷量 (IU/mL) 慢性宫颈炎例 (%) 表 2 不同程度宫颈病变患者的 HPV-DNA 负荷量分布 CIN I 例 (%) CIN II 例 (%) CIN III 例 (%) 宫颈癌例 (%) 0~10 2 4(4.71) 1(1.06) 0(0.00) 3(6.82) 0(0.00) ~10 3 6(7.06) 6(6.38) 3(2.61) 4(9.09) 0(0.00) ~ (31.74) 14(14.89) 19(16.52) 6(13.64) 4(6.56) ~ (28.24) 46(48.94) 42(37.52) 12(27.27) 17(27.87) ~ (25.88) 21(22.34) 33(28.70) 8(18.18) 24(39.34) 108 >10 6 2(2.35) 6(6.38) 18(15.65) 11(25.00) 16(26.23) 53 合计合计例 2806

5 表 3 上海地区 4 种高危型 HPV 负荷量在不同程度宫颈病变中的中位数分布负荷量中位数 HPV-16 (IU/mL) HPV-58 (IU/mL) HPV-33 (IU/mL) HPV-52 (IU/mL) 慢性宫颈炎 CIN I CIN II CIN III 宫颈癌高 [5,17]. 因此, 上海地区高危型 HPV 亚型的分布特征的特殊性不可忽视, 将为我国研发新一代 HPV 预防疫苗的涵盖范围提供依据. 近年来关于 HPV 负荷量的研究表明, 随着病毒负荷量的增高, 病毒复制数量相应地增多, 使病毒得以持续存在, 可能促进宫颈病变的发生发展 [18]. 另一方面, 宫颈病变程度越严重, 感染 HPV 的亚型越多, 病毒负荷量就越高 [8,19]. 我们应用统计分析 HPV- DNA 负荷量在不同程度宫颈病变中的分布, 结果表明 HPV 负荷量在不同级别宫颈疾病分类中的总体分布有显著差异, 平均秩次随宫颈病变程度的增加呈上升趋势, 说明 HPV 负荷量的增高可能增加宫颈病变的危险度, 与已有研究报道结果一致. 而 Sun 等 [20] 人证实了 HPV-DNA 低负荷量与 CIN II 以下病变并没有明显的相关性. 本研究结果同样显示, CIN 及宫颈癌者的 HPV 负荷量较炎症者明显增高, 且随着 HPV 负荷量的增加, 宫颈癌及其前期病变的发生危险性增加 ( 表 2). 通过 Spearman 等级相关分析, 检验证实 HPV 负荷量与宫颈病变严重程度呈现正相关. 本研究中上海地区的宫颈疾病患者 HPV 负荷量统计分析结果, 进一步为 HPV 负荷量与宫颈病变严重程度呈正相关提供佐证, 同时表明 HPV 负荷量在宫颈病变发生发展中发挥重要作用. 据报道, 持续感染高危型 HPV 是引起并维持 CIN 的必要条件, 如持续感染高危型 HPV 的妇女发生 CIN 的风险增加 250 倍 [21] [22]. Zhao 等人的研究也展示出高危型 HPV 负荷量与宫颈病变程度的显著相关性, 高 HPV 负荷量与 CIN II+ 病变相关. 但 Lorincz [23] 等人的研究指出, 高危型 HPV 感染显著增加了发生 CIN III 及宫颈癌的风险, 而高的病毒负荷量却不能在此基础上进一步预测 CIN III 及宫颈癌的风险. 两项研究的结论产生冲突的原因, 可能为高危型 HPV 持续感染或病毒清除会导致宫颈病变的进展或消退. 多数研究显示, HPV-16 病毒负荷量增加与 CIN III 或者宫颈癌的发生进展相关, 但是其他高危型 HPV 没有这种现象 [24]. 我们比较上海地区与宫颈病变严重程度呈显著相关的高危型 HPV-DNA 负荷量 (HPV-16, 58, 33, 52) 在 5 组宫颈病变不同级别患者的中位数 ( 表 3), 与统计分析结果共同提示, 两种高危亚型 HPV-16 和 HPV-33 的负荷量是上海地区 HPV 负荷量与宫颈病变严重程度呈现正相关性的主导因素. 目前 HPV 负荷量与宫颈病变程度的相关性尚存争议, 但本研究提示高危型 HPV 负荷量, 尤其是 HPV-16 和 HPV-33, 可以作为上海地区宫颈病变危险程度的辅助监测指标. 由此可见, 发生高级别宫颈病变的危险性随着高危型 HPV 感染和病毒负荷量的增大亦增加, 进一步证实了高危 HPV 持续感染是诱发 CIN 进而发展为宫颈癌的重要因素. 高负荷量 HPV-DNA 更提示了 CIN 甚至宫颈癌发生的可能, 应作为宫颈癌筛查的有意义指标而引起重视. 但对于高 HPV 负荷量是否可以作为预测宫颈病变程度风险的指标, 还有待于对病毒负荷量在宫颈病变发病机制中的作用进行进一步的研究. 致谢感谢上海卓衡生物技术有限公司为统计分析方法的选择提供了建议. 参考文献 1 Arbyn M, de Sanjose S, Saraiya M, et al. EUROGIN 2011 roadmap on prevention and treatment of HPV-related disease. Int J Cancer, 2012, 131:

6 2013 年 9 月第 58 卷第 27 期 2 Jemal A, Bray F, Center M M, et al. Global cancer statistics. Ca Cancer J Clin, 2011, 61: Psyrri A, DiMaio D. Human papillomavirus in cervical and head-and-neck cancer. Nat Clin Pract Oncol, 2008, 5: Nygard J F, Sauer T, Skjeldestad F E, et al. CIN 2/3 and cervical cancer after an ASCUS pap smear. A 7-year, prospective study of the Norwegian population-based, coordinated screening program. Acta Cytol, 2003, 47: Lo K W, Wong Y F, Chan M K, et al. Prevalence of human papillomavirus in cervical cancer: A multicenter study in China. Int J Cancer, 2002, 100: Bhatla N, Dar L, Rajkumar Patro A, et al. Human papillomavirus-type distribution in women with and without cervical neoplasia in North India. Int J Gynecol Pathol, 2008, 27: Li N, Franceschi S, Howell-Jones R, et al. Human papillomavirus type distribution in invasive cervical cancers worldwide: Variation by geographical region, histological type and year of publication. Int J Cancer, 2011, 128: Abba M C, Mouron S A, Gomez M A, et al. Association of human papillomavirus viral load with HPV16 and high-grade intraepithelial lesion. Int J Gynecol Cancer, 2003, 13: Gravitt P E, Kovacic M B, Herrero R, et al. High load for most high risk human papillomavirus genotypes is associated with prevalent cervical cancer precursors but only HPV16 load predicts the development of incident disease. Int J Cancer, 2007, 121: Woodman C B, Collins S, Winter H, et al. Natural history of cervical human papillomavirus infection in young women: A longitudinal cohort study. Lancet, 2001, 357: Munoz N, Bosch F X, Castellsague X, et al. Against which human papillomavirus types shall we vaccinate and screen? The international perspective. Int J Cancer, 2004, 111: Bosch F X, Burchell A N, Schiffman M, et al. Epidemiology and natural history of human papillomavirus infections and type-specific implications in cervical neoplasia. Vaccine, 2008, 26: K1 K16 13 Bao Y P, Li N, Smith J S, et al. Human papillomavirus type-distribution in the cervix of Chinese women: A meta-analysis. Int J STD AIDS, 2008, 19: Chan P K, Ho W C, Yu M Y, et al. Distribution of human papillomavirus types in cervical cancers in Hong Kong: Current situation and changes over the last decades. Int J Cancer, 2009, 125: Chen W, Zhang X, Molijn A, et al. Human papillomavirus type-distribution in cervical cancer in China: The importance of HPV 16 and 18. Cancer Causes Control, 2009, 20: 代敏, 李霓. 人乳头瘤病毒及其疫苗研究进展. 科学通报, 2009, 19: ,,,. 58. :, 2009, 39: Ylitalo N, Sorensen P, Josefsson A M, et al. Consistent high viral load of human papillomavirus 16 and risk of cervical carcinoma in situ: A nested case-control study. Lancet, 2000, 355: Sherman M E, Wang S S, Wheeler C M, et al. Determinants of human papillomavirus load among women with histological cervical intraepithelial neoplasia 3: Dominant impact of surrounding low-grade lesions. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2003, 12: Sun C A, Lai H C, Chang C C, et al. The significance of human papillomavirus viral load in prediction of histologic severity and size of squamous intraepithelial lesions of uterine cervix. Gynecol Oncol, 2001, 83: Hernandez-Hernandez D M, Ornelas-Bernal L, Guido-Jimenez M, et al. Association between high-risk human papillomavirus DNA load and precursor lesions of cervical cancer in Mexican women. Gynecol Oncol, 2003, 90: 赵方辉, 胡尚英, 王少明, 等. 高危型人乳头瘤病毒载量与子宫颈病变的关系. 中华预防医学杂志, 2009, 43: Lorincz A T, Castle P E, Sherman M E, et al. Viral load of human papillomavirus and risk of CIN3 or cervical cancer. Lancet, 2002, 360: Bekkers R L, Massuger L F, Bulten J, et al. Epidemiological and clinical aspects of human papillomavirus detection in the prevention of cervical cancer. Rev Med Virol, 2004, 14:

7 Human papillomavirus genotyping and correlation of high-risk human papillomavirus viral load and cervical lesions in Shanghai SHU HuiMin 1,8, CHEN Hua 1, WEI HaiBin 2,7, QING ZhiRong 3, YAO HaiHong 1, WANG ZhiFeng 1, XIONG Miao 4, WANG Li 5 & YANG BinLie 6 1 Department of Obstetrics and Gynecology, Shanghai Pudong New Area Gongli Hospital, Shanghai , China; 2 Key Laboratory of Nutrition and Metabolism, Institute for Nutritional Sciences, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai , China; 3 Shanghai Mendel DNA Center Co. Ltd, Shanghai , China; 4 Sixth People s Hospital affiliated to Shanghai Jiaotong University, Shanghai , China; 5 First People s Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University, Shanghai , China; 6 Department of Obstetrics and Gynecology, People s Hospital of the Pudong New Area, Shanghai , China; 7 Shanghai Agrobiological Gene Center, Shanghai , China; 8 Shanghai First Maternity and Infant Hosiptal, Tongji University, Shanghai , China The epidemiological distribution of human papillomavirus (HPV) subtypes varies among different countries and also in different areas within the same country. HPV viral load is correlated with the grade of cervical intraepithelial lesion. Therefore, HPV subtype and HPV viral load testing have drawn increasing research attention. We investigated 515 cervical disease specimens collected from patients at the Shanghai Pudong New Area Gongli Hospital. We used guide hybrid gene chip technology (HybriMax) to conduct HPV genotyping and measured HPV viral load by RT-PCR. We then analyzed the correlations between HPV genotypes and grade of cervical disease, as well as HPV viral load and cervical disease. We detected 18 HPV subtypes in Shanghai. Six high-risk subtypes (HPV 16, 58, 33, 52, 31, 18) had a detection rate of over 5%, of which four subtypes (HPV 16, 58, 33, 52) were significantly correlated with the severity of cervical lesions. Spearman rank correlation analysis showed that HPV viral load and cervical lesion grade were positively correlated (r=0.318, P=0.000); this correlation was primarily as a result of HPV-16 and HPV-33. This study presents the prevalent HPV subtypes in Shanghai and analyzes HPV viral load and the relationship to cervical lesions. These results provide evidence for the clinical significance of HPV viral load in rapid screening for cervical lesions, and serves to inform for the development of a polyvalent vaccine for China. human apillomavirus (HPV), viral load, cervical intraepithelial neoplasia (CIN), cervical cancer doi: /

2015医学版第六期

2015医学版第六期第 4 卷第 6 期 205 年 2 月 Journal of Lanzhou University(Medical Sciences) Vol.4 No.6 Dec. 205 文章编号 :000-282 (205) 06-0054-05 金昌队列人群代谢综合征率及组分分析彭峥, 白亚娜, 王凤杰 2, 李娟生, 李海燕 2, 刘燕青,