疾病监测年月日第卷第期!"# $%&$& 治有重要的临床意义研究表明 4/ 亚型分布与地区环境人群等因素相关 ' 为了解浙江省湖州地区 4/ 基因分型及流行分布情况本研究采用基因芯片技术对浙江省湖州市中心医院就诊的 ' 名妇女的宫颈脱落细胞标本进行基因分型检测现报道如下 7 对象

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因掌解
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1 疾病监测年月日第卷第期!"# $%&$& 传染病监测浙江省湖州地区 ' 例女性人乳头瘤病毒感染及基因分型分析李栋立秦基取钱福初范晓娴摘要目的了解浙江省湖州地区女性人乳头瘤病毒 #() %$) 5!(4/ 亚型分布状况及年龄相关性为本地区女性宫颈癌的防治及 4/ 疫苗的研制提供科学参考方法收集年月至年月于湖州市中心医院就诊的 ' 份女性宫颈脱落细胞标本以基因芯片方法进行 4/ 亚型检测及统计学分析结果 ' 份标本检出 4/ 阳性标本 ' 例为 '&' B ' 亚型分布排在前位的分别为 4/' 为 & B.4/ 为 & ' B.4/ 为 &. B. 高危感染占 &.' B' 低危感染占 & B' 高低危混合感染 &'. B' 岁年龄组种感染类型均最高感染亚型以单一亚型感染为主 '&' 单一亚型最高的是. >. 岁年龄组为 &' 多重亚型最高的是岁年龄组为 '& 结论湖州地区门诊女性 4/ 为 '& 亚型以 4/' 为主岁以下高高多重说明 4/ 感染有低龄化多亚型化倾向值得引起高度重视关键词人乳头瘤病毒基因分型年龄女性中图分类号, 文献标志码文章编号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人乳头瘤病毒 #() %$) 5!(4/ 是一种无囊膜的双链病毒流行病学与分子生物学研究表明 4/ 能引起人体黏膜和皮肤上皮细胞病变并且 4/ 持续感染是女性宫颈病变的主要原作者单位湖州市中心医院中心实验室浙江湖州作者简介李栋立男浙江省湖州市人助理工程师主要从事临床分子诊断及研究工作通信作者李栋立 % 1)%3$0%'<',"$) 收稿日期因国际肿瘤研究所根据其致癌性与否将 4/ 亚型分为高危型和低危型两类高危型 4/ 是宫颈癌的主要发病因素而低危型 4/ 引起良性病变较多的宫颈癌患者检测出 4/ 高危亚型感染在 > 年内多数感染者 4/ 会清除也不会有明显病变发生但还是有部分会存在持续感染. 同一亚型 4/ 的持续感染会大大增加宫颈癌发生的风险有效的医学干预能够降低宫颈癌的发病率及早发现 4/ 感染分型对提前进行防!"#$ %&&'

2 疾病监测年月日第卷第期!"# $%&$& 治有重要的临床意义研究表明 4/ 亚型分布与地区环境人群等因素相关 ' 为了解浙江省湖州地区 4/ 基因分型及流行分布情况本研究采用基因芯片技术对浙江省湖州市中心医院就诊的 ' 名妇女的宫颈脱落细胞标本进行基因分型检测现报道如下 7 对象与方法 & 研究对象收集年浙江省湖州市中心医院就诊女性宫颈脱落细胞 '' 份剔除复诊病例 ' 例获得有效宫颈脱落细胞标本为 ' 例年龄为 > 岁平均年龄 & & 岁 & 仪器和试剂 / 扩增仪 "%! #!) % "%! 购自美国 8 公司分子杂交炉 4* 3 # DII-"D 购自美国 #!)$%"-!$ 公司离心机为德国 4-"# 公司 D!$ 型号人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒和人乳头瘤病毒分型基因芯片阅读仪 "#! 4/ 为亚能生物技术深圳有限公司产品该试剂医疗器械注册证书编号为国食药监械准字. 第. 号有文献报道其敏感度特异度分别为 '&' 和 &' 能够满足实验检测需要 & 实验方法 && 样本采集与保存用试剂盒配套专用脱落细胞采集器进行采样将宫颈刷于宫颈口单方向旋转. > 周以获得足量的上皮细胞样本将样本放人专用细胞保存液中折断宫颈刷柄旋紧管盖做好样本标识 1 E 保存待检 && 样本处理快速溶解采集器内洗脱液充分漂洗宫颈刷后取 )% 洗脱液移到 & )% 微量离心管中!B) 离心 ) 弃去上清保留管底的细胞沉淀加入 % 裂解液悬浮沉淀 E 水浴加热 )!B) 离心 ) 保留上清液备用 && 基因芯片检测聚合酶链反应 $%)!"#!"-$/ 扩增取 / 反应管做好标记加入已提取的待测样品 % 反应总体系为 % 低速离心数秒按以下条件扩增 E ) E ) 然后以. E. E E 个循环. E.' E ' E 个循环 E 延伸 ) 杂交取 )% 离心管放入标有患者编号的膜条加入液 J& 十二烷基磺酸钠 4&. )% 及所有 / 产物按 4/ 基因分型检测试剂盒说明进行杂交显色显色结果亦按说明书进行判定膜条上探针按固定顺序排列由蓝色斑点显现位置即可断定 4/ 的亚型其中高危型包括 4/'. '' 低危型包括 4/' / 为显色质控点 &&. 统计学分析数据采用 / & 统计学软件处理计数资料比较采用检验 7 结果 & 不同年份检测情况及年浙江省湖州市中心医院妇科年初诊数分别为. 和例初诊患者年 4/ 检测逐年上升分别为. B.&. B.'& 和. B & 逐年降低分别为 B. &' B. & 和 '' B. &. 年生殖器疣宫颈上皮异位和宫颈癌的 4/ 开展情况见表 &4/ 及各亚型分布状况 ' 名女性中有 ' 名感染 4/ 总阳性率为 '& 检出最高的型别是 4/' 型检出为 & B. 也是单一阳性率及多重阳性率最高的亚型分别为 &' 和 & 见表 4/ 各亚型在 ' 份阳性样本中 4/' 4/ 和 4/ 明显高于其他亚型分别为 &' & 和 & 表 7 年生殖器疣宫颈上皮异位及宫颈癌的开展情况 :/7,//"$-$ (/-/#"/$"# /"/2"$$,/"$/ % 生殖器疣宫颈柱状上皮异位宫颈癌年份 4/ 受检 4/ 受检 4/ 受检总总总 ',,' '','.,.., ',. ', ' '.',, 合计 ',, '.,'!"#$ %&&'

3 疾病监测年月日第卷第期!"# $%&$& 表 7' 例感染者各亚型构成情况 :/7"#"."$(12/#-$ ' "$(/"$#/# 4/ 型别单一型感染多重型感染总计 4/',',, 4/,., ' ',. 4/.,'.,.,. 4/.,,, 4/,'',, 4/,',' ', 4/.,...,,' 4/,',, 4/ '.,' '.,. ', 4/',,',. 4/,,,. 4/ ',',. ', 4/'.,'.,'.,'' 4/'.,. ',. ', 4/ ',. ', ', 合计, ',., & 不同年龄组 4/ 感染状况分析 ' 例送检者年龄为 > 岁以 >. 岁最多共. 例占 &' 在所有年龄组中岁年龄组阳性率最高达 '& 其次是 >. 岁年龄组阳性率为 &. > 岁年龄组相对较低岁年龄组 4/ 与其他各年龄组差异均有统计学意义与 > 岁组比较?&#& 与其他各组比较?.&' >'.&#& >. 岁组还与 > 岁四组差异有统计学意义与 >. 岁组比较?'&#?& & 与 >. 岁三组比较?&'. >&#& 与其他组别比较 #& 差异无统计学意义岁以下组高危型低危型高低危混合型均明显高于其他年龄组分别为.&& 和 &' 其他相对较高的有高危型感染中岁组 '& 低危型感染中 > 岁组.&' 高低危混合型中 > 岁年龄组 &. 见表 &.4/ 单一感染和多重感染分布状况 4/ 感染存在多种亚型同时感染的情况不同年龄组 4/ 单一感染和多重感染检出情况见表. 单一感染例占 '&' B' 二重感染为两种亚型阳性占 & '. B' 三重感染占 &. B' 四重感染占 &' B. 五重及以上感染占 & B' 单一型感染中. >. 岁组最高为 &' B.. >. 岁年龄组单一型与. 岁及岁 ' 组差异有统计学意义与岁的三组比较?& >.&. # & 与 >. 组比较?&'#& 与 >.. 岁组比较?& 和 &'#& 差异无统计学意义二重感染中岁组最高为.&. B 岁组二重与其他年龄组差异均有统计学意义与 >. 岁组比较?.&.#& 与其他组比较?&. >.&.#& 见表. & 种病症与 4/ 感染亚型分析宫颈癌生殖器疣和宫颈柱状上皮异位为与 4/ 感染密切相关的妇科疾病 4/ 阳性率最高为生殖器疣 '& 与宫颈癌组比较差异无统计学意义 #& 与宫颈柱状上皮异位组比较差异有统计学意义?'&#& 阳性中高危型最高为宫颈癌患者达 '& 与生殖器疣组及宫颈柱状上皮异位组比较差异均有统计学意义?&. 和 '&#& 分析湖州地区最常见的 ' 型 4/ 感染在高危型感染中宫颈癌患者种亚型比例最高为.& 分别与生殖器疣组比较差异有统计学意义?.&' #& 与宫颈柱状上皮异位组比较差异无统计学意义?&#& 4/ 高危型多重亚型感染比例为宫颈癌组最大为 & 与生殖年龄组岁受检单纯高危型表 7 不同年龄组感染状况 :/7"$(/"$#.#"$,"(//$/.2# 单纯低危型高危 7 低危型总感染..,,,' ', > '.,...,.,.,. >,.,', ', >.''.,,,, >,,,..,.. >.'.,.,',. ',. > ',,,.,. >,.,.,', ',,'.,'.', 合计 ' ',,., ' ',!"#$ %&&'

4 疾病监测年月日第卷第期!"# $%&$& 年龄组岁总感染单一感染表 7 单一感染和多重感染在各年龄组的 :/ 7"-2/ $,-."12/"$(/"$/#"$,"(//$/.2# 二重感染三重感染四重感染五重及以上感染,'.,. ',,'', >,',,',.,.. > ' ', '', ',,., >,,,,,' >..,,, ',.,. > '.,,,',.,.. >.,' ' ', ',,,. >. ',.., ',,,.' ',,..,'.,'.,' 总计 ' ',' '.,,. ',, 诊断类型表 7 宫颈癌生殖器疣及宫颈柱状上皮异位亚型分析 :/7:12/#2/"(".#"$ /"$/ /$"$,/"/2"$ 总检阳性阳性率高危型 4/' 亚型高危型多重感染宫颈癌. ', ',.,, 生殖器疣 ', ' ',,,' 宫颈柱状上皮异位.'.,.., '., ', 器疣组和宫颈柱状上皮异位组比较差异无统计学意义?&' 和 &'#& 7 讨论本研究应用基因芯片技术对湖州地区女性的 4/ 感染情况进行了大规模样本的调查实验结果显示年全年检测初诊 4/ 检测率及阳性持续增加而逐年降低分析原因可能是患者及医生对 4/ 检测及防御意识增加 ' 份样本中 4/ 感染者 ' 例为 '& 与浙南地区 & 杭州拱墅区 & 上海地区 & 接近低于重庆地区 & 辽宁省.&' 高于青海省 '& 和云南地区 &. 不同区域 4/ 差异有统计学意义呈现北方中部地区东南沿海地区偏远西南地区本研究中高危亚型 & 单一感染 '&' 为本地区主要类型 4/ 单一感染中以 4/' 最常见占单一型感染的 &' B 其次为 4/ 和分为 '. 和例三者合计占单一型感染者的.&. B' 多重型感染中最常见的种亚型为 4/' 型合并感染合计感染的为.& B. 所占比例接近半数数据表明湖州地区宫颈癌与 4/ 高危亚型密切相关而 ' 三种亚型均为高危亚型在宫颈癌中这三种高危亚型比例明显高于生殖器疣组但与宫颈柱状上皮异位组差异无统计学意义因此湖州地区 4/ 筛查可以高危型为重点尤其是 ' 型对宫颈癌的筛查有重要临床意义此结果与我国其他地区报道一致也符合亚洲人群研究结果提示 4/ 感染除阳性率在地区间有较大差异亚型的分布在各地区较为一致但与国外人群有差异美国前位基因型为 4/' ' 芬兰为 4/' 4/ 不同年龄组亚型分布各有其特点本研究显示 ' 名受检女性在 > > > >. >. > > 岁年龄组中呈现个峰值两端高中间低说明年龄. 岁和岁人群 4/ 较大尤其是岁人群高达 '& 明显高于其他组并且多数为多重感染二重三重四重均排列第位此类感染人群高原因可能与检测标本数量少多数就诊患者已有相应症状有关而且该年龄组处于性活跃期宫颈环境未成熟也可能是原因之一 >. 岁人群虽然检测及感染最多但并不高且较稳定多为单一型感染岁人群增高并且岁年龄组五重及感染最多原因可能是处于绝经期宫颈环境及机体内分泌不稳定免疫力下降感染风险相对增加有文献报道岁女性的 4/ 多为急性感染清除率高应重视岁以上患者的高危型 4/ 感染不同年龄 4/ 的差异有统计!"#$ %&&'

5 疾病监测年月日第卷第期!"# $%&$& 学意义这一差异主要与就诊者自身免疫生活环境及卫生习惯等因素有关同时健康的性生活对 4/ 的预防也有重要意义研究显示宫颈癌及生殖器疣患者 4/ 阳性率明显高于宫颈柱状上皮异位患者低危型感染病症之一为生殖器疣高危型宫颈癌患者明显高于其他人群与有关文献报道一致而本研究中湖州地区常见型感染及多重高危型感染并不能直接证明其与宫颈癌病变相关考虑可能与标本类型取样及数量或检测差异有关持续 4/ 高危型感染是宫颈癌发生的必要条件 4/ 检查是目前预防及控制宫颈癌发生的主要手段 4/ 亚型筛查可以及时发现高危型感染人群使其能够早诊断早治疗做到早期阻断宫颈癌病变的进一步发展有效降低宫颈癌的发病率和死亡率希望医院及各类卫生机构重视女性 4/ 亚型的普查工作定期对已婚妇女进行 4/ 亚型检测本实验首次对本地区女性进行大样本回顾性分析 4/ 感染和基因型分型状况对本地的宫颈癌的防控提供了一定的理论依据参考文献 30,!!+ #00 '$ 6 $ $& '** '. * * 9:* 9' ) 43 '!!! '''*,&'). 1' 2&!33!36 3!33 '& &!!!!! "#"#'&+0) 1' # &&3 '4&! $& &!! & "& "$ & :!# : ":!#'&1 0).' 1..' /* # ' 1!!! $$!) $& &! 6! # $$ #!&!$!! "&!#! "!# '&'.' ' *0!) * &) 3 ("!) ':! $& &!#!&! '*+ 0*0).' 1'' ($ +3 1 '! $#0 # # $& &! ": $! &!''. &0%,)0/(0,+0,- 1*.. 1.' $! 何进才周小梅黄涛等 ' 反向杂交法检测种人乳头瘤病毒型别的研究 ' 中华检验医学杂志.. 1.' 2 $ ( 4 '*! & &!.. "&!$ ($/ ''. &0%,)0/0.0*00)0-. 1' $! 王艳陈雅珍丁友法等 ' 浙南地区.. 例宫颈人乳头状瘤病毒感染状况分析 ' 中华医院感染学杂志. 1' ($ $ ('* 6!& &!&!$ #! 0$ ''. &0%,)0/ )+ (0,+0,-7*0)0-1 ' $! 赵晓飞陶小薇陈兆军 ' 杭州市拱墅区女性 6 感染基因分型情况调查 ' 中国卫生检验杂志 1' - $ + '1$#! $!! #!!!! $& &! "&. #! *$$ ' '%,+ #%0)0-. 1' $! 李江燕陈洁侯晓菁等 ' 上海地区妇女宫颈脱落细胞中人乳头瘤病毒型别分布特征 ' 现代免疫学. 1' ** ($ -'1$!!# #! $$!) 6 "& $ ''08 1*.. 1.' $! 杨平杨双双张莉萍 ' 重庆地区妇女高危型 6 感染现状及年龄的分层分布 ' 重庆医学.. 1.' 2 *(2, 2 ' &## && $$:!)! $& &! - '&0%,)0/' 1*),.+-..' 1.' $! 王诗卓王宁魏恒等 ' 辽宁地区人乳头瘤病毒的感染状态及其高危基因型的分布情况 ' 中国医科大学学报..' 1.' (3 ($ 2 3' & &! ' ' "& $ ''. &0%,)0/ 4)-) 1'' $! 才仁卓玛张建青魏春梅 ' 青海省 ' ' 名临床就诊妇女宫颈人乳头瘤病毒感染情况及亚型分布 ' 中国计划生育学杂志 1''. - $ '!!# #! $& &!!!''. &0%,)0/(.++,*.1 - *0)0-1 1+,*. )*+,0*1+0 ' 1' $! 岳耀斐杨丽娟陈俊英等 ' 云南省例妇女宫颈人乳头瘤病毒的检测与基因分型 ' 中华妇幼临床医学杂志电子版 ' 1' 1 *, $ 1 '5#& $& &! # #!! * # 1" ' ** ' * 3':3' '! "5 -(( 3 '1:! #!! $& &! "& $;# *!"$ #!&! ' &(.++- *0).' 1.'' - 3 3, ' 1:# :!#! $& &! "& #! #',&'*,. 1' *!"4*& 4 -"! 2 '& * & *! # $ # & * $! #! $ # # '&') +0)' 1.' 1) -' 1$! # &! # '1,% ''!"#$ %&&'

0 疾病监测年月日第卷第期 $$ 有重要意义目前国内医疗机构多采用胶体金法筛检轮状病毒但是各地轮状病毒检出情况不尽相同 / 余杭区外来流动人口繁多居住范围较为集中

0 疾病监测年月日第卷第期 $$ 有重要意义目前国内医疗机构多采用胶体金法筛检轮状病毒但是各地轮状病毒检出情况不尽相同 / 余杭区外来流动人口繁多居住范围较为集中疾病监测年月日第卷第期 $$ 0 传染病监测年浙江省某医院腹泻患者轮状病毒感染情况分析金青青姚瑛摘要目的了解浙江省杭州市余杭区某医院群轮状病毒的感染情况为该院轮状病毒性腹泻防控提供科学依据方法采用群轮状病毒试