第 25 卷 第 1 期 2016 年 1 月 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2016.01.015 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2016.01.015 Chinese Journal of General Surgery, 2016, 25(1):97 102. Chinese Journal of General Surgery Vol.25 No.1 Jan. 2016 基 础 研 究 硫 化 氢 抑 制 自 噬 减 轻 肝 硬 化 大 鼠 肝 脏 缺 血 再 灌 注 损 伤 魏 来, 陈 文 雁, 邹 毅, 黄 红 珏, 潘 冰 冰, 金 盛, 孔 高 茵 ( 湖 南 省 人 民 医 院 麻 醉 科, 湖 南 长 沙 410005) 摘 要 目 的 : 探 讨 硫 化 氢 (H 2 S) 预 处 理 对 肝 硬 化 大 鼠 肝 脏 缺 血 再 灌 注 损 伤 (HIRI) 的 影 响 及 机 制 方 法 : 将 32 只 采 用 胆 总 管 结 扎 法 制 作 的 肝 硬 化 模 型 大 鼠 随 机 均 分 为 4 组, 分 别 行 假 手 术 ( 假 手 术 组 ) 30 min 肝 门 阻 断 及 4 h 再 灌 注 诱 导 HIRI 模 型 (HIRI 组 ) 硫 氢 化 钠 (NaHS, 外 源 性 H 2 S 供 体 ) 预 处 理 +HIRI 模 型 诱 导 (NaHS 组 ) NaHS+ 雷 帕 霉 素 (RPM,mTOR 抑 制 剂 ) 预 处 理 +HIRI 模 型 诱 导 (RPM 组 ), 随 后 检 测 血 清 谷 草 转 氨 酶 (AST) 谷 丙 转 氨 酶 (ALT) 浓 度, 分 别 用 光 镜 与 电 镜 观 察 肝 组 织 病 理 学 变 化 与 自 噬 水 平,Western blot 检 测 肝 组 织 LC3-II( 自 噬 特 异 性 标 记 ) 以 及 mtor 磷 酸 化 mtor (p-mtor) 蛋 白 表 达 结 果 : 除 假 手 术 组 外, 其 余 各 组 肝 组 织 在 肝 硬 化 表 现 的 基 础 上 均 出 现 明 显 的 炎 症 反 应 细 胞 肿 胀 与 局 灶 性 坏 死 等 损 伤 改 变, 但 NaHS 组 的 损 伤 程 度 明 显 轻 于 HIRI 组 与 RPM 组 与 假 手 术 组 比 较, 其 他 各 组 血 清 AST ALT 水 平 均 明 显 升 高 肝 细 胞 内 自 噬 体 数 量 明 显 增 多 肝 组 织 LC3-II 蛋 白 表 达 明 显 升 高, 而 p-mtor 蛋 白 表 达 (p-mtor/mtor 比 值 ) 明 显 降 低 ( 均 P<0.05), 但 NaHS 组 转 氨 酶 升 高 幅 度 细 胞 内 噬 体 数 量 肝 组 织 LC3-II 蛋 白 升 高 及 p-mtor 蛋 白 降 低 程 度 均 明 显 低 于 HIRI 组 ( 均 P<0.05), 而 RPM 组 与 HIRI 组 间 各 项 指 标 差 异 均 无 统 计 学 意 义 ( 均 P>0.05) 结 论 :H 2 S 预 处 理 能 减 轻 肝 硬 化 大 鼠 HIRI, 其 机 制 可 能 与 通 过 活 化 mtor 途 径 抑 制 自 噬 有 关 关 键 词 肝 ; 再 灌 注 损 伤 ; 肝 硬 化 ; 硫 化 氢 ; 自 噬 中 图 分 类 号 :R657.3 Protective effect of hydrogen sulfide against hepatic ischemiareperfusion injury in cirrhotic rats by autophagy inhibition WEI Lai, CHEN Wenyan, ZOU Yi, HUANG Hongjue, PAN Bingbing, JIN Sheng, KONG Gaoyin (Department of Anesthesiology, Hunan Provincial People s Hospital, Changsha 410005, China) Abstract Objective: To investigate the influence of hydrogen sulfide (H 2 S) pretreatment on hepatic ischemia-reperfusion injury (HIRI) in rats with liver cirrhosis and the mechanism. Methods: Thirty-two rats with liver cirrhosis that was induced by common bile duct ligation were equally randomized into 4 groups, and were subjected to sham operation (sham group), HIRI model creation by 30-min hepatic inflow occlusion/4-h reperfusion (HIRI group), sodium hydrosulfide (NaHS, an exogenous H 2 S donor) pretreatment and then HIRI model creation (NaHS group), and NaHS plus rapamycin (RPM, mtor 基 金 项 目 : 湖 南 省 科 技 厅 科 研 条 件 创 新 专 项 立 项 资 助 项 目 (2014TT2019) 收 稿 日 期 :2015-11-10; 修 订 日 期 :2015-12-18 作 者 简 介 : 魏 来, 湖 南 省 人 民 医 院 副 主 任 医 师, 主 要 从 事 围 术 期 重 要 器 官 功 能 保 护 方 面 的 研 究 通 信 作 者 : 陈 文 雁, Email: 448027999@qq.com 97
98 第 25 卷 Key words inhibitor) pretreatment and then HIRI model creation (RPM group), respectively. Subsequently, the serum levels of aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) were measured, the pathologic and autophagic changes in the liver tissues were observed by light microscope and electron microscope respectively, and the protein expressions of LC3-II (an autophagosome marker), mtor and phosphorylated mtor (p-mtor) in the liver tissues were determined by Western blot analysis. Results: Except in sham group, the liver tissues in all the other groups, apart from the presence of cirrhosis, presented the injury-induced changes that included inflammatory responses, cellular swelling and focal necrosis, but the degree of these changes in NaHS group was markedly milder than that in HIRI group or RPM group. Compared with sham group, the serum levels of AST and ALT were elevated, the number of autophagosomes in hepatic cells was increased, and protein expression of LC3-II was up-regulated while p-mtor (p-mtor/mtor ratio) in liver tissues was down-regulated significantly in the other three groups (P<0.05), in which the amplitude of aminotransferase increase, number of autophagosomes in hepatic cells, degree of LC3-II protein increase and p-mtor protein decrease in NaHS group were all significantly lower than those in HIRI group (all P<0.05), but all these parameters showed no statistical difference between RPM group and HIRI group (all P>0.05). Conclusion: H 2 S pretreatment can alleviate HIRI in cirrhotic rats, and its mechanism may be responsible for autophagy inhibition via mtor signaling pathway activation. Liver; Reperfusion Injury; Liver Cirrhosis; Hydrogen Sulfide; Autophagy CLC number: R657.3 肝 硬 化 是 大 多 数 肝 脏 疾 病 的 最 终 病 理 表 现, 常 伴 随 较 差 的 肝 功 能 储 备, 肝 脏 手 术 过 程 中 缺 血 再 灌 注 损 伤 可 进 一 步 损 害 肝 功 能, 甚 至 导 致 肝 衰 竭, 因 此 减 轻 肝 硬 化 患 者 肝 脏 缺 血 再 灌 注 损 伤 (hepatic ischemia-reperfusion injury,hiri) 是 临 床 工 作 的 重 点 和 难 点 硫 化 氢 (hydrogen sulfide,h 2 S) 是 重 要 的 内 源 性 气 体 信 号 分 子, 参 与 多 种 生 理 和 病 生 过 程, 有 研 究 表 明 H 2 S 对 正 常 大 鼠 缺 血 再 灌 注 器 官 具 有 保 护 作 用, 机 制 可 能 与 对 自 噬 的 调 节 相 关 [1] 基 于 以 上 研 究 基 础, 本 研 究 提 出 假 说 :H 2 S 能 通 过 调 节 自 噬 减 轻 肝 硬 化 大 鼠 的 肝 脏 缺 血 再 灌 注 损 伤 本 研 究 通 过 构 建 肝 硬 化 大 鼠 模 型, 摸 索 H 2 S 对 肝 硬 化 大 鼠 HIRI 的 影 响, 并 观 察 自 噬 在 其 中 发 挥 的 作 用 1 材 料 与 方 法 1.1 实 验 动 物 与 主 要 试 剂 SPF 级 雄 性 SD 大 鼠,32 只, 体 质 量 200~250 g, 购 于 湖 南 斯 莱 克 景 达 实 验 动 物 有 限 公 司 ; 外 源 性 H 2 S 供 体 硫 氢 化 钠 (NaHS) mtor 抑 制 剂 雷 帕 霉 素 (RPM) 购 自 美 国 Sigma-Aldrich 公 司, 兔 抗 大 鼠 LC3 II 抗 体 兔 抗 大 鼠 mtor 抗 体 兔 抗 大 鼠 p-mtor 抗 体 兔 抗 大 鼠 β-actin 抗 体 购 自 美 国 Cell Signaling Technology 公 司 1.2 模 型 建 立 胆 总 管 结 扎 肝 硬 化 模 型 : 大 鼠 称 重 后,0.3% 戊 巴 比 妥 钠 1 ml/100 g 腹 腔 注 射 麻 醉, 固 定, 消 毒, 中 上 腹 部 正 中 切 口 进 腹, 在 十 二 指 肠 降 部 肠 系 膜 中 找 到 透 明 的 胆 总 管, 双 重 结 扎, 常 规 关 腹 根 据 预 实 验 结 果 确 定 肝 硬 化 模 型 成 模 时 间 为 30 d HIRI 模 型 : 大 鼠 麻 醉 后 固 定, 消 毒 铺 巾, 原 切 口 进 腹, 分 离 组 织, 暴 露 第 一 肝 门, 无 损 伤 血 管 夹 Pringle 法 阻 断 肝 动 脉 门 静 脉 和 胆 管 造 成 缺 血, 松 开 血 管 夹 即 开 放 形 成 再 灌 注 1.3 动 物 分 组 和 观 察 指 标 32 只 肝 硬 化 大 鼠 随 均 机 分 为 4 组 : 假 手 术 组, HIRI 组,NaHS 组,RPM 组 假 手 术 组 仅 开 腹 及 游 离 暴 露 肝 门, 不 结 扎 ;HIRI 组 行 肝 门 阻 断 30 min, 再 灌 注 4 h 建 立 HIRI 模 型 ;NaHS 组 和 RPM 组 建 立 HIRI 模 型, 并 于 开 放 阻 断 前 5 min 腹 腔 注 射 NaHS 28 μmol/kg,rpm 组 给 予 NaHS 28 μmol/kg 后 静 脉 注 射 雷 帕 霉 素 5 mg/kg,hiri 组 注 射 等 剂 量 生 理 盐 水 各 组 再 灌 注 末 ( 假 手 术 组 于 相 应 时 间 ) 于 下 腔 静 脉 取 血 3 ml, 静 置,4 000 r/min 4 离 心 15 min 收 集 上 层 血 清, 全 自 动 生 化 仪 检 测 谷 丙
第 1 期 魏 来, 等 : 硫 化 氢 抑 制 自 噬 减 轻 肝 硬 化 大 鼠 肝 脏 缺 血 再 灌 注 损 伤 99 转 氨 酶 (ALT) 和 谷 草 转 氨 酶 (AST) 含 量 ; 取 部 分 左 肝 外 叶 组 织,4 生 理 盐 水 冲 洗,10% 福 尔 马 林 固 定 24 h, 脱 水, 石 蜡 包 埋, 切 片, 苏 木 素 - 伊 红 (HE) 染 色 后 光 学 显 微 镜 下 行 病 理 学 检 查 ; 取 部 分 左 肝 外 叶 组 织 4 生 理 盐 水 冲 洗,2.5% 戊 二 醛 固 定, 脱 水 包 埋 染 色 后 透 射 电 镜 ( 日 立 H-7500) 观 察 检 查 肝 细 胞 中 自 噬 体, 每 个 标 本 随 机 选 取 3~5 个 高 倍 视 野 ( 8 900) 用 于 自 噬 体 计 数 ; 取 部 分 左 肝 外 叶 组 织, 用 Western blot 法 检 测 各 组 细 胞 自 噬 特 异 性 标 记 LC3-II mtor 磷 酸 化 mtor(p-mtor) 蛋 白 表 达 水 平, 计 算 条 带 光 密 度, 计 算 LC3-II/actin 和 p-mtor/mtor 比 值, 以 LC3- II/actin 比 值 反 映 肝 细 胞 自 噬 情 况, 以 p-mtor/mtor 比 值 反 映 mtor 信 号 通 路 的 活 化 程 度 1.3 统 计 学 处 理 采 用 SPSS 17.0 软 件 进 行 统 计 学 分 析, 计 量 资 料 采 用 均 数 ± 标 准 差 (x ± s ) 表 示, 采 用 方 差 分 析,P<0.05 为 差 异 有 统 计 学 意 义 2 结 果 2.1 肝 脏 病 理 学 改 变 假 手 术 组 肝 窦 紊 乱, 但 无 明 显 炎 症 细 胞 浸 润 细 胞 肿 胀 坏 死 表 现 ;HIRI 组 和 RPM 组 肝 窦 紊 乱 明 显 炎 症 细 胞 浸 润 肝 细 胞 严 重 肿 胀 较 多 局 灶 坏 死 ;NaHS 组 肝 窦 紊 乱 肝 细 胞 肿 胀 变 性 坏 死 以 及 炎 性 细 胞 浸 润, 但 病 变 程 度 较 HIRI 组 和 RPM 组 减 轻 ( 图 1) A B C D 图 1 肝 组 织 病 理 学 检 查 (HE 100) A: 假 手 术 组 ;B:HIRI 组 ;C:NaHS 组 ;D:RPM 组 Figure 1 Pathological examination of the liver specimens (HE 100) A: Sham group; B: HIRI group; C: NaHS group; D: RPM group 2.2 血 清 转 氨 酶 检 测 结 果 与 假 手 术 组 比 较, 其 余 各 组 缺 血 再 灌 注 4 h 后 AST ALT 水 平 显 著 升 高 (P<0.05), 其 中 NaHS 组 较 HIRI 组 和 RPM 组 损 伤 轻 (P<0.05),HIRI 组 和 RPM 组 无 统 计 学 差 异 (P>0.05)( 表 1) 表 1 各 组 血 清 ALT AST 水 平 比 较 (n=8) Table 1 Comparison of the serum ALT and AST levels among groups (n=8) 组 别 ALT(U/L) AST(U/L) 假 手 术 组 146.5±16.5 253.8±25.5 HIRI 组 623.54±35.7 1) 853.4±45.7 1) NaSH 组 378.8±24.9 1),2) 464.3±32.6 1),2) RPM 组 588.2±24.7 1) 784.5±46.3 1) 注 :1) 与 假 手 术 组 比 较,P<0.05;2) 与 HIRI 组 比 较, P<0.05 Note: 1) P<0.05 vs. sham group; 2) P<0.05 vs. HIRI group
100 第 25 卷 2.3 电 镜 观 察 结 果 透 射 电 镜 下 观 察 自 噬 体 数 量, 与 假 手 术 组 比 较, 其 余 3 组 自 噬 体 数 量 明 显 增 加 ( 均 P<0.05), HIRI 组 和 RPM 组 之 间 无 统 计 学 差 异 (P>0.05), NaHS 组 明 显 少 于 HIRI 组 和 RPM 组 ( 均 P<0.05) ( 图 2) NaSH 组 假 手 术 组 RPM 组 HIRI 组 A 图 2 各 组 肝 组 织 自 噬 情 况 A: 电 镜 照 片 ( 8 900, 箭 头 示 自 噬 体 );B: 各 组 肝 细 胞 自 噬 体 数 量 比 较 Figure 2 Autophagy observation in liver tissues of each group A: Electron microscope images ( 8 900, arrow marking the autophagosomes); B: Comparison of the number of autophagosomes in the hepatic cells among groups 电 镜 视 野 自 噬 体 数 量 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0 假 手 术 组 HIRI 组 NaSH 组 RPM 组 B 2.4 肝 组 织 LC3-II mtor p-mtor 蛋 白 表 达 与 假 手 术 组 比 较, 其 余 3 组 的 LC3- II 蛋 白 表 达 水 平 (LC3- II/actin 比 值 ) 均 明 显 增 高 ( 均 P<0.05), 其 中 NaHS 组 低 于 HIRI 组 和 RPM 组 ( 均 P<0.05),HIRI 与 RPM 组 无 统 计 学 差 异 ( P>0.05); 其 余 3 组 p- mtor 水 平 (p- mtor/ mtor 比 值 ) 均 明 显 降 低 ( 均 P<0.05), 其 中 NaHS 组 高 于 HIRI 组 和 RPM 组 ( 均 P<0.05),HIRI 和 RPM 组 无 统 计 学 差 异 (P>0.05)( 图 3) 假 手 术 组 NaHS 组 HIRI 组 RPM 组 LC3 Ⅱ p-mtor mtor β-actin A 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.0 LC3 II/actin p-mtor/mtor 假 手 术 组 NaHS 组 HIRI 组 RPM 组 B 图 3 各 组 肝 组 织 LC3-II p-mtor mtor 表 达 A:Western blot 结 果 ;B: 蛋 白 表 达 量 比 较 Figure 3 Expressions of LC3-II, p-mtor and mtor in liver tissues of group A: Results of Western blot analysis; B: Comparison of protein expression levels 3 讨 论 肝 移 植 肝 叶 切 除 术 中 常 需 短 暂 阻 断 入 肝 血 流, 有 利 于 维 持 术 野 清 晰 和 减 少 出 血, 但 伴 随 的 缺 血 再 灌 注 损 伤 可 严 重 损 害 肝 功 能 [1] 对 于 肝 功 能 受 损 储 备 极 其 有 限 的 肝 硬 化 患 者 而 言,HIRI 更 是 对 机 体 的 重 大 打 击, 可 能 造 成 术 后 肝 功 能 衰 竭 甚 至 死 亡 [2], 因 此 深 入 研 究 HIRI 相 关 机 制 及 防 治 办 法 具 有 重 要 的 意 义 [3] H 2 S 是 机 体 内 源 性 气 体 信 号 分 子, 在 体 内 以
第 1 期 魏 来, 等 : 硫 化 氢 抑 制 自 噬 减 轻 肝 硬 化 大 鼠 肝 脏 缺 血 再 灌 注 损 伤 101 低 浓 度 存 在, 可 自 由 扩 散 通 过 细 胞 膜, 参 与 多 种 重 要 的 生 理 和 病 生 过 程 硫 氢 化 钠 是 常 用 的 外 源 性 H 2 S 供 体 [4-5] 研 究 表 明 H 2 S 在 HIRI 中 能 产 生 保 护 作 用, 其 机 制 涉 及 直 接 或 间 接 对 抗 氧 化 应 激 [6] enos 的 活 化 和 NO 的 生 成 [7] Akt-GSK-3β 信 号 通 [8] 路 的 激 活 和 线 粒 体 渗 透 性 转 化 以 及 对 自 噬 的 调 控 等 肝 硬 化 是 肝 病 发 展 的 终 末 状 态, 围 术 期 HIRI 对 其 影 响 更 大, 目 前 H 2 S 对 肝 硬 化 大 鼠 肝 功 能 保 护 的 研 究 较 少, 值 得 深 入 研 究 自 噬 是 真 核 细 胞 利 用 溶 酶 体 降 解 受 损 的 长 寿 蛋 白 和 细 胞 器 提 供 能 量 的 过 程, 是 细 胞 对 不 利 环 境 的 适 应 性 反 应 自 噬 在 HIRI 中 发 挥 的 作 用 目 前 尚 未 完 全 明 确, 体 内 和 体 外 研 究 均 发 现 激 活 自 噬 能 减 少 活 性 氧 簇 对 线 粒 体 的 损 害, 从 而 减 轻 HIRI [9], 而 通 过 药 物 抑 制 自 噬 也 能 减 轻 HIRI [10], 提 示 自 噬 与 HIRI 关 系 密 切 而 复 杂, 在 不 同 阶 段 可 发 挥 不 同 作 用 [11] 本 研 究 通 过 胆 总 管 结 扎 建 立 肝 硬 化 模 型, 观 察 H 2 S 对 肝 硬 化 大 鼠 HIRI 的 影 响 及 自 噬 在 其 中 发 挥 的 作 用, 模 拟 临 床 上 由 于 胆 道 阻 塞 胆 汁 淤 积, 高 浓 度 胆 酸 和 胆 红 素 损 伤 肝 细 胞, 造 成 胆 汁 性 肝 硬 化 的 患 者 经 历 HIRI 的 过 程 预 实 验 时 胆 总 管 结 扎 后 取 肝 脏 组 织 行 Masson 染 色, 第 30 天 时 观 察 到 肝 内 大 量 增 生 的 胆 管 上 皮 细 胞 呈 花 环 状 密 布, 胆 管 上 皮 细 胞 外 周 胶 原 沉 积, 细 胞 外 基 质 增 加 肝 星 状 细 胞 活 化 增 殖, 是 肝 纤 维 化 的 中 心 环 节 [12], 从 而 确 定 胆 汁 性 肝 硬 化 模 型 制 备 成 功 在 肝 硬 化 的 基 础 上, 肝 脏 经 历 缺 血 再 灌 注 损 伤 对 肝 功 能 造 成 巨 大 的 影 响, 表 现 为 AST ALT 急 剧 上 升, 而 NaHS 组 肝 功 能 指 标 上 升 低 于 HIRI 组,HE 染 色 光 镜 下 肝 脏 组 织 病 理 学 改 变 显 示 肝 损 伤 的 程 度 和 范 围 均 低 于 HIRI 组, 此 保 护 效 应 可 被 mtor 抑 制 剂 雷 帕 霉 素 部 分 逆 转 自 噬 是 细 胞 内 的 再 循 环 系 统, 在 应 激 状 态 下 能 提 供 能 量 清 除 受 损 蛋 白 和 细 胞 器, 促 进 细 胞 生 存, 是 机 体 重 要 的 保 护 和 修 复 机 制, 与 细 胞 坏 死 凋 亡 关 系 密 切 [13], 过 度 或 失 控 的 自 噬 通 过 激 烈 的 自 我 消 化 会 促 进 细 胞 死 亡, 对 肿 瘤 低 氧 炎 症 饥 饿 等 的 研 究 均 提 示 自 噬 在 其 中 发 挥 双 刃 剑 作 用, 可 能 促 进 细 胞 生 存 也 可 能 损 伤 细 胞 [14-15] 自 噬 的 调 控 非 常 复 杂,mTOR 是 其 中 的 中 心 信 号 调 节 因 子 mtor 是 一 种 非 典 型 的 丝 氨 酸 / 苏 氨 酸 激 酶, 在 细 胞 生 长 分 化 以 及 增 殖 等 功 能 中 起 着 中 心 调 节 的 作 用 [16-17] mtor 存 在 两 种 复 合 物 形 式, 与 自 噬 凋 亡 能 量 代 谢 相 关 的 主 要 是 mtorc1 [18] mtor 的 上 游 调 控 信 号 通 路 非 常 复 杂, 目 前 尚 未 完 全 阐 明, 大 体 上 可 分 为 PI3K/ Akt 依 赖 性 和 非 依 赖 性 两 大 途 径 自 噬 在 肝 病 的 发 展 中 起 到 了 重 要 的 作 用 [19], 通 过 药 物 调 节 自 噬 已 经 成 为 肝 病 治 疗 的 新 思 路 [20] 本 研 究 中, 和 假 手 术 组 比 较, 电 镜 下 自 噬 体 数 量 和 自 噬 标 志 性 蛋 白 LC3-II 的 表 达 水 平 均 显 示,HIRI 后 肝 细 胞 自 噬 明 显 增 强, 开 放 肝 门 前 给 予 NaHS 预 处 理 后, 再 灌 注 4 h 时 NaSH 组 自 噬 比 假 手 术 组 强, 而 弱 于 HIRI 组 mtor 对 自 噬 产 生 负 向 调 节 作 用, 雷 帕 霉 素 是 其 特 异 性 抑 制 剂, 能 通 过 抑 制 mtorc1 而 激 活 自 噬 HIRI 组 p-mtor/mtor 水 平 较 高,HIRI 可 以 通 过 抑 制 p-mtor 激 活 自 噬, 而 给 予 NaSH 后, 磷 酸 化 形 式 升 高, 抑 制 自 噬, 提 示 H 2 S 可 能 通 过 激 活 mtor 信 号 通 路 发 挥 肝 脏 保 护 作 用 RPM 组 雷 帕 霉 素 激 活 自 噬, 导 致 H 2 S 抑 制 LC3-II 表 达 的 作 用 明 显 减 弱, 但 不 能 完 全 阻 断 H 2 S 抑 制 自 噬 的 作 用, 表 明 H 2 S 抑 制 肝 硬 化 大 鼠 肝 细 胞 自 噬 的 作 用 至 少 部 分 是 通 过 mtor 信 号 转 导 通 路 介 导 的 本 研 究 显 示 H 2 S 可 能 通 过 调 节 自 噬 发 挥 减 轻 肝 硬 化 大 鼠 HIRI 的 作 用, 对 H 2 S 及 其 与 自 噬 的 关 系 进 行 了 初 步 研 究, 在 再 灌 注 期, 抑 制 自 噬 的 过 度 表 达 可 能 有 利 于 对 抗 HIRI 损 伤, 其 具 体 机 制 有 待 进 一 步 深 入 研 究 参 考 文 献 [1] 何 宗 全, 章 安 庆, 叶 显 道, 等. 牛 磺 熊 去 氧 胆 酸 对 大 鼠 肝 脏 缺 血 再 灌 注 损 伤 的 保 护 作 用 [J]., 2015, 24(7):990-995. He ZQ, Zhang AQ, YE XD, et al. Protective effect of tauroursodeoxycholic acid against hepatic ischemia reperfusion injury in rats[j]. Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(7):990-995. [2] Li L, Jiang HK, Li YP, et al. Hydrogen sulfide protects spinal cord and induces autophagy via mir-30c in a rat model of spinal cord ischemia-reperfusion injury[j]. J Biomed Sci, 2015, 22:50. doi: 10.1186/s12929-015-0135-1. [3] 章 正 威, 王 楷, 梅 铭 惠. 不 同 入 肝 血 流 阻 断 法 行 肝 硬 化 大 鼠 肝 切 除 的 比 较 [J]., 2014, 23(1):58-63. Zhang ZW, Wang K, Mei MH. Comparison of different hepatic inflow occlusion methods for hepatectomy in rats with liver cirrhosis[j]. Chinese Journal of General Surgery, 2014, 23(1):58-63. [4] 杜 津, 王 国 林. 硫 化 氢 对 大 鼠 肝 缺 血 再 灌 注 损 伤 的 影 响 [J]. 中 华 麻 醉 学 杂 志, 2011, 31(9):1136-1138.
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