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顼舒
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1 227 徐琳琳, 马奕, 许雅君, 李勇 ( 北京大学公共卫生学院营养与食品卫生学系, 北京 ) 目的 : 探讨乳清蛋白肽对幼年大鼠体格长骨发育及血液参数的影响方法 :40 只雄性断乳 SD 大鼠随机分为 1 个阴性对照组和低 (0.225%) 中 (0.45%) 高 (1.35%)3 个乳清蛋白肽干预组, 每组 10 只动物连续喂养 42d, 期间每周测量体重和身长一次, 计算食物利用率, 实验结束时对每只大鼠进行血液常规和生化指标检测, 并测定股骨长度直径骨矿物质含量和密度结果 : 中高剂量乳清蛋白肽干预组大鼠体重及食物利用率较对照显著增高 ; 高剂量组大鼠股骨近端骨密度及矿物质含量较对照显著增加 ; 乳清蛋白肽干预组大鼠股骨干重长度和直径较对照有增加趋势, 但尚未见统计学差异 ; 中高剂量组大鼠血肌酐和血尿酸含量较对照组显著降低结论 : 一定剂量的乳清蛋白肽能够促进幼年大鼠体格发育和增加长骨矿物质密度乳清蛋白肽 ; 生长发育 ; 骨矿物质密度 Effect of Whey Protein Peptides on Growth and Development of Young Rats XU Lin-lin,MA Yi,XU Ya-jun,LI Yong (Department of Nutrition and Food Hygiene, School of Public Health, Peking University, Beijing , China) Abstract :Objective: To investigate the effect of low-molecular-weight whey protein peptides (WPP) on physical development, bone growth and blood parameters in young rats. Methods: Forty male SD rats were randomly divided into 4 groups of 10 rats each, designated as control group, groups with WPP intervention at low, middle and high doses, which were 0.225%, 0.45 % and 1.35 % WPP, respectively. All rats were subjected to feeding for 42 consecutive days. Body weight and length of each rat were measured once a week. Blood parameters, femur length and diameter, bone mineral content and bone density of each rat were analyzed at the end of experimental period. Results: WPP intervention at the dose of 0.45 % and 1.35 % resulted in an obvious increase in body weight, femur length, and food utilization rate of rats. Compared to the control group, the bone mineral density and mineral content of proximal femur in rats treated with 1.35 % WPP exhibited a significant increase although no significant impact on femur dry weight, length and diameter. Moreover, the levels of serum creatinine and uric acid in rats treated with 0.45 % and 1.35 % WPP were significantly decreased. Conclusion: WPP could promote growth and development of young rats, and enhance their bone mineral density. Key words:whey protein peptides;growth and development;bone mineral density 中图分类号 : R151.3;R153.2 文献标识码 :A 文章编号 : (2010) 近年来, 生物活性肽以其吸收快和生物活性方面的优势已成为蛋白质营养研究的热点之一而乳源性活性肽以其独特的营养价值备受关注乳清蛋白是牛乳干酪生产中去除酪蛋白后剩余的乳清中所含的一种优质蛋白, 大部分为 α- 乳白蛋白和 β- 乳球蛋白, 占总蛋白的 70%~80%, 其他的蛋白组分为牛乳血清白蛋白乳铁蛋白乳过氧化酶免疫球蛋白生长因子和许多生 [1] 物活性因子及酶, 其富含半胱氨酸和蛋氨酸乳清蛋白的生物价比许多高品质的膳食蛋白 ( 如鸡蛋白牛肉蛋白及大豆蛋白 ) 高, 适合婴幼儿尚未发育完善的胃肠道国内外研究发现, 乳清蛋白的水解产物相对分子质量主要分布在 300~1400, 并且绝大部分集中在 1000 以 [2-3] 下现有研究显示, 乳清蛋白水解得到的小肽在体 [4] [5-6] [7-9] 内可呈现清除羟自由基抗高血压免疫调节促 [10-12] 进矿物质吸收等活性但对幼年动物体格和长骨发育的影响还未见报道本研究研究小分子量乳清蛋白肽对幼年大鼠体格及长骨发育的影响, 旨在为乳清蛋白肽在婴幼儿食品中的应用提供实验依据 1 材料与方法收稿日期 : 作者简介 : 徐琳琳 (1986 -), 女, 硕士研究生, 研究方向为营养与疾病 xll @163.com

2 , Vol. 31, No. 01 食品科学营养卫生 1.1 材料乳清蛋白肽 (whey protein peptides,wpp) 由北京中食海氏生物技术有限公司提供, 淡黄色粉末, 纯度为 79.4%, 相对分子质量主要分布在 180~1000 范围内 1.2 实验动物 SPF 级雄性断乳 SD 大鼠 40 只, 体重 40~50g 由北京大学医学部试验动物中心提供 ( 动物合格证号 : SCXK , 实验动物使用许可证号 :SYXK( 京 ) , 实验动物生产许可证号 :SYXK( 京 ) ) 动物饲养条件 :SPF 级动物室, 温度范围 (22 ± 2), 相对湿度 50%~60%, 昼 : 夜 12h:12h 饲料合格证号 : 京动许字 (2000) 第 015 号, 由北京市科奥协力饲料有限公司提供 1.3 仪器与设备 XR-36 双能 X 线骨密度仪美国 Norland 公司 ; FA1004A 电子天平中国上海精天电子仪器厂 1.4 方法动物分组实验动物适应性喂养 3d 后随机分为 4 组, 每组 10 只动物对照组给予普通大鼠饲料, 低中高 3 个干预剂量组将普通大鼠饲料中的部分豆粉替换成 WPP, 各组饲料中 WPP 含量分别为 0.225% 0.45% 1.35% 连续喂养 42d, 期间各组动物自由进食饮水体格发育指标测定实验开始时用直尺测量大鼠颅顶到尾根的长度, 即为初始身长, 同时测量每只大鼠的初始体重实验期间内每周测量大鼠的身长体重和进食量, 并计算食物利用率血液指标测定 42d 后股动脉放血处死动物, 留取血液标本, 进行血液常规和生化参数检测骨骼发育指标测定分离每只大鼠的左侧股骨除净附着在骨上的肌肉和软组织后迅速干燥, 称量股骨干重测量股骨长度和直径, 最后进行骨矿物质密度扫描股骨干重测量将除净软组织的股骨置于恒重盒中, 在干燥箱充分干燥 10h 至恒重 ( 条件为先开盖 80 持续 6h, 然后闭盖 115 持续 4h) 恒重后, 迅速以分析天平称量股骨干重股骨长度和直径测量测量干重后的股骨用游标卡尺测得股骨大转子和股骨颈汇合处最低点到股骨髁间窝的距离, 为股骨长度第三转子下行至股骨干交接之处的直径定为股骨直径骨矿物质含量和密度测量将各股骨用双能 X 线骨密度扫描仪进行骨密度和骨矿物质含量分析分析时选择股骨近心端远心端中上 1/3 交界处 3 点进行组间比较 1.5 统计学分析实验结果用 x ± s 表示, 以 SPSS16.0 软件进行单因素方差分析 (one-way ANOVA) 方差齐性检验显示方差齐时, 以 SNK 和 LSD 检验进行组间数据比较 ; 方差不齐时, 则采用 Tamhane's T2 和 Dunnett's C 检验进行组间数据比较 2 结果与分析 2.1 乳清蛋白肽对 SD 大鼠体格发育和食物利用率的影响由表 1 可知,0.45%WPP 和 1.35%WPP 剂量组大鼠体重增加第 1~6 周均显著高于对照组 (P < 0.01) 由表表 1 乳清肽对幼年 SD 大鼠体重增加的影响 Table 1 Effect of whey protein peptides on body weight of young SD rats 组别 n 第 1 周体重增加 /g 第 2 周体重增加 /g 第 3 周体重增加 /g 第 4 周体重增加 /g 第 5 周体重增加 /g 第 6 周体重增加 /g 对照 ± ± ± ± ± ± %WPP ± ± ± ± ± ± % WPP ± 5.00** ± 5.73** ± 7.27** ± 5.18** ± 0.42** ± 7.52** 1.35% WPP ± 4.88** ± 5.46** ± 4.72** ± 8.50** ± 6.84** ± 6.66** 注 : *. 和对照组比较,P<0.05; **. 和对照组比较,P<0.01 下同表 2 乳清肽对幼年 SD 大鼠身长的影响 Table 2 Effect of whey protein peptides on body length of young SD rats 组别 n 第 1 周身长增长 /cm 第 2 周身长增长 /cm 第 3 周身长增长 /cm 第 4 周身长增长 /cm 第 5 周身长增长 /cm 第 6 周身长增长 /cm 对照 ± ± ± ± ± ± % WPP ± ± ± ± ± ± % WPP ± ± ± ± ± ± % WPP ± ± ± ± 0.32* 1.86 ± 0.32* 1.20 ± 0.48*

3 229 表 3 乳清肽对幼年 SD 大鼠食物利用率的影响 Table 3 Effect of whey protein peptides on food utilization rate of young SD rats 组别 n 第 1 周食物利用率 /% 第 2 周食物利用率 /% 第 3 周食物利用率 /% 第 4 周食物利用率 /% 第 5 周食物利用率 /% 第 6 周食物利用率 /% 对照 ± ± ± ± ± ± % WPP ± ± ± ± ± ± % WPP ± 1.85* ± 1.36* ± 0.24* ± 1.80* ± 1.80* ± 1.53* 1.35% WPP ± 2.21* ± 2.43* ± 0.19* ± 0.66* ± 1.66* ± 0.59* 表 4 乳清肽对幼年 SD 大鼠血常规指标的影响 Table 4 Effect of whey protein peptides on blood parameters of young SD rats 组别 n 粒细胞计数 /L 粒细胞百分比 /% 血细胞容积比血红蛋白质量浓度 /(g/l) 淋巴细胞计数 /L 淋巴细胞百分比 /% 平均红细胞血红蛋白含量 /pg 平均红细胞血红蛋白质量浓度 /(g/l) 对照 ± ± ± ± ± ± ± ± %WPP ± ± ± ± ± ± ± ± %WPP ± ± ± ± ± ± ± ± %WPP ± ± ± ± ± ± ± ±5.85 红细胞平均压积体积 /fl 单核细胞计数 /L 单核细胞百分比 /% 血小板平均体积 /fl 血小板容积比血小板分布宽度 /% 红细胞计数 /L 白细胞计数 /L 红细胞体积分布宽度 /% 55.90± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.50 表 5 乳清肽对幼年 SD 大鼠血生化指标的影响 Table 5 Effect of whey protein peptides son biochemical index of blood in young SD rats 组别 n 谷草转氨酶活性 /(IU/L) 总蛋白质量浓度 /(g/l) 白蛋白质量浓度 /(g/l) 血糖浓度 /(mmol/l) 甘油三酯浓度 /(mmol/l) 血尿素氮浓度 /(mmol/l) 对照 ± ± ± ± ± ± %WPP ± ± ± ± ± ± %WPP ± ± ± ± ± ± %WPP ± ± ± ± ± ± 2.01 血肌酐浓度 /(μmol/l) 胆固醇浓度 /(mmol/l) 谷丙转氨酶活性 /(IU/L) 高密度脂蛋白浓度 /(mmol/l) 血尿酸浓度 /(μmol/l) 血清白 / 球蛋白含量 (g/g) 血清球蛋白质量浓度 /(g/l) ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± 11.78* 1.93 ± ± ± 4.24** 1.68 ± ± ± ± 11.36** 2.03 ± ± 可知,1.35%WPP 干预组第 4~6 周身长增长显著高于对照组 (P < 0.05) 由表 3 可知,0.45%WPP 和 1.35%WPP 剂量组在第 1~6 周内每周的食物利用率均显著高于对照组 (P < 0.05) 2.2 乳清蛋白肽对 SD 大鼠血液指标的影响由表 4 可知, 血常规指标, 各 WPP 干预组与对照组相比差异均无显著性由表 5 可知, 血液生化指标, 1.35%WPP 剂量组血肌酐 (CREA) 的含量显著低于对照组 (P < 0.01),0.45%WPP 和 1.35%WPP 剂量组血尿酸 (UA1) 的含量均显著低于对照组 (P < 0.05 和 P < 0.01) 2.3 乳清蛋白肽对股骨干重长度和直径的影响由表 6 可知, 随着各剂量组 WPP 含量的增加,SD 大鼠股骨长度直径和干重均有增加趋势但经统计学分析,WPP 干预组与对照组的差异无显著性表 6 乳清肽对幼年 SD 大鼠股骨长度直径及干质量的影响 Table 6 Effect of whey protein peptides on length, diameter and dry weight of femur in young SD rats 组别 n 股骨干质量 /g 股骨长度 /cm 股骨直径 /cm 对照 ± ± ± %WPP ± ± ± %WPP ± ± ± %WPP ± ± ± 乳清蛋白肽对股骨矿物质含量和密度的影响由表 7 可知,1.35%WPP 剂量组大鼠股骨近端矿物质密度 (bone mineral density,bmd) 和矿物质含量 (bone mineral content,bmc) 均显著高于对照组

4 , Vol. 31, No. 01 食品科学营养卫生表 7 乳清肽对幼年 SD 大鼠股骨骨矿物质含量和密度的影响 Table 7 Effect of whey protein peptides on bone mineral content and bone density of femur in young SD rats 组别 n 近端 BMC/g 近端 BMD/(g/cm 2 ) 远端 BMC/g 远端 BMD/(g/cm 2 ) 中上 1/3BMC/g 中上 1/3BMD/(g/cm 2 ) 对照 ± ± ± ± ± ± %WPP ± ± ± ± ± ± %WPP ± ± ± ± ± ± %WPP ± 0.004** 0.30 ± 0.11* 0.11 ± ± ± ± 讨论本研究结果显示, 在膳食中添加一定量的乳清蛋白肽可以促进幼年 SD 大鼠的生长发育, 表现在可以促进体重及身长的增加传统的消化模式认为, 动物机体对蛋白质的吸收只能以氨基酸的形式进行但近些年的研究证明, 蛋白质经消化道酶促水解后, 主要以小肽的形式被吸收, 国内外研究也相继证实了小肽可以被完 [13-14] 整转运吸收的观点小肽的吸收具有耗能低转运速度快载体不易饱和等优点, 有降低游离氨基酸的吸收竞争促进氨基酸的吸收促进蛋白质的合成和 [15-16] 矿物质元素的吸收等作用乳清蛋白肽主要为小肽, 能被快速吸收, 及时输送更多的氨基酸到组织中, 刺激提高蛋白质合成速度, 从而使得净蛋白获得率提高, 达到增加体重的效果本研究结果还提示, 幼鼠补充 6 周乳清蛋白肽后股骨近端骨密度和骨矿物质含量较对照组显著增加, 这可能与乳清蛋白肽促进骨矿物元素, 如钙磷锌等的吸收和在骨骼中沉着有关儿童期的骨量积累对个体成年后的骨骼状况影响很大, 尽管骨质疏松通常在中老年才发生, 但国内外研究表明, 儿童时期峰值骨量每增加 5% 将会使骨质疏松性骨折发生的危险性降低 40% [17] 因而临床专家认为, 成年后的骨质疏松症实际是儿科疾病在中老年时期的表现研究显示, 骨矿物质密度每 [17] 减少 1 个标准差, 骨折危险就增加 1.5~2 倍由此可见, 增加骨量, 无疑是减少骨质疏松性骨折危险的重要措施生命早期取得的峰值骨量和生命后期的骨质丢失率, 是影响个体发生骨质疏松危险性的两个主要因素世界卫生组织倡导的骨质疏松的初级预防是在骨骼生长发育期使骨量达到更高峰值, 但我国长久以来形成的植物性食物为主的膳食模式使得我国人民对以钙元素为首的骨相关元素的吸收和利用明显不足, 因而成年后的骨量峰值普遍偏低饮奶能够在一定程度上补充钙元素, 然而牛奶中的钙虽较易吸收, 单位体积所含的总体钙量却相对较少 ; 另一方面, 目前市面上的补钙产品多以 CaCO3 为主, 含钙量虽然高, 吸收利用率却显得相对较低同时, 构成骨组织的元素有多种, 它们按照一定比例组合成骨骼, 单纯补充钙元素而忽视其他元素, 也不能真正起到强健骨骼的作用本研究中发现的幼年大鼠补充 6 周乳清蛋白肽后, 其骨密度具有一定程度的增加, 提示其对增加骨量峰值具有积极作用这一效果仅在最高剂量组出现, 说明需要达到一定的生理剂量, 乳清蛋白肽才能充分发挥其促进骨矿物质沉着的作用血液生化参数检测结果显示, 高剂量乳清蛋白肽干预组大鼠血肌酐的含量显著低于对照组, 中高剂量组血尿酸的含量显著低于对照组血肌酐是人体肌肉代谢的产物, 在肌肉中, 肌酸主要通过不可逆的非酶脱水反应缓慢地生成肌酐, 再释放到血液中随尿排泄本研究中血肌酐含量的降低可能与乳清蛋白肽降低了肌肉细胞分解速度有关 ; 从另一方面讲, 肌细胞分解减少, 储存增多, 可能与本实验中发现的动物体重较对照明显增加有关尿酸是人体内嘌呤核苷酸的分解代谢产物, 嘌呤核苷酸 80% 由细胞代谢产生, 每天代谢产生的尿酸主要从肾脏排出体外嘌呤核苷酸代谢异常或有肾脏疾患的病人, 长期的高尿酸血症很易引发痛风本研究发现的乳清蛋白肽降低大鼠血尿酸水平, 可能提示其具有促进肾脏对尿酸的滤过作用, 其具体机制还有待进一步探讨, 但这对于临床痛风病的预防可能具有积极意义综上所述, 低分子量的乳清蛋白肽具有促进幼年大鼠生长发育增加长骨骨量和降低血尿酸和肌酐的作用, 这些作用对于处于生长发育期的婴幼儿来说均具有积极意义进一步探讨乳清蛋白肽在人类婴幼儿使用的安全性对于婴幼儿健康促进和婴幼儿食品的开发均具有现实意义参考文献 : [1] 李勇, 蔡木易. 肽营养学 [M]. 北京 : 北京大学医学部出版社, [2] LIU L, ZHU C, ZHAO Z. Analyzing molecular weight distribution of whey protein hydrolysates[j]. Food and Bioproducts Processing, 2008, 86(1):1-6. [3] 李晓东, 牛治霞, 高莉莉, 等. 乳清蛋白源生物活性肽段序列及其功能 [J]. 中国乳品工业, 2007, 35(2): [4] 包怡红, 李雪龙, 徐思源, 等. 乳清蛋白肽的制备及羟自由基的清除作用 [J]. 中国乳品工业, 2006, 34(8): [5] 包怡红, 徐思源. 乳清蛋白肽对高血压大鼠血压及血管紧张素转化酶 (ACE) 活性的影响 [J]. 食品科学, 2007, 28(11):

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211 better than those in the control group, with significant difference between two groups (P < 0.05). The ocular hypertension of patients in the cont

211 better than those in the control group, with significant difference between two groups (P < 0.05). The ocular hypertension of patients in the cont 210 毛果芸香碱联合拉坦前列素治疗原发性急性闭角型青光眼的疗效观察符元党 1, 郑振优 2, 林再雄 2, 周吉良 1. 昌江黎族自治县中西医结合医院, 海南昌江 572700 2. 海南医学院附属医院眼科, 海南海口 570100 1 摘要 : 目的探讨

, Vol. 31, No. 01 食 品 科 学 营 养 卫 生 1.1 材 料 乳 清 蛋 白 肽 (whey protein peptides,wpp) 由 北 京 中 食 海 氏 生 物 技 术 有 限 公 司 提 供, 淡 黄 色 粉 末, 纯 度 为 79.4%, 相 对

, Vol. 31, No. 01 食品科学营养卫生 1.1 材料乳清蛋白肽 (whey protein peptides,wpp) 由北京中食海氏生物技术有限公司提供, 淡黄色粉末, 纯度为 79.4%, 相对