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村软昝
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1 1584 doi /j.issn J South Med Univ, 2014, 34(11): 基础研究 TLR4 NF-κB 陈晓琳, 唐成林, 谢辉, 唐念珍, 郜婕, 刘仁建重庆医科大学中医药学院, 重庆摘要 : 目的探讨电针对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织 toll 样受体 4(TLR4) 核因子 κb(nf-κb) 表达的影响及意义方法 48 只雄性 SD 大鼠随机分成正常组模型组早期干预组晚期干预组, 每组各 12 只 ; 模型组早期干预组晚期干预组均给予高脂饲料喂养 5 周建立非酒精性脂肪性肝病模型, 在 5 周末处死每组大鼠各 1 只, 以验证造模成功早期干预组和晚期干预组均电针足三里丰隆三阴交,1 次 /d,20 min/ 次, 连续治疗 21 d 针刺后检测各组大鼠血清 ALT AST TC TG 的变化情况, 采用荧光定量 PCR 和 Werstern blot 检测大鼠肝脏 TLR4 和 NF-κB 的 mrna 表达情况结果模型组大鼠的 ALT AST TC TG 及肝脏 TLR4 NF-κB 的表达均高于其余 3 组, 差异有统计学意义 (P<0.05); 针刺后各干预组的 ALT AST TC TG 及肝脏 TLR4 NF-κB 的表达均显著下降, 差异有统计学意义 (P<0.05) 结论电针足三里丰隆三阴交可以调节血脂及肝功, 对非酒精性脂肪肝有一定良性调节作用, 其作用机制可能与电针可以调节脂代谢, 同时可以下调肝脏组织 TLR4 NF-κB 的表达, 减轻炎症对非酒精性脂肪性肝病的影响有关关键词 : 非酒精性脂肪性肝病 ; 电针 ;toll 样受体 4; 核因子 -κb Effect of electro-acupuncture on hepatic Toll-like receptor 4 and nuclear factor κb expressions in rats with non-alcoholic fatty liver disease CHEN Xiaolin, TANG Chenglin, XIE Hui, TANG Nianzhen, GAO Jie, LIU Renjian Institute of Chinese Medicine, Chongqing Medical University, Chongqing , China Abstract: Objective To investigate the effect of electro-acupuncture on Toll-like receptor 4 (TLR4) nuclear factor κb (NF-κB) expressions in the liver of rats with non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). Methods SD rat models of NAFLD induced by feeding high-fat diet for 5 weeks were subjected to early or late intervention with electro-acupuncture at the acupoints Zusanli, Fenglong and Sanyinjiao for 20 min once daily for 21 consecutive days. The changes in serum ALT, AST, TC, and TG levels were determined in the rats and hepatic expressions of TLR4 and NF-κB detected with quantitative fluorescence PCR and Western blotting after treatments. Results Serum ALT, AST, TC, and TG levels and TLR4 and NF-κB levels increased significantly after NAFLD onset (P<0.05), and were markedly reduced by interventions with electro-acupuncture (P<0.05). Conclusion Electro-acupuncture at the acupoints Zusanli, Fenglong and Sanyinjiao can modify blood lipid and hepatic function to produce positive effect on NAFLD possibly by modifying lipid metabolism, lowering expressions of TLR4 and NF-κB in the liver, and reducing the impact of inflammation on NAFLD. Key words: non-alcoholic fatty liver disease; electro-acupuncture; Toll-like receptor 4; nuclear factor κb 非酒精性脂肪性肝病 (non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD) 是一种指除外酒精和其他明确的损肝因素所致的, 以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变性为主要特征的临床病理综合征 NAFLD 可分为单纯性脂肪肝非酒精性脂肪肝炎和非酒精性脂肪肝炎相关性肝硬化 NAFLD 最终出现炎症坏死纤维化 ; 炎症是联系 [1] 脂肪肝肝纤维化肝癌的桥梁张莉等报道炎症和免疫系统也成为代谢性疾病 ( 如肥胖 NAFLD) 发生和发展的起始因素 Toll 样受体 4(Toll-like receptor 4, 收稿日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金 ( ) Supported by National Natural Science Foundation of China ( ). 作者简介 : 陈晓琳, 硕士, chenxlhappy@126.com 通信作者 : 唐成林, CYTCL996@163.com TLR4) 表达于许多的免疫和非免疫细胞, 活化 TLR4 将诱导产生一系列的炎性介质从而产生强有力的炎性反 [2] [3-6] 应研究表明肥胖引起的脂肪堆积氧化的低密度脂蛋白游离脂肪酸饱和脂肪酸及肠源性内毒素等作为上游因子可以激活 TLR4 NF-κB 是 TLR4 的下游因子,TLR4 被激活, 导致下游的 NF-κB 活化增强, 最终导致一系列炎性介质大量释放, 加重肝脏损害在前期研究显示电针可以改善肥胖脂肪组织的炎症反应状态, 对体质量及血脂胰岛素抵抗等有良性调节作用 ; 电针足三里和三阴交可改善肥胖脂肪组织炎性反应状态, 减轻肥胖大鼠体质量 ; 电针可抑制大鼠机体脂肪细胞的 [7-8] 内质网应激反应, 改善大鼠的肥胖炎症状态也有研究报道姜黄素可以通过抑制 NF-κB 的促炎信号通路的表达, 抑制炎症因子 TNF-α 及 IL-6 的产生, 来调控炎症

2 J South Med Univ, 2014, 34(11): [9] 信号通路, 但目前电针对 NAFLD 大鼠肝脏组织的 TLR4 和 NF-κB 调控的研究较少, 本研究用电针刺激足三里丰隆三阴交, 观察电针对 NAFLD 大鼠肝脏组织的 TLR4 和 NF-κB 表达的影响, 探讨电针对 NAFLD 炎性反应的作用及意义 1 材料与方法 1.1 实验动物健康清洁级 SD 大鼠 48 只, 雄性,5 周龄, 体质量 110±20 g, 由重庆医科大学实验动物中心提供 ( 医学动物合格证号 SCXK 渝 ) 实验动物处置经重庆医科大学伦理委员会批准将 48 只 SD 雄性大鼠适应性喂养 1 周后, 按随机数字表选取 12 只为正常组 A 晚期干预组 B 模型组 C 早期干预组 D 组正常组予以普通饲料喂养, 其余 3 组均以高脂饲料配方高脂饲料 [10] 配方 : 胆固醇 2%, 胆酸钠 0.5%, 丙硫氧嘧啶 0.2%, 蔗糖 5%, 猪油 10% 普通基础饲料 82.3% 造模, 饲料由重庆医科大学制备, 高脂饲料喂养 5 周后每组均处死 1 只大鼠, 对比观察造模情况 1.2 主要试剂胆固醇购自上海生工 ( 批号 0836B511), 胆酸钠购自上海生工 ( 批号 MC0223B5012J), 蔗糖购自成都市科龙化工试剂厂 ( 批号 ), 丙硫氧嘧啶购自苏州恒益医药原料有限公司 ( 批号 ), 天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒丙氨酸氨基转移酶试剂盒总胆固醇试剂盒甘油三酯试剂盒均购自宁波瑞源生物科技有限公司 ( 批号分别为 , , , ) 华佗牌针灸针 (0.25 mm 0.25 mm, 中国苏州 ); 华佗牌 SDZ-17 型电针仪 ( 苏州医疗用品厂有限公司 ) 1.3 针刺方法验证造模成功高脂饲料喂养 5 周后同时处死各组 1 只大鼠,HE 染色观察大鼠脂肪变性, 验证造模情况 5 周后, 正常组模型组早期干预组晚期干预组分别处死大鼠 1 只, 肉眼观察正常组大鼠肝脏颜色呈暗红色 ; 造模组早期干预组晚期干预组大鼠肝脏呈奶油黄色, 有油腻感, 体积增大, 薄膜稍紧张, 边缘圆顿 HE 染色正常组肝细胞无明显病变, 结构清晰, 仅个别细胞内有少量脂滴 ; 模型组早期干预组晚期干预组散在大量脂滴变性, 肝细胞体积较正常明显增加, 胞质内充满大量脂肪空泡, 界限不清楚 ; 造模成功 ( 图 1) A B C D 图 1 各组大鼠肝脏外观和组织病理学比较 Fig.1 Hepatic histopathology of the rats in each group (HE staining, original magnification: 200). A: Normal group; B: Model group; C: Early intervention group; D: Late intervention group 实验处理造模成功后于每日下午 14:00 开始固定各实验组大鼠于自制固定器上早期干预组在适应性喂养高脂饲料 1 周后开始针刺, 晚期干预组在高脂饲料喂养 5 周后开始针刺均选取单侧足三里三阴交丰隆穴, 左右侧交替取穴电针接足三里丰隆穴, 电针频率为 20 Hz, 连续波, 电针强度为 5 V,1 次 /d, 20 min/ 次, 连续治疗 21 d [11] 正常组和模型组大鼠不进行针刺, 每天固定, 以排除大鼠应激所导致的实验偏差针刺大鼠取穴标准参照实验针灸学 [12] 1.4 指标检测标本采集治疗结束后各组大鼠禁食过夜, 用 10% 水合氯醛 (1 ml/100 g) 腹腔注射麻醉后心脏取血 3 ml, 静置 20 min, 离心机以 3000 r/min 分离血清, 收集上清液, 静置于 4 冰箱中待测, 按甘油三酯 (TG) 总胆固醇 (TC) 丙氨酸转氨酶 (ALT) 谷草转氨酶 (AST) 试剂盒说明检测相应指标 ; 并迅速摘取肝脏, 比较色泽外观, 取肝右叶肝脏组织迅速放入 -80 液氮罐中, 后存入 -80 冰箱, 避免反复冻融, 备用 ; 同时取 0.5 cm 0.5 cm 大小肝组织用 10% 甲醛固定, 做常规 HE 染色, 光镜下进行病理形态学观察实时荧光定量 PCR 检测肝脏 TLR4 和 NF-κB mrna 的表达按照 Trizol Reagent 试剂盒说明提取肝脏组织总的 RNA, 按 ReverTra Ace-α- 反转录试剂盒操作步骤进行引物 Invitrogen Biotechnology Co,LTD 中国公司合成,PCR 引物见表 1 实时定量 RT-PCR 反应按 TOYOBO THUNDERBIRD SYBR qpcr Mix 试剂盒操作步骤进行,PCR 扩增反应条件 :95 预变性 1 min, 循环 40 次,95,15 s 58,20 s 72,20 s,

3 J South Med Univ, 2014, 34(11): 末端延伸 72,5 min, 溶解曲线 72 95, 每 20 s 升温 1 结果处理采用 ΔΔCT 法 :A=CT ( 目的基因, 待测样本 )- CT ( 内标基因, 待测样本 );B=CT ( 目的基因, 对照样本 )- CT ( 内标基因, 对照样本 );K=A-B, 表达倍数 =2-K 1.5 统计学处理用 SPSS 130 统计学软件进行数据分析, 计量资料用均数 ± 标准差表示, 组间比较用方差分析,P<0.05 为差异有统计学意义表 1 引物序列 Tab.1 Primer sequences Name TLR4 NF-κB Action Primer sequences(5'-3') AGTTTAGAGAATCTGGTGGCTGTG TTCCCTGAAAGGCTTGGTCT CTGATGTGCATCGGCAAGTGG CAGAAGTTGAGTTTCGGGTAGGC CTGAGAGGGAAATCGTGCGT CCACAGGATTCCATACCCAAGA Western blot 检测肝脏 TLR4 NF-κB 蛋白的表达提取细胞总蛋白, 配置蛋白标准液, 测定并绘制标准曲线, 制备 SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳, 按照 200 ma 1 h 条件的进行转膜, 免疫反应将转好的膜于室温下在脱色摇床上用 5% 的脱脂牛奶 (0.5% TBST 配 ) 封闭 1 h; 稀释一抗 (TBST 溶解的 5% 脱脂牛奶 ),4 过夜 ; 用 TBST 在室温下脱色摇床上洗 3 次,5 min/ 次 ; 将二抗用 TBST 稀释 3000 倍, 室温下孵育 30 min, 用 TBST 在室温下脱色摇床上洗 3 次,5 min/ 次根据不同的光强度调整曝光条件, 显影定影将胶片进行扫描存档, 以 β-actin 为内参, 以 Quantity One4.6(Bio-rad 公司 ) 图像分析软件进行 Western blot 结果分析 Fragment length(bp) 结果 2.1 各组大鼠一般情况比较实验期间正常组大鼠活动度可, 皮毛整洁, 体质量增加较快 ; 造模组大鼠体质量增长缓慢, 活动减少, 皮毛凌乱 ; 各干预组大鼠体重均增长缓慢, 活动减少, 皮毛呈浅黄色实验结束时, 各组大鼠全部存活 2.2 各组大鼠肝脏病理学变化肉眼观察 : 正常组大鼠肝脏颜色呈暗红色 ; 造模组大鼠肝脏呈奶油黄色, 有油腻感, 体积增大, 薄膜稍紧张, 边缘圆顿 ; 早期干预组大鼠肝脏颜色呈暗红色, 体积增大 ; 晚期干预组大鼠肝脏颜色呈暗红色, 颜色较预干预组淡 HE 染色光镜下观察 : 正常组肝脏肝小叶结构清晰, 细胞索排列整齐, 肝窦正常, 肝细胞无明显病变, 结构清晰, 仅个别细胞内有少量脂滴 ; 模型组散在大量脂滴变性, 肝细胞体积较正常明显增加, 胞质内充满大量脂肪空泡, 界限不清楚 ; 早期干预组与模型组相比, 肝细胞变性坏死炎细胞浸润明显改善, 与正常组比较有轻度肿胀 ; 晚期干预组广泛脂肪变性, 但是以小脂肪变性为主, 肝细胞脂肪变性程度较模型组明显下降, 肝细胞结构趋于正常 ( 图 2) A B C D 图 2 各组大鼠肝脏外观和肝脏病理学比较 Fig.2 Hepatic histopathology of the rats in each group after treatment (HE staining, original magnification: 200). A: Normal group; B: Model group; C: Early intervention group; D: Late intervention group. 2.3 各组大鼠的血脂及肝功情况比较模型组大鼠 AST ALT TC TG 明显高于正常组 (P<0.05); 各个干预组大鼠 AST ALT TC TG 明显下降, 均低于模型组 (P<0.05), 早期干预组和晚期干预组比较, 早期干预组 AST ALT TC TG 水平下调更明显 (P=0.042, P=0.000, P=0.755, P=0.078), 提示电针可以改善肝脏功能, 超早期干预对大鼠肝功影响更明显, 对大鼠血脂影响效果不显著, 可能和干预时间长短有关 ( 表 2) 2.4 实时荧光定量 PCR 检测大鼠肝脏 TLR4 NF-ΚB mrna 的表达 PCR 结果显示 : 模型组大鼠肝脏 TLR4 NF-κB 的

4 J South Med Univ, 2014, 34(11): 表 2 各组大鼠血脂及肝功能指标比较 Tab.2 Comparison of blood lipids and liver function in rats among the 4 groups (Mean±SD, n=11) ALT(U/L) AST(U/L) TC(mmol/L) TG(mmol/L) A 35.55± ± ± ±0.69 B 50.41±12.20 (2) ±16.24 (2) 2.12±0.91 (2) 1.39±0.26 (2) C ± ± ± ±0.72 D 40.08±8.83 (2) ±20.47 (2) 2.01±1.03 (2) 0.96±0.62 (2) P<0.05 vs group A; (2) P<0.05 vs group C. A: Normal (common diet) group; B: Late intervention group; C: Model (high-fat diet) group; D: Early intervention group. 表 3 各组大鼠肝脏 TLR4 NF-κB mrna 的表达比较 Tab.3 Comparison of expressions of TLR4 and NF-κB in rat liver tissues among the 4 groups (Mean±SD, n=11) Common diet group High-fat diet group Early intervention group Later intervention group 表达均显著高于正常组 (P<0.05); 针刺干预后晚期干预组和早期干预组大鼠肝脏 TLR4 NF-κB 的表达明显下降, 均低于模型组 (P<0.05); 早期干预组和晚期干预组比较 TLR4 NF-κB 的表达下调更明显 (P<0.05, 图 3, 表 3) 2.5 Western blot 检测大鼠肝脏 TLR4 NF-ΚB 蛋白表达结果比较结果显示 : 模型组大鼠肝脏 TLR4 NF-κB 的表达均显著高于正常组 (P<0.05); 针刺干预后晚期干预组和早期干预组大鼠肝脏 TLR4 NF-κB 的表达明显下降, 均低于模型组 (P<0.05), 早期干预组和晚期干预组比较 TLR4 NF-κB 的表达下调更明显 (P<0.05) Western blot 分析结果与 PCR 结果基本相符 ( 表 4) 3 讨论 TLR4 mrna 1.095± ± ±0.078 (2) 2.500±0.301 (2) NF-κB mrna 1.009± ± ±0.174 (2) 2.114±0.061 (2) P<0.05 vs common diet group; (2) P<0.05 vs high-fat diet group. 表 4 各组大鼠肝脏 TLR4 NF-κB 灰度值的表达比较 Tab.4 Levels (gray scale) of TLR4 and NF-κB expressions in rat liver in the 4 groups (Mean±SD, n=11) TLR4 mrna NF-κB mrna Common diet group High-fat diet group Early intervention group Later intervention group 1.095± ± ±0.078 (2) 2.500±0.301 (2) 1.009± ± ±0.174 (2) 2.114±0.061 (2) P<0.05 vs common diet group; (2) P<0.05 vs high-fat diet group. 中医学认为,NAFLD 形成的外因是嗜食肥甘膏粱厚味, 内因是脾肾运化输布失调, 肝胆疏泄调畅失司以调理脾肾利湿化痰活血化瘀为治则三阴交是足三阴经交会穴, 能健脾补肾化痰通络 ; 足三里是足阳明胃经的合穴, 可运脾除湿丰隆穴为足阳明经络穴, 功能化痰降浊运脾通腑, 是治痰要穴研究表明电 [14] 针丰隆穴对高脂血症有治疗作用研究显示电针可 [15] 以抑制下丘脑神经元肥胖抑制素最近的研究报道 [16] 电针可以改善 NFLAD 的胰岛素抵抗状态针刺可以调整机体脂质代谢过程中多种酶的功能, 增强其活性, 使血脂被更快地转化利用, 并促进肠肝循环, 使胆固醇转化胆汁酸及类固醇激素, 从而降低血脂含量现代医学认为 NAFLD 是一种遗传 - 环境 - 代谢应激相关性肝病, 其发病机制至今尚未完全明确 Day 等提出的二次打击以脂质代谢异常细胞因子氧应激和 [17-18] 脂质过氧化为特色的理论被广大学者认同改善 NAFLD 的炎症状态, 可以阻止 NAFLD 向肝纤维化肝硬化等肝脏进一步损伤的发展变化研究报道脂代谢紊乱可以激活 TLR4, 而长期高脂饮食致内毒素 (LPS) 通过门静脉进入肝脏, 内毒素与细胞膜上的结合受体 CD14 结合后, 激活 TLR4 [3-6],TLR4 通过将 LPS 转导途径的信号传至核内, 激活 NF-κB 和 [19] 相关因子的表达, 可促进炎症因子释放 ( 如 TNF-α 等炎性因子的释放 ) 研究显示,TLR4 是介导肝脏炎症反应的重要受体, 也是连接肝脏炎症反应和肝纤维化的中间物质, 脂多糖通过肝细胞表面的 TLR4 受体介导参与 [20-22] 调解肝纤维化的发展而 NF-κB 是 TLR4 信号通路下游的重要炎症因子,NF-κB 通过调节基因的表达来调控免疫应激反应炎症反应细胞黏附及对细胞凋亡的 [23] 保护作用 NF-κB 能调控多种与炎性反应有关的细胞因子, 如 TNF-α IL-1 等, 是介导过度炎性反应的核心 [24] 环节, 也是调控肝脏病理损害重要的细胞因子可以认为 TLR4 被激活, 引起下游的 NF-κB 的表达, 释放大量的炎症介质, 引起肝细胞的进一步坏死凋亡炎症等损害因此抑制 TLR4 NF-κB 的激活是改善 NAFLD 炎症状态的关键本实验我们选取足三里丰隆三阴交为穴, 实验结果显示模型组大鼠 AST ALT TC TG 及肝脏

5 J South Med Univ, 2014, 34(11): TLR4 NF-κB 的表达明显高于正常组, 表明模型组肝脏功能异常和脂质代谢紊乱, 可能 NAFLD 的炎症信号通路已被激活 ; 电针治疗后各干预组 TLR4 NF-κB 均显著下调, 提示 NAFLD 的炎症状态可能得到改善, 同时 AST ALT 均明显下降, 显示肝脏功能可能在逐渐恢复和脂代谢紊乱得到明显改善, 与研究显示针刺可以调理 [15] 脂代谢, 改善肝脏炎症状态是一致的 ; 其中我们发现除 TC TG 外早期干预组下调更明显, 肝脏病理学变化也一致, 但是各指标未恢复正常, 可能与治疗时间长短有关因 NAFLD 是遗传 - 代谢 - 环境刺激相关性疾病, 针对 NAFLD 高风险人群和高发人群, 我们可以超早期介入, 治疗效果更佳, 体现了中医治未病的理论, 为临床治疗 NAFLD 的患者及具有遗传易感性 NAFLD 的人群未病治疗提供一定的实验理论依据实验结果表明, 针灸改善 NAFLD 的炎症状态 : 一方面针刺可能直接或间接抑制炎症信号通路, 通过下调 TLR4 在 Kupffer 细胞和肝细胞上的表达, 从而使 TLR4 进入细胞内的信号减弱, 导致其下游因子 NF-κB 的激活和释放减少, 最终减少炎症介质的释放 ; 另一方面电针可多方面调节脂代谢, 减少肝脏脂质的沉积, 改善肝功能及 NAFLD 的脂代谢紊乱氧化应激等状态本实验表明电针可以改善脂代谢紊乱, 调控 NAFLD 炎性信号通路 TLR4 和 NF-κB 的表达, 从而调控 NAFLD 的炎性反应参考文献 : [1] 张莉, 宋海燕, 季光. 非酒精性脂肪肝代谢调控与炎症反应的共同通路 [J]. 中华肝脏病杂志, 2011, 19(5): [2] 张宇, 孙瑞利, 胡锦跃. Toll 样受体 4 信号转导研究进展 [J]. 国际病理科学与临床杂志, 2009, 29: [3] 王慧, 贾继东. Toll 样受体 4 与肝脏疾病 [J]. 肝脏, 2009, 14(3): [4] Miller YI, Chang MK, Binder CJ, et al. Oxidized low density lipoprotein and innate immune receptors[j]. Curr Opin Lipidol, 2003, 14(5): [5] Lee JY, Ye J, Gao Z, et al. Reciprocal modulation of Toll-like receptor-4 signaling pathways involving MyD88 and phosphatidylinositol 3-kinase/AKT by saturated and polyunsaturated fatty acids[j]. J Biol Chem, 2003, 278(39): [6] 戴鑫, 吕宗舜. 肠道屏障功能在非酒精性脂肪性肝病发病机制中的作用 [J]. 世界华人消化杂志, 2012, 20(8): [7] 余敏, 唐成林, 刘祖丽, 等. 不同强度电针对肥胖大鼠脂肪组织炎症相关因子的影响 [J]. 生命科学研究, 2011, 15(2): [8] 郜婕, 唐成林, 刘仁建, 等. 不同强度电针对肥胖大鼠附睾脂肪细胞内质网应激的影响 [J]. 中国病理生理杂志, 2013, 29(2): [9] 诸葛丽, 苏冬梅, 李健, 等. 姜黄素对小鼠非酒精性脂肪性肝炎炎症信号传导通路的调控作用 [J]. 中西医结合肝病杂志, 2011, 21(6): [10] 王倩, 管小琴. 大鼠非酒精性脂肪肝造模方法的改进 [J]. 世界华人消化杂志, 2007, 15(11): [11] 余敏, 肖晓秋, 唐成林, 等. 不同强度电针对肥胖大鼠血脂脂肪组织巨噬细胞趋化蛋白 -1 及肿瘤坏死因子 -α 的影响 [J]. 针刺研究, 2011, 36(2): [12] 李忠仁. 实验针灸学 [M]. 北京 : 中国中医药出版社, 2003: 329. [13] 刘祖丽, 唐成林, 余敏, 等. 电针刺激对肥胖大鼠脂肪组织 C 反应蛋白白细胞介素 -6 表达的影响 [J]. 重庆医科大学学报, 2011, 36(4): [14] 王琼, 黄浩, 乐薇, 等. 电针丰隆穴对高脂血症大鼠血脂及肝脏 ABCA1 PPARα 的调控作用 [J]. 中国中西医结合杂志, 2012, 32(9): [15]Kong XJ, Gao L, Peng H, et al. Effects of electro-acupuncture on expression of obestatin in hypothalamus of rats with simple obesity [J]. Zhong Xi Yi Jie He Xue Bao, 2010, 8(5): [16] 程井军, 任婕, 吴其恺, 等. 电针对非酒精性脂肪性肝炎大鼠胰岛素抵抗指数水平的影响 [J]. 湖北中医药大学学报, 2014, 16: [17] 池肇春. 非酒精性脂肪性肝病 [M]. 北京 : 军事医学科学出版社, 2009: [18] 田忠, 李溪源, 李异玲, 等. 肥胖及非酒精性脂肪性肝病患者血清内脂素的变化及意义 [J]. 中国医科大学学报, 2011, 40(4): [19]Li Z, Zhang de K, Yi WQ, et al. NF-kappaB p65 antisense oligonucleotides May serve as a novel molecular approach for the treatment of patients with ulcerative colitis[j]. Arch Med Res, 2008, 39(8): [20]Seki E, De Minicis S, Osterreicher CH, et al. TLR4 enhances TGF-beta signaling and hepatic fibrosis[j]. Nat Med, 2007, 13(11): [21]Hua J, Qiu de K, Li JQ, et al. Expression of toll-like receptor 4 in rat liver during the course of Carbon tetrachloride-induced liver injury[j]. J Gastroenterol Hepatol, 2007, 22(6): [22]Isayama F, Hines IN, Kremer M, et al. LPS signaling enhances hepatic fibrogenesis caused by experimental cholestasis in mice[j]. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2006, 290(6): G [23]Smahi A, Courtois G, Rabia SH, et al. The NF-kappaB signalling pathway in human diseases: from incontinentia pigmenti to ectodermal dysplasias and immune-deficiency syndromes[j]. Hum Mol Genet, 2002, 11(20): [24] 孟磊, 杨少奇. 槐定碱对大鼠肝硬化, 血浆内毒素的干预作用及对 TLR4,NF-κB 表达的影响 [D]. 宁夏 : 宁夏医科大学, ( 编辑 : 陈望忠 )

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷第 9 期 2015 年 5 月 1339 非酒精性脂肪性肝病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是一种与胰岛素抵抗遗

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷第 9 期 2015 年 5 月 1339 非酒精性脂肪性肝病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是一种与胰岛素抵抗遗 1338 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷第 9 期 2015 年 5 月九味肝泰胶囊对高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪肝的治疗作用陈菲 1 2,, 艾国 3, 盛柳青 1, 麻佳蕾 1, 黄正明 1. 金华职业技术学院医学院, 浙江金华