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1 密 级 : 公 开 学 号 : 硕 士 学 位 论 文 祛 斑 玉 容 方 对 色 素 沉 着 小 鼠 血 酪 氨 酸 酶 及 皮 肤 形 态 的 影 响 研 究 生 王 茜 指 导 教 师 学 科 专 业 所 在 学 院 毕 业 时 间 孙 亦 农 中 医 康 复 学 第 二 临 床 医 学 院 2013 年 6 月

2 Freckle of Yurong side of pigmentation mouse tyrosinase activity Morphology of the skin The scientific medical professional master's degree Candidate:qian wang Adviser:yi-nong sun Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing, China

3 学 号 : 硕 士 学 位 论 文 祛 斑 玉 容 方 对 色 素 沉 着 小 鼠 血 酪 氨 酸 酶 及 皮 肤 形 态 的 影 响 作 者 姓 名 王 茜 申 请 学 位 级 别 科 学 医 学 硕 士 学 位 指 导 教 师 姓 名 孙 亦 农 职 称 教 授 学 科 专 业 中 医 康 复 学 研 究 方 向 美 容 学 习 时 间 自 2010 年 9 月 5 日 起 至 2013 年 6 月 30 日 止 论 文 提 交 日 期 2012 年 4 月 6 日 论 文 答 辩 日 期 2012 年 5 月 28 日 学 位 授 予 单 位 南 京 中 医 药 大 学 学 位 类 型 科 学 医 学 专 业 硕 士 学 位

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5 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 目 录 中 文 摘 要... III ABSTRACT... V 前 言... 1 第 一 部 分 理 论 研 究... 3 一 祖 国 医 学 对 黄 褐 斑 的 认 识 及 研 究 古 代 文 献 对 黄 褐 斑 的 认 识 病 因 病 机 及 辨 证 分 型 中 医 治 疗 黄 褐 斑 的 研 究 中 医 治 疗 黄 褐 斑 的 其 他 疗 法 研 究... 7 二 现 代 医 学 对 黄 褐 斑 的 认 识 及 研 究 病 因 病 机 研 究 临 床 表 现 与 组 织 病 理 诊 断 及 鉴 别 诊 断 现 代 医 学 的 治 疗 方 法 第 二 部 分 实 验 研 究 一 实 验 材 料 实 验 动 物 实 验 药 品 实 验 仪 器 试 剂 和 药 物 试 剂 配 制 方 法 二 实 验 方 法 分 组 与 饲 养 建 立 黄 褐 斑 小 鼠 模 型 动 物 分 组 实 验 方 法 给 药 方 法 及 剂 量 取 材 及 指 标 测 定 三 实 验 结 果 各 组 小 鼠 血 中 酪 氨 酸 酶 含 量 各 组 小 鼠 皮 肤 HE 染 色 的 病 理 形 态 学 观 察 各 组 小 鼠 皮 肤 免 疫 组 织 化 学 的 病 理 形 态 学 观 察 祛 斑 玉 容 方 对 小 鼠 表 皮 黑 素 细 胞 个 数 及 数 密 度 的 影 响 i

6 目 录 分 析 讨 论 一 造 模 方 法 的 选 择 二 观 察 指 标 的 选 择 三 祛 斑 玉 容 方 治 疗 黄 褐 斑 的 选 方 机 理 四 实 验 结 果 分 析 祛 斑 玉 容 方 对 小 鼠 血 酪 氨 酸 酶 的 影 响 祛 斑 玉 容 方 对 小 鼠 皮 肤 病 理 形 态 的 影 响 祛 斑 玉 容 方 对 色 斑 ( 黄 褐 斑 ) 小 鼠 的 预 防 作 用 不 足 与 展 望 参 考 文 献 攻 读 硕 士 学 位 期 间 发 表 论 文 致 谢 ii

7 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 中 文 摘 要 目 的 : 本 实 验 通 过 复 制 黄 褐 斑 小 鼠 实 验 动 物 模 型, 予 以 祛 斑 玉 容 方 等 治 疗, 观 察 治 疗 前 后 各 组 的 血 酪 氨 酸 酶 及 皮 肤 病 理 形 态 学 改 变, 探 讨 祛 斑 玉 容 方 治 疗 黄 褐 斑 的 疗 效 机 制, 为 临 床 进 一 步 研 究 防 治 黄 褐 斑 提 供 理 论 与 实 验 依 据 方 法 : 选 取 清 洁 级 白 色 雌 性 小 鼠 48 只, 体 重 20g 左 右, 将 标 准 合 格 的 小 鼠 随 机 分 成 6 组, 每 组 8 只 分 别 为 模 型 对 照 组 空 白 对 照 组 vc 治 疗 组 中 药 治 疗 组 中 药 合 面 膜 治 疗 组 中 药 预 防 组 按 分 组 编 号, 所 有 动 物 分 笼 饲 养 采 用 中 波 紫 外 线 照 射 白 色 雌 性 小 鼠 复 制 黄 褐 斑 实 验 动 物 模 型 模 型 复 制 成 功 后, 各 防 治 组 进 行 4 周 的 防 治 处 理, 于 防 治 结 束 的 次 日 将 所 有 实 验 小 鼠 脱 颈 处 死, 检 测 小 鼠 血 中 的 酪 氨 酸 酶 含 量, 并 观 察 皮 肤 病 理 学 形 态 结 果 : 1. 通 过 各 组 小 鼠 血 中 酪 氨 酸 酶 含 量 分 析, 正 常 组 与 模 型 组 小 鼠 血 中 的 酪 氨 酸 酶 含 量 和 皮 肤 病 理 学 形 态 存 在 较 大 差 异, 均 具 有 显 著 性 统 计 学 意 义 (P<0.01) 而 作 为 防 治 的 其 他 四 组, 即 vc 治 疗 组 中 药 治 疗 组 中 药 合 面 膜 治 疗 组 中 药 预 防 组, 酪 氨 酸 酶 含 量 均 降 低, 与 模 型 组 比 较, 皆 具 有 统 计 学 意 义, 这 说 明 此 四 组 对 色 素 沉 着 型 小 鼠 均 具 有 良 性 调 整 作 用 2 根 据 皮 肤 病 理 切 片 分 析, 空 白 对 照 组 上 皮 浅 薄, 无 扩 散, 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 排 列 整 齐 有 序 模 型 对 照 组 小 鼠 表 皮 的 上 皮 细 胞 有 较 多 增 殖, 并 且 表 皮 细 胞 的 数 目 增 加, 切 片 显 示 出 较 多 的 炎 性 细 胞, 皮 肤 附 属 器 如 毛 囊 皮 脂 腺 出 现 明 显 增 生 中 药 合 面 膜 治 疗 组 小 鼠 皮 肤 与 空 白 对 照 组 相 比, 表 皮 略 微 增 厚, 皮 肤 附 属 器 也 明 显 减 少, 仅 见 少 量 炎 症 细 胞 及 纤 维 组 织 增 生 中 药 合 面 膜 组 疗 效 最 明 显, 中 药 预 防 组 中 药 治 疗 组 次 之,vc 治 疗 组 不 如 前 三 个 治 疗 组, 但 较 模 型 组 情 况 已 有 明 显 的 改 善 iii

8 中 文 摘 要 结 论 : 1. 祛 斑 玉 容 方 防 治 黄 褐 斑 的 机 制 可 能 与 抗 氧 化, 减 少 酪 氨 酸 含 量, 抑 制 皮 肤 黑 素 细 胞 增 殖, 从 而 减 少 黑 素 细 胞 合 成 有 关 2. 祛 斑 玉 容 方 治 疗 黄 褐 斑 疗 效 显 著 3. 祛 斑 玉 容 方 对 黄 褐 斑 具 有 很 好 的 预 防 作 用 关 键 词 : 黄 褐 斑 ; 酪 氨 酸 酶 ; 祛 斑 玉 容 方 ; 中 药 面 膜 ; 皮 肤 形 态 iv

9 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 Abstract Objective: In this study, mice animal models replicate chloasma, freckle Yurong Fang and other treatment to be observed before and after treatment in each group tyrosinase activity and skin blood morphological pathology results, and the mechanism of melasma combined were detected and analyzed to explore the freckle Yurong side effects on the treatment of melasma mechanism for further research, prevention and treatment of melasma provide theoretical and experimental evidence. Methods: 48 white female mice of clean grade, weight about 20g, these mice were randomly divided into 6 groups (Model group, the Vc group, Chinese medicine group, Chinese medicine Plus mask group, Chinese medicine prevention group,blank group),8 in each group. Melasma models is made by UVB irradiation.before the experiment, remove the hair from spine and buttock skin area of all mice by mild hair removal cream,clean the exposed skin on the back. Remove the hair every week,4 weeks in total. Apart from the blank control group, each group were exposed to the UVB wavelength of 320nm for 60 minutes,once in a daily time. Because the skin of mice is very delicate, the UVB irradiation was divided in two phases, 30minutes for each time and 10minutes for cooling 10minutes between. Keep the animals 20cm away from the source of light. The UVB irradiation last for 4 weeks, observe the changes of the exposed skin of mice. After 4 weeks of UVB irradiation, treat each group with corresponding methods for 4 weeks.after the treatment detect the content of Tyrosinase in the blood, and observed the morphology of treated skin. Results: 1. Analysis the content of Tyrosinase and skin pathology morphology of each group, there is significant difference in the normal group and melasma model group(p <0.01). The tyrosinase content of all treated group (Vc group, Chinese medicine group, Chinese medicine Plus mask group, Chinese medicine prevention group) were significant lower than model group, indicating that these four treatment method have effect on the skin pigment mice. 2. Biopsy analysis shows that epithelial cell of blank control group is thinner, and non-proliferation, and the basal cells and prickle cells were arranged orderly. The epithelial cell of model control group show much proliferation and the increased number of epidermal cells, more inflammatory cells, and obvious hyperplasia of skin appendages such as hair follicles and sebaceous glands. The Chinese medicine plus mask group,compared with the blank control group, the epidermis is slightly thickened, the skin appendages are significantly v

10 Abstract reduced, only remaining small amount of inflammatory cells and hyperplasia fibrous tissue. Compared with the Chinese medicine group and Vc group, Chinese medicine plus mask group has the best treatment effect; preventive group ranked second and followed by Vc group, which is not as good as the first two treatment groups, but there has been significant improvement compared with the model group. Conclusion: 1. The mechanisms of Qubanyurong may be reduce the content of tyrosine in skin and liver, antioxidant, improve SOD activity to inhibit the melanocyte proliferation, thereby reducing the the melanocyte synthesis. 2. Qubanyurong treatment has significant effect on Melasma. 3. Freckle Yurong side effect is obvious for the prevention of melasma Keywords: Melasma; the tyrosinase; Qubanyurong treatment; medicine mask ; Skin morphology vi

11 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 前 言 黄 褐 斑 又 称 蝴 蝶 斑 黧 黑 斑 肝 斑, 是 一 种 慢 性 的 色 素 代 谢 障 碍 的 损 容 性 疾 病 该 病 易 诊 难 治, 好 发 于 颜 面, 皮 损 表 现 为 局 部 淡 棕 色 棕 灰 色 棕 黑 色 甚 至 黄 褐 色 或 淡 黑 色 片 状 色 素 斑, 大 小 不 一, 形 状 不 规 则, 常 平 摊 于 皮 肤, 抚 之 不 碍 手, 皮 损 呈 多 形 性, [1] 常 对 称 发 生, 并 可 呈 蝶 翼 状 外 观 现 代 医 学 认 为 多 种 原 因 可 致 本 病, 如 紫 外 线 照 射 滥 用 化 妆 品 内 分 泌 紊 乱 过 度 疲 劳 人 种 以 及 情 绪 变 化 睡 眠 质 量 等, 本 病 季 节 性 明 显, 冬 轻 夏 重, 其 组 织 学 表 现 为 电 镜 下 表 皮 型 和 真 皮 型 在 细 胞 结 构 上 无 实 质 性 差 别, 色 素 细 胞 活 性 增 加, 黑 素 细 胞 树 突 明 显 增 大, 角 阮 细 胞 中 含 有 大 量 的 单 个 非 聚 集 的 黑 素 颗 粒, 真 皮 噬 黑 素 细 胞 分 布 不 均, 细 胞 浆 丰 富, 含 极 少 量 直 径 小 的 黑 素 颗 粒 现 代 研 究 表 明, 酪 氨 酸 酶 (Tyrosinase) 是 皮 肤 黑 色 素 生 物 合 成 的 关 键 酶, 它 决 定 黑 色 素 合 成 的 速 率, 并 且 是 黑 素 细 胞 (MC) 分 化 成 熟 的 特 征 性 标 志 在 黑 色 素 形 成 过 程 中, 酪 氨 酸 酶 (TYR) 是 主 要 限 速 酶 和 关 键 酶 该 酶 活 性 决 定 着 黑 色 素 形 成 的 数 量 黑 色 素 形 成 的 生 理 过 程 基 本 可 以 概 括 为 : 黑 素 细 胞 产 生 黑 色 素, 黑 素 颗 粒 通 过 黑 素 细 胞 树 枝 状 突 起 向 角 朊 细 胞 转 移, 转 移 至 角 朊 细 胞 的 黑 素 颗 粒 随 表 皮 细 胞 上 行 至 角 质 层, 并 随 角 质 层 脱 落 而 排 泄, 黑 素 形 成 的 生 化 过 程 也 是 本 病 研 究 的 重 点 表 皮 中 黑 素 小 体 数 量 增 加, 黑 素 细 胞 活 性 增 强 是 黄 褐 斑 形 成 的 机 理, 其 活 性 与 黑 素 合 成 量 相 关, 控 制 其 活 力 即 可 控 制 黑 素 生 成 量, 超 氧 化 物 歧 化 酶 (SOD) 具 有 抑 制 酪 氨 酸 酶 ( TYR ) 活 性, 降 低 色 素 沉 着 的 作 用 现 代 许 多 研 究 发 现 [2], 超 氧 阴 离 子 自 由 基 (OFR) 的 变 化 与 黑 色 素 的 形 成 和 皮 肤 色 素 沉 着 有 着 很 大 关 联 当 自 由 基 的 增 加, 脂 质 形 成 脂 质 过 氧 化 物 (LPO), 在 这 种 不 稳 定 的 过 氧 化 脂 质 和 脂 质 过 氧 化 的 皮 脂 很 容 易 造 成 继 续 变 化, 分 解 丙 二 醛 (MDA) 诱 导 的 色 素 沉 着 性 皮 肤 病 因 此, 提 高 超 氧 化 物 歧 化 酶 (SOD) 的 活 性, 清 除 自 由 基, 抑 制 酪 氨 酸 酶 活 性 和 黑 素 细 胞 的 增 殖 的 是 治 疗 黄 褐 斑 的 根 本 近 年 来, 本 病 的 发 病 率 逐 渐 上 升, 严 重 影 响 了 广 大 患 者 的 生 活 质 量, 目 前 的 难 题 是 如 何 找 到 一 个 安 全 有 效 简 便 的 疗 法 中 医 药 治 疗 黄 褐 斑 的 方 法 多 样 历 史 悠 久, 一 般 治 疗 采 用 口 服 或 外 用, 但 由 于 中 医 药 的 治 疗 研 究 机 制 相 对 落 后, 虽 然 取 得 了 良 好 的 临 床 疗 效, 但 其 治 疗 机 制 尚 未 完 全 清 楚, 所 以 这 种 疗 法 并 没 有 被 广 泛 接 受, 因 此 中 医 药 治 疗 黄 褐 斑 的 疗 效 机 制 研 究 探 讨 迫 在 眉 睫 现 代 研 究 表 明 [3], 祖 国 医 学 中 的 许 多 具 有 祛 瘀 补 益 的 中 药 都 具 有 抑 制 酪 氨 酸 酶 (TYR) 活 性 抗 氧 化 与 促 进 黑 素 代 谢 的 作 用, 复 方 中 药 治 疗 黄 褐 斑 的 机 制 主 要 与 抑 制 其 黑 素 合 成 黑 素 细 胞 增 殖 酪 氨 酸 酶 活 性, 提 高 机 体 超 氧 化 物 歧 化 酶 (SOD) 活 性 清 除 多 余 超 氧 自 由 基 调 节 微 量 元 素 含 量 的 异 常 有 密 切 关 系 目 前 大 多 数 为 单 味 中 药 的 研 究, 复 方 中 药 研 究 较 少, 而 中 药 合 理 配 伍 才 是 发 挥 有 效 清 除 自 由 基 抗 氧 化 的 关 键 但 目 前 的 复 方 研 究 并 不 多, 绝 大 部 分 为 中 医 经 典 古 方, 如 逍 遥 丸 桃 红 四 物 汤 六 味 地 黄 丸 肾 气 丸 补 中 益 气 汤 等, 研 究 水 平 还 处 于 疗 效 验 证 阶 段, 未 能 从 本 质 上 阐 明 中 药 治 疗 黄 褐 斑 的 作 用 机 理 1

12 前 言 因 此, 寻 找 治 疗 黄 褐 斑 的 有 效 药 物 已 受 到 国 内 外 的 广 泛 重 视, 特 别 是 对 有 祛 斑 作 用 的 复 方 中 药 的 研 究, 成 为 当 前 医 药 界 特 别 关 注 的 课 题 为 了 探 讨 祛 斑 玉 容 方 的 作 用 机 制, 本 实 验 采 用 复 制 中 波 紫 外 线 照 射 白 色 雌 性 小 鼠 的 黄 褐 斑 实 验 动 物 模 型 的 造 模 方 法, 观 察 分 析 本 方 对 血 液 中 酪 氨 酸 酶 的 影 响, 同 时 结 合 中 药 外 敷 比 较 不 同 组 别 间 的 疗 效, 通 过 免 疫 组 化 等 病 理 学 方 法 观 察 了 对 皮 肤 黑 色 素 阳 性 细 胞 的 个 数 数 密 度 的 影 响 采 用 vc 作 为 阳 性 对 照 药 物, 加 以 检 测 分 析, 进 一 步 探 讨 祛 斑 玉 容 方 防 治 黄 褐 斑 的 药 效 机 制 为 明 确 祛 斑 玉 容 方 治 疗 黄 褐 斑 的 显 著 效 果 提 供 可 靠 的 实 验 手 段 及 理 论 依 据 2

13 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 一 祖 国 医 学 对 黄 褐 斑 的 认 识 及 研 究 第 一 部 分 理 论 研 究 1. 古 代 文 献 对 黄 褐 斑 的 认 识 黄 褐 斑 属 中 医 学 黧 黑 斑 肝 斑 蝴 蝶 斑 妊 娠 斑 的 范 畴, 另 有 面 尘 面 皯 黯 面 黑 皯 面 皯 黯 面 皯 疱 皯 黯 等 各 种 命 名 关 于 病 因 病 机, 古 人 也 进 行 了 一 些 阐 述, 如 诸 病 源 候 论 云 : 五 脏 六 腑 十 二 经 血, 皆 上 于 面, 夫 血 之 行 俱 荣 表 里, 或 痰 饮 渍 脏, 或 腠 理 受 风, 致 气 血 不 和, 或 涩 或 浊, 不 能 荣 于 皮 肤, 故 发 生 黑 斑 普 济 方 中 曰 : 夫 风 邪 入 于 经 络, 血 气 凝 滞, 肌 肉 弗 泽, 发 为 疣 目 肝 肾 阴 血 亏 虚, 水 不 制 火, 血 弱 不 能 外 荣 于 肌 肤, 火 燥 结 成 黧 斑 外 科 大 成 曰 : 黧 黑 斑 多 生 于 女 子 之 面, 由 血 弱 不 华, 火 燥 结 成, 疑 事 不 决 所 致 圣 济 总 录 卷 第 一 百 一 面 体 门 描 述 面 奸 黯 皆 由 风 邪 客 于 皮 肤 痰 饮 浸 渍 其 形 外 者 或 饮 食 安 坐 无 所 作 为 若 养 里 方 所 谓 积 聚 不 消 之 病 对 其 性 状 表 现 也 有 了 较 为 详 尽 的 描 述, 如 医 宗 金 鉴 曰 : 由 忧 思 抑 郁, 血 弱 不 华, 火 燥 结 滞 而 生 于 面 上, 妇 女 多 有 之 此 证 一 名 黧 黑 斑 初 起 色 如 尘 垢, 日 久 黑 似 煤 形, 枯 黯 不 泽, 大 小 不 一, 小 者 如 粟 米 粒 豆, 大 者 似 莲 子 芡 实, 或 长 或 斜 或 圆 与 皮 肤 相 平, 再 忧 思 抑 郁, 血 弱 不 华, 火 燥 结 滞 而 生 于 面 上, 妇 女 多 有 之 外 科 证 治 全 书. 面 部 证 治 面 尘 形 容 其 面 色 如 尘 垢, 日 久 煤 黑, 形 枯 不 泽 或 起 大 小 黑 斑, 与 面 肤 相 平 由 忧 思 抑 郁, 血 弱 不 华 外 用 玉 容 散, 内 宜 疏 胆 气 兼 清 肝, 加 味 归 脾 汤 送 六 味 地 黄 丸 主 之 外 科 正 宗 曰 : 黧 黑 斑 者, 水 亏 不 能 制 火 血 弱 不 能 华 肉, 以 致 火 燥 结 成 斑 黑, 色 枯 不 泽 清 代 医 灯 续 焰 又 曰 : 面 黄 而 斑 驳 者, 以 胃 中 虫 积 以 胃 脉 起 于 面, 故 面 病 多 属 胃 亦 有 面 疮 之 属 脾 肺 风 热, 面 尘 之 属 肝 胆 燥 热, 又 不 独 一 阳 明 胃 也 2. 病 因 病 机 及 辨 证 分 型 2.1 病 因 病 机 中 医 认 为, 人 体 的 生 命 活 动 主 要 是 依 赖 脏 腑 功 能, 而 脏 腑 的 功 能 活 动 所 需 的 物 质 基 础 是 气 血 津 液, 气 血 通 过 经 络 输 布 到 全 身 各 个 脏 腑 组 织 因 此, 脏 腑, 气 血, 经 络 与 皮 肤 关 系 极 为 密 切, 外 邪 通 过 皮 肤 进 入 机 体, 导 致 脏 腑, 气 血 功 能 失 调, 就 可 以 引 起 全 身 疾 病, 反 之, 脏 腑 气 血 疾 病 亦 可 通 过 经 络 反 应 映 脏 腑 黄 褐 斑 的 发 生, 就 是 脏 腑 气 血 经 络 发 生 异 常 反 应 在 外 的 表 现, 主 要 与 肝 脾 肾 三 脏 密 切 相 关, 根 本 病 机 是 气 血 不 能 上 荣 于 面 肝 气 郁 结 肝 藏 血, 有 贮 藏 血 液 调 节 血 液 的 生 理 功 能 肝 主 疏 泄, 喜 调 达, 可 以 根 据 人 体 的 生 理 需 要 调 节 不 同 部 位 的 血 流 量 其 生 理 功 能 与 人 的 情 绪 且 相 关, 情 绪 平 和, 则 肝 气 调 达, 3

14 第 一 部 分 理 论 研 究 疏 泄 有 度 ; 烦 躁 不 安, 则 肝 火 上 炎, 疏 泄 失 调, 郁 结 于 内, 长 此 以 往, 冲 任 失 调, 气 血 不 充, 不 能 上 荣 于 面, 面 失 所 养, 面 色 无 华, 日 久 成 斑 灵 枢 一 书 中 说 道 : 十 二 经 脉, 三 百 六 十 五 络, 其 血 气 皆 上 注 于 面 而 走 空 窍, 血 证 论 : 以 肝 属 木, 木 气 冲 和 调 达, 不 致 遏 郁, 则 血 脉 通 畅 可 见 黄 褐 斑 的 生 成 与 气 血 不 荣 有 相 当 大 的 关 系 肾 阴 不 足 外 科 正 宗 曰 : 黧 黑 斑 者, 水 亏 不 能 制 火, 血 弱 不 能 华 肉, 以 致 火 燥 结 成 斑 黑, 色 枯 不 泽 肾 藏 精, 肝 藏 血 身 体 的 各 种 组 织 和 器 官, 包 括 皮 肤 都 是 源 于 精 血 起 着 濡 养, 滋 润 的 作 用 肾 精 化 生 血 液 是 人 体 生 命 活 动 的 根 本, 取 决 于 肾 精 气 化, 肾 精 充 盛 还 取 决 于 血 液 的 滋 养 两 者 相 互 滋 生 相 互 转 化, 因 而 有 精 血 同 源 之 称 慢 性 疾 病 劳 倦 过 度 情 绪 不 佳 均 可 导 致 肾 精 亏 虚 和 肝 血 不 足, 肝 肾 亏 损 则 会 导 致 气 血 不 足, 不 能 上 荣, 虚 火 熏 灼 于 面, 面 部 皮 肤 干 燥, 失 却 滋 润, 以 致 火 燥 结 于 面 部 则 形 成 黄 褐 斑 肾 阳 亏 虚 肾 之 阳 气 充 足, 可 促 进 血 液 遍 布 全 身, 荣 润 面 部, 对 蒸 腾 气 化 体 液, 排 出 浊 邪 具 有 重 要 的 作 用 素 体 阳 虚 或 年 老 肾 亏, 肾 气 损 伤 或 慢 性 疾 病, 或 劳 倦 过 度, 可 导 致 肾 功 能 不 足, 无 法 温 煦 经 脉, 使 得 寒 凝 血 滞 ; 阳 气 极 度 虚 弱, 蒸 腾 气 化 没 失 司, 面 部 皮 肤 黯 淡 无 华, 面 色 黧 黑 无 泽, 颜 面 失 养 而 致 黄 褐 斑 脾 胃 虚 弱 普 济 方 有 云 : 饱 食 安 坐, 无 所 作 为 积 聚 不 消 之 病, 使 人 面 目 黧 皯 是 也 脾 胃 共 处 中 焦, 功 能 上 相 互 影 响 脾 主 运 化, 以 清 为 升, 其 功 能 是 将 精 微 物 质 上 输 于 头 目, 以 使 颜 面 部 得 以 滋 润 胃 主 通 降, 以 受 纳 腐 熟 水 谷, 其 经 脉 循 行 余 面 部, 故 而 书 中 有 云 : 手 足 六 阳 之 经, 皆 上 至 于 头, 而 唯 阳 明 胃 脉, 起 鼻 交 中, 入 上 齿 中, 侠 口 环 唇, 循 颊 车, 上 耳 前, 过 客 主 人, 故 人 之 面 部, 阳 明 之 所 属 也 若 饮 食 不 节 或 忧 思 烦 恼, 则 脾 阳 不 升, 运 化 无 力, 水 湿 内 停, 无 力 输 布, 从 而 导 致 气 血 生 化 乏 源, 气 血 不 能 上 荣 于 面 而 致 使 面 失 濡 养 而 生 斑 湿 热 内 盛 素 问 至 真 要 大 论 中 说 道 : 诸 湿 中 满, 皆 属 于 脾, 湿 浊 内 生, 主 要 是 由 于 脾 的 运 化 和 输 布 功 能 障 碍, 从 而 导 致 的 水 液 内 聚 不 得 散, 湿 邪 日 久 蕴 而 化 热, 炼 液 为 痰, 其 中 粘 稠 者 为 痰, 稀 薄 者 为 饮, 长 期 内 聚 与 体 内, 则 阻 碍 经 络, 使 得 气 血 运 行 不 畅, 脉 络 阻 塞, 不 得 上 荣 于 面, 面 失 所 养 而 成 斑 瘀 血 内 生 灵 枢 有 云 : 血 不 流 则 毛 色 不 泽, 故 其 面 黑 如 漆 柴 者, 普 济 方 所 说 : 面 上 皯 黯, 此 由 凝 血 在 脏 中 医 有 无 瘀 不 成 斑 和 久 病 成 瘀 的 说 法 凡 血 行 不 畅, 4

15 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 或 者 体 内 离 经 之 血 未 能 消 散, 均 可 形 成 瘀 血, 瘀 血 属 于 脏 腑 功 能 失 调 的 产 物, 女 性 特 有 的 生 理 活 动 月 经 则 体 现 了 血 液 充 足 血 行 通 畅 对 女 性 的 身 体 健 康 又 至 关 重 要 的 影 响 张 氏 医 通 曰 : 盖 气 和 血, 两 相 维 和, 气 不 得 血, 则 散 而 无 统, 血 不 得 气, 则 凝 而 不 流 黄 褐 斑 属 于 慢 性 的 皮 肤 疾 病, 临 床 多 数 患 者 有 气 滞, 某 些 慢 性 疾 病, 如 结 核, 肿 瘤, 慢 性 肝 病, 肾 病 疾 病 或 妇 科 疾 病 的 患 者, 由 于 长 期 患 病 和 瘀 滞, 气 血 运 行 不 畅, 脉 络 瘀 阻 冲 任 失 调, 导 致 血 液 淤 滞, 气 滞 瘀 阻, 面 部 肌 肤 失 养, 形 成 黄 褐 斑 因 此, 在 临 床 治 疗, 各 种 不 同 类 型 的 黄 褐 斑 需 要 酌 加 理 气, 活 血 化 瘀 之 品, 以 提 高 疗 效 外 邪 侵 袭 黄 褐 斑 生 于 面 部, 而 面 部 长 期 暴 露 于 外, 风 寒 暑 湿 燥 火 等 外 邪 长 期 侵 袭, 风 邪 可 使 面 部 肌 肤 干 燥 式 样, 营 卫 失 调 ; 寒 邪 可 使 腠 理 闭, 不 出 汗, 使 肌 肤 不 得 濡 润 ; 湿 邪 侵 袭 皮 肤 则 可 使 面 部 肌 肤 水 湿 过 盛, 可 发 展 呈 湿 疹, 水 疱, 痤 疮 等 病 理 表 现, 中 医 强 调 的 光 毒 即 现 代 医 学 认 知 的 紫 外 线 则 是 令 肌 肤 生 斑 的 最 大 伤 害 由 此 可 见, 黄 褐 斑 的 病 因 病 机 较 为 复 杂, 受 多 种 病 理 因 素 影 响, 在 病 机 上 还 会 相 互 夹 杂 相 互 影 响, 临 床 辨 证 施 治 时 应 当 仔 细 鉴 别 诊 断 2.2 辨 证 分 型 临 床 主 要 将 本 病 主 要 分 为 以 下 几 型 : 1 肝 郁 气 滞 型 : 斑 色 黄 褐 呈 弥 漫 性 分 布, 日 晒 后 加 深, 兼 有 情 志 抑 郁, 胸 胁 胀 满, 或 少 寐 多 梦, 面 部 烘 热, 眩 晕 耳 鸣, 双 目 干 涩, 口 干 微 苦, 月 经 不 调, 或 有 痛 经, 苔 褐 黄, 舌 质 夹 有 瘀 点 或 瘀 斑, 脉 细 涩 治 宜 疏 肝 解 郁, 化 瘀 消 斑 2 脾 虚 肝 郁 型 : 斑 色 淡 褐, 兼 有 肢 体 困 怠, 少 气 懒 言, 纳 呆 便 溏, 脘 腹 胀 痛, 胸 膈 痞 塞 不 适, 舌 质 淡 红 胖 嫩 有 齿 痕, 苔 薄 或 腻, 脉 弦 细 或 弦 滑 治 宜 健 脾 益 气, 调 和 气 血 3 肾 阴 虚 : 斑 色 深 暗, 兼 见 头 昏 目 眩, 腰 膝 酸 软, 五 心 烦 热, 遗 精, 经 水 稀 少, 月 经 量 少, 月 经 先 期, 目 涩 便 干, 舌 红 少 苔 脉 细 数 治 宜 补 肾 养 血, 填 精 益 髓 4 肾 阳 虚 : 斑 色 黑 褐 灰 暗, 如 煤 形 枯 黯 不 泽 兼 有 畏 寒 肢 冷, 周 身 皮 肤 干 燥 发 痒, 口 淡 乏 味, 小 便 频 频 而 清, 甚 则 不 禁, 或 尿 有 余 沥 未 尽, 或 大 便 稀 溏, 或 腰 脊 空 痛 喜 按, 性 欲 减 退, 舌 质 淡 白, 苔 少 或 薄 白, 脉 沉 迟 治 宜 温 肾 助 阳, 化 瘀 消 斑 3. 中 药 治 疗 黄 褐 斑 的 研 究 中 医 治 疗 黄 褐 斑 历 史 悠 久, 方 法 多 样 其 中 中 药 疗 法 在 临 床 上 运 用 较 多, 其 治 疗 主 要 体 现 在 以 下 几 个 方 面 : 3.1 辨 证 为 主, 病 症 结 合 中 医 认 为 人 体 是 一 个 有 机 整 体, 黄 褐 斑 虽 然 是 发 生 在 面 部 的 疾 病, 但 是 与 内 在 脏 腑 气 血 经 络 有 密 切 的 联 系 黄 褐 斑 的 发 生 主 责 肝 脾 肾 三 脏, 以 气 血 不 能 上 荣 于 面 为 发 [4] 病 机 制, 不 同 医 家 对 本 病 的 治 疗 虽 有 不 同, 但 都 遵 循 辨 证 论 治 的 原 则, 周 宝 宽 将 本 病 分 5

16 第 一 部 分 理 论 研 究 为 肝 郁 气 滞 肝 肾 不 足 脾 虚 湿 蕴 气 滞 血 瘀 四 证, 分 别 以 逍 遥 散 加 减 逍 遥 散 合 六 味 地 [5] 黄 丸 加 减 逍 遥 散 合 参 苓 白 术 散 加 减 逍 遥 散 合 桃 红 四 物 汤 加 减 等 四 方 治 疗 汪 悦 结 合 多 年 临 床 经 验 将 本 病 分 为 肝 气 郁 结 证 脾 虚 湿 蕴 证 肝 肾 阴 虚 证 肾 阳 不 足 证 四 种, 分 别 以 逍 遥 散 参 苓 白 术 散 合 平 胃 散 加 减 六 味 地 黄 丸 合 左 归 丸 加 减 肾 气 丸 合 右 归 丸 加 减 治 疗 同 时 针 对 黄 褐 斑 的 病 机 加 入 丹 参 川 芎 等 活 血 药 以 活 血 化 瘀, 减 轻 色 斑 有 的 医 家 认 为 某 些 患 者 除 了 面 部 色 斑 外 无 其 他 明 显 症 状, 所 以 根 据 黄 褐 斑 发 生 的 病 因 病 机 拟 定 了 专 法 专 方, 并 在 此 基 础 上 临 证 加 减, 但 总 的 来 看 还 是 以 辨 证 治 疗 为 主, 在 辨 证 的 同 时 结 合 [6] 辨 病 治 疗, 两 者 结 合, 提 高 疗 效 吴 莉 认 为 黄 褐 斑 的 生 成 是 由 于 水 亏 不 能 制 火, 血 弱 不 能 华 肉, 火 燥 内 结 而 成, 治 宜 补 气 活 血, 疏 肝 祛 风 以 黄 芪 当 归 川 芎 何 首 乌 丹 参 白 蒺 藜 甘 草 为 基 础 方, 并 将 本 病 分 为 肝 郁 气 滞 脾 虚 湿 盛 肝 肾 不 足 三 型, 随 症 [7] 加 减 结 果 显 示 治 疗 后 66 例 患 者 总 有 效 率 为 89.47% 孙 泽 渊 认 为 黄 褐 斑 为 气 滞 血 瘀 所 致, 故 以 八 珍 汤 加 味 治 疗 此 病, 组 成 方 药 : 白 术 党 参 茯 苓 当 归 熟 地 杭 芍 川 芎 鸡 血 藤 膏 粉 通 大 海 炙 甘 草 伴 经 前 乳 胀 者, 加 佛 手 枳 壳 杭 芍 易 白 芍 ; 伴 睡 眠 多 梦 者, 加 柏 子 仁 炒 枣 仁 茯 苓 易 猪 苓 ; 伴 肢 冷 畏 寒 者, 加 桂 枝 菟 丝 子 ; 伴 口 苦 心 烦 者, 加 茵 陈 栀 子 党 参 易 玄 参 治 疗 2 个 月 后 总 有 效 率 为 97% 3.2 内 外 结 合, 方 法 多 样 由 于 黄 褐 斑 是 一 种 顽 固 难 治 的 损 美 性 皮 肤 病, 在 调 理 脏 腑 气 血, 治 疗 病 因 的 同 时, 其 外 治 也 显 得 尤 为 重 要 相 较 于 内 治, 外 治 黄 褐 斑 可 以 直 达 病 所, 促 进 局 部 血 液 循 环 和 细 胞 膜 更 新, 从 而 减 轻 色 斑 达 到 治 疗 效 果 [8] 中 药 外 治 的 方 法 多 样, 从 剂 型 来 分, 有 面 膜 散 剂 膏 剂 霜 剂 等, 冯 小 菁 使 用 祛 [9] 斑 养 颜 霜 治 疗 本 病, 方 中 有 白 术 白 芷 冬 瓜 仁 杏 仁, 取 得 了 很 好 的 疗 效 李 志 英 等 选 取 复 方 杏 仁 面 膜 进 行 治 疗, 面 膜 中 含 有 : 白 芷 当 归 川 芎 白 僵 蚕, 研 末 后 将 之 与 苦 [10] 杏 仁 蒸 馏 水 鸡 蛋 调 匀, 治 疗 2 个 疗 程 后 总 有 效 率 为 76.74% 单 敏 洁 等 使 用 归 白 散 治 疗 黄 褐 斑, 由 当 归 白 附 子 白 及 白 茯 苓 僵 蚕 紫 草 白 蒺 藜 皂 角 刺 三 七 薏 苡 [11] 仁 3 个 疗 程 疗 程 后, 有 效 率 为 96.67% 谢 明 峰 通 过 与 氢 醌 组 和 内 服 组 比 较 观 察 珍 珠 四 白 膏 的 疗 效 发 现 :1 个 疗 程 后 发 现 四 白 组 的 MDA 明 显 降 低,SOD 显 著 升 高 且 疗 效 优 于 另 两 组 从 治 疗 方 法 分, 有 单 纯 外 治 内 外 合 治 及 外 治 配 合 现 代 治 疗 仪 器 等 从 临 床 报 道 分 析, 内 外 结 合 的 疗 效 要 优 于 单 纯 外 治, 同 时 内 外 结 合 治 疗 也 与 中 医 标 本 兼 治 的 思 想 相 [12] 符 合, 应 大 力 推 广 于 临 床 王 海 燕 等 采 用 中 药 内 服 配 合 局 部 中 药 导 入 的 方 法, 内 服 中 药 使 用 调 气 活 血, 滋 阴 补 肾 的 方 剂, 组 成 药 物 : 太 子 参 生 花 生 地 生 苡 仁 沙 参 黄 柏 人 参 当 归 鸡 内 金 等 常 规 皮 肤 护 理 后, 将 祛 斑 粉 和 精 华 素 调 匀 后 超 声 导 入, 最 后 以 当 [13] 归 热 膜 敷 面 治 疗 3 次 后, 几 乎 所 有 患 者 色 斑 变 淡 王 艳 等 将 中 药 内 服 配 合 散 剂 局 部 外 用 治 疗 黄 褐 斑, 内 服 中 药 以 桃 红 四 物 汤 为 基 本 方, 辩 证 治 疗, 肝 郁 气 滞 者 加 柴 胡 枳 壳 泽 兰 郁 金 木 香 等 ; 肝 肾 阴 虚 者 加 熟 地 山 萸 知 母 黄 柏 枸 杞 子 等 ; 脾 虚 湿 蕴 者 加 黄 芪 茯 苓 白 术 猪 苓 白 芍 木 香 等 ; 肾 阳 不 足 者 加 菟 丝 子 巴 戟 天 制 附 片 等 局 6

17 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 部 外 用 则 是 将 白 及 白 芷 白 僵 蚕 等 份 研 末, 面 膜 前, 将 清 洁 后 的 皮 肤 置 于 离 子 喷 雾 器 下 行 热 喷 10-15min, 再 把 调 制 好 的 面 膜 敷 上,3 个 疗 程 后,82 例 患 者 的 总 有 效 率 为 91.5% [14] 徐 晶 萍 等 采 用 内 外 合 治 法, 内 服 方 基 本 方 : 熟 地 女 贞 子 旱 莲 草 山 茱 萸 川 芎 红 花 当 归 桃 仁 赤 芍 白 芷 何 首 乌, 临 证 加 减, 肝 郁 胸 胀 者 加 柴 胡 郁 金 香 附 枳 壳 ; 阳 虚 者 加 肉 苁 蓉 制 附 片 ; 脾 虚 者 加 黄 芪 白 术 党 参 ; 白 带 色 黄 加 黄 柏 白 花 蛇 舌 草 外 用 面 膜 方 : 白 及 白 芷 白 附 子 白 僵 蚕 白 茯 苓 当 归 三 七 冬 瓜 仁 桃 花, 在 敷 膜 前, 将 皮 肤 常 规 清 洁, 用 负 离 子 喷 雾 器 喷 面, 再 行 面 部 经 络 按 摩, 局 部 色 斑 区 域 加 [15] 强 按 摩, 最 后 将 面 膜 粉 调 匀 敷 面 3 个 疗 程 后, 总 有 效 率 为 90.0%. 赵 一 丁 等 采 用 E 光 结 合 中 药 祛 斑 汤 治 疗 黄 褐 斑,E 光 治 疗 时 以 明 显 刺 痛, 皮 肤 微 红, 色 斑 稍 深 为 度, 每 隔 4 周 治 疗 一 次 ; 自 拟 祛 斑 汤 以 疏 肝 活 血 健 脾 补 肾 为 治 疗 大 法, 药 物 组 成 : 柴 胡 赤 白 芍 当 归 熟 地 香 附 红 花 桃 仁 薏 仁 茯 苓 益 母 草, 随 证 加 减 3 个 疗 程 后 有 效 率 为 87.76% 3.3 注 重 调 摄, 防 治 并 举 黄 褐 斑 属 于 顽 固 的 难 治 性 皮 肤 病, 治 疗 的 病 程 长, 需 要 患 者 在 治 疗 以 及 日 常 生 活 中 加 以 配 合 才 能 取 得 满 意 的 疗 效 患 者 需 要 注 意 的 主 要 有 几 个 方 面 一 是 日 常 生 活 习 惯 的 调 摄, 如 注 意 防 晒, 紫 外 线 的 照 射 是 黄 褐 斑 形 成 的 重 要 原 因, 因 此 嘱 咐 患 者 出 门 时 备 好 防 晒 的 工 具 ; 尽 量 避 免 使 用 化 妆 品, 化 妆 品 中 含 有 大 量 的 重 金 属 及 其 他 有 害 物 质, 长 期 使 用 会 加 重 色 斑, 护 肤 品 要 选 择 低 刺 激 的 温 和 的 产 品 这 类 调 摄 着 重 强 调 了 黄 褐 斑 的 预 防, 充 分 体 现 了 中 医 治 未 病 的 思 想 二 是 心 情 的 调 摄, 要 求 患 者 放 松 心 情, 注 意 休 息, 报 道 显 示 睡 眠 质 量 差 者 的 黄 褐 斑 发 病 率 是 质 量 好 者 的 7 倍 [16], 另 外 坚 定 治 疗 的 信 心, 多 做 一 些 轻 松 愉 悦 的 活 动 和 运 动 还 有 就 是 要 注 重 饮 食 的 调 摄, 避 免 辛 辣 刺 激 油 腻 的 饮 食, 尽 量 做 到 食 饮 有 节, 起 居 有 常, 不 妄 作 劳 [17], 并 且 多 食 一 些 含 有 维 生 素 A C E 和 微 量 元 素 锌 的 食 物, 如 柑 橘 柠 檬 番 茄 胡 萝 卜 等 中 医 认 为 有 诸 外 必 行 诸 内, 黄 褐 斑 虽 然 表 现 在 皮 肤 表 面, 但 究 其 根 本 是 内 脏 气 血 失 调 所 致, 因 此 调 养 相 关 脏 腑 为 治 疗 本 病 的 关 键 [18], 外 在 的 表 象 在 内 在 调 养 的 同 时 也 要 加 强 防 护, 只 有 这 样 才 能 起 到 满 意 的 疗 效 4. 中 医 治 疗 黄 褐 斑 的 其 他 疗 法 研 究 4.1 经 络 疗 法 灵 枢 邪 气 脏 腑 病 形 有 云 : 十 二 经 脉, 三 百 六 十 五 络, 其 血 气 皆 上 注 于 面 而 走 空 窍 诸 阳 之 会, 皆 在 于 面 本 病 以 气 血 不 能 上 荣 于 面 为 根 本, 多 是 由 于 肝 郁 气 滞, 脾 虚 湿 阻, 肾 精 亏 虚 致 经 络 不 通, 气 血 不 能 上 荣 于 面, 颜 面 失 养 所 致 人 体 经 络 遍 布 全 身, 气 血 充 足 是 面 部 得 以 濡 养 的 物 质 基 础, 而 经 络 是 气 血 运 行 的 通 道, 通 过 刺 激 经 络 腧 穴 可 以 调 理 相 关 病 变 脏 腑, 使 其 气 血 阴 阳 协 调, 从 而 使 得 面 部 气 血 充 足 通 畅 达 到 治 疗 色 斑 的 效 果 目 前 临 床 上 使 用 的 经 络 疗 法 主 要 有 毫 针 针 刺 和 耳 穴 贴 压, 还 有 穴 位 埋 线 刺 络 放 血 拔 罐 艾 灸 等 7

18 第 一 部 分 理 论 研 究 毫 针 刺 法 毫 针 刺 法 治 疗 黄 褐 斑 包 括 远 道 取 穴 局 部 围 刺 及 辩 证 选 穴 及 三 者 结 合 的 方 式 [3] 经 过 临 床 研 究 证 实, 将 体 针 与 面 部 围 刺 结 合 的 方 法 优 于 单 独 针 刺, 属 于 中 医 里 标 [19] 本 兼 治 的 范 畴 胡 津 丽 等 采 用 面 部 美 容 针 结 合 体 针 的 方 法, 面 部 取 斑 片 进 行 围 刺, 面 积 较 大 或 泛 发 者 采 用 循 经 排 刺 的 方 式, 留 针 30 分 钟, 每 周 3 次,10 次 为 一 疗 程 体 针 以 曲 池 外 关 合 谷 血 海 足 三 里 三 阴 交 为 主 穴, 情 志 不 畅 者 加 太 冲 ; 便 秘 者 加 天 枢 支 沟 照 海 ; 月 经 不 调 者 加 关 元 气 海 列 缺 留 针 30 分 钟, 行 针 1 次, 每 周 针 刺 3 次 治 疗 3 个 月 后 观 察 统 计 疗 效 基 本 治 愈 7 例, 占 22.6%; 显 效 14 例, 占 45.2%; 好 转 9 例, 占 29.0%; 无 效 1 例, 占 3.2% 有 效 率 96.8% 总 体 看 来, 体 针 调 理 脏 腑 功 能 的 失 调, 使 肝 气 调 达 脾 运 畅 通 肾 精 充 沛, 从 而 令 精 气 津 血 上 荣, 面 部 肌 肤 得 以 润 泽 濡 养 ; 面 针 疏 通 局 部 气 血, 改 善 局 部 血 液 循 环, 增 强 皮 肤 柔 韧 性 以 增 强 治 疗 效 果 耳 针 疗 法 黄 帝 内 经 有 云 : 耳 为 宗 脉 之 所 聚 也, 耳 穴 治 疗 黄 褐 斑, 注 重 整 体 原 则, 遵 从 中 医 藏 象 学 说, 注 重 肺 肝 脾 肾 等 脏 器 的 调 理, 宣 肺 调 气 疏 肝 健 脾 补 肾 益 精 与 活 血 祛 瘀 相 辅 相 成, 通 过 调 节 机 体 全 身 气 血 达 到 治 斑 的 目 的 选 取 的 穴 位 有 神 门 面 颊 区 肺 内 分 泌 皮 质 下 内 生 殖 器 肾 心 耳 针 的 治 疗 方 式 有 贴 压 放 血 和 割 法 (1) 贴 压 法 : 贴 压 前 先 按 压 耳 廓 发 热 或 有 烧 灼 感 为 宜, 此 法 操 作 安 全 简 便 易 行, 稍 有 微 痛 感, 患 者 易 接 受, 临 床 应 用 最 为 广 泛, 适 用 于 治 疗 各 型 黄 褐 斑, 标 本 兼 顾, 疗 效 明 显 通 过 患 者 的 不 定 时 按 压 贴 敷 处, 能 达 到 加 强 刺 激 持 续 刺 激 的 作 用, 具 有 较 好 的 远 期 疗 效 [20] 刘 剑 梅 等 选 取 内 分 泌 肺 肾 神 门 面 颊 为 主 穴, 斑 块 以 两 颧 为 主 加 肝 ; 以 前 额 鼻 梁 为 主 加 脾, 将 磁 珠 贴 于 耳 穴 相 应 位 置, 每 日 按 压 3~5 次, 每 次 2~3min, 双 耳 轮 流 交 替 贴 压,3d 交 替 一 次,10 次 为 1 疗 程, 结 果 显 示 :80 例 患 者 总 有 效 率 为 91.25% (2) 割 治 法 和 刺 血 法 : 同 样 对 位 先 行 按 摩, 消 毒 后 用 手 术 刀 进 行 切 割, 或 用 三 棱 针 快 速 点 刺 耳 穴, 使 之 出 血, 每 周 1 次 此 两 法 具 有 一 定 的 损 伤, 取 穴 宜 少 而 精, 要 求 操 作 时 严 格 消 毒 及 术 后 [21] 处 理, 以 防 感 染 吴 艳 等 选 取 面 颊 肝 脾 外 肺 神 门 交 感 子 宫 内 分 泌, 每 次 选 择 4~6 穴, 治 疗 前 揉 捏 耳 廓 3min, 出 血 后 用 力 挤 压, 使 其 再 出 血 10~ 20 滴, 每 周 治 疗 l~2 次,10 次 为 1 疗 程 2 个 月 后 统 计 有 效 率 为 93.33% 这 几 种 方 法 各 有 所 长, 急 则 治 标, 缓 则 治 本, 择 善 而 从, 综 合 配 用, 提 高 疗 效 刺 络 放 血 灵 枢 九 针 十 二 原 : 凡 用 针 者, 虚 则 实 之, 满 则 泄 之, 菀 陈 则 除 之 黄 褐 斑 的 普 遍 病 机 为 气 滞 血 瘀, 应 采 用 活 血 化 瘀 的 治 疗 方 法, 则 可 使 用 放 血 疗 法 一 般 选 取 背 俞 穴, 刺 血 拔 罐 取 穴 : 大 椎 肺 俞 膈 俞 肝 俞 心 俞 穴 位 常 规 消 毒 后, 以 梅 花 针 叩 刺, 每 次 选 择 1~2 个 叩 刺 点, 每 个 叩 刺 点 上 形 成 15 个 左 右 的 小 出 血 点, 随 后 用 闪 火 法 于 叩 刺 点 上 拔 罐, 出 血 量 1~2 ml 为 宜 隔 日 治 疗 1 次,10 次 为 一 疗 程 除 上 述 的 几 种 经 络 疗 法 外, 还 有 刮 痧 [22] 埋 线 [23] 拔 罐 [24] [25] 穴 位 注 射 等 方 法 也 取 得 了 不 错 的 疗 效, 在 临 床 上 得 到 了 广 泛 的 运 用 8

19 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 4.2 饮 食 疗 法 素 问 五 脏 生 成 中 提 到 : 多 食 苦, 则 皮 槁 而 毛 拔 ; 多 食 咸, 则 脉 凝 泣 而 变 色 ; 多 食 辛, 则 筋 急 而 爪 枯 ; 多 食 酸, 则 肉 胝 皱 而 唇 揭 ; 多 食 甘, 则 骨 痛 而 发 落 由 此 可 见 饮 食 与 美 容 有 着 莫 大 的 关 联, 所 谓 药 食 同 源, 食 物 和 药 物 对 于 疾 病 的 治 疗 是 同 一 原 理, 针 对 黄 褐 斑 的 治 疗 应 多 摄 入 富 含 维 生 素 和 美 白 成 分 的 新 鲜 食 蔬, 如 : 柑 橘 牛 奶 番 茄 绿 茶 薏 仁 山 药 菊 花 等 4.3 音 乐 疗 法 天 有 五 音, 人 有 五 脏, 天 有 六 律, 人 有 六 腑, 此 人 与 天 地 相 应 也 ( 灵 枢 斜 客 ) 说 明 古 代 人 类 就 发 现 了 音 乐 与 人 体 脏 腑 有 关 联, 内 经 中 就 有 关 于 音 乐 疗 法 运 用 于 颜 面 部 疾 病 的 治 疗 和 调 理 的 记 载 现 代 研 究 表 明, 音 乐 是 具 有 一 定 频 率 的 声 波 震 动, 它 可 以 作 用 于 人 体 并 与 其 产 生 有 利 于 人 体 的 共 振, 一 方 面 调 和 人 体 气 血, 另 一 方 面 消 除 精 神 紧 张, 使 人 体 个 组 织 器 官 运 行 协 调, 刺 激 神 经 自 主 调 节, 促 进 血 液 循 环, 加 强 新 陈 代 谢, 减 轻 病 理 因 素, 从 而 达 到 治 疗 疾 病 的 效 果 黄 褐 斑 的 生 成 与 情 志 不 畅, 气 滞 失 调 有 关, 因 而 要 多 倾 听 舒 缓, 愉 悦 的 乐 曲, 以 消 散 患 者 体 内 郁 结 二 现 代 医 学 对 黄 褐 斑 的 认 识 及 研 究 现 代 医 学 研 究 认 为 黄 褐 斑 是 一 种 发 生 于 颜 面 的 色 素 增 生 性 皮 肤 病, 其 临 床 表 现 以 面 部 局 限 性 淡 褐 色 或 褐 色 斑 片 呈 对 称 分 布 于 面 部, 无 自 觉 症 状, 无 炎 症 表 现 及 鳞 屑 病 情 可 稍 有 变 化, 大 部 分 患 者 病 程 持 续 较 长, 可 持 续 数 年 或 数 月 本 病 病 因 及 影 响 因 素 较 为 复 杂, 临 床 治 疗 上 也 无 特 别 有 效 的 方 法 成 为 当 今 医 学 的 一 大 难 题 1. 病 因 病 机 研 究 1.1 日 光 照 射 [26] 紫 外 线 作 为 一 种 外 源 性 刺 激 可 激 活 酪 氨 酸 酶 活 性, 使 照 射 部 位 黑 素 细 胞 分 裂 加 速, 黑 素 生 成 增 加, 经 常 受 到 日 光 照 射 的 皮 肤 暴 露 部 位 更 易 引 发 黄 褐 斑 避 免 日 晒 或 使 用 广 谱 的 遮 光 剂 能 改 善 病 情, 过 度 日 光 照 射 则 会 使 病 情 加 重 1.2 心 理 因 素 [27] 精 神 抑 郁 或 激 动 时 容 易 造 成 色 素 加 深, 这 种 机 制 可 能 与 增 加 下 丘 脑 - 垂 体 系 统 的 MSH( 黑 素 细 胞 刺 激 素 ) 的 释 放 有 关 很 多 文 献 已 证 实 心 理 因 素 与 黄 褐 斑 的 发 病 率 直 接 相 关 可 以 看 出 黄 褐 斑 可 能 是 一 种 身 心 疾 病, 药 物 治 疗 的 同 时 给 予 心 理 疏 导 和 治 疗 有 助 于 提 高 整 体 疗 效 1.3 皮 肤 微 生 态 平 衡 皮 肤 表 面 有 大 量 微 生 物 存 在, 根 据 其 存 在 情 况 不 同 分 为 常 驻 菌 ( 如 痤 疮 丙 酸 杆 菌 葡 萄 9

20 第 一 部 分 理 论 研 究 球 菌 ) 和 暂 驻 菌 或 共 生 菌 ( 如 棒 杆 菌 需 氧 革 兰 氏 阴 性 菌 及 微 球 菌 ) 正 常 皮 肤 菌 群 之 间 的 共 生 或 拮 抗 作 用 能 维 持 在 一 个 相 对 稳 定 的 状 态 下 [28], 但 是 如 果 皮 肤, 环 境 及 病 理 状 态 下 的 微 生 态 失 衡, 则 会 引 起 皮 肤 的 病 理 性 损 伤 黄 褐 斑 的 产 生 与 皮 肤 微 生 态 的 失 调 和 紊 乱 有 关 皮 肤 的 正 常 菌 群 的 数 量 减 少 了, 如 常 驻 菌 分 离, 分 离 出 的 细 菌 数 量 显 着 增 加, 可 以 使 皮 肤 自 身 抵 抗 力 下 降, 甚 至 会 影 响 皮 肤 免 疫 系 统 代 谢 功 能 及 粘 膜 相 比 普 通 的 人 而 言, 黄 褐 斑 皮 损 部 位 的 暂 住 菌 改 变 显 着, 如 棒 状 杆 菌, 产 生 色 素 微 球 菌 和 需 氧 革 兰 阴 性 菌, 特 别 是 生 产 色 素 微 球 菌 增 加 显 着, 而 常 驻 菌 显 着 低 于 健 康 人 提 示 了 黄 褐 斑 患 者 皮 损 区 该 色 素 的 吸 收 和 沉 积 的 变 化 后 的 皮 肤 菌 群 参 与 黄 褐 斑 的 形 成 1.4 遗 传 因 素 研 究 发 现, 黄 褐 斑 在 棕 色 人 种 黄 色 人 种 的 人 群 中 多 发, 而 在 白 色 人 种 黑 色 人 种 中 发 病 率 较 低 而 且 许 多 家 系 调 查 结 果 发 现, 很 多 黄 褐 斑 患 者 拥 有 家 族 史, 占 黄 褐 斑 患 者 人 数 半 数 以 上, 并 而 男 性 患 者 有 家 族 史 的 比 例 相 较 女 性 更 高 另 外 有 研 究 发 现 黄 褐 斑 与 自 身 免 疫 性 甲 状 腺 疾 病 存 在 连 锁 遗 传 1.5 服 用 药 物 长 期 口 服 避 孕 药 的 妇 女, 由 于 体 内 激 素 水 平 的 变 化 [29], 也 会 和 妊 娠 一 样 会 诱 发 黄 褐 斑 报 道 显 示 长 期 服 用 冬 眠 灵 安 体 舒 通 苯 妥 英 钠 等 药 物 也 能 诱 发 黄 褐 斑 还 有 一 些 常 用 中 药 如 丹 皮 旱 莲 草 无 花 果 蛇 床 子 补 骨 脂 等 对 酪 氨 酸 酶 也 有 激 活 作 用 1.6 血 液 流 变 学 的 改 变 根 据 报 道 发 现 [30], 黄 褐 斑 患 者 的 全 血 粘 度 比, 红 细 胞 沉 降 率, 红 细 胞 和 其 他 内 容 较 正 常 对 照 组 有 显 著 差 异, 全 血 粘 度, 血 浆 浓 度, 红 细 胞 压 积, 纤 维 蛋 白 原 差 异 更 加 明 显, 证 实 黄 褐 斑 与 血 液 粘 度 增 加 而 致 血 液 瘀 滞, 微 循 环 障 碍 有 一 定 关 系 [31] 除 上 述 这 几 大 因 素 有 关 外, 黄 褐 斑 的 形 成 还 与 化 妆 品 使 用 不 当 空 气 污 染 微 量 元 素 如 锌 铜 铁 镁 等 的 改 变 及 内 分 泌 失 调 有 关 2. 临 床 表 现 与 组 织 病 理 黄 褐 斑 常 对 称 分 布 于 面 部 [32], 一 般 不 累 及 眼 睑 和 口 腔 粘 膜, 无 自 觉 症 状, 无 炎 症 表 现 及 鳞 屑 病 情 可 稍 有 变 化, 大 多 数 患 者 病 程 难 于 肯 定, 可 持 续 数 月 或 数 年 临 床 上 将 黄 褐 斑 按 发 病 部 位 分 为 四 型 : (1) 蝶 形 型 : 皮 损 主 要 分 布 于 两 侧 的 脸 颊, 呈 蝴 蝶 状 对 称 分 布 : (2) 面 上 部 型 : 皮 损 主 要 分 布 在 前 额, 颞 部, 鼻 子 和 脸 颊 (3) 面 下 部 型 : 皮 损 主 要 分 布 在 颊 下 部 口 周 (4) 泛 发 型 : 皮 损 泛 发 在 面 部 大 部 分 区 域 泛 发 型 又 可 根 据 病 因 分 为 二 型 : (1) 特 发 型 : 无 明 显 诱 因 者 (2) 继 发 型 : 由 于 妊 娠, 更 年 期, 口 服 避 孕 药 或 阳 光 照 射 等 原 因 而 诱 发 黄 褐 斑 的 组 织 学 特 征 : 表 皮 和 真 皮 的 类 型 的 电 子 显 微 镜 与 正 常 人 相 比, 在 细 胞 结 构 上, 没 有 实 质 性 的 差 异, 在 活 动 性 病 灶 的 形 成 处, 树 突 状 细 胞 的 色 素 细 胞 显 着 增 加 棘 层 角 阮 细 胞 内 含 有 大 量 的 单 个 细 胞 黑 色 素 颗 粒, 增 加 在 基 底 层 的 黑 素 细 胞, 真 皮 噬 黑 素 细 胞 分 布 10

21 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 不 均, 细 胞 质 丰 富, 含 有 极 少 量 的 黑 色 素 粒 子 且 直 径 较 小 存 在 很 多 的 噬 色 素 细 胞 和 游 离 色 素 粒 子, 有 时 可 见 少 数 血 管 周 围 淋 巴 细 胞 浸 润 3. 诊 断 及 鉴 别 诊 断 诊 断 :1 面 部 出 现 浅 棕 色 或 深 棕 色 的 明 显 斑 块, 边 界 清 晰, 通 常 呈 对 称 分 布, 无 炎 症 及 鳞 屑 ;2 无 明 显 其 他 不 适 症 状 ; 3 女 性 多 发, 主 要 发 生 于 青 春 期 后 期 ;4 本 病 情 季 节 性 明 显, 一 般 态 势 呈 夏 重 冬 轻 ;5 无 内 分 泌 疾 病, 并 排 除 其 它 疾 病 所 引 起 的 色 素 沉 着 ; 6 与 平 均 光 密 度 值 相 比, 面 部 色 素 沿 区 域 的 平 均 光 密 度 值 大 于 20% 以 上 鉴 别 诊 断 1 雀 斑 : 有 家 族 病 史, 色 素 斑 散 布 不 融 合 且 色 斑 细 小 ;2 瑞 尔 黑 变 病 : 色 素 斑 好 发 于 耳 部, 颞 部, 颈 部, 灰 褐 色, 呈 黑 褐 色 粉 末 状 的 薄 鳞 片 状 染 色 3Civatte 皮 肤 异 色 病 : 可 见 萎 缩 苍 白 的 杂 合 性 色 素 青 斑 网 状 分 布 4 太 田 痣 : 皮 损 为 淡 蓝 色, 深 蓝 色 或 蓝 黑 色 色 斑 片, 一 般 为 单 侧 病 变, 也 有 的 病 人 结 膜, 巩 膜 也 青 色 4. 现 代 医 学 的 治 疗 方 法 4.1 药 物 局 部 治 疗 氢 醌 制 剂 是 当 今 学 术 界 被 公 认 为 最 有 效 的 治 疗 黄 褐 斑 的 药 物 之 一 其 疗 效 和 配 制 浓 度, 基 质 及 化 学 稳 定 性, 与 浓 度 效 应 和 刺 激 度 是 成 比 例 的 若 浓 度 过 高, 可 以 造 成 永 久 的 皮 肤 漂 白, 常 用 于 局 部 的 浓 度 必 须 是 小 于 5%,3% 浓 度 的 氢 醌 是 最 佳 浓 度 其 作 用 机 制 是 阻 碍 酪 氨 酸 转 化 黑 素 细 胞, 抑 制 黑 色 素 的 生 物 合 成 但 并 不 稳 定, 强 烈 的 刺 激 性, 长 期 高 浓 度 时 可 引 起 不 均 匀 的 色 素 脱 失, 接 触 性 皮 炎, 外 源 性 黄 褐 斑 疗 效 与 [33] 它 们 的 制 备 方 法 的 浓 度, 基 质 和 化 学 稳 定 性 有 关 研 究 表 明 氢 醌 凝 胶 剂 对 抑 制 酪 氨 酸 酶 活 性, 淡 化 成 形 色 斑 有 显 著 疗 效 壬 二 酸 是 一 种 9 碳 直 链 饱 和 双 羟 基 脂 肪 酸 这 既 是 一 种 酪 氨 酸 酶 的 竞 争 性 抑 制 剂, 直 接 干 扰 黑 色 素 的 生 物 合 成, 但 过 于 活 跃 或 不 正 常 的 黑 素 细 胞 会 有 选 择 性 杀 伤 线 粒 体 呼 吸 和 细 胞 破 坏 的 DNA 合 成 的 抑 制 酪 氨 酸 酶 的 活 性, 以 减 少 产 生 的 黑 色 素 实 现 色 素 脱 失 20% 壬 二 酸 霜, 结 合 广 谱 防 晒 霜 治 疗 表 皮 和 混 合 的 黄 褐 斑, 具 有 显 著 的 效 果, 但 是 疗 程 较 长, 一 般 需 6 个 月 以 上 的 壬 二 酸 与 氢 醌 制 剂 相 较 而 言, 其 物 理 和 化 学 性 质 更 稳 定, 且 没 有 显 着 的 副 作 用 维 甲 酸 可 抑 制 体 外 培 养 黑 素 瘤 细 胞 的 酪 氨 酸 酶 活 性, 抑 制 黑 素 细 胞 形 成, 促 进 含 有 较 多 黑 素 颗 粒 的 表 皮 ( 尤 其 是 角 质 层 ) 脱 落, 并 抑 制 黑 素 颗 粒 向 角 质 形 成 细 胞 输 送, 减 少 黑 素 形 成 从 而 发 挥 脱 色 剂 作 用 阻 止 黑 素 向 角 质 形 成 细 胞 的 转 运, 减 少 角 质 形 成 细 胞 粘 合 度, 增 加 药 物 渗 透 但 相 对 来 说 表 皮 型 黄 褐 斑 效 果 明 显, 真 皮 型 则 效 差 其 副 作 用 为 轻 中 度 红 斑 及 脱 屑 使 用 时 可 从 低 浓 度 起 使 用, 逐 渐 增 至 1%, 以 免 引 起 局 部 刺 激 曲 酸 是 一 种 吡 喃 酮 类 化 合 物 [34], 它 通 过 抑 制 酪 氨 酸 酶 活 性 而 抑 制 黑 素 的 形 成 最 佳 外 用 浓 度 为 1% 左 右, 每 日 2 次, 疗 程 2 月 以 上, 有 效 率 87.4% 有 报 道 称 2% 曲 酸 与 5% 羟 基 乙 酸, 或 2% 曲 酸 与 0.025% 维 甲 酸, 或 2% 曲 酸 与 1% 维 生 素 C 联 用 有 较 好 的 疗 效 11

22 第 一 部 分 理 论 研 究 果 酸 分 子 结 构 较 简 单, 并 通 过 角 质 层, 是 一 种 小 分 子 量 的 酸 [35], 具 有 水 溶 性, 无 味, 无 毒, 有 很 强 的 渗 透 性, 可 以 被 皮 肤 吸 收 果 酸 共 有 37 种, 按 其 分 子 结 构 的 不 同, 分 子 量 由 小 到 大 依 次 是 甘 醇 酸 乳 酸 苹 果 酸 酒 石 酸 枸 橼 酸 杏 仁 酸 等 对 皮 肤 的 作 用 可 分 为 表 皮 效 应 色 素 效 应 与 真 皮 效 应 三 方 面 可 促 进 皮 肤 的 更 替, 近 年 来 果 酸 换 肤 风 靡 于 市 场, 高 浓 度 的 果 酸 进 行 皮 肤 角 质 的 剥 离 作 用, 促 使 老 化 角 质 层 脱 落, 加 速 角 质 细 胞 及 少 部 分 上 层 表 皮 细 胞 的 更 新 速 度, 促 进 真 皮 层 内 弹 性 纤 维 增 生, 低 浓 度 可 降 低 皮 肤 表 皮 黏 合 力 一 般 用 1% 浓 度 的 果 酸 进 行 黄 褐 斑 的 治 疗 果 酸 有 副 作 用 的 报 告 称, 使 用 者 在 换 肤 过 [36] 程 中, 皮 肤 可 能 会 出 现 了 瘙 痒 和 红 肿 有 人 应 用 不 同 浓 度 的 果 酸 治 24 例 痤 疮 患 者, 采 用 自 身 前 后 对 照 进 行 疗 效 观 察 治 疗 4 周 8 周 12 周 后 痤 疮 患 者 皮 损 减 退 率 分 别 为 34% 53% 69%, 有 效 率 分 别 为 83% 100% 100% 酚 化 合 物 ( 主 要 有 4- 异 丙 基 邻 苯 二 酚 4- 异 丙 基 儿 茶 酚 4- 羟 基 苯 甲 醚 及 茶 多 酚 等 ): 酚 类 化 合 物 可 以 被 酪 氨 酸 酶 代 谢 为 黑 素 细 胞 的 细 胞 毒 组, 但 会 引 起 皮 肤 过 敏, 接 触 性 皮 炎 有 试 验 证 明,2%-4 - 羟 基 茴 香 醚 和 0.01% 维 A 酸 的 混 合 制 剂, 以 减 轻 皮 肤 色 素 的 效 果, 不 会 造 成 不 可 逆 的 色 素 脱 失 N- 乙 酰 基 -4 - S - 半 光 胺 酚 是 一 种 新 型 的 漂 白 剂, 治 疗 黄 褐 斑 有 很 好 的 疗 效 其 稳 定 性 强, 刺 激 量 较 小, 不 会 导 致 永 久 性 色 素 脱 失 [37], 熊 果 甙 又 称 熊 果 素, 是 一 种 白 色 针 状 结 晶 或 粉 末 为 氢 醌 的 诱 导 体 与 多 巴 竞 争 酪 氨 酸 酶 的 受 体 位 点, 其 抑 制 的 百 分 比 和 效 果 比 曲 酸 弱 集 绿 色 植 物 安 全 可 靠 高 效 脱 色 的 特 点, 它 可 以 快 速 渗 透 肌 肤, 能 有 效 地 抑 制 酪 氨 酸 酶 的 活 性, 在 皮 肤 上 阻 止 黑 色 素 的 形 成, 酪 氨 酸 酶 直 接 键 合, 加 速 黑 色 素 的 分 解 和 排 泄, 从 而 减 少 色 素 沉 着 的 的 皮 肤, 清 除 色 斑 及 雀 斑, 并 对 黑 色 素 细 胞 不 产 生 副 作 用 如 毒 性, 刺 激 性, 过 敏 性 等, 还 兼 有 杀 菌, 消 炎 的 作 用 4.2 药 物 全 身 治 疗 维 生 素 C 和 维 生 素 E 维 生 素 C 能 抑 制 氧 化 多 巴, 使 得 皮 肤 黑 色 素 减 少 到 无 色 物 质 和 黑 色 素 成 水 溶 性 胶 质 适 用 于 轻 度 黄 褐 斑 的 治 疗 脂 溶 性 维 生 素 E 其 脂 质 成 分 决 定 了 其 清 除 自 由 基 的 作 用, 减 少 脂 质 过 氧 化 作 用 比 维 生 素 C 以 及 它 们 的 组 合 是 显 着 优 于 单 用, 这 可 能 是 由 于 维 生 素 C 和 维 生 素 E 协 同 效 应 的 缘 故, 维 生 素 C 和 维 生 素 E 协 同 使 用 应 该 需 大 量 止 血 环 酸 又 称 氨 甲 环 酸 (tranexamic acid) 是 与 酪 氨 酸 的 部 分 结 构 类 似 的 抗 纤 维 蛋 白 溶 解 的 止 血 剂, 参 与 黑 色 素 的 代 谢, 共 有 一 个 羧 基, 可 以 对 酪 氨 酸 酶 的 竞 争 性 抑 制, 从 [38] 而 减 少 黑 色 素 的 形 成 其 商 品 名 称 为 妥 塞 敏,0.5g/ 片, 每 日 2 次, 有 人 使 用 氨 甲 环 酸 结 合 微 晶 磨 皮 治 疗 黄 褐 斑,45 例 患 者 总 有 效 率 为 86.67% 谷 胱 甘 肽 与 维 生 素 C 并 用 是 一 种 含 γ- 酰 胺 键 和 巯 基 的 三 肽, 是 一 种 由 多 种 氨 基 酸 构 成 的 三 肽 化 合 物 其 分 子 中 含 活 性 巯 基, 后 者 通 过 抑 制 酪 氨 酸 酶 的 活 性, 抑 制 黑 素 的 形 成, 单 独 使 用 有 效 率 59.6% 儿 茶 素 绿 茶 的 提 取 物, 又 称 儿 茶 精, 茶 单 宁 为 黄 烷 醇 的 衍 生 物, 儿 茶 素 最 初 由 儿 12

23 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 茶 中 提 出 为 无 色 结 晶 形 固 体, 能 溶 于 水 具 有 很 强 的 抗 氧 化 活 性, 能 清 除 自 由 基, 儿 茶 素 是 天 然 的 抗 氧 化 剂, 抗 氧 化 活 性 甚 至 比 维 生 素 C 维 生 素 E 高, 且 可 以 清 除 人 体 产 生 的 自 由 基, 以 保 护 细 胞 膜, 通 过 提 高 机 体 的 氧 化 能 力 来 淡 化 色 斑 原 花 色 素 葡 萄 籽 提 取 物, 是 一 种 高 效 的 的 氧 自 由 基 清 除 剂 和 脂 质 过 氧 化 抑 制 剂, 1951 年 法 国 科 学 家 首 次 发 现 了 它 的 抗 氧 化 能 力, 近 代 科 学 研 究 进 一 步 发 现 其 活 性 比 一 些 天 然 抗 氧 化 剂 ( 维 生 素 C 胶 原 蛋 白 等 ) 还 要 强 能 使 黄 褐 斑 患 者 的 黑 素 指 数 斑 片 大 小 得 到 明 显 改 善 4.3 物 理 治 疗 光 子 嫩 肤 光 子 嫩 肤 仪 治 疗 黄 褐 斑, 所 利 用 的 是 选 择 性 光 热 解 的 原 理, 强 脉 冲 光 穿 透 皮 肤, 使 组 织 中 的 色 素 颗 粒 首 先 被 吸 收, 使 得 电 光 能 转 化 为 热 能, 从 而 使 色 素 颗 粒 被 破 坏 分 解, 部 分 由 从 表 皮 脱 落, 其 表 现 为 皮 肤 的 表 层 形 成 黑 色 痂 皮, 待 痂 皮 自 然 脱 落, 部 分 由 吞 噬 细 胞 吞 噬 后 转 运 排 出 体 外 治 疗 时, 面 部 可 能 会 出 现 红 斑 或 色 素 加 深, 红 斑 一 般 在 2 h 后 消 失, 加 深 的 色 素 则 表 现 为 颜 面 部 的 色 素 薄 痂, 一 般 几 周 内 均 可 自 然 脱 落 赵 一 丁 [39] 等 对 49 例 黄 褐 斑 患 者 采 用 E 光 结 合 中 药 祛 斑 汤, 每 4 周 治 疗 1 次,3 次 为 1 个 疗 程,12 周 后 有 效 率 为 87.76% 激 光 激 光 治 疗 黄 褐 斑 的 基 本 原 理 和 光 子 嫩 肤 类 似, 但 激 光 的 能 量 更 强, 并 且 可 通 过 波 长 调 节 来 控 制 治 疗 深 度 现 在 临 床 上 用 得 最 多 的 美 容 激 光 主 要 是 Q 开 关 激 光 宋 为 民 [40] 等 试 用 大 光 斑 低 能 量 Q 开 关 Nd:YAG 激 光 治 疗 黄 褐 斑, 患 者 20 次 后 有 效 率 大 90.00% 尽 管 现 代 医 学 激 光 治 疗 黄 褐 斑 方 面 取 得 了 一 些 效 果, 但 是 临 床 实 践 中 发 现 其 效 果 并 不 确 切 和 稳 定, 且 存 在 许 多 潜 在 的 治 疗 后 遗 证 如 色 素 增 多, 因 而 难 以 达 到 预 期 的 目 标 所 以 许 多 皮 肤 科 和 激 光 科 不 主 张 将 激 光 作 为 黄 褐 斑 的 首 选, 仅 用 于 其 他 方 法 无 效 黑 素 较 深 的 患 者 另 外, 还 有 超 声 波 导 入 微 晶 换 肤 超 声 波 磨 削 注 射 的 方 法, 均 取 得 了 不 错 的 疗 效 13

24 第 二 部 分 实 验 研 究 第 二 部 分 实 验 研 究 一 实 验 材 料 1. 实 验 动 物 48 只 昆 明 种 雌 性 小 鼠, 体 重 20g 左 右 ( 南 京 青 龙 山 实 验 动 物 中 心 提 供, 淸 洁 级 ) 南 京 中 医 药 大 学 实 验 中 心 饲 养, 在 自 然 条 件 相 同 的 情 况 下, 常 规 饲 食 饮 水, 室 温 :20~25, 湿 度 :20~30%, 自 由 摄 食 饮 水, 饲 料 为 全 价 颗 粒 饲 料 (Ca:0.5%), 饲 养 10 天 适 应 环 境 后 再 开 始 进 行 实 验 2. 实 验 药 品 祛 斑 玉 容 方 组 成 : 黄 芪 20g 桃 仁 15g 红 花 10g 当 归 15g 熟 地 15g 川 芎 10g 芍 药 15g 柴 胡 10g 甘 草 5g vc 注 射 液 生 理 盐 水 面 膜 方 ( 粉 剂 ) 组 成 : 当 归 15g 红 花 10 白 芷 30g 白 术 30g 白 茯 苓 10g 薏 仁 30g 白 芍 10g 白 及 15g 白 附 子 10g 蜂 蜜 适 量 3. 实 验 仪 器 紫 外 线 光 疗 仪 电 动 玻 璃 匀 浆 机 台 式 高 速 冷 冻 离 心 机 系 统 生 物 显 微 镜, 病 理 图 像 分 析 系 统 酶 标 仪 恒 温 孵 育 箱 分 光 光 度 计 造 模 笼 具 灌 胃 针, 温 和 型 脱 毛 膏 宠 物 剃 毛 器 等 4. 试 剂 和 药 物 酪 氨 酸 (Tyr) 检 测 试 剂 盒 BCA 蛋 白 测 定 试 剂 盒 一 抗 {melanoma 黑 素 瘤 }( 兔 抗 鼠 ) 二 抗 ( 羊 抗 兔 ) 柠 檬 酸 盐 抗 原 液 磷 酸 盐 (PBS) 缓 冲 液 抗 体 稀 释 液 5. 试 剂 配 制 方 法 (1)Vc 注 射 液 :1 支 :125ml 生 理 盐 水 每 次 每 只 小 鼠 0.5ml(2)PBS 溶 液 : 磷 酸 盐 缓 冲 剂,2000ml 蒸 馏 水 (3) 一 抗 (HMB45) 试 剂 :0.25ml 抗 体 稀 释 液 配 0.25ml 双 蒸 水, 混 均 后 取 出 100 微 升, 与 0.1ml 一 抗 混 合, 再 加 入 抗 体 稀 释 液 10ml (4)DAB 显 色 剂 : 浓 缩 DAB 溶 液 浓 缩 过 氧 化 氢 溶 液 各 两 滴, 浓 缩 缓 冲 液 二 实 验 方 法 1. 分 组 与 饲 养 将 动 物 随 机 分 为 6 组 : 正 常 对 照 组 模 型 对 照 组 中 药 预 防 组 vc 治 疗 组 中 药 治 疗 组 中 药 合 面 膜 治 疗 组, 每 组 8 只 分 笼 饲 养, 室 温 20~25, 湿 度 20~30%, 自 由 摄 食 饮 水, 饲 料 为 全 价 颗 粒 饲 料 (Ca:0.5%) 14

25 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 2. 建 立 黄 褐 斑 小 鼠 模 型 采 用 中 波 紫 外 线 照 射 雌 性 小 鼠 复 制 黄 褐 斑 动 物 实 验 模 型 按 分 组 编 号, 将 小 鼠 分 笼 饲 养 以 剃 毛 器 剃 去 小 鼠 脊 柱 两 侧 及 靠 臀 部 皮 肤 短 毛, 然 后 将 脱 毛 膏 涂 于 小 鼠 背 部, 稍 待 1~2min 后 以 干 布 擦 去, 再 以 湿 抹 布 擦 净 在 实 验 过 程 中 发 现 小 鼠 背 部 短 毛 长 出 者, 即 立 刻 以 剃 毛 器 剃 尽 24h 后 行 紫 外 线 灯 照 射 UVB 紫 外 灯 灯 管 的 光 谱 值 为 320nm, 灯 管 距 小 鼠 背 部 距 离 20cm, 连 续 照 射 4 周, 每 天 60min 3. 动 物 分 组 实 验 方 法 (1) 空 白 对 照 组 : 不 造 模, 不 作 治 疗, 治 疗 组 完 成 后 次 日 颈 椎 脱 臼 处 死 小 鼠, 取 小 鼠 血 背 部 皮 肤, 检 测 和 观 察 相 关 指 标 和 皮 肤 形 态 (2) 模 型 对 照 组 : 只 造 模, 不 作 治 疗, 治 疗 组 完 成 后 次 日 颈 椎 脱 臼 处 死 小 鼠, 取 小 鼠 血 及 背 部 皮 肤, 检 测 和 观 察 相 关 指 标 和 皮 肤 形 态 (3) 中 药 预 防 组 : 造 模 前 中 药 内 服 连 续 10 天 造 模, 治 疗 组 完 成 后, 第 二 天 颈 椎 脱 臼 处 死 小 鼠, 取 小 鼠 血 及 背 部 皮 肤, 检 测 相 关 指 标 和 皮 肤 形 态 (4)vc 治 疗 组 : 造 模, 造 模 完 成 后 灌 胃 口 服 vc4 周, 根 据 成 人 正 常 剂 量, 按 比 率 换 算, 每 日 每 只 100mg/kg, 治 疗 完 成 后 次 日 颈 椎 脱 臼 处 死 小 鼠, 取 小 鼠 血 及 背 部 皮 肤, 检 测 相 关 指 标 和 皮 肤 形 态 (5) 中 药 治 疗 组 : 造 模, 造 模 完 成 后, 予 小 鼠 灌 服 中 药 方 治 疗 4 周, 治 疗 完 成 后 次 日 颈 椎 脱 臼 处 死 小 鼠, 取 小 鼠 血 及 背 部 皮 肤, 检 测 相 关 指 标 和 皮 肤 形 态 (6) 中 药 合 面 膜 治 疗 组 : 造 模, 造 模 完 成 后, 给 小 鼠 灌 服 中 药 方 合 面 膜 治 疗 4 周, 治 疗 完 成 后 次 日 颈 椎 脱 臼 所 有 小 鼠, 取 小 鼠 血 及 背 部 皮 肤, 检 测 相 关 指 标 和 皮 肤 形 态 4. 给 药 方 法 及 剂 量 4.1 剂 型 : 祛 斑 玉 容 方 为 煎 剂 面 膜 方 为 粉 剂 4.2 方 法 : 祛 斑 玉 容 方 灌 服 面 膜 方 外 敷 4.3 剂 量 采 用 中 波 紫 外 线 照 射 白 色 雌 性 小 鼠 4 周 后, 灌 服 祛 斑 玉 容 方 煎 剂, 按 照 人 体 临 床 用 药 剂 量 标 准 换 算 所 得, 小 鼠 每 10g 体 重 给 予 0.06g 生 药 量, 每 只 小 鼠 体 重 20g 左 右, 由 此 可 知 平 均 小 鼠 每 天 生 药 量 为 0.12g/ 只 ( 相 当 于 人 体 临 床 标 准 剂 量 ) 灌 胃 口 服 vc, 每 只 每 天 口 服 剂 量 按 100mg/kg 的 比 例,20g 的 豚 鼠 每 只 每 天 约 2mg 面 膜 方 ( 粉 剂 ) 组 成 : 当 归 15g 红 花 10 白 芷 30g 白 术 30g 白 茯 苓 10g 薏 仁 30g 白 芍 10g 白 及 15g 白 附 子 10g, 打 粉 混 合 调 匀, 每 次 实 验 取 5g, 用 2 勺 蜂 蜜 调 匀 5. 取 材 及 指 标 测 定 5.1 标 本 采 集 治 疗 4 周 后, 截 止 取 材 时, 除 去 灌 胃 期 间 死 亡 的 小 鼠, 取 材 小 鼠 共 40 只 ( 除 去 因 灌 15

26 第 二 部 分 实 验 研 究 胃 或 自 然 死 亡 的 小 鼠 ) 于 取 材 前 再 进 行 一 次 脱 毛, 对 小 鼠 进 行 眼 眶 血, 并 于 最 后 一 次 灌 药 60min 后 将 所 有 小 鼠 颈 椎 脱 臼 处 死, 迅 速 取 其 脱 毛 后 皮 肤 组 织 标 本 (1.0*1.0cm) 5.2 生 化 指 标 将 血 液 以 2500r/min 离 心 15min, 取 上 清 液, 按 酪 氨 酸 酶 试 剂 盒 说 明 书 操 作, 进 行 指 标 测 定 5.3 皮 肤 黑 色 素 细 胞 的 病 理 形 态 学 检 测 分 别 取 小 鼠 去 毛 皮 肤 1 块 (1.0X1.0cm),10% 福 尔 马 林 固 定, 常 规 石 蜡 包 埋 切 片, 黑 色 素 标 记 采 用 免 疫 组 织 化 学 技 术, 再 经 脱 蜡 至 水, 抗 原 修 复 后, 用 HMB45(melanoma 黑 素 瘤 ) 为 第 一 抗 体, 免 疫 组 化 二 步 法,DAB 显 色, 苏 木 素 复 染 用 PBS 代 替 一 抗 做 阴 性 对 照, 光 学 显 微 镜 下 计 算 各 组 黑 色 素 细 胞 个 数 5.6 免 疫 组 化 方 法 (1) 修 片 在 皮 肤 上, 去 除 多 余 的 脂 肪 和 结 缔 组 织 再 将 组 织 切 片 泡 10% 的 甲 醛 固 定 剂 中 (2) 石 蜡 包 埋, 切 片 (3) 常 规 脱 蜡 用 二 甲 苯 脱 蜡, 复 再 用 乙 醇 脱 蜡 (4) 水 化 在 自 然 水 蒸 馏 水 中 分 别 泡 洗 两 遍, 约 各 2min, 然 后 将 组 织 切 片 浸 泡 入 配 制 好 的 PBS 溶 液 中, 每 次 2min, 洗 两 次 (5) 根 据 一 抗, 组 织 切 片 的 预 处 理 柠 檬 酸 抗 原 修 复 被 添 加 到 2000 毫 升 的 蒸 馏 水, 煮 沸 5 分 钟 到 解 决 方 案 的 组 织 切 片 灭 火, 煮 70 秒 至 完 全 冷 却 (6) 蒸 馏 水 再 次 清 洗 切 片, 多 甩 几 次, 不 要 残 留 蒸 馏 水,3% 过 氧 化 氢 溶 液 (H 2 O) 的 去 离 子 水 滴 在 孵 化 器 上 的 膜 在 37 Ç 孵 育 5-7min, 然 后 用 PBS 洗 涤, 每 次 2min, 多 冲 洗 几 次 (7) 滴 入 配 制 好 的 一 抗 试 剂, 温 箱 37 孵 育 2h,PBS 冲 洗 3 次, 每 次 2min (8) 滴 加 免 疫 组 化 二 步 法 检 测 试 剂 盒,37 孵 育 30min,PBS 冲 洗 3 次, 每 次 2min (9)DAB 显 色 5~10min (10) 蒸 馏 水 冲 洗 10min (11) 苏 木 素 复 染, 常 规 脱 水 透 明 (12) 封 片 片 子 上 加 滴 一 滴 中 性 树 胶, 以 盖 玻 片 封 片 另 备 两 张 片 子 用 PBS 代 替 一 抗 做 阴 性 对 照 5.8 酪 氨 酸 酶 测 定 按 测 定 试 剂 盒 的 操 作 要 求 进 行 5.9 统 计 学 方 法 SPSS17 统 计 学 软 件, 数 据 以 ( x ± s ) 表 示, 进 行 方 差 分 析 16

27 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 三 实 验 结 果 1. 各 组 小 鼠 血 中 酪 氨 酸 酶 含 量 经 祛 斑 玉 容 方 灌 服 4 周 后,vc 对 照 组 中 药 治 疗 组 中 药 合 面 膜 治 疗 组 中 药 预 防 组 与 模 型 对 照 组 比 较, 酪 氨 酸 酶 含 量 明 显 降 低, 差 异 显 著, 有 统 计 学 意 义 (P<0.05), 中 药 对 照 组 中 药 合 面 膜 治 疗 组 与 vc 对 照 组 组 比 较, 酪 氨 酸 酶 含 量 明 显 降 低, 差 异 显 著, 具 有 统 计 学 意 义 (P<0.05) 各 治 疗 组 与 模 型 对 照 组 相 比, 在 治 疗 后, 酪 氨 酸 酶 含 量 均 有 不 同 程 度 降 低, 可 见 选 择 的 治 疗 方 法 均 有 一 定 疗 效, 相 互 之 间 有 可 比 性 见 表 1 表 1 小 鼠 血 中 酪 氨 酸 酶 含 量 表 ( x ±s) 组 别 例 数 酪 氨 酸 酶 (u) 正 常 空 白 组 模 型 对 照 组 中 药 组 VC 组 预 防 组 中 药 合 面 膜 组 ±1.197*# ±2.068# ±1.150* ±1.428* ±1.607* ±1.315* 方 差 F 值 分 析 P 值 注 : 与 模 型 组 比 较, #P<0.01, 具 有 显 著 性 意 义 与 中 药 合 面 膜 组 比 较,* P<0.05, 具 有 统 计 学 意 义 与 预 防 组 比 较, P<0.05, 具 有 统 计 学 意 义 2. 各 组 小 鼠 皮 肤 HE 染 色 的 病 理 形 态 学 观 察 17

28 第 二 部 分 实 验 研 究 2.1 空 白 对 照 组 : 鳞 状 上 皮 显 示 是 薄 的, 并 没 有 增 生, 是 由 2~3 层 的 上 皮 细 胞, 表 面 含 少 量 的 角 质 真 皮 看 到 正 常 的 毛 囊, 皮 脂 腺 和 无 汗 腺, 正 常 的 结 缔 组 织, 皮 下 脂 肪 和 肌 肉 组 织 见 图 1, 图 2 图 1. 空 白 对 照 组 100X 空 白 对 照 组 表 皮 较 薄, 附 属 器 不 多, 未 见 炎 性 细 胞 图 2. 空 白 对 照 组 400X 2.2 模 型 对 照 组 : 表 皮 的 上 皮 细 胞 的 增 生 明 显, 层 数 增 加 时,4~5 层 的 数 目 增 加, 出 现 疣 状 增 生 乳 头 状 瘤 增 生, 局 部 炎 症 细 胞 增 多, 毛 囊 和 皮 脂 腺 增 生 明 显 见 图 3 图 4 图 3. 模 型 对 照 组 100 X 图 4. 模 型 对 照 组 400 X 模 型 对 照 组 表 皮 明 显 增 生, 附 属 器 增 多, 局 部 呈 疣 状 增 生 18

29 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 2.3 vc 治 疗 组 : 上 皮 细 胞 增 生, 但 细 胞 层 的 数 量 是 小 于 模 型 组, 在 预 防 组 以 上,3~4 层 附 件 增 生, 出 现 炎 症 细 胞 见 图 5 图 6 图 5. vc 治 疗 组 100 X 图 6.vc 治 疗 组 400 X vc 对 照 组 附 属 器 有 增 生, 可 见 炎 性 细 胞, 上 皮 层 数 较 模 型 组 减 少 2.4 中 药 治 疗 组 : 2~3 层 上 皮 层 数 量, 接 近 正 常 对 照 组, 部 分 上 皮 增 生 轻 微, 局 部 见 有 少 量 炎 症 细 胞 和 纤 维 组 织 增 生,3 至 7 层 毛 囊, 皮 脂 腺 分 泌 较 模 型 组 下 降 明 显, 基 本 无 增 生, 接 近 正 常 对 照 组 见 图 7 图 8. 图 7. 中 药 治 疗 组 100 X 图 8. 中 药 治 疗 组 400 X 中 药 治 疗 组 上 皮 层 数 接 近 正 常, 约 有 2~3 层, 见 有 少 量 炎 性 细 胞 19

30 第 二 部 分 实 验 研 究 2.5 中 药 合 面 膜 治 疗 组 : 上 皮 细 胞 层 数 接 近 空 白 组, 约 1~2 层, 有 中 性 粒 细 胞 聚 集, 上 皮 细 胞 排 列 有 疏 松, 皮 脂 腺 增 生 少 见, 偶 见 炎 性 细 胞, 局 部 上 皮 有 增 生 见 图 9 图 10 图 9. 中 药 合 面 膜 治 疗 组 100 X 图 10. 中 药 合 面 膜 治 疗 组 400 X 中 药 合 面 膜 治 疗 组 : 上 皮 细 胞 接 近 正 常 组, 附 属 器 减 少, 局 部 偶 见 增 生 2.6 中 药 预 防 组 : 上 皮 细 胞 层 是 薄 的, 比 对 照 组 略 厚 细 胞 排 列 松 散, 附 属 器 偶 尔 增 生, 局 部 浸 润 的 炎 症 细 胞, 毛 囊, 皮 脂 腺 的 数 量 低 于 模 型 组 见 图 11 图 12 图 11. 中 药 预 防 组 100 X 图 12. 中 药 预 防 组 400 X 中 药 预 防 组 上 皮 细 胞 较 薄, 偶 见 毛 囊 皮 脂 腺 增 生, 局 部 有 炎 性 细 胞 浸 润 20

31 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 3. 各 组 小 鼠 皮 肤 免 疫 组 织 化 学 的 病 理 形 态 学 观 察 3.1 空 白 对 照 组 : 毛 囊 皮 脂 腺 基 底 细 胞 中 见 有 少 量 黑 色 素, 胞 浆 着 色 棕 褐 色 以 人 体 皮 肤 组 织 HMB45 标 记 作 为 阳 性 对 照, 黑 色 素 细 胞 排 列 整 齐, 棘 细 胞 层 中 见 少 量 阳 性 细 胞, 表 皮 中 未 见 黑 色 素 细 胞 见 图 13, 图 14 图 13. 空 白 对 照 组 100X 图 14. 空 白 对 照 组 400X 3.2 模 型 对 照 组 : 免 疫 组 化 HMB45 (400x) 表 皮 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 层 中 可 见 成 簇 分 布 的 黑 素 细 胞, 上 皮 层 明 显 增 厚 且 黑 素 细 胞 增 多, 成 簇 分 布 于 毛 囊 基 底 细 胞 团 中, 表 皮 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 层 中 亦 见 单 个 散 在 分 布 的 黑 素, 细 胞 核 增 大 且 伴 有 核 上 移, 胞 浆 着 色 为 褐 色, 呈 强 阳 性 反 应 见 图 15, 图 16 图 15. 模 型 对 照 组 100 X 图 16. 模 型 对 照 组 400 X 21

32 第 二 部 分 实 验 研 究 3.3 vc 治 疗 组 : 免 疫 组 化 HMB45(400X) 表 皮 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 层 中 亦 见 单 个 散 在 分 布 的 黑 素 细 胞 基 底 层 黑 素 数 量 与 模 型 组 比 较 略 有 少, 胞 浆 呈 深 棕 褐 色 见 图 17 图 18 图 17. vc 治 疗 组 100 X 图 18.vc 治 疗 组 400 X 3.4 中 药 治 疗 组 : 表 皮 基 底 细 胞 排 列 整 齐, 可 见 在 基 底 层 细 胞 和 棘 细 胞 层 内, 多 分 布 零 散 的 黑 素 细 胞 的 细 胞 质 染 色 深 棕 褐 色 的 黑 素 细 胞, 黑 素 细 胞 的 深 度, 细 胞 数 量 和 深 度 均 比 vc 治 疗 组 在 基 底 层 少 见 图 19, 图 20 图 19. 中 药 治 疗 组 100 X 图 20. 中 药 治 疗 组 400 X 22

33 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 3.5 中 药 合 面 膜 治 疗 组 : 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 层 可 见 的 现 象 较 少 的 黑 素 细 胞 分 布 相 对 分 散, 分 布 密 集 见 图 21, 图 22 图 21. 中 药 合 面 膜 治 疗 组 100 X 图 22. 中 药 合 面 膜 治 疗 组 400 X 3.6 中 药 预 防 组 : 黑 色 素 细 胞 的 数 量 较 Vc 组 明 显 减 少, 见 图 23,24 图 23. 中 药 预 防 组 100 X 图 24. 中 药 预 防 组 400 X 4. 祛 斑 玉 容 方 对 小 鼠 表 皮 黑 素 细 胞 个 数 及 数 密 度 的 影 响 灌 服 祛 斑 玉 容 方 4 周 后,vc 对 照 组 中 药 治 疗 组 中 药 合 面 膜 治 疗 组 中 药 预 防 组 小 鼠 皮 肤 黑 色 素 阳 性 细 胞 个 数 及 靶 目 标 内 黑 色 素 细 胞 的 数 密 度 呈 下 降 趋 势, 跟 模 型 对 照 组 比 较, 有 统 计 学 意 义 (P<0.05) 中 药 治 疗 组 中 药 合 面 膜 治 疗 组 中 药 预 防 组 与 阳 性 药 物 对 照 组 比 较, 明 显 下 降, 差 异 显 著 (P<0.05) 见 表 2 23

34 第 二 部 分 实 验 研 究 表 2 小 鼠 皮 肤 黑 色 素 细 胞 的 个 数, 数 密 度 ( x ±s) 组 别 n 黑 色 素 细 胞 的 个 数 数 密 度 比 较 正 常 空 白 组 ±0.74 模 型 对 照 组 ±0.58 中 药 组 ±0.86 Vc 组 ±0.78 预 防 组 ±0.68 中 药 合 面 膜 组 ±0.79 注 : 与 模 型 对 照 组 比 较,P<0.05; 与 阳 性 药 物 对 照 组 比 较, P<

35 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 分 析 讨 论 一 造 模 方 法 的 选 择 目 前 黄 褐 斑 动 物 实 验 模 型 的 造 模 方 法 主 要 有 : 紫 外 线 照 射 法 雌 激 素 攻 击 法 及 微 量 定 点 注 射 等 [41] 潘 杨 等 使 用 UVB 照 射 雌 性 豚 鼠 1 个 月, 根 据 皮 肤 黑 素 细 胞 的 病 理 形 态 学 指 标, 皮 肤 和 肝 组 织, 酪 氨 酸 和 超 氧 化 物 歧 化 酶 (SOD), 丙 二 醛 (MDA) 的 变 化 来 看, 结 果 显 示 : 豚 鼠 皮 肤 黑 色 素 的 色 素 沉 着, 皮 肤 和 肝 脏 酪 氨 酸, 丙 二 醛 (MDA) 含 量 显 着 高 含 量 下 降 [42] SOD 结 论 UVB 照 射 雌 性 白 色 豚 鼠 黄 褐 斑 实 验 动 物 模 型 成 功 日 本 的 猪 木 彩 子 采 用 UVB 照 射 小 鼠 的 方 法 复 制 黄 褐 斑 动 物 实 验 模 型, 研 究 木 槿 提 取 物 抑 制 黑 素 生 成 的 作 用 过 伟 峰 根 据 假 设 的 雌 激 素 和 孕 激 素 增 加, 刺 激 黑 色 素 细 胞 而 致 色 素 沉 着 的 发 生 率 导 致 内 分 泌 失 调 这 个 论 点, 用 黄 体 酮 注 射 液 (2 倍,8 倍 等 量 的 人 体 临 床 组 ) 攻 击 雌 性 小 鼠, 从 而 复 制 黄 褐 斑 的 动 物 模 型 通 过 检 测 肝 脏 和 皮 肤 中 丙 二 醛 (MDA) 酪 氨 酸 超 氧 化 物 歧 化 酶 (SOD) 含 量 和 皮 肤 黑 素 细 胞 生 长 指 标, 以 检 查 是 否 造 模 成 功 结 果 显 示 : 酪 氨 酸 的 活 性 和 丙 二 醛 (MDA) 含 量 显 着 增 加, 可 见 模 型 组 在 集 群 位 于 毛 囊 的 基 底 细 胞 显 着 增 加 的 黑 色 素 细 胞 的 病 理 检 测 呈 强 阳 性 反 应 (P <0.01), 说 明 孕 激 素 黄 褐 斑 攻 击 由 于 雌 性 小 鼠 的 动 物 模 型 是 成 功 的 汪 南 玥 等 使 用 的 是 各 种 致 病 因 素 复 合 法 ( 孕 激 素 + UV+ 束 缚 ) 建 立 小 鼠 实 验 模 型 是 成 功 的, 黄 褐 斑 的 产 生 主 要 是 由 于 内 分 泌 失 调, 阳 光 可 加 重 黄 褐 斑 的 症 状, 皮 肤 分 泌 更 多 的 黑 色 素 颗 粒 的 主 要 的 病 变 的 病 理 变 化 的 机 制, 并 考 虑 到 肝 郁 是 比 较 常 见 的 中 医 证 型 的 黄 褐 斑 类 型 本 主 题 拟 建 立 局 部 皮 肤 的 UVB 照 射 小 鼠, 孕 激 素 全 身 注 射 及 多 因 素 建 模 方 法 的 束 缚, 建 立 黄 褐 斑 的 肝 郁 模 型, 并 与 现 有 模 型 相 比, 促 进 黄 褐 斑 治 疗 开 发 新 的 药 物, 以 提 供 更 科 学 的 模 型 日 光 照 射 是 黄 褐 斑 发 生 的 重 要 因 素, 紫 外 线 作 为 一 种 外 源 性 刺 激 可 使 黑 色 素 细 胞 分 裂 增 殖, 过 度 的 日 光 照 射 可 使 病 情 加 重, 这 可 能 与 阳 光 照 射 后 维 生 素 D3 参 与 有 关 研 究 证 明 [43], 维 生 素 D3 能 增 加 黑 色 素 细 胞 中 酪 氨 酸 酶 的 含 量, 并 能 够 调 节 或 者 诱 导 黑 色 素 的 合 成 近 年 有 研 究 发 现 [44], 紫 外 线 照 射 后 能 刺 激 角 朊 细 胞 产 生 和 分 泌 内 皮 素 它 可 作 用 于 黑 色 素 细 胞, 加 强 黑 色 素 细 胞 的 增 生 根 据 紫 外 线 照 射 是 黄 褐 斑 的 主 要 致 病 因 素, 故 可 以 通 过 紫 外 线 照 射 使 黑 色 素 细 胞 增 殖 来 复 制 黄 褐 斑 实 验 动 物 模 型 用 中 波 紫 外 线 攻 击 小 鼠 1 个 月, 并 以 小 鼠 皮 肤 病 理 形 态 学 及 血 液 中 的 酪 氨 酸 酶 含 量 的 变 化 作 为 黄 褐 斑 模 型 是 否 成 功 的 检 查 指 标 实 验 结 果 显 示, 被 紫 外 线 攻 击 的 动 物 皮 肤 病 理 形 态 学 肉 眼 观 察 黑 色 素 沉 着 面 积 扩 大 着 色 加 深, 与 黄 褐 斑 的 临 床 表 现 一 致, 进 一 步 证 实 了 中 波 紫 外 线 复 制 该 模 型 的 科 学 性 另 外, 本 人 在 实 验 的 造 模 过 程 中 发 现, 根 据 众 多 文 献 显 示 每 天 造 模 60min, 由 于 小 鼠 皮 薄 肉 嫩, 经 过 长 时 间 的 紫 外 线 照 射 后, 通 过 观 察 可 以 发 现 小 鼠 局 部 裸 露 的 皮 肤 会 出 现 红 25

36 分 析 讨 论 肿 灼 热, 甚 至 发 炎 的 现 象, 遂 将 每 天 的 造 模 时 间 间 隔, 照 射 30min 后 暂 停 10min, 待 温 度 冷 却 后 再 继 续 造 模 30min, 以 保 证 造 模 的 成 功 进 行 造 模 完 成 后, 酪 氨 酸 酶 指 标 测 定 显 示, 模 型 对 照 组 为 ±2.068, 空 白 对 照 组 为 ±1.197, 两 者 存 在 明 显 差 异, 皮 肤 组 织 形 态 学 显 示 : 空 白 对 照 组 表 皮 较 薄, 附 属 器 不 多, 毛 囊 皮 脂 腺 基 底 细 胞 中 见 有 少 量 黑 色 素, 胞 浆 着 色 棕 褐 色, 未 见 炎 性 细 胞, 模 型 对 照 组 的 表 皮 增 生 明 显, 出 现 疣 状 增 生 或 乳 头 状 瘤 增 生, 局 部 炎 症 细 胞 增 多, 毛 囊 和 皮 脂 腺 增 生 明 显 表 皮 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 层 中 可 见 成 簇 分 布 的 黑 素 细 胞, 上 皮 层 明 显 增 厚 且 黑 素 细 胞 增 多, 表 皮 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 层 中 亦 见 单 个 散 在 分 布 的 黑 素 证 明 中 波 紫 外 线 复 制 黄 褐 斑 模 型 小 鼠 成 功 二 观 察 指 标 的 选 择 本 实 验 选 取 的 观 测 指 标 包 括 : 血 液 中 的 酪 氨 酸 酶 含 量 皮 肤 数 密 度 和 黑 色 素 细 胞 个 数, 其 中 病 理 形 态 学 观 察 更 具 有 客 观 意 义 数 密 度 是 指 黑 色 素 细 胞 个 数 与 靶 目 标 的 面 积 的 比 值, 是 形 态 计 量 学 中 衡 量 空 间 中 某 种 粒 子 数 目 多 少 的 结 构 参 数 每 组 黑 素 细 胞 个 数 ( 每 组 平 均 每 视 野 数 )= 每 组 总 黑 素 细 胞 数 / 总 视 野 数, 总 视 野 数 = 每 组 动 物 数 视 野 数 ( 即 5 个 视 野 ) 长 期 的 UVB 照 射 使 黑 素 细 胞 的 增 殖, 皮 肤 色 素 形 成 的 黑 色 素 瘤 细 胞 在 表 皮 的 基 底 层 在 体 外 研 究 证 明, 酪 氨 酸 在 酪 氨 酸 酶 的 作 用 下 转 变 为 多 巴, 是 黑 色 素 合 成 中 的 第 一 个 决 定 步 骤 酪 氨 酸 是 生 理 活 动 必 需 的 氨 基 酸, 大 量 而 广 泛 地 存 在 于 人 体 中 肤 色 较 深 的 皮 肤 中 的 酪 氨 酸 酶 活 性 大 约 是 肤 色 较 浅 皮 肤 的 3 倍 皮 肤 色 素 的 合 成 是 酪 氨 酸 慢 慢 地 通 过 氧 化 成 多 巴 [45], 左 旋 多 巴, 再 在 多 巴 氧 化 酶 的 氧 化 物 的 影 响 下 变 成 无 色 的 中 间 质 量 的 酪 氨 酸 酶, 这 种 物 质 中 的 酪 氨 酸 酶 的 影 响 下, 进 一 步 的 作 用 和 最 终 氧 化 成 棕 色 黑 色 素, 黑 色 素 通 过 树 突 状 细 胞 的 转 运 至 角 质 层 形 成 色 斑 黄 褐 斑 作 为 一 种 慢 性 的 色 素 增 加 性 皮 肤 病, 其 根 本 发 病 原 因 是 黑 色 素 增 多 三 祛 斑 玉 容 方 治 疗 黄 褐 斑 的 选 方 机 理 黄 褐 斑 的 发 生 主 要 是 由 于 肝 气 不 舒 气 血 郁 结, 脾 失 健 运 痰 湿 内 阻, 肾 阴 不 足 虚 [46] 火 上 炎, 均 可 导 致 气 血 悖 逆 或 瘀 滞, 不 能 上 荣 于 面, 久 而 生 斑 陈 氏 认 为 此 病 是 由 于 虚 热 内 蕴, 郁 结 不 散, 致 使 颜 面 气 血 失 和 所 致, 方 用 化 瘀 消 斑 汤 治 疗 以 活 血 化 瘀 滋 补 消 斑, [47] 孙 氏 认 为 气 不 足 则 面 色 无 华, 气 滞 血 瘀 则 晦 暗 长 斑, 因 而 采 用 八 珍 汤 加 味 以 调 补 气 血 为 主, 兼 润 肠 通 便 排 毒 此 方 能 使 冲 任 气 血 充 盈, 经 脉 调 畅, 让 沉 着 于 面 颊 上 的 色 素 逐 渐 淡 化 本 实 验 选 择 祛 斑 玉 容 方 治 疗 黄 褐 斑, 补 气 与 活 血 并 行, 加 强 祛 斑 除 滞 之 效 本 方 是 根 据 导 师 多 年 临 床 经 验 所 得, 此 方 补 气 活 血, 化 瘀 消 斑, 其 方 药 组 成 : 黄 芪 20g 桃 仁 15g 红 花 10g 当 归 15g 熟 地 15g 川 芎 10g 芍 药 15g 柴 胡 10g 甘 草 5g 方 中 重 用 黄 芪, 黄 芪 为 补 气 佳 品, 气 行 则 血 行, 气 血 充 足 则 能 滋 润 肌 肤 ; 当 归 养 血 活 血 滋 阴 补 肝 通 调 月 经 温 润 皮 肤, 其 中 含 有 壬 酸, 阿 魏 酸, 可 抵 制 脂 质 过 氧 化, 保 护 膜 脂 质 氧 化, 对 抗 自 由 26

37 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 基 损 伤 组 织 有 效 地 抑 制 酪 氨 酸 酶 ; 芍 药 清 热 敛 阴, 凉 血 祛 瘀 ; 现 代 药 理 研 究 表 明 : 芍 药 中 的 赤 芍 总 苷 能 显 着 降 低 脑 中 丙 二 醛 的 (MDA) 水 平, 并 能 明 显 提 高 SOD 的 活 性 根 据 久 病 必 瘀 久 病 入 络 之 理, 加 桃 仁 配 当 归, 通 血 络 而 祛 色 斑, 桃 仁 具 有 抗 脂 质 过 氧 化 作 用 ; 加 红 花 以 活 血 祛 瘀, 推 陈 致 新, 恶 血 去 则 新 血 生 且 有 养 血 而 不 碍 血, 活 血 而 不 伤 血 的 功 效, 红 花 能 有 效 地 保 护 内 源 性 超 氧 化 物 歧 化 酶 的 活 性 氧 自 由 基, 具 有 显 著 的 抑 制 脂 质 过 氧 化 的 作 用 川 芎 为 血 中 之 气 药, 辛 散 走 窜, 上 达 头 目, 行 气 活 血, 调 畅 气 血, 有 助 活 血 之 功, 研 究 证 实 川 芎 可 调 节 血 管 张 力, 降 低 粘 度 的 红 血 细 胞 和 血 小 板 聚 集, 增 加 微 循 环 血 流 量 川 芎 生 物 碱 称 为 川 芎 嗪, 可 以 明 显 减 少 黄 褐 斑 的 过 氧 化 脂 质 含 量, 使 超 氧 化 物 歧 化 酶 的 含 量 提 高, 在 相 对 较 低 的 安 全 浓 度 能 有 效 地 抑 制 黑 素 细 胞 的 细 胞 增 殖 和 酪 氨 酸 酶 的 活 性 降 低, 从 而 减 少 黑 色 素 的 合 成 柴 胡 疏 肝 解 郁, 可 依 赖 性 抑 制 的 TYR 活 性 和 黑 素 的 生 成 量 甘 草 调 和 诸 药 全 方 配 伍 得 当, 使 气 机 畅 通 血 气 调 和 瘀 去 新 生, 并 且 将 调 节 脏 腑 气 机 与 活 血 化 瘀 并 重, 注 重 气 血 的 双 面 调 和 外 用 面 膜 方 组 成 : 当 归 15g 红 花 10 白 芷 30g 白 术 30g 白 茯 苓 10g 薏 仁 30g 白 芍 10g 白 及 15g 白 附 子 10g 本 方 由 古 方 七 白 膏 ( 太 平 圣 惠 方 ) 化 裁 而 来, 方 中 选 用 : 白 芷 30g, 白 敛 30g, 白 术 30g, 白 附 子 白 茯 苓 细 辛 各 10g, 白 及 15g 以 光 滑 美 白, 祛 斑 润 肤 此 方 以 白 术 补 益 脾 胃, 使 气 血 生 化 充 足, 药 性 论 云 其 有 : 主 面 光 悦, 驻 颜 去 皯 之 效, 为 古 方 中 芳 香 辟 秽 增 白 之 要 药 白 茯 苓 助 白 术 健 脾 益 气 之 功 白 芷 祛 风 润 燥, 助 白 术 芳 香 辟 秽, 辛 香 行 气 ; 细 辛 发 散 祛 风 ; 白 及 补 肺 益 皮 毛, 合 白 蔹 敛 创 生 肌, 此 4 药 佐 助 君 臣, 防 治 色 斑 白 附 子 引 药 上 行, 配 鸡 子 白 为 赋 性 之 用 本 实 验 使 用 的 面 膜 方 中, 当 归 行 气 养 血, 活 血 逐 瘀, 祛 瘀 生 新, 畅 通 血 脉 ; 白 茯 苓 薏 仁 可 健 脾 化 湿, 通 畅 血 络 ; 据 药 性 论 记 载 白 及 可 令 人 肌 滑 ; 白 附 子 具 有 祛 风 化 瘀 之 功 诸 药 配 伍 具 祛 风 化 湿 活 血 消 斑 之 功 效, 直 接 作 用 于 面 部, 可 使 面 部 皮 肤 气 血 充 盈, 得 以 滋 养, 达 到 祛 瘀 消 斑 之 效 且 面 膜 方 中 当 归 白 茯 苓 僵 蚕 白 附 子 白 及 薏 仁 具 有 去 色 素 增 白, 抗 皱 抗 衰 老 作 用, 可 抑 制 酪 氨 酸 酶 活 性, 使 黑 色 素 产 生 减 少 另 外, 实 验 证 明 当 归 对 超 氧 化 物 歧 化 酶 有 明 显 激 活 作 用, 可 抑 制 过 氧 化 脂 质 的 产 生, 减 少 色 素 产 生 本 方 之 所 以 奏 效, 与 外 用 方 的 合 用 能 加 速 改 变 色 素 沉 着 的 原 因 有 关 外 用 面 膜 方 直 接 作 用 于 皮 肤, 借 助 水 温 和 药 物 作 用, 润 泽 皮 肤, 使 角 质 层 得 以 软 化 皮 肤 毛 孔 张 开, 易 于 使 药 物 穿 透, 刺 激 患 部 毛 细 血 管 扩 张, 促 进 局 部 血 液 循 环, 使 新 陈 代 谢 旺 盛, 改 善 局 部 组 织 营 养 此 外, 面 膜 外 治 法 简 便 有 效 经 济 安 全, 易 于 为 患 者 所 接 受 本 实 验 研 究 结 果 表 明 祛 斑 玉 容 方 与 外 用 面 膜 方 合 用 治 疗 黄 褐 斑 的 机 制 与 抑 制 皮 肤 黑 素 细 胞 的 增 殖, 并 降 低 皮 肤 与 肝 脏 组 织 中 酪 氨 酸 的 活 性, 减 少 黑 素 的 合 成 有 关, 说 明 本 方 法 对 黄 褐 斑 有 较 好 的 治 疗 作 用 四 实 验 结 果 分 析 本 实 验 结 果 各 组 比 较 : 27

38 分 析 讨 论 1. 祛 斑 玉 容 方 对 小 鼠 血 酪 氨 酸 酶 的 影 响 由 表 1 可 以 看 出 模 型 组 与 空 白 组 P<0.01, 具 有 显 著 差 异, 证 明 造 模 方 法 正 确, 造 模 获 得 成 功 中 药 组 的 酪 氨 酸 酶 含 量 高 于 模 型 组, 预 防 组 和 中 药 合 面 膜 组, 说 明 造 模 获 得 成 功, 中 药 内 服 也 取 得 一 定 疗 效, 但 相 比 内 外 合 治 和 预 防 组, 效 果 有 待 加 强, 同 时 从 中 发 现 中 药 组 的 治 疗 效 果 优 于 vc 组,vc 本 身 具 有 很 强 的 抗 氧 化 能 力, 能 还 原 氧 化 的 黑 色 素, 被 誉 为 美 白 圣 物, 可 见 中 药 治 疗 黄 褐 斑 有 其 独 特 的 疗 效 优 势, 应 进 一 步 探 索 其 疗 效 机 理 中 药 合 面 膜 组 的 治 疗 效 果 最 有 优 势, 甚 至 优 于 空 白 组, 说 明 这 种 中 药 内 服 外 敷 的 方 法 达 到 了 标 本 兼 治 的 效 果, 但 本 实 验 治 疗 周 期 较 短, 在 今 后 有 条 件 的 情 况 下, 应 延 长 治 疗 周 期, 观 察 中 药 治 疗 的 远 期 疗 效 2. 祛 斑 玉 容 方 对 小 鼠 皮 肤 病 理 形 态 的 影 响 2.1 模 型 组 皮 肤 病 理 形 态 学 显 示 上 皮 细 胞 的 增 生 明 显, 出 现 疣 状 增 生 甚 至 乳 头 状 瘤 增 生, 局 部 炎 症 细 胞 增 多, 毛 囊 和 皮 脂 腺 增 生 明 显, 黑 素 细 胞 增 多, 成 簇 分 布 于 毛 囊 基 底 细 胞 团 中, 表 皮 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 层 中 亦 见 单 个 散 在 分 布 的 黑 素, 细 胞 核 增 大 且 伴 有 核 上 移 空 白 组 皮 肤 病 理 形 态 学 显 示 鳞 状 上 皮 显 示 较 薄, 并 没 有 增 生, 表 面 含 少 量 的 角 质 真 皮 看 到 正 常 的 毛 囊, 皮 脂 腺 和 无 汗 腺, 正 常 的 结 缔 组 织, 皮 下 脂 肪 和 肌 肉 组 织 毛 囊 皮 脂 腺 基 底 细 胞 中 见 有 少 量 黑 色 素, 胞 浆 着 色 棕 褐 色 黑 色 素 细 胞 排 列 整 齐, 棘 细 胞 层 中 见 少 量 阳 性 细 胞, 表 皮 中 未 见 黑 色 素 细 胞 两 组 比 较 证 实 实 验 造 模 成 功 2.2 vc 组 皮 肤 病 理 形 态 学 显 示 上 皮 细 胞 增 生, 但 细 胞 层 的 数 量 是 小 于 模 型 组, 比 预 防 组 多, 出 现 炎 症 表 皮 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 层 中 亦 见 单 个 散 在 分 布 的 黑 素 细 胞 基 底 层 黑 素 数 量 与 模 型 组 比 较 略 有 少, 胞 浆 呈 深 棕 褐 色 模 型 组 皮 肤 病 理 形 态 学 显 示 上 皮 细 胞 的 增 生 明 显, 出 现 疣 状 增 生 甚 至 乳 头 状 瘤 增 生, 局 部 炎 症 细 胞 增 多, 毛 囊 和 皮 脂 腺 增 生 明 显, 黑 素 细 胞 增 多, 成 簇 分 布 于 毛 囊 基 底 细 胞 团 中, 表 皮 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 层 中 亦 见 单 个 散 在 分 布 的 黑 素, 细 胞 核 增 大 且 伴 有 核 上 移 vc 作 为 公 认 的 治 疗 黄 褐 斑 的 有 效 药 物, 维 生 素 C 能 抑 制 氧 化 多 巴, 使 得 皮 肤 黑 色 素 减 少 到 无 色 物 质 和 黑 色 素 成 水 溶 性 胶 质, 在 此 实 验 中 也 发 挥 了 一 定 的 治 疗 效 果 2.3 中 药 组 皮 肤 病 理 形 态 学 显 示 部 分 上 皮 增 生 轻 微, 局 部 见 有 少 量 炎 症 细 胞 和 纤 维 组 织 增 生 毛 囊, 皮 脂 腺 分 泌 较 模 型 组 下 降 明 显 表 皮 基 底 细 胞 排 列 整 齐, 可 见 在 基 底 层 细 胞 和 棘 细 胞 层 内, 多 分 布 零 散 的 黑 素 细 胞 的 细 胞 质 染 色 深 棕 褐 色 的 黑 素 细 胞, 黑 素 细 胞 的 深 度, 细 胞 数 量 和 深 度 均 比 vc 治 疗 组 在 基 底 层 少 见 VC 组 皮 肤 病 理 形 态 学 显 示 上 皮 细 胞 增 生, 但 细 胞 层 的 数 量 是 小 于 模 型 组, 比 预 防 组 多, 出 现 炎 症 表 皮 基 底 细 胞 和 棘 细 胞 层 中 亦 见 单 个 散 在 分 布 的 黑 素 细 胞 基 底 层 黑 素 数 量 与 模 型 组 比 较 略 有 少, 胞 浆 呈 深 棕 褐 色 由 此 我 们 可 以 得 出, 中 药 治 疗 黄 褐 斑 的 远 期 疗 效 比 西 药 治 疗 好, 值 得 推 广 28

39 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 3. 祛 斑 玉 容 方 对 色 斑 ( 黄 褐 斑 ) 小 鼠 的 预 防 作 用 黄 褐 斑 的 预 防 大 于 治 疗, 要 降 低 发 病 率, 首 先 要 灌 输 人 们 预 防 的 理 念 为 了 观 察 祛 斑 玉 容 方 对 黄 褐 斑 小 鼠 是 否 具 有 预 防 作 用, 我 们 在 实 验 中 增 设 了 一 组 预 防 组 从 结 果 看 : 预 防 组 皮 肤 病 理 形 态 学 显 示 表 皮 细 胞 层 较 薄, 细 胞 排 列 松 散, 附 属 器 偶 尔 增 生, 局 部 浸 润 的 炎 症 细 胞, 毛 囊, 皮 脂 腺 的 数 量 低 于 模 型 组 vc 组 和 中 药 组 中 药 组 皮 肤 病 理 形 态 学 显 示 部 分 上 皮 增 生 轻 微, 局 部 见 有 少 量 炎 症 细 胞 和 纤 维 组 织 增 生 毛 囊, 皮 脂 腺 分 泌 较 模 型 组 下 降 明 显 表 皮 基 底 细 胞 排 列 整 齐, 可 见 在 基 底 层 细 胞 和 棘 细 胞 层 内, 多 分 布 零 散 的 黑 素 细 胞 的 细 胞 质 染 色 深 棕 褐 色 的 黑 素 细 胞, 黑 素 细 胞 的 深 度, 细 胞 数 量 和 深 度 均 比 vc 治 疗 组 在 基 底 层 少 见 酪 氨 酸 酶 含 量 紧 高 于 与 中 药 合 面 膜 组, 结 果 显 示 : 预 防 组 的 治 疗 效 果 优 于 中 药 组, 从 中 药 预 防 组 的 优 秀 治 疗 效 果, 试 想 其 机 理, 可 能 与 提 高 机 体 的 抗 病 邪 能 力 有 关, 全 方 从 肝 脾 肾 三 脏 入 手, 通 过 调 整 脏 腑 功 能, 疏 通 经 络 气 血, 使 腠 理 得 养, 淤 袪 生 新, 以 强 化 机 体 正 气, 从 而 抵 御 外 邪 入 侵 如 方 中 君 药 黄 芪, 神 农 本 草 经 描 述 : 主 痈 疽, 久 败 疮, 补 虚 现 代 研 究 表 明, 其 可 抗 疲 劳 抗 缺 氧 可 增 强 非 特 异 性 免 疫 反 应, 促 进 抗 体 形 成, 还 可 延 缓 衰 老, 对 心 肌 细 胞 有 保 护 作 用 由 此 可 见, 本 方 对 于 提 高 机 体 的 抗 病 邪 能 力, 保 护 正 气 起 到 了 重 要 作 用, 为 我 们 今 后 在 黄 褐 斑 防 治 的 研 究 道 路 上 开 辟 了 新 的 思 维 方 向 除 了 药 物 治 疗, 我 们 在 日 常 生 活 中 还 要 注 意 以 下 几 个 方 面 : 饮 食 调 理 : 应 经 常 食 用 维 生 素 C 含 量 较 多 的 食 品 如 大 枣 韭 菜 菠 菜 橘 子 萝 卜 白 菜 冬 瓜 西 红 柿 大 葱 柿 子 芹 菜 黄 瓜 梨 香 蕉 西 瓜 荔 枝 核 桃 等, 忌 食 辛 辣 刺 激, 肥 腻 厚 味 的 食 物 日 常 防 护 : 众 所 周 知, 外 源 性 刺 激 特 别 是 紫 外 线 的 照 射 加 重 病 情, 因 而 在 外 出 前 要 做 好 防 护 准 备, 如 涂 抹 防 晒 霜 携 带 遮 阳 伞 等, 尽 量 避 免 在 阳 光 下 暴 晒, 以 减 少 皮 肤 受 到 刺 激 的 几 率 情 志 调 护 : 上 文 已 经 阐 述 了 黄 褐 斑 的 发 生 于 肝 脾 肾 三 脏 密 切 相 关, 特 别 与 肝 脏 联 系 更 加 密 切, 肝 主 疏 泄, 喜 调 达, 因 此 要 嘱 咐 患 者 放 松 心 情 适 当 调 节 情 志, 且 由 于 黄 褐 斑 是 缠 绵 难 愈 的 慢 性 疾 病, 患 者 往 往 在 就 医 过 程 中 表 现 出 对 疗 效 预 期 过 高 的 失 望 情 绪, 身 为 医 者 应 当 密 切 关 注, 适 当 疏 导, 提 到 其 治 疗 信 心 29

40 不 足 与 展 望 不 足 与 展 望 1. 黄 褐 斑 病 因 病 机 复 杂, 中 药 治 疗 该 病 的 机 制, 需 要 进 行 深 入 性 研 究 随 着 科 技 的 日 新 月 异, 现 代 中 药 治 疗 黄 褐 斑 在 治 疗 机 理 方 面 的 研 究 已 经 逐 渐 增 多, 可 以 考 虑 从 分 子 学 细 胞 学, 甚 至 基 因 学 的 方 向 入 手 研 究, 以 发 现 更 加 安 全 有 效 的 治 疗 方 法 2. 在 研 究 过 程 中 应 结 合 中 医 辨 证 观 念, 运 用 多 种 方 法 综 合 治 疗, 丰 富 和 发 展 黄 褐 斑 的 辨 证 施 治 理 论 3. 现 今 国 内 黄 褐 斑 的 系 统 评 价 研 究 相 对 薄 弱, 研 究 数 量 和 对 象 较 少, 文 献 数 量 虽 较 多, 但 在 选 择 标 准 文 献 检 索 真 实 性 评 价 研 究 方 法 评 价 标 准 等 方 面 还 存 在 不 足, 临 床 试 验 的 方 法 学 质 量 仍 有 待 提 高 4. 由 于 本 次 研 究 仅 限 于 动 物 实 验, 没 有 进 行 相 关 的 临 床, 对 主 要 症 状 存 在 一 定 的 主 观 性 ; 另 外 局 限 于 时 间 条 件 资 金 等 问 题, 未 能 进 行 较 大 范 围 样 本 数 量 的 统 计, 以 至 于 研 究 方 面 存 在 很 多 局 限 与 不 足, 此 次 研 究 对 治 疗 黄 褐 斑 的 作 用 机 理 只 是 进 行 了 初 步 的 探 讨, 中 药 方 剂 对 黄 褐 斑 的 治 疗 也 不 是 单 一 因 素 的 作 用, 至 于 其 他 因 素 的 作 用 及 其 他 更 复 杂 的 相 互 作 用 关 系, 还 有 待 于 在 今 后 进 一 步 的 深 入 探 讨 和 研 究 30

41 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 参 考 文 献 [1] 崔 正 军. 黄 褐 斑 的 研 究 现 状 [J]. 四 川 医 学,2004,25(1): [2] 查 旭 山, 刘 旖 旎, 李 勇. 中 药 含 药 血 清 对 体 外 培 养 黑 素 细 胞 增 殖 及 酪 氨 酸 酶 活 性 的 影 响 [J] 中 国 皮 肤 性 病 学 杂,2008,22(11): [3] 闫 军. 中 药 对 酪 氨 酸 酶 活 性 的 影 响 [J]. 中 草 药 杂 志,2002,33(4): [4] 周 宝 宽. 辩 证 论 治 黄 褐 斑 经 验 [J]. 辽 宁 中 医 杂 志,2012,39(3): [5] 曹 晶. 汪 悦 教 授 治 疗 黄 褐 斑 经 验 [J]. 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报,2010,12(9): [6] 吴 莉. 中 医 辩 证 治 疗 黄 褐 斑 疗 效 观 察 [J]. 四 川 中 医,2009,27(8):114. [7] 孙 泽 渊. 八 珍 汤 加 味 治 疗 黄 褐 斑 200 例 [J]. 云 南 中 医 中 药 杂 志,2008,29(6):80. [8] 冯 小 菁, 刘 长 青, 付 雷 等. 祛 斑 养 颜 霜 治 疗 黄 褐 斑 临 床 观 察 [J]. 中 国 美 容 医 学,2008,17(3): [9] 李 志 英, 刘 保 国, 王 世 君 等. 复 方 杏 仁 面 膜 治 疗 黄 褐 斑 临 床 观 察 [J]. 中 国 美 容 医 学,2007,16(5): [10] 单 敏 洁, 王 晓 华, 周 黎 霞. 归 白 散 面 膜 倒 模 术 治 疗 黄 褐 斑 60 例 [J]. 河 北 中 医,2010,32(12): [11] 谢 明 峰, 刘 丽 芳. 珍 珠 四 百 膏 治 疗 肝 郁 型 黄 褐 斑 对 血 清 SOD MDA 的 影 响 [J]. 中 国 中 医 药 现 代 远 程 教 育,2011,9(12): [12] 王 海 燕, 张 瑾, 韩 冬 敏 等. 中 药 治 疗 黄 褐 斑 108 例 疗 效 观 察 [J]. 山 西 医 药 杂 志,2012,41(3): [13] 王 艳, 周 重 远. 中 药 内 服 外 敷 治 疗 黄 褐 斑 82 例 [J]. 江 苏 中 医 药,2010,42(4):44. [14] 徐 晶 萍, 刘 长 征. 内 外 合 治 黄 褐 斑 70 例 临 床 观 察 [J]. 四 川 中 医,2009,27(5): [15] 赵 一 丁, 李 彬, 姚 春 海 等.E 光 配 合 中 药 祛 斑 汤 治 疗 黄 褐 斑 49 例 临 床 疗 效 观 察 [J]. 中 国 中 西 医 结 合 皮 肤 性 病 学 杂 志,2009,8(5): [16] 赵 广, 杨 庆 琪. 黄 褐 斑 发 病 危 险 因 素 的 多 因 素 分 析 及 预 防 对 策 [J]. 实 用 皮 肤 病 学 杂 志,2008,1 (2): [17] 黄 敏, 易 琼, 谭 强 等. 浅 论 和 治 黄 褐 斑 [J]. 四 川 中 医,2009,27(12): [18] 范 叔 第, 王 文 杰. 黄 褐 斑 病 因 病 机 探 讨 [J]. 山 东 中 医 杂 志,2009,28(5): [19] 胡 津 丽, 傅 海 扬, 蒋 彩 云. 美 容 针 结 合 体 针 治 疗 黄 褐 斑 31 例 [J ]. 中 国 针 灸,2002,25 (10) :698 [20] 刘 剑 梅, 李 慧 珍. 耳 穴 贴 压 磁 珠 治 疗 黄 褐 斑 80 例 小 结 [J]. 甘 肃 中 医,2000,3:43. [21] 吴 艳, 黄 蜀, 童 丹 丹 等. 耳 尖 放 血 配 合 局 部 围 刺 治 疗 气 滞 血 痛 型 黄 揭 斑 60 例 [J]. 中 医 外 科 杂 志, 2010,19(3):11. [22] 姚 慧 芳. 刮 痧 治 疗 黄 褐 斑 的 体 会 [J]. 中 国 民 间 疗 法,2009,(17)3:11. [23] 辛 卓 萍. 采 用 穴 位 埋 线 治 疗 黄 褐 斑 24 例 [J]. 甘 肃 中 医,2010,23(4):51 [24] 马 朋 丽. 刺 血 拔 罐 与 针 刺 治 疗 黄 褐 斑 1 例 [J]. 陕 西 中 医,2011,32 (8):1073. [25] 袁 春 意, 马 维 波. 脉 络 宁 注 射 液 治 疗 黄 褐 斑 60 例 疗 效 观 察 [J]. 中 国 社 区 医 师,2011,13(274):273. [26] 万 苗 坚. 黄 褐 斑 研 究 进 展 [J]. 国 外 医 学 皮 肤 性 病 学 分 册,1996,22(4):209. [27] 彭 霞, 杨 明. 黄 褐 斑 的 类 型 病 因 及 治 疗 [J]. 辽 宁 中 医 学 院 学 报,2000,2(1): [28] 叶 世 龙. 黄 褐 斑 与 微 生 态 失 衡 自 由 基 损 害 血 管 内 皮 功 能 异 常 [J]. 中 国 美 容 医 学 杂 志,2007,16(4): 31

42 参 考 文 献 [29] 张 地 君. 黄 褐 斑 的 病 因 诊 断 分 类 及 治 疗 [ J ]. 皮 肤 病 与 性 病.2000, 22 (3) : 20. [30] 张 素 洁. 黄 褐 斑 的 中 医 辨 证 分 型 与 血 液 流 变 学 的 研 究 分 析 [J]. 中 国 美 容 医 学,2004,13(6):663. [31] 王 辉, 林 彤. 黄 褐 斑 病 因 及 发 病 机 制 的 研 究 进 展 [J]. 国 际 皮 肤 性 病 学 杂 志.2012,38(3): [32] 中 国 中 西 医 结 合 学 会 皮 肤 性 病 专 业 委 员 会 色 素 病 学 组. 黄 褐 斑 的 临 床 诊 断 和 疗 效 标 准 ( 2003 年 修 订 稿 ) [ J ]. 中 国 皮 肤 性 病 学 杂 志,2004, 3 (1) : 66 [33] 金 睿, 张 玉 霞. 氢 醌 凝 胶 剂 对 酪 氨 酸 酶 的 抑 制 作 用. 中 国 医 科 大 学 学 报, 2006, 35( 1 ): 39 [34] 周 轶, 陈 力. 果 酸 在 皮 肤 科 的 应 用 [J]. 中 国 中 西 医 结 合 皮 肤 性 病 学 杂 志,2009,8(6): [35] 肖 晓 庆, 项 红 蕾, 郑 志 忠. 果 酸 疗 法 在 痤 疮 治 疗 中 的 应 用 [J]. 中 国 美 容 学,2007,16(6): [36] M en ter A. Rat ionnale for the rise of top ital corticosteroids in m elasm a.d rugs Derm atol, 2004,3(2): 169 [37] 丁 国 斌, 陈 璧, 汤 朝 武. 熊 果 苷 对 体 外 培 养 的 人 黑 素 细 胞 的 作 用 [J]. 第 四 军 医 大 学 学 报, 2001;22(20): [38] 陈 丽 梅, 孙 乐 琪, 周 媛 媛 等. 微 晶 磨 面 联 合 氨 甲 环 酸 治 疗 黄 褐 斑 的 疗 效 观 察 [J]. 中 国 美 容 医 学,2010,19 (11): [39] 赵 一 丁, 李 彬, 姚 春 海 等. E 光 配 合 中 药 祛 斑 汤 治 疗 黄 褐 斑 49 例 临 床 疗 效 观 察 [J]. 中 国 中 西 医 结 合 皮 肤 性 病 学 杂 志,2009,8(5): [40] 宋 为 民, 胡 玲 玲, 潘 红 等. 大 光 斑 低 能 量 Q 开 关 Nd:YAG 激 光 治 疗 黄 褐 斑 的 临 床 及 动 物 研 究 [J]. 中 国 中 西 医 结 合 皮 肤 性 病 学 杂 志,2011,10(3). [41] 潘 扬, 曹 亮, 许 惠 琴 等. 建 立 黄 褐 斑 实 验 动 物 模 型 的 初 步 研 究 [J]. 成 都 中 医 药 大 学 学 报,2003, 26: [42] 潘 阳, 猪 木 彩 子. 木 槿 提 取 物 抑 制 黑 素 生 成 的 作 用 [J]. 国 外 医 学 中 医 中 药 分 册, 2005, 27 (4) : 246 [43] 王 大 光, 朱 文 元, 鲁 严 等. 1,25 二 羟 基 维 生 素 D3 对 毛 囊 外 毛 根 鞘 无 色 素 黑 素 细 胞 激 活 的 实 验 研 究 [J]. 中 国 皮 肤 性 病 学,2010,9(6):338. [44] 李 云, 范 东 艳, 凌 翎. UVB 对 角 朊 细 胞 的 损 伤 及 其 机 制 研 究 [J]. 中 国 实 验 诊 断 学,2007,11(5): [45] 熊 雄, 单 连 海. 天 然 植 物 酪 氨 酸 酶 活 性 抑 制 剂 研 究 进 展 [J]. 安 徽 农 业 科 学, 2007,35(13): [46] 陈 仁 康. 化 瘀 消 斑 汤 治 疗 黄 褐 斑 60 例 [J]. 河 南 中 医,2009,29(4):387. [47] 孙 泽 渊. 八 珍 汤 加 味 治 疗 黄 褐 斑 200 例 [J]. 云 南 中 医 中 药 杂 志,2008,29(6):80. 32

43 南 京 中 医 药 大 学 硕 士 学 位 论 文 攻 读 硕 士 学 位 期 间 发 表 论 文 1. 黄 褐 斑 的 中 药 治 疗 发 表 于 吉 林 中 医 药 杂 志 2012 年 9 月 第 32 卷 第 9 期 2. 黄 褐 斑 的 针 灸 治 疗 进 展 发 表 于 中 国 美 容 医 学 杂 志 2012 年 12 月 第 21 卷 第 12 期 下 33

44 致 谢 致 谢 1 衷 心 感 谢 导 师 孙 亦 农 教 授 三 年 多 来 的 辛 勤 培 育 她 在 课 题 设 计 和 论 文 撰 写 过 程 中 给 予 的 悉 心 指 导 与 热 忱 关 怀, 以 及 生 活 上 的 体 谅 与 呵 护, 临 床 上 的 信 任 与 包 容, 都 为 我 创 造 了 一 个 温 暖 的 学 习 环 境 她, 学 识 渊 博, 教 诲 不 倦, 令 人 如 沐 春 风 ; 她, 谦 逊 求 真, 严 谨 治 学, 令 我 终 身 铭 记 2 由 衷 感 谢 项 老 师 在 实 验 过 程 中 给 予 的 无 私 帮 助 和 耐 心 指 导 一 丝 不 苟 精 益 求 精 的 工 作 态 度 使 我 受 益 匪 浅 3 感 谢 江 苏 省 中 医 院 各 位 老 师 在 临 床 上 给 予 的 指 导 4 感 谢 我 的 同 门, 以 及 三 年 来 给 予 了 我 支 持 和 帮 助 的 老 师 和 同 学 们 5 感 谢 我 的 家 人 在 物 质 与 精 神 上 对 我 的 付 出 感 恩 之 情 尽 在 不 言 中, 谢 谢! 34