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瑕萧
5 years ago
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molecular biology 分子生物学研究好搭档 2018 Thermo Scientific

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1 molecular biology 分子生物学研究好搭档 2018 Thermo Scientific 分子生物学专辑一高质量的明星产品 ( 如 DNA 聚合酶反转录酶限制性内切酶 ) 与值得信赖的基础必备品 ( 如 dntp 实验用水等 ) 组成科研好搭档共同助力分子生物学研究 2018 开年特惠, 领取狗年萌宠公仔 PCR 扩增图解, 提高扩增成功率 Thermo Scientific PCR 试剂选择指南技术与经典联合呈现 Maxima 与 RevertAid 反转录酶那些年 Phusion 高保真 DNA 聚合酶的那些事精品推荐 CloneJET PCR 克隆试剂盒 FastDigest 快速酶切指南填字游戏, 尽享科研好时光 thermofisher.com/mp2018

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2 2018 开年特惠, 领取狗年萌宠公仔一活动期间,A 组和 B 组产品均享特殊优惠折扣 ( 请使用促销代码 P 进行订购 ) 二活动期间, 除享受优惠折扣外, 在单次订单中, 当订购 A 组产品实际金额 2000 RMB, 若再订购 B 组任意产品 ( 不限种类和金额 ), 即可获得一个狗年萌宠公仔三套装组合, 价格更实惠活动时间 :2018 年 1 月 1 日至 4 月 30 日畅销精品 (A 组 ) 类别货号产品名称规格目录价折扣价 Maxima 高性能反转录 RevertAid 常规反转录 Phusion 高保真 PCR DreamTaq 常规 PCR T4 DNA 连接酶 FastDigest 快速内切酶 EP0751 2,000 U Maxima H Minus Reverse Transcriptase EP ,000 U K rxns Maxima H Minus First Strand cdna Synthesis Kit K rxns K1681 Maxima H Minus First Strand cdna Synthesis Kit, with 20 rxns K1682 dsdnase 100 rxns M rxns Maxima H Minus cdna Synthesis Master Mix M rxns M rxns Maxima H Minus cdna Synthesis Master Mix, with dsdnase M rxns K rxns RevertAid First Strand cdna Synthesis Kit K rxns EP ,000 units RevertAid Reverse Transcriptase (200 U/μL) EP x10,000 units F530S 100 U Phusion High-Fidelity DNA Polymerase F530L 500 U F531S 100 x 50 μl rxns Phusion High-Fidelity PCR Master Mix with HF Buffer F531L 500 x 50 μl rxns F549S 100 U Phusion Hot Start II High-Fidelity DNA Polymerase F549L 500 U F565S 100 x 50 µl rxns Phusion Hot Start II High-Fidelity PCR Master Mix F565L 500 x 50 µl rxns K rxns DreamTaq Green PCR Master Mix (2X) K rxns K rxns DreamTaq Hot Start Green PCR Master Mix K rxns EL0011 1,000 units EL0012 T4 DNA Ligase (5 U/µL) 5x 1,000 units EL units EL0013 T4 DNA Ligase, HC (30 U/µL) 5000 U EL0016 T4 DNA Ligase, LC (1 U/µL) 2x500 U 所有 FastDigest 快速内切酶均 6.5 折优惠, 具体价格详见本手册页活动备注 : 1. 活动内套装不参加赠礼活动 2. 订单金额的计算以活动期内下单且成功发货为准 3. 礼品将在活动中期活动结束后统一安排发放礼品以实物为准因礼品数量有限, 若指定礼品发放完, 可以同等价值礼品替换 4. 礼品发放前需要核实客户有无超账期欠款, 结清欠款后方可发放礼品 5. 每个独立企事业单位用户下的多个 Thermo Fisher Scientific 注册账户被视为同一客户, 每个客户获得的礼品价值总数不超过 5000 元人民币 6. 活动促销产品仅供科学研究使用, 不得用于临床诊断或治疗 7. 礼品的所有权应归属为客户单位而非个人兑换礼品或参加此活动即表示您已确认自己受雇佣单位指派领取奖品, 应本公司要求应当提供雇佣单位指派的相关授权文件, 同时未因约雇合约法律规范或其他因素之限制而不得收受来自于本公司的礼品若地方法律法规或机关 / 机构政策限制时, 优惠自行无效, 并请通知本公司 8. 本次活动仅针对中国大陆的合格企事业单位用户, 任何经销商都不得参加以上所有活动, 也不应通过其他关联公司参加, 若获得任何礼品将自动失效, 不得领取 9. Thermo Fisher Scientific 享有对本活动的最终解释权, 此规则同样适用于英潍捷基 ( 上海 ) 贸易有限公司

3 基础必备 (B 组 ) 类别货号产品名称规格目录价折扣价克隆试剂盒 DNA 修饰酶 RNA 酶抑制剂 dntp 实验用水核酸纯化核酸分子量标准 K reactions CloneJET PCR Cloning Kit K reactions EF0651 1,000 units FastAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase (1 U/µL) EF0652 5x 1,000 units EK units T4 Polynucleotide Kinase (10 U/µL) EK0032 2,500 units EP units Klenow Fragment (10 U/µL) EP0052 1,500 units EP units T4 DNA Polymerase (5 U/µL) EP units EN0521 DNase I, RNase-free (1 U/µL) 1,000 units EN0523 DNase I, RNase-free, HC (50 U/µL) 1,000 units EO0381 2,500 units EO0382 RiboLock RNase Inhibitor (40 U/µL) 4 x 2,500 units EO x 2,500 units R ml R0192 dntp Mix (10 mm each) 1 ml R x 1.0 ml R ml dntp Mix (2 mm each) R x 1.0 ml R x 1.25 ml Water, nuclease-free R ml R ml DEPC-treated Water R x 1.0 ml K0502 GeneJET Plasmid Miniprep Kit 50 preps K0692 GeneJET Gel Extraction Kit 250 preps K0702 GeneJET PCR Purification Kit 250 preps K0731 GeneJET RNA Purification Kit 50 preps K0801 GeneJET Plant RNA Purification Kit 50 preps K0821 GeneJET Viral DNA/RNA Purification Kit 50 preps K0721 GeneJET Genomic DNA Purification Kit 50 preps K0781 GeneJET Whole Blood Genomic DNA Purification Mini Kit 50 preps K2981 RapidOut DNA Removal Kit 50 preps SM0242 GeneRuler 100 bp DNA Ladder 5 x 50 µg SM0244 GeneRuler 100 bp DNA Ladder, ready-to-use 5 x 50 µg SM0311 GeneRuler 1 kb DNA Ladder 5 x 50 µg SM0313 GeneRuler 1 kb DNA Ladder, ready-to-use 5 x 50 µg SM1331 GeneRuler 1 kb Plus DNA Ladder 5 x 50 µg SM1334 GeneRuler 1 kb Plus DNA Ladder, ready-to-use 50 µg SM1821 RiboRuler High Range RNA Ladder 5 x 20 µl SM1831 RiboRuler Low Range RNA Ladder 5 x 20 µl 特惠套装套装名称货号产品名称规格目录价数量套装折扣价 RevertAid 套装 K1622 RevertAid First Strand cdna Synthesis Kit 100rxns EN0521 DNase I, RNase-free (1 U/µL) 1000units CloneJET 套装 F530S Phusion High-Fidelity DNA Polymerase 100 U K1232 CloneJET PCR Cloning Kit 40 reactions 注 :RevertAid 套装请使用促销代码 RNASE 进行线下订购,CloneJET 套装请使用促销代码 RCLONE 进行线下订购

找到您所需的聚合酶是顺利完成实验的关键 PCR 预混液典型的 PCR 反应包括 DNA

0 mm) 模板和引物预混好的 PCR 预混液经优化可用于绝大部分 PCR 扩增

4 PCR 扩增图解 DNA 聚合酶是 DNA 扩增的核心但是,DNA 聚合酶并不是一种酶适用于所有反应, 聚合酶有多种类型, 找到您所需的聚合酶是顺利完成实验的关键 PCR 预混液典型的 PCR 反应包括 DNA 聚合酶反应缓冲液 dntp(200 μm each) MgCl 2 ( mm) 模板和引物预混好的 PCR 预混液经优化可用于绝大部分 PCR 扩增热启动修饰热启动 DNA 聚合酶在起始 PCR 变性步骤前是没有活性的这种热启动修饰可阻止非特异性的扩增, 获得更高的扩增特异性灵敏度和扩增产量合成速率快速的聚合酶合成可缩短扩增子延伸的时间基于 Taq 的 DNA 聚合酶一般合成速率为 60 s/kb, 而经基因工程改造的 DNA 聚合酶只需 15 s 即可扩增同样的长度

引物设计引物一般长度为 15-30 bp, 避免引物间存在互补序列及引物中存在重复序列,

聚合酶可实现强劲精确和快速的 PCR 扩增一个 DNA 结合域与一个校正 DNA 聚合酶 52x Taq

8x Taq 1x Taq Phusion DNA Pfu Taq Polymerase Phusion

DNA 聚合酶具有一个 3-5 核酸外切酶区域, 其可去除错配的核苷酸增加的保真度对于诸如克隆二代测序

DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶增强的扩增灵敏度 ( 使用热启动 DNA 聚合酶可扩增低至 3 pg

使用经优化的反应缓冲液 ( 含预加的 MgCl 2 ), 几乎无需优化反应 pg ng 3 30 3 7.

5 引物设计引物一般长度为 bp, 避免引物间存在互补序列及引物中存在重复序列, 以阻止发夹结构及引物二聚体的形成使用 Thermo Scientific Phusion 高保真 DNA 聚合酶可实现强劲精确和快速的 PCR 扩增一个 DNA 结合域与一个校正 DNA 聚合酶 52x Taq 融合在一起 52xTaq 6xPfu 的高保真度持续合成能力是 Taq 酶的 2 倍,Pfu 的 10 倍 8x Taq 1x Taq Phusion DNA Pfu Taq Polymerase Phusion 高保真 DNA 聚合酶相比 Pfu 或 Taq 具有更高的保真度 Phusion Pfu Taq 校正机制校正 DNA 聚合酶具有一个 3-5 核酸外切酶区域, 其可去除错配的核苷酸增加的保真度对于诸如克隆二代测序突变或变异分析等实验至关重要 Phusion 高保真 DNA 聚合酶可在更短的时间内获得更高的产量 Phusion 高保真 DNA 聚合酶可对低至 0.4 ng 的模板进行 PCR 扩增适用于日常研究的热启动 DNA 聚合酶 Thermo Scientific DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶增强的扩增灵敏度 ( 使用热启动 DNA 聚合酶可扩增低至 3 pg 的模板 ) 扩增得到更多的 PCR 产物可扩增合成不同长度的扩增子 ( 长达 20 kb) 使用经优化的反应缓冲液 ( 含预加的 MgCl 2 ), 几乎无需优化反应 pg ng kb 9 kb 20 kb 2 kb 727 bp 160 bp DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶即使对于低至 3 pg 的起始材料也能进行强劲的扩增 DreamTaq 热启动 DNA 聚合酶可有效扩增 20 kb 的扩增子

Thermo Scientific PCR 试剂选择指南常规 PCR 适用于常规 PCR 扩增, 获取稳定可靠的扩增结果热启动 PCR 适用于要求高特异性的 PCR 扩增, 以及扩增稀有或复杂 DNA 模板高保真 PCR 适用于高准确性扩增,PCR 产物碱基错配率极小, 主要用于克隆测序和突变常规性能增强性能常规性能增强性能非热启动热启动快速 Taq DNA Polymerase

6 Thermo Scientific PCR 试剂选择指南常规 PCR 适用于常规 PCR 扩增, 获取稳定可靠的扩增结果热启动 PCR 适用于要求高特异性的 PCR 扩增, 以及扩增稀有或复杂 DNA 模板高保真 PCR 适用于高准确性扩增,PCR 产物碱基错配率极小, 主要用于克隆测序和突变常规性能增强性能常规性能增强性能非热启动热启动快速 Taq DNA Polymerase DreamTaq DNA Polymerase DreamTaq Hot Start DNA Polymerase Phire Hot Start II DNA Polymerase Phusion High-Fidelity DNA Polymerase Phusion Hot Start II High-Fidelity DNA Polymerase Phusion U Hot Start DNA Polymerase Phusion Flash High-Fidelity PCR Master Mix 特点 5'-3' 外切酶活性有有有无无无无无校正活性无无无部分有有有有高保真度扩增片段长度 (gdna/ phage DNA) 5/10 kb 6/20 kb 6/20 kb 7.5/20 kb 16/20 kb 16/20 kb 16/20 kb 16/20 kb 延伸速度 60 s/kb 60 s/kb 60 s/kb s/kb s/kb s/kb s/kb 15 s/kb 平端或 3'A 端 3'A 3'A 3'A 平端平端平端平端平端是否耐受 dutp 是否是否否否是否规格单酶有有有有有有有无预混液有有有有有有有有绿色缓冲液无有有有有有有无除以上产品外,Thermo Scientific 还可提供一些特殊 PCR 试剂, 如直接 PCR 多重 PCR 试剂, 可满足您不同的实验需求技术与经典联合呈现 Maxima 与 RevertAid 反转录酶 Thermo Scientific TM Maxima TM 反转录酶经分子改造技术, 提高了酶的热稳定性合成能力和合成速度与野生型反转录酶相比, 其持续合成能力提高了 50 倍, 并且对胍和甲酰胺等反应抑制剂的耐受性也较野生型的酶有了显著的提高分子改造技术反转录酶在较宽的温度范围内 (42-65 C) 保持高活性可高效合成长达 20 kb 的全长 cdna 片段可对复杂的 RNA 模板进行反转录提供第一链合成试剂盒及预混液产品形式 Thermo Scientific TM RevertAid TM 反转录酶是一款重组型的 M-MuLV 反转录酶, 为经典畅销反转录试剂 9 kb 6 kb 5 kb 4 kb 3 kb 2 kb 1 kb 0.5 kb Maxima H Minus RT 温度 C 经改造的突变体经历选择后依然保持活性, 最终筛选出的突变体比野生型 MMuLV 反转录酶及其它突变体表现出更佳的反转录酶性能, 成为 Maxima 反转录酶野生型 MMuLV 反转录酶基因 mrna 库体外翻译成蛋白, 形成不同的乳浊液, 并在选择压力下进行筛选, 提高热稳定性通过随机突变和体外转录成 mrna 产生个突变体构成的大型突变体库反转录酶最佳活性温度为 42 C 可以高效合成长达 13 kb 的全长第一链 cdna 提供反转录反应所需的全部组分, 包括 RNase Inhibitor Oligo(dT) 18 和随机引物等

那些年 Phusion 高保真 DNA 聚合酶的那些事儿自从 2003 年推出以来,Thermo Scientific Phusion 高保真 DNA 聚合酶逐渐建立了高性能 PCR 的全新标准在过去的十几年间, 不断的创新造就了一系列完整的 Thermo Scientific Phusion 高保真产品,

Pyrococcus-like 校正 DNA 聚合酶融合在一起 ; 由于这种独特的技术, 即使对于最难以扩增的模板,Phusion DNA 聚合酶可以极高的准确性和极快的速度扩增获得 PCR 产品, 其它类型聚合酶都难以企及 2007 Phusion Flash High- Fidelity PCR Master Mix

中引入突变片段插入或片段缺失 2006 Phusion Hot Start DNA Polymerase 加入热启动技术, 室温下 Phusion DNA 聚合酶的活性被抑制, 使 PCR 扩增的灵敏度和特异性大大提升 2004 Phusion High-Fidelity PCR Master Mixes 预混液形式,

Polymerases Phusion DNA 聚合酶提供绿色缓冲液, 从而使 PCR 扩增产物直接上样电泳成为可能, 极大简化了 PCR 流程 2013 Phusion U Hot Start DNA Polymerase Phusion DNA 聚合酶中 dutp 结合域的一个突变, 使得 Phusion 可扩增含

7 那些年 Phusion 高保真 DNA 聚合酶的那些事儿自从 2003 年推出以来,Thermo Scientific Phusion 高保真 DNA 聚合酶逐渐建立了高性能 PCR 的全新标准在过去的十几年间, 不断的创新造就了一系列完整的 Thermo Scientific Phusion 高保真产品, 适于不同的研究需求由于 Phusion 产品的强劲性能快速扩增速度高准确性和高抑制剂耐受力, 其已成为多种实验应用中 DNA 聚合酶的首要选择 2003 Phusion High-Fidelity DNA Polymerase Phusion DNA 聚合酶的诞生源于将一个 dsdna 结合蛋白与一个 Pyrococcus-like 校正 DNA 聚合酶融合在一起 ; 由于这种独特的技术, 即使对于最难以扩增的模板,Phusion DNA 聚合酶可以极高的准确性和极快的速度扩增获得 PCR 产品, 其它类型聚合酶都难以企及 2007 Phusion Flash High- Fidelity PCR Master Mix 该预混液以 15 s/kb 甚至更快的速度, 可实现极短时间 PCR 扩增 2008 Phusion Direct PCR Kits 该试剂盒可实现直接用原始材料样本进行 PCR 扩增, 无需进行核酸纯化 2006 Phusion Site-Directed Mutagenesis Kit 该试剂盒用于向任何类型质粒 DNA 中引入突变片段插入或片段缺失 2006 Phusion Hot Start DNA Polymerase 加入热启动技术, 室温下 Phusion DNA 聚合酶的活性被抑制, 使 PCR 扩增的灵敏度和特异性大大提升 2004 Phusion High-Fidelity PCR Master Mixes 预混液形式, 经优化用于极高保真的 PCR 扩增或高 GC 含量模板的扩增 2009 Phusion Hot Start II DNA Polymerase 升级版的热启动技术, 使得 Phusion DNA 聚合酶拥有超高的 PCR 扩增灵敏度和特异性 2013 Phusion Green High-Fidelity DNA Polymerases Phusion DNA 聚合酶提供绿色缓冲液, 从而使 PCR 扩增产物直接上样电泳成为可能, 极大简化了 PCR 流程 2013 Phusion U Hot Start DNA Polymerase Phusion DNA 聚合酶中 dutp 结合域的一个突变, 使得 Phusion 可扩增含 dutp 的模板 2014 Phusion U Multiplex PCR Master Mixes 该预混液用于多达 20 个目的 DNA 的同时扩增, 每个片段可长达 2.5 kb, 且具有极高的扩增特异性和灵敏度 2014 Phusion Hot Start II Master Mixes 具有极高扩增特异性的高保真 PCR 预混液, 性能加强, 且简化了 PCR 反应体系配制

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分钟即可获得超过 99% 的阳性重组克隆克隆流程由具有校正活性的聚合酶 ( 如 :Pfu DNA polymerase) 扩增的平末端 PCR 产物可以直接连入克隆载体

连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株筛选原理试剂盒提供一个创新的即用型阳性选择克隆载体 pjet2.

2/blunt 载体表达致死的限制酶 ( 无外源片段插入 ), 转化后杀死大肠杆菌细胞这种阳性筛选策略极大地加速了克隆筛选进程, 同时节省了蓝白斑筛选的额外费用

2/blunt 克隆载体的多克隆位点两侧各包含一个 BglII 识别序列此外, 该载体含有 T7 启动子, 可用于体内或体外转录插入片段测序等研究特点快速 PCR 克隆只需 5 分钟

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8 精品推荐 CloneJET PCR 克隆试剂盒 Thermo Scientific CloneJET PCR Cloning Kit 是一个高效的阳性筛选克隆系统, 可以高效克隆各种热稳定聚合酶扩增出的 PCR 产物, 或者任何平末端或粘性末端 DNA 片段该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的 DNA 片段都有效阳性选择载体和插入片段连接仅需 5 分钟即可获得超过 99% 的阳性重组克隆克隆流程由具有校正活性的聚合酶 ( 如 :Pfu DNA polymerase) 扩增的平末端 PCR 产物可以直接连入克隆载体由无校正活性的聚合酶 ( 如 :Taq DNA polymerase) 或聚合酶混合物扩增的 PCR 产物在连接前需用试剂盒提供的热稳定 DNA 平端化酶削平突出末端 (5 分钟即可 ) 连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株筛选原理试剂盒提供一个创新的即用型阳性选择克隆载体 pjet2.1/ blunt 该载体含有致死限制酶基因多克隆位点处插入外源片段会引起酶基因失活因此只有转化了重组质粒的细菌才能存活形成克隆菌落而自身环化的 pjet1.2/blunt 载体表达致死的限制酶 ( 无外源片段插入 ), 转化后杀死大肠杆菌细胞这种阳性筛选策略极大地加速了克隆筛选进程, 同时节省了蓝白斑筛选的额外费用载体元件为方便酶切作图和插入片段基因操作,pJET1.2/blunt 克隆载体的多克隆位点两侧各包含一个 BglII 识别序列此外, 该载体含有 T7 启动子, 可用于体内或体外转录插入片段测序等研究特点快速 PCR 克隆只需 5 分钟高效阳性克隆率 >99% 无克隆背景通过致死基因进行阳性筛选通用适合平末端和粘性末端克隆经济无需昂贵的蓝白筛选应用 10 kb 以下的平末端及带 3ˊ-dA 尾的 PCR 产物的克隆酶切得到的 DNA 片段的克隆 ds cdna 的克隆构建 cdna 文库所克隆 DNA 的测序 T7 启动子介导的克隆插入片段的体内和体外转录 bla (Ap R ) pjet1.2/blunt 2,974 bp DNA insert eco47ir 试剂盒组分 pjet1.2/blunt Cloning Vector T4 DNA Ligase 2X Reaction Buffer Blunting Enzyme pjet1.2 Forward Sequencing Primer pjet1.2 Reverse Sequencing Primer Control PCR Product Water, nuclease-free 了解更多信息, 欢迎访问 thermofisher.com/clonejet

9 FastDigest 快速酶切指南 DNA 快速酶切实验方案 1. 在室温下按照指定顺序配制酶切反应预混液组分水,* 无核酸酶 ( 货号 :R0581) 10X FastDigest 绿色缓冲液或者 10X FastDigest 缓冲液 DNA* 按比例放大酶切反应体系 DNA 1 µg 2 µg 3 µg 4 µg 5 µg FastDigest 内切酶 1 µl 2 µl 3 µl 4 µl 5 µl 10X FastDigest 绿色缓冲液或者 10X FastDigest 2 µl 2 µl 3 µl 4 µl 5 µl 缓冲液总体积 20 µl 20 µl 30 µl 40 µl 50 µl 同时使用多种酶进行 DNA 酶切 FastDigest 内切酶可实现在同一反应中同时进行双酶切或多酶切每种内切酶加 1 μl, 可按反应体系相应增大所加入内切酶的总量不应超过总反应体积的 1/10 多个 DNA 样本酶切反应体系配制 1. 吸取 2 μl DNA* 加入每个反应管 2. 按照 n+1 的样本量配制反应预混液预混液配制举例 (10 个样本 ): 体积质粒 DNA PCR 产物基因组 DNA 15 µl 16 µl 30 µl 2 µl 3 µl 5 µl 2 µl (up to 1 µg) 10 µl (~0.2 µg) 水,* 无核酸酶 ( 货号 :R0581) (10+1) x 15 µl = 165 µl 10X FastDigest 绿色缓冲液或者 10X Fast- Digest 缓冲液 (10+1) x 2 µl = 22 µl FastDigest 内切酶 (10+1) x 1 µl = 11 µl 3. 将 18 μl 预混液加入含有样本 DNA 的反应管 10 µl (up to 5 µg) FastDigest 内切酶 1 µl 1 µl 5 µl 总体积 20 µl 30 µl 50 µl 2. 轻柔混匀 3. 在加热器或水浴锅里 37 C 孵育 5 分钟 ** 4. 将酶进行失活 ( 可选 ) ** 5. 如果使用 FastDigest 绿色缓冲液, 直接将部分酶切反应混合液上样进行凝胶电泳 * DNA 的体积可增大至 10 μl 或减少至 0.5 μl, 主要根据 DNA 的浓度可相应调整水和预混液的体积以达到最终的反应体积 ** 查看内切酶的产品信息表中酶特异性和底物特异性的酶切时间, 以及酶失活条件此处水和反应缓冲液的体积适用于未纯化的 PCR 产物注意事项当设计实验时, 确保先查看 FastDigest 内切酶对 DNA 甲基化的敏感性相关的信息可在官方网站或产品说明书上查到识别位点附近的 DNA 序列可能会影响 DNA 的切割效率, 适当的延长时间可实现完全切割在以下情况下, 使用 Thermo Scientific GeneJET PCR Purification Kit ( 货号 :K0701/2) 用于酶切前 PCR 产物的纯化 : 使用了诸如 DMSO 或甘油等 PCR 添加剂, 这些物质可能影响切割效率或引起星号活性 PCR 产物用于下游克隆实验具有活性的嗜热 DNA 聚合酶在 PCR 反应混合液中仍然存在, 可能改变所切割 DNA 的末端, 降低连接效率如果总反应体积超过 20 μl, 适当将孵育时间增加 3-5 分钟孵育时由于空气恒温器传热较慢, 所以不推荐使用注 : 当样本体积或 DNA 浓度要求较高, 我们推荐使用 GeneJET Gel Extraction and DNA Cleanup Micro Kit ( 货号 :K0831/2) DNA 修饰酶在 FastDigest 绿色缓冲液或 FastDigest 缓冲液中的活性 DNA 修饰酶活性 (%) 货号 DNA Polymerase I 100 EP0041 Klenow Fragment 100 EP0051 Klenow Fragment, exo 100 EP0421 T4 DNA Polymerase 100 EP0061 T7 DNA Polymerase 100 EP0081 T4 DNA Ligase* EL0011 FastAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase 100 EF0651 T4 Polynucleotide Kinase 100 EK0031 * T4 DNA Ligase 的活性需要 0.5 mm ATP 使用 FastDigest 绿色缓冲液进行 5 分钟酶切 M M M Thermo Scientific GeneRuler Express DNA Ladder ( 货号 :SM1553) 1 未酶切的质粒 DNA 2 使用 FastDigest EcoRI 消化的质粒 3 使用 FastDigest EcoRI 和 FastDigest KpnI 进行双酶切的质粒 4 使用 FastDigest EcoRI, FastDigest KpnI 和 FastDigest SmaI 进行三重酶切的质粒

10 FastDigest 快速内切酶订购信息货号产品名称规格目录价折扣价 K1991 FastDigest Value Pack 13 x 20 reactions FD2064 FastDigest AanI 20 rxns FD1724 FastDigest AasI 25 rxns FD0994 FastDigest AatII 50 rxns FD0904 FastDigest Acc65I 100 rxns FD1234 FastDigest AdeI 50 rxns FD1954 FastDigest AjuI 20 rxns FD0014 FastDigest Alul 100 rxns FD0024 FastDigest Alw21I 100 rxns FD0034 FastDigest Alw26I 100 rxns FD0044 FastDigest Alw44I 200 rxns FD1414 FastDigest ApaI 300 rxns FD rxns FastDigest BamHI FD rxns FD0724 FastDigest BclI 300 rxns FD0064 FastDigest BcnI 200 rxns FD rxns FastDigest BcuI FD rxns FD1164 FastDigest BfmI 20 rxns FD2184 FastDigest BfoI 200 rxns FD0074 FastDigest BglI 200 rxns FD rxns FastDigest BglII FD rxns FD1424 FastDigest Bme1390I 100 rxns FD2124 FastDigest BmsI 20 rxns FD1434 FastDigest BoxI 100 rxns FD1014 FastDigest BpiI 20 rxns FD1314 FastDigest BplI 20 rxns FD1184 FastDigest Bpu10I 20 rxns FD0094 FastDigest Bpu1102I 50 rxns FD1084 FastDigest BseDI 20 rxns FD0874 FastDigest BseGI 100 rxns FD1714 FastDigest BseJI 200 rxns FD1204 FastDigest BseLI 100 rxns FD1264 FastDigest BseMI 20 rxns FD1404 FastDigest BseMII 20 rxns FD0884 FastDigest BseNI 100 rxns FD1444 FastDigest BseSI 50 rxns FD1454 FastDigest BseXI 20 rxns FD0924 FastDigest Bsh1236I 100 rxns FD0894 FastDigest Bsh1285I 100 rxns FD1004 FastDigest BshNI 300 rxns FD1464 FastDigest BshTI 20 rxns FD0124 FastDigest Bsp119I 200 rxns FD0134 FastDigest Bsp120I 200 rxns FD rxns FastDigest Bsp1407I FD rxns FD0784 FastDigest Bsp143I 40 rxns FD1154 FastDigest BspLI 20 rxns FD2044 FastDigest BspOI 20 rxns FD0834 FastDigest BspTI 150 rxns FD0704 FastDigest Bst1107I 100 rxns 货号产品名称规格目录价折扣价 FD1024 FastDigest BstXI 100 rxns FD rxns FastDigest Bsu15I FD rxns FD0154 FastDigest BsuRI 400 rxns FD1744 FastDigest BveI 50 rxns FD1394 FastDigest CaiI 50 rxns FD0184 FastDigest Cfr10I 50 rxns FD0194 FastDigest Cfr13I 100 rxns FD0744 FastDigest CpoI 20 rxns FD1904 FastDigest CseI 20 rxns FD2114 FastDigest CsiI 50 rxns FD0214 FastDigest Csp6I 100 rxns FD rxns FastDigest DpnI FD rxns FD0224 FastDigest DraI 200 rxns FD0234 FastDigest Eam1104I 50 rxns FD0244 FastDigest Eam1105I 100 rxns FD0254 FastDigest Ecl136II 100 rxns FD0404 FastDigest Eco105I 50 rxns FD0414 FastDigest Eco130I 200 rxns FD0424 FastDigest Eco147I 100 rxns FD rxns FastDigest Eco31I FD rxns FD rxns FastDigest Eco32I FD rxns FD0314 FastDigest Eco47I 200 rxns FD0324 FastDigest Eco47III 20 rxns FD0334 FastDigest Eco52I 50 rxns FD0344 FastDigest Eco57I 20 rxns FD0364 FastDigest Eco72I 200 rxns FD0374 FastDigest Eco81I 50 rxns FD0384 FastDigest Eco88I 200 rxns FD0394 FastDigest Eco91I 200 rxns FD0264 FastDigest EcoO109I 200 rxns FD rxns FastDigest EcoRI FD rxns FD rxns FastDigest EheI FD rxns FD0454 FastDigest Esp3I 20 rxns FD1814 FastDigest FaqI 20 rxns FD2144 FastDigest FokI 100 rxns FD1664 FastDigest FspAI 20 rxns FD1764 FastDigest FspBI 50 rxns FD0464 FastDigest GsuI 20 rxns FD1854 FastDigest HhaI 200 rxns FD0474 FastDigest Hin1I 100 rxns FD1834 FastDigest Hin1II 100 rxns FD0484 FastDigest Hin6I 200 rxns FD0494 FastDigest HincII 100 rxns FD rxns FastDigest HindIII FD rxns FD0804 FastDigest HinfI 400 rxns

货号产品名称规格目录价折扣价 FD0514 FastDigest HpaII 200 rxns 713 463 FD1574 FastDigest Hpy8I 20 rxns 815 530 FD1734 FastDigest HpyF10VI 20 rxns 566 368 FD1884 FastDigest HpyF3I 50 rxns 787 512 FD2164

11 货号产品名称规格目录价折扣价 FD0514 FastDigest HpaII 200 rxns FD1574 FastDigest Hpy8I 20 rxns FD1734 FastDigest HpyF10VI 20 rxns FD1884 FastDigest HpyF3I 50 rxns FD2164 FastDigest KflI 20 rxns FD0534 FastDigest Kpn2I 100 rxns FD0524 FastDigest KpnI 300 rxns FD1034 FastDigest KspAI 50 rxns FD1934 FastDigest LguI 20 rxns FD2074 FastDigest Lsp1109I 100 rxns FD2084 FastDigest MauBI 20 rxns FD1274 FastDigest MbiI 100 rxns FD0814 FastDigest MboI 50 rxns FD0824 FastDigest MboII 50 rxns FD1214 FastDigest MlsI 50 rxns FD0564 FastDigest MluI 100 rxns FD1074 FastDigest MnlI 50 rxns FD0734 FastDigest Mph1103I 100 rxns FD2024 FastDigest MreI 20 rxns FD0544 FastDigest MspI 400 rxns FD1344 FastDigest MssI 100 rxns FD rxns FastDigest MunI FD rxns FD0964 FastDigest Mva1269I 50 rxns FD0554 FastDigest MvaI 200 rxns FD rxns FD0574 FastDigest NcoI 100 rxns FD rxns FD rxns FD0584 FastDigest NdeI 300 rxns FD rxns FD rxns FastDigest NheI FD rxns FD1514 FastDigest NmuCI 20 rxns FD rxns FD rxns FastDigest NotI FD rxns FD rxns FD1224 FastDigest NsbI 50 rxns FD1634 FastDigest OliI 20 rxns FD2204 FastDigest PacI 25 rxns FD0604 FastDigest PaeI 20 rxns FD1284 FastDigest PagI 50 rxns FD1524 FastDigest PdiI 50 rxns FD1534 FastDigest PdmI 100 rxns FD1784 FastDigest PfeI 50 rxns FD0854 FastDigest Pfl23II 50 rxns FD1754 FastDigest PfoI 20 rxns FD1974 FastDigest Ppu21I 50 rxns FD0944 FastDigest Psp1406I 20 rxns FD0764 FastDigest Psp5II 50 rxns FD2224 FastDigest PspFI 20 rxns 货号产品名称规格目录价折扣价 FD rxns FastDigest PstI FD rxns FD1554 FastDigest PsuI 150 rxns FD1334 FastDigest PsyI 100 rxns FD2134 FastDigest PteI 20 rxns FD0624 FastDigest PvuI 20 rxns FD0634 FastDigest PvuII 400 rxns FD2154 FastDigest RruI 100 rxns FD1124 FastDigest RsaI 100 rxns FD2004 FastDigest RseI 20 rxns FD rxns FastDigest SacI FD rxns FD0644 FastDigest SalI 200 rxns FD2174 FastDigest SaqAI 50 rxns FD1644 FastDigest SatI 20 rxns FD0434 FastDigest ScaI 100 rxns FD1374 FastDigest SchI 100 rxns FD1194 FastDigest SdaI 20 rxns FD0654 FastDigest SduI 50 rxns FD2094 FastDigest SfaAI 100 rxns FD1824 FastDigest SfiI 150 rxns FD1894 FastDigest SgsI 100 rxns FD rxns FastDigest SmaI FD rxns FD1244 FastDigest SmiI 200 rxns FD1794 FastDigest SsiI 20 rxns FD0774 FastDigest SspI 100 rxns FD1364 FastDigest TaaI 20 rxns FD1144 FastDigest TaiI 50 rxns FD0674 FastDigest TaqI 400 rxns FD1354 FastDigest TasI 100 rxns FD1294 FastDigest TatI 20 rxns FD1654 FastDigest TauI 20 rxns FD0984 FastDigest Tru1I 50 rxns FD2104 FastDigest TscAI 100 rxns FD0714 FastDigest Van91I 100 rxns FD0914 FastDigest VspI 200 rxns FD1304 FastDigest XagI 100 rxns FD rxns FastDigest XapI FD rxns FD rxns FastDigest XbaI FD rxns FD1474 FastDigest XceI 50 rxns FD rxns FastDigest XhoI FD rxns FD1564 FastDigest XmaJI 20 rxns FD1484 FastDigest XmiI 50 rxns 了解更多信息, 欢迎访问 thermofisher.com/fastdigest

填字游戏, 尽享科研好时光根据提供的线索, 完成以下填字游戏每个方格对应一个英文字母横向竖向英文字母组成的单词均为 Thermo Scientific 分子生物学产品英文商标名称, 且包含在本手册中, 更多信息也可登录赛默飞官网查询红色圆圈位置的字母最终可组成一个隐藏英文单词 6 7 4 提示线索横向 1.

为 Thermo Scientific 最畅销的限制性内切酶, 系列内所有内切酶均使用一种统一缓冲液, 可在 5-15 分钟内快速完成酶切 ; 2 3 5 1 纵向 4. 为 Thermo Scientific 常规 PCR 试剂, 可扩增长达 6 kb 的基因组片段, 绿色预混液形式可实现 PCR 扩增后直接上样电泳 ; 5.

12 填字游戏, 尽享科研好时光根据提供的线索, 完成以下填字游戏每个方格对应一个英文字母横向竖向英文字母组成的单词均为 Thermo Scientific 分子生物学产品英文商标名称, 且包含在本手册中, 更多信息也可登录赛默飞官网查询红色圆圈位置的字母最终可组成一个隐藏英文单词提示线索横向 1. 为 Thermo Scientific 常规反转录试剂, 其为经典畅销产品, 可合成长达 13 kb 的第一链 cdna; 2. 为 Thermo Scientific 高性能反转录试剂, 可高效合成长达 20 kb 的全长 cdna 片段, 可对复杂的 RNA 模板进行反转录, 更有预混液形式, 适用于 RT-qPCR; 3. 为 Thermo Scientific 最畅销的限制性内切酶, 系列内所有内切酶均使用一种统一缓冲液, 可在 5-15 分钟内快速完成酶切 ; 纵向 4. 为 Thermo Scientific 常规 PCR 试剂, 可扩增长达 6 kb 的基因组片段, 绿色预混液形式可实现 PCR 扩增后直接上样电泳 ; 5. 为 Thermo Scientific 核酸纯化试剂, 系列产品覆盖质粒基因组 DNA RNA 胶回收 PCR 产物纯化等多种类型核酸纯化 ; 6. 为是一个高效的阳性筛选克隆系统, 可以高效克隆任何平末端或粘性末端 DNA 片段, 仅需 5 分钟即可获得超过 99% 的阳性重组克隆 ; 7. 为知名的高保真酶, 具有 52xTaq 6xPfu 的高保真度, 可合成长达 20 kb 的片段, 自上市以来被上千篇文献引用找到最后隐藏的英文单词了么? 登录将您的答案告诉我们, 回答正确即可获赠精美记事本一个免费服务电话 : / 销售服务信箱 :sales.china@thermofisher.com 技术咨询信箱 :LifeScience-CNTS@thermofisher.com For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified.

酶切, 原来如此简单特点所有 FastDigest 限制性内切酶在通用缓冲液中均为 100% 的活性 5-15 分钟内完全酶切酶切后直接进行凝胶电泳提供 176 种限制性内切酶 Thermo Scientific FastDigest 限制性内切酶是为快速 DNA 酶切专门研发的高级限制性内

酶切, 原来如此简单特点所有 FastDigest 限制性内切酶在通用缓冲液中均为 100% 的活性 5-15 分钟内完全酶切酶切后直接进行凝胶电泳提供 176 种限制性内切酶 Thermo Scientific FastDigest 限制性内切酶是为快速 DNA 酶切专门研发的高级限制性内 FastDigest, 让酶切如此简单 176 种限制性内切酶 5-15 分钟内完全酶切通用缓冲液, 与下游实验 100% 兼容使用绿色缓冲液, 酶切后直接上样进行电泳酶切, 原来如此简单特点所有 FastDigest 限制性内切酶在通用缓冲液中均为 100% 的活性 5-15 分钟内完全酶切酶切后直接进行凝胶电泳提供 176 种限制性内切酶 Thermo Scientific FastDigest