克隆变得前所未有的简单 终于, 可以抛开选择兼容酶切缓冲液的麻烦, 无需再费力查找适合您的酶切实验方案 - 从现在开始, 获得准确而可靠的 结果, 用于您的下游实验 Invitrogen Anza 限制性内切酶克隆系统是一套完整的系统, 包括 : 128 种限制性内切酶 + 5 种 DNA 修饰酶

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1 Anza 限制性内切酶克隆系统 完整克隆系统, 统一缓冲液体系 - 极致简约, 完美克隆

2 克隆变得前所未有的简单 终于, 可以抛开选择兼容酶切缓冲液的麻烦, 无需再费力查找适合您的酶切实验方案 - 从现在开始, 获得准确而可靠的 结果, 用于您的下游实验 Invitrogen Anza 限制性内切酶克隆系统是一套完整的系统, 包括 : 128 种限制性内切酶 + 5 种 DNA 修饰酶 所有 Anza 限制性内切酶可以同时进行酶切, 在 Anza 统一缓冲液中可发挥全部功能 该系统可提供 : 适用于所有限制性内切酶的统一缓冲液 适用于所有 DNA 类型的统一酶切实验方案 在 15 分钟内完全酶切 过夜酶切也无星号活性 Anza 限制性内切酶的简便性 Anza 限制性内切酶采用简单的两步法实验方案, 不管您的反应中限制性内切酶有几种, 不管您处理什么样的 DNA 类型 - 只需配制反应混合液,37 C 孵育 15 分钟即可 DNA 修饰酶 T4 DNA 连接酶预混液热敏碱性磷酸酶 T4 多聚核苷酸激酶 DNA 平端化试剂盒 DNA 末端修复试剂盒 实验方案 1. 按表 1 的顺序加入试剂, 配制反应混合液 C 孵育 15 分钟 表 1 试剂 单酶切反应 双酶切反应 三重酶切反应 无核酸酶的水 根据最终反应体积加入所需的量 Anza 10x 缓冲液或 Anza 10X 红色缓冲液 2 μl 2 μl 3 μl DNA μg μg μg Anza 限制性内切酶 1 1 μl 1 μl 1 μl Anza 限制性内切酶 2 1 μl 1 μl Anza 限制性内切酶 3 1 μl 最终反应体积 20 μl 20 μl 30 μl 体积可以线性扩大至 5X 2

3 方便的缓冲液形式所有 Anza 限制性内切酶均提供 Anza 10X 缓冲液和 Anza 10X 红色缓冲液, 可以根据您的实验需求灵活选择 红色缓冲液包括一种密度试剂, 其含有红色和黄色示踪染料, 在 1% 琼脂糖凝胶上两种染料分别与 800 bp DNA 片段和 10 bp DNA 片段一同迁移 这省去了凝胶上样前繁琐的染料添加步骤, 且与下游的各种实验应用兼容 * 简单的编号系统 Anza 限制性内切酶克隆系统将传统的限制性内切酶名称和简单的数字系统结合在一起, 方便您轻松挑选并保存内切酶, 无需记住那些不熟悉且复杂的内切酶名称 * 对于需要进行荧光激发分析的实验应用, 我们推荐使用 Anza 10X 缓冲液, 因为 Anza 10X 红色缓冲液中的黄色染料可能会影响一些荧光的检测 3

4 灵活的酶切时间一些限制性内切酶可能出现星号活性, 或者表现出限制酶与 DNA 识别位点的识别特异性降低 当反应条件不是最佳, 如甘油浓度过高或 Mg 2+ 存在时, 可能出现星号活性, 其可导致 DNA 的非特异性剪切 Anza 限制性内切酶经优化具有灵活的酶切时间 - 从 15 分钟到过夜酶切均可进行完全酶切 - 无需担心星号活性 bp L C C bp 12,000 L C C ,000 5,000 5,000 2,000 2,000 1,000 1, 分钟 16 小时 L 1 Kb Plus DNA Ladder C1 未酶切的质粒 DNA 1 Anza 11 EcoRI 2 Anza 12 XbaI 3 Anza 1 NotI C2 未酶切的 PCR 片段 4 Anza 11 EcoRI 5 Anza 12 XbaI 6 Anza 1 NotI 图 1. Anza 限制性内切酶可在 15 分钟内实现完全酶切, 过夜酶切后也无星号活性 使用 Anza 11 EcoRI Anza 12 XbaI 和 Anza 1 NotI 对质粒 DNA (6,215 bp) 和纯化的 PCR 产物 (1.6 kb) 进行酶切 反应混合物中包括 1 μg DNA 和 1 μl 限制性内切酶, 总体积为 20 μl, 按照推荐的实验方案进行酶切 左图所示为 37 C 孵育 15 分钟, 右图为 37 C 孵育 16 小时 限制性内切酶切割位点图谱 4

5 出众的性能 所有 Anza 限制性内切酶可稳定地在 15 分钟内对各种类型 DNA 进行完全酶切 bp L C bp L C ,000 5,000 12,000 5,000 2,000 2,000 1,000 1, 质粒 DNA 纯化的 PCR 产物 质粒 DNA 的酶切 L 1 Kb Plus DNA Ladder C 未酶切的质粒 DNA 1 Anza 3 BcuI 2 SpeI-HF ( 竞争对手 N,BcuI 的同裂酶 ) 3 Anza 47 Eco52I 4 EagI-HF ( 竞争对手 N,Eco52I 的同裂酶 ) PCR 产物的酶切 L 1 Kb Plus DNA Ladder C 未酶切 DNA 片段 1 Anza 3 BcuI 2 SpeI-HF ( 竞争对手 N,BcuI 的同裂酶 ) 3 Anza 9 NdeI 4 NdeI ( 竞争对手 N) 5 Anza 47 Eco52I 6 EagI-HF ( 竞争对手 N,Eco52I 的同裂酶 ) 图 2. Anza 限制性内切酶提供了出众的性能 使用 Anza 3 BcuI 和 Anza 47 Eco521 以及竞争对手 N 的 SpeI-HF (BcuI 的同裂酶 ) 和竞争对手 N 的 EagI-HF (Eco52I 的同裂酶 ) 对质粒 DNA (6,215 bp) 进行酶切 使用 Anza 3 BcuI Anza 9 NdeI 和 Anza 47 Eco521 以及竞争对手 N 的 SpeI-HF (BcuI 的同裂酶 ) 竞争对手 N 的 NdeI 和竞争对手 N 的 EagI-HF (Eco52I 的同裂酶 ) 对纯化的 PCR 产物 (1.6 kb) 进行酶切 在 37 C 进行孵育, 每种酶分别使用各自不同的推荐实验方案 BcuI (250) BcuI (936) pcdna3.1-gfp 6215 bp 限制性内切酶切割位点图谱 Ec52I (1318)o pcdna3.1-gfp 6215 bp Eco52I (1767) Eco52I (2958) 5

6 在 Anza 统一缓冲液中进行多重酶切使用 Anza 统一缓冲液,Anza 限制性内切酶可在同一反应中进行完全的多重酶切 无需再费力查找与您所使用的酶兼容的缓冲液, 同时只需一种酶切实验方案即可完成所有酶切反应, 从而节省了时间 三重酶切 C 未酶切的质粒 DNA 1 Anza 1 NotI 2 Anza 16 HindIII 3 Anza 15 XmaJI 4 Anza 1 NotI + Anza 16 HindIII + Anza 15 XmaJI L 1 Kb Plus DNA Ladder C L bp 12,000 5,000 2,000 1, 图 3. Anza 限制性内切酶可在统一缓冲液中实现三种酶的完全酶切 使用 Anza 1 NotI Anza 16 HindIII 和 Anza 15 XmaJI 对质粒 DNA (6215 bp) 进行酶切 单酶切反应的反应混合物包括 1 μg DNA 和 1 μl 限制性内切酶, 总体积为 20 μl 三重酶切反应混合物中包括 1 μg DNA 和各种限制性内切酶各 1 μl, 总体积为 30 μl, 按照推荐的实验方案进行酶切 37 C 孵育 15 分钟 限制性内切酶切割位点图谱 HindIII (912) pcdna3.1-gfp 6215 bp NotI (1767) XmaJI (2842) 6

7 提供入门套装 Anza 入门套装包含 5 种或 10 种最常用的限制性内切酶 Anza 10 缓冲液及精选的 Anza DNA 修饰酶, 使用该试剂盒可以即 刻开始进行克隆 Anza 5-Pack 入门套装 Anza 1 NotI Anza 5 BamHI Anza 11 EcoRI Anza 12 XbaI Anza 16 HindIII Anza T4 DNA 连接酶预混液 Anza 碱性磷酸酶 Anza 10X 缓冲液 Anza 10X 红色缓冲液 Anza 10-Pack 入门套装 Anza 1 NotI Anza 3 BcuI Anza 5 BamHI Anza 8 XhoI Anza 10 DpnI Anza 11 EcoRI Anza 12 XbaI Anza 16 HindIII Anza 19 BglII Anza 26 Eco32I Anza T4 DNA 连接酶预混液 Anza 碱性磷酸酶 Anza 10X 缓冲液 Anza 10X 红色缓冲液 7

8 订购信息限制性内切酶 产品名称单位 (U) 体积 (μl) 浓度 (U/μL) 货号 Anza 1 NotI IVGN001-4 Anza 1 NotI 2, IVGN001-6 Anza 2 NcoI IVGN002-6 Anza 2 NcoI 4, IVGN002-8 Anza 3 BcuI IVGN003-4 Anza 3 BcuI 2, IVGN003-6 Anza 4 BpiI IVGN004-4 Anza 4 BpiI 1, IVGN004-6 Anza 5 BamHI 8, IVGN005-6 Anza 5 BamHI 24,000 2, IVGN005-8 Anza 6 NheI IVGN006-6 Anza 6 NheI 4, IVGN006-8 Anza 7 BshTI IVGN007-4 Anza 7 BshTI 1, IVGN007-6 Anza 8 XhoI 4, IVGN008-6 Anza 8 XhoI 20,000 1, IVGN008-8 Anza 9 NdeI 3, IVGN009-6 Anza 9 NdeI 15, IVGN009-8 Anza 10 DpnI IVGN010-6 Anza 10 DpnI 4, IVGN010-8 Anza 11 EcoRI 8, IVGN011-6 Anza 11 EcoRI 40,000 2, IVGN011-8 Anza 12 XbaI 2, IVGN012-6 Anza 12 XbaI 12,000 1, IVGN012-8 Anza 13 Esp3I IVGN013-6 Anza 14 SalI 1, IVGN014-6 Anza 14 SalI 8, IVGN014-8 Anza15 XmaJI IVGN015-4 Anza15 XmaJI IVGN015-6 Anza 16 HindIII 8, IVGN016-6 Anza 16 HindIII 40,000 2, IVGN016-8 Anza 17 KpnI 3, IVGN017-6 Anza 17 KpnI 15,000 1, IVGN017-8 Anza 18 PacI IVGN018-4 Anza 18 PacI 1, IVGN018-6 Anza 19 BglII 1, IVGN019-6 Anza 19 BglII 8, IVGN019-8 Anza 20 SacI 1, IVGN020-6 Anza 20 SacI 8, IVGN020-8 Anza 21 SgsI IVGN021-4 Anza 21 SgsI 2, IVGN021-6 Anza 22 SmaI 2, IVGN022-6 产品名称单位 (U) 体积 (μl) 浓度 (U/μL) 货号 Anza 22 SmaI 8,000 1,600 5 IVGN022-8 Anza 23 PstI 8, IVGN023-6 Anza 23 PstI 40,000 4, IVGN023-8 Anza 24 MssI IVGN024-4 Anza 24 MssI 2, IVGN024-6 Anza 25 PaeI IVGN025-4 Anza 25 PaeI 2, IVGN025-6 Anza 26 Eco32I 3, IVGN026-6 Anza 26 Eco32I 15, IVGN026-8 Anza 27 PvuI IVGN027-4 Anza 28 MluI IVGN028-6 Anza 29 KflI IVGN029-4 Anza 30 Bsu15I 1, IVGN030-6 Anza 31 MunI IVGN031-4 Anza 32 ApaI 4,000 2,000 2 IVGN032-6 Anza 33 LguI IVGN033-4 Anza 34 Pfl23II IVGN034-4 Anza 35 Eco47III IVGN035-4 Anza 36 Eco31I IVGN036-6 Anza 37 Mph1103I IVGN037-6 Anza 38 ScaI IVGN038-6 Anza 39 Bsp1407I IVGN039-6 Anza 40 SfaAI IVGN040-4 Anza 41 HpyF3I IVGN041-6 Anza 42 RsaI IVGN042-6 Anza 43 Eco105I IVGN043-4 Anza 44 AluI IVGN044-6 Anza 45 PteI IVGN045-4 Anza 46 AatII IVGN046-4 Anza 47 Eco52I IVGN047-4 Anza 48 MnlI IVGN048-4 Anza 49 SmiI 1, IVGN049-6 Anza 50 KspAI IVGN050-4 Anza 51 BspTI 1, IVGN051-6 Anza 52 PvuII 4, IVGN052-6 Anza 53 AanI IVGN053-4 Anza 54 Eco147I IVGN054-6 Anza 55 MboI IVGN055-4 Anza 56 Hin1II 1, IVGN056-6 Anza 57 Bpu1102I IVGN057-4 Anza 58 PagI IVGN058-4 Anza 59 HhaI 1, IVGN

9 产品名称单位 (U) 体积 (μl) 浓度 (U/μL) Anza 60 Kpn2I IVGN060-6 Anza 61 PfoI IVGN061-4 Anza 62 MlsI IVGN062-4 Anza 63 CpoI IVGN063-4 Anza 64 SaqAI IVGN064-4 Anza 65 MspI 4, IVGN065-6 Anza 66 BstXI IVGN066-6 Anza 67 RruI IVGN067-6 Anza 68 BsuRI 2, IVGN068-6 Anza 69 BglI 1, IVGN069-6 Anza 70 NsbI IVGN070-4 Anza 71 HinfI 4, IVGN071-6 Anza 72 HincII IVGN072-6 Anza 73 BclI 2, IVGN073-6 Anza 74 CsiI IVGN074-4 Anza 75 Alw44I 2, IVGN075-6 Anza 76 VspI 1, IVGN076-6 Anza 77 DraI 1, IVGN077-6 Anza 78 AdeI IVGN078-6 Anza 79 PdiI IVGN079-4 Anza 80 FspBI IVGN080-4 Anza 81 Eco91I 1, IVGN081-6 Anza 82 Eco72I 1, IVGN082-6 Anza 83 Eco81I IVGN083-6 Anza 84 FspAI IVGN084-4 Anza 85 MreI IVGN085-4 Anza 86 PdmI IVGN086-6 Anza 87 Eco47I 1, IVGN087-6 Anza 88 Bsp119I 2, IVGN088-6 Anza 89 Mva1269I IVGN089-4 Anza 90 Eco88I 1, IVGN090-6 Anza 91 Acc65I 1, IVGN091-6 Anza 92 EheI IVGN092-4 Anza 93 HpaII 1, IVGN093-6 Anza 94 BfmI IVGN094-4 Anza 95 MauBI IVGN095-4 Anza 96 XmiI IVGN096-6 Anza 97 Bsp143I IVGN097-6 Anza 98 XceI IVGN098-4 Anza 99 XagI IVGN099-6 Anza 100 Bsh1236I IVGN100-6 Anza 101 BoxI IVGN101-6 货号产品名称单位 (U) 体积 (μl) 浓度 (U/μL) 货号 Anza 102 CaiI IVGN102-4 Anza 103 Psp1406I IVGN103-4 Anza 104 MboII IVGN104-4 Anza 105 Hin1I 1, IVGN105-6 Anza 106 Van91I IVGN106-6 Anza 107 BspLI IVGN107-4 Anza 108 SatI IVGN108-4 Anza 109 Alw26I IVGN109-6 Anza 111 XapI IVGN111-6 Anza 112 BseGI IVGN112-6 Anza 113 BcnI 1, IVGN113-6 Anza 114 Hpy8I IVGN114-6 Anza 115 MbiI IVGN115-6 Anza 116 Cfr13I IVGN116-6 Anza 117 EcoO109I 1, IVGN117-6 Anza 118 BseDI IVGN118-6 Anza 119 BmsI IVGN119-4 Anza 120 NmuCI IVGN120-4 Anza 121 Bsp120I 1, IVGN121-6 Anza 122 Csp6I 1, IVGN122-6 Anza 123 Hin6I 1, IVGN123-6 Anza 124 PfeI IVGN124-4 Anza 125 HpyF10VI IVGN125-4 Anza 126 Alw21I IVGN126-6 Anza 127 RseI IVGN127-4 Anza 128 PspFI IVGN128-4 Anza 129 BshNI IVGN

10 DNA 修饰酶产品名称 反应次数 体积 (μl) 浓度 (U/μL) 货号 Anza 10X 缓冲液套装 2,000 4,000 (4 x 1,000) IVGN200-8 Anza T4 DNA 连接酶预混液 (4 x 200) 4X IVGN210-8 Anza T4 DNA 连接酶预混液 X IVGN210-4 Anza 碱性磷酸酶 2,000 2,000 (4 x 500) 1 U/μL IVGN220-8 Anza 碱性磷酸酶 U/μL IVGN220-4 Anza T4 PNK 试剂盒 U/μL IVGN230-4 Anza DNA 平端化试剂盒 IVGN240-4 Anza DNA 末端修复试剂盒 IVGN

11 入门套装 Anza 5-Pack 入门套装单位 (U) 体积 (μl) 浓度 (U/μL) 货号 Anza 5-Pack 入门套装 Anza 1 NotI Anza 5 BamHI Anza 11 EcoRI Anza 12 XbaI Anza 16 HindIII Anza T4 DNA 连接酶预混液 20 rxns 100 4X Anza 碱性磷酸酶 20 rxns 20 1 Anza 10X 缓冲液 X Anza 10X 红色缓冲液 X IVGN300-4 Anza 10-Pack 入门套装单位 (U) 体积 (μl) 浓度 (U/μL) 货号 Anza 10-Pack 入门套装 Anza 1 NotI Anza 3 BcuI Anza 5 BamHI Anza 8 XhoI Anza 10 DpnI Anza 11 EcoRI Anza 12 XbaI Anza 16 HindIII Anza 19 BglII Anza 26 Eco32I Anza T4 DNA 连接酶预混液 20 rxns 100 4X Anza 碱性磷酸酶 20 rxns 20 1 Anza 10X 缓冲液 X Anza 10X 红色缓冲液 X IVGN

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