纽A scientific update 英伦快讯NEB NEWS from New England Biolabs Beijing Issue III, 2015 秋实满致促销季 做足一百, 水到渠成 NEBNext 文库定量试剂盒 提供 PCR 全面解决方案的 NEB 聚合酶
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- 邮 崔
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1 纽A scientific update 英伦快讯NEB NEWS from New England Biolabs Beijing Issue III, 2015 秋实满致促销季 做足一百, 水到渠成 NEBNext 文库定量试剂盒 提供 PCR 全面解决方案的 NEB 聚合酶
2 客服电话 目录 1 秋实满致 2 促销季 种常用 CutSmart 内切酶 7 折 Issue III, 2015 卷首语 做足一百 水到渠成 关于 NEB HELLO 广州 新品介绍 NEBNext 文库定量试剂盒 NEBNext 文库定量试剂盒基于 qpcr 的原理 能够提供精准可靠的二代测序 文库定量结果 惊喜促销 7 优惠促销 秋实满致促销季 2 金牌 T4 DNA 连接酶 6.5 折特惠 种常用 CutSmart 内切酶 7 折惊喜促销 2. 金牌 T4 DNA 连接酶 6.5 折特惠 3. 购买 Q5 系列产品 高品质 dntp 免费送 4. NEBuilder 克隆组装精选组合套装强力推新 5. NEB 蛋白 Marker 产品长期特惠 3 购买 Q5 系列产品 高品质 活动时间 即日起至 2015 年 11 月 30 日 dntp 免费送 4 12 NEBuilder 克隆组装精选组合套 装强力推新 13 NEB 蛋白 Marker 产品长期特惠 活动时间 即日起至 2015 年 11 月 30 日截止 经典回顾 Q5 超保真 DNA 聚合酶 Q5 超保真 DNA 聚合酶 以其无与伦比的扩增保真性 Taq 酶的 100 倍 及其超低的错配率 建立了高保真聚合酶的新标准 14 特别推荐 合成生物学 选择合适的设计和组装方法 NEB 提供一系列 DNA 组装和克隆的产品 用于无缝克隆 操作流程简单快 捷 轻松实现多片段 DNA 克隆 更多优惠详情 请见 P7 P 提供 PCR 全面解决方案的 NEB 聚合酶 NEB 提供各种 DNA 聚合酶 并致力于为 PCR 和相关应用研发具有创新性和 高品质的工具 其中 Q5 超保真 DNA 聚合酶 其超高的保真度 更快的扩 增速度 更强的模板适应性和更低的价格 定会成为您高保真扩增实验的首 选 5 经典回顾 最新动态 携手四十春秋 见证科学热忱
3 卷首语 做足一百, 水到渠成 这个世界正在被各种鸡血式的狂热聒噪着, 你的梦想是什么? 成了某著名选秀节目的标志性问句, 众多心灵鸡汤充斥着微信的朋友圈, 连股市都在一浪接一浪的救市声中潮起潮落 在随着整个世界疯狂的同时, 人们仿佛都在刻意回避或者遗忘一种最基本的道理, 那就是水到渠成 有梦想成大事固然重要, 但只有踏实做事, 将小事做到极致, 大事才能水到渠成 四十而立的 NEB 至今仍是一家兢兢业业的私营公司, 她与众多的公众公司最大的不同点在于, 上市公司为股东董事服务, 而私营公司则为终端用户负责, 用户就是上帝, 是衣食父母 在 NEB 总部, 有一个为全球用户提供技术支持的平台, 由所有在 NEB 工作的科学家们组成, 谁在哪个领域最专业, 谁就负责平台上这个领域的问题解答 他们每天都在践行着 Scientists for Scientists 的理念, 为世界各地的 NEB 用户们提供最棒的解决方案 也许下次你一封 过去, 回答你的是 NEB 的诺奖获得者 Richard Roberts 都说不定呢! 这就是 NEB, 一个将小事做到极致的公司, 她带给用户的永远都是 100 分的产品和服务 时值开学季, 在最新促销活动中, 我们精选了 100 种常用的内切酶 金牌 T4 连接酶 Q5 超保真聚合酶和克隆组装精品 NEBuilder 等产品, 回馈我们的用户 ; 同时, 还将带给您 NEB 新版目录 广州办启动等最新的资讯 让我们在这个收获的季节, 用优质的产品和服务, 助力您在科学的道路上, 水到渠成 NEB( 北京 ) 市场部 2015 年秋 2
4 客服电话 : HELLO, 广州! NEB 广州办事处正式成立 广州市天河区珠江新城华夏路 16 号富丽盈凯大厦 1312 室 NEB 完美品质成就科学梦想 NEB( 北京 ) 北京海淀区王庄路 1 号清华同方科技广场 B 座 0612 客服热线 : 电话 : /6 传真 : 网站 : 邮箱 : info@neb-china.com 3
5 充足现货库存, 满足您每一天的需求 渠道壮大, 服务再升级 专业人员, 支持更贴心 热力活动, 面对面与您互动 4
6 客服电话 : 新品介绍 NEBNext 文库定量试剂盒 二代测序文库的精确定量对于每次测序的数据量及质量至关重要 特别是 Illumina 平台, 精确的文库定量对于优化簇密度, 从而得到最好的测序结果非常重要 实时定量 PCR(qPCR) 是最精确及有效的文库定量方法, 与测量总核苷酸浓度的电泳法和分光光度计法相比,qPCR 有更高的一致性和重复性 基于扩增的定量方法, 因为只能扩增两侧都加了接头的序列, 因此为可测序文库分子浓度提供更精准定量 NEBNext 文库定量试剂盒显著提高了基于 qpcr 的二代测序文库定量的精确度 NEBNext 文库定量试剂盒操作流程 产品特色 提供更精准可靠的定量结果 适用于不同方法制备的多种插入片段大小及 GC 含量的文库 只需要 4 个标准样品, 每个试剂盒可定量的文库更多 提供使用方便的文库稀释缓冲液 时间 准备试剂文库稀释建立反应 qpcr 数据分析 工作流程时间 NEBNext 文库定量预混液只需要加入引物 无论插入片段大小, 所有的文库均可使用同 一延伸时间 试剂盒 操作 5 min. 10 min. 总计 25 min. 1 min. 10 min. 操作 51 min. 总计 文库定量结果可以通过 NEB 线上工具 NEBioCalculator.neb.com 轻松计算 5 min. 10 min. 25 min. 60 min. 10 min. 1 hr. 45 min. 试剂盒中包含 ROX, 方便需要参照染料的 qpcr 仪器进行标准化 与 Bioanalyzer 分析相比,qPCR 文库定量结果一致性更好 超值价格 Library Quant (nm) Jurkat (633 bp) Jurkat (924 bp) E. coli P. falciparum NEB Bioanalyzer 4 个文库分别用 NEBNext 文库定量试剂盒 ( 橙色 ) 和 Aglient Bioanalyzer( 蓝色 ) 定量, 并进行比较 与 NEBNext 基于 qpcr 的方法相比,Aglient Bioanalyzer 定量结果之间差异较大 NEBNext 文库定量试剂盒定量结果可重复性更高 IMR-90 qpcr Quant (nm) User 1 User 2 User 3 User 4 NEB KAPA 3 个 bp 的文库分别由 4 位使用者用 NEBNext 或 Kapa 文库定量试剂盒 ( 通用 ) 进行定量, 每组实验重复 2-4 次 NEBNext 文库定量试剂盒 ( 橙色 ) 定量的一致性有显著提高 E. coli qpcr Quant (nm) H. influenzae qpcr Quant (nm)
7 新品介绍 NEBNext 文库定量试剂盒标准品无批间差 NEBNext 文库构建试剂盒能够得到最优的成簇密度 NEB KAPA 200 Target Density NEB KAPA C q qpcr Quant (nm) Standard Concentration (pm) Raw Cluster Density (k/mm 2 ) 1,000 1,100 1,200 1,300 精准的 qpcr 需要高质量的已知浓度 DNA 标准品 NEBNext 文库定量试剂盒包含 4 种标准品, 能够获得高精确度, 高一致性的结果 上图中显示了 NEBNext( 橙色 ) 及 Kapa( 灰色 ) 来源于 4 个批次 70 多个反应的数据, 所有 Cq 值如图所示 盒形图和须形图分别表示均值和四分位数 NEBNext 文库定量试剂盒的标准品在 Cq 值上显示了较低的方差, 从而得到更一致的定量结果 使用 NEBNext 文库定量试剂盒 ( 橙色 ) 或 Kapa 文库定量试剂盒 (Universal)( 灰色 ) 分别对 7 个不同的文库进行定量 未稀释的文库浓度在 nm 之间 文库稀释到 8 pm 并使用 MiSeq 测序仪 (v2 chemistry;mcs v ) 进行测序 使用 NEBNext 试剂盒定量的文库得到平均 1160 k/mm 2 的簇密度, 在 k/mm 2 的最佳范围内 相比之下, 使用 Kapa 试剂盒定量的文库只有平均 660 k/mm 2 的密度 不同大小及 GC 含量的文库均能通过 NEBNext 文库定量试剂盒获得最优簇密度 Input: Library Size (bp): qpcr Quant (nm) R. palustris H. influenzae 311 E. coli 341 Jurkat 633 R. palustris 638 H. influenzae 656 R. palustris 900 Jurkat 946 E. coli 958 H. influenzae GC Content: 65% 38% 51% 41% 65% 38% 65% 41% 51% 38% 将不同来源 bp 的文库用 NEBNext 定量试剂盒定量, 稀释到 8 pm 后用 MiSeq(v2 chemistry;mcs v ) 测序 文库浓度在 nm 之间, 所有的文库均能得到 k/mm 2 (ave. = 1199) 的簇密度 由 NEBNext 文库定量试剂盒定量的文库, 无论文库的大小, 均能够取得最佳簇密度 0 Cluster Density (k/mm 2 ) 1, Target Density 0 不同大小及 GC 含量的文库均能通过 NEBNext 文库定量试剂盒获得精确的定量 srna (human) bp srna (A. thaliana) P. falciparum H. influenzae PCR-Free FFPE R. palustris IMR-90 E. coli E. coli R. palustris Jurkat ImmuneSeq H. influenzae H. influenzae Jurkat E. coli R. palustris Library Size 成功用 NEBNext 文库定量试剂盒物种精选 文库按照大小排列, 从 bp 的较小文库 (srna,ffpe), 到 980 bp 的较大的文库 多种起始来源, 从 20% 到 70% 的 GC 含量, 用不同颜显示 文库使用 NEBNext,Illumina TruSeq Nano 及 Kapa Hyper 文库制备试剂盒制备 ( 数据未显示 ) 当使用 NEBNext 文库定量试剂盒时, 未观察到文库大小及 GC 含量的依赖性 GC Content 20% 70% 订购信息 NEBNext 文库定量试剂盒 E7630S/L 100/500 reactions 6
8 优惠促销 秋实满致促销季 秋天 收获的季节 它来自于水的滋润 土的给养 人的耕作 是合力而为的结果 金秋时节 NEB 特推出回馈客户系列活动之三 秋实满 致促销季 活动时间 即日起至 2015 年 11 月 30 日 种常用 CutSmart 内切酶 7 折惊喜促销 满足绝大部分酶切需求 CutSmart 统一 Buffer HF 高保真内切酶一应俱全 震撼特价全力回馈客户 AatII AccI AciI AclI AfeI AflII AgeI-HF AhdI AluI ApaI ApaLI AscI AsiSI AvrII R0117L R0117S R0117V R0161L R0161S R0161V R0551L R0551S R0551V R0598L R0598S R0598V R0652L R0652S R0520L R0520S R0520V R3552L R3552S R0584L R0584S R0584V R0137L R0137S R0137V R0114L R0114S R0114V R0507L 200 units 1, 300 units 150 units 200 units 1, 300 units , 50 units 50,000 units 50,000 units R0507M R0507S R0507V R0558L R0558S R0558V R0630L R0630S R0174L R0174S R0174V R3136L R3136M BamHI-HF R3136S R3136T R3136V ,299 1,329 2, , , , ,336 1,909 1, BbvCI BccI BfaI BlpI BmtI-HF BsaI BsaI-HF BseRI BslI BsmI BspHI BsrGI-HF BssHII BstBI BstEII-HF BstUI R0601L R0601S R0704L R0704S R0568L R0568S R0568V R0585L R0585S R0585V R3658L R3658S R0535L R0535S R0535V R3535L R3535S R3535V R0581L R0581S R0581V R0555L R0555S R0555V R0134L R0134S R0134V R0517L R0517S R0517V R3575L R3575S R3575V R0199L 1, 300 units 200 units 1 1, R0199M R0199S R0199V R0519L R0519S R0519V R3162L R3162M R3162S R3162V R0518L R0518S R0518V 2, , , ,
9 BstZ17I Bsu36I BtsI ClaI DdeI DpnI DraI DraIII-HF EagI-HF R0594L R0594S R0524L R0524S R0524V R0614L R0614S R0197L R0197S R0197V R0175L R0175S R0175V R0176L R0176S R0176V R0129L R0129S R0129V R3510L R3510S R3510V R3505L 50,000 units 50,000 units 20,000 units 20,000 units 4,000 units 4,000 units 200 units 50 units 1 1 3,000 units 3,000 units 1, R3505M R3505S R3505V R3101L R3101M EcoRI-HF R3101S R3101T R3101V R3195L R3195M EcoRV-HF R3195S R3195T Fnu4HI FokI FseI FspI R3195V R0178L R0178S R0178V R0109L R0109S R0109V R0588L R0588S R0588V R0135L R0135S R0135V R0108L R0108M HaeIII R0108S R0108T R0108V 1,909 1,336 1,909 1, MboI MmeI HhaI R0139L R0139S R0139V R3104L 50,000 units 50,000 units 2 2 1, 20,000 units 20,000 units 4,000 units R3104M HindIII-HF R3104S R3104T R3104V R0155L R0155M HinfI R0155S R0155T HpaI HpaII Hpy99I HpyCH4IV HpyCH4V KasI KpnI-HF R0155V R0105L R0105S R0105V R0171L R0171M R0171S R0171V R0615L R0615S R0619L R0619S R0620L R0620S R0544L R0544S R3142L R3142M R3142S R3142V R0147L MfeI MfeI-HF MluCI MluI-HF MnlI R0147M R0147S R0147V R0589L R0589S R0589V R3589L R3589S R3589V R0538L R0538S R3198L R3198S R3198V R0637L R0637S R0163L R0163S R0163V 1,909 1,336 1,909 1,
10 优惠促销 秋实满致促销季 MscI R0534L 1, 1, 125 units ,000 units 4,000 units 1, 125 units R0534M R0534S R0534V R0525L MseI R0525M R0525S R0525V R0106L R0106M MspI R0106S R0106T NarI Nb.BbvCI NcoI-HF NdeI NheI-HF NlaIII NotI-HF R0106V R0191L R0191S R0191V R0631L R0631S R3193L R3193M R3193S R3193V R0111L R0111S R0111V R3131L R3131M R3131S R3131V R0125L R0125S R0125V R3189L R3189M R3189S R3189V R3192L R3192M NruI-HF R3192S R3192T NsiI-HF Nt.BbvCI PacI 9 R3192V R3127L R3127S R3127V R0632L R0632S R0547L R0547S R0547V PmeI R0560L R0560S R0560V R0532L R0532S R0532V R3140L 50,000 units 50,000 units ,000 units 1, R3138T SbfI SbfI-HF R3138V R0642L R0642S R3642L R3642S R3122L PmlI R3140M PstI-HF R3140S R3140T PvuI-HF PvuII-HF RsaI RsrII SacI-HF SacII R3140V R3150L R3150S R3150V R3151L R3151M R3151S R3151V R0167L R0167S R0167V R0501L R0501S R0501V R3156L R3156M R3156S R3156V R0157L R0157S R0157V R3138L R3138M SalI-HF ScaI-HF SfiI SmaI R3138S R3122M R3122S R3122V R0123L R0123S R0123V R0141L R0141S R0141V
11 SnaBI R0130L R0130M R0130S R0130V R0133L R0133M SpeI R0133S R0133V R3133L SpeI-HF R3133M R3133S R3133V R3182L SphI-HF R3182M R3182S R3182V R3132L SspI-HF R3132M R3132S R3132V R0187L R0187M StuI R0187S R0187V 2 Tsp45I R0583L R0583S R0583V R0145L 200 units 1 1 3,000 units 3,000 units 1, 2 2 R0145M XbaI R0145S R0145T R0145V R0146L XhoI R0146M R0146S R0146V R0180L XmaI XmnI R0180M R0180S R0180V R0194L R0194S R0194V 金牌 T4 DNA 连接酶 6.5 折特惠 高效经典的 NEB 金牌 T4 DNA 连接酶及快连试剂盒 6.5 折特惠 经过全球各个实验室数十年的验证 NEB T4 连接酶高效 快捷 可靠 是连接实验 的首选 T4 DNA Ligase Blunt/TA Ligase Master Mix Instant Sticky-end Ligase Master Mix Quick Ligation Kit M0202L 100,000 units 1,969 M0202M 高浓度 100,000 units 1,969 M0202S 20,000 units M0202T 高浓度 20,000 units M0202V 227 M0367L 250 rxns 4,569 2,970 M0367S 50 rxns 1, M0370L 250 rxns 4,569 2,970 M0370S 50 rxns 1, M2200L 150 rxns 4,569 2,970 M2200S 30 rxns 1, M2200V 15 rxns
12 客服电话 : 购买 Q5 3 系列产品, 高品质 dntp 免费送 Q5 + dntp 强强组合, 高质量 PCR 实验, 高保真扩增从此无忧 更有 Q5 超保真 PCR 试剂盒 7 折特价供应 目录价 ( 元 ) 促销价 ( 元 ) Q5 High-Fidelity DNA Polymerase 2,959 M0491L Deoxynucleotide (dntp) Solution Mix 8 μmol of each Q5 High-Fidelity DNA Polymerase 749 M0491S Deoxynucleotide (dntp) Solution Mix 2 μmol of each 169 2, Q5 High-Fidelity PCR Kit E0555L 200 rxns 2,119 1,483 E0555S 50 rxns NEBuilder 4 克隆组装精选组合套装强力推新 将高效能 NEBuilder 组装预混液与 NEB Q5 超保真 DNA 聚合酶和高纯度的 dntp 组合为 NEBuilder HiFi DNA Assembly Essential Kit, 绝妙搭配, 让您的克隆组装实验迈上新台阶 组分目录价 ( 元 ) 促销价 ( 元 ) NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix 250 rxns NEBuilder HiFi DNA Assembly Essential Kit T2621X Q5 High-Fidelity DNA Polymerase 33,869 22,015 Deoxynucleotide (dntp) Solution Mix 8 μmol of each NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix 50 rxns NEBuilder HiFi DNA Assembly Essential Kit T2621L Q5 High-Fidelity DNA Polymerase 8,649 6,054 Deoxynucleotide (dntp) Solution Mix 4 μmol of each NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix 10 rxns NEBuilder HiFi DNA Assembly Essential Kit T2621S Q5 High-Fidelity DNA Polymerase 50 units 2,649 1,854 Deoxynucleotide (dntp) Solution Mix 4 μmol of each 5 NEB 蛋白 Marker 产品长期特惠 L 包装 5 折特惠 目录价 ( 元 ) 促销价 ( 元 ) Color Protein Standard, Broad Range ( kda) P7712L 500 gel lanes 5,699 2,850 Blue Protein Standard, Broad Range ( kda) P7706L 500 gel lanes 5,079 2,540 S 包装买一送一 目录价 ( 元 ) Color Protein Standard, Broad Range ( kda) P7712S 100 gel lanes 1,199 Blue Protein Standard, Broad Range ( kda) P7706S 100 gel lanes 1,069 11
13 经典回顾 提供 PCR 全面解决方案的 NEB 聚合酶 聚合酶链式反应 (PCR) 是分子生物学中最常用的方法 作为科研市场中第一家销售 Taq DNA 聚合酶和第一家发现 PCR 超保真 DNA 聚 合酶的公司,40 年来,NEB 公司在生命科学研发领域和生产试剂方面, 一直处于领导者地位 NEB 提供各种 DNA 聚合酶, 并致力于为 PCR 和相关应用研发具有创新性和高品质的工具 下表简要描述了如何针对您的实验选择最佳的聚合酶 特性 OneTaq / OneTaq 热启动 标准 PCR 超保真 PCR 特异性 PCR Taq/ 热启动 Taq Q5 /Q5 热启动 最高保真度中等保真度长片段扩增 Phusion (1) / Phusion (1) Flex Vent R / Deep Vent R LongAmp / LongAmp 热启动 Taq 重亚硫酸盐测序 血液 PCR Epimark 血源扩增 Hemo 热启动 Taq KlenTaq 保真度与 Taq 比较 2X 1X > 100X > 50X 5 6X 2X 1X ND 扩增长度 < 6 kb 5 kb 20 kb 20 kb 6 kb 30 kb 1 kb 2 kb 延伸速率 1 kb/min 1 kb/min 6 kb/min 4 kb/min 1 kb/min 1.2 kb/min 1 kb/min 0.5 kb/min 产物末端结构 3 A/ 平末端 3 A 平末端平末端平末端 3 A/ 平末端 3 A 3 A 3' 5' 外切酶活性有无有有有有无无 5' 3' 外切酶活性有有无无无有有无 Units/50 µl 反应体系 N/A 退火温度 Tm 5 Tm 5 Tm + 3 Tm + 3 Tm 5 Tm 5 Tm 5 Tm 5 应用 常规 PCR l l l l l 菌落 PCR l 增强保真度 l l l l 高保真度 l 高产量 l l 快速 l 长片段扩增 l 富含 GC 模板 l l 富含 AT 模板 l l l 高通量 l l l l l 多重 PCR l (2) l l 无需提取 DNA 的 PCR DNA 标记 定点突变 l 重亚硫酸盐测序 二代测序应用 二代测序文库扩增 l (3) l 剂型 热启动 l l l l l l 试剂盒 l l l l 预混液 l l l l l 直接凝胶上样 l l l (1) Phusion DNA Polymerase was developed by Finnzymes Oy, now a part of Thermo Fisher Scientific. This product is manufactured by New England Biolabs, Inc. under agreement with, and under the performance specifications of Thermo Fisher Scientific. (2) 使用多重 PCR 5X Master Mix (3) 使用 NEBNext 超保真 2X PCR 预混液模块 12
14 客服电话 : 经典回顾 Q5 超保真 DNA 聚合酶 Q5 超保真 DNA 聚合酶, 以其无与伦比的扩增保真性 (> Taq 酶的 100 倍 ) 及其超低的错配率, 建立了高保真聚合酶的新标准 Q5 超保真 DNA 聚合酶是一种新型聚合酶, 携带具有持续合成能力的 Sso7d DNA 结合域, 能够提高反应速度 保真度和可靠性 超保真性 - 大于 Taq 酶的 100 倍 Fidelity (x Taq ) >100 1,2 >50 1,2 超强扩增力 - 几乎不用优化即可获得超高产量及超高特异性 超强适应力 - 适用于不同模版 ( 从高 AT 到高 GC) 超快速 - 极短的延伸时间 (10 秒 /kb) 扩增产物长 - 简单模板可至 20 kb, 复杂模板可至 10 kb 20 0 Q5 Phusion AccuPrime Pfx PfuUltra II Fusion HS PfuUltra Platinum Taq HiFi KOD 1 基于 PCR 的突变筛选 [lacz (NEB), lac I (Agilent), rpsl (Life)] 2 由于 Q5 的碱基错误掺入情况极低, 因此其错配率很难用统计学方法进行测量 虽然通过比较发现 Q5 的保真性为 Taq 酶的 100~200 倍, 但我们仍保守的将其保 真性定为 Taq 酶的 100 倍 3 Takagi et al (1997) appl.env.microbiol.63, 使用 Q5 进行高保真 PCR 的实验方案 25 μl 反应体系 50 μl 反应体系 终浓度 5X Q5 反应缓冲液 * 5 µl 10 µl 1X 10 mm dntps 0.5 µl 1 µl 200 µm 10 μm 引物 ( 正向和反向 ) 1.25 µl 2.5 µl 0.5 µm DNA 模板 可变 可变 < 1 µg 无核酸酶污染的水 至 25 µl 至 50 µl Q5 超保真 DNA 聚合酶 ** 0.25 µl 0.5 µl 0.02 units/50 µl rxn * ** 加入 High GC Enhancer 可以对富含 GC 和复杂的模板进行扩增 如果扩增产物大于 6 kb, 可以把加入的聚合酶量提高到 2 units/50 μl rxn 循环数温度时间 预变性 秒 变性 秒 退火 * 秒 延伸 秒 / kb 最后延伸 分钟 保持 * 可以借助 NEB Tm calculator 计算 Tm 值 ( 请注意 Q5 和 Phusion 的退火温度不同 13 订购信息 Q5 High-Fidelity DNA Polymerase Q5 High-Fidelity 2X Master Mix Q5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase Q5 Hot Start High-Fidelity 2X Master Mix NEBNext High-Fidelity 2X PCR Master Mix NEBNext Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix Q5 Site-Directed Mutagenesis Kit (Without Competent Cells) Q5 High-Fidelity PCR Kit M0491L M0491S M0491V 50 units M0492L 500 次反应 (50 μl 反应体系 ) M0492S 100 次反应 (50 μl 反应体系 ) M0493L M0493S M0494L 500 次反应 (50 μl 反应体系 ) M0494S 100 次反应 (50 μl 反应体系 ) M0541L 250 次反应 (50 μl 反应体系 ) M0541S 50 次反应 (50 μl 反应体系 ) M0543L 250 次反应 (50 μl 反应体系 ) M0543S 50 次反应 (50 μl 反应体系 ) E0552S 10 次反应 E0555L 200 次反应 (50 μl 反应体系 ) E0555S 50 次反应 (50 μl 反应体系 )
15 特别推荐 合成生物学 选择合适的设计和组装方法 合成生物学是将基因及蛋白作为基本组装要素, 重新设计或组装成为具有更新更强功能的生物产品 最近的生物化学和生物燃料方面的进展, 及关于最小基因组的最新认识都得益于合成生物学 这些项目通常都依赖于将多个 DNA 片段的有序组装, 从而创造出更为复杂的人造 DNA 结构, 实验方法的发展极大的简化了以上流程 New England Biolabs 提供一系列能够用于 DNA 组装和克隆的产品 利用下表选择最适合您的 DNA 组装产品 特性 NEBuilder HiFi DNA Assembly NEB #E2621 NEB #E5520 Gibson Assembly NEB #E5510 NEB #E2611 NEB Golden Gate Assembly Mix NEB #E1600 USER Enzyme NEB #M5505 去除 5' 或 3' 端错配 *** * N/A N/A 在连接处高保真的组装 *** ** *** *** 允许末端的重复序列 * * *** *** 生成充分连接好的产品 *** *** *** NR 连接双链 DNA 和单链的寡核苷酸 *** ** NR NR DNA 总量小时依旧高效的组装 *** ** ** ** 灵活的重叠片段长度 *** *** * ** 应用 简单克隆 (1-2 个片段 ) *** *** *** *** 4-6 个片段组装 *** *** *** *** > 6 个片段组装 *** ** *** *** 为体外转录所构建的模板 *** *** *** * 全基因组合成组装 *** * * * 多位点突变 *** ** ** ** 文库生成 ** ** ** ** 信号通路工程 *** ** ** *** TALENs ** ** *** ** 短的发卡 RNA 克隆 (shrna) *** ** * * grna 文库生成 *** ** * * 大片段 (> 10 kb) 组装 *** *** *** ** 小片段 (< 100 bp) 组装 *** * *** *** 用于可循环的限制性内切酶组装 *** * NR * 订购信息 NEBuilder HiFi DNA Assembly Master Mix Gibson Assembly Master Mix NEB Golden Gate Assembly Mix E2621S/L/X E2611S/L E1600S 10/50/250 reactions 10/50 reactions 15 reactions USER Enzyme M5505S/L 50/ KEY *** 针对所选择的应用, 是最佳的 推荐的产品 N/A 不适用于该应用 ** 针对所选择的应用能很好的工作 NR 不推荐 能用于所选择的应用, 但不推荐 * 其它有助于合成生物学实验的试剂 限制性内切酶 DNA 连接酶和修饰酶 DNA Ladder BsaI R0535V/S/L 500/1,000/ BsaI-HF R3535V/S/L 500/1,000/ BbsI R0539V/S/L 150/300/1, BsmBI R0580S/L 200/ Thermos aquaticus (Taq) DNA 连接酶 M0208V/S/L 1,000/2,000/ T4 DNA 连接酶 M0202V/S/T/L/M 10,000/20,000/100,000 units T5 核酸外切酶 M0363S/L 1,000/ Quick-Load Purple 2-log DNA Ladder ( kb) N0550S gel lanes Quick-Load Purple 100 bp DNA Ladder N0551S 125 gel lanes Quick-Load Purple 1 kb DNA Ladder N0552S 125 gel lanes NEW ENGLAND BIOLABS NEB HF NEBUILDER 和 QUICK-LOAD 是 New England Biolabs, Inc. 注册商标 GIBSON ASSEMBLY 是 Synthetic Genomics, Inc. 注册商标 USER 是 New England Biolabs, Inc. 注册商标 14
16 美国 NEW ENGLAND BIOLABS, INC. 240 County Road Ipswich, MA Telephone (978) Toll Free (USA Orders) Toll Free (USA Tech) Fax (978) 加拿大 NEW ENGLAND BIOLABS, LTD. Telephone (905) Toll Free Fax (905) Fax Toll Free 携手四十春秋见证科学热忱 NEB 产品目录及技术资料即将发行 New England Biolabs 隆重推出屡获殊荣的最新产品目录及技术资料, 包括 50 多种新产品 最新的选择表 操作步骤及问题解答贴士 精选 40 年来深受读者青睐的每一期目录精华, 与您一同聆听 2014 年 Passion in Science Awards 获奖者们鼓舞人心的故事 特色产品推荐 > 200 种内切酶在 Cutsmart Buffer 中活性为 100% OneTaq 和 Q5 DNA 聚合酶 超强的扩增性能, 宽泛的模板适用性 ( 常规 高 AT 和高 GC) NEBuilder HiFi DNA 组装工具 实现多重 DNA 片段无误连接 用于二代测序文库制备的 NEBNext 试剂 新增 FFPE 样本 DNA rrna 去除和微生物 DNA 试剂盒 法国 NEW ENGLAND BIOLABS FRANCE Free Call Free Fax info.fr@neb.com 德国 / 奥地利 NEW ENGLAND BIOLABS GMBH Telephone +49/(0)69/ Free Call 0800/ (Germany) Free Call 00800/ (Austria) Fax +49/(0)69/ Free Fax 0800/ (Germany) info.de@neb.com 日本 NEW ENGLAND BIOLABS JAPAN, INC. Telephone +81 (0) Fax +81 (0) info@neb-japan.com 新加坡 NEW ENGLAND BIOLABS, PTE. LTD. Telephone Fax sales.sg@neb.com 英国 NEW ENGLAND BIOLABS (UK) LTD. Telephone (01462) Call Free Fax (01462) Fax Free info.uk@neb.com 详情洽询 NEB( 北京 ) CUTSMART NEBNEXT NEW ENGLAND BIOLABS NEBUILDER ONETAQ 和 Q5 是 New England Biolabs, Inc. 的注册商标, PASSION IN SCIENCE AWARDS 是 New England Biolabs, Inc. 的商标 NEB 官方微博 NEB 官方微信 NEB 完美品质成就科学梦想 NEB( 北京 ) 北京海淀区王庄路 1 号清华同方科技广场 B 座 0612 客服热线 : 电话 : /6 传真 : 网站 : 邮箱 : info@neb-china.com NEB 官方微博 :
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( 105 133002) 787 1092 32 287.50 2004 6 1 2004 6 1 1 1 000 736.00 ( 16.00 ) ...1 19...5 10...6...7...11 59...13...14...15...19...20...24...25 I ...27...28...31...33...34 60...36...44...46 19 13...47 16
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
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第一章分子克隆工具酶 1 第一节限制性内切酶 Restriction Enzymes Restriction Enzymes An endonuclease( 核酸内切酶 ) that recognizes specific nucleotide sequences (4-8 bp) in DNA and breaks the DNA chain at that sites 2 一 限制性内切酶的发现
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中 国 资 产 管 理 业 翘 首 等 待 修 订 后 的 证 券 投 资 基 金 法 及 配 套 法 规 的 施 行 2012 年 12 月 28 日, 业 内 期 盼 已 久 的 中 华 人 民 共 和 国 证 券 投 资 基 金 法 ( 新 基 金 法 ) 修 订 通 过, 自 2013 年 6 月 1 日 起 施 行 为 了 支 持 新 基 金 法 的 实 施, 有 关 监 管 部 门, 主
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厨房小知识（六）
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目 党 政 工 作 广 东 纺 织 职 业 技 术 学 院 党 委 理 论 中 心 组 学 习 制 度...1 广 东 纺 织 职 业 技 术 学 院 教 职 工 政 治 理 论 学 习 制 度...4 广 东 纺 织 职 业 技 术 学 院 党 风 廉 政 建 设 责 任 制 实 施 办 法 ( 试 行 )...6 广 东 纺 织 职 业 技 术 学 院 党 风 廉 政 建 设 暂 行 规 定...18
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2005 2005 http://www.nsfc.gov.cn 2005 12 2005...1 1-1 2005...1 1-2 2005...2 1-3 2005...5 1-4 2005...6 1-5 2005...7 1-6 2005...8 1-7 2005...9 1-8 2005...10 1-9 2005 200...11 1-10 2005...21 1-11 2005...61
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金融英语证书考试大纲
金 融 英 语 证 书 考 试 大 纲 第 一 部 分 考 试 说 明 一 考 试 目 的 金 融 英 语 证 书 考 试 是 国 家 级 行 业 性 专 业 外 语 水 平 考 试, 旨 在 通 过 统 一 的 标 准 化 考 试 程 序 和 测 试 标 准, 为 中 国 金 融 业 提 供 金 融 英 语 水 平 行 业 参 考 标 准, 测 试 并 认 定 应 试 人 员 的 金 融 英 语
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健康知识（二）
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中南财经大学（二）.doc
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广西大学（一）.doc
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根据学校教学工作安排，2011年9月19日正式开课，也是我校迁址蓬莱的第一学期开学
济 南 大 学 泉 城 学 院 2014 届 毕 业 生 就 业 质 量 年 度 报 告 前 言 济 南 大 学 泉 城 学 院 是 国 家 教 育 部 和 山 东 省 人 民 政 府 正 式 批 准 成 立, 实 施 本 科 层 次 学 历 教 育 的 综 合 性 高 等 院 校 自 2005 年 建 校 以 来, 学 院 依 托 济 南 大 学 雄 厚 的 办 学 实 力, 坚 持 以 学 生
山东大学（一）.doc
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主 编 : 杨 林 副 主 编 : 张 新 民 邹 兰 曹 纯 纯 周 秋 婷 李 雅 清 黄 囡 囡 评 审 顾 问 : 杨 林 张 新 民 评 审 : 张 新 民 邹 兰 曹 纯 纯 周 秋 婷 李 雅 清 黄 囡 囡 李 忆 萍 徐 如 雪 文 字 编 辑 : 曹 纯 纯 邹 兰 李 雅 清
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最新文物管理执法全书（十四）.doc
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园林常识（二）.doc
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前 言 二 一 六 年 四 月 四 日, 兒 童 節, 誕 生 了 一 件 美 事 : 中 國 作 家 曹 文 軒 在 意 大 利 博 洛 尼 亞 國 際 童 書 展 榮 獲 國 際 安 徒 生 文 學 獎, 是 該 獎 創 設 六 十 年 來, 第 一 位 摘 桂 的 中 國 作 家, 意 義 重
目 錄 前 言 i 童 年 1 關 於 肥 肉 的 歷 史 記 憶 ( 節 錄 ) 7 疲 民 15 水 邊 的 文 字 屋 23 海 邊 的 屋 29 紅 葫 蘆 37 追 隨 永 恆 ( 草 房 子 代 跋 一 ) 53 因 水 而 生 草 房 子 寫 作 札 記 59 書 香 人 家 73 朗 讀 的 意 義 79 知 無 涯, 書 為 馬 85 讀 是 誰 91 給 孩 子 講 課 文 學
湖 南 科 技 大 学
I 目 录 第 一 章 2015 年 度 培 训 概 况 1 1 基 本 情 况 1 1.1 项 目 申 报 情 况 1 1.2 项 目 实 施 情 况 3 1.3 学 员 来 源 情 况 5 1.4 项 目 经 费 情 况 7 2 组 织 管 理 9 2.1 学 校 设 立 培 训 项 目 实 施 工 作 领 导 小 组 9 2.2 施 训 学 院 设 立 项 目 实 施 办 公 室 9 3 培
上海外国语大学（二）.doc
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2009 陳 敦 德
前 言 : 發 掘 香 港 歷 史 獨 有 的 寶 藏 2010 2009 陳 敦 德 目 錄 前 言 發 掘 香 港 歷 史 獨 有 的 寶 藏 / i 第 一 章 香 港 設 立 八 路 軍 辦 事 處, 青 年 廖 承 志 為 主 任 /1 一 毛 澤 東 認 為, 八 路 軍 駐 香 港 辦 事 處, 是 個 獨 特 的 辦 事 處 /10 二 毛 澤 東 親 自 點 將, 為 小 廖 舉
切 实 加 强 职 业 院 校 学 生 实 践 能 力 和 职 业 技 能 的 培 养 周 济 在 职 业 教 育 实 训 基 地 建 设 工 作 会 议 上 的 讲 话 深 化 教 育 教 学 改 革 推 进 体 制 机 制 创 新 全 面 提 高 高 等 职 业 教 育 质 量 在
目 录 中 华 人 民 共 和 国 职 业 教 育 法... 1 国 务 院 关 于 大 力 推 进 职 业 教 育 改 革 与 发 展 的 决 定... 7 国 务 院 关 于 大 力 发 展 职 业 教 育 的 决 定... 17 教 育 部 财 政 部 关 于 实 施 国 家 示 范 性 高 等 职 业 院 校 建 设 计 划 加 快 高 等 职 业 教 育 改 革 与 发 展 的 意 见...
鸽子（三）
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兽药基础知识（四）
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