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1 临床微生物实验室完整解决方案 中国协和医科大学医学硕士马文新 2015 年 6 月 7 日 济南 中国 MRSA 对抗生素敏感性 药物 S% I% R% 青霉素 氨苄西林 头孢唑林 头孢克罗 头孢噻肟 头孢匹肟 依米培南 庆大霉素 红霉素 氧氟沙星 万古霉素 年全国抗菌药物临床应用专项整治活动方案

2 史上最严格的抗生素政治方案 抗菌药物临床应用管理办法 ( 卫生部令第 84 号 ) 凝聚 150 余年专业品质的技术与服务 Sensititre 完整的微生物实验室解决方案 加强血培养检测 手工鉴定产品 药敏试验 Versa TREK Iris 2X

3 血培养的三个主要目的 中国微生物送检样品的种类 快速证实感染性病原体 为鉴定病原体提供条件 指导正确的抗菌药物使用 肛拭子导管 1% 1% 支气管灌洗液其它 2% 1% 分泌物咽拭子 3% 3% 大便 4% 引流液或穿刺液 6% 组织 1% 大型三甲医院 3,200 张床位 40,000 标本 / 年 血液 9% 痰液 58% 尿液 11% 实验室类型 : 美国私立大医院微生物实验室 医院病床数 : 800 beds 微生物标本量 : 600 个标本 / 天 血培养标本量 : 150 瓶 / 天 血培养标准采样 : 3 套瓶 /24 小时 (1 个需氧瓶 +1 个厌氧瓶 =1 套 ) 阳性结果 : 株需氧或兼性厌氧菌 / 天, 2 株厌氧菌 / 月 实验室类型 : 标本来源 : 微生物标本量 : 血培养标本量 : 阳性结果 : 美国大型独立实验室 14 家中型医院和一些小诊所 8000 个标本 / 天 1400 瓶 / 天 个阳性结果 / 天

4 New 赛默飞四合一培养系统 武汉同济医院评估结果 市场上唯一获得 FDA 认可的 四合一 系统, 可以同时进行血液 无菌体液培养 分枝杆菌培养以及结核分枝杆菌药敏测试可以有效控制血流感染和结核分枝杆菌排查和药敏, 减少实验室仪器成本投入, 提高效率 1) 结果汇总菌株名称 菌落计数 BD 需氧瓶 梅里埃需氧瓶 Thermo 需氧瓶 最快 鲍曼不动杆菌 大肠埃希菌 嗜麦芽寡养单胞菌 普通变形杆菌 铜绿假单胞菌 流感嗜血杆菌 菌株名称 菌落计数 BD 需氧瓶 梅里埃需氧瓶 Thermo 需氧瓶 最快 金黄色葡萄球菌 人葡萄球菌人亚种 粪肠球菌 产单核李斯特菌 肺炎链球菌 草绿色链球菌 化脓链球菌 菌株名称 菌落计数 BD 需氧瓶 梅里埃需氧瓶 Thermo 需氧瓶 最快 白色念珠菌 VersaTREK 240 VersaTREK 528 结论 :VersaTREK 系统在金黄色葡萄球菌 产单核李斯特菌 白色念珠菌检测速度上最快 上海华山医院对比数据 菌株 TREK 报阳时间 H BD FX 报阳时间 /H BD 9120 报阳时间 H3D 报阳时间 H 最快 肺炎链球菌 白色念珠菌 奇异变形杆菌 嗜麦芽寡养单胞菌 铜绿假单胞菌 肺炎克雷伯菌 大肠埃希菌 流感嗜血杆菌 铅黄肠球菌 腐蚀艾肯氏菌 阴沟肠杆菌 化脓链球菌 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 产气荚膜梭菌 脆弱拟杆菌 厌氧消化链球菌 大肠埃希菌 ( 厌氧 ) 拜血梭菌 独特的专利检测技术 Comprehensive Detection Technology (CDT 检测技术 ) 检测各种气体的产生和消耗 (CO 2, O 2, N 2 和 H 2 ), 能够检测的细菌范围最广避免了只检测 CO 2 的局限性 有效提高培养的阳性率 有效检测苛养菌 HACEK 群 脑膜炎奈瑟氏菌和其它菌 有效检测厌氧菌 很多厌氧菌通常不能产生足够的 CO2, 但是会产生其它气体, 如 N2 或 H2(Sullivan, et. al., ASM 1992) 磁力涡旋搅拌技术 性价比最高的培养瓶 REDOX1 需氧培养瓶, 通过磁力自动搅拌增加 REDOX 1 培养基中氧合作用, 特殊的培养基配方, 确保细菌和酵母菌的高检出率 VorTrexing = 更快的检测速度 REDOX 2 厌氧培养瓶静止不搅拌静止的 REDOX 2 厌氧瓶, 减少氧含量, 提高厌氧菌和兼性厌氧菌的检出率 最佳的营养效果 ( 样本与肉汤 1:9 稀释比例 ) - 优化的培养基,80ml 大容量提供更多营养成分 -1:9 稀释比例, 达到足以稀释抗生素的剂量, 消除抗生素的抑制作用, 因此无需专用的活性炭 树脂瓶或特殊培养瓶 - 不含影响细菌生长的物质, 如指示剂 最低的采血量 - 80 ml 需氧瓶 / 厌氧瓶 (FDA 认可样本量 ml) 最低 0.1ml 采血量, 适用于小儿, 无需专用的儿童瓶 80ml

5 分枝杆菌检测技术 分枝杆菌培养瓶 分枝杆菌培养 : 检测技术的独特优势 Comprehensive Detection Technology (CDT 技术 ) 同时检测 O 2 的消耗和其它气体的产生 (CO 2, N 2 and H 2 ) 所有分枝杆菌均要消耗气体绝大部分污染菌是产生气体!! 结核分枝杆菌药敏 : 一线抗生素 简化的单一瓶检测系统 可用于所有标本类型的分枝杆菌培养呼吸道标本 血液 体液和尿液等独特的生长基质 分枝杆菌培养瓶包含纤维海绵优化的 7H9 液体培养基, 提高含氧率和结核检出率提供固体生长基质 利福平, 异烟肼, 乙胺丁醇, 吡秦酰胺, 链霉素 微生物鉴定药敏流程 多种细菌鉴定药敏产品 OptiRead * 自动微生物鉴定及药敏分析系统 AIM 全自动菌液接种仪 采用荧光技术, 读板快速准确, 减少人工判读时间 快速传送结果, 用于处理 解释和生成报告 简洁 小巧的设计自动化操作方便 SWIN 数据分析软件及专家系统 加样快速精确,50µl 增量 ( 最大量 200µl) 小巧 紧凑的台式设计 可完成一块板上多个样本的接种 图标式触摸屏, 操作方便 可以接种所有 Sensititre 板条以及 其它 96 孔板 独特试管头设计, 避免污染 无需接种样本槽

6 ARIS 2X 全自动鉴定及药敏系统 Automated Reading & Incubation System Vizion 自动药敏判读系统 采用先进的荧光技术 条码阅读器, 自动识别检测板种类 自动完成培养和结果判读 64 块测试板容量 SWIN 数据分析软件及专家系统 提供 LIS 联网接口 无需附加试剂及废液回收 无需特殊维护 自动记录可视化结果 触摸式数字图像 无需人工记录结果 可调节背景光 数字图像可储存, 记录永久保存 SWIN 专家系统 提供 LIS 联网接口 Vizion 的 SWIN 软件 药敏板 标准全值 MIC 药敏板 阈值 BP 药敏板 ( 折点法 ) 室温储存, 有效期长 同时支持人工判读和自动判读 始终提供的是最新药物组合 SWIN 软件能显示药敏板条的数字图像抗生素及相应浓度网状分格显示快速判读结果, 通过不同颜色标识药敏结果 Dtest 阳性的金黄色葡萄球菌会显示结果解释 减少附加试验和重复试验, 降低检测成本, 加快检测时间 检测已有的和发展中的抗生素耐药情况室温保存 24 个月减少运输和处理的成本 CLSI M-100 氨基糖苷类和头孢菌素类执行标准 粘菌素多粘菌素 B 强力霉素多尼培南米诺环素特拉万星头孢洛琳 常用药敏板种类 药敏板优点 货号 产品名称 适用范围 备注 注册证 革兰阴性非苛养菌 ( 包括肠杆菌科, 假 阈值 BP 药敏板, CFDA(Ⅰ) PRCM2F 非苛养菌药敏板 2 个测试 / 药敏板 单胞菌属和其他非肠杆菌科细菌 ) 7 革兰阳性非苛养菌 ( 包括金黄色葡萄球 阈值 BP 药敏板, PRCM1F 非苛养菌药敏板 菌属, 肠球菌属, 除肺炎链球菌外的 β 2 个测试 / 药敏板 CFDA(Ⅰ) 溶血性链球菌 ) 革兰氏阴性杆菌 ( 包括肠杆菌科, 假单 CFDA(Ⅰ) GN4F 革兰氏阴性菌药敏板 全值 MIC 药敏板 胞菌属和其他非肠杆菌科细菌 ) 7 革兰氏阳性菌 CFDA(Ⅰ) GPALL1F 革兰氏阳性菌药敏板 全值 MIC 药敏板 ( 葡萄球菌 肠球菌 链球菌 ) 5 STP6F 链球菌药敏板 链球菌属和肺炎链球菌 全值 MIC 药敏板 CFDA(Ⅰ) YO2IVD 真菌药敏板 念珠菌属 5 种抗真菌药物 CFDA 受理证 YO10 真菌药敏板 念珠菌属 隐球菌属 曲霉菌属和其它 9 种抗真菌药物 CFDA 受理证 可快速生长的酵母菌属 GN4F 革兰氏阴性菌药敏板适用于革兰氏阴性杆菌包含多尼培南,CLSI 2014 新增加了该抗生素针对不动杆菌属的折点包含米诺环素,CLSI 2014 重新加入了该抗生素 ( 自动化仪器上, 仅 Sensititre 药敏板条包含米诺环素 ) GPALL1F 革兰氏阳性菌药敏板适用于葡萄球菌 肠球菌 链球菌药物品种齐全,22 种抗生素, 包括达托霉素等特有抗生素 STP6F 链球菌药敏板适用于链球菌属和肺炎链球菌全值 MIC 药敏板,23 种抗生素

7 YO2 IVD Fluconazole 氟康唑 Itraconazole 伊曲康唑 5-Flucytosine 5- 氟胞嘧啶 Voriconazole 伏立康唑 Caspofungin 卡泊芬净 YeastOne 真菌药敏板 YO10 Fluconazole 氟康唑 Itraconazole 伊曲康唑 5-Flucytosine 5- 氟胞嘧啶 Amphotericin 两性霉素 Voriconazole 伏立康唑 Caspofungin 卡泊芬净 Posaconazole 泊沙康唑 Anidulafungin 阿尼芬净 Micafungin 米卡芬净 New 革兰氏阴性 (GNID) 肠杆菌科和非发酵细菌肠杆菌 :5 小时非发酵菌 :18 小时革兰氏阳性 (GPID) 小时每个鉴定板可进行 3 个样本测试荧光判读 无需附加试剂 月有效期, 室温保存 手工快速鉴定板 近 500 种细菌可进行精确鉴定 RapID Yeast Plus 文献 三种商业系统用于鉴定临床微生物实验室常规分离酵母菌的比较

8 对比数据 结论 总鉴定率 : RapID Yeast Plus:96% API 20C Aux: 83% Vitek YBC: 86% RapID Yeast Plus 鉴定效果明显优于 API 20C Aux( 正确鉴定 193 株 vs 167 株 ;P<0.0001), 和 Vitek YBC ( 正确鉴定 193 株 vs 173 株 ;P=0. 003), 无需附加试验直接正确鉴定到菌种水平 RapID Yeast Plus 鉴定系统使用方便, 是一个很好的系统可用于临床相关酵母菌的常规鉴定 制成培养基解决方案 2007 年在中国北京依据 OXOID 全球统一标准设立微生物制成培养基生产线, 亚洲首个全自动 PPM 生产厂

9 优质的 OXOID 原料 全自动化生产工艺 1924 年 Oxo 有限公司成立了医疗事业部, 向医生销售属于 OXOID(OXO Industrial Division) 商标的产品 1950 s Oxoid 开始销售干粉培养基, 是目前全球最大的干粉供应商 自动化罐装, 平板表面光滑, 厚薄均匀 精确分装, 并保证有足够的量满足存储和孵育的需要 产品在百级的环境中灌装 冷却 吹干 喷码, 保证产品不被污染 精确的温度控制 C.L.E.D 培养基 CM301 在专用的培养基制备器中完成原料的升温 溶解 灭菌 强制降温, 各种参数被精确控制, 保证培养基的彻底灭菌且不破坏营养成分 过热导致金黄色葡萄球菌生长降低 正常 普通平板 加血平板 药敏检测平板

10 选择性分离平板 二分平板 院感用接触性平板 PPM 获得 CFDA 证书 品种最齐全的药敏纸片 185 种 Code No. Product Chinese name Registration No. Class PB8001A/F 万古霉素巧克力琼脂平板 ( 培养嗜血杆菌 ) 京药监械 ( 准 ) 字 2013 第 号 Ⅱ PO8060A/F 玫红酸中国蓝乳糖琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2013 第 号 Ⅱ PO1034A/F 念珠菌显色琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2013 第 号 Ⅱ PO5045A/F 伊红美蓝琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2013 第 号 Ⅱ PO0495A/F 3 号麦康凯琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2013 第 号 Ⅱ PB8136A/F 巧克力 GC 选择性琼脂平板 ( 培养淋球菌 ) 京药监械 ( 准 ) 字 2013 第 号 Ⅱ PO5022A/F SS 琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2013 第 号 Ⅱ PO0152A/PO1043S MH 琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2013 第 号 Ⅱ PB0115A/F 血琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2012 第 号 Ⅰ PB0123A/F 哥伦比亚血琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2012 第 号 Ⅰ PB8124A/F 巧克力琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2012 第 号 Ⅰ PO0160A/F 沙保氏葡萄糖琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2012 第 号 Ⅰ PO0155A/F 营养琼脂平板 京药监械 ( 准 ) 字 2012 第 号 Ⅰ EUCAST 评估为性能最优异的纸片品牌 EUCAST 评估为性能最优异的纸片品牌

11 安全柜 培养 冰箱孵箱 PPM 纸片 加样器 PCR 鉴定 测序 板卡

目录 一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果 二 按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流 骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5

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