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1 临床与病理杂志 J Clin Pathol Res 2017, 37(12) doi: /j.issn View this article at: 泰州市人民医院 2016 年血培养阳性病原菌的分布及其耐药性 徐娟 1, 陆桃红 1, 张庆芳 1, 周成林 1 2, 顾兵 (1. 泰州市人民医院检验科, 江苏泰州 ;2. 徐州医科大学医学技术学院, 江苏徐州 ) [ 摘要 ] 目的 : 了解泰州市人民医院 2016 年血培养病原菌的分布和耐药情况 方法 : 采用 BACTEC ALERT 3D 全自动血培养仪进行血培养 ; 采用 VITEK 2 Compact 全自动鉴定系统进行微生物鉴定及药敏试验, 链球菌药敏为纸片扩散法 (K-B 法 ), 真菌药敏采用 DL-96 FUNGUS;WHONET5.6 软件进行统计分析 结果 :2016 年全年血培养共检出病原菌 380 株, 排列前 5 位的菌种依次为大肠埃希菌 (24.2%) 表皮葡萄球菌(14.7%) 人葡萄球菌(12.1%) 肺炎克雷伯菌(8.7%) 金黄色葡萄球菌 (7.9%) 血培养病原菌主要分布于: 新生儿 ICU(newborn-intensive care unit,nicu) 感染科 ICU 消化科 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱 β- 内酰胺酶 (extended spectrum β lactamases, ESBLs) 检出率分别为 53.3%,33.3% 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,mrsa) 检出率为 44.4%, 葡萄球菌未发现对利奈唑胺 万古霉素 奎奴普丁 / 达福普汀 替加环素耐药的菌株 结论 : 血培养病原菌在不同科室的分布和耐药性不同 [ 关键词 ] 血培养 ; 病原菌分布 ; 耐药率 Distribution and resistance of pathogens isolated from blood culture of Taizhou People s Hospital in 2016 XU Juan 1, LU Taohong 1, ZHANG Qingfang 1, ZHOU Chenglin 1, GU Bing 2 (1. Department of Laboratory, Taizhou People s Hospital, Taizhou Jiangsu ; 2. College of Medical Technology, Xuzhou Medical University, Xuzhou Jiangsu , China) Abstract Objective: To investigate the distribution and resistance of pathogens isolated from blood culture of patients in the Jiangsu Taizhou People s Hospital in Methods: All blood samples were cultured by BACTEC ALERT 3D. Automatic detection machine of VITEK-2 Compact was used for identification of bacteria and fungus, as well as the susceptibility of non-fastidious bacteria. Susceptibility of streptococcus was tested by K-B method while susceptibility of fungus was tested by DL-96 FUNGUS. WHONET5.6 software was used for statistical analysis. Results: The total of pathogen strains isolated from blood culture in 2016 was 380. The top five bacteria were Escherichia coli (24.2%), Staphylococcus epidermidis (14.7%), Staphylococcus hominis (12.1%), Klebsiella pneumonia 收稿日期 (Date of reception): 通信作者 (Corresponding author): 周成林, @126.com; 顾兵, gb @163.com 基金项目 (Foundation item): 南通大学校级自然科学类科研基金 (16ZY36); 泰州市人民医院院级课题 (ZL201613);2017 年泰州市科技支撑计划 ( 社会发展 ) (SSF ) This work was supported by the Natural Science Foundation of Nantong University (16ZY36); Foundation of Jiangsu Taizhou People s Hospital (ZL201613); and Taizhou Technology Support Program (Social Development) of 2017 (SSF ), China.

2 2654 临床与病理杂志, 2017, 37(12) Keywords (8.7%), Streptococcus (7.9%). The pathogens of blood culture were mainly isolated from the department of newborn-intensive care unit (NICU), infection, ICU, gastroenterology dept. The resistance rates of Escherichia coli and Klebsiella pneumonia to extended spectrumβ lactamases (ESBLs) were 53.3%, 33.3%. Staphylococcus aureus had a 44.4% resistance rate to methicillin, while all of the three aureus were sensitive to linezolid, vancomycin, quinupristin/dafoe leptin, tigecycline. Conclusion: Diversities of distribution and antimicrobial susceptibility of blood culture isolates are found in different clinical departments. blood culture; the distribution of pathogens; drug resistance rate 血流感染常发生在病情危重的患者, 若早期 未能得到有效的抗菌药物治疗, 常危机生命 [1-3] 诊断血流感染及选择有效抗菌药物的重要依据 是血培养 由于医院患者组成 抗菌药物的大 量使用 各类诊疗手段的变化等因素, 不同医 院血流感染的病原菌在种类及耐药性方面存在 差异 本研究通过对泰州人民医院 2016 年血培 养阳性菌的分布及耐药性的分析, 为本院血流 感染经验性治疗提供依据, 更为常见病原菌的 耐药趋势提供参考 1 材料与方法 1.1 材料 菌株来源 收集泰州市人民医院 2016 年 1 月 1 日至 12 月 31 日 所有临床送检的血培养标本, 剔除同一病例的重 复菌株 仪器与试剂 BACTEC ALERT 3D 全自动血培养仪购于法 国梅里埃,VITEK 2 Compact 全自动细菌鉴定 药敏分析系统及培养平板均购于法国梅里埃公 司, 药敏纸片购于英国 OXOID 公司 1.2 方法 阳性标本的处理 血培养标本按临床微生物标准操作置血培养 仪, 血培养仪报阳后行革兰染色, 并转种血平板 和巧克力平板,35 孵育 24~48 h; 若为厌氧瓶则 需另增加血平板 转种后有菌生长为阳性, 无菌 生长为假阳性, 同时注意观察仪器生长曲线 ; 仪 器培养 5 d 无报警, 为阴性 药敏试验 非苛养菌 链球菌 真菌药敏分别采用 VITEK 2 Compact 药敏卡片 纸片扩散 (K-B 法 ) DL-96 [4] FUNGUS 板条 按照相应标准判读药敏结果 质 控菌株参照文献 [5] 1.3 统计学处理选用 SPSS19.0 统计软件进行分析 WHONET5.6 对菌株分布情况及药敏结果进行分析 P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 血培养阳性率 2016 年泰州市人民医院共送检血培养标本 份, 其中血培养阳性标本 502 份, 阳性率为 6.4%(502/7 788) 各科送检阳性率详见表 1, 其中普外科 神经外科 烧伤外科 消化科 肾内科检出阳性率位列前 5 位 各科室人均检查数量均未达到 4( 双侧双瓶 ), 仅在 1~2, 而人均检查数量最高的血液透析室也仅为 2.2, 较双侧双瓶 4 仍存在一定差距 2.2 血培养阳性病原菌菌种分布 2016 年全院共分离 380 株非重复病原菌, 涵盖 39 种 ( 表 2) 排列前 5 位的菌种见图 1 革兰阴性菌 革兰阳性菌分离率分别为 46.1%(175/380), 53.7%(204/380), 其中革兰阴性菌主要为大肠埃希菌 (24.2%) 肺炎克雷伯菌(8.7%) 肠杆菌属 (3.7%) 铜绿假单胞菌(2.9%) 鲍曼不动杆菌 (1.6%); 革兰阳性菌中表皮葡萄球菌 人葡萄球菌 金黄色葡萄球菌分别以 14.7%,12.1%,7.9% 的构成比位列葡萄球菌属的前 3 位 ; 链球菌 (3.2%) 肠球菌 (2.9%) 构成比相近 链球菌包括无乳链球菌与肺炎链球菌 2 种, 且两者在链球菌构成比相同 (50%) 肠球菌包括屎肠球菌和粪肠球菌, 两者构成比分别为屎肠球菌 (54.5%) 粪肠球菌(45.5%) 真菌分离率为 0.3%(1/380), 为白色念珠菌 2.3 血培养病原菌的科室分布情况病原菌主要分布于新生儿 ICU(newbornintensive care unit,nicu) 感染科 ICU 消化科 ( 表 3)

3 泰州市人民医院 2016 年血培养阳性病原菌的分布及其耐药性徐娟, 等 2655 表 1 临床各科室血培养送检情况 Table 1 Details of blood culture in clinical department 病区名称 检查阳性阳性检查人均检查数量数量率 /% 人次数量 普外科 神经外科 烧伤外科 消化科 肾内科 ICU 神经内科 肿瘤科 内分泌科 门急诊科 血管内科 康复科 血管外科 CCU 老年科 感染科 脊柱外科 NICU 心内科 泌尿外科 产科 风湿免疫科 血液透析室 胸心外科 表 2 血培养阳性病原菌的分布情况 Table 2 Distribution of positive pathogen in blood culture 病原菌 数量 / 株 构成比 /% 细菌革兰阴性菌 大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 铜绿假单胞菌 鲍曼不动杆菌 鲁氏不动杆菌 肠杆菌属 沙雷菌属 嗜麦芽窄食单胞菌 产酸克雷伯菌 气单胞菌 沙门菌 霍乱弧菌 革兰阳性菌 链球菌 肠球菌 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 人葡萄球菌 溶血性葡萄球菌 其他葡萄球菌 其他革兰阳性菌 真菌 白色念珠菌 妇科 呼吸内科 儿科 眼科 骨科 关节外科 构成比 /% 甲状腺乳腺外科 大肠埃希菌 表皮葡萄球菌 人葡萄球菌 肺炎克雷伯菌 金黄色葡萄球菌 耳鼻喉头颈外科 图 1 排列前 5 位菌种 Figure 1 Top 5 bacteria

4 2656 临床与病理杂志, 2017, 37(12) 表 3 血培养阳性病原菌的科室分布情况 Table 3 Distribution of positive pathogen wards in blood culture 科室 菌株数量 / 株 构成比 /% NICU 感染科 ICU 消化科 儿科 血液内科 呼吸内科 康复科 神经内科 肿瘤科 门诊 内分泌科 肾内科 心内科 老年科 手术室 风湿科 普外科 烧伤科 CCU 泌尿外科 脊柱外科 神经外科 妇科 胸心外科 产科 眼科 不动杆菌 (10.0%) 肺炎克雷伯菌 (10.0%); 消化科 排列前 3 位的病原菌株为 : 大肠埃希菌 (46.4%) 粪 肠球菌 (14.3%) 肺炎克雷伯菌 (10.7%) 2.5 排列前 5 位的菌种对抗菌药物的耐药性 肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药性 肠杆菌科中分离率位列前两位的细菌是大肠埃 希菌和肺炎克雷伯菌, 表 4 为两者对常用抗菌药物 的药敏情况 超广谱 β- 内酰胺酶 (extended spectrum β lactamases, ESBLs) 在两者中的检出率分别为 53.3%(49/92),33.3%(11/33) 大肠埃希菌和肺炎 克雷伯菌对青霉素类 头孢类 碳青霉烯类 喹诺 酮类耐药率差异均无统计学意义 (P>0.05) 表 4 肠杆菌科细菌对常用抗菌药物的药敏情况 Table 4 Drug sensitivity of Enterobacteriaceae 常用抗菌药物 氨苄西林 大肠埃希菌 /% 肺炎克雷伯菌 /% R S R S 氨苄西林 / 舒巴坦 哌拉西林 / 他唑巴坦 头孢唑啉 头孢他啶 头孢曲松 头孢替坦 氨曲南 亚胺培南 庆大霉素 环丙沙星 左旋氧氟沙星 复方新诺明 不同科室血培养病原菌株的比较由于临床各科室间疾病谱 患者免疫状态 患者易感因素等存在差异, 各科室的主要病原菌种类也不相同, 了解各科室间常见血培养病原菌种类, 有利于指导临床预防性用药 其中,NICU 排列前 3 位的病原菌株为 : 表皮葡萄球菌 (41.3%) 人葡萄球菌 (14.3%) 溶血性葡萄球菌(11.1%); 感染科排列前 3 位的病原菌株为 : 人葡萄球菌 (25.9%) 大肠埃希菌 (18.5%) 溶血性葡萄球菌(11.1%);ICU 排列前 3 位的病原菌株为 : 大肠埃希菌 (20.0%) 鲍曼 葡萄球菌对常用抗菌药物的药敏情况表皮葡萄球菌 人葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 3 种菌株为位列前 3 的葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (methicillin resistant Staphylococcus aureus, MRSA) 检出率为 44.4%, 耐甲氧西林表皮葡萄球菌检出率为 75.9%, 耐甲氧西林人葡萄球菌检出率为 75.6%,MRSA 检出率较后两者检出率低 3 种葡萄球菌均未发现对利奈唑胺 万古霉素 奎奴普丁 / 达福普汀 替加环素耐药的菌株 ( 表 5)

5 泰州市人民医院 2016 年血培养阳性病原菌的分布及其耐药性徐娟, 等 2657 表 5 葡萄球菌对常用抗菌药物的药敏情况 Table 5 Drug sensitivity of Staphylococcus 常用抗菌药物 表皮葡萄球菌 /% 人葡萄球菌 /% 金黄色葡萄球菌 /% R S R S R S 青霉素 G 苯唑西林 庆大霉素 利福平 环丙沙星 左旋氧氟沙星 莫西沙星 复方新诺明 克林霉素 红霉素 四环素 表皮葡萄球菌 人葡萄球菌 金黄色葡萄球菌对利奈唑胺 万古霉素 奎奴普丁 / 达福普汀 替加环素敏感率均为 100% Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus hominis, Streptococcus were all sensitive to linezolid, vancomycin, quinupristin/dafoe leptin, tigecycline. 3 讨论 血流感染对患者预后的影响毋庸置疑, 诊断 血流感染最重要的手段是血培养 本研究收集泰 州市人民医院 2016 年全年 份血培养标本, 其 中血培养阳性标本 502 份, 阳性率为 6.4%, 阳性率 较省级医院往年低 [5-6], 其中普外科 神经外科 烧伤外科 消化科 肾内科 5 个科室阳性率位列前 5 位 从各科室人均送检数量分析, 其双侧双瓶执 行度欠佳 因此, 可以此为起点, 监测每年本院 血培养阳性检出率及人均送检数量, 根据变化趋 势, 指导临床合理规范血培养操作, 以便进一步 提高患者诊疗疗效 对血培养阳性病原菌的分布进行分析发现 : 血培养中最常见的 5 种病原菌依次为大肠埃希菌 (24.2%), 表皮葡萄球菌 (14.7%) 人葡萄球菌 (12.1%) 肺炎克雷伯菌 (8.7%) 金黄色葡萄球菌 (7.9%) 在排名前 5 位的病原菌中有 3 种葡萄球菌, 除金黄色葡萄球菌外, 另两种属于凝固酶阴性葡 萄球菌 (coagulase negative Staphylococcus,CNS) [7-8] 大量资料显示 :CNS 一直为血培养分离率的第 1 位, 与本次调查相符 虽然 CNS 是最常见的分离 菌株, 但其也是最常见的污染菌 [9], 可通过积极宣传 严格执行双侧双瓶采集血培养标本制度, 或者增加采血量来控制 CNS 的假阳性率 另外, 本次调研结果发现, 院内感染常见菌, 如大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌仍是血培养的主要病原菌, 应引起临床重视 真菌监测方面, 本次调查中只分离出 1 株白色念珠菌, 低于相关报道 [10], 真菌感染率近年来有增高趋势, 临床应加强真菌检测送检率, 微生物实验室也可考虑采取适当措施提高真菌的检出率, 以便指导临床合理用药 本次调查中发现 1 株霍乱弧菌, 为烈性传染病之一霍乱的病原菌, 临床患者主要表现为剧烈的呕吐 腹泻 失水, 病死率甚高, 故应加强对此菌的监测, 以免引起大流行 对血培养病原菌科室分布进行统计后发现 : NICU 感染科 ICU 消化科的血流感染最常见, 但此排名与血培养阳性率由高至低排序并非一致, 消化科是唯一一个血培养阳性率与病原菌分布均居前的科室 NICU 患者年龄偏小 血管细, 采血相对困难, 采血量相对少, 易造成采血过程污染 ; 感染科交叉感染概率偏高, 因此更应加强血培养无菌操作理念 ;ICU 患者自身免疫力相

6 2658 临床与病理杂志, 2017, 37(12) 对低下, 血流感染概率相对升高, 且易出现耐药菌株, 因此临床更应注重药敏结果合理用药 ; 消化科常见病原菌主要为肠道菌群, 不能排除因科室环境不洁造成的血液污染, 故做好科室环境监测, 避免污染十分必要 虽然血流感染与各科室患者病种有一定相关性, 但以上科室仍应引起重视, 查找危险因素, 采取适当措施加强对科室患者血流感染的预防和监控 对排列前 5 位的菌种抗菌药物的耐药性分析中发现 : 肠杆菌科中大肠埃希菌 ESBLs 菌株检出率高于肺炎克雷伯菌 虽然 β 内酰胺类药物折点在 CLSIM100-S20 [11] 中发生改变, 现已不需修正产 ESBLs 菌株对 β 内酰胺类药敏结果, 但检测 ESBLs 对于感染控制的意义仍不容忽视 另本研究中涉及的耐药机制尚未阐明, 仍需进一步探讨 常见葡萄球菌中 MRSA 检出率低于 50%, 其检出率低于耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 (Methicillin Resistant Coagulase-Negative Staphylococci,MRCNS) 本研究并未发现常见葡萄球菌对利奈唑胺 万古霉素 奎奴普丁 / 达福普汀 替加环素耐药, 以上抗菌药可列入临床经验性用药的备选名单 参考文献 1. Al-Hasan MN, Juhn YJ, Bang DW, et al. External validation of bloodstream infection mortality risk score in a population-based cohort[ J]. Clin Microbiol Infect, 2014, 20(9): Laupland KB, Svenson LW, Gregson DB, et al. Long-term mortality associated with community-onset bloodstream infection[ J]. Infection, 2011, 39(5): Lillie PJ, Allen J, Hall C, et al. Long-term mortality following bloodstream infection[j]. Clin Microbiol Infect, 2013, 19(10): Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. CLSI documents M100-S24[S]. Wayne: Clinical and laboratory Standards Institude, 张保荣, 刘根焰, 文怡, 等. 血培养检出病原菌的分布及耐药性分析 [ J]. 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ), 2016, 6(35): ZHANG Baorong, LIU Genyan, WEN Yi, et al. Analysis of distribution and resistance of pathogens isolated from blood culture[ J]. Acta Universitatis Medicinalis Nanjing. Natural Science, 2016, 6(35): 赵茂吉, 辛力华, 向瑶, 等 年四川省中医院血培养病原菌分布及耐药性分析 [ J]. 现代预防医学, 2017, 44(5): ZHAO Maoji, XIN Lihua, XIANG Yao, et al. Distribution and drug resistance of pathogens isolated from blood culture, [ J]. Modern Preventive Medicine, 2017, 44(5): Lai CC, Chen YH, Lin SH, et al. Changing aetiology of healthcareassociated bloodstream infections at three medical centres in Taiwan, [ J]. Epidemiol Infect, 2014, 142(10): 钱扬会, 李艳君, 赵强元 年某院血流感染主要病原菌分布及耐药性分析 [ J]. 国际检验医学杂志, 2016, 37(21): QIAN Yanghui, LI Yanjun, ZHAO Qiangyuan. Analysis of the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria of bloodstream infection in 2015[ J]. International Journal of Laboratory Medicine, 2016, 37(21): 曹春来, 陈益明, 徐立冬. 凝固酶阴性葡萄球菌在血培养阳性结果中的临床价值 [ J]. 中国微生态学杂志, 2014, 26(8): CAO Chunlai, CHEN Yiming, XU Lidong. Clinical value of positive coagulase negative Staphylococci in blood culture[ J]. Chinese Journal of Microecology, 2014, 26(8): 马均宝, 黄广强, 吴智刚 年血液感染病原菌分布及耐药性分析 [ J]. 中华医院感染学杂志, 2014, 24(12): MA Junbao, HUANG Guangqiang, WU Zhigang. Analysis of the distribution and drug resistance of pathogens causing blood infections from 2010 to 2011[ J]. Chinese Journal of Nosocomiology, 2014, 24(12): Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing, CLSI documents M100-S20[S]. Wayne: Clinical and laboratory Standards Institude, 本文引用 : 徐娟, 陆桃红, 张庆芳, 周成林, 顾兵. 泰州市人民医院 2016 年血培养阳性病原菌的分布及其耐药性 [ J]. 临床与病理杂志, 2017, 37(12): doi: /j.issn Cite this article as: XU Juan, LU Taohong, ZHANG Qingfang, ZHOU Chenglin, GU Bing. Distribution and resistance of pathogens isolated from blood culture of Taizhou People s Hospital in 2016[ J]. Journal of Clinical and Pathological Research, 2017, 37(12): doi: /j.issn

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