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1 ICS C44 YY 中华人民共和国医药行业标准 YY/T XXXX XXXX 浓度梯度琼脂扩散药敏条 Agar Diffusion and Dilution Susceptibilityt test Strip ( 征求意见稿 ) XXXX - XX - XX 发布 XXXX-XX-XX 实施 国家药品监督管理局 发布

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3 前 言 发布本标准按照 GB/T 标准化工作导则第 1 部分 : 标准的结构和编写 的规则起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利, 本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 本标准由国家药品监督管理局提出 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会 (SAC/TC 136) 归口 本标准起草单位 : 本标准主要起草人 : 1

4 浓度梯度琼脂扩散药敏条 1. 范围 本标准规定了浓度梯度琼脂扩散药敏条的范围 规范性引用文件 要求 试验方法 标签和使用说明书 包装 运输和储存 本标准适用于浓度梯度琼脂扩散方法进行抗菌药物敏感性检测的体外诊断试剂 本标准不适用于 : a) 抗菌剂药敏纸片 b) 微量肉汤稀释法类药敏试剂 c) 除以上情况如仍有不适用的, 制造商需提供充足的理由 2. 规范性引用文件 下列文件对于本标准的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本标 准 凡是不注日期的引用文件, 其最新版本 ( 包括所有的修改单 ) 适用于本标准 GB/T191 包装储运图示标志 GB/T 体外诊断医疗器械制造商提供的信息 ( 标示 ) 第 2 部分 : 专业用体外诊断试剂 YY/T 临床实验室检测和体外诊断系统 - 感染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性试验设备的性能评价第 2 部分 : 抗菌剂敏感性试验设备的性能评价 3. 术语和定义 3.1 药敏条 susceptibilityt test strip 含有 MIC 读取刻度以及浓度梯度抗菌药物的长方形塑料或纸质条带, 用于临床致病菌对抗菌药物的药物敏感性检测 3.2 最低抑菌浓度 minimal inhibitory concentration, MIC 在规定的体外试验条件下, 在规定的时间段, 能抑制细菌出现肉眼可见生长的最低 ( 抗菌药物 ) 浓度 注 :[ YY/T /ISO :2007, 定义 3.11 ] 3.3 浓度梯度琼脂扩散试验 agar diffusion and dilution test 也称 E 试验法, 其原理是浓度呈连续梯度的抗菌药物从塑料或纸质试条中向琼脂中扩散, 在试条周围抑菌浓度范围内受试菌的生长被抑制, 从而形成透明的梨形抑菌圈 2

5 4. 要求 4.1 外观药敏条外观应符合制造商规定的要求 4.2 药敏条尺寸药敏条长 : 应在 50mm±20mm 范围内 ; 药敏条宽 : 应在 5mm±2mm 范围内 4.3 最低抑菌浓度最低抑菌浓度检测结果应符合表 1~4 规定的质控范围要求, 如表中无相应规定, 应符合制造商的要求 表 1 非苛养菌药敏试验质控范围金黄色葡萄球菌大肠埃希菌铜绿假单胞大肠埃希菌肺炎克雷伯菌抗微生物药物粪肠球菌 ATCC29212 ATCC29213 ATCC25922 菌 ATCC27853 ATCC35218 ATCC 阿米卡星 阿米卡星 / 磷霉素 (5:2) 0.5/0.2-4/1.6 32/ / /0.1-2/0.8 1/0.4-8/ 阿莫西林 > 128 氨苄西林 > 32 > 128 阿奇霉素 阿洛西林 氨曲南 贝西沙星 比阿培南 安普霉素 羧苄西林 头孢克洛 头孢孟多 头孢唑啉 头孢狄尼 头孢托仑 头孢吡肟 头孢他美 Cefiderocol 头孢克肟 头孢美唑 > 头孢尼西 头孢哌酮 头孢噻肟

6 头孢替坦 头孢西丁 头孢泊肟 头孢丙烯 头孢洛林 头孢他啶 头孢布烯 头孢唑肟 头孢托罗 头孢曲松 头孢呋辛 头孢噻吩 氯霉素 西诺沙星 环丙沙星 克拉霉素 克林沙星 克林霉素 粘菌素 达巴万星 达托霉素 德拉沙量 地红霉素 多尼培南 多西环素 依诺沙星 头孢米诺 厄他培南 红霉素 法罗培南 非达霉素 非达沙星 氟罗沙星 磷霉素 夫西地酸 加雷沙星 加替沙星 吉米沙星 庆大霉素

7 Gepotidacin 格帕沙星 艾拉普林 亚胺培南 卡那霉素 Lefamulin 左氧氟沙星 Levonadifloxacin 利奈唑胺 洛美沙星 氯碳头孢 >8 - - 美西林 美罗培南 甲氧西林 > 美洛西林 米诺环素 拉氧头孢 莫西沙星 萘夫西林 Nafithromycin 萘啶酸 替奈米星 呋喃妥因 诺氟沙星 氧氟沙星 Omadacycline Oritavancin 奥利万 星 苯唑西林 青霉素 Pexiganan 哌拉西林 > 64 - Plazomicin 多粘菌素 B 奎奴普汀 / 达福普汀 Razupenem 利福平 Solithromycin 司帕沙星

8 磺胺异恶唑 Sulopenem 硫培南 Tedizolid 特地唑胺 替考拉宁 Telavancin 特拉万星 替利霉素 四环素 替卡西林 > 128 > 256 替加环素 妥布霉素 甲氧苄啶 > 甲氧苄啶 / 磺胺甲恶 唑 0.5/ / /9.5 8/152-32/ 丙大观霉素 曲伐沙星 尤利沙星 (prulifloxacin) 万古霉素 Zidebactam 阿莫西林 - 克拉维酸 (2:1) 0.125/ / / /0.5 2/1 8/4;2-8 4/2 16/8 4/2 16/8 氨苄西林 - 舒巴坦 2/1 8/4 8/4 32/16 8/4 32/16 (2:1) 0.03/ /4 氨曲南 - 阿维巴坦 2/4 8/4 0.06/4 0.5/4 5/4 0.06/4 头孢吡肟 - 他唑巴坦 1/8-4/8-0.03/ /8 0.5/8-4/ /8 0.5/ 8 头孢吡肟 zidebactam(1:1) 0.03/ /4 头孢洛林 - 阿维巴坦 0.125/4 0.5/4 0.25/4 1/4 5/4 0.06/4 头孢他啶 - 阿维巴坦 4/4 16/4 0.06/4 0.5/ 4 0.5/4 4/4 0.03/ /4 0.25/4 2/4 头孢他啶 - 他唑巴坦 16/4 64/ /4 0.5 /4 0.25/4 1/4 0.06/4 0.25/4 0.5/4 2/4 头孢曲松 亚胺培南 -relebactam 0.008/4 0.03/4 0.5/4 2/4 0.06/ /4 0.25/4 1/4 0.06/4 0.25/4 0.03/4-0.25/4 美罗培南 -vaborbactam 0.03/ / / / /8 1/ /8 0.06/ /8 6/8 6

9 哌拉西林 - 他唑巴坦 0.25/4 2/4 1/4 4/4 1/4 4/4 1/4 8/4 0.5/4 2/4 8/4 32/4 替卡西林 - 克拉维酸 0.5/2 2/2 16/2 64/2 4/2 16/2 8/2 32/2 8/2 32/2 32/2 128/2 头孢氨苄 头孢匹罗 头孢洛扎 - 他唑巴坦 表 2 苛养菌药敏试验质控范围 抗生素种类 流感嗜血杆菌 (ATCC49247) 流感嗜血杆菌 (ATCC49766) 肺炎链球菌 (ATCC49619) 阿米卡星 / 磷霉素 (5:2) 0.5/0.2 4/1.6 8/3.2 64/25.6 阿莫西林 阿莫西林 / 克拉维酸 (2:1) 2/1 16/ / /0.06 氨苄西林 氨苄西林 / 舒巴坦 (2:1) 2/1 8/ 阿奇霉素 氨曲南 贝西沙星 头孢克洛 头孢孟多 头孢地尼 头孢妥仑 头孢吡肟 头孢吡肟 / 他唑巴坦 0.5/8 2/8 0.03/ /8 头孢他美 头孢克肟 头孢美唑 2 16 头孢尼西 头孢噻肟 头孢匹罗 头孢泊肟 头孢丙烯 头孢洛林 头孢洛林 / 阿维巴坦 0.016/ /4 头孢他啶 头孢他啶 / 阿维巴坦 0.06/4 0.5/ /4 0.06/4 0.25/4 2/4 头孢布烯 头孢唑肟 头孢托罗 头孢洛扎 / 他唑巴坦 0.5/4 2/4 0.25/4 1/4 7

10 头孢曲松 头孢呋辛 头孢噻吩 氯霉素 环丙沙星 克拉霉素 克林杀星 克林霉素 达巴万星 达托霉素 德拉杀星 地红霉素 多尼培南 多西环素 Eravacycline 厄他培南 红霉素 法罗培南 非那杀星 氟罗沙星 夫西地酸 4 32 加雷杀星 加替沙星 吉米沙星 Gepotidacin 格雷杀星 拉普林 亚胺培南 亚胺培南 /relebactam 0.25/4 1/ / /4 利福美林 左氧氟沙星 左氧那地杀星 利奈唑胺 洛美沙星 氯碳头孢 美罗培南 米诺环素 莫西沙星 Nafithromycin

11 呋喃妥因 4 16 诺氟沙星 2 8 氧氟沙星 Omadacycline 奥利万星 青霉素 Pexiganan 哌拉西林 / 他唑巴坦 0.06/4 0.5/4 奎奴普汀 / 达福普汀 Razupenem 利福平 Solithromycin 司帕沙星 硫培南 特地唑胺 特拉万星 泰利霉素 四环素 替加环素 甲氧苄啶 / 磺胺甲恶唑 (1:19) 0.03/ / /2.4 1/19 丙大观霉素 曲伐沙星 万古霉素 罗红霉素 4-16 表 3 厌氧菌药敏试验质控范围 抗生素种类 脆弱拟杆菌 (ATCC25285) 多形拟杆菌 (ATCC29471) 艰难梭菌 (ATCC700057) 迟缓优杆菌 (ATCC43055) 阿莫西林 / 克拉维酸 (2:1) 0.25/ / /0.25 2/1 0.25/ /0.5 氨苄西林 氨苄西林 / 舒巴坦 (2:1) 0.5/0.25 2/1 0.5/0.25 2/1 0.5/0.25 4/2 0.25/ /1 Cadazolid 头孢美唑 头孢哌酮 头孢噻肟 头孢替坦 头孢西丁 头孢洛林 头孢洛林 / 阿维巴坦 0.125/4 0.5/4 4/4 16/4 0.5/4 4/4 4/4 16/4 9

12 头孢唑肟 头孢洛扎 / 他唑巴坦 0.125/4 1/4 16/4 128/4 头孢曲松 氯霉素 克林杀星 克林霉素 多尼培南 Eravacycline 厄他培南 法罗培南 非达霉素 非那杀星 加雷杀星 亚胺培南 亚胺培南 /relebactam 0.03/4 0.25/4 0.06/4 0.5/ /4 1/4 利奈唑胺 美罗培南 甲硝唑 美洛西林 莫西沙星 硝唑尼特 Omadacycline 青霉素 哌拉西林 哌拉西林 / 他唑巴坦 0.125/4 0.5/4 4/4 16/4 4/4 16/4 4/4 16/4 Ramoplanin 雷莫拉宁 拉苏培南 Ridinilazole 利福平 晒克硝唑 硫培南 Surotomycinc 四环素 提卡西林 提卡西林 / 克拉维酸 0.5/2 2/2 16/2 64/2 16/2 64/2 替加环素 替硝唑 替唑尼特 万古霉素

13 表 4 真菌药敏试验质控范围 美国临床实验室标准化协会 (CLSI) 质控范围 欧洲抗菌药物敏感性试验委员会 (EUCAST) 质控范围 近平滑抗生素种念珠菌类 (ATCC2 2019) 克柔念珠菌 (ATCC62 58) 白色念珠菌 近平滑念珠菌 热带念珠菌 (ATCC90 (ATCC9001 (ATCC ) 8) ) 克柔念珠 菌 (ATCC625 8) 白色念珠菌 (CNM-CL F8555) 近平滑念珠菌 (ATCC2201 9) 克柔假丝酵母 (CNM-CL-3 403) 烟曲霉黄曲霉菌 (ATCC204 (ATCC20 305) 4305) 两性霉素 B 氟康唑 伊曲康唑 酮康唑 氟胞嘧啶 月 16 日 阿尼芬净 卡泊芬净 米卡芬净 泊沙康唑 伏立康唑 艾沙康唑 重复性 用同一批号的药敏条对同一质控菌株进行抑菌能力试验, 重复检测 10 条, 所测 MIC 值最大值和最小值的比值应不超过表 1~4 所规定的质控范围最大值与最小值的比值 4.5 批间差用 3 个不同批号的药敏条对同一质控菌株进行抑菌能力试验, 每个批号重复检测 10 条, 所测 MIC 值最大值和最小值的比值应不超过表 1~4 规定的质控范围最大值与最小值的比值要求 4.6 稳定性生产企业应规定产品的有效期 取到效期的试剂盒, 检测最低抑菌浓度 重复性, 结果应符合 的要求 11

14 5. 检验方法 5.1 外观目测检查, 应符合 4.1 的要求 5.2 药敏条尺寸用通用量具测量, 结果应符合 4.2 的要求 5.3 最低抑菌浓度 菌悬液制备参照附录 A 制备 4.3 中所用的质控菌株的菌悬液 最低抑菌浓度将 制备的菌悬液涂布于药敏用琼脂平板中, 按照制造商说明书规定的条件进行培养及判读, 结果应符合 4.3 的要求 5.4 重复性用同一批号的药敏条, 对同一质控菌株按照 的方法进行抑菌能力试验, 重复检测 10 条, 结果应符合 4.4 的要求 5.5 批间差用 3 个不同批号的药敏条, 对同一质控菌株分别按照 的方法进行抑菌能力试验, 每个批号重复检测 10 条, 结果应符合 4.5 的要求 5.6 稳定性取有效期末的试剂盒按照 和 5.4 的方法进行检测, 结果应符合 4.6 的要求 6 标签和使用说明书 应符合 GB/T 的规定 7. 包装 运输 储存 7.1 包装包装储运图示标志应符合 GB/T 191 的规定 包装容器应保证密封性良好, 完整, 无泄露, 无破损 7.2 运输应按制造商的要求运输 7.3 储存应在制造商规定条件下储存 12

15 13

16 附录 A ( 资料性附录 ) 推荐菌悬液配制 培养基 接种及孵育指南 表 A.1 规定了推荐的菌悬液配制 培养基 接种及孵育方法 表 A.1 推荐菌悬液配制 培养基 接种及孵育指南 接种 微生物 培养基 悬浮介质 麦氏浊度 孵育条件 需氧菌 MH 培养基 0.85% NaCl 0.5( 粘液型则为 1) (35±2),16~20h 厌氧菌 布鲁氏血琼脂 MH 肉汤培养基 1 (35±2),80~85%N2,5~ 10%CO2,10%H2,24~72h 流感嗜血杆菌 HTM MH 肉汤或 HTM 肉汤培 0.5( 粘液型则养基为 1) (35±2),5% CO2,20~24h 肺炎链球菌 ( 包括 β 溶 血链球菌组及变异链球 0.5( 粘液型则 MH 培养基 +5% 羊血 MH 肉汤培养基菌 血链球菌 猪链球为 1) (35±2),5% CO2,20~24h 菌等 ) 真菌 苛养菌药敏琼脂平板 ( 用于真菌 ) 0.85% NaCl 0.5 (35±2),24h 注 : 所制备的菌液麦氏浊度和培养时间可能因微生物种属间的差异而有所区别, 请结合最新参考文献进行菌液浓度 和培养时间的调整 14

17 参考文献 [1] YY/T 抗菌剂药敏纸片. [2] CLSI M11: Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria, 8th Edition. [3] CLSI M24:Susceptibility Testing of Mycobacteria, Nocardiae, and Other Aerobic Actinomycetes, 2nd Edition. [4] CLSI M38:Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Filamentous Fungi, 3rd Edition. [5] CLSI M45:Methods for Antimicrobial Dilution and Disk Susceptibility Testing of Infrequently Isolated or Fastidious Bacteria, 3rd Edition. [6] CLSI M60:Performance Standards for Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts, 1st Edition. [7] CLSI M61:Performance Standards for Antifungal Susceptibility Testing of Filamentous Fungi, 1st Edition [8] CLSI M07-A11:Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically, 11th Edition. [9] National committee for clinical laboratory standards. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests of anaerobic bacteria.approved Standard.7th ed[s]. NCCLS document M11-A7, [10] CLSI M27-A4:Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts; Fourth Edition. [11] CLSI M100-S27: Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twenty-Seventh Informational Supplement. [12] European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. [13] Method for the determination of broth dilution minimum inhibitory concentrations of antifungal agents for yeasts. 15

目录 一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果 二 按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流 骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5

目录 一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果 二 按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流 骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5 2014 年安医大一附院病原菌分布及药物敏感性分析 编者 : 沈继录 编审 : 王中新徐元宏 1 目录 一 2014 年全院 5533 株细菌分布及前 10 位主要细菌耐药性结果 二 按照标本类型 ( 或感染部位 ) 进行的病原菌构成及药敏分析 1 呼吸道标本病原菌构成及药敏分析 2 尿液标本病原菌构成及药敏分析 3 血流 骨髓标本病原菌构成及药敏分析 4 皮肤软组织标本病原菌构成及药敏分析 5 伤口引流液标本病原菌构成及药敏分析

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