614 JOURNAL OF SOOCHOW UNIVERSITY MEDICAL SCIENCE EDITION PVA 3% antigen presentation cells APCs r /min 5 min 400W 1 s / 1 s W 1 /O /
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- 段 颜
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1 PLGA OVA PLGA ζ BCA OVA FITC OVA RAW MTT OVA-PLGA ζ P < OVA 7. 2% ~ 8. 4% FITC-OVA- PLGA RAW P > FITC-OVA-PLGA P < R A Effects of Mannose Modified Chitosan on the Macrophage Uptake of Nanoparticles ZHOU LinZHU LiCHEN LiCAO Qing-riCUI Jing-Hao Dept of PharmaceuticsSchool of Pharmaceutical ScienceMedical CollegeSoochow UniversityJiangsu Suzhou China Abstract Objective To prepare and evaluate mannose modified chitosan Man-CS coated poly lactic-co-glycolic acid PLGA nanoparticles NPs observe its cytotocity and effects on the uptake of macrophages. Method Ovalbumin OVA loaded PLGA NPs were prepared by double emulsion method and coated with CS or Man-CS. The size and zeta potentional of NPs were detected by a laser particle size analyzerbca method was used to measure OVA concentration and calculate the drug loading and release rate. The cytotocixty and phagocytosis of FITC-OVA loaded NPs were investigated by MTT method and fluorescence microscope after incubating with macrophage cells RAW Results Both of the particle sizes and zeta potentionals of the OVA-PLGA nanoparticles increased with increasing the concentration of CSand the loading amount of OVA was in the range of 7. 2% ~ 8. 4%. No significant cytotoxicity was observed after incubating CS or Man-CS coating FITC-OVA-PLGA nanoparticles with RAW P > but noticeable phagocytosis effects were obtained P < Conclusions The model antigen loaded cationic nanoparticles modified with mannose-chitosan are prepared and it will provide evidences for the rsearch of antigen presentation cell targeting delivery systems. Key words mannose receptor chitosan poly lactic-co-glycolic acid macrophage
2 614 JOURNAL OF SOOCHOW UNIVERSITY MEDICAL SCIENCE EDITION PVA 3% antigen presentation cells APCs r /min 5 min 400W 1 s / 1 s W 1 /O / 1-3 APCs W 2 PVA 20 ml 0. 5% r /min 10 min r /min 20 min 3-70 PLGA C- CS Man-CS - CS Man-CS PVA % 3 Yeeprae 7 O /W Zhou ζ DNA ζ ovalbumin OVA poly lactic-coglycolic acid PLGA 2% mg 1 ml 5% /0. 1 mol /L 1 NaOH 25 4 h r / min 10 min BCA OVA 1. 1 loading amount LA FITC -OVA entrapment efficiency EE Man-CS - LA = 100% PLGA CS ~ EE = 100% BCA BR mg 1. 5 ml EP 1 ml DMEM % PBS ph = Gibco 0. 5 ml BR r /min 15 min BCA Hepes DAPI RAW Man-CS-OVA-PLGA 37 RAW Man-CS PLGA DMEM 7 ml r /min OVA-PLGA % DMEM μl 10 mg OVA PVA 100 U /ml 37 5% CO 2 3% PLGA 10 s 2 70% ~ 200W 1 s / 1 s W 1 /O 80% 0. 25%
3 / 96 FITC-OVA 20 FITC-OVA μg /ml FITC-OVA PLGA PLGA 1. 6 CS-PLGA x ± s SPSS PLGA Man-CS-PLGA P < μl 2 MTT 10 μl 4 h 100 μl SDS-HCl 2. 1 Man-CS OVA-PLGA 570 nm A PLGA /ml 2 ml P < PLGA PBS FITC-OVA FITC-OVA-PLGA CS-PLGA Man-CS-PLGA CS Man-CS PLGA ζ 1 1 ζ P < h PBS 3 OVA P > CS Man-CS CS % nm ζ mv % ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± * 305 ± ± ± ± 0. 6 * 1% Man-CS 2. 2 Man-CS OVA-PLGA CS PLGA PLGA Man-CS PLGA PLGA 1 PLGA CS-PLGA Man-CS-PLGA
4 616 JOURNAL OF SOOCHOW UNIVERSITY MEDICAL SCIENCE EDITION Man-CS OVA-PLGA OVA-PLGA OVA 1 h 30% 30 d 80% OVA-PLGA CS Man-CS OVA OVA P < OVA-PLGA * P < n = 6 / OVA PLGA Man-CS 2. 4 CS FITC-OVA-PLGA FITC-OVA FITC- 3 OVA-PLGA CS- PLGA CS-PLGA PLGA Man-CS-PLGA 8 hmtt OVA PLGA ~ 80 μg /ml FITC-OVA FITC-OVA-PLGA CS-PLGA Man-CS PLGA PLGA 80 μg /ml Man-CS-PLGA CS 90% OVA P > * P < n = Man-CS FITC-OVA-PLGA 4 4 FITC-OVA FITC-OVA-PLGA FITC-OVA-PLGA CS Man-CS FITC- 256 ± 30 ~ 305 ± 16 nm 7. 2 ± 1. 5 % ~ 8. 4 ± 0. 6 % A FITC-OVA B FITC-OVA-PLGA C CS-FITC-OVA-PLGA D Man-CS-FITC-OVA-PLGA 4 Man-CS 400
5 < CS-FITC-OVA-PLGA < Man-CS FITC-OVA-PLGA 6Jiang Hu-LinKang Mi-LanQuan Ji-Shan et al. The potential of mannosylated chitosan microspheres to target 10 CS macrophage mannose receptors in an adjuvant-delivery sys- FITC-OVA-PLGA tem for intranasal immunizationj. Biomaterials Alizadeh DZhang LYHwang JYet al. Tumor-associated macrophages are predominant carriers of cyclodextrinbased nanoparticles into gliomas J. Nanomedicine NanotechnologyBiologyand Medicine Jhunjhunwala SRaimondi GThomson AW et al. Delivery of rapamycin to dendritic cells using degradable microparticlesj. Journal of Controlled Release Soma CEDubernet CBarratt Get al. Investigation of the role of macrophages on the cytotoxicity of doxorubicin and doxorubicin-loaded nanoparticles on M5076 cells in MTT vitro J. Journal of Controlled Release % FITC-OVA 5Waeckerle-Men YGroettrup M. PLGA microspheres for improved antigen delivery to dendritic cells as cellular vac- FITC-OVA < FITC-OVA-PLGA cinesj. Advanced Drug Delivery Reviews Yeeprae WKawakami SYamashita Fet al. Effect of mannose density on mannose receptor-mediated cellular uptake of mannosylated O /W emulsions by macrophages J. Journal of Controlled Release Zhou XianfengLiu BinYu Xianghuiet al. Controlled release of PEI / DNA complexes from mannose-bearing chitosan microspheres as a potent delivery system to enhance immune response to HBV DNA vaccinej. Journal of Controlled Release McConnell ELBasit AWMurdan S. Colonic antigen administration induces significantly higher humoral levels of colonic and vaginal IgAand serum IgG compared to oral administration J. Vaccine J. 10Sharma GValenta DTAltman Yet al. Polymer particle shape independently influences binding and internalization by macrophagesj. Journal of Controlled Release 檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷檷 Ding JieCheng YanGao Shanet al. Effects of nerve growth factor and Noggin-modified bone marrow stromal cells on stroke in rats J. J Neurosci Res Marco FioreViviana TriacaTiziana Amendolaet al. Brain NGF and EGF administration improves passive a- voidance response and stimulates brain precursor cells in aged male micej. Physiology & Behavior Sarnowska ABraun HSauerzweig Set al. The neuroprotective effect of bone marrow stem cells is not dependent on direct cell contact with hypoxic injured tissue J. Exp Neurol Yang HaijieXia YinyanLu Songqinget al. Basic fibroblast growth factor-induced neuronal differentiation of mouse bone marrow stromal cells requires FGFR-1 MAPK /ERKand transcription factor AP-1J. J Biol Chem Rabizadeh SOh JZhong LTet al. Induction of apoptosis by the low-affinity NGF receptor J. Science
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