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3 High Efficiency Particulate Air Filter HEPA
4 CO 2
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7 74 30 min 2 min
8 CO CO 2 CO h) 3000
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13 CO rpm Zeiss
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21 70
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26 NaOH min 7
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28 160~180 2 h min Zeiss 75 1
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31 BSS ph EDTA
32 a b c
33 TC199 MEM RPMI-1640 DMEM
34
35 5 10
36
37 Eagle Eagle Eagle s minimum essential medium MEM BEM Basal Eagle Medium DMEM Dulbecco MEM DMEM 4500 mg/l 1000 mg/l
38 RPMI 1640
39 Ham Ham F7 F10 Ham F12
40 NaHCO U/ml 100U/ml ph 7.0~7.2 PH m+0.45 m 4 10%
41 Serum free medium, SFM DNA
42
43 SFM
44 1975 Sato 20
45
46 56 30
47 1. 2. A ~0.5%
48 g/l 100
49 RPMI g 100 / 1000 ml, ph
50 1 2 3 RPMI
51
52
53
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55
56
57
58
59 0.2% min min 75%
60 30 min 75
61
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63
64
65
66
67 3T3-L1 3T3-L1
68 MG-63 MG-63
69 rpm/min
70 ml min /10 1/
71 Coulter
72
73
74 /ml 4 / %
75 Preparation of microscope/hemocytometer for cell counting. Position cover slip so that glass covers both counting areas equally (See figure below). Filling the hemocytometer chamber (Left).
76
77 Coulter = 4 x 10 4 x 4 = /ml
78 Growth of yeast at ph=7 (Number of cells count/ml vs.time) Number of cells count/ml 1.00E E E E+08 Control 1.00E Time (hr)
79
80 ml ml 0.4% 2 3 min 3 4
81 % = / x 100%
82 2 MTT MTT MTT formazan) DMSO formazan OD MTT
83 MTT / CO MTT 50 / 3 3 DMSO 150 / 10 4 OD 570 nm
84
85
86
87 /min /min
88 DMSO
89 1. 20% 10% DMSO DMSO 2., /ml) 3. 1 ml
90 /min /min > > ( )--->
91 min 2. 5 min rpm 4 min 4.
92
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97 µm µm
98 Chlamydia pneumoniae associated with macrophages (RAW cells). A. Typical pear shaped elementary bodies (EBs) (arrows) are shown at the macrophage surface. B. Intracellular EBs.
99 PCR Hayflick
100 Hayflick 3 5 ( M. hyorhinis)
101 bisbenzimide, Hoechst DNA Adenosine-Thymidine (A-T) rich DNA A-T 55 80%
102 PCR 16s 23s PCR
103 :
104
105 G+ 100 IU/ml G- 100 µg/ml G+, G- 200 µg/ml G+, G- 10 µg/ml G+, G- 50 µg/ml 2 µg/ml 25 µg/ml
106 PCR
去 中 和 ; [3] 消 化 最 好 在 37 培 养 箱 或 室 温 25 以 上 的 环 境 下 进 行 消 化, 消 化 2--5 min 后, 把 培 养 瓶 放 在 显 微 镜 下 观 察, 发 现 胞 质 回 缩 细 胞 间 隙 增 大, 细 胞 变 圆 后, 立 即 将 培 养 瓶
第 一 节 细 胞 培 养 的 相 关 技 术 1 细 胞 的 复 苏 概 述 复 苏 细 胞 要 求 快 速 融 化 的 手 段, 这 样 可 以 保 证 细 胞 外 结 晶 在 很 短 的 时 间 内 即 融 化 避 免 由 于 缓 慢 融 化 使 水 分 渗 入 细 胞 内 形 成 胞 内 再 结 晶 对 细 胞 造 成 损 害 用 品 培 养 液 吸 管 离 心 管 培 养 瓶 步 骤 [1]
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1 (1) (2) ( ) (3) (4) (5) (1) (2) (3) 2 (1) ( ) (2) (3) (4) 1 2 1 3 4 5 1 1-20 4 2, 260mOsm/kg 320 mosm/kg HEPES ph 7.2-7.4 ph ph (7.4-7.7), ph (7.0-7.4) NaHCO 3 CO 2 CO 2 CO 2 5 2 NaHCO 3 1.97g/L CO 2
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细 胞 培 养 技 术 常 见 问 题 解 答 一 细 胞 培 养 基 础 问 答 1.BHK 细 胞 就 是 指 BHK21 吗? 答 :BHK 细 胞 是 指 幼 年 叙 利 亚 地 鼠 肾 细 胞 (Baby Hamster Syrian Kidney),1961 年 建 株 原 始 的 细 胞 株 是 成 纤 维 细 胞, 贴 壁 依 赖 性 1963 年 获 得 单 细 胞 克 隆 细 胞
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检 验 过 程 临 床 PCR 检 验 标 本 的 处 理 保 存 及 核 酸 提 取 方 法 医 师 申 请 检 验 项 目 申 请 患 者 准 备 患 者 识 别 样 本 采 集 样 本 运 送 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 分 析 测 定 样 本 处 理 分 析 前 分 析 中 分 析 后 报 告 临 床 应 用 烟 台 市 烟 台 山 医 院 赵 善 娜 结 合 临 床 资 料 分 析 结 果 并 确 认 出
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