1858 临床与病理杂志, 2015, 35(10) 鲍曼不动杆菌 (Acinetobacter baumannii,ab) 是 革兰阴性杆菌中最常见的条件致病菌之一, 其广泛 分布于自然界的土壤及水, 医院环境如医护人员的 手 患者用具 呼吸设备 消毒液 透

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1 临床与病理杂志 J Clin Pathol Res 2015, 35(10) doi: /j.issn View this article at: 鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因研究进展 丁梦珊 1 1, 李朋朋 1, 综述马萍 2, 姜飞 2 1, 2, 顾兵 审校 (1. 徐州医学院医学技术学院, 江苏徐州 ;2. 徐州医学院附属医院检验科, 江苏徐州 ) [ 摘要 ] 鲍曼不动杆菌是革兰阴性杆菌中最常见的条件致病菌之一, 近年来对碳青霉烯类抗菌药耐药性逐渐增强, 导致较高的发病率和病死率 其耐药机制较为复杂, 产碳青霉烯酶是其对碳青霉烯类抗菌药耐药的主要机制 本文主要从三个方面进行阐述 : 第一, 鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药性 ; 第二,A 类 B 类和 D 类碳青霉烯酶及其基因的进展 ; 第三, 耐药质粒 转座子 整合子和插入序列介导的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的传播形式 [ 关键词 ] 鲍曼不动杆菌 ; 耐药性 ; 碳青霉烯酶基因 ; 传播形式 The advance of carbapenem genes in Acinetobacter baumannii DING Mengshan 1, LI Pengpeng 1, MA Ping 1,2, JIANG Fei 2, GU Bing 1,2 (1. Medical Technology Institute of Xuzhou Medical College, Xuzhou Jiangsu ; 2. Department of Laboratory Medicine, Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou Jiangsu , China) Abstract Keywords Acinetobacter baumannii (Ab) is one of the most common opportunistic pathogens in gram-negative bacteria, while carbapenem antimicrobial resistance is gradually increasing in recent years. Morbidity and mortality associated with A. baumannii Infection are increasing. Its resistance mechanism is more complex, and making carbapenemases is the main resistance mechanism of A. baumannii to carbapenem. This article elaborates mainly from the following three aspects: firstly, the antimicrobial resistance of A. baumannii to imipenem and meropenem; secondly, the progress of class A, Class B and class D carbapenemases and their genes; thirdly, the transmission of carbapenem-resisitant A. baumannii mediated between resistance plasmid, transposonmediated,integronand insertion sequence. Acinetobacter baumannii (Ab); resistance; carbapenemase gene; transmission 收稿日期 (Date of reception): 通信作者 (Corresponding author): 顾兵, gb @163.com; 姜飞, jiangf0319@126.com 基金项目 (Foundation item): 国家自然科学基金 ( ); 江苏省高等学校大学生创新创业训练计划重点项目 ( Z) This work was supported by National Natural Science Foundation ( ) and Training Program of Innovation and Entrepreneurship for Undergraduates of Jiangsu Province ( Z), P. R. China.

2 1858 临床与病理杂志, 2015, 35(10) 鲍曼不动杆菌 (Acinetobacter baumannii,ab) 是 革兰阴性杆菌中最常见的条件致病菌之一, 其广泛 分布于自然界的土壤及水, 医院环境如医护人员的 手 患者用具 呼吸设备 消毒液 透析机 水龙 头等部位 [1], 侵袭人体的皮肤 血液 胸腔积液 呼吸道 消化道和泌尿生殖道, 引起医院获得性和 呼吸机相关肺炎 菌血症 尿路感染 手术部位的 感染, 导致较高的发病率和病死率 [2-4] 近年来, 在抗菌药物的选择压力等综合作用下, 鲍曼不动杆 菌耐药情况日益严峻, 更凭借其严重的多重耐药 泛耐药和全耐药受到各界广泛关注 [5-6] 本文就鲍 曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药的耐药性 相关耐 药基因及其传播形式作一综述 1 鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性 碳青霉烯类抗生素曾被认为是临床治疗鲍曼 不动杆菌感染最有效的抗菌药物之一, 但近年来 由于碳青霉烯类药物的大量使用, 碳青霉烯类耐 药鲍曼不动杆菌 (carbapenem resisitance Acinetobacter [7] baumannii, CRAB) 的比例逐渐增加 研究指出 CRAB 对阿米卡星 庆大霉素等 12 种抗生素的耐 药率均高于碳青霉烯类敏感革兰阴性杆菌的耐药 率, 此外, 它还产生多种碳青霉烯酶, 并有产酶 克隆株的流行 2013 年 SENTRY 抗菌药物监测项目数据显 示 : 欧洲鲍曼不动杆菌对亚胺培南的 MIC 值为 0.12~0.25 mg/l, 对美罗培南的 MIC 值为 0.25 mg/l, [8] 而意大利南部的一家医院分离的 2011 年和 2012 年 的鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药的耐药率均 为 100%, 形势十分严峻 [9-15] 中国 CHINET 细菌耐药性监测显示医院内 感染鲍曼不动杆菌 2007 年到 2013 年期间对亚胺培 南的耐药率分别为 37.6% 48.1% 54.8% 62.1% 65.2% 63.5% 62.8%, 而对美罗培南的耐药率 分别为 42.7% 49.3% 57.2% 63.6% 66.2% 68.2% 59.4% 从图 1 可知,2007 至 2010 年期间耐 药率上升较快,2010 至 2013 年期间耐药率虽然波 动不是很大, 但是居高不下 耐药率 (%) 亚胺培南 美罗培南 年份 图 1 中国 CHINET 监测显示鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率 Figure 1 Chinse CHINET surveillance shows that resistant rate of A. baumannii to imipenem and meropenem 2 CRAB 的耐药机制鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制主要有以下几个方面 : 碳青霉烯酶生成 ;PBPs 改变 ; 外膜蛋白缺失 ; 主动外排机制参与 其中产碳青霉烯酶是 CRAB 耐药的主要机制, 因此, 了解碳青霉烯酶及其基因表达的相关机制十分必要 碳青霉烯酶是指能够明显水解至少亚胺培南或美罗培南的一类 β- 内酰胺酶 依据 Ambler 分子分 类可将其分为三类 :A 类 B 类和 D 类 在鲍曼不动杆菌中, 水解碳青霉烯类抗生素的酶主要为 B 类酶和 D 类酶 2.1 A 类碳青霉烯酶 A 类碳青霉烯酶为丝氨酸蛋白酶, 很少见, 主要见于肠杆菌科细菌中 其利用活性位点丝氨酸残基灭活 β- 内酰胺酶, 可被克拉维酸和他唑巴坦抑制, 但对 EDTA 不敏感 [16-17] 其对亚胺培南的水解活性强于美罗培南

3 鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因研究进展丁梦珊, 等 1859 到目前为止, 世界各地已经发现多种不同类 型的 A 类碳青霉烯酶, 包括 GES KPC SME IMI NMC-A 和 SPC 型, 他们之间的氨基酸序列同 源性为 32.0~70.0% 编码基因位于染色体或质粒 上 另外,A 类碳青霉烯酶也包括一些非典型的超 广谱 β- 内酰胺酶 (ESBLs), 如 PER VEB SHV TEM 和 CTX-M 基因型 迄今为止, 已在鲍曼不动杆菌中发现多种类 型的 A 类酶, 如 GES KPC SHV TEM PER VEB 和 CTX-M 等 [18] 由于鲍曼不动杆菌中 KPC GES PER TEM VEB 和 CTX-M 等酶的出现, 其 编码基因大多数位于可转移质粒上, 使该酶介导的 耐药性在不同细菌间 不同地区和不同国家间发生 水平性转移传播, 引起程度不一的爆发流行 黑龙 江地区 2013 年至 2014 年 319 株 CRAB 的临床分离株 中,286 株改良 Hodge 试验阳性即产碳青霉烯酶, 其中 187 株 CRAB 产丝氨酸类碳青霉烯酶, 检出率 可达 58.6% [19] KPC 是目前最常见酶中水解功能最 强的酶 [20] 2013 年安徽地区淮北医院 34 株 CRAB 中 13 株 (38.2%) 产 KPC-2 型碳青霉烯酶 [21] 2.2 B 类碳青霉烯酶 B 类碳青霉烯酶为金属 β- 内酰胺酶 (metallo-betalactamase,mbl), 含有 1 或 2 个金属离子, 通常为 Zn 2+, 参与催化作用 其可被金属螯合剂依地酸和 巯基类化合物抑制, 不能被克拉维酸 他唑巴坦 和舒巴坦抑制, 多数 MBLs 对亚胺培南的水解活性 强于美罗培南 目前已有超过 19 种 MBLs 在不动杆菌中检测 到, 其中大部分为鲍曼不动杆菌, 鲍曼不动杆菌 杆菌中已被鉴别出来的获得性 MBLs 有 IMP VIM 和 SIM-1 型酶以及 NDM [2] 尽管在鲍曼不动杆菌 中 MBLs 的分离率没有 OXA 型碳青霉烯酶高, 但 其对碳青霉烯类抗菌药物的水解活性, 是后者的 10~1 000 倍 [22] IMP 和 VIM 型酶组特别是在鲍曼 不动杆菌中变得越来越普遍, 尤其是在远东地 区, 南美洲和希腊 [23-24] 然而, 鲍曼不动杆菌中 的 MBLs 通常低水平表达, 很难检测到 [25] 华西医 院 2009 年 49 株 CRAB 中, 有 30 株菌 (61.2%)MBLs 表 型阳性,6 株 (20.0%) 携带 blaimp,4 株 (13.3%) 携 带 blavim [26] 广东地区 2013 至 2014 年 30 株 CRAB 中 5 株 (16.7%)MBLs 表型阳性 [27] 其中 NDM 是近 年来发现的水解功能最强的酶 阿尔及利亚地区 blandm-1 在 CRAB 中检出率为 10.6% [28] 2.3 D 类碳青霉烯酶 D 类碳青霉烯酶为苯唑西林酶 (oxacillin enzyme,oxa), 得名于其对苯唑西林的水解活性 强 其具有活性丝氨酸位点, 能水解碳青霉烯, 可被舒巴坦抑制, 但不能被克拉维酸抑制 到目前为止, 已发现 200 多种 OXA 酶衍生物, 在 鲍曼不动杆菌菌株中已经发现的 D 类碳青霉烯酶可 分为 6 个家族 :OXA-23 族 OXA-40 族 OXA-51 族 0XA-58 族 OXA-143 族和 OXA-235 族 其中,OXA-23 族 是目前检出率最高, 研究最多的 D 类碳青霉烯酶, 而 OXA-235 族是一种新型子类 OXA 型酶 OXA-23 族 第一例 OXA 型碳青霉烯酶是于 1958 在英国鲍曼 不动杆菌中被发现的, 最初命名为 ARI-1, 后改名 为 OXA-23 [29] 随后,OXA-27 OXA-49 OXA-73 OXA-102 OXA-103 OXA-105 OXA-133 OXA-134 OXA-146 OXA-165~171 OXA-422 OXA-423 依次被发现, 这些酶共同构成了 OXA-23 族 它们之间的区别在于 2~5 个氨基酸的改变, 具有 99.0% 的氨基酸同源性 blaoxa-23 族已经在多种不 同的不动杆菌 奇异变形杆菌和肺炎克雷伯菌检 测出 [30] 有研究已经提出了将 blaoxa-23 blaoxa-102 blaoxa-103 blaoxa-105 blaoxa-133 和 blaoxa-134 这些基因所在染色体位点作为部分特 定物种的标志 其次, 可以通过基因在染色体和 质粒上的位点来帮助确认鲍曼不动杆菌是否属于当 地 [31], 从而有效监测鲍曼不动杆菌中的传播范围 [32] Higgins 等发现携带 blaoxa-23 族的菌株呈全 球性分布并以克隆形式传播 越来越多的研究发 现, 来自东南亚和南美洲的鲍曼不动杆菌多携带 [33] blaoxa-23 族 哥伦比亚的一次大规模调查发现 33.6% 鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类药物, 且 98.5% 的 耐药菌株携带 blaoxa-23 族 中国的 CRAB 主要以产 OXA-23 族为主, 且以 [34] 寡克隆形式在国内流行 研究发现,97.7% 耐药 鲍曼不动杆菌携带 blaoxa-23, 且由染色体编码的 blaoxa-23 族上游都存在 ISAbal, 仅浙江杭州医院 [35] 发现极少菌株携带 blaoxa-58 族 Lee 等指出台 湾地区的 CRAB 也同样是以产 blaoxa-23 族为主 为了更直观地了解 OXA-23 族的现状, 制作了中国 和世界各地区 OXA-23 族基因的检出率分布地图, 如图 2-3 所示 部分地区没有这方面的研究, 数据 有空缺, 还有待于进一步研究

4 1860 临床与病理杂志, 2015, 35(10) 图 2 中国各地区 CRAB 中 OXA-23 基因的检出率 Figure 2 The detection rate of OXA-23 gene in CRAB among some regions of China 图 3 世界各地区 CRAB 中 OXA-23 基因的检出率 Figure3 The detection rate of OXA-23 gene in CRAB among some regions of world OXA-40 族 OXA-40 是于 1997 年在西班牙医院爆发性感染的鲍曼不动杆菌中检测出的 [36], 最初被命名为 OXA-24, 现更名为 OXA-40 随后, 与 OXA-40 的氨基酸同源性超过 99.0% 的 5 种酶被检测出 :OXA-25 OXA-26 OXA-72 OXA-139 OXA-160 这 6 种 酶共同组成了 OXA-40 族, 基因位于染色体或质 粒上 [36-37] OXA-40 OXA-25 和 OXA-26 的动力学研究 发现, 这些酶对碳青霉烯类, 部分头孢菌素类呈弱 酸性, 并且能水解青霉素 OXA-40 族活性虽然不 高, 但是其常表现出对碳青霉烯类药物的高耐药

5 鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因研究进展丁梦珊, 等 1861 [38] 性 由 Heritier 等证实 OXA-40 族可导致菌株对碳青 霉烯类 头孢菌素和青霉素的高耐药性 2007 年, 鲍曼不动杆菌中 OXA-40 族碳青霉烯酶的结晶结构 发表, 指出了一些酶的结构特点可能是导致酶底 物特异性的原因 [39] OXA-51 族 OXA-51 是于 1996 年在阿根廷发现的碳青霉 烯酶 blaoxa-51 族是鲍曼不动杆菌唯一天然携带 的基因, 编码 OXA-51 OXA-64 OXA-65 OXA- 66 OXA-68 OXA-69 OXA-70 OXA-71 OXA- 78 OXA-79 OXA-80 以及 OXA-82 型, 基因位于染 色体上, 也可位于质粒上 尽管这类酶对碳青霉烯 类水解活性较弱, 然而当该基因上游存在插入序列 ISAbal 时, 可明显增强 OXA-51 族基因表达水平, 导 致对碳青霉烯类耐药 [40] [41] 研究显示, 在缺乏该插 入序列时, 即使有多重药物外排泵 (AdeABC) 的过 表达, 其对碳青霉烯类的敏感性仍影响很小 由于其他 4 个家族编码的基因可以从其他来源 获取, 而由 OXA-51 族所编码的基因被认为是鲍曼 不动杆菌的固有基因, 因此可将 blaoxa-51 族作为 临床上快速鉴定鲍曼不动杆菌的一个分子生物学 诊断指标 [42] OXA-58 族 2003 年法国一家医院的多重耐药鲍曼不动 杆菌中检测到 OXA-58, 与 OXA-96 OXA-97 OXA-164 OXA-420 共同组成 OXA-58 族 OXA- 58 族对亚胺培南的水解效率是 OXA-40 族的两倍 blaoxa-58 族可位于染色体和质粒上, 通常为质粒 介导 [43],OXA-58 族单独存在不足以赋予碳青霉烯 类耐药性和达到临床耐药水平的一套机制 携带 blaoxa-58 族的 CRAB 经常在欧洲被报 道, 在法国 英国 阿根廷 西班牙 土耳其 罗 马尼亚 澳大利亚 雅典 苏格兰和科威特都有分 布 [43], 同时于全球各地同样也有报道 [32,34,44-47] OXA-143 族 OXA-143 是在巴西分离菌株的质粒上发现 的, 与 OXA-40 族的氨基酸同源性可达 88% [48] blaoxa-143 与任何的插入序列或基因盒无关, 并 被确认为已被动员的同源重组 该酶对青霉素类 和碳青霉烯类抗生素的水解能力处于低水平, 未 检测到除头孢噻吩之外的头孢菌素水解现象 质 粒上携带 blaoxa-143 导致对亚胺培南和美罗培南 高水平耐药 OXA-182 是在韩国的 12 个克隆菌株中 分离鉴定出来的 [49], 与 OXA-143 的氨基酸同源性可 达 93.0% OXA-235 族 OXA-235 族是一种新型的子类 OXA 型 D 类碳青 霉烯酶, 是从美国和墨西哥分离的鲍曼不动杆菌 中检测出来的, 由 OXA-235 OXA-236 OXA-237 这 3 种酶组成 所编码的基因位于质粒上, 其表达 可降低碳青霉烯类抗生素的敏感性 OXA-235 族 与 OXA-23 族 OXA-40 族 OXA-58 族 OXA-143 族 的氨基酸同源性可达 54.0~57.0%, 与 OXA-51 族氨 [50] 基酸同源性可达 56.0% 研究表明 blaoxa-235 blaoxa-236 blaoxa-237 在两个插入序列 ISAbal 之间 这些基因的存在可能是一种转介机制导致 的, 这突出了鲍曼不动杆菌获得碳青霉烯类耐药 决定因素的倾向 OXA 型检出率 由于耐药性 耐药机制和传播途径之间的不 [19,51-58] 同, 各型 OXA 酶检出率体现地区间差异性 ( 见表 1) 表 1 部分地区 CRAB 中 OXA 型碳青霉烯酶的检出率 Table1 The detection rate of OXA-type carbapenemases in CRAB in some areas 地区 年份 OXA-23 族 /% OXA-40 族 /% OXA-51 族 /% OXA-58 族 /% OXA-143 族 /% 黑龙江 2013~ ND 江苏 2012~ ND 95.8 ND ND 上海 ND ND ND 北京 ND ND ND 安徽 ND 海南 2012~ ND 台湾 ND 巴西 2006~ 伊朗 2010~ ND ND 表示未进行检测

6 1862 临床与病理杂志, 2015, 35(10) 3 碳青霉烯类耐药基因的传播方式 鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制 极其复杂, 因为导致其耐药的因素并非单一的, 在可移动基因原件如耐药质粒 转座子 整合 子 插入序列的综合作用下, 使得耐药基因大范 围的传播 [42] 3.1 耐药质粒 携带耐药基因的质粒称为耐药性质粒, 耐药 质粒可通过细菌之间的接合 转化等方式进行传 递, 故称传递性耐药质粒 (R 质粒 ) 抗生素的不合 理使用促使携带 R 质粒菌株的出现及迅速播散 R 质粒所携带耐药决定簇的水平传播, 可使其菌株 在不利环境下得以生存 耐药质粒自身可携带耐 药基因, 同时质粒也可作为转座子及整合子的载 体, 故而导致大量耐药菌株的出现 3.2 转座子 转座子是存在于染色体 DNA 上可自主复制和 位移的基本单位, 是基因组中一段特异的具有转 位特性的独立 DNA 序列, 是一类可在细菌的染色 体 质粒或噬菌体之间自行移动的遗传单位, 从 而造成其耐药的多样性 同时, 转座子不受菌株 之间亲缘关系的影响而可自行插入 因此, 转座 子可导致细菌耐药性的多样化, 并且易于传递散 播 [59] [60-61] 有文献报道,OXA-23 族传播的主要结 构是转座子 Tn2006 Tn2007 和 Tn2008 Tn2006 由一 个 blaoxa-23 族 一个 blaatpase 和两端的插入序列 ISAbal 组成, 两个 ISAbal 方向相反 [62] ;Tn2008 的结 构与 Tn2006 相似, 但下游少一个 ISAbal;Tn2007 是 由一个 blaoxa-23 族 一个 blaatpase 和上游的插入 序列 ISAbal 组成 [63] 台湾地区 blaoxa-23 族的传播是 与转座子 Tn2006 Tn2007 和 Tn2008 密切相关的, 而 Tn2008 也一直被认为是近年来国内 blaoxa-23 族在 鲍曼不动杆菌间传播的主要载体 [35] 上, 从而导致基因盒的移动 [64] 同时由于基因盒 的移动, 使得耐药性在菌株间互相传播, 导致多重 耐药基因在菌株甚至不同菌种之间进行传播 [65] 目前, 在鲍曼不动杆菌中,1 类整合子最为常见, 2 类整合子少见 3.4 插入序列 ISAbal 插入序列 ISAba1 最初描述于鲍曼不动杆菌 ADC 酶中 [66], 位于乙酰辅酶还原酶编码的 phab AC 基因上游和鲍曼不动杆菌中 blaoxa 基因的上游 基因上游插入序列 ISAba1 的表达水平明显高于基 因下游插入序列 ISAba1 的表达水平 blaoxa-23 族基因上游插入的 ISAba1 增强了 OXA-23 族的表 达水平 最近已表明 [63], blaoxa-23 族基因表达 的启动子是由插入的 ISAbal 提供的 另外它还增 强 blaoxa-40 族 blaoxa-51 族 blaoxa-58 族和 blaoxa-66 的基因表达水平 插入序列 ISAba1 携带 blaoxa 在全球移动播散, 并增强其耐药性表达, 耐药基因的水平转移是我们对抗耐药细菌感染所 面临的严峻挑战 [67] 3.5 克隆传播 鲍曼不动杆菌具有在体外长期存活能力, 易 造成克隆播散 [68] 参考全球谱系的流行病学谱系 WW1-WW8 已经被提出, 其中欧洲克隆 Ⅰ 欧洲 克隆 Ⅱ 欧洲克隆 Ⅲ 分别对应的是 WW1 WW2 WW3, 均不同程度地携带碳青霉烯类耐药基因 在英国有一个持续的感控问题, 涉及鲍氏不动杆 菌几个克隆系的循环, 称为东南克隆 (SE 克隆 ), OXA-23 克隆 Ⅰ 和 OXA-23 克隆 Ⅱ [69] 鲍曼不动杆菌 的克隆系在全球范围内传播机制尚不清楚, 但至 少有一部分的答案可能在于相对高水平的多重耐 药性和这些系谱所具备的获得并维持阻力决定因 素的能力 [70] 4 小结 3.3 整合子整合子位于染色体 质粒或转座子上, 是细菌固有的一种遗传单位 每个整合子都是一个单独的可移动的遗传元件, 并通过捕获外源性基因来增强细菌生存的适应性 整合子携带着重组的基因盒插入到质粒或转座子中, 在不同的细菌中运动而传播耐药性 另外, 整合子能捕获和切除基因盒, 一个整合子可以捕获一个或多个基因盒, 且同一个基因盒可以整合到不同的整合子 鲍曼不动杆菌在可移动基因原件的基础上, 使碳青霉烯酶基因得以高水平表达及广泛传播, 导致 CRAB 的出现, 给临床治疗带来了很大困难 从图 2-3 可知, 编码 blaoxa-23 族鲍曼不动杆菌已呈世界性分布, 且高水平表达 而新型子类 OXA 型碳青霉烯酶 OXA-235 族的发现也预示着 CRAB 耐药机制日益复杂, 但是涉及此方面的研究还未全面开展, 导致 OXA-235 族的水解活性及其检出分布现状还未可知 抗生素耐药不但延长了患病期 加

7 鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因研究进展丁梦珊, 等 1863 大了死亡的危险, 还加大了卫生保健成本, 对于国家和家庭来说都是很重的经济负担 在分子生物学理论的基础上进行新型抑制剂和新工具的研发, 可以作为控制细菌耐药的发展新方向 新型抑制剂的研发目标是抑制耐药基因的表达, 使其低水平表达, 甚至不表达 而新工具和试剂的研发目标可以是进行耐药机制的人为调节, 诱导其向某个特定方向突变, 使其出现类似于人类的返祖现象, 降低其致病力 另外, 促进新疫苗 诊断制剂 感染治疗方法的研发也有助于控制抗生素耐药的蔓延 参考文献 1. Guenthner SH, Hendley JO, Wenzel RP. Gram-negative bacilli as nontransient flora on the hands of hospital personnel[ J]. J Clin Microbiol, 1987, 25(3): Peleg AY, Seifert H, Paterson DL. Acinetobacter baumannii: emergence of a successful pathogen[ J]. Clin Microbiol Rev, 2008, 21(3): Dijkshoorn L, Nemec A, Seifert H. An increasing threat in hospitals: multidrug-resistant Acinetobacter baumannii[ J]. Nat Rev Microbiol, 2007, 5(12): Sunenshine RH, Wright MO, Maragakis LL, et al. Multidrug-resistant Acinetobacter infection mortality rate and length of hospitalization[ J]. Emerg Infect Dis, 2007, 13(1): 单斌, 马晓波, 涂亮, 等. 分析 9 年不动杆菌院内感染的耐药性变化及其与 Ⅰ 类整合子的相关性 [ J]. 实用检验医师杂志, 2011, 3(1): 5-8. SHAN Bin, MA Xiaobo, TU Liang, et al. Analysis of relevance of resistance change of nosocomial infection and its classⅠintegron in Acinetobacter baumannii[j]. Chinese Journal of thologist, 2011, 3(1): Adams MD, Chan ER, Molyneaux ND, et al. Genomewide analysis of divergence of antibiotic resistance determinants in closely related isolates of Acinetobacter baumannii[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2010, 54(9): 沈继录, 朱德妹, 吴卫红, 等. 革兰阴性杆菌碳青霉烯酶产生与细菌耐药性关系的研究 [ J]. 华检验医学杂志, 2008, 31(4): SHEN Jilu, ZHU Zhide, WU Weihong, et al. Research of relationship between production of carbapenemases and bacterial resistance of Gram-negative bacilli[ J]. Chinese Journal of Laboratory Medicine, 2008, 31(4): Esposito S, Gioia R, De Simone G, et al. Bacterial Epidemiology and Antimicrobial Resistance in the Surgery Wards of a Large Teaching Hospital in Southern Italy[ J]. Mediterr J Hematol Infect Dis, 2015, 7(1): e 史俊艳, 张小江, 徐春英, 等 年中国 CHINET 鲍曼不动杆菌耐药性监测 [ J]. 中国感染与化疗杂志, 2007, 9(3): SHI Junyan, ZHANG Xiaojiang, XU Chunying, et al. CHINET 2007 surveillance of antimicrobial resistance among A. baumannii isolates in China[ J]. Chin J Infect Chemother, 2007, 9(3): 汪复, 朱德妹, 胡付品, 等 年中国 CHINET 细菌耐药性监测 [ J]. 中国感染与化疗杂志, 2009, 9(5): WANG Fu, ZHU Demei, HU Fupin, et al. CHINET 2008 surveillance of bacterial resistance in China[ J]. Chin J Infect Chemother, 2009, 9(5): 张小江, 徐英春, 俞云松, 等 年中国 CHINET 鲍曼不动杆菌耐药性监测 [ J]. 中国感染与化疗杂志, 2010, 10(6): ZHANG Xiaojiang, XU Yingchun, YU Yunsong, et al. CHINET 2009 surveillance of antibiotic resistance in A. baumannii isolates in China[ J]. Chin J Infect Chemother, 2010, 10(6): 习慧明, 徐英春, 朱德妹, 等 年中国 CHINET 鲍曼不动杆菌耐药性监测 [ J]. 中国感染与化疗杂志, 2012, 12(2): XI Huiming, XU Yingchun, ZHU Demei, et al. CHINET 2010 surveillance of antibiotic resistance in Acinetobacter baumannii in China[ J]. Chin J Infect Chemother, 2012, 12(2): 张辉, 张小江, 徐英春, 等 年中国 CHINET 不动杆菌属细菌耐药性监测 [ J]. 中国感染与化疗杂志, 2013, 13(5): ZHANG Hui, ZHANG Xiaojiang, XU Chunying, et al. CHINET 2011 surveillance of antibiotic resistance in A. baumannif isolates in China[ J]. Chin J Infect Chemother, 2013, 13(5): 张辉, 张小江, 徐英春, 等 年中国 CHINET 不动杆菌属细菌耐药性监测 [ J]. 中国感染与化疗杂志, 2014, 14(5): ZHANG Hui, ZHANG Xiaojiang, XU Chunying, et al. CHINET 2012 surveillance of antibiotic resistance in Acinetobacter baumannii isolates in China[ J]. Chin J Infect Chemother, 2014, 14(5): 胡付品, 朱德妹, 汪复, 等 年中国 CHINET 细菌耐药性监测 [ J]. 中国感染与化疗杂志, 2014, 14(5): HU Fupin, ZHU Demei, WANG Fu, et al. CHINET 2013 surveillance of bacterial resistance in China[ J]. Chin J Infect Chemother, 2014, 14(5): 李金钟. A 类碳青霉烯酶的研究进展 [ J]. 中国热带医学, 2009, 9(5): LI Jinzhong. Advances of Class A carbapenemases[ J]. China Tropical Medicine, 2009, 9(5): Walther-Rasmussen J, Høiby N. Class A carbapenemases[ J]. J Antimicrob Chemother, 2007, 60(3): 刘赫, 多丽波. 鲍曼不动杆菌 A 类碳青霉烯酶的研究进展 [ J]. 中国抗生素杂志, 2015, 40(4): LIU He, DUO Libo. Advances of Class A carbapenemases in Acinetobacter baumannii[ J]. Chinese Journal of Antibiotics, 2015, 40(4):

8 1864 临床与病理杂志, 2015, 35(10) 邹桂玲, 张婉莹, 杜雪飞, 等. 黑龙江地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌表型检测及同源性分析 [ J]. 哈尔滨医科大学学报, 2015, 49(2): ZOU Guiling, ZHANG Wanying, DU Xuefei, et al. Phenotypic testing and homology analysis of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii in Heilongjiang region[ J]. Journal of Harbin Medical University, 2015, 49(2): Nordmann P, Naas T, Poirel L. Global spread of Carbapenemaseproducing Enterobacteriaceae[ J]. Emerg Infect Dis, 2011, 17(10): 张琪, 程训民, 沈继龙. 碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶和整合子的检测 [ J]. 中国抗生素杂志, 2015, 40(5): ZHANG Qi, CHENG Xunmin, SHEN Jilong. The detection of carbapenemases and integration in Carbapenem resistant Acinetobacter baumannii[ J]. Chinese Journal of Antibiotics, 2015, 40(5): Poirel L, Menuteau O, Agoli N, et al. Outbreak of extended-spectrum beta-lactamase VEB-1-producing isolates of Acinetobacter baumannii in a French hospital[ J]. J Clin Microbiol, 2003, 41(8): Tsakris A, Ikonomidis A, Poulou A, et al. Clusters of imipenem-resistant Acinetobacter baumannii clones producing different carbapenemases in an intensive care unit[ J]. Clin Microbiol Infect, 2008, 14(6): Fritsche TR, Sader HS, Toleman MA, et al. Emerging metallo-betalactamase-mediated resistances: a summary report from the worldwide SENTRY antimicrobial surveillance program[ J]. Clin Infect Dis, 2005, 41 Suppl 4: S276-S Ikonomidis A, Ntokou E, Maniatis AN, et al. Hidden VIM-1 metallobeta-lactamase phenotypes among Acinetobacter baumannii clinical isolates[ J]. J Clin Microbiol, 2008, 46(1): 史映红, 冯萍. 耐亚胺培南鲍曼不动杆菌金属 β 内酰胺酶表型及基因型检测 [ J]. 中国临床实用医学, 2009, 3(3): SHI Yinghong, FEI Ping. Testing of phenotype and genotype of metal β-lactamases in Imipenem-resistant Acinetobacter baumannii[ J]. China Clinical Practical Medicine, 2009, 3(3): 欧佳美, 黄显武, 胡秋蓉. 耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌耐药性分析及产金属酶检测 [ J]. 现代医院, 2015, 15(2): OU Jiamei, HUANG Xianwu, HU Qiurong. Resistance analysis and producing-metal-enzyme assays of carbapenem resistant Acinetobacter baumannii[ J]. Modern Hospital, 2015, 15(2): Khorsi K, Messai Y, Hamidi M, et al. High prevalence of multidrugresistance in Acinetobacter baumannii and dissemination of carbapenemase-encoding genes blaoxa-23-like, blaoxa-24-like and blandm-1 in Algiers hospitals[ J]. Asian Pac J Trop Med, 2015, 8(6): Donald HM, Scaife W, Amyes SG, et al. Sequence analysis of ARI-1, a novel OXA beta-lactamase, responsible for imipenem resistance in Acinetobacter baumannii 6B92[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2000, 44(1): Poirel L, Figueiredo S, Cattoir V, et al. Acinetobacter radioresistens as a silent source of carbapenem resistance for Acinetobacter spp[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2008, 52(4): Bergogne-Bérézin E, Towner KJ. Acinetobacter spp. as nosocomial pathogens: microbiological, clinical, and epidemiological features[ J]. Clin Microbiol Rev, 1996, 9(2): Higgins PG, Dammhayn C, Hackel M, et al. Global spread of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii[ J]. J Antimicrob Chemother, 2010, 65(2): Villegas MV, Kattan JN, Correa A, et al. Dissemination of Acinetobacter baumannii clones with OXA-23 Carbapenemase in Colombian hospitals[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2007, 51(6): Wang H, Guo P, Sun H, et al. Molecular epidemiology of clinical isolates of carbapenem-resistant Acinetobacter spp. from Chinese hospitals[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2007, 51(11): Lee MH, Chen TL, Lee YT, et al. Dissemination of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii carrying BlaOxA-23 from hospitals in central Taiwan[ J]. J Microbiol Immunol Infect, 2013, 46(6): Bou G, Oliver A, Martínez-Beltrán J. OXA-24, a novel class D beta-lactamase with carbapenemase activity in an Acinetobacter baumannii clinical strain[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2000, 44(6): Afzal-Shah M, Woodford N, Livermore DM. Characterization of OXA- 25, OXA-26, and OXA-27, molecular class D beta-lactamases associated with carbapenem resistance in clinical isolates of Acinetobacter baumannii[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2001, 45(2): Héritier C, Poirel L, Lambert T, et al. Contribution of acquired carbapenem-hydrolyzing oxacillinases to carbapenem resistance in Acinetobacter baumannii[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2005, 49(8): Santillana E, Beceiro A, Bou G, et al. Crystal structure of the carbapenemase OXA-24 reveals insights into the mechanism of carbapenem hydrolysis[ J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 2007, 104(13): Turton JF, Ward ME, Woodford N, et al. The role of ISAba1 in expression of OXA carbapenemase genes in Acinetobacter baumannii[ J]. FEMS Microbiol Lett, 2006, 258(1): Héritier C, Poirel L, Fournier PE, et al. Characterization of the naturally occurring oxacillinase of Acinetobacter baumannii[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2005, 49(10): 于文静, 多丽波. 鲍曼不动杆菌 D 类碳青霉烯酶及其基因环境研究进展 [ J]. 国际检验医学杂志, 2014, 35(2): YU Wenjing, DUO Libo. Advances of class D carbapenemases and gene environment in Acinetobacter baumannii[ J]. International Journal of

9 鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因研究进展丁梦珊, 等 1865 Laboratory Medicine, 2014, 35(2): Poirel L, Marqué S, Héritier C, et al. OXA-58, a novel class D {beta}- lactamase involved in resistance to carbapenems in Acinetobacter baumannii[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2005, 49(1): Novovic K, Mihajlovic S, Vasiljevic Z, et al. Carbapenemresistant Acinetobacter baumannii from Serbia: revision of CarO classification[ J]. PLoS One, 2015, 10(3): e Karunasagar A, Maiti B, Shekar M, et al. Prevalence of OXA-type carbapenemase genes and genetic heterogeneity in clinical isolates of Acinetobacter spp. from Mangalore, India[ J]. Microbiol Immunol, 2011, 55(4): Khajuria A, Praharaj AK, Kumar M, et al. Molecular Characterization of Carbapenem Resistant Isolates of Acinetobacter baumannii in An Intensive Care Unit of A Tertiary Care Centre at Central India[ J]. J Clin Diagn Res, 2014, 8(5): DC38-DC Kouyama Y, Harada S, Ishii Y, et al. Molecular characterization of carbapenem-non-susceptible Acinetobacter spp. in Japan: predominance of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii clonal complex 92 and IMP-type metallo-β-lactamase-producing nonbaumannii Acinetobacter species[ J]. J Infect Chemother, 2012, 18(4): Higgins PG, Poirel L, Lehmann M, et al. OXA-143, a novel carbapenemhydrolyzing class D beta-lactamase in Acinetobacter baumannii[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2009, 53(12): Kim CK, Lee Y, Lee H, et al. Prevalence and diversity of carbapenemases among imipenem-nonsusceptible Acinetobacter isolates in Korea: emergence of a novel OXA-182[ J]. Diagn Microbiol Infect Dis, 2010, 68(4): Higgins PG, Pérez-Llarena FJ, Zander E, et al. OXA-235, a novel class D β-lactamase involved in resistance to carbapenems in Acinetobacter baumannii[j]. Antimicrob Agents Chemother, 2013, 57(5): Antonio CS, Neves PR, Medeiros M, et al. High prevalence of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii carrying the blaoxa-143 gene in Brazilian hospitals[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2011, 55(3): 王秀凤, 陈祎霏, 尹秀云, 等. 血液病患者鲍曼不动杆菌的耐药性分析及其耐药基因检测 [ J]. 国际检验医学杂志, 2013, 34(18): WANG Xiufeng, CHEN Yifei, YIN Xiuyun, et al. Analysis of antibiotic resistance and mullidrug-resistant genes in Acinetobacter baumannii isolates from leukemia patients[ J]. International Journal of Laboratory Medicine, 2013, 34(18): 邢丽丹, 糜祖煌, 徐鑫鑫, 等. 多重耐药鲍曼不动杆菌中 β 内酰胺酶基因的检测 [ J]. 中国感染与化疗杂志, 2014, 14(1): XING Lidan, MI Zuhuang, XU Xinxin, et al. Detection of β-lactamase genes in muitidrug-resistant strains of Acinetobater baumannii[ J]. Chin J Infect Chemother, 2014, 14(1): 杨正海, 李小宁. 碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌 OXA 酶基因研究 [ J]. 中国抗生素杂志, 2015, 40(3): YANG Zhenghai, LI Xiaoning. Study on genes of oxacillinase in carbapenem-resistant Ainetobacter baumannii[ J]. Chinese Journal of Antibiotics, 2015, 40(3): 陈海, 陈霞, 袁敏. 海南省某医院 103 株鲍曼不动杆菌复合群 β- 内酰胺类耐药性与碳青霉烯酶携带情况分析 [ J/OL]. 疾病监测, 2015, 30(2): CHEN Hai, CHEN Xia, YUAN Min, et al. Resistance to β-lactams and carbapenemases carriage of Acinetibacter baumannii complex in a hospital in Hainan[ J/OL]. Disease surveillance, 2015, 30(2): Lin MF, Chang KC, Lan CY, et al. Molecular epidemiology and antimicrobial resistance determinants of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii in five proximal hospitals in Taiwan[ J]. Jpn J Infect Dis, 2011, 64(3): 杜坤, 应春妹, 汪雅萍, 等. 上海地区四家医院鲍曼不动杆菌产 β- 内酰胺酶研究 [ J]. 检验医学, 2012, 27(2): DU Kun, YING Chunmei, WANG Yaping, et al. The study on Acinetobacter baumannii beta-lactamases in four hospitals of Shanghai[ J]. Laboratory Medicine, 2012, 27(2): Azizi O, Shakibaie MR, Modarresi F, et al. Molecular Detection of Class-D OXA Carbapenemase Genes in Biofilm and Non-Biofilm Forming Clinical Isolates of Acinetobacter baumannii[ J]. Jundishapur J Microbiol, 2015, 8(1): e Hinerfeld D, Churchward G. Specific binding of integrase to the origin of transfer (orit) of the conjugative transposon Tn916[ J]. J Bacteriol, 2001, 183(9): Minandri F, D'Arezzo S, Antunes LC, et al. Evidence of diversity among epidemiologically related carbapenemase-producing Acinetobacter baumannii strains belonging to international clonal lineage II[ J]. J Clin Microbiol, 2012, 50(3): Manageiro V, Jones-Dias D, Ferreira E, et al. Genetic diversity and clonal evolution of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii isolates from Portugal and the dissemination of ST118[ J]. Int J Antimicrob Agents, 2012, 40(5): Mugnier PD, Poirel L, Nordmann P. Functional analysis of insertion sequence ISAba1, responsible for genomic plasticity of Acinetobacter baumannii[ J]. J Bacteriol, 2009, 191(7): Corvec S, Poirel L, Naas T, et al. Genetics and expression of the carbapenem-hydrolyzing oxacillinase gene blaoxa-23 in Acinetobacter baumannii[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2007, 51(4): 王晓辉. 鲍曼不动杆菌 β- 内酰胺类药物耐药基因及转座子 插入序列遗传标记的初步研究 [D]. 江苏大学, WANG Xiaohui. A preliminary study of beta-lactam drug

10 1866 临床与病理杂志, 2015, 35(10) resistance gene,transposon and insertion sequence in Acinetobacter baumannii[d]. Jiangsu University, Rowe-Magnus DA, Guerout AM, Mazel D. Bacterial resistance evolution by recruitment of super-integron gene cassettes[ J]. Mol Microbiol, 2002, 43(6): Corvec S, Caroff N, Espaze E, et al. AmpC cephalosporinase hyperproduction in Acinetobacter baumannii clinical strains[ J]. J Antimicrob Chemother. 2003, 52(4): 王晓辉, 宗志勇, 吕晓菊. 鲍曼不动杆菌中碳青霉烯酶基因 blaoxa 的流行与播散 [ J]. 广东医学, 2012, 33(16): WANG Xiaohui, ZONG Zhiyong, LV Xiaoju. Prevalence and spread of carbapenemases genes blaoxa in Acinetobacter baumannii[ J]. Guangdong Medical Journal, 2012, 33(16): Perez F, Hujer AM, Hujer KM, et al. Global challenge of multidrugresistant Acinetobacter baumannii[ J]. Antimicrob Agents Chemother, 2007, 51(10): Coelho JM, Turton JF, Kaufmann ME, et al. Occurrence of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii clones at multiple hospitals in London and Southeast England[ J]. J Clin Microbiol, 2006, 44(10): Evans BA, Hamouda A, Amyes SG. The rise of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii[ J]. Curr Pharm Des, 2013, 19(2): 本文引用 : 丁梦珊, 李朋朋, 马萍, 姜飞, 顾兵. 鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因研究进展 [ J]. 临床与病理杂志, 2015, 35(10): doi: /j.issn Cite this article as: DING Mengshan, LI Pengpeng, MA Ping, JIANG Fei, GU Bing. The advance of carbapenem genes in Acinetobacter baumannii[ J]. Journal of Clinical and Pathological Research, 2015, 35(10): doi: /j.issn