9 期徐韬, 等 : 发酵桑叶替代鱼粉对大口黑鲈生长脂质代谢与抗氧化能力的影响材料与方法 1.1 实验饲料以鱼粉豆粕和棉籽蛋白为主要蛋白源, 以鱼油和豆油为脂肪源配制应用基础饲料 (CP 42%,GE 18 MJ/Kg)( 表 1) 在基础饲料中用发酵桑叶 ( 采用乳酸菌酵母菌

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豫穆
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1 第 40 卷第 9 期水产学报 Vol. 40, No 年 9 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Sep., 2016 文章编号 : (2016) DOI: /jfc 发酵桑叶替代鱼粉对大口黑鲈生长脂质代谢与抗氧化能力的影响徐韬 1,2, 彭祥和 1,2, 陈拥军 1,2 1,2, 林仕梅 *, 黄先智 3 1,2, 李云 (1. 西南大学动物科技学院, 重庆 ; 2. 西南大学淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 重庆 ; 3. 西南大学蚕学与系统生物学研究所, 重庆 ) 摘要 : 在基础饲料中用发酵桑叶分别替代 0 15% 30% 鱼粉, 再对 30% 鱼粉替代水平饲料补充晶体赖氨酸和蛋氨酸, 配制成 4 种等能等氮 (CP 42%,GE 18 MJ/Kg) 的实验饲料, 分别表示为 D 1 D 2 D 3 和 D 4, 饲喂大口黑鲈 ( 初始体质量 10 g)8 周, 研究发酵桑叶替代鱼粉对大口黑鲈生长脂质代谢和抗氧化能力的影响结果显示, 发酵桑叶替代 30% 鱼粉会显著降低大口黑鲈的终末体质量特定生长率 (SGR) 脏体比(VSI) 和肝体比 (HSI), 补充晶体氨基酸 (CAA) 后会明显改善大口黑鲈的生长性能各实验组蛋白质效率饲料系数摄食率肥满度以及全鱼常规组成均无显著差异发酵桑叶替代 30% 鱼粉会显著降低大口黑鲈血清总胆固醇 (CHO) 甘油三酯(TG) 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 和低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C) 含量, 提高 HDL-C/CHO 和 HDL-C/LDL-C 比值随发酵桑叶替代水平的增加, 大口黑鲈血清低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C) 含量和丙二醛 (MDA) 含量显著降低, 而超氧化物歧化酶 (SOD) 活性显著升高研究表明, 发酵桑叶替代适宜水平鱼粉不会影响大口黑鲈的生长, 而替代鱼粉水平过高会显著抑制大口黑鲈的生长, 但可以改善大口黑鲈的脂质代谢和机体抗氧化能力饲料中补充晶体氨基酸可以提高桑叶的利用率, 促进大口黑鲈生长关键词 : 大口黑鲈 ; 发酵桑叶 ; 生长 ; 代谢 ; 抗氧化能力中图分类号 : S 文献标志码 : A 大口黑鲈 (Micropterus salmoides) 是一种典型的肉食性鱼类, 其本身易患脂肪肝, 而高能低氮日粮的开发应用, 更易致大口黑鲈肝脏受损 [1] 桑叶作为一种新型饲料, 含有较高的粗蛋白质 ( 占干物质 20% 左右 ) 和氨基酸, 且富含多糖黄酮和生物碱等活性成分而倍受人们关注 [2-3] 动物学实验已证实, 饲料中添加桑叶可以实现降血糖降血脂以及提高动物机体的抗氧化能力 [4-6] 本课题组前期研究也证实, 桑叶可有效调节鱼体的脂质代谢 [7] 但桑叶的消化率较低 [8], 影响其在水产饲料中的添加量已有的研究证实, 桑叶发酵后可以提高其替代鱼饲料中鱼粉的用量 [9-10], 甚至替代饲料中高达 80% 的鱼粉 [11] 而有关发酵桑叶在大口黑鲈饲料中的应用研究还未见报道为此, 本实验拟采用发酵桑叶替代部分鱼粉, 研究饲料中添加发酵桑叶对大口黑鲈生长代谢以及抗氧化能力的影响, 旨在为桑叶的综合开发利用积累更多的资料, 同时为解决大口黑鲈养殖生产实际问题提供参考依据收稿日期 : 修回日期 : 资助项目 : 公益性行业 ( 农业 ) 科研专项 ( ); 重庆市应用开发计划 (cstc2014yykfa80019) 通信作者 : 林仕梅, linsm198@163.com

2 9 期徐韬, 等 : 发酵桑叶替代鱼粉对大口黑鲈生长脂质代谢与抗氧化能力的影响材料与方法 1.1 实验饲料以鱼粉豆粕和棉籽蛋白为主要蛋白源, 以鱼油和豆油为脂肪源配制应用基础饲料 (CP 42%,GE 18 MJ/Kg)( 表 1) 在基础饲料中用发酵桑叶 ( 采用乳酸菌酵母菌芽孢杆菌和固氮菌进行固态发酵而成, 其干物质含量为 32.5%, 粗蛋白质含量为 24.7%, 粗脂肪含量为 10.3%, 粗灰分含量为 8.7%) 替代 0 15% 30% 鱼粉 ; 在 30% 鱼粉替代水平基础上, 补充晶体赖氨酸和蛋氨酸 ( 达到与 0 替代水平时饲料同等赖氨酸和蛋氨酸水平 ), 配制成 4 种等氮等能的实验饲料, 分别表示为 D 1 D 2 D 3 D 4 各饲料原料粉碎过 80 目筛, 采取逐级稀释法混合均匀, 用洋工 TSE65S 型双螺杆湿法膨化机 ( 北京现代洋工机械科技发展有限公司 ) 制成粒径为 2.0 和 3.0 mm 的浮性膨化颗粒饲料, 风干后放入 4 C 冰箱中保存备用 1.2 饲养管理实验鱼选用当年培育的体质健壮规格整齐的大口黑鲈 ( 平均体质量为 10 g)480 尾, 随机分成 4 个处理, 每个处理设 4 个重复, 每个重复 30 尾在室内淡水循环水族缸 ( 有效体积为 250 L) 中饲养大口黑鲈 8 周, 日投饲率为体质量的 3%~5%, 每天 08:00 12:30 17:00 各投喂 1 次水源为曝气自来水, 实验期间水温为 (26.2±0.5) C,pH 为 7.3± 表 1 实验饲料组成及营养水平 ( 风干基础 ) Tab. 1 Composition and nutrient levels of the test diets (air-dry basis) 原料 /% ingredients 秘鲁蒸汽鱼粉 Peru steam-treated fish meal 去皮豆粕 dehulled soybean meal 棉籽蛋白 cottonseed protein 发酵桑叶 fermented mulberry leaves 高筋面粉 strong flour 鱼油 fish oil 豆油 soybean oil 胆碱 choline 复合预混料 premix 磷酸二氢钙 Ca(H 2 PO 4 ) L- 赖氨酸硫酸盐 L-lysine H 2 SO DL- 蛋氨酸 DL-methionine 营养水平 nutrient levels 粗蛋白质 /% crude protein 粗脂肪 /% crude lipid 粗灰分 /% crude ash 赖氨酸 /% lysine 蛋氨酸 /% methionine 含硫氨基酸 /% sulphur amino acids 总能 /(MJ/kg) gross energy 注 :L- 赖氨酸硫酸盐含 65%L- 赖氨酸 ;DL- 蛋氨酸含 98%DL- 蛋氨酸 Notes: L-lysine H 2 SO 4 consists of 65% L-lysine;DL-methionine consists of 98% DL-methionine

3 1410 水产学报 40 卷 0.5, 溶解氧 >6.8 mg/l, 氨氮 <0.48 mg/l, 亚硝酸盐氮 <0.06 mg/l 1.3 样品制备与分析饲养实验结束后, 禁食 24 h 后称重, 每个重复随机取 3 尾鱼作为全鱼样品, 用于体组成的测定 ; 每个重复随机取 4 尾鱼, 用 MS-222 进行麻醉, 测体长体高, 分离出内脏肝胰脏, 用于形体指标的测定 ; 每个重复随机取 5 尾鱼于尾静脉取血, 在 4000 g 4 C 条件下离心 10 min, 收集血清, 20 C 保存备用饲料原料及全鱼样品均在 105 C 烘干至恒重, 然后采用凯氏定氮法测定粗蛋白质含量, 索氏抽提法测定粗脂肪含量, 高温 (550 C) 灼烧法测定灰分含量血清代谢指标均采用全自动生化分析仪 ( 日立 7100) 测定, 包括谷丙转氨酶 (ALT) 和谷草转氨酶 (AST) 活性以及总胆固醇 (TC) 甘油三酯 (TG) 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 和低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C) 的含量血清超氧化物歧化酶 (SOD) 活性和丙二醛 (MDA) 含量采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定蛋白质含量采用考马斯亮蓝法测定 1.4 计算公式特定生长率 (specific growth rate, SGR, %/d)= 100 [lnw t lnw 0 ]/t; 蛋白质效率 (protein efficiency ratio, PER)=(W t W 0 )/(F F p ); 饲料系数 (feed conversion ratio; FCR)=F/(W t W 0 ); 摄食率 (feeding rate, FR, g/d)=f 2/[(W t + W 0 ) t]; W t /L 3 ; W v /W t ; 成活率 (survival, SR, %)=100 N t /N 0 ; 肥满度 (condition factor, CF, g/cm 3 )=100 脏体比 (viscera somatic index, VSI, %)=100 肝体比 (hepatopancreas somatic index, HSI, %)=100 W h /W t 式中,W t (g) 和 W 0 (g) 分别为终末体质量和初始体质量 ;t 为养殖实验天数 ;F(g) 为尾均摄食量 ; F p (%) 为饲料蛋白质含量 ;N t ( 尾 ) 和 N 0 ( 尾 ) 分别为终末尾数和初始尾数 ;L(cm) 为鱼体长 ;W v (g) 为内脏重 ;W h (g) 为肝胰脏重 1.5 数据处理与分析实验数据均以平均值 ± 标准误 (mean±se) 表示, 采用 SPSS17.0 对所得数据进行单因素方差分析 (One-Way ANOVA), 若差异达到显著水平, 则进行 Tukey 多重比较, 显著性水平为 P< 结果 2.1 发酵桑叶对大口黑鲈生长性能的影响饲料中不同水平发酵桑叶替代鱼粉显著影响大口黑鲈的生长性能 ( 表 2) 30% 替代鱼粉水平组大口黑鲈的终末体质量和特定生长率显著低于对照组和 15% 替代鱼粉水平组 (P<0.05), 而对照组和 15% 鱼粉替代水平组之间无显著影响 (P> 0.05) 30% 鱼粉替代水平补充晶体氨基酸后 (30%+AA) 大口黑鲈的终末体质量和特定生长率与对照组无显著差异, 同样与 30% 鱼粉替代水平组无显著差异 (P>0.05) 各实验组蛋白质效率饲料系数表 2 饲料中添加发酵桑叶对大口黑鲈生长性能的影响 Tab. 2 Effects of fermented mulberry leaves on growth performance of largemouth bass 初始体质量 /g IBW 10.96± ± ± ±0.52 终末体质量 /g FBW 28.13±0.94 ab 30.10±0.26 a 23.29±1.40 b 25.76±0.75 ab 特定生长率 /(%/d) SGR 1.71±0.02 a 1.68±0.02 a 1.32±0.08 b 1.56±0.04 ab 蛋白质效率 PER 2.42± ± ± ±0.04 饲料系数 FCR 1.30± ± ± ±0.02 摄食率 /(%/d) FR 2.06± ± ± ±0.07 成活率 /% SR 96.67± ± ± ±3.83 注 : 同行数据肩标不同小写字母表示差异显著 (P<0.05), 下同 Notes: In the same row, values with different small letter superscripts mean significant different (P<0.05), the same below

4 9 期徐韬, 等 : 发酵桑叶替代鱼粉对大口黑鲈生长脂质代谢与抗氧化能力的影响 1411 和摄食率均无显著差异 (P>0.05) 2.2 发酵桑叶对大口黑鲈形态指标和体组成的影响 30% 鱼粉替代水平以及补充晶体氨基酸后会显著降低大口黑鲈脏体比和肝体比 (P<0.05), 而 15% 鱼粉替代水平没有显著影响 (P>0.05)( 表 3) 各实验组大口黑鲈肥满度以及全鱼水分粗蛋白质粗脂肪和粗灰分含量均无显著差异 (P>0.05) 表 3 发酵桑叶对大口黑鲈形态指标和营养组成的影响 2.3 发酵桑叶对大口黑鲈血清脂质代谢的影响 30% 鱼粉替代水平以及补充晶体氨基酸后会显著降低大口黑鲈血清总胆固醇甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇含量, 提高 HDL-C/CHO 和 HDL-C/LDL-C 比值 (P<0.05)( 表 4) 随发酵桑叶替代水平的增加, 大口黑鲈血清低密度脂蛋白胆固醇含量显著降低 (P<0.05) 2.4 发酵桑叶对大口黑鲈血清抗氧化指标的影响 Tab. 3 Morphological measurements and nutrient composition of largemouth bass fed diets containing different levels of fermented mulberry leaves % 形态指标 morphological measurements 肥满度 CF 1.31± ± ± ±0.03 脏体比 VSI 7.21±0.15 a 7.03±0.07 a 6.27±0.18 b 6.32±0.09 b 肝体比 HSI 1.70±0.04 a 1.63±0.03 a 1.31±0.09 b 1.30±0.05 b 营养组成 nutrition composition 水分 moisture 72.00± ± ± ±0.35 粗蛋白质 crude protein 16.70± ± ± ±0.20 粗脂肪 crude lipid 6.00± ± ± ±0.15 粗灰分 crude ash 3.20± ± ± ±0.03 随发酵桑叶替代鱼粉水平的提高, 大口黑鲈血清中 SOD 活性显著升高, 以对照组最低 (P<0.05)( 表 5) 30% 鱼粉替代水平以及补充晶体氨基酸后会显著降低大口黑鲈血清 MDA 含量 (P<0.05), 而 15% 鱼粉替代水平与对照组差异不显著 (P>0.05) 3 讨论 3.1 发酵桑叶替代鱼粉对大口黑鲈生长性能的影响表 4 饲料中添加发酵桑叶对大口黑鲈血液脂质代谢指标的影响 Tab. 4 Effects of fermented mulberry leaves on blood metabolic indexes of largemouth bass 总胆固醇 / (mmol/l) CHO 7.10±0.13 a 6.61±0.07 a 4.82±0.07 b 4.86±0.09 b 甘油三酯 / (mmol/l) TG 1.56±0.02 a 1.51±0.02 ab 1.44±0.02 b 1.42±0.01 b 高密度脂蛋白胆固醇 / (mmol/l) HDL-C 4.30±0.02 a 4.12±0.04 a 3.28±0.03 b 3.26±0.04 b 低密度脂蛋白胆固醇 / (mmol/l) LDL-C 2.20±0.03 a 1.79±0.06 b 1.27±0.04 c 1.26±0.01 c HDL-C/CHO 0.60±0.01 b 0.62±0.01 b 0.68±0.01 a 0.67±0.01 a HDL-C/LDL-C 1.95±0.02 b 2.30±0.06 b 2.59±0.05 a 2.60±0.02 a 大量研究表明, 水产饲料中植物蛋白替代鱼粉的比例因实验鱼种规格以及食性等不同而有所差异 [12-13] 相对于杂食性鱼类, 肉食性鱼类对植物蛋白的耐受程度较低, 对鱼粉的依赖性较大 [12] 从本实验结果可以看出, 大口黑鲈对发酵桑叶的耐受剂量较低, 高水平 (30%) 发酵桑叶替代鱼粉会抑制大口黑鲈的生长这与在蛋鸡上的研究结果一致 [14] 而饲料中添加 15% 桑叶不会影响尼罗罗非鱼 (Oreochromis niloticus) 的生长性能 [7] 这表明动物对桑叶的耐受能力因动物种类不同而存在差异已有研究表明, 桑叶发酵后能够改善印度囊鳃鲇 (Heteropneustes fossilis) 的生长性能, 与鱼下脚料配合使用能替代 75% 鱼粉 [9] 随后在巴塔野鲮(Labeo bata) [10] 和南亚野鲮表 5 饲料中添加发酵桑叶对大口黑鲈血清抗氧化指标的影响 Tab. 5 Effects of fermented mulberry leaves on antioxidant enzymes activities of largemouth bass 超氧化物歧化酶 /(U/mL) SOD ±8.00 b ±5.78 ab ±10.21 a ±11.02 a 丙二醛 /(nmol/ml) MDA 1.95±0.06 a 1.82±0.05 a 1.52±0.08 b 1.47±0.05 b

5 1412 水产学报 40 卷 (Labeo rohita) [11] 上研究发现, 发酵桑叶可以替代饲料中 50% 鱼粉, 与鱼类下脚料配合使用还可替代南亚野鲮饲料中 80% 鱼粉本实验结果也证实, 发酵桑叶替代 15% 鱼粉不会影响大口黑鲈的生长这些结果证实, 桑叶发酵后可以改善鱼类对桑叶的利用率但饲料中发酵桑叶替代 30% 鱼粉会影响大口黑鲈的生长尽管发酵工艺可以降低或去除植物性原料中抗营养因子的含量 [15], 但桑叶中粗纤维含量仍然较高, 影响消化酶的活性, 从而降低饲料中营养成分的消化率 [16-17] 这可能是高水平 (30%) 发酵桑叶替代鱼粉不能改善大口黑鲈生长性能的原因本研究结果显示, 高水平 (30%) 发酵桑叶饲料中补充晶体氨基酸, 大口黑鲈的生长状态明 [18] 显得到改善陈乃松等的研究也指出, 在低蛋白质饲料中补充晶体必需氨基酸对大口黑鲈的生长体组成和免疫指标产生明显的有益作用这些结果表明, 大口黑鲈具有利用结晶氨基酸的能力关于鱼虾对晶体氨基酸 (CAA) 的利用能力, 至今仍存在许多争议, 研究结果因种类以及实验条件不同而存在差异大量研究证实, 向饲料中添加某种或某几种限制性必需氨基酸, 可改善饲料的必需氨基酸平衡, 提高水生动物对植物蛋白源的利用 [13,19-20], 这也为桑叶在水产饲料中有效利用提供了新思路饲料中植物蛋白源替代鱼粉往往因饲料适口性差导致实验动物摄食率降低, 进而影响动物的生长性能 [21] 在本实验中, 发酵桑叶并没有影响大口黑鲈的摄食量, 表明桑叶未影响大口 [7] 黑鲈饲料的适口性这与在尼罗罗非鱼上的研究结果一致同样, 在印度囊鳃鲇 [9] 巴塔野 [10] [11] 鲮和南亚野鲮上的研究也未发现饲料中添加发酵桑叶影响养殖鱼类摄食量的现象 3.2 发酵桑叶替代鱼粉对大口黑鲈脂质代谢和抗氧化能力的影响桑叶中含有的植物甾醇黄酮生物碱等功能性成分具有降血糖和降血脂功能 [2,22] 目 [14,23] 前, 桑叶已在畜禽饲料中广泛应用, 不仅能够改善动物的生长性能, 还可以通过多种途径实现降糖降脂功效本实验结果也显示, 饲料中添加发酵桑叶可显著降低大口黑鲈血脂含量, 说明桑叶可调节大口黑鲈体脂的转化和代 [7] [24] 谢这与在尼罗罗非鱼上的研究结果一致在人上的研究指出, 桑叶提取物可以降低低密度脂蛋白含量这些结果表明, 桑叶中含有生物碱 1- 脱氧野尻霉素 (1-deoxynojirimycin, DNJ) [25] 和黄酮 [16] 类物质能够抑制动物肠道刷状缘膜上二糖酶活性, 同时具有调控肝脏中糖代谢过程关键酶活性的作用, 从而调控机体中糖脂肪和蛋白质的代谢和转化 [17,26] [2], 控制体内脂肪沉积 Park 等从分子水平证实, 桑叶提取物通过调节 PPARs 和 LPL mrna 表达来调节机体的脂质代谢植物甾醇和黄酮还可以抑制肠道内胆固醇的吸收, 提高 HDL-C/LDL-C 比值, 促进胆固醇向肝脏转运和代谢 [27-28] 本实验中, 饲料添加高水平 (30%) 发酵桑叶可提高大口黑鲈血清 HDL-C/CHO 和 HDL- C/LDL-C 比值, 表明桑叶也可加速鱼体胆固醇转运和代谢但桑叶是否通过该途径起到降血脂的作用, 还有待于进一步研究众所周知, 桑叶中含有抗氧化活性成分, 能够提高机体抗氧化能力 [22] 血清脂质过氧化反应可诱导炎症因子及炎症反应通常脂肪过氧化最终产物丙二醛的含量可敏锐地反映机体内脂质过氧化强弱本研究发现, 饲料中添加发酵桑叶显著降低大口黑鲈血清 MDA 水平升高 [7] [29] SOD 水平在尼罗罗非鱼和大鼠上的研究也有同样的发现这些结果表明, 桑叶可通过提高机体抗氧化能力及抑制脂质过氧化反应来降低炎症因子水平, 减轻炎症反应, 从而改善脂质代谢功能 [30] 也有研究指出, 桑叶中黄酮是通过提高机体抗氧化能力促进胰岛素分泌加快葡萄糖氧化分解等途径达到降低血糖的作用 [31] 由此可见, 桑叶降脂降糖的功效都是通过提高机体的抗氧化能力来实现的 4 结论饲料中发酵桑叶替代适宜水平鱼粉 (15%) 不会影响大口黑鲈的生长, 而高水平 (30%) 替代鱼粉会显著抑制大口黑鲈的生长, 但可以改善大口黑鲈的脂质代谢和机体抗氧化能力饲料中补充晶体氨基酸可以提高桑叶的利用率, 促进大口黑鲈生长参考文献 : [ 1 ] Bright L A, Coyle S D, Tidwell J H. Effect of dietary lipid level and protein energy ratio on growth and body

6 9 期徐韬, 等 : 发酵桑叶替代鱼粉对大口黑鲈生长脂质代谢与抗氧化能力的影响 1413 composition of largemouth bass Micropterus of freshwater catfish, Heteropneustes fossilis[j]. salmoides[j]. Journal of the World Aquaculture Society, Electronic Journal of Biology, 2011, 7(3): , 36(1): [10] Mondal K, Kaviraj A, Mukhopadhyay P K. Effects of [ 2 ] Park M Y, Lee K S, Sung M K. Effects of dietary partial replacement of fishmeal in the diet by mulberry mulberry, Korean red ginseng, and banaba on glucose leaf meal on growth performance and digestive enzyme homeostasis in relation to PPAR-α, PPAR-γ, and LPL activities of Indian minor carp Labeo bata[j]. mrna expressions[j]. Life Sciences, 2005, 77(26): International Journal of Aquatic Science, 2012, 3(1): [ 3 ] Katsube T, Imawaka N, Kawano Y, et al. Antioxidant [11] Kaviraj A, Mondal K, Mukhopadhyay P K, et al. Impact flavonol glycosides in mulberry (Morus. alba L.) leaves of fermented mulberry leaf and fish offal in diet isolated based on LDL antioxidant activity[j]. Food formulation of Indian major carp (Labeo rohita)[j]. Chemistry, 2006, 97(1): Proceedings of the Zoological Society, 2013, 66(1): 64- [ 4 ] Liu J X, Yao J, Yan B, et al. Effects of mulberry leaves 73. to replace rapeseed meal on performance of sheep [12] Gatlin D M, Barrows F T, Brown P, et al. Expanding the feeding on ammoniated rice straw diet[j]. Small utilization of sustainable plant products in aquafeeds: a Ruminant Research, 2001, 39(2): review[j]. Aquaculture Research, 2007, 38(6): [ 5 ] Zhao X J, Li L, Luo Q L, et al. Effects of mulberry [13] Figueiredo-Silva C, Lemme A, Sangsue D, et al. Effect (Morus alba L.) leaf polysaccharides on growth of DL-methionine supplementation on the success of performance, diarrhea, blood parameters, and gut almost total replacement of fish meal with soybean meal microbiota of early-weanling pigs[j]. Livestock Science, in diets for hybrid tilapia (Oreochromis niloticus 2015, 177: Oreochromis mossambicus)[j]. Aquaculture Nutrition, [ 6 ] Islam M R, Siddiqui M N, Khatun A, et al. Dietary effect 2015, 21(2): of mulberry leaf (Morus alba) meal on growth [14] 章学东, 李有贵, 张雷, 等. 桑叶粉对蛋鸡生产性能 performance and serum cholesterol level of broiler 蛋品质和血清生化指标的影响研究 [J]. 中国家禽, chickens[j]. SAARC Journal of Agriculture, 2014, 12(2): 2012, 34(16): Zhang X D, Li Y G, Zhang L, et al. Effect of dietary [ 7 ] 李法见, 杨阳, 陈文燕, 等. 桑叶对罗非鱼生长性能 mulberry leaves on productive performance, egg quality 脂质代谢和肌肉品质的影响 [J]. 动物营养学报, 2014, and serum biochemical indices of laying hens[j]. China 26(11): Poulty, 2012, 34(16): 25-28(in Li F J, Yang Y, Chen W Y, et al. Effects of dietary [15] Bairagi A, Sarkar Ghosh K, Sen S K, et al. Duckweed mulberry leaves on growth performance, fat metabolism (Lemna polyrhiza) leaf meal as a source of feedstuff in and meat quality of tilapia (Oreochromis niloticus)[j]. formulated diets for rohu (Labeo rohita Ham.) Chinese Journal of Animal Nutrition, 2014, 26(11): fingerlings after fermentation with a fish intestinal (in bacterium[j]. Bioresource Technology, 2002, 85(1): 17- [ 8 ] 杨阳, 陈文燕, 李法见, 等. 罗非鱼对 5 种不同来源桑叶 24. 中营养成分的表观消化率 [J]. 动物营养学报, 2014, [16] 俞灵莺, 李向荣, 方晓. 桑叶总黄酮对糖尿病大鼠小肠 26(11): 双糖酶的抑制作用 [J]. 中华内分泌代谢杂志, 2002, Yang Y, Chen W Y, Li F J, et al. Apparent digestibility 18(4): of nutrients in 5 kinds of mulberry leaves with different Yu LY, Li X R, Fang X. Inhibitory effect of total sources for tilapia (Oreochromis niloticus)[j]. Chinese flavonoids from mulberry tree leaf on small intestine Journal of Animal Nutrition, 2014, 26(11): (in disaccharidases in diabetic rats[j]. Chinese Journal of Endocrinology and Metabolism, 2002, 18(4): (in [ 9 ] Mondal K, Kaviraj A,Mukhopadhyay P K. Introducing mulberry leaf meal along with fish offal meal in the diet [17] Li Y G, Ji D F, Zhong S, et al. Hybrid of 1-deoxyno-

7 1414 水产学报 40 卷 jirimycin and polysaccharide from mulberry leaves treat Li Y G, Zhong S, Lü Z Q, et al. Inhibitory kinetics of α- diabetes mellitus by activating PDX-1/insulin-1 sucrase by 1-deoxynojirimycin from mulberry leaves[j]. signaling pathway and regulating the expression of Science of Sericulture, 2010, 36(6): (in glucokinase, phosphoenolpyruvate carboxykinase and glucose-6-phosphatase in alloxan-induced diabetic [26] 李有贵, 钟石, 吕志强, 等. 饲料中添加桑叶粉对单胃 mice[j]. Journal of Ethnopharmacology, 2011, 134(3): 哺乳动物小鼠的脂肪代谢影响 [J]. 蚕业科学, 2012, (3): [18] 陈乃松, 梁勤朗, 肖温温, 等. 在低蛋白质饲料中补充 Li Y G, Zhong S, Lü Z Q, et al. Impact of mulberry leaf 必需氨基酸对大口黑鲈生长体组成和免疫指标的 powder added to diet on fat metabolism of the 影响 [J]. 水生生物学报, 2014, 38(2): monogastric mammal mice[j]. Science of Sericulture, Chen N S, Liang Q L, Xiao W W, et al. Effects of 2012, 38(3): (in supplementing EAA to lower protein diets on growth, [27] Weggemans R M, Trautwein E A. Relation between soy- body composition and immunological index of associated isoflavones and LDL and HDL cholesterol largemouth bass (Micropterus salmoides)[j]. Acta concentrations in humans: a meta-analysis[j]. European Hydrobiologica Sinica, 2014, 38(2): (in Journal of Clinical Nutrition, 2003, 57(8): [28] 李向荣, 陈菁菁, 刘晓光. 桑叶总黄酮对高脂血症动物 [19] [20] [21] Gaylord T G, Barrows F T. Multiple amino acid supplementations to reduce dietary protein in plant-based rainbow trout, Oncorhynchus mykiss, feeds[j]. Aquaculture, 2009, 287(1-2): Dabrowski K, Zhang Y F, Kwasek K, et al. Effects of protein-, peptide- and free amino acid-based diets in fish nutrition[j]. Aquaculture Research, 2010, 41(5): Webster C D, Tiu L G, Tidwell J H, et al. Growth and body composition of channel catfish (Ictalurus punctatus) fed diets containing various percentages of [29] 的降血脂效应 [J]. 中国药学杂志, 2009, 44(21): Li X R, Chen J J, Liu X G. Lipid lowering activity of total flavonoids from mulberry leaves in two hyperlipidemic animal models[j]. Chinese Pharmaceutical Journal, 2009, 44(21): (in 江正菊, 宁林玲, 胡霞敏, 等. 桑叶总黄酮对高脂诱导大鼠高血脂及高血糖的影响 [J]. 中药材, 2011, 34(1): canola meal[j]. Aquaculture, 1997, 150(1-2): Jiang Z J, Ning L L, Hu M X, et al. Effect of total [22] Arabshahi-Delouee S, Urooj A. Antioxidant properties flavonoids extracted from mulberry L. on serum lipids of various solvent extracts of mulberry (Morus indica L.) and blood glucose in hyperlipidemic rats[j]. Journal of leaves[j]. Food Chemistry, 2007, 102(4): Chinese Medicinal Materials, 2011, 34(1): (in [23] 李有贵, 张雷, 钟石, 等. 饲粮中添加桑叶对育肥猪生长性能脂肪代谢和肉品质的影响 [J]. 动物营养学报, [30] 朱祥瑞, 鲍惠金. 桑叶超氧物歧化酶 (SOD) 的研究 [J]. 2012, 24(9): 蚕业科学, 1995, 21(4): Li Y G, Zhang L, Zhong S, et al. Effects of dietary Zhu X R, Bao H J. Study on the superoxide dismutase mulberry leaf on growth performance, fat metabolism from mulberry Morus alba Linnaeus leaves[j]. Science and mealt quality of finishing pigs[j]. Chinese Journal of of Sericulture,, 1995, 21(4): (in Animal Nutrition, 2012, 24(9): (in [31] 陈玲玲, 刘炜, 陈建国, 等. 桑叶黄酮对糖尿病小鼠调 [24] Doi K, Kojima T, Fujimoto Y. Mulberry leaf extract 节血糖的作用机制研究 [J]. 中国临床药理学杂志, inhibits the oxidative modification of rabbit and human 2010, 26(11): low density lipoprotein[j]. Biological & Pharmaceutical Chen L L, Liu W, Chen J G. Study on the hypoglycemic Bulletin, 2000, 23(9): mechanism of flavonoids of mulberry leaves on [25] 李有贵, 钟石, 吕志强, 等. 桑叶 1- 脱氧野尻霉素 glycemia in diabetic mice[j]. The Chinese Journal of (DNJ) 对 α- 蔗糖酶的抑制动力学研究 [J]. 蚕业科学, Clinical Pharmacology, 2010, 26(11): (in 2010, 36(6):

8 9 期徐韬, 等 : 发酵桑叶替代鱼粉对大口黑鲈生长脂质代谢与抗氧化能力的影响 1415 Effects of replacing fish meal with fermented mulberry leaves on the growth, lipid metabolism and antioxidant capacity in largemouth bass (Micropterus salmoides) XU Tao 1,2, PENG Xianghe 1,2, CHEN Yongjun 1,2, LIN Shimei 1,2 *, HUANG Xianzhi 3, LI Yun 1,2 (1. College of Animal Science and Technology, Southwest University, Chongqing , China; 2. Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development, Ministry of Education, Southwest University, Chongqing , China; 3. Institute of Sericulture and Systems Biology, Southwest University, Chongqing , China) Abstract: This experiment was conducted to study the effect of replacement of fish meal by fermented mulberry leaves on the growth, lipid metabolism and antioxidant capacity of largemouth bass [with the initial weight (10 g)]. Four isonitrogenous and isoenergetic diets (CP 42%, GE 18 MJ/Kg) were formulated to contain different levels of fermented mulberry based upon the basal diet to replace fish meal 0 (D 1 ), 15% (D 2 ), 30% (D 3 ) and supplement EAA based on 30% (D 4 ). After 8 weeks, the results showed that final weight (FW), specific growth rate (SGR), viscera somatic index (VSI) and hepatopancreas somatic index (HSI) were decreased significantly when the replacement ratio of fish meal by fermented mulberry was 30%, and supplement crystalline amino acids (CAA) could improve the growth of largemouth bass obviously. There were no significant differences in protein efficiency ratio (PER), feed conversion ratio (FCR), feeding rate (FR), condition factor (CF) and whole body general composition for each test group. The largemouth bass serum of CHO, TG, HDL-C and LDL-C were decreased observably but the ratios of HDL-C/CHO and HDL-C/LDL-C showed the opposite trend. The LDL-C decreased as fermented mulberry ratio increased. Superoxide dismutase (SOD) activities increased significantly as fermented mulberry ratio increased, but malondialdehyde (MDA) decreased markedly. Results of above show that a suitable percentage of fermented mulberry replacement of fish meal has no effect on the growth of largemouth bass. Too high replacement levels would inhibit the growth of largemouth bass, but could improve the lipid metabolism and antioxidant capacity of largemouth bass. Supplement of essential amino acids can improve the utilization of fermented mulberry, and promote the growth of largemouth bass. Key words: Micropterus salmoides; fermented mulberry; growth; metabolism; antioxidant capacity Corresponding author: LIN Shimei. linsm198@163.com Funding projects: National Special Research Fund for Non-profit Sector (Agriculture) ( ); Chongqing Application Development Projects (cstc2014yykfa80019)

标题

动物营养学报 2015,27(12):3968 3974 Chinese Journal of Animal Nutrition doi:10.3969 / j.issn.1006 267x.2015.12.039 罗非鱼低鱼粉饲料中桑叶发酵蛋白替代鱼粉的研究陈文燕陈拥军彭祥和林仕梅 3 黄先智李云 (1. 西南大学动物科技学院, 重庆 400716;2. 西南大学淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室,