聚焦超声穴位照射对兔压痛阈的影响

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1 聚焦超声穴位照射对正常兔痛阈的影响 林强 1 赵骏刘真珍白晋乔海李东向理科 ( 重庆医科大学生物医学工程系, 省部共建超声医学工程国家重点实验室, 超 声医学工程重庆市市级重点实验室, 重庆 ) 摘要 : 目的探讨聚焦超声照射 足三里 穴位对正常兔痛阈的影响 方法将 30 只新西兰大白兔随机分为实验组和假照组, 每组 15 只 实验组用频率 0.5MHz, 功率 2W 的聚焦超声照射兔左侧 足三里 穴位 5 分钟, 假照组照射方法相同, 但不打开电源 分别于照射前, 照射后 2min,4min,6min,8min, 10min,12min,14min 和 16min, 用电子压力测痛仪痛阈进行痛阈测定 结果假照组照射后的痛阈值与基础痛阈相比无显著性差异 (p>0.05) 实验组在照射后 6min, 痛阈值 [(94.57±51.84)g] 出现高峰 (p<0.001); 分别于 14min 和 16min 恢复至基础水平 在 2min,4min,6min,8min,10min 和 12min, 实验组的痛阈值均显著性高于假照组 (p<0.05) 光镜观察实验组与假照组的皮肤组织图 肌肉组织图和坐骨神经组织图无明显变化 结论聚焦超声照射 足三里 穴位可以提高正常兔的痛阈, 并且是安全的 关键词 : 聚焦超声 ; 足三里 ; 痛阈 ; The influence of normal rabbits pain threshold after the acupuncture point radiated by focused ultrasound Lin Qiang, Zhao Jun, Liu Zhen Zhen, et al State Key Laboratory of Ultrasound Engineering in Medicine Co-founded by Chongqing and the Ministry of Science and Technology, Chongqing Key laboratory of Ultrasound in Medicine and Engineering, Department of Biomedical Engineering, Chongqing Medical University, Chongqing , China. Objective: Research the influence of normal rabbits pain threshold after the focused ultrasound radiation at ST 36. Methods: Dividing thirty new zealand white rabbits into experimental group and false radiation group completely randomized and equally.in experimental group, the rabbits left ST36 was radiated five minutes with focused ultrasound when frequence was 0.5MHz and power was 2W and then detecting the rabbits pain threshold at upper left ear with electron dolorimeter after the radiation 2min 4min 6min 8min 10min 12min 14min and 16min. In the false radiation group,all the conditions were same as the experimental group except shutting down the power Results: Sham control group after radiation to pain threshold and the basis of pain threshold was not significantly different(p<0.05).experiment group appear a peak pain threshold[(94.57 ± 第一作者 : 林强 (1985-), 男, 在读硕士研究生, 研究方向 : 聚焦超声治疗疼痛的安全性和有效性 通讯作者 : 白晋, 女, 博士生导师, linqian125@163.com; 项目来源 : 超声针灸治疗仪关键技术及效应评价研究, 国中医药科 2007ZX01-2

2 51.84)g](p<0.001).14min and 16min respectively, returned to baseline.in 2min, 4min, 6min, 8min, 10min and 12min, the experimental group's pain threshold was significantly higher than sham control group(p<0.05). No damage observed by light microscopy. Conclusion: The focused ultrasound radiation at ST36 of rabbits can set up the pain threshold, and is safe. Key words: Focused ultrasound; ST36; Pain threshold; Corresponding author: 0 前言聚焦超声 (Focused Ultrasound, US) 穴位照射是将传统针灸技术与现代治疗超声技术相结合的一种新穴位刺激方法 它是在现代声学原理基础上, 运用声能 热能等作为刺激因子, 作用于穴位区域, 产生 酸 麻 胀 热 等感觉, 达到调解脏腑经络之气, 治疗疼痛 聚焦超声穴位照射使用方便, 并可防止交叉感染, 还可解除患者对针灸的恐惧感, 具有很好的临床应用前景 [1] 本研究旨在观察正常兔聚焦超声穴位照射对正常兔痛阈的影响, 为聚焦超声安全有效的应用于疼痛治疗提供实验依据 1 材料与方法 1.1 主要仪器超声骨关节治疗仪 ( 由重庆融海超声医学工程研究中心有限公司自主研发 ); 电子 VonFrey 测痛仪 2391 型 ( 美国 IITC 公司 ), 测试结果独立与温度和湿度 1.2 实验动物及其分组新西兰兔 ( 由重庆医科大学动物中心提供 )30 只, 雌雄不拘, 体质量 2.0 kg~2.5 kg, 随机分为假照组和实验组, 每组 15 只 1.3 痛阈检测压痛阈值采用电子 VonFrey 测痛仪进行测量 电子 VonFrey 测痛仪包括压痛阈检测头, 放大器和显示系统三部分 原理 : 把加在动物身上的压力通过压力传感器稳定地转换成电信号, 经过信号放大处理后由显示屏显示出准确的压力值 电子 VonFrey 测痛仪准确可靠, 可重复性高, 广泛用于痛阈测定 将兔放置于特制测量笼中, 于兔耳下面贴放一个光滑有机玻璃板, 将压痛阈检测头垂直压在兔耳左耳上三分之一处, 逐渐缓慢增大压力, 以兔甩头或者挣扎反应时的值为痛阈值 照射前测得的痛阈值为基础痛阈值 1.4 穴位照射先在左侧的 足三里 穴位喷洒酒精, 然后聚焦超声头紧贴穴位, 以超声耦合剂耦合, 超声频率 0.5 MHz, 功率 2W, 焦皮距 18mm, 穴位照射时间 5min, 分别于照射后 2min,4min,6min,8min,10min,12min,14min 和 16min 八个时间点进行痛阈测量 1.4 切片的制备从实验组和假照组中随机抽取两只, 照射后立即取足三里穴位所在的皮肤肌肉组织, 取标本严格无菌操作 标本离体后尽快以 4% 多聚甲醛固定, 石蜡包埋, 常规切片,HE 染色, 光镜观察 为进一步研究其安全性, 另取坐骨神经组织 ( 照射参数不变, 实验组和假照组每组各 2 只 ), 制成石蜡切片,HE 染色 1.5 统计学处理采用 SAS9.1 统计分析软件, 进行重复方差分析,p<0.05 为显著 性差异, 数据以均数 ± 标准误 ( x ±s) 表示 2 结果

3 2.1 痛阈值的比较实验组和假照组痛阈随时间的变化趋势见图 1 假照组曲线几乎为一条直线, 各时间点的痛阈值与基础痛阈值比较均无统计学意义 实验组在聚焦超声照射后 6min 出现痛阈值高峰, 与基础痛阈值比较有统计学差异 (p<0.05) 14min 恢复至基础水平 (p>0.05), 以后无明显变化 两组在不同时间点的痛阈值见表 1 两组的基础值差异无统计学意义, 但在聚焦超声照射后 2min, 实验组的痛阈值明显高于假照组 (p<0.001), 照射后 4min 痛阈值进一步升高, 当 6min 时痛阈值达到最大, 然后缓慢下降, 直到 16min 回到正常水平 表 1 各组不同时间点的痛阈值比较 ( 单位 :g) # 表示与假照组相比有显著性差异 (p<0.05) 组别 n 基础痛阈值 聚焦超声照射后 2min 4min 6min 8min 10min 12min 14min 16min 实验组 ± ±28.98# 88.26±41.01# 94.57±51.84# 90.70±39.64# 71.93±30.31# 57.50±14.73# 50.01± ±6.31 假照组 ± ± ± ± ± ± ± ± ±5.29 # 表示与假照组相比有显著性差异 (p<0.05) 图 1 各组痛阈值时间趋势图 表示 p<0.001, 表示 p<0.05, 和同组的基础痛阈值相比 2.2 石蜡切片镜下观察结果肉眼观察假照组和实验组与正常组相比无明显变化 光镜观察假照组和实验组与正常组也无明显组织学变化 ; 皮肤的细胞结构完整, 毛囊和毛细血管清晰可见 ( 图 2, 图 3); 肌细胞呈梭型, 细胞膜完整, 光滑, 胞浆红染, 细胞核清晰 ( 图 4, 图 5); 神经纤维排列紧密, 轴突连续, 雪旺细胞形态正常 ( 图 6, 图 7)

4 图 2 假照组皮肤组织图 (HE 200) 图 3 实验组皮肤组织图 (HE 200) 图 4 假照组肌肉组织图 (HE 200) 图 5 实验组肌肉组织图 (HE 200) 图 6 假照组坐骨神经组织图 (HE 200) 图 6 实验组坐骨神经组织图 (HE 400) 讨论穴位是人体脏腑经络之气输注并散发于体表的部位, 是与脏腑经络之气相通并随之活动变化的感受点和反应点 [2], 是镇痛过程中重要的刺激点, 通过对某些穴位的连续性刺激可以 产生一个短时间内局部镇痛功效或一个全身性的强而持久的镇痛作用 对穴位各层组织 ( 从 表皮 真皮 皮下到筋膜 肌肉 ) 的解剖结果发现, 穴位主要是由神经末梢 神经丛 血 管 淋巴管等物质构成 [3] 由于足三里能调气血, 活络止痛, 因此常被选用为镇痛穴位, 针刺足三里能明显提高痛阈值 [8] 本实验中所采用的是聚焦超声而不是传统理疗所采用的平面超声, 进行足三里照射, 同时鉴于针灸治疗疼痛的的重要原理之一是提高痛阈, 因此我们对兔的穴位进行了超声照 射, 观察其对压痛阈的影响 实验结果显示实验组与假照组在三个时间点测出的压痛阈值有 显著性差异 (p<0.05), 说明聚焦超声穴位照射能提高压痛阈值 研究中发现有三只兔子在

5 照射后 4min 6min 和 8min 痛阈值分别为 165.6g 170.6g 和 212.9g,189.7g 184.5g 和 138.1g,112.6g 174.4g 和 183.6g, 远远高于实验组其他兔子的痛阈值, 这可能是由于这三 只兔子对聚焦超声十分敏感的缘故 对皮肤, 肌肉和坐骨神经进行了组织学观察, 未见其损 伤, 因此聚焦超声穴位照射是安全的 聚焦超声治疗是一种无创性治疗, 可在治疗表层下病变组织时不破坏表面组织 ( 皮肤, 黏膜或上皮组织 ) 聚焦超声具有良好的能量渗透性和聚焦性, 在焦点处释放大量能量产生 热效应, 空化效应, 机械效应以及声化学效应, 通过神经反射作用 神经体液调节作用 神 经 内分泌一免疫作用和直接作用等途径 [4], 最终达到治疗疼痛和调节机体功能的目的 聚 焦超声作用于穴位也有循经传导的特点, 可以温经活络 [5] 张果忠 [6] 等观察穴位针刺 艾灸 超 声针灸对实验胃痛大鼠痛阈的影响, 结果显示三种疗法有明显的镇痛作用, 但超声针灸较之两法具有更长 的镇痛效应 郭义等进一步验证了穴位超声针灸镇痛的效果 张玉华 [7] 等采用超声波作用于阿是穴治疗肋 间神经痛, 结果显示有效率超过 90%, 认为超声针治疗肋间神经痛是一种行之有效的治疗方法, 此法见效 快 安全 无痛苦 患者易接受 总之, 初步显示聚焦超声穴位照射能提高压痛阈, 但其作用机 制还有待进一步研究 结论聚焦超声单次照射兔 足三里, 可以提高正常兔的痛阈, 为聚焦超声穴位照射治疗疼 痛打下重要基础, 有望开拓一种更安全 有效 简便的疼痛治疗技术 参考文献 : [1] 柳文仪. 超声医学在中医临床与研究中的进展 [J]. 当代医学. 1999, 5(12): [2] 王慕冰, 袁泽惠. 超声波在医学中的应用 [J]. 中国西部科技. 2004, 10(13): [3] Kendall D E. Scientific basis of acupuncture(part 1).Guo W ai Yi Xue Zhong Yi Zhong Yao Fen Ce (For Med Sci,Sect Trad Chin Med,Chin),1991,13(1): [4] 陈蓉, 王智彪, 邹建中. 超声针灸应用的探讨 [J]. 局解手术学杂志. 2007, 16(2): [5] 金完成, 王少英, 刘素敏, 等. 超声针的临床应用及实验研究. 中国超声医学杂志. 1988, 4(3): [6] 张果忠 ; 王秀云 ; 李桂兰. 穴位针刺 艾灸 超声针灸不同刺激对实验性胃痛大鼠痛阈的影响 [J]. 中 医研究,1996, 4(9): [7] 张玉华, 常建如. 超声针治疗肋神经痛的临床观察 [J]. 实用医技杂志, 2002, 9(5): [8] 孙佳 针刺双侧足三里对小鼠痛阈的影响 [J] 中国保健营养,2010 年第 4 期 :12-13.

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1449 1 相 对 校 正 因 子 的 相 关 方 法 1.1 内 标 多 控 法 研 究 发 现, 在 中 药 各 成 分 间 存 在 着 一 定 的 比 例 关 系, 只 要 各 成 分 的 量 符 合 该 比 例 关 系, 中 药 的 多 [6] 指 标 质 量 控 制 可 以 依 此 法 1448 相 对 校 正 因 子 在 中 药 多 指 标 测 定 中 的 应 用 研 究 进 展 1, 罗 祖 良 2, 仇 峰 1 1,, 韦 日 伟 2 1,, 覃 禹 2, 张 坤 1, 覃 洁 萍 2, 杨 美 华 1. 北 京 协 和 医 学 院 药 用 植 物 研 究 所, 中 草 药 物 质 基 础 与 资 源 利 用 教 育 部 重 点 实 验 室, 北 京 100193 2. 广

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