Microsoft Word ?1709gc100186郑惠玲.doc
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1 生物工程学报 Chin J Biotech 2010, December 25; 26(12): journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN cjb@im.ac.cn 2010 CJB, All rights reserved. 生物技术与方法 抗山羊 ΔfosB 基因表达产物抗体的制备及应用 郑惠玲, 祝珍珍, 安俊辉, 杨振宇, 邢瑞芳, 闫林慧 西北农林科技大学动物科技学院, 杨凌 摘 要 : ΔfosB 是 fosb 基因的自然截短型, 稳定存在于许多组织中, 在脂肪细胞和成骨细胞的形成和分化中起到重要作 用 ΔFosB 蛋白可能与钙在骨和乳腺中的代谢有关, 并且调控钙从骨向乳腺转移的信号通路 将奶山羊的 ΔfosB 基因亚克隆到 pet32a 载体得到 pet32a-δfosb 原核表达载体,IPTG 诱导其在大肠杆菌中表达, 纯化融合蛋白免疫兔子制备多克隆抗体 ELISA 检测显示抗体效价达 ,Western blotting 结果显示制备的抗体能特异性检测原核表达的 ΔFosB 蛋白以及在 HEK-293 细胞中表达的 ΔFosB 蛋白 进一步的组织差异表达检测表明 ΔFosB 在山羊的乳腺 骨髓 脑髓 肌肉 心脏 肝和肺组织中均有表达 关键词 : 山羊,ΔFosB, 原核表达, 多克隆抗体, 组织差异表达 Preparation and application of goat ΔfosB gene expression product antibody Huiling Zheng, Zhenzhen Zhu, Junhui An, Zhenyu Yang, Ruifang Xing, and Linhui Yan College of Animal Science and Technology, Northwest A&F University, Yangling , China Abstract: ΔfosB, a naturally occurring truncated isform of fosb gene, existed in many tissues stably and played an important role in formation and differentiation of adipocyte and osteoblast. ΔFosB may be related to the metabolism of calcium in bone and mammary gland and regulate the signal pathway of calcium transfer from bone to mammary gland. We first sub-cloned ΔfosB gene of goat into the vector pet32a to construct prokaryotic expression vector pet32a-δfosb. Then we induced for ΔfosB gene expression efficiently by IPTG. Finally we immunized the adult rabbits with purified recombinant ΔFosB to prepare rabbit anti-goat ΔFosB polyclonal antibody. ielisa analysis showed the antibody with the titer of 1:51 200, and Western blotting result showed that the antibody could specifically detect the ΔFosB protein expressed in prokaryotic cell and HEK-293 cell, respectively. Further Western blotting assay showed that ΔFosB expressed in various tissues of goat in vivo. Keywords: goat, ΔFosB, prokaryotic expression, polyclonal antibody, tissue differential expression 小鼠骨肉瘤基因 B (Finkel-Biskis-Jinkins murine osteosarcoma B,fosB) 是转录因子 AP-1 家族成员之一, 有 3 种表达产物 :FosB ΔFosB 和 Δ2ΔFosB, 都是细胞增殖与分化的重要调节因子 [1] fosb 基因是一种典型的早期即刻基因, 在多种刺激物的作用下瞬时诱导表达 [2] ΔFosB 由于磷酸化作用能够作 Received: March 30, 2010; Accepted: May 17, 2010 Supported by: Basic Research Fund of Northwest A&F University (No. Z ), Research and Development Special Fund for Public Welfare Industry (Agriculture) (No. 3-45). Corresponding author: Huiling Zheng. Tel/Fax: ; Zheng.huiling@yahoo.com 西北农林科技大学基本科研业务费 (No. Z ), 农业部公益性行业科研专项 ( 农业 ) 经费 (No. 3-45) 资助
2 郑惠玲等 : 抗山羊 ΔfosB 基因表达产物抗体制备及应用 1705 为一种分子开关稳定存在 [3-4] 研究表明 ΔFosB 在小鼠中可能参与脂肪细胞和成骨细胞的形成与分化 [5-8] 钙是骨的重要组成成分,ΔFosB 调控骨的形成及骨密度, 故 ΔFosB 可能与钙在骨骼中的积累有 [9] 关 Yoshinori 等建立了表达各种 fosb 基因转录本的突变的小鼠胚胎干细胞系, 发现在只表达 ΔFosB 的突变细胞系中有 7 种钙结合蛋白上调,1 种下调, 同时有 3 种在乳腺中高表达的蛋白上调,1 种下调 在妊娠期的母体中, 大量钙通过一些钙受体蛋白从骨骼向乳腺转运 [10] 通过这些结果我们推测,ΔFosB 在骨骼和乳腺的钙代谢中起重要作用, 它可能参与调节钙从骨向乳腺转运的信号通路 本课题组采用 RT-PCR 方法从山羊的乳腺组织克隆得到了 ΔfosB 基因 [11], 证明了 ΔFosB 在乳腺中有表达 本实验进一步构建了山羊 ΔfosB 的原核表达载体, 并在大肠杆菌中表达纯化了 ΔFosB 蛋白, 制备了兔抗羊 ΔFosB 多克隆抗体, 为从蛋白质水平研究山羊 ΔFosB 的功能提供了特异性工具 1 材料与方法 1.1 材料 携带 His 标签的 pet32a(+) 载体 E. coli BL21 (DE3) 菌株 pmd-δfosb 质粒 padtrack-cmv-δfosb 质粒 DH5α 菌株 HEK-293 细胞由本实验室保存 琼脂糖购自 Biowest 公司 T4 DNA 连接酶 LA Taq DNA 聚合酶 pmd18-t Vector 限制性内切酶 BamHⅠ 和 SalⅠ 以及低蛋白质分子量标准为 TaKaRa 公司产品 IPTG 购自 Inalc 公司 DNA marker 预染蛋白质 marker Ⅲ 琼脂糖凝胶 DNA 片段回收试剂盒及 Pro-light HRP 化学发光检测试剂购自天根生化科技 ( 北京 ) 有限公司 弗氏完全佐剂 弗氏不完全佐剂购自 Sigma 公司 质粒回收试剂盒购自北京博大泰克 / 博大泰恒生物技术集团公司 辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的羊抗兔 IgG 以及 Anti-β-Actin 抗体均购自北京博奥森生物技术有限公司 PVDF 膜购自美国 Millipore 公司 引物合成及测序工作由上海生工生物工程有限公司完成 DMEM 高糖及胎牛血清购自美国 Hyclone 公司 Lipofectamine 2000 Reagent 购自美国 Invitrogen 公司 1.2 方法 原核表达载体的构建及鉴定根据山羊的 ΔfosB 基因 cdna 序列 (GenBank Accession No. FJ455501), 设计 1 对特异性引物, 上游 :5 -GGAGGATCCATGTTTCAAGCTTTCCCCGG AG-3 ( 下划线为 BamH I 酶切位点 ); 下游 :5 -TCC GTCGACTCACTCCGCCAGCGGGCCCG-3 ( 下划线为 Sal Ⅰ 酶切位点 ) 以 pmd-δfosb 质粒为模板进行 PCR 反应, 反应条件为 :95 预变性 5 min;94 变性 30 s,62 退火 30 s,72 延伸 1 min,30 个循环 ;72 10 min 将回收的 ΔfosB 基因克隆到 pmd18-t 载体得到 pmd-δfosb, 转化感受态大肠杆菌 DH5α, 挑取阳性克隆, 进行菌液 PCR 检测, 然后送上海生工生物工程有限公司测序 将 pmd-δfosb 质粒和 pet32a 载体分别用 BamH I 和 SalⅠ 进行双酶切, 琼脂糖凝胶电泳纯化回收 ΔfosB 片段及载体片段, 按照摩尔比为 8 1 的比例混合 ΔfosB 和 pet32a 载体, 用 T4 DNA 连接酶于 16 连接过夜 转化感受态大肠杆菌 DH5α, 挑选阳性克隆进行菌液 PCR 鉴定, 鉴定后的阳性 克隆再进行质粒双酶切鉴定 鉴定正确的质粒命名为 pet32a-δfosb, 并送上海生工生物工程有限公司测序 pet32a-δfosb 的诱导表达及 SDS-PAGE 分析将质粒 pet32a-δfosb 转化感受态大肠杆菌菌株 BL21(DE3), 挑取阳性单克隆接种到含 100 μg/ml 氨苄青霉素的 LB 培养基中,37 振荡培养, 摇菌至 OD 时, 加 IPTG 至终浓度 0.5 mmol/l,37 诱导表达 6 h, 同时用载有空质粒 pet32a 的大肠杆菌 BL21(DE3) 和未诱导的重组质粒 pet32a-δfosb 作为空白对照及阴性对照 收集诱导后重组菌液 1 ml,5 000 r/min 4 离心 15 min 后 PBS 重悬, 冰上超声破碎, r/min 离心 10 min, 保存上清 包涵体沉淀用 PBS 洗 2 次, 重悬于 8 mol/l 尿素中,4 放置 2~3 h r/min 离心 20 min, 收集上清 将获得的细胞质上清与包涵体上清与 1 SDS 上样缓冲液等体积混合,100 加热 10 min 后进行 12% SDS-PAGE 电泳
3 1706 ISSN CN /Q Chin J Biotech December 25, 2010 Vol.26 No 融合蛋白的纯化裂解后的包涵体进行 SDS-PAGE 电泳, 随后使用 0.25 mol/l KCl 染色 10 min 切下目的条带, 放入预冷研钵中, 加入液氮研磨至粉末状, 加入 PBS 4 过夜 r/min 4 离心 5 min, 收集上清后, 与 1 SDS 上样缓冲液混合,100 加热 5 min 后, 取 10 μl 样品进行 12% SDS-PAGE 检测 多克隆抗体的制备将 1 ml 纯化后的重组蛋白 ΔFosB ( 约 0.6 mg/ml) 与弗氏完全佐剂等量混合超声乳化, 皮下多点注射分别免疫 2 只大耳白兔, 免疫前取血作为阴性血清对照 以后每隔 7 天使用重组蛋白与弗氏不完全佐剂混合的乳化液再次进行增强免疫,28 d 后心脏采血,37 静置 12 h 分离血清,2 000 r/min 离心 10 min 去除血细胞, 收集血清 多克隆抗体效价检测及特异性分析用间接酶联免疫吸附法 (Indirect enzyme-linked immunosorbent assay,ielisa) 测定抗体效价 将融合蛋白用包被缓冲液稀释, 取 100 μl 加入酶标板中 4 包被过夜 ;PBST 洗涤 3 次, 使用 PBST 配制的 5% 脱脂奶粉 37 封闭 1 h;pbst 洗涤 3 次, 加入梯度稀释的血清在 37 孵育 1 h;pbst 洗涤 3 次后, 使用 HRP 标记的羊抗兔 IgG,37 孵育 1 h; PBST 洗涤 3 次, 晾干后加入 TMB 显色液显色, 最后用 2 mol/l 硫酸终止反应, 酶标仪测定抗体效价 采用 Western blotting 检测抗体特异性 : 融合蛋白 SDS-PAGE 凝胶电泳后,60 V 转印约 2 h, 将蛋白电转移至 PVDF 膜上,5% 脱脂奶粉封闭过夜, TBST 洗涤 3 次 ; 使用血清为一抗 ( 分别按 1 200, 1 500, 稀释 ),37 孵育 2 h,tbst 洗涤 3 次 ;HRP 标记的羊抗兔 IgG 作为二抗 ( 稀释 ),37 孵育 1 h,tbst 洗涤 3 次 ;ECL 显影分析结果 用自制抗体检测 HEK-293 细胞内外源 ΔFosB 的表达 HEK-293 细胞采用 DMEM 高糖培养基,37 5% CO 2 的条件进行常规培养, 转染前夜将细胞均匀接种于六孔培养皿中, 次日待细胞融合度达 90% 时, 将已构建好的 padtrack-cmv-δfosb 超表达载体 转染 HEK-293 细胞, 转染过程按照 Lipofectamine 2000 Reagent 说明书进行 转染试验设立了 padtrack- CMV-ΔfosB 转染组以及未转染的空白对照组 转染 36 h 后, 弃细胞上清液, 胰酶消化后离心收集细胞 PBS 漂洗 2 遍, 加入 100 μl 预冷的 RIPA 裂解液, 冰上放置 30 min, 期间进行振荡使细胞充分裂解 r/min 离心 30 min, 收集上清 将上清进行 SDS-PAGE 电泳,60 V 转膜 2 h,5% 的脱脂奶粉封闭过夜 用自制的 ΔFosB 多克隆抗体为一抗,37 孵育 2 h,tbst 洗涤 3 次 ;HRP 标记的羊抗兔 IgG 作为二抗,37 孵育 1 h,tbst 洗涤 3 次 ;ECL 显影分析结果 山羊 ΔFosB 组织差异表达分析采集关中山羊的乳腺 骨髓 脑髓 垂体 肌肉 心脏 肺 胃和肾组织样, 各剪取约 0.1 g, 液氮中研碎, 加入 500 μl RIPA 裂解液 (50 mmol/l Tris,0.5% 脱氧胆酸钠,0.1% SDS,150 mmol/l NaCl,5 mmol/l EDTA,1% Triton X-100 使用前加 0.5 mmol/l PMSF),4 裂解过夜, r/min 离心 20 min, 收集上清 将上清进行 SDS-PAGE 凝胶电泳,60 V 转膜 2 h,5% 脱脂奶粉封闭过夜 ; 分别用自制的 anti-δfosb 多克隆抗体和 anti-β-actin 抗体 (1 500 稀释 ) 作为一抗,37 孵育 2 h,tbst 洗涤 3 次 ;HRP 标记的羊抗兔 IgG 作为二抗 ( 稀释 ),37 孵育 1 h,tbst 洗涤 3 次 ; ECL 显影分析结果 2 结果 2.1 原核表达载体的构建及鉴定构建的 pet32a-δfosb 原核表达载体酶切后可见 pet32a 载体条带和所插入的 ΔfosB 条带 ( 图 1) 测序结果显示, 山羊 ΔfosB 基因成功插入 pet32a 载体, 原核表达载体 pet-δfosb 构建成功 2.2 重组蛋白 ΔFosB 的表达 pet32a-δfosb 经诱导表达后, 收集菌体进行 SDS-PAGE 分析, 发现诱导后的蛋白在 55 kda 处出现一条带, 其大小与所推测的融合蛋白相对分子量一致 (35 kda 的 ΔFosB 和 20 kda 的标签蛋白 ) 根据 SDS-PAGE 分析,IPTG 的最佳诱导浓度为 0.5 mmol/l,
4 郑惠玲等 : 抗山羊 ΔfosB 基因表达产物抗体制备及应用 1707 图 1 原核表达载体 pet32a-δfosb 的构建及鉴定 Fig. 1 Construction and identification of prokaryotic expression vector pet32a-δfosb. (A) Construction of prokaryotic expression vector pet32a-δfosb. (B) Agarose gel analysis for restriction enzyme treatment of pet32a-δfosb vector. 1: λdna/hind III marker; 2: pet32a-δfosb digested with BamH I and Sal I produced the long fragment of pet32a vector and 750 bp ΔfosB gene; 3: pet32a-δfosb plasmid. 最佳诱导时间为 6 h, 再增加 IPTG 浓度和诱导时间并不能提高表达量 超声破碎细菌, 分别取上清液和沉淀悬浮液进行 SDS-PAGE 分析, 结果表明 : 重组蛋白 ΔFosB 的表达产物主要以包涵体形式存在, 上清液中融合蛋白的表达量极其微小 ( 图 2) 2.3 重组蛋白的纯化诱导表达产物经 SDS-PAGE 分析后, 使用 0.25 mol/l KCl 染色, 切胶纯化,SDS-PAGE 检测纯化结果 结果在 55 kda 处显示一条带 ( 图 3), 与预期目的蛋白大小一致, 所获得的融合蛋白纯度较高, 可用于抗体制备 图 3 重组蛋白 ΔFosB 的纯化 Fig. 3 SDS-PAGE analysis of purification of recombinant protein ΔFosB. 1: low molecular weight protein marker; 2: pet32a-δfosb/bl21, induced; 3,4: purified recombinant ΔFosB. 2.4 多克隆抗体效价检测和特异性分析 ielisa 技术测定制备的多克隆抗血清效价达到 以上 ( 图 4) Western blotting 印迹结果显示, 稀释的自制兔抗羊 ΔFosB 血清, 能够检测到分子量约 55 kda 的融合蛋白 ( 图 5), 说明所制备的兔抗羊 ΔFosB 抗体对原核表达的 ΔFosB 蛋白具有较好的特异性 2.5 用自制抗体检测 HEK-293 细胞内外源 ΔFosB 的表达用 padtrack-cmv-δfosb 转染 HEK-293 细胞, 图 2 SDS-PAGE 检测重组蛋白 ΔFosB 的表达 Fig. 2 SDS-PAGE analysis of expression of recombinant protein ΔFosB. 1: pre-stained protein marker III; 2: precipitate of induced pet32a-δfosb /BL21 after sonication; 3: supernatant of induced pet32a-δfosb/bl21 after sonication; 4: precipitate of uninduced pet32a-δfosb/bl21 after sonication; 5: supernatant of uninduced pet32a-δfosb/bl21 after sonication. 未转染的细胞作为空白对照, 用自制的兔抗羊 ΔFosB 抗体进行 Western blotting 检测 结果如图 6 所示, 过表达 ΔFosB 的细胞有条带, 而空白对照无阳性反应, 说明制备的抗体对细胞内表达的 ΔFosB 有特异性
![作为其稳定存在的成员已备受关注, 在小鼠中的研究表明 [12-15] ΔFosB 参与药物成瘾过程 控制大脑补偿机制 以及调控骨形成和脂肪形成 我们采用 RT-PCR 的方法已经从山羊的乳腺组织克隆出了 ΔfosB 基因, 证明了 ΔFosB 在乳腺中的表达, 为进一步研究 ΔFosB 在乳腺钙代谢中的作用奠定了基础 本研究将克隆得到的山羊 ΔfosB 基因 CDS 区 (Coding](/docs-images/93/118039456/images/5-10.jpg "sequences) 亚克隆到 pet32a 载体上, 优化了载体的表达条件, 分别在 25 30 和 37 条件下加入 0.1 mmol/l 0.5 mmol/l 1 mmol/l 和 1.5 mmol/l IPTG 诱导其在大肠杆菌中表达 2 h 4 h 6 h 和 8 h, 得到了最佳的表达条件 :37,0.")
5 1708 ISSN CN /Q Chin J Biotech December 25, 2010 Vol.26 No.12 图 7 山羊 ΔFosB 组织差异表达检测 Fig. 7 Tissue distribution of dairy goat ΔFosB. 1: pre-stained protein marker; 2: breast; 3: brain; 4: hypophysis; 5: marrow; 6: muscle; 7: heart; 8: liver; 9: spleen; 10: lung. 图 4 多克隆抗体效价的测定 Fig. 4 ielisa analysis of anti-δfosb antibody with recombinant ΔFosB. ELISA plates were coated with recombinant ΔFosB, anti-δfosb antibodies were serial diluted and dispensed, pipetted into the wells. HRP-labeled goat anti-rabbit IgG antibody was used as second antibody. 图 5 Western blotting 检测多克隆抗体的特异性 Fig. 5 Identification of the specificity of ΔFosB polyclonal antibody by Western blotting. 1: pre-stained protein marker; 2: 1:1 000 diluted polyclonal antibodies; 3: 1:500 diluted polyclonal antibody; 4: 1:200 diluted polyclonal antibody. 图 6 用自制抗体检测 ΔFosB 在 HEK-293 细胞内的表达 Fig. 6 Expression of ΔFosB in HEK-293 examined by homemade antibody. 1: HEK-293 cell transfected by padtrack- CMV-ΔfosB; 2: blank control. 2.6 山羊 ΔFosB 组织差异表达检测 Western blotting 结果显示 ΔFosB 在山羊的乳腺 骨髓 脑髓 肌肉 心脏 肝和肺组织中均有表达, 而在垂体 脾脏中没有表达 ( 图 7) 3 讨论 Fos 家族是一种典型的早期 即刻基因, 能被 多种刺激因子诱导快速瞬时表达, 该家族基因编码的亮氨酸拉链蛋白能与 Jun 家族蛋白形成二聚体, 参与调控细胞增殖 分化及转化 ΔFosB 作为其稳定存在的成员已备受关注, 在小鼠中的研究表明 [12-15] ΔFosB 参与药物成瘾过程 控制大脑补偿机制 以及调控骨形成和脂肪形成 我们采用 RT-PCR 的方法已经从山羊的乳腺组织克隆出了 ΔfosB 基因, 证明了 ΔFosB 在乳腺中的表达, 为进一步研究 ΔFosB 在乳腺钙代谢中的作用奠定了基础 本研究将克隆得到的山羊 ΔfosB 基因 CDS 区 (Coding sequences) 亚克隆到 pet32a 载体上, 优化了载体的表达条件, 分别在 和 37 条件下加入 0.1 mmol/l 0.5 mmol/l 1 mmol/l 和 1.5 mmol/l IPTG 诱导其在大肠杆菌中表达 2 h 4 h 6 h 和 8 h, 得到了最佳的表达条件 :37,0.5 mmol/l 诱导表达 6 h 在优化的条件下, 重组蛋白在大肠杆菌中高效表达, 由于难以正确折叠而导致蛋白质聚集从而形成包涵体 [16], 用 8 mol/l 的尿素裂解包涵体获得重组蛋白, 将其与弗氏佐剂混合给兔子皮下多点注射, 免疫 5 次后得到效价高达 的兔抗羊 ΔFosB 多克隆抗血清 Western blotting 检测显示所制备的抗体对于原核表达的 ΔFosB 融合蛋白以及 HEK-293 细胞中超表达的 ΔFosB 蛋白具有特异性反应 进一步将制备的抗体用于组织差异表达检测, 用来检测体内 ΔFosB 的表达情况, 结果表明 ΔFosB 在山羊乳腺 骨髓 脑髓 肌肉 心脏 肝和肺多种组织中有表达, 在垂体 脾脏中没有表达 ΔFosB 蛋白比 FosB 蛋白少了 C 末端转活区 (C-terminal transactivation domain 和 TATA- 结合蛋白结合区 (TATA-binding protein-binding domain), 相比 Δ2ΔFosB 多了 N 末端 Fos 同源区 (N-terminal
6 郑惠玲等 : 抗山羊 ΔfosB 基因表达产物抗体制备及应用 1709 Fos homology domain,fh), 但是它们都具有亮氨酸拉链这个关键功能区 [9] 本研究是以 ΔfosB 基因 CDS 区全序列表达产物作为抗原制备的抗体, 所以理论上也可以和 FosB 以及 Δ2ΔFosB 产生免疫反应 但是在最后的组织差异表达检测中只杂交出了与 ΔFosB 大小一致的一条带, 这很可能是因为 FosB 和 Δ2ΔFosB 不稳定, 在组织中已经降解, 或者因为在这些组织中的表达量过低,Western blotting 检测不到 综上所述, 本研究成功制备了兔抗羊 ΔFosB 多克隆抗体, 可用于 ΔFosB 蛋白的表达水平检测及功能研究 REFERENCES [1] Dobrzanski P, Noguchi T, Kovary K, et al. Both products of the fosb gene, FosB and its short form, FosB/SF, are transcriptional activators in fibroblasts. Mol Cell Biol, 1991, 11(11): [2] Inoue D, Kido S, Matsumoto T. Transcriptional induction of FosB/ΔFosB gene by mechanical stress in osteoblasts. J Biol Chem, 2004, 279(48): [3] Nestler EJ, Barrot M, Self DW. ΔFosB: A sustained molecular switch for addiction. Proc Natl Acad Sci USA, 2001, 98(20): [4] Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, et al. Phosphorylation of ΔFosB mediates its stability in vivo. Neuroscience, 2009, 158(2): [5] Kveiborg M, Chiusaroli R, Sims NA, et al. The increased bone mass in deltafosb transgenic mice is independent of circulating leptin levels. Endocrinology, 2002, 143(11): [6] Kveiborg M, Sabatakos G, Chiusaroli R, et al. ΔFosB induces osteosclerosis and decreases adipogenesis by two independent cell-autonomous mechanisms. Mol Cell Biol, 2004, 24(7): [7] Sims NA, Sabatakos G, Chen JS, et al. Regulating ΔFosB expression in adult tet-off-δfosb transgenic mice alters bone formation and bone mass. Bone, 2002, 30: [8] Sabatakos G, Sims NA, Chen J, et al. Overexpression of ΔFosB transcription factor(s) increases bone formation and inhibits adipogenesis. Nat Med, 2000, 6(9): [9] Ohnishi YN, Sakumi K, Yamazaki K, et al. Antagonistic regulation of Cell-Matrix adhesion by FosB and ΔFosB/Δ2ΔFosB encoded by alternatively spliced forms of fosb transcripts. Mol Biol Cell, 2008, 19(11): [10] VanHouten JN. Calcium sensing by the mammary gland. J Mammary Gland Biol Neopla, 2005, 10(2): [11] Zheng HL, Yuan C, Bao LJ. Cloning and bioinformatics analysis of dairy goat Δfosb cdna. Acta Agric Boreali- Occidentalis Sin, 2009, 18(5): 郑惠玲, 袁超, 包黎娟. 山羊 Δfosb 基因 cdna 的克隆及生物信息学分析. 西北农业学报, 2009, 18(5): [12] Werme M, Messer C, Olson L, et al. ΔFosB regulates wheel running. J Neurosci, 2002, 22(18): [13] McClung CA, Nestler EJ. Regulation of gene expression and cocaine reward by CREB and ΔFosB. Nat Neurosci, 2003, 6(11): [14] Renthal W, Carle TL, Maze I, et al. ΔFosB mediates epigenetic desensitization of the c-fos gene after chronic amphetamine exposure. J Neurosci, 2008, 28(29): [15] Renthal W, Nestler EJ. Epigenetic mechanisms in drug addiction. Trends Mol Med, 2008, 14(8): [16] Wang Z, Ma HQ, Zhang W, et al. The progress of inclusion body isolation and chromatographic refolding, purification methods. China Biotechnol, 2009, 29(7): 王增, 马会勤, 张文, 等. 包涵体蛋白的分离和色谱法体外复性纯化研究进展. 中国生物工程杂志, 2009, 29(7):
材料 方法
生物技术通报 张发洲 杨慧兰 为了构建单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽 真核表达质粒 应用 技术从 株 的基因组中扩增 基因 并连接至真核表达载体 对阳性克隆进行菌落 酶切和测序鉴定后 成功构建了重 组质粒 用 转染试剂盒将重组质粒 转染至 细胞中 并用 及 检测其表达情况 结果显示 基因在 细胞中得到正确表达 真核表达质粒 的构建成功 为进 一步研究 对宿主细胞的影响奠定了基础 单纯疱疹病毒 型 感染细胞多肽
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
:TGF-β bfgf 23 KEY WORDS:transforminggrowthfactor-β ;basicfibroblastgrowthfactor; bonemarrow mesenchymalstemcels;eukaryoticexpressionvector; liposomet
2 ( )208 58 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)208,Vol.58No. TGF-β bfgf,, 2 (., 330006; 2., 5040) : -β (TGF-β ) (bfgf) (BMSCs), SD BMSCs Percol PCR TGF-β bfgf, pcdna3.(+), 3 BMSCs RT-PCR Westernblot
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
pet28a + CD 1 3 ~ 4 NHL 85% ~ % B 2 CD B B B 3-4 CD 5 CD B Rituximab C2B8 CD IgG1 CHO FDA C2B8 Minibody IgG VL VH CH3 Linker VL-VH-CH3 Fc ADCC
35 3 12 9 JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY Natural Science Edition Vol 35 No 3 Sept 12 pet28a + CD 210046 Rituximab VL VH CH3 CD overlap PCR Rituximab VL VH Linker ScFv ScFv IgG1 CH3 IgG1 cdna pet28a
Invitrogen 1.4 pet-gr, ICE-LGR, PCR TA, pmd18-t/gr pet-21a(+) (Nde I Xho I), E. coli DH-5,,,, pet-gr GR ORF cdna, GR, : PU: 5 -GGAATTCCAT
42 6 Vol.42, No.6 2011 11 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA Nov., 2011 南极衣藻 (Chlamydomonas sp. ICE-L) 谷胱 * 甘肽还原酶基因的原核表达及其条件优化 1 1 燏 1 1 2 (1. 524025; 2. 266061) RT-PCR GR ORF cdna, ; IPTG,, pet-gr BL21,
标题
Vol. 36 高 等 学 校 化 学 学 报 No. 5 2015 年 5 月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 摇 摇 摇 摇 摇 摇 886 ~ 892 摇 摇 doi: 10. 7503 / cjcu20140965 一 种 新 的 混 合 斑 精 子 分 离 方 法 伍 贤 军 1,2, 赵 摇 兵 2, 缪 摇 璇
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37 11 215 11 中国预防兽医学报 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Vol. 37 No.11 Nov. 215 doi: 1.3969/j.issn.8-589.215.11.12 张瑛杰 1, 尹杰超 1, 李天鹤 2, 周兵 3, 徐鹏飞 1, 荆燕 1,4, 任桂萍 1*, 李德山 1* (1. 153 2. 49
2004级研究生现代免疫学实验技术结业报告
PCR PCR PCR RT-PCR PCR (Polymerase Chain Reaction,PCR) 80 DNA, DNA PCR PCR PCR DNA PCR -- -- DNA DNA 93 DNA PCR DNA DNA ( ) DNA 55 DNA DNA -- TaqDNA dntp DNA -- -- PCR PCR DNA DNA Y (1 X) n Y DNA X (Y)
基 础 研 究 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No. 07 17 白 球 蛋 白 醇 溶 蛋 白 和 碱 溶 蛋 白 等, 发 现 白 果 中 的 蛋 白 质 主 要 以 清 蛋 白 和 球 蛋 白 为 主, 其 中 白 果 清 蛋 白 具 有 抗 氧 化 和 延 缓 衰 老 等 作
16 李 莹 莹 1, 吴 彩 娥 1, *, 杨 剑 婷 2, 范 龚 健 1 (1. 南 京 林 业 大 学 森 林 资 源 与 环 境 学 院, 江 苏 南 京 210037;2. 安 徽 科 技 学 院 食 品 药 品 学 院, 安 徽 凤 阳 233100) 对 白 果 的 主 要 过 敏 蛋 白 进 行 鉴 定, 并 对 其 过 敏 原 性 进 行 分 析 以 SDS-PAGE 和 Western-Blotting
10 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2012 Vol. 44 No. 4 cantly in the presence of indicating that the resistant protein was not expressed in the
2012 44 4 9 2 2 3 1. 225009 2. 200240 3. 200072 R PCR p215c3lyz R pqe-31 R IPTG Western blotting pqe- p215c3lyz COS- DH5α OD 600 Western blotting p215c3lyz Western blotting R R S852. 4 A 0529-5130 2012
陆睿等 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的检测 05,(0) 7 作用较大 半衰期短的缺点 重组人纤溶酶原 HCG 097丽珠集团丽珠制药厂 胎牛血清 激活剂 rhpaf E K 区缺失体 具有出血副作 SH0070.0HyClone M G80Sigma 用小 半衰期长 溶栓活性高等
生物技术通报 研究报告 IOTECHNOLOGY ULLETIN 05, (0):6- 重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的 检测 陆睿 宋绍征 祁正强 葛欣 邵宾 成勇 江苏省转基因动物制药工程研究中心扬州 5009 摘 要 人组织纤溶酶原激活剂 ht-pa 是临床血栓疾病治疗的主要生物药品应用转基因动物乳腺生物反应器制备已有 报道但重组人纤溶酶原激活剂 rhpa 在转基因动物中表达尚未见报道
<453A5CCAB3C6B7BFC6D1A73131C4EA3134C6DA5C3134C6DA5C3032B7D6CEF6>
227 ELISA 刘 沙 洲 1,2, 桑 小 雪 1, 欧 阳 华 学 3, 雷 绍 荣 3, 白 林 含 1, * (1. 四 川 大 学 生 命 科 学 学 院, 四 川 成 都 610065;2. 成 都 市 食 品 药 品 检 测 中 心, 四 川 成 都 610045; 3. 四 川 省 农 业 科 学 院 分 析 测 试 中 心, 四 川 成 都 610066) 目 的 : 比 较
Microsoft Word tb 于瑞嵩-简报..doc
微生物学通报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Oct. 20, 2018, 45(10): 2183 2190 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.171047 简报 西藏株小反刍兽疫病毒 H 蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备 于瑞嵩 1,2 高位相 1 李凤平
Microsoft Word 赵凯-二校 出4154
6 10 Vol. 6 No. 10 2015 10 Journal of Food Safety and Quality Oct., 2015 赵 1, 凯 2, 贾彦博 3*, 王啸 2, 丁枫芸 2, 肖海龙 3, 黄建萍 3 (1., 310058; 2., 310019; 3., 310022) 摘要 : 目的 ELISA 方法, Balb/c 4, ELISA,,, ELISA 结果,
材料 方法
生物技术通报 姜燕 采用鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 和胶体金标记鼠抗人血红蛋白 单克隆抗体 及对照抗体羊抗鼠 利用双抗体免疫夹心反应原理特异性地结合人血红蛋白抗原 在 内可得到胶体金显色结果的原理研制便潜血单克 隆一步法胶体金检测试卡 用于诊断因各种原因引起的消化道出血疾病 应用杂交瘤技术制备两株鼠抗人血红蛋白 抗 体 方法检测 效价 免疫胶体金技术制备胶体金检测试卡 法检测 效价的结果显示 鼠抗人
标题
环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨
討論
MTT cell viability assay 1 [45] succinate dehydrogenase MTT Kreb s cycle 2 MTT 3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide DMSO 570 nm 15 3 MTT solution MTT Sigma Cat. M-2128 ( PBS ) 5
Microsoft Word - 4张爱玲.doc
生物工程学报 Chin J Biotech 2009, January 25; 25(1): 23-28 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn 2009 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved 动物及兽医生物技术
材料與方法
10-12 250-350 Sprague-Dawley rat ( SD ) 12 ( AM 8 00-PM 8 00 ) (Control group) (HS) (Heat shock group) 15 0 4 6 16 24 (PAE) ( Pulmonary air embolism group) 20 40 (25 l/min) 40 17 20 (HS&PAE) 15 4 16 20
Microsoft Word - 6--李铁松_news_.doc
重组七鳃鳗 PHB2 蛋白的原核表达及纯化 李铁松, 王颖, 高杨, 李庆伟 (, 116081) 摘要 : 为了研究 PHB2 蛋白的生物学活性及后续抗体的制备, 作者以前期构建的 pmd18-t-lm-phb2 质粒为模板, PCR 扩增 Lm-PHB2 基因全长 CDS 区, PCR 产物经 Hind III 和 EcoR I 双酶切后连接至表达载体 pet-32a, 构建重组质粒 pet-32a-lm-phb2
Protein Labeling and Detection
ECL plex Product Specialist 1/ Western Blot 2/ Western Blotting- PI 3/ Western Blotting 1. 2 1 2. 3. 4. Y 3 4 5. 4/ 1. SDS- (SDS-PAGE) SDS ( β- ) --SDS 5/ SDS-PAGE - - - (Tris-HCL ph 6.8) glycine/chloride
Microsoft Word 冯 凡.doc
4 4 Vol. 4 No. 4 2013 8 Journal of Food Safety and Quality Aug., 2013 B 1 冯 凡 1 1,, 许杨 2*, 王丹 1, 雷达 1, 孙澄浩 1 (1., 330047; 2., 330047) 摘要 : 目的 F7 方法 pet22b-f7, E. coli BL21(DE3), 结果 F7 AFB1, ELISA AFB1
SNAT2 mrna SNAT2 mr- NA 2 SNAT SNAT2 12 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT2 SNAT pet28a+ pbk - CMVΔ SNAT2 - HA pbk - CMV -
4 2 5 Vol 42 No 5 2 0 1 3 1 0 Journal of Shanghai Normal UniversityNatural Sciences Oct 2 0 1 3 2SNAT2 1 1 2* 1 200234 2 110016 钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白 2( SNAT2) 属于 SLC38 家族, 参与小的中性氨基酸跨膜转运, 在哺乳动物组织中广泛表达 SNAT2
Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr
PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus
Really Good Antibodies Bethyl 二抗产品册 超过 670 种抗小鼠 兔子 山羊和大鼠的二抗 bethyl.com
Really Good Antibodies Bethyl 二抗产品册 超过 670 种抗小鼠 兔子 山羊和大鼠的二抗 bethyl.com Bethyl 公司 Bethyl Laboratories, Inc. ) 成立于1972年 一直秉承改善生活的理念致力于科学研究的理念 提供高质量的抗体产品 和抗体定制服务 Bethyl所销售的每一个抗体都是在德克萨斯州的蒙哥马利的唯一工厂生产 并且都经过Bethyl
第 期 甘金华等 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 材料与方法 试剂及溶液
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 强力霉素人工抗原的合成与抗体制备 甘金华 邓薇 李进平 艾晓辉 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北荆州 武汉纺织大学环境与城建学院 湖北武汉 采用改进的碳二亚胺两步法将强力霉素半抗原与载体蛋白 连接制备强力霉素 牛血清白蛋白 人工免疫抗原 并用同样方法将强力霉素与载体蛋白 连接制备人强力霉素 卵清白蛋白 人工包被抗原 经紫外扫描分析和动物免疫试验证实 强力霉素人工抗原合成成功
生物技术通报 材料 方法
生物技术通报 高曰文 朱耀明 王艳林 朱晨宇 秦烨 胡汉卿 韩钰 旨在探讨盐酸普鲁卡因 对人结肠癌 细胞 基因甲基化及表达的影响 应用巢式双重 甲基化特异性聚合酶链反应 检测盐酸普鲁卡因处理前后 细胞中 基因启动子的甲基 化水平 逆转录 聚合酶链反应 和蛋白印迹技术观察 细胞内 基因表达情况 检测发现人结肠癌 细胞中 基因存在甲基化 经盐酸普鲁卡因处理能够使 基因甲基化水平下降 和蛋白印迹分析结果显
Microsoft Word - 11吴双林.doc
生物工程学报 Chin J Biotech 2009, November 25; 25(11): 1664-1670 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn 2009 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved
12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL
![12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL](/thumbs/91/106935627.jpg "12 (autophagy),imagej,,, 3 [1-4] (self-eating) Transwelinvasion, 20μmol L -1 LY A549 [5] PI3K/AKT 24h,PBS, [6-8],, ml -1 ( ) 600μL")
( )2017 57 5JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2017,Vol.57No.5 11 LY294002, (, 330006) : LY294002 PI3K/AKT 0 10 15 20 25 30μmol L -1 LY294002(LY294002 ) A549,PBS CCK8 LY294002 A549 ; Westernblot
Microsoft Word gc170117蔡鑫娜
1276 生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology http://journals.im.ac.cn/cjbcn DOI: 10.13345/j.cjb.170117 蔡鑫娜等 / 猪繁殖与呼吸综合征病毒 nsp4 抗体制备与鉴定 August 25, 2017, 33(8): 1276 1283 2017 Chin J Biotech, All rights
Microsoft Word - gc 彭静.doc
生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology DOI: 10.13345/j.cjb.170372 彭静等 / 利用抗原结合多肽嫁接抗体技术制备抗 hcg 单域抗体 Apr. 25, 2018, 34(4): 569 577 2018 Chin J Biotech, All rights reserved 医学与免疫生物技术 569 hcg 彭静, 王琼, 程小玲,
II ABSTRACT Severe acute respiratory syndrome (SARS) was the first severe infectious disease in the 21 century,which was caused by a new coronavirus,n
I SARS 21 SARS-CoV GeneBank SARS-CoV Tor2 PCR N PN422 N 40% SARS N 95% N C N 38 15%~30% SARS N N 39 Western N 30 60aa 160~170aa N Bal b/c 8 39 Western Blot 8 6 2 N N 30 184 301 360 2 2 IgG1 10 6 10 9 M
Microsoft Word - 360145.doc
项 目 批 准 号 81273814 归 口 管 理 部 门 申 请 代 码 收 件 日 期 H2716 360145 y 国 家 自 然 科 学 基 金 委 员 会 资 助 项 目 计 划 书 资 助 类 别 : 面 上 项 目 亚 类 说 明 : 非 连 续 资 助 类 项 目 附 注 说 明 : 项 目 名 称 : 益 气 养 肺 法 拮 抗 bfgf 对 肺 癌 微 环 境 介 导 化 疗
150 微生物学通报 2009, Vol.36, No.1 (systemic lupus erythematosus, SLE), Sm(B B D1), Sm D1, SLE [1], Sm D1 (immunoblot, IBT) (enzyme linked immunosorbent as
![150 微生物学通报 2009, Vol.36, No.1 (systemic lupus erythematosus, SLE), Sm(B B D1), Sm D1, SLE [1], Sm D1 (immunoblot, IBT) (enzyme linked immunosorbent as](/thumbs/88/114888322.jpg "150 微生物学通报 2009, Vol.36, No.1 (systemic lupus erythematosus, SLE), Sm(B B D1), Sm D1, SLE [1], Sm D1 (immunoblot, IBT) (enzyme linked immunosorbent as")
微生物学通报 JAN 20, 2009, 36(1): 149~153 Microbiology tongbao@im.ac.cn 2009 by Institute of Microbiology, CAS 生物实验室 人 SmD1 抗原的酵母真核表达及其初步应用 * 杨湘越吴文冰兰小鹏 ( 350025) 摘要 : 通过 PCR 扩增 Sm D1 基因, 与酵母表达载体 ppic9k 重组, 构建表达质粒
2月5期aa
中 国 农 学 通 报 212,28():2-27 Chinese Agricultural cience Bulletin 血 清 11 型 鸭 疫 里 默 氏 菌 的 分 离 鉴 定 1,2 2, 2, 2, 2, 2, 2, 杨 晓 辉, 程 龙 飞, 陈 红 梅, 施 少 华, 傅 光 华, 万 春 和, 黄 瑜 ( 1 福 建 省 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 研 究 所, 福 州
Microsoft Word - 骆健美.doc
第 30 卷 第 2 期 2015 年 4 月 天 津 科 技 大 学 学 报 Journal of Tianjin University of Science & Technology Vol. 30 No. 2 Apr. 2015 DOI:10.13364/j.issn.1672-6510.20140064 IrrE 重 组 大 肠 杆 菌 的 构 建 和 性 能 分 析 骆 健 美, 郑 媛
马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,
![马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,](/thumbs/42/22971098.jpg "马 丽 媛, 等. 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat 细 胞 凋 亡 及 其 可 能 机 制 1073 力 争 将 茶 油 作 为 食 用 油 的 主 流 品 种 [5] 茶 麸 系 油 茶 果 实 榨 除 茶 油 后 的 废 弃 残 渣, 药 用 名 为 茶 子 饼,")
1072 基 础 研 究 Basic Research www.tumorsci.org 肿 瘤 2011 年 12 月 第 31 卷 第 12 期 TUMOR Vol. 31, December, 2011 DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.12. 004 Copyright 2011 by TUMOR 油 茶 皂 苷 体 外 诱 导 人 白 血 病 Jurkat
细 胞 生 物 学 实 验 指 导 细 胞 生 物 教 研 室 目 录 实 验 一 动 物 细 胞 的 基 本 形 态 观 察 和 显 微 测 量 1 实 验 二 线 粒 体 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 4 实 验 三 液 泡 系 的 活 体 染 色 及 电 镜 照 片 观 察 6 实 验 四 细 胞 生 理 活 动 的 观 察 7 实 验 五 细 胞 组 分 的 化 学 反 应
标题
摇 1524 艾 滋 病 合 并 肺 部 感 染 中 医 证 型 研 究 进 展 综 述 扶 伟 摇 徐 立 然 摇 马 秀 霞 摇 孟 鹏 飞 摇 宋 夕 元 摇 李 亮 平 摇 李 正 摇 丁 雪 摇 邱 荃 摇 杨 超 华 揖 摘 要 铱 摇 艾 滋 病 合 并 肺 部 感 染 的 治 疗 过 程 中 因 其 病 因 复 杂, 临 床 症 状 多 样, 辨 证 分 型 及 临 床 疗 效 评
Microsoft Word gc 刘传志
生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology DOI: 10.13345/j.cjb.140061 刘传志等 / 小鼠 17β-hsd10 的克隆 表达及双抗夹心 ELISA 方法的建立 November 25, 2014, 30 (11) : 1775 1781 2014 Chin J Biotech, All rights reserved 生物技术与方法 1775
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2CCA3BA4542B2A1B6BE52746120496747BFB9CCE5D3EBB1C7D1CAB0A9B7D6C6DAB5C4B9D8CFB52E646F63>
EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 分 期 的 关 系 蔡 永 林, 郑 裕 明, 成 积 儒, 李 军, 莫 永 坤, 钟 青 燕 ( 广 西 梧 州 市 红 十 字 会 医 院, 梧 州 市 肿 瘤 防 治 研 究 所, 广 西 梧 州 543002) 摘 要 : 目 的 探 讨 EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 临 床 分 期 的 关 系 方 法 用 酶
4 : pcdna3.1(+) ;PLV-EF1A-EGFP(2A) 30s,41 30s,72 2min,35 ; Puro ; TG1; (Hu min 1% manembryonickidney293cels); (Ma- din-darbycaninekidneyce
33 4 2017 6 CHINESEJOURNALOF VIROLOGY Vol.33 No.4 June 2017 1# 2#,, 2, 2, 1 3* 1*,, (1., 511436; 2., 510230; 3., 510663) : HEK-293-HA RT-PCR HA, pcdna3.1(+ ), pcdna3.1(+ )-HA pcdna3.1(+)-ha PLV-EF1a-EGFP(2A)Puro
instillation therapy combined with Western medicine can reduce the levels of ALT, TBA, ALP, TBIL, DBIL and GGT, and improve the anti-cmv-igm negative
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i28.4568 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 10 月 8 日 ; 23(28): 4568-4573 ISSN 1009-3079
绎 阴 元元 510515 Caco-2 Caco-2 P 连接
502 南方医科大学学报 J South Med Univ 202;32(4) 基础研究 小鼠前列腺干细胞抗原的原核表达 纯化及抗原活性检测 董金凯 2 罗 津 3 阎瑾琦 2 张 亮 2 高江平 于继云 2 中国人民解放军总医院泌尿外科 北京 00853 2 军事医学科学院基础医学研究所 北京 00850 3 湖南省永州 市人民医院 湖南 永州 425000 摘要 目的 RT-PCR 扩增小鼠前列腺干细胞抗原
380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂
![380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂](/thumbs/43/23114460.jpg "380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂")
中 国 细 胞 生 物 学 学 报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(4): 379-384 http://www.cjcb.org 全 小 麦 啤 酒 酵 母 菌 株 的 诱 变 育 种 及 应 用 研 究 袁 仲 1* 张 百 胜 1 张 慎 举 1 马 绮 云 2 陈 柯 羽 2 ( 1 商 丘 职 业 技 术 学 院 园 林 食 品 加 工 系,
第 33 卷 第 2 期 2010 年 4 月 - 149 - 脱 蛋 白 较 好 的 方 法 是 Sevag 法, 它 是 根 据 蛋 白 质 在 氯 仿 等 有 机 溶 剂 中 变 性 的 特 点, 使 蛋 白 质 变 性 成 胶 状, 此 法 条 件 温 和, 可 避 免 多 糖 的 降 解
- 148 - Drug Evaluation Research Vol.33 No.2 April 2010 植 物 多 糖 的 研 究 进 展 陶 遵 威 1, 郑 夺 1, 邸 明 磊 2, 单 晓 菊 1 天 津 市 医 药 科 学 研 究 所, 天 津 300020; 2 天 津 中 医 药 大 学, 天 津 300073 2 摘 要 多 糖 是 由 单 糖 连 接 而 成 的 多 聚 物,
1444 微生物学通报 2008, Vol.35, No.9, β- [1] [2], [3 5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] [12] [13], 1992, Nakamura T [14], 2003, [15] Subtilisin DFE, 16S rdna, (Mi
![1444 微生物学通报 2008, Vol.35, No.9, β- [1] [2], [3 5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] [12] [13], 1992, Nakamura T [14], 2003, [15] Subtilisin DFE, 16S rdna, (Mi](/thumbs/93/113515430.jpg "1444 微生物学通报 2008, Vol.35, No.9, β- [1] [2], [3 5] [6] [7] [8] [9] [10] [11] [12] [13], 1992, Nakamura T [14], 2003, [15] Subtilisin DFE, 16S rdna, (Mi")
微生物学通报 SEP 20, 2008, 35(9): 1443~1449 Microbiology tongbao@im.ac.cn 2008 by Institute of Microbiology, CAS 研究报告 纤溶酶产生菌 藤黄微球菌的筛选 鉴定及纤溶酶基因的克隆 1, 2 肖璐 2 张仁怀 2* 张义正 (1. 411201) (2. 610064) 摘要 : 通过血粉培养基富集 纤维蛋白培养基筛选,
10384 200326107 UDC Cloning and Expression of Genes from Venom Gland of Bungarus multicinctus 2006 7 1 2 V 1 1 2 C 4 α- P22-A31 0 11 1 11 2 11 13 α- 13 2 α- 14 3 α- 15 4 α- 15 17 α cdna 21 1 21 2 23 24
mm ~
16 3 2011 6 Vol 16 No 3 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Jun 2011 1 2 3 1 150040 2 150040 3 450052 1 3 4 > 1 ~ 3 > > U414 A 1007-2683 2011 03-0121- 06 Shrinkage Characteristics of
5-25袁宏钧.indd
第 24 卷 第 5 期 2015 年 5 月 碘 131 doi:10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.1005-6947.2015.05.005 Chinese Journal of General Surgery, 2015, 24(5):643 647. Chinese Journal of
932 SUZHOU UVIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE E1A inhibite H22 ascitic hepatoma obviously and almost has no side effect on immune functio
2010 30 5 931 Ad-E1A 215123 Ad-E1A BALB /c Ad-E1A RT-PCR E1A H22 BALB /c H22 PBS Ad-E1A 5-Fu 7 10 9 pfu /ml Ad-E1A Ad-E1A 5-Fu 66. 7% 68. 8% P > 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu P < 0. 01 P < 0. 05 Ad-E1A PBS 5-Fu
- 14 - Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 料 ), 山 西 皇 城 相 府 药 业 有 限 公 司, 批 号 20111003 ( 人 口 服 推 荐 剂 量 为 每 日 3 次, 每 次 4 粒, 成 人 体 质 量 按 60
Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 - 13 - 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治 疗 作 用 研 究 * 刘 聪, 岳 永 花, 郝 旭 亮 山 西 省 中 医 药 研 究 院, 山 西 太 原 030012 摘 要 : 目 的 探 讨 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治
1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
标题
第 39 卷第 6 期 Vol. 39 No. 6 摇 摇 摇 摇 中南医学科学杂志 Journal of Medical Science in Central South China 2011 年 11 月 Nov. 2011 沙眼衣原体 T 细胞抗原 CT143 原核表达 纯化及免疫活性鉴定 陆春雪1,吴移谋1,彭摇 波2,刘良专1,蔡恒玲1,李忠玉1 (1. 南华大学 微生物与免疫学教研室,湖南
张红丽 等 部分功能域基因的原核表达与分析 第６期 发表序列 ＡＹ８１９６５０ 同源性为 １００ 与国外 １０ 株 同源性为 ９８畅 ８ 有 １３ 个碱基发生了突 变 其中 ４ 个是有意义的突变 这 ４ 个有意义的 突变分别为第 ２５７ 位 Ｔ Ｃ 第 ５０５ 位 Ａ Ｃ 第 ９０８ 位 Ａ Ｇ 第 １０１２ 位 Ｇ Ｃ 图 ４ 这些差异可 能是捻转血矛线虫株间存在地域差异所致 ２畅 ５ ＨＰＳ 原核表达与鉴定
相 关 报 道 近 年 来 临 床 上 运 用 多 种 针 灸 疗 法 治 疗 肥 胖 及 其 引 起 的 并 发 症, 如 高 脂 血 症 糖 尿 病 高 血 压 及 痛 经 等, 均 获 得 满 意 疗 效. caused by sedentary lifestyle and genetic f
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v24.i5.815 世 界 华 人 消 化 杂 志 2016 年 2 月 18 日 ; 24(5): 815-820 ISSN 1009-3079 (print)
物理学报 Acta Phys. Sin. Vol. 62, No. 14 (2013) 147802 叠 [4]. PET 设备最重要的部件就是探测器环, 探测 备重建图像具有减少数据插值的优势. 器环的性能直接影响 PET 的成像能力. 探头与探头 之间得到的符合直线叫做投影线. 所有的投影线在
![物理学报 Acta Phys. Sin. Vol. 62, No. 14 (2013) 147802 叠 [4]. PET 设备最重要的部件就是探测器环, 探测 备重建图像具有减少数据插值的优势. 器环的性能直接影响 PET 的成像能力. 探头与探头 之间得到的符合直线叫做投影线. 所有的投影线在](/thumbs/41/22573722.jpg "物理学报 Acta Phys. Sin. Vol. 62, No. 14 (2013) 147802 叠 [4]. PET 设备最重要的部件就是探测器环, 探测 备重建图像具有减少数据插值的优势. 器环的性能直接影响 PET 的成像能力. 探头与探头 之间得到的符合直线叫做投影线. 所有的投影线在")
数 据 插 值 对 正 电 子 发 射 断 层 成 像 设 备 的 图 像 重 建 影 响 的 研 究 * 杨 昆 刘 新 新 李 晓 苇 ( 河 北 大 学 物 理 学 院, 保 定 071000 ) ( 2013 年 1 月 30 日 收 到 ; 2013 年 4 月 9 日 收 到 修 改 稿 ) 正 电 子 发 射 断 层 扫 描 (positron emission computed tomography,
114 () ml,60 2 g 20 ml, 120 r/ min,12. 3,, 3, ( Fluroscein diacetate, FDA). 2 mg FDA 1 ml, 50,0. 04 g/ L. FDA 1 1, 10 min,,., = / 100
48 1 () Vol. 48 No. 1 2009 1 Journal of Xiamen University (Nat ural Science) Jan. 2009 1, 1 3, 2 (1.,, 361005 ; 2., 730000) :, (DMSO). :DMSO,. 75 mmol/ L DMSO 48 h,, 1. 6 1. 8 ;10mol/ L 48 h,,;,. : ; ;
Microsoft Word - 16周同.doc
生物工程学报 Chin J Biotech 2009, November 25; 25(11): 1697-1704 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn 2009 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved
Method
PfNPC 5% O 10% AB 4, RPMI 5% CO 2 37 5 100% 30 sec 10% Giemsa 15 mins 100x oil-immersion lens parasitemia parasitemia 10 15% Parasitemia multiple invasion 4 Panel A B C parasitemia parasitemia 2% *Parasitemia
Vol. 22 No. 4 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Aug GPS,,, : km, 2. 51, , ; ; ; ; DOI: 10.
22 4 2017 8 Vol. 22 No. 4 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Aug. 2017 150080 GPS,,, : 27. 36 km, 2. 51, 110. 43, ; ; ; ; DOI: 10. 15938 /j. jhust. 2017. 04. 015 U469. 13 A 1007-2683
2011 2011 A B A 18 A 2006 2007 2008 2007 2007a 2007b 2007 2010 2010 2011 2009 2007 2011 23
A 18 * A 18 A D035. 1 A 1674-2486 2015 02-0022 - 25 Bennett 1976 Cell 1977 Whyte 1974 * chennabo@ mail. sysu. edu / 12YJC840048 13YJA810002 985 22 2011 2011 A B A 18 A 2006 2007 2008 2007 2007a 2007b 2007
Microsoft Word doc
5 7 Vol. 5 No. 7 2014 7 Journal of Food Safety and Quality Jul., 2014 HTS-ELISA 甄玉萍, 裴世春 *, 高建伟 (, 161006) 摘要 :,,,,, HTS-ELISA, (Trailing), 关键词 : - ; ; ; Progress of monoclonal antibody secretion hybridoma
104 18, 1 1.1, (500±20) g, 1, ; BALB/c 1.2 Varian Cary 50 ; Bio-Rad model 550, BioRad, BioRad IgG(Goat-IgG) Sigma ; CNBr Sepharose 4B Amersham-Pharmac
2011 1, 18(1): 103 109 Journal of Fishery Sciences of China 研究论文 DOI: 10.3724/SP.J.1118.2011.00103 许娜娜 1,2, 钱冬 2 1, 赵海泉 1., 230001; 2., 313001 摘要 : (Lateolabrax japonicus) (Ig), -IgG(Goat-IgG), A Goat-IgG
Microsoft Word - 793-797 tb20150504赵宏宇s-高校教改纵横.doc
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Apr. 20, 2016, 43(4): 793 797 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150504 高 校 教 改 纵 横 生 物 工 程 专 业 发 酵 课 程 群 建 设 探 索 * 赵 宏 宇
AFLP % 1. 1 DNA 5 RAPD DNA 0. 1g % ~ ph 6 10 DNA 9 40μl TE SSR STS 20ng /L
2012 13 2 201-206 Journal of Plant Genetic Resources / 071001 41 SSR 21 SSR 41 52 2 ~ 4 2. 5 Shannon 0. 21 ~ 1. 40 0. 73 5. 54 3 7 9 13. 16% ~ 186. 49% 5. 48 6 11 SSR Genetic Diversity of Peanut Arachis
untitled
20 1 2010 10 Vol.20 Special 1 The Chinese Journal of Nonferrous Metals Oct. 2010 1004-0609(2010)S1-s0127-05 Ti-6Al-4V 1 2 2 (1. 710016 2., 710049) 500~1 000 20 Ti-6Al-4V(TC4) TC4 800 TC4 800 TC4 TC4 800
基于因子分析法对沪深农业类上市公司财务绩效实证分析
山 东 农 业 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ),2014,45(3):449-453 VOL.45 NO.3 2014 Journal of Shandong Agricultural University (Natural Science Edition) doi:10.3969/j.issn.1000-2324.2014.03.024 基 于 因 子 分 析 法 对 沪 深 农 业
2015,35(4) 龚隆财等 :ctni linker TnC 融合蛋白的原核表达及鉴定 49 免疫反应鉴定, 表明重组表达的 ctni linker TnC 融合蛋白具有较好的免疫原性, 保存了 ctni 和 ctnc 单体的天然结构, 有望成为天然 ctni TnC 复合物的替代物, 为下一步
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2015,35(4):48 53 DOI:10.13523/j.cb.20150407 ctni linker TnC 融合蛋白的原核表达及鉴定 龚隆财 罗镇明 杨雁青 王振宇 向军俭 (1 暨南大学广东省分子免疫与抗体工程重点实验室广州 510632) 王 宏 (2 广州市疾病与食品安全免疫学快速检测重点实验室暨南大学分室广州 510632)
< F63756D656E D2D796E2DB9A4D7F72D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA31C6DA2D30302DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A D31A3A92E6D6469>
绎 阴 元元 / 100102 MCAT MCAO 84~333 mg kg -1 167 333 mg kg -1 MCAT 84 167 mg kg -1 MCAT 27% 37% 84~333 mg kg -1 MCAT 21%~ 32% MCAO LDH 10%~ 12% MDA 28%~38% SOD 15%~36% GSH 14%~36% doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2013.01.016
Microsoft Word - _6-15_--CCMP93-CT-107.doc
Yearbook of Chinese Medicine and Pharmacy, 23(6),303-320,2005 中 醫 藥 年 報 第 23 期 第 6 冊 編 號 :CCMP93-CT-107 補 中 益 氣 湯 抑 制 多 種 惡 性 細 胞 腫 瘤 生 長 機 轉 的 體 外 細 胞 與 肺 氣 虛 老 鼠 模 型 之 先 驅 研 究 沈 建 忠 長 庚 大 學 中 醫 系 摘 要
HGC27 MKN45 SGC7901 MGC803 BGC823 AGS GES μl ATCC RPMI X F12K Sigma SDS-PAGE PBS 4 d CCK-8 Tris-base Biosharp 10% CCK μ
516 1002-0217 2017 06-0516 - 05 3 1,2, 1, 1, 1 1. 210029 2. 244000 3 RT-PCR Western-blot RNA CCK-8 Western-blot P < 0. 05 P < 0. 001 LC3Ⅱ P < 0. 001 P62 P < 0. 001 3 R 735. 2 A DOI 10. 3969 / j. issn.
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~
GB 15973—1995麻风病诊断标准及处理原则
炭 疽 诊 断 标 准 及 处 理 原 则 前 言 GB 17015 1997 炭 疽 (Anthrax) 是 由 炭 疽 芽 孢 杆 菌 (Bacillus anthracis) 引 起 的 一 种 人 与 动 物 共 患 传 染 病, 主 要 存 在 于 食 草 动 物 和 牲 畜 群 落 之 中, 并 能 造 成 环 境 的 广 泛 污 染 由 于 炭 疽 芽 孢 具 有 对 外 界 环 境
PCA+LDA 14 1 PEN mL mL mL 16 DJX-AB DJ X AB DJ2 -YS % PEN
21 11 2011 11 COMPUTER TECHNOLOGY AND DEVELOPMENT Vol. 21 No. 11 Nov. 2011 510006 PEN3 5 PCA + PCA+LDA 5 5 100% TP301 A 1673-629X 2011 11-0177-05 Application of Electronic Nose in Discrimination of Different
材料 方法 载体构建 转基因植株的获得
生物技术通报 唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 邱德文 通过根癌农杆菌 介导转化法 将含有激发子基因 的植物表达载体 转化三生烟 获得了转基因烟草植株 用 检测确认了阳性转化株 用 杂交 和 杂交进一步证实了 基因的整合 转录和表达 对 代转基因阳性株进行 接种试验 结果显示 与非转基 因对照相比 表达 的烟草叶片枯斑数量减少 表明蛋白激发子基因 的表达提高了转基因烟草对 的抗性 激发子 基因 烟草 转化 材料
13期
中 国 农 学 通 报,9():- Chinese Agricultural Science Bulletin 药 百 合 种 子 萌 发 及 染 色 体 倍 性 检 测 吴 昀, 马 怡 迪, 张 琳, 夏 宜 平 ( 浙 江 大 学 农 业 与 生 物 技 术 学 院 园 艺 系 / 农 业 部 园 艺 植 物 生 长 发 育 与 品 质 调 控 重 点 开 放 实 验 室, 杭 州 ) 摘 要
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
θ 1 = φ n -n 2 2 n AR n φ i = 0 1 = a t - θ θ m a t-m 3 3 m MA m 1. 2 ρ k = R k /R 0 5 Akaike ρ k 1 AIC = n ln δ 2
35 2 2012 2 GEOMATICS & SPATIAL INFORMATION TECHNOLOGY Vol. 35 No. 2 Feb. 2012 1 2 3 4 1. 450008 2. 450005 3. 450008 4. 572000 20 J 101 20 ARMA TU196 B 1672-5867 2012 02-0213 - 04 Application of Time Series
國防大學國防醫學院生理學研究所碩士論文
1. 6-8 Lewis 20 5 4 2. (dark adaptation) 24 (5A) 3. 24 (6) 1, 6, 12, 24 800-900 lux (dark recovery) 24 (5B) 1. 6-8 Lewis 20 5 4 2. (dark adaptation) 24 (5A) 3. 24 1, 6, 12, 24 800-900 lux (dark recovery)
Microsoft Word - 林文晟3.doc
台 灣 管 理 學 刊 第 8 卷 第 期,008 年 8 月 pp. 33-46 建 構 農 產 運 銷 物 流 中 心 評 選 模 式 決 策 之 研 究 林 文 晟 清 雲 科 技 大 學 企 業 管 理 系 助 理 教 授 梁 榮 輝 崇 右 技 術 學 院 企 業 管 理 系 教 授 崇 右 技 術 學 院 校 長 摘 要 台 灣 乃 以 農 立 國, 農 業 經 濟 在 台 灣 經 濟
% 8. 48% 3 80 Alcalase Novozymes Alcalase 2. 4 L Bacillus licheniformis 2. 4 AU /g 1. 2 Hitachi S-4700 JEOL JEM-1200EX Olympus Bu
2011 33 6 1117-1121 http / /xuebao. jxau. edu. cn Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E - mail ndxb7775@ sina. com * 311400 Alcalase 2. 4 L TS225. 1 + 6 A 1000-2286 2011 06-1117 - 05 A Study on
+
~ 1 ~ ~ 2 ~ 1-1 UHPLC-SEC 法对治疗性抗体的分析 TSKgel UP-SW3 UHPLC HPLC A TSKgel UP-SW3 2 μm (4.6 mm ID. 15 cm B UHPLC-SEC 1.7 μm (4.6 mm ID. 15 cm mmol/l (ph 6.7 + 2SO4 mmol/l Na +.5 % NaN3.35 ml/ 25 UV 28 nm 5
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗
1338 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 九 味 肝 泰 胶 囊 对 高 脂 饮 食 诱 导 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 陈 菲 1 2,, 艾 国 3, 盛 柳 青 1, 麻 佳 蕾 1, 黄 正 明 1. 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院, 浙 江 金 华
United Nations ~ ~ % 2010
42 3 2018 5 Vol. 42 No. 3 May 2018 38 Population Research 2014 60 3% ~ 4% 10% 60 +
Microsoft Word 马 姜-出3355
6 9 Vol. 6 No. 9 2015 9 Journal of Food Safety and Quality Sep., 2015 马 姜 1, 高 原 1*, 王 红 静 2 (1.,, 100089; 2. ( ), 100080) 摘 要 : 目 的, 方 法 HORIBA LA-950 结 果,, 结 论, 关 键 词 : ; ; ; Application of particle
< F63756D656E D2D796E2D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D C4EA2DB5DA37C6DA2D30352DD6D0D2BDD1D0BEBF2E6D6469>
1. 530011 2. 410007 KEGG HMDB metpa 9 15 CoA P 约 0.05 CoA CoA doi: 10.11842/wst.2014.07.029 R256.2 A [1~4] GC-MS metpa KEGG Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes HMDB The Human Metabolome Database [5]
Ps22Pdf
2007, 29 (1 ) : 74 78 Acta Botanica Yunnanica AOX) 1, 3, Moore A L 2, 3, 3 (1, 363005; 2 School of Biological Sciences, University of Sussex, BN1 9QG UK; 3, 361005 ) : ( Alternative Oxidase, AOX), Q, 4
1 MCF-7 VEGF spss 20 5 ~ 6 h Cck-8 6 h r 2 = Cck-8 6 h 450 nm v Cck-8 v = h 450 nm 3 A = A - A A r 2 Cck -8 Mcf-7 1
42 1 Vol 42 No 1 2018 1 Journal of Jiangxi Normal University Natural Science Jan 2018 1000-5862 2018 01-0100-06 MCF-7 VEGF 1 2 1 1 1 1* 1 570228 2 70102 Mcf -7 Cck-8 TUNEL- DAPI Cck-8 Cck-8 TUNEL-DAPI
Microsoft Word gc 关晓宇.doc
44 生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology DOI: 10.13345/j.cjb.160221 关晓宇等 / 抗鸡白细胞介素 4 单克隆抗体的制备及鉴定 January 25, 2017, 33(1): 44 54 2017 Chin J Biotech, All rights reserved 动物及兽医生物技术 4 关晓宇, 徐志超, 王永强, 李晓齐,
助 剂 改 善 其 止 血 效 果 1 实 验 1.1 原 料 和 试 剂 家 蚕 蛹 经 过 提 取 蛹 油 蛋 白 质 后 剩 余 的 残 渣 ( 主 要 成 分 为 蛹 皮 ), 烘 干 除 杂 粉 碎 后 待 用 ; 壳 聚 糖 ( 成 都 市 科 龙 化 工 试 剂 厂 ), 脱 乙 酰
研 究 与 技 术 蚕 蛹 壳 聚 糖 复 合 止 血 材 料 的 制 备 及 凝 血 性 能 初 探 陈 超, 单 其 艳, 杨 铭, 蓝 广 芊, 吴 大 洋 ( 西 南 大 学 纺 织 服 装 学 院, 重 庆 400716) 摘 要 : 探 讨 以 蚕 蛹 壳 聚 糖 (CS) 和 明 胶 (GEL) 为 主 要 原 料 制 备 复 合 止 血 材 料 的 工 艺 及 凝 血 效 果 首 先
Microsoft Word 熊波-二校
6 3 Vol. 6 o. 3 2015 3 Journal of Food Safety and Quality Mar., 2015 * 熊波, 吴胜泽, 苏焕斌, 张燕, 刘辉 (, 528300) 摘要 : 目的 (sildenafil, SD) 方法 (SDH) (SDH-BSA),, SD, 结果 SD, 3.8 10 5, 0.02~3.8 ng/ml,, 结论 SD, SD 关键词
1 13 1. 2. 2 1 H NMR 谱 的 测 定 1 H NMR 20 6 VARIAN INOVA - 400 MHz 7 [9] 1. 2. 3 相 溶 解 度 法 测 定 < 0. 01 mm MTX 15 3 Q 7 5 10 15 20 25 mg 20 ~ 30 mm β - 1
![1 13 1. 2. 2 1 H NMR 谱 的 测 定 1 H NMR 20 6 VARIAN INOVA - 400 MHz 7 [9] 1. 2. 3 相 溶 解 度 法 测 定 < 0. 01 mm MTX 15 3 Q 7 5 10 15 20 25 mg 20 ~ 30 mm β - 1](/thumbs/42/22814918.jpg "1 13 1. 2. 2 1 H NMR 谱 的 测 定 1 H NMR 20 6 VARIAN INOVA - 400 MHz 7 [9] 1. 2. 3 相 溶 解 度 法 测 定 < 0. 01 mm MTX 15 3 Q 7 5 10 15 20 25 mg 20 ~ 30 mm β - 1")
32 1 12 ~ 16 2013 Journal of Mountain Agriculture and Biology * 黄 英 1, 马 艳 辉 2, 王 娟 2, 陶 朱 2, 薛 赛 凤 2 2, 祝 黔 江 1. 550025 2. 550025 以 七 元 瓜 环 为 主 体, 抗 癌 药 物 甲 氨 蝶 呤 为 客 体, 利 用 1 H NMR 技 术 和 紫 外 可 见 吸 收
林学 园艺
中国农学通报 2015,31(10):153-157 Chinese Agricultural Science Bulletin 蚬壳花椒资源繁育与有效成分研究进展 杨 辉 李 猛 王 平 孙吉康 代明龙 中南林业科技大学生命科学与技术学院 长沙 410004 摘 要 总结了蚬壳花椒的一般特性及生长发育特征 地理分布差异 组织培养 扦插嫁接 有性繁育 遗 传多样性分析 药用成分的种类 有效成分的分离纯化方法
典型自编教材汇总
江 苏 大 学 食 品 与 生 物 工 程 实 验 中 心 典 型 自 编 实 验 教 材 汇 总 目 录 1. 分 子 生 物 学 与 基 因 工 程 实 验 教 程 ( 中 国 轻 工 业 出 版 社 ).1 2. 食 品 工 程 原 理 ( 化 工 原 理 ) 实 验 指 导 书 ( 讲 义 )..20 3. 仪 器 分 析 实 验 指 导 书 ( 讲 义 ).58 4. 植 物 生 理 学
细胞凋亡检测 doc
[ - 1 - ] cell apoptosis detection BMS306FI rh Annexin V FITC KIT 300 test 5000 ANNEXIN V rh Annexin V FITC KIT 200 test 4880 BMS306FI/100T rh Annexin V FITC KIT 100 test 2850 BMS306FI/c rh Annexin V FITC
16 31, %, 15 % 1949 ( 1), : 4 8, ;, , , 5, , 5. 05, 400kg,
31 2 2007 3 Vol1 31, No12 March 2007 15 Population Research,,, ; 2020 420 435 kg, 18 14136 ; 450 kg, 14173,,,, :, ;, ; : ; ;,, :100101 21 20,,, (2010 2020 2030 2040 ),,,,, (2020 ) (2030 2040 ), 1 1. 1