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1 第 9 卷第 4 期食品安全质量检测学报 Vol. 9 No 年 2 月 Journal of Food Safety and Quality Feb., 2018 免疫分析技术在乳及乳制品抗生素类兽药残留检测中的应用李小会, 李海星, 段亚军 *, 赵军妮, 赵三军 ( 蒙牛乳业 ( 宝鸡 ) 有限公司, 宝鸡 ) 摘要 : 为了预防与治疗乳牛疾病, 抗生素类兽药被广泛应用于乳牛的饲养过程中而滥用抗生素导致牛奶中抗生素残留超出最大允许残留量, 不仅会对牛奶品质造成影响, 而且可能会危害到牛奶饮用者的身体健康因此, 如何快速准确地检测乳与乳制品中抗生素类兽药残留是乳品检测行业和企业亟需解决的问题本文主要介绍了牛乳中兽药残留的来源危害及其现状, 阐述了酶联免疫分析技术胶体金免疫层析技术的检测原理及其在应用过程中所具有的不同特点, 最后对 2 种方法的优势与不足进行简要总结, 并对免疫分析法在乳与乳制品抗生素类兽药残留检测中的应用前景做出展望关键词 : 乳 ; 乳制品 ; 兽药 ; 残留 ; 免疫分析 Application of immunoassay technology in the detection of veterinary drug residue of milk and dairy products LI Xiao-Hui, LI Hai-Xing, DUAN Ya-Jun *, ZHAO Jun-Ni, ZHAO San-Jun (Mengniu Dairy (Baoji) Co., Ltd., Baoji , China) ABSTRACT: In order to prevent and treat cow disease, antibiotic veterinary drugs are widely used in the feeding process of dairy cattle breeding. However, the misuse of antibiotics leads to the excessive residual amount of antibiotics in milk, which not only affects the quality of milk, but also may harm the health of the milk drinkers. Therefore, how to quickly and accurately detect the antibiotic veterinary drug residues in milk and dairy products is an urgent problem for dairy testing industry and enterprises. This article mainly introduced the sources and harmfulness of veterinary drug residues in milk and its present situation, described the detection principle of the enzyme-linked immunoassay technology and colloidal gold immune chromatography technique and its different characteristics in the application process. Finally, this paper summarized the advantages and disadvantages of the 2 methods and prospected the application of immumoassay in the detection of veterinary drug residue in milk and dairy products. KEY WORDS: milk; milk products; veterinary drug; residues; immunoassay 1 引言乳及乳制品是人类尤其是婴幼儿的重要营养来源, 其质量安全受到了国家相关部委及社会各界越来越多的关注乳及乳制品中抗生素残留不仅对乳的品质有很大的影响, 对长期饮用者相当于长期服用小剂量抗生素 [1], 危害饮用者身体健康在国际食品贸易中也常因抗生素残留问题引发国际间贸易争执和摩擦事实上, 动物性食品中兽 * 通讯作者 : 段亚军, 检验工程师, 主要研究方向为食品检验分析 duanyajun@mengniu.cn *Corresponding author: DUAN Ya-Jun, Test Engineer, Mengniu Dairy (Baoji) Co., Ltd., Baoji , China. duanyajun@mengniu.cn

2 第 4 期李小会, 等 : 免疫分析技术在乳及乳制品抗生素类兽药残留检测中的应用 777 药残留已经成为一个非常重要的公共卫生安全问题 [2-4], 因而提升抗生素残留的检测技术, 开发快速准确灵敏度高的抗生素检测方法是保证乳品质的关键 2 乳中兽药残留的来源危害及其现状 2.1 兽药残留的来源乳中兽药残留的主要来源有 : (1) 对乳牛用药不当或不注意安全挤奶时间, 尤其是使用乳房灌注法治疗乳腺炎, 易造成牛乳中抗生素残留据调查, 我国一般奶牛场中奶牛乳腺炎等疾病的患病率在 30% 左右 [5,6] (2) 为了预防疾病, 向牛饲料中添加饲料添加剂, 其中含有一定比例的抗生素 (3) 一些不法交奶户在高温季节为防止乳的酸败, 往往向生乳中掺杂各种抗生素 [7] 2.2 兽药残留的危害我国 1990 年 11 月颁布的乳与乳制品管理办法第 4 条明确规定 : 乳牛在应用抗菌素期间和停药后 5 d 内的乳汁不得供食用 [8] 2001 年 9 月农业部发布了无公害食品生鲜牛奶行业标准, 这个标准明确规定了生鲜牛乳的卫生指标抗生素不得检出 [9] 在欧美国家多年前即以法规禁止抗生素残留超限量的牛奶上市对抗生素有过敏体质的人服用残留抗生素的牛乳后, 会发生过敏反应, 如皮疹过敏性休克等, 长期饮用不仅会抑制人体肠道中正常的敏感菌群的生长, 而且日积月累会产生毒性作用 [10,11] 氨基糖苷类抗生素可能导致肾毒性和耳毒性过敏反应病原菌耐药性增加 ; 大环内酯类抗生素可能引起腹痛腹胀恶心呕吐及腹泻等消化系统疾病甚至引起肝功能异常胆汁淤积等肝毒性疾病 ; 四环素类抗生素可对骨和牙组织造成损伤, 学龄前儿童用药可致牙齿黄染, 釉质发育不全, 俗称四环素牙 [12] 氯霉素类药物是一种广谱抗菌药, 它会抑制骨髓造血功能, 引起再生障碍性贫血 [13,14] 我国在 2000 年将氯霉素列为禁用药物, [15] 覃志英等对消毒牛奶的调查表明, 消毒牛奶氯霉素检出率在 50% 以上对于乳品企业来说, 细菌含量是对牛乳定级的一个重要指标, 乳中抗生素的存在会抑制细菌的正常繁殖, 造成收乳人员对牛乳质量的误判, 不仅给企业的经济利益造成影响, 而且会给产品的质量安全带来极大的危害从乳品加工角度来看, 牛乳中抗生素残留可导致牛乳的发酵不能正常完成或出现异常发酵, 可严重影响干酪黄油发酵乳的发酵和后期风味的形成 [16,17] 2.3 兽药残留的现状国内主要使用氨基糖苷类 β- 内酰胺类大环内酯类四环素类氟喹诺酮类磺胺类等抗生素药物来解决牛体疾病问题, 奶牛用药后经过一段时间的休药期, 待牛乳中兽药残留检测合格后才可投入使用我国乳及乳制品中抗生素残留问题仍未能得到有效解决, 需要加强对牛奶生产的管理及开发准确有效的检测方法目前企业多使用酶联免疫法和胶体金试纸条法来检测生乳中的抗生素兽药残留 3 免疫分析技术免疫分析法分为酶联免疫分析 (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 放射免疫分析 (radioimmunoassay, RIA) 化学发光法及固相免疫传感器荧光免疫分析 (fluoroimmunoassay, FIA) 等 [18], 现主要介绍基于抗原抗体特异性识别原理的酶联免疫吸附法胶体金免疫层析技术及其在兽药残留检测中的应用概况 3.1 酶联免疫分析法在兽药残留检测中的应用酶联免疫吸附分析方法始创于 1971 年, 瑞典学者 Engvall 和 Perlmann, 荷兰学者 Van Weeman 和 Schuurs 分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法 [19] 其原理是把抗原抗体免疫反应的特异性和酶的高效催化作用结合起来, 将待测目标物通过固定的抗体或抗原的特异性捕捉而结合于固相支持物表面, 再将酶标记的抗体或抗原与之反应, 利用酶在液相反应中催化底物显色来达到测定待测目标物含量的目的 [20] 酶联免疫吸附分析法 (ELISA) 主要分为直接法竞争法间接法双抗夹心法等 [21], 其中竞争法广泛的应用于 [22,23] 牛乳中兽药残留的检测中如 Watanabe 等建立了直接竞争 ELISA 法检测 6 种生物基质中卡那霉素以及双氢链霉 [24] 素的含量, Jeon 等用间接竞争 ELISA 法, 生物素 - 链亲和素信号放大系统, 测定了牛奶中残留的四环素磺胺及其 [25] 衍生物是常用的广谱抗菌兽药, 吴定等以牛血清蛋白和卵蛋白 2 种不同的载体包被抗原, 建立牛乳中磺胺甲基嘧 [26] 啶的 ELISA 测定 Loomans 等等用新霉胺作为免疫原建立 ELISA 方法同时检测牛奶中的庆大霉素卡那霉素和新 [27] 霉素张可煜等制备的检测组织中氟喹诺酮类药物残留的酶联免疫法方法, 检测限为 2 ng/ml 酶联免疫分析法迅速发展, 使其被广泛应用到乳制品中抗生素残留的检测中众多开发商研制开发出了抗生素残留检测的 ELISA 试剂盒 [28] ELISA 试剂盒主要由包被抗原或抗体的固相载体酶标记的抗体或抗原酶的底物终止液组成其制备及选材上均有较高要求, 在综合各项性能并保证检测结果准确可靠的前提下, 固相载体的选择必须具备吸附力强能保持抗原或抗体的活性不参与化学反应这 3 个条件, 目前国际国内各 ELISA 试剂盒生产厂家大多选择微孔型聚乙烯聚苯乙烯聚丙烯等高分子材料作为固相载体将抗原或者抗体包被 ; 良好的酶结合物既保持了酶的活性, 又保持了抗原或抗体的免疫活性, 同时针对抗原和抗体则必须具有纯度高效价高结合力

3 778 食品安全质量检测学报第 9 卷高的特点常用的酶主要有辣根过氧化物酶碱性磷酸酶 β- 半乳糖苷酶等 [29], 这些酶均具有纯度高催化转化率高专一性强性质稳定来源丰富标记后稳定的特点, 以满足酶联免疫技术的反应要求现阶段, 市售试剂盒检测技术主要应用的是酶联免疫竞争法该方法检测用时 2~3 h, 样品前处理过程简单, 用样量少, 灵敏度高 ( 可检测 ng~pg 级 ), 回收率结果可达 80%~140%, 在 2~3 h 内可分析近百个样品, 在实现批量测定的同时, 不仅节约成本而且提高了工作效率与传统纸片法氯化三苯基四氮唑法 (trypheye tetrazolium chloride, TTC) 等为主的微生物受阻法 (microorganism inhibitory test, MIT) 相比, 灵敏度高 5~10 倍 [30-32] ; 与高效液相色谱和气相色谱法相比, 分析效率高几十倍, 且可同时检测同一类药物 [33] 酶联免疫吸附法属于半定量检测, 外界因素对检测结果的影响较大, 所以检测时应注意操作细节 : (1) 试剂使用前要恢复至室温 (20~25 ) 且摇匀 ; (2) 样品移取要准确, 不可有气泡, 直接加到微孔底部, 不可加到微孔壁上 ; (3) 检测过程严格控制反应温度反应时间, 与方法要求保持一致 ; (4) 洗板时操作迅速洗涤彻底干净, 防止孔底内外遭受污损 ; (5) 洗涤后要立刻加样, 并使反应液尽快混匀, 避免微孔长时间干燥, 影响结果的重复性 ; (6) 试剂在使用之前应注意观察是否失效或有结晶等酶联免疫吸附法的应用, 实现了快速准确地检测牛奶中抗生素残留的目标, 为乳及乳制品的质量安全生产以及质量监控提供了技术支持 3.2 胶体金技术在兽药残留检测中的应用胶体金免疫层析 (colloidal gold immunochromatograthy assay) 技术是当前新兴的一种结合免疫分析技术侧向层析技术胶体金标记技术的快速检测手段自 1990 [34] 年 Beggs 等第一次将胶体金免疫层析试纸条 ( 简称 : 金标试纸条 ) 应用于人绒毛促性腺激素的测定, 金标试纸条在之后二十几年的发展日益成熟胶体金试纸条主要是借助毛细管作用使样品垫上的待测物经金标结合垫移动至层析膜上, 当待测物经过层析膜上的检测线 (T 线 ) 与质控线 (C 线 ) 时会与上面的配体 ( 抗原或抗体 ) 特异性结合, 最终通过目测 C 线与检测线的显色情况或通过读数仪读取数值, 在短时间内得到待测物的浓度, 从而实现定性或半定量检测 [35-37] 胶体金免疫层析技术具有方便快捷灵敏度高稳定性强等特点, 在医疗诊断领域和乳及乳制品兽药残留检测领域中广泛应用, 是目前乳品企业抗生素检测使用最广泛的一种检测方法, 与酶联免疫分析法相比更为简便快速, 且成本低无污染 [38,39], 但该方法只能作为初筛的方法, 出现阳性或假阳性需要用其他方法进行验证在参考国际国内已有技术, 并开发研究新兴技术的情况下, 国内大量优质生产厂家应运而生, 开发出了适合国情和企业及消费者需求的各类试纸条如氯霉素胶体金试纸条 [40] 链霉素胶体金试纸条 [41] 磺胺二甲基嘧啶胶体 [42] 金试纸条等, 均在乳品行业批量应用 [43,44] 冯才伟等应用竞争抑制免疫原理, 研制 β- 内酰胺类和三聚氰胺胶体金试纸条, 该试纸条青霉素 G 检测限为 2 μg/l 氨苄青霉素 3 μg/l 阿莫西林 3 μg/l 苯唑青霉素 6 μg/l 邻氯青霉素 6 μg/l 双氯青霉素 6 μg/l 萘夫西林 20 μg/l 头孢喹肟 20 μg/l 头孢哌酮 40 μg/l 头孢曲松 50 μg/l 头孢噻呋 90 μg/l 头孢洛宁 10 μg/l 三聚氰胺 50 μg/l, 假阳性率小于 5% 假阴性率为 0, 检测时间不超过 15 min, 操作简便灵敏度高特异性强何丹婷 [45] 等研制了快速检测乳制品中恩诺沙星药物的胶体金免疫层析试纸条, 检测限为 50 μg/l, 其特异性强灵敏度高, [46] 是一种快速高效的检测手段万宇平等利用胶体金标记的抗氟喹诺酮类单克隆抗体制备了氟喹诺酮类胶体金免疫检测试纸条, 该试纸条对牛奶中恩诺沙星沙拉沙星双氟沙星氧氟沙星诺氟沙星环丙沙星培氟沙星氟甲喹达氟沙星检测检测限为 20 μg/l, 对依诺沙星恶喹酸检测检测限为 40 μg/l, 检测时间 5 min, 与三聚氰胺磺胺类药物氯霉素大环内酯类药物氨基糖苷类药物四环素类药物在 500 μg/l 浓度时, 不发生交叉反应胶体金试纸条结果判定方法主要有目测法和读数仪法 [47] 其中目测法存在很多缺陷, 例如 : (1) 光线影响和长期用眼会引起视觉疲劳, 导致结果误判 ; (2) 被检测物质浓度处于临界状态时难以目测 ; (3) 目测得到的定性结果可能受观察者的主观影响 ; (4) 目测观察结果无法为保留检测数据而胶体金读数仪通过检测样品对胶体金试剂板上检测线与质控线的反应结果的光密度和灰度值, 从而实现样品的定性和半定量检测它是胶体金免疫层析技术与自动化检测技术交叉得到的新产物, 解决了胶体金试纸条目视存在的缺陷 4 结论 ELISA 法具有一定的灵敏度和特异性, 可同时处理几十批样品, 检测总用时 3 h 左右, 而且不需要昂贵的仪器设备, 适用于大量样品的快速检测, 但是 ELISA 法对过程的操作细节和环境条件要求较为严格胶体金法操作简单不需要前处理能在 5~10 min 内完成检测, 极大的满足了企业的生产需求, 在现场监控和日常大批量检测中有着十分广阔的应用前景, 但是胶体金法作为快速初筛的检测方法, 易出现假阳性, 需要用 ELISA 法或其他方法验证因此, 开发出快速定量的检测方法是未来乳品检测技术发展的方向目前, 酶技术或免疫酶技术与电子技术结合而初步产生的生物传感器技术潜力十分巨大, 有望实现在线定量检测或更快捷的检测

4 第 4 期李小会, 等 : 免疫分析技术在乳及乳制品抗生素类兽药残留检测中的应用 779 参考文献 [1] 朱俊平. 乳及乳制品质量检验 [M]. 北京 : 中国计量出版社, Zhu JP. Quality inspection of milk and dairy products [M]. Beijing: China Metrology Press, [2] Moloney A, Allen P, Joseph R, et al. Influence of beta-adrenergic agonists and similar compounds on growth. In Pearson AM, Dutson TR(Eds.). Growth regulation in farm animals [M]. London: Elsevier, [3] Butaye P, Devriese LA, Haesebrouck F. Differences in antibiotic resistance patterns of Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium strains isolated from and petanimals [J]. Antimicrob Agents Chemother, 200l, 45(5): [4] 沈建忠. 动物性食品的安全性及其监控 [J]. 中国兽医杂志, 2001, 37(1): Shen JZ. Safety and monitoring of animal food [J]. Chin J Veter Med, 200l, 37(1): [5] 邓冬云, 余淑冰, 梁景涛, 等. 佛山市区牛奶及奶粉中抗生素残留状况调查 [J]. 中国热带医学, 2004, 4(3): Deng DY, Yu SB, Liang JT, et al. Investigation into the residual status of antibliotics in milk and milk powder in Foshan [J]. China Tropical Med, 2004, 4(3): [6] 陈云, 李洪亮, 张冬洁, 等. 乳中抗生素残留及其检测方法的研究进展 [J]. 中国乳品工业, 2012, 40(9): Chen Y, Li HL, Zhang DJ, et al. Study on residues and detected methods of antibiotics in milk [J]. China Dairy Ind, 2012, 40(9): [7] 包温奎. 生鲜牛乳中违禁添加物和抗生素残留及其检测方法论述 [J]. 青海畜牧兽医杂志, 2010, 40(6): Bao WK. The contraband and antibiotic residue of fresh milk were discussed [J]. Chin Qinghai J Anim Husband Veter Med, 2010, 40(6): [8] 吴瑕, 张兰威. 牛乳中抗生素残留及其检测方法的研究进展 [J]. 食品与发酵工业, 2004, 30(7): Wu X, Zhang LW. Development of methods for detection of antibiotics residues in milk [J]. Food Ferment Ind, 2004, 30(7): [9] 无公害食品行业标准 [S]. Stand of non-public food industry [S]. [10] 邓斌, 邓春来, 张曦. 牛奶中抗生素残留及其检测方法研究进展 [J]. 饲料广角, 2002, 24(24): Deng B, Deng CL, Zhang X. Study progress on antibiotic residues in milk and its determination methods [J]. Feed China, 2002, 24(24): [11] 杨旭, 王力群. 牛乳中抗生素检测方法的研究 [J]. 畜牧兽医科技信息, 2008, (11): Yang X, Wang LQ. Research on antibiotic detection method in cow milk [J]. Chin J Anim Husband Veter Med, 2008, (11): [12] 闫靳, 毕京辉. 有抗奶的危害及控制措施 [J]. 黑龙江畜牧兽医, 2009, (16): Yan J, Bi JH. Anti-milk hazard and control measures [J]. Heilongjiang Anim Sci Veter Med, 2009, (16): [13] 蒋定国, 杨大进. 动物性食品中氯霉素残留检测技术的研究概况 [J]. 中国食品卫生杂志, 2002, 14(2): Jiang DG, Yang DJ. Detecting technology overview of chloramphenicol residue in animal food [J]. Chin J Food Hyg, 2002, 14(2): [14] 胡顶飞, 沈建忠. 氯霉素类抗生素的残留分析 [J]. 中国兽药杂志, 2001, 35(5): Hu DF, Shen JZ. Chloramphenicol antibiotic residue analysis [J]. Chin J Vet Drug, 2001, 35(5): [15] 覃志英, 唐振柱, 苏小川, 等. 消毒牛奶中氯霉素残留状况与分析 [J]. 广西医学, 2008, 30(1): Qin ZY, Tang ZZ, Su XC, et al. Residual status and analysis of chloramphenicol in disinfectant milk [J]. Guangxi Med J, 2008, 30(1): [16] 赵先晟, 赵伯川, 魏学良. 牛奶中抗生素残留的危害及控制对策 [J]. 中国动物保健, 2009, 11(5): Zhao XS, Zhao BC, Wei XL. The harm of antibiotic residues in milk and control countermeasures [J]. China Anim Health, 2009, 11(5): [17] 王宏博, 高雅琴, 杜天庆, 等. 牛奶中抗生素残留的危害及检测方法的研究进展 [J]. 畜牧与饲料科学, 2010, 31(4): Wang HB, Gao YQ, Du QT, et al. The hazards of antibiotic residues in milk and detection method overview [J]. 2010, 31(4): [18] 吕珍珍, 蒋小玲, 刘金钏, 等. 免疫分析技术在兽药残留检测中的应用 [J]. 农产品质量与安全, 2012, (9): Lv ZZ, Jiang XL, Liu JC, et al. The application of immunoassay in veterinary drug residue detection [J]. Qual Saf Agro-Prod, 2012, (9): [19] 王守法, 阚春月, 许学书. 酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用 [J]. 食品科学, 2009, 30(23): Wang SF, Kan CY, Xu XS. Application of ELISA method in food detection [J]. Food Sci, 2009, 30(23): [20] 博东, 王栩冬, 张维, 等. 酶联免疫吸附法在食品安全分析中的应用 [J]. 中国卫生检验杂志, 2005, 15(11): Bo D, Wang XD, Zhang W, et al. The application of enzyme-linked immunosorbent assay in food safety analysis [J]. Chin J Health Lab Technol, 2005, 15(11): [21] 朱慧莉, 黎锡流. 酶联免疫吸附法 (ELISA) 在乳制品检测中的应用 [J]. 食品工业, 2001, (5): Zhu HL, Li XL. The application of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in dairy product testing [J]. Food Ind, 2001, (5): [22] Watanabe H, Satake A, Kido Y, et a1. Production of monoclonal I antibody and development of enzyme-linked immunosorbent assay for kanamycin in biological matrices. Analyst, 1999, 124(11): [23] Watanabe H, Satake A, Kido Y, et a1. Monoclonal-based enzyme-linked immunosorbent assay and immunochrornatographic rapid assay for dihydrostreptomycin in milk [J]. Anal Chim Acta, 2002, 472(1 2): [24] Jeon M, Kim J, Paeng KJ, et a1. Biotin-avidin mediated competitive enzyme-linked immunosorbent assay to detect residues of tetracyclines in milk [J]. Microchem J, 2008, 88(1): [25] 吴定, 张羽航, 姚汝华. ELISA 测定乳中磺胺甲基嘧啶残留 [J]. 中国兽药学报, 1999, 19(2): Wu D, Zhang YH, Yao RH. ELISA was used to determine the residues of sulfadiazine in milk [J]. Chin J Veter Sci, 1999, 19(2): [26] Loomans EE, Van WJ. Neamine as an immunogen for the development of a generic ELISA detecting gentamicin, kanamycin,and neomycin in milk [J]. J Agric Food Chem, 2003, 51(3): [27] 张可煜, 郑海红, 张丽芳, 等. 动物性食品兽药残留的快速筛选方法 [J]. 中国兽医寄生虫病, 2008, 16(4): Zhang KY, Zheng HH, Zhang LF, et al. Methods for rapid screening detection of veterinary drug residues in animal foods [J]. Chin J Veter Parasitol, 2008, 16(4): [28] 郭军, 张和平. 乳及乳制品中抗生素类兽药残留快速检测技术 [J]. 中国乳品工业, 2004, 32(12):

780 食品安全质量检测学报第 9 卷 Guo J, Zhang HP. Introduction on rapid milk antibiotic residues test/assay techniques and kits [J]. Chin Dairy Ind, 2004, 32(12): 30 35. [29] 邵辉, 吴瑕, 王剑飞, 等.

Chin Dairy Ind, 2011, 39(6): 58 59. [30] 张彩红, 索宝, 李正洪, 等. 原料奶中抗生素残留及快速检测方法 [J]. 当代畜禽养殖业, 2012, (7): 33 36. Zhang CH, Suo B, Li ZH, et al.

5 780 食品安全质量检测学报第 9 卷 Guo J, Zhang HP. Introduction on rapid milk antibiotic residues test/assay techniques and kits [J]. Chin Dairy Ind, 2004, 32(12): [29] 邵辉, 吴瑕, 王剑飞, 等. 酶联免疫法与乳及乳制品中抗生素残留的检测 [J]. 中国乳品工业, 2011, 39(6): Shao H, Wu X, Wang JF, et al. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and detection of antibiotics residues in milk and milk products [J]. Chin Dairy Ind, 2011, 39(6): [30] 张彩红, 索宝, 李正洪, 等. 原料奶中抗生素残留及快速检测方法 [J]. 当代畜禽养殖业, 2012, (7): Zhang CH, Suo B, Li ZH, et al. Methods of antibiotic residue and rapid detection in raw milk [J]. Mod Anim Husband, 2012, (7): [31] 李延华, 王伟君, 张兰威. 牛乳中 β- 内酰胺类抗生素残留及检测方法的比较 [J]. 食品研究与开发, 2007, 28(7): Li YH, Wang WJ, Zhang LW. Character and screening methods of β-lactam antibiotic residues in milk [J]. Food Res Dev, 2007, 28(7): [32] 叶兴乾, 刘东红, 陈健初. 牛奶抗生素残留快速检测技术进展及应用现状 [J]. 农业工程学报, 2005, 21(4): Ye XQ, Liu DH, Chen JC. Advances in the rapid detection of antibiotics residues in dairy products [J]. Trans Chin Soc Agric Eng, 2005, 21(4): [33] 刘军安, 高美红, 黄运丽. 牛奶中抗生素残留检测方法的研究进展及展望 [J]. 湖北农业科学, 2010, 49(6): Liu JA, Gao MH, Huang YL. Advance and prospects of detecting techniques for antibiotic residues in milk [J]. Hubei Agric Sci, 2010, 49(6): [34] Beggs M, Novotny M, Sampedro S, et al. A self-performing chromatographic (HCG) in urine and serum [J]. Clin Chem, 1990, 36: [35] 魏文平, 龚振明. 胶体金免疫层析法检测兽药残留的原理和方法 [J]. 黑龙江畜牧兽医, 2007, 2007(8): Wei WP, Gong ZM. The principle and method of determination of veterinary drug residue by colloidal gold immunochromatography [J]. Heilongjiang Anim Sci Veter Med, 2007, 2007(8): [36] 刘爱玲, 张少东, 唐丽. 免疫胶体金技术的原理与应用技术 [J]. 浙江畜牧兽医, 2010, 35(3): Liu AL, Zhang SD, Tang L. The principle and application of immune colloidal gold [J]. Zhejiang J Anim Sci Veter Med, 2010, 35(3): [37] 张莹, 冯海, 吴秋平, 等. 胶体金免疫层析技术的研究进展 [J]. 现代生物医学进展, 2015, 15(12): Zhang Y, Feng H, Wu QP, et al. Progress of the colloidal gold-based immunochromatographic assay [J]. Prog Mod Biomed, 2015, 15(12): [38] 李周敏, 方惠群, 许丹科. 牛奶中残留抗生素免疫检测方法研究进展 [J]. 生物技术通报, 2012, (11): Li ZM, Fang HQ, Xu DK. Immunoassay methods for antibiotic residues in milk [J]. Biotechnol Bull, 2012, (11): [39] 汪霄峰. 食品安全快速检测技术现状及应用 [J]. 现代食品, 2016, 3(5): Wang XF. Present situation and application of rapid detection technology of food safety [J]. Mod Food, 2016, 3(5): [40] 陶光灿, 吴鹏, 赵正苗, 等. 胶体金免疫层析测定动物组织中氯霉素残留 [J]. 吉林畜牧兽医, 2012, 33(6): Tao GC, Wu P, Zhao ZM, et al. Detection of chloramphenicol residues in animal tissues by gold immunochromatographic assay [J]. Jilin Anim Sci Veter Med, 2012, 33(6): [41] 范国英, 王顺岗, 杨艳艳, 等. 链霉素快速检测试纸的研制及其性能测定 [J]. 西北农业学报, 2010, 19(2): Fan GY, Wang SG, Yang YY, et al. Development and trait identification of colloidal gold labeled strip for rapid detection of streptomycin [J]. Acta Agric Boreali-occident Sin, 2010, 19(2): [42] 林晓丽, 饶辉, 熊勇华, 等. 胶体金试纸条快速检测食品中磺胺二甲基嘧啶残留 [J]. 食品科学, 2010, 31(24): Lin XL, Rao H, Xiong YH, et al. Rapid detection of sulfadimidine residue in food by colloidal gold strips [J]. Food Sci, 2010, 31(24): [43] 冯才伟, 罗晓琴, 孙震, 等. 牛奶中 β- 内酰胺类和三聚氰胺检测方法的建立 [J]. 食品科技, 2012, (10): Feng CW, Luo XQ, Sun Z, et al. Establishment of detection method for β-lactam antibiotics and melamine in milk [J]. Food Sci Technol, 2012(10): [44] 孙志文, 陶光灿, 罗小琴, 等. 胶体金免疫层析法测定牛奶中 β- 内酰胺类抗生素和三聚氰胺残留 [J]. 乳业科学与技术, 2012, 35(3): Sun ZW, Tao GC, Luo XQ, et al. Detection of β-lactam antibiotics and melamine residues in milk by colloidal gold immunochromatographic assay [J]. J Dairy Sci Technol, 2012, 35(3): [45] 何丹婷, 李艳伟, 师伟, 等. 牛奶中恩诺沙星和环丙沙星检测试纸的研制及性能测定 [J]. 中国兽药杂志, 2011, 45(9): He DT, Li YW, Shi W, et al. Research and trait identification of colloidal gold strip for rapid detection of enrofloxacin and ciprofloxacin in milk [J]. Chin J Veter Drug, 2011, 45(9): [46] 万宇平, 赵正苗, 汪善良, 等. 胶体金免疫层析法快速检测牛奶中氟喹诺酮类药物残留 [J]. 中国奶牛, 2013, (11): Wang YP, Zhao ZM, Wang SL, et al. The fluoroquinolone drug residues in milk were quickly detected by colloidal gold immunochromatography [J]. China Dairy Cattle, 2013, (11): [47] 宋昀鹏, 李灏, 丁子元, 等. 胶体金读数仪在快速检测中的应用研究进展 [J]. 食品安全质量检测学报, 2017, 8(1): Song YP, Li H, Ding ZY, et al. Research advance of application of colloidal-gold strips readers in rapid detection [J]. J Food Saf Qual, 2017, 8(1): 作者简介 ( 责任编辑 : 武英华 ) 李小会, 检验分析员, 主要研究方向为乳品检验分析 @qq.com 段亚军, 检验工程师, 主要研究方向为食品检验分析 duanyajun@mingniu.cn

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<4D F736F F D D D6ECD0A1BAEC2D2D2D2D2DB2CEBFBCCEC4CFD7D3A2CEC4B7ADD2EBB8F1CABDC3BBD3D0B6D4A1AD> 4 1 Vol. 4 No. 1 2013 2 Journal of Food Safety and Quality Feb., 2013 朱小红 *, 牟宵, 刘海静 (, 710061) 摘要 :,,, 关键词 : ; ; ; Standard formulation of the veterinary drug residues in catering service and its application

Microsoft Word 李小会 二校 776、

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