1056 中 国 药 事 2015 年 10 月 第 29 卷 第 10 期 12 mg kg -1 ) of ferulic acid. The pharmacokinetic parameters were calculated by the software DAS 2.0. Results:

中 国 药 事 2015 年 10 月 第 29 卷 第 10 期 1055 药 物 研 究 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 比 格 犬 血 浆 中 阿 魏 酸 浓 度 及 其 药 代 动 力 学 研 究 孙 旭 1, 黄 莉 莉 2, 王 欣 100050;2. 南 京 大 学 医 学 院 附 属 鼓 楼 医 院, 南 京,210008) 2* (1. 中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院 国 家 药 物 安 全 评 价 监 测 中 心, 北 京, 摘 要 目 的 : 建 立 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 比 格 犬 血 浆 中 阿 魏 酸 的 含 量, 并 用 于 药 代 动 力 学 研 究 方 法 : 血 浆 样 品 采 用 乙 酸 乙 酯 处 理, 以 替 硝 唑 作 为 内 标, 色 谱 柱 为 Phenomenex Luna C18 色 谱 柱, 流 动 相 为 水 ( 含 5 mmol L -1 醋 酸 铵 和 0.05H 3 PO 4 )- 乙 腈 (60..40), 等 度 洗 脱, 流 速 为 1.0 ml min -1, 紫 外 检 测 波 长 为 320 nm 采 用 比 格 犬 单 剂 量 静 注 3 6 12 mg kg -1 的 阿 魏 酸, HPLC-UV 法 测 定 阿 魏 酸 的 血 药 浓 度, 并 采 用 DAS 2.0 软 件 计 算 药 代 动 力 学 参 数 结 果 : 方 法 学 实 验 结 果 表 明 内 源 性 杂 质 不 干 扰 阿 魏 酸 和 内 标 的 测 定, 线 性 范 围 0.0975~12.5 μg ml -1, 定 量 限 为 ml -1 方 法 精 密 度 准 确 度 稳 定 性 和 回 收 率 均 符 合 生 物 样 品 测 定 的 要 求, 适 合 比 格 犬 血 浆 中 阿 魏 酸 浓 度 的 测 定, 可 以 应 用 该 方 法 进 行 阿 魏 酸 的 药 代 动 力 学 研 究 比 格 犬 单 剂 量 静 注 3 6 12 mg kg -1 的 阿 魏 酸 后, 血 药 浓 度 - 时 间 曲 线 下 面 积 (AUC 0-τ ) 分 别 为 244.81±57.34 508.40±118.82 988.87±172.29 min μg ml -1, 不 同 剂 量 下 AUC 0-τ 比 为 1..2.1..4.0, 与 剂 量 比 1..2..4 近 似 成 比 例, 说 明 在 研 究 的 剂 量 范 围 内, 阿 魏 酸 在 Beagle 犬 体 内 的 消 除 过 程 是 线 性 的 结 论 : 本 方 法 操 作 简 便 灵 敏 专 属 性 强, 方 法 学 考 证 符 合 生 物 样 品 测 定 的 要 求 并 成 功 用 于 阿 魏 酸 在 比 格 犬 体 内 的 药 代 动 力 学 研 究 关 键 词 : 阿 魏 酸 ; 高 效 液 相 色 谱 ; 药 代 动 力 学 ; 比 格 犬 血 浆 中 图 分 类 号 :R28; R97 文 献 标 识 码 :A 文 章 编 号 :1002-7777(2015)10-1055-07 doi:10.16153/j.1002-7777.2015.10.011 Development and Validation of an HPLC-UV Method for Determination of Ferulic Acid in Beagle Dog Plasma and Application to a Pharmacokinetic Study Sun Xu 1, Huang Lili 2, Wang Xin 2* (1. National Center for Safety Evaluation of Drugs, National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050, China; 2. Pharmaceutical Preparation Section of Nanjing Drum Tower Hospital, the Affiliated Hospital of Nanjing University Medical School, Nanjing 210008, China) Abstract Objective: To establish a sensitive, simple and specific high-performance liquid chromatography method for determination of ferulic acid in order to study the pharmacokinetics of ferulic acid in beagle dogs. Methods: Ferulic acid and tinidazole (internal standard, IS) were extracted by liquid-liquid extraction and separated on a Phenomenex Luna C18 column, with acetonitrile and water (containing 5 mmol L -1 ammonium acetate and 0.05 phosphoric acid) (40..60) as the mobile phase. The flow rate was set to be 1.0 ml min -1 and the analytical wavelength was 320 nm. After validating, the developed method was used for evaluating pharmacokinetics of ferulic acid in beagle dogs following intravenous administration of three doses (3, 6, 作 者 简 介 : 孙 旭, 主 管 药 师 ; 研 究 方 向 : 药 代 动 力 学 ;Tel:(010)67872233-8220;E-mail:sunxu-513@163.com 通 信 作 者 : 王 欣, 主 管 药 师 ; 研 究 方 向 : 药 剂 和 药 房 管 理 研 究 ;Tel:(025)83304616;E-mail:20031269@qq.com

1056 中 国 药 事 2015 年 10 月 第 29 卷 第 10 期 12 mg kg -1 ) of ferulic acid. The pharmacokinetic parameters were calculated by the software DAS 2.0. Results: The methodological study showed endogenous impurities did not interfere the determination of ferulic acid, and the internal standard and a good linear relationship were found within 0.0975-12.5 μg ml -1 with a sensitivity of 0.0975 μg ml -1 as the limit of quantification. The precision, accuracy, stability and mean recoveries met the requirements of biological sample measurement. The method described above was successfully applied to the pharmacokinetic study of ferulic acid in the samples of beagle dog plasma. The area under the plasma concentrationtime curves (AUC 0-τ ) of ferulic acid after single intravenous doses of 3, 6 and 12 mg kg -1 was 244.81±57.34, 508.40±118.82, 988.87±172.29 min μg ml -1, respectively. The relationship between dose and AUC 0-τ showed a good linearity as the AUC 0-τ ratio was 1..2.1..4.0 under different doses which was proportional to the dose ratio of 1..2..4, indicating that the elimination process of ferulic acid in beagle dogs was linear. Conclusion: This HPLC-UV method for determination of ferulic acid was proved to have sufficient selectivity, sensitivity and reproducibility and was successfully applied to the pharmacokinetic study of ferulic acid in beagle dogs. Keywords: ferulic acid; HPLC; pharmacokinetics; beagle dog plasma 阿 魏 酸 是 广 泛 存 在 于 植 物 中 的 一 种 功 能 性 酚 酸, 也 是 当 归 升 麻 川 芎 等 常 用 中 药 的 主 要 活 性 成 分 阿 魏 酸 具 有 很 强 的 抗 氧 化 和 抗 炎 活 性, 能 有 效 提 高 血 流 量, 抑 制 血 小 板 聚 集, 降 低 血 脂 水 平 和 抑 制 血 栓 形 成 [1-5] 阿 魏 酸 广 泛 用 于 心 血 管 疾 病 的 治 疗 : 脑 供 血 不 足 脑 血 栓 形 成 脑 栓 塞 等 目 前 已 从 细 胞 生 物 学 及 分 子 生 物 学 技 术 进 一 步 阐 明 阿 魏 酸 钠 在 神 经 细 胞 保 护 方 面 的 作 用 机 制, 将 对 临 床 以 阿 魏 酸 钠 作 为 神 经 保 护 剂 的 应 用 提 供 可 能 [6-9] 阿 魏 酸 因 其 作 用 广 泛 毒 性 较 低 而 具 有 较 好 的 药 用 前 景 本 文 建 立 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 比 格 犬 血 浆 中 阿 魏 酸 的 浓 度, 并 将 该 方 法 应 用 于 阿 魏 酸 在 比 格 犬 体 内 的 药 代 动 力 学 研 究, 为 阿 魏 酸 的 临 床 用 药 提 供 参 考 依 据 1 材 料 1.1 仪 器 岛 津 (Shimadzu) 高 效 液 相 色 谱 仪, 包 括 LC- 20AD 送 液 泵 (2 个 ) DGU-20A3 在 线 脱 气 机 SIL-20A 自 动 进 样 器 CTO-20A 柱 温 箱 SPD-20A 紫 外 检 测 器 CBM-20A 系 统 控 制 器 和 Shimadzu Labsolutions 色 谱 工 作 站 ;Milli-Q Gradient A10 超 纯 水 器 (Millipore Inc. USA);Thermo SPD-2010-230 台 式 真 空 浓 缩 仪 (Thermo Inc. USA);Thermo Sorvall Stratos 台 式 高 速 冷 冻 离 心 机 (Thermo Inc. USA);Vortex-2 旋 涡 混 合 器 (Scientific Industries Inc. USA) 等 1.2 药 品 与 试 剂 阿 魏 酸 ( 批 号 Z003247150, 含 量 99) 和 内 标 替 硝 唑 ( 批 号 32553, 含 量 99) 均 购 自 西 格 玛 奥 德 里 奇 ( 上 海 ) 贸 易 有 限 公 司 ; 色 谱 级 乙 腈 购 自 德 国 Merck 公 司 ; 其 余 试 剂 均 为 市 售 分 析 纯 1.3 动 物 Beagle 犬,18 月 龄, 体 重 (10.0±1.0)kg, 雌 雄 各 半, 购 自 扬 州 四 方 实 验 动 物 科 技 有 限 公 司 [ 合 格 证 号 :SCXK( 苏 )2008-0006] 2 方 法 与 结 果 2.1 标 准 溶 液 配 制 阿 魏 酸 标 准 品 的 配 制 : 精 密 称 取 阿 魏 酸 标 准 品 5.00 mg, 用 甲 醇 10.0 ml 溶 解 定 容, 配 制 成 500 μg ml -1 贮 备 液, 临 用 前 用 超 纯 水 稀 释 到 相 应 的 浓 度 内 标 液 的 配 制 : 精 密 称 取 替 硝 唑 10.00 mg, 用 甲 醇 溶 解 后, 稀 释 至 40 μg ml -1 备 用 2.2 血 浆 中 测 定 阿 魏 酸 的 HPLC-UV 色 谱 条 件 色 谱 柱 为 Phenomenex Luna 5 μm C18( 4.6 mm); 流 动 相 : 水 相 (A) 5 mm 醋 酸 铵 ( 含 0.05 磷 酸 ), 有 机 相 (B) 乙 腈 (A.. B=60..40), 等 度 洗 脱 ; 流 速 1.0 ml min -1 ; 柱 温 40 ; 紫 外 检 测 波 长 320 nm; 进 样 量 20 μl 2.3 血 浆 样 品 的 处 理 取 血 浆 100 μl, 加 内 标 10 μl 混 匀 后, 加 入 1.3 ml 乙 酸 乙 酯, 振 荡 5 min, 以 离 心 半 径 8 cm,5000 rpm 离 心 10 min, 取 上 清 1.2 ml, 45 氮 气 吹 干, 用 100 μl 流 动 相 溶 解 残 渣, 以 离 心 半 径 8 cm,18000 rpm 离 心 10 min,20 μl 进 样,

中 国 药 事 2015 年 10 月 第 29 卷 第 10 期 1057 用 样 品 与 内 标 峰 面 积 比 进 行 定 量 分 析 2.4 血 浆 中 阿 魏 酸 的 测 定 方 法 学 考 察 2.4.1 方 法 特 异 性 的 考 证 在 本 实 验 条 件 下, 比 格 犬 血 浆 样 品 峰 和 内 标 峰 有 较 好 的 分 离 度, 血 浆 中 内 源 性 物 质 与 其 他 药 物 代 谢 物 不 干 扰 测 定, 基 线 噪 音 小, 表 明 该 方 法 专 属 性 较 好 阿 魏 酸 的 保 留 时 间 约 为 7.3 min, 内 标 保 留 时 间 约 为 6.5 min( 见 图 1) 1 2 0.0 2.5 5.0 7.5 A 0.0 2.5 5.0 7.5 B 1 2 0.0 2.5 5.0 7.5 C 1. 内 标 替 硝 唑 ;2. 阿 魏 酸 图 1 空 白 血 浆 (A) 内 标 替 硝 唑 + 阿 魏 酸 对 照 品 (B) 和 比 格 犬 静 注 阿 魏 酸 30 min 后 血 浆 样 品 (C) 的 HPLC-UV 图 2.4.2 标 准 曲 线 的 制 备 取 比 格 犬 空 白 血 浆 90 μl 于 数 支 1.5 ml EP 管 中, 精 密 加 入 10 μl 阿 魏 酸 标 准 液, 旋 涡 混 匀, 配 成 含 阿 魏 酸 分 别 为 0.0975 0.195 0.39 0.78 1.56 3.12 6.25 12.50 μg ml -1 的 标 准 含 药 血 浆, 按 血 浆 样 品 的 处 理 节 下 操 作, 记 录 色 谱 图, 计 算 阿 魏 酸 峰 面 积 As 和 内 标 峰 面 积 Ai 的 比 值 ƒ 制 备 5 条 标 准 曲 线, 以 ƒ(ƒ=as/ai) 对 血 药 浓 度 C 作 回 归 计 算, 得 平 均 回 归 方 程 : ƒ = 0.1677C - 0.0012 r = 0.9998 结 果 表 明 线 性 范 围 为 0.0975~12.5 μg ml -1, 最 低 定 量 浓 度 为 0.0975 μg ml -1 2.4.3 稳 定 性 试 验 分 别 考 察 了 低 (0.195 μg ml -1 ) 中 (1.56 μg ml -1 ) 高 (10.0 μg ml -1 )3 个 浓 度 的 含 阿 魏 酸 血 浆 样 品 : 室 温 放 置 6 h, 反 复 冻 融 3 次,-20 冷 冻 放 置 2 周, 以 及 处 理 过 的 待 测 样 本 在 进 样 器 放 置 24 h 的 稳 定 性 结 果 表 明 样 品 在 储 存 及 测 定 过 程 中 均 稳 定,RSD 均 < 10, 结 果 见 表 1

1058 中 国 药 事 2015 年 10 月 第 29 卷 第 10 期 表 1 阿 魏 酸 在 比 格 犬 血 浆 中 稳 定 性 试 验 (n =5) 条 件 加 入 浓 度 /(μg ml -1 ) 测 定 浓 度 /(μg ml -1 ) RSD/ 室 温 (20 ) 放 置 6 h 0.195 0.198±0.014 7.14 1.56 1.603±0.113 7.07 10.0 9.828±0.546 5.56 进 样 器 (4 ) 放 置 24 h 0.195 0.202±0.012 6.09 1.56 1.613±0.088 5.47 10.0 10.352±0.510 4.93-20 冰 冻 2 周 0.195 0.190±0.016 8.39 1.56 1.575±0.092 5.82 10.0 9.806±0.384 3.91 反 复 冻 融 3 次 0.195 0.201±0.015 7.24 1.56 1.521±0.076 5.02 10.0 10.588±0.277 2.62 2.4.4 精 密 度 和 准 确 度 用 空 白 比 格 犬 血 浆 配 制 低 (0.195μg 中 (1.56 μg ml -1 ) 高 (10.0 μg ml -1 )3 个 浓 度 的 样 品 各 5 份, 连 续 测 定 3 d, 用 随 行 标 准 曲 线 计 算 相 应 的 药 物 浓 度, 分 别 考 察 日 内 和 日 间 精 密 度 与 准 确 度 实 验 结 果 表 明, 低 中 高 3 个 浓 度 的 批 内 和 批 间 RSD 均 小 于 10, 准 确 度 为 99.0~103.5, 结 果 见 表 2 表 2 比 格 犬 血 浆 中 阿 魏 酸 测 定 方 法 的 日 内 和 日 间 精 密 度 和 准 确 度 (n =5) 加 入 浓 度 / (μg ml -1 ) 测 定 浓 度 / (μg ml -1 ) 日 内 变 异 (n=5) 精 密 度 / 准 确 度 / 日 间 变 异 (3 d, n=5) 测 定 浓 度 / 精 密 度 / (μg ml -1 ) 准 确 度 / 0.195 0.202±0.016 8.0 103.5 0.200±0.012 6.2 102.6 1.56 1.535±0.070 4.6 98.4 1.532±0.054 3.6 98.2 10.0 9.954±0.273 2.7 99.5 9.901±0.268 2.7 99.0 2.4.5 提 取 回 收 率 EP 管 加 入 90 μl 空 白 血 浆, 加 入 阿 魏 酸 标 准 品, 使 其 浓 度 分 别 为 0.195 1.56 按 血 浆 样 品 的 处 理 节 方 法 操 作, 记 录 样 品 峰 面 积 和 内 标 峰 面 积 比 值 Rf; 另 取 EP 管 加 入 100 μl 空 白 血 浆, 加 入 1.3 ml 乙 酸 乙 酯, 振 荡 5 min, 离 心 5 min, 取 上 清 液 1.2 ml,45 真 空 挥 干, 加 入 浓 度 为 1.95 15.6 阿 魏 酸 标 准 品 10 μl, 再 加 入 内 标 10 μl, 真 空 浓 缩 挥 干 后, 用 100 μl 流 动 相 溶 解 残 渣, 离 心 5 min, 取 上 清 液 20 μl 进 样 记 录 样 品 峰 面 积 和 内 标 峰 面 积 比 值 Rs 提 取 回 收 率 =(Rf/ Rs) 100, 每 种 浓 度 重 复 5 次 阿 魏 酸 在 低 (0.195 μg ml -1 ) 中 (1.56 μg ml -1 ) 高 (10.00 μg ml -1 )3 个 浓 度 的 提 取 回 收 率 分 别 为 (84.18±3.91) (83.34±5.34) 和

中 国 药 事 2015 年 10 月 第 29 卷 第 10 期 1059 (85.16±5.53), 回 收 率 符 合 要 求 且 稳 定 2.5 阿 魏 酸 在 比 格 犬 体 内 的 药 代 动 力 学 研 究 Beagle 犬 6 只, 雄 雌 各 半, 体 重 (10.0±1.0)kg, 随 机 分 为 3 组, 每 组 2 只, 进 行 三 交 叉 的 静 注 3 个 剂 量 阿 魏 酸 实 验, 清 洗 期 为 1 周 6 只 比 格 犬 禁 食 12 h 后 分 别 前 肢 静 注 3 6 12 mg kg -1 的 阿 魏 酸, 于 给 药 前 和 给 药 后 2 5 10 15 20 30 45 60 75 90 120 min, 从 前 肢 静 脉 取 血 0.5 ml 于 肝 素 化 试 管 中, 离 心 后 取 100 μl 的 血 浆 用 于 HPLC 分 析 阿 魏 酸 浓 度 6 只 Beagle 犬 按 照 三 交 叉 试 验 设 计 静 注 3 6 12 mg kg -1 阿 魏 酸 后, 阿 魏 酸 的 平 均 血 药 浓 度 - 时 间 曲 线 见 图 2, 利 用 DAS2.0 软 件 按 非 房 室 模 型 法 计 算 主 要 的 药 代 动 力 学 参 数, 见 表 3,AUC 0-τ 分 别 为 (244.81±57.34) (508.40±118.82) (988.87±172.29) min μg ml -1 ;AUC 0- 分 别 为 (247.57±59.47) (515.52±119.35) (1012.67± 172.91)min μg ml -1 ;t 1/2 分 别 为 (21.23± 5.26) (21.46±4.77) (22.13±3.63)min 3 种 剂 量 的 AUC 0-τ 与 剂 量 关 系 表 明 AUC 与 剂 量 间 呈 一 定 的 线 性 关 系 (r >0.99), 不 同 剂 量 (3 6 12 mg kg -1 ) 下,AUC 0-τ 比 1 2.1 4.0 与 剂 量 比 1 2 4 近 似 成 比 例, 说 明 在 研 究 的 剂 量 范 围 内, 阿 魏 酸 在 Beagle 犬 体 内 的 消 除 过 程 是 线 性 的 log C ug ml -1 100 10 1 0.1 3 mg kg -1 6 mg kg -1 12 mg kg -1 0.01 0 20 40 60 80 100 120 图 2 比 格 犬 单 次 静 注 3 6 12 mg kg -1 阿 魏 酸 的 半 对 数 平 均 血 药 浓 度 - 时 间 (logc-t) 曲 线 表 3 比 格 犬 单 剂 量 静 注 3 个 剂 量 阿 魏 酸 后 的 主 要 药 动 学 参 数 (Mean±SD, n =6) 参 数 3 mg kg -1 6 mg kg -1 12 mg kg -1 C 2 min /(μg ml -1 ) 17.6±7.0 35.3±9.7 72.9±15.9 AUC 0-τ / (min μg ml -1 ) 244.81±57.34 508.40±118.82 988.87±172.29 AUC 0- / (min μg ml -1 ) 247.57±59.47 515.52±119.35 1012.67±172.91 t 1/2 /min 21.23±5.26 21.46±4.77 22.13±3.63 MRT/min 30.64±7.15 30.97±5.84 31.94±4.38 Vd//(mL kg -1 ) 371.16±73.02 360.39±80.12 378.46±82.46 Cl/( ml min -1 kg -1 ) 12.12±3.34 11.64±3.49 11.85±2.92

1060 3 讨 论 本 研 究 运 用 高 效 液 相 色 谱 法 检 测 比 格 犬 血 浆 中 阿 魏 酸 的 血 药 浓 度, 该 方 法 简 便 特 异 性 强, 为 阿 魏 酸 的 药 代 动 力 学 研 究 提 供 了 专 属 准 确 灵 敏 的 检 测 方 法 有 文 献 研 究 了 阿 魏 酸 在 大 鼠 体 内 的 药 代 动 力 学, 结 果 发 现 大 鼠 灌 胃 14.75 mg kg -1 阿 魏 酸 后, 其 血 药 浓 度 - 时 间 曲 线 符 合 二 房 室 模 型, 在 大 鼠 体 内 的 分 布 迅 速, 平 均 达 峰 时 间 仅 为 10.8 min, 消 除 速 率 较 快, 维 持 有 效 血 药 浓 度 的 时 间 较 短, 在 2.0~10.0 h 内 长 期 保 持 低 浓 度 [10] 多 剂 量 灌 胃 给 药 (10 mg kg -1 )1 周 在 大 鼠 体 内 不 存 在 蓄 积, 平 均 达 峰 时 间 为 6.6 min, 半 衰 期 为 [12] 夏 东 亚 等 建 立 了 测 定 大 鼠 血 浆 中 阿 魏 酸 浓 度 的 HPLC 方 法, 并 用 于 心 舒 口 服 液 ( 含 当 归 川 芎 和 红 花 等 ) 中 阿 魏 酸 在 大 鼠 体 内 的 药 动 学 研 究, 实 验 结 果 表 明, 大 鼠 灌 胃 心 舒 口 服 液 2 ml ( 含 阿 魏 酸 1.00 mg ml -1 ) 后, 自 胃 肠 道 吸 收 迅 速, 灌 胃 给 药 后 平 均 22 min 即 达 血 药 浓 度 峰 值, 随 后 阿 魏 酸 在 大 鼠 体 内 迅 速 分 布, 其 药 - 时 曲 线 符 合 二 室 模 型,t 1/2α 为 12.6 min, t 1/2β 为 305 min, 与 [10] 文 献 报 道 川 芎 单 方 中 阿 魏 酸 的 t 1/2β 11.9 min 比 较, 明 显 延 长, 提 示 复 方 制 剂 中 多 种 成 分 可 能 对 阿 魏 酸 在 大 鼠 体 内 的 药 动 学 过 程 有 显 著 影 响 Li [13] 等 建 立 了 同 时 测 定 新 西 兰 大 白 兔 血 浆 中 丹 参 素 阿 魏 酸 丹 参 酮 IIA 和 隐 丹 参 酮 的 HPLC 方 法, 并 用 于 丹 芎 方 的 药 动 学 研 究 研 究 表 明, 在 耳 缘 静 脉 注 射 丹 芎 方 后 ( 以 阿 魏 酸 计, 给 药 剂 量 为 阿 魏 酸 的 血 药 浓 度 - 时 间 曲 线 符 合 二 房 室 模 型, [14] 其 t 1/2α 和 t 1/2β 分 别 为 7.0 和 何 跃 生 等 研 究 了 阿 魏 酸 钠 片 剂 在 比 格 犬 体 内 的 药 动 学, 结 果 表 明 Beagle 犬 口 服 阿 魏 酸 钠 片 剂 (100 mg) 后, 自 胃 肠 道 吸 收 迅 速, 给 药 后 平 均 30 min 即 达 血 药 浓 度 峰 值, 随 后 阿 魏 酸 钠 片 剂 在 Beagle 犬 体 内 迅 速 分 布, 其 药 - 时 曲 线 符 合 一 室 模 型, 吸 收 半 衰 期 t 1/2(ka) 为 10.9 min, 消 除 半 衰 期 t 1/2(ke) 为 29.8 min [15] 同 时 有 文 献 报 道 利 用 UPLC-MS-MS 同 时 测 定 比 格 犬 血 浆 中 阿 魏 酸 香 草 酸 芍 药 苷 和 芍 药 内 酯 苷 的 定 量 分 析 方 法, 并 研 究 比 格 犬 灌 胃 当 归 - 白 芍 药 对 提 取 物 后 阿 魏 酸 的 药 动 学 特 征 数 据 显 示 比 格 犬 灌 胃 给 予 当 归 - 白 芍 药 对 提 取 物 后, 阿 魏 酸 吸 收 和 消 除 均 较 快,t max 为 (14.55 ± 0.29)min,t 1/2 为 (45.61 ± 14.01)min 中 国 药 事 2015 年 10 月 第 29 卷 第 10 期 文 献 的 结 果 均 表 明 阿 魏 酸 吸 收 迅 速 消 除 较 快, 这 与 本 研 究 结 果 一 致 由 于 阿 魏 酸 吸 收 迅 速 和 消 除 较 快 的 药 动 学 特 性, 可 能 更 加 适 合 静 脉 注 射 给 药 虽 然 已 有 文 献 报 道 了 利 用 UPLC-MS/MS 方 法 测 定 比 格 犬 血 浆 中 阿 魏 酸 的 血 药 浓 度 并 利 用 该 方 法 进 行 比 格 犬 口 服 阿 魏 酸 的 药 代 动 力 学 研 究, 但 到 目 前 为 止 尚 未 有 详 细 阐 述 静 脉 注 射 阿 魏 酸 在 比 格 犬 体 内 药 代 动 力 学 研 究 的 报 道 本 研 究 发 现, 阿 魏 酸 在 比 格 犬 体 内 的 AUC 0-τ 与 剂 量 呈 现 良 好 的 线 性 关 系, 提 示 其 为 线 性 动 力 学 过 程, 并 且 主 要 的 药 代 动 力 学 参 数 如 平 均 驻 留 时 间 MRT 半 衰 期 t 1/2 清 除 率 Cl 和 表 观 分 布 容 积 Vd 在 各 剂 量 组 中 无 显 著 性 差 异 本 研 究 建 立 的 阿 魏 酸 检 测 方 法 及 其 在 比 格 犬 体 内 的 药 代 动 力 学 实 验 结 果, 将 为 今 后 全 面 评 价 阿 魏 酸 的 体 内 外 药 代 动 力 学 提 供 一 定 的 参 考 依 据 参 考 文 献 : [1] 林 迎 晖, 陈 文 为. 阿 魏 酸 钠 的 药 理 作 用 及 分 子 改 造 前 景 [J]. 药 学 学 报,1994,29(9):717-720. [2] 张 延 妮, 岳 宣 峰, 张 志 琪. 4 种 川 芎 化 学 成 分 与 心 肌 细 胞 膜 受 体 作 用 的 研 究 [J]. 中 国 中 药 杂 志,2004,29 (7):660-662. [3] 濮 铭 哲, 朱 文 玲, 金 征 宇, 等. 中 药 川 芎 嗪 拮 抗 内 皮 素 -1 致 冠 脉 收 缩 效 应 的 初 步 观 察 [J]. 中 国 医 学 科 学 院 学 报,1996,18(2):133-136. [4] 赵 文 红, 邓 泽 元, 范 亚 苇, 等. 阿 魏 酸 体 外 抗 氧 化 作 用 研 究 [J]. 食 品 科 学,2010,31(1):219-223. [5] 李 家 明, 赵 永 海, 钟 国 琛, 等. 阿 魏 酸 衍 生 物 的 合 成 及 抗 血 小 板 聚 集 活 性 [J]. 2011,46(3):305-310. [6] 廖 铭 能, 王 艳 平, 张 永 平, 等. 阿 魏 酸 钠 的 神 经 保 护 和 神 经 发 生 增 强 作 用 [J]. 中 国 细 胞 生 物 学 学 报,2010, 32(6):840-849. [7] 陈 勤, 叶 海 燕, 陈 逸 青, 等. 红 藻 氨 酸 诱 导 PC12 细 胞 凋 亡 及 阿 魏 酸 对 神 经 元 的 保 护 作 用 [J]. 中 国 病 理 生 理 杂 志,2013,29(7):1175-1180. [8] 刘 文 萍. 阿 魏 酸 钠 对 大 脑 神 经 系 统 保 护 作 用 的 研 究 进 展 [J]. 中 国 民 族 民 间 医 药,2010,15:63-64. [9] 曾 小 耘, 郑 锦 鸿. 阿 尔 茨 海 默 病 的 氧 应 激 与 阿 魏 酸 的 抗 氧 化 作 用 [J]. 国 际 医 药 卫 生 导 报,2008, 14(6): 113-118. [10] 欧 阳 臻, 潘 璐 琳, 汤 建 明, 等. 阿 魏 酸 川 芎 及 复 方 脑 得 生 中 阿 魏 酸 在 大 鼠 体 内 的 药 动 学 研 究 [J]. 中 国 中

中 国 药 事 2015 年 10 月 第 29 卷 第 10 期 1061 药 杂 志,2010,35(2):226-228. [11] 吴 瑞 阳, 金 艺, 刘 晓 红, 等. LC-MS/MS 法 测 定 大 鼠 血 浆 中 阿 魏 酸 的 血 药 浓 度 [J]. 沈 阳 药 科 大 学 学 报, 2013,30(8):610-614. [12] 夏 东 亚, 郭 涛, 潘 文 灏, 等. HPLC 法 测 定 心 舒 口 服 液 中 阿 魏 酸 血 浆 浓 度 及 其 在 大 鼠 体 内 的 药 动 学 研 究 [J]. 中 草 药,2004,35(1):36-38. [13] Li X, Li XR, Wang L, et al. Simultaneous Determination of Danshensu, Ferulic Acid, Cryptotanshinone and Tanshinone IIA in Rabbit Plasma by HPLC and Their Pharmacokinetic Application in Danxiongfang[J]. J Pharm Biomed Anal,2007,44(5):1106-1112. [14] 何 跃 生, 袁 玲, 曲 树 明. HPLC 法 测 定 阿 魏 酸 钠 在 Beagle 犬 体 内 血 浆 浓 度 及 药 动 学 研 究 [J]. 天 津 医 药, 2007,35(9):687-689. [15] 罗 年 翠, 王 川, 钱 大 玮, 等. UPLC-MS-MS 同 时 测 定 比 格 犬 血 浆 中 阿 魏 酸 香 草 酸 芍 药 苷 和 芍 药 内 酯 苷 的 含 量 及 其 药 动 学 研 究 [J]. 中 国 实 验 方 剂 学 杂 志, 2013,19(14):168-173. ( 收 稿 日 期 2015 年 3 月 11 日 编 辑 王 雅 雯 )