营 养 卫 生 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No [2] 治 疗 糖 尿 病 药 物 而 受 到 人 们 的 关 注 因 为 高 血 糖 是 糖 尿 病 人 各 种 并 发 症 的 主 要 诱 因, 而 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 阻 止 低 聚 糖 和

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1 , Vol. 32, No. 19 食 品 科 学 营 养 卫 生 王 光 新 1,2, 董 捷 2, 曾 晓 雄 1, 张 红 城 2, * (1. 南 京 农 业 大 学 食 品 科 技 学 院, 江 苏 南 京 ;2. 中 国 农 业 科 学 院 蜜 蜂 研 究 所, 北 京 ) 为 了 研 究 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 对 餐 后 血 糖 的 控 制 作 用, 采 用 不 同 体 积 分 数 乙 醇 对 蜂 胶 进 行 提 取, 测 定 其 总 黄 酮 和 总 多 酚 含 量, 并 利 用 高 效 液 相 对 其 成 分 进 行 初 步 分 析 并 使 用 体 外 麦 芽 糖 酶 和 蔗 糖 酶 抑 制 模 型, 研 究 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 对 来 自 小 鼠 肠 道 麦 芽 糖 酶 和 蔗 糖 酶 的 抑 制 作 用 结 果 表 明 :75% 乙 醇 提 取 物 的 总 黄 酮 含 量 最 高, 达 到 ( ± 6.15)mg 芦 丁 /g 蜂 胶 提 取 物, 而 25% 乙 醇 提 取 物 含 有 的 总 多 酚 含 量 最 高, 为 ( ± 17.40)mg 没 食 子 酸 /g 提 取 物 ; 蜂 胶 75% 乙 醇 提 取 物 对 来 自 小 鼠 肠 道 的 蔗 糖 酶 半 数 抑 制 质 量 浓 度 最 低, 为 (32.30 ± 0.60)μg/mL; 蜂 胶 水 提 取 物 对 小 鼠 肠 道 的 麦 芽 糖 酶 半 数 抑 制 质 量 浓 度 最 低, 为 (32.60 ± 0.20)μg/mL; 与 阳 性 对 照 组 ( 阿 卡 波 糖 ) 相 比, 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 对 来 自 小 鼠 肠 道 蔗 糖 酶 半 数 抑 制 质 量 浓 度 要 小, 存 在 着 显 著 差 异 (P < 0.05) 蜂 胶 ; 麦 芽 糖 酶 ; 蔗 糖 酶 ; 酚 类 化 合 物 Inhibitory Effect of Ethanol Extract from Propolis on Maltase and Sucrase in Rat Intestinal Tract WANG Guang-xin 1,2, DONG Jie 2, ZENG Xiao-xiong 1, ZHANG Hong-cheng 2, * (1. College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing , China; 2. Bee Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing , China) Abstract :In order to explore the control effect of ethanol extract from propolis (EEP) on postprandial blood glucose, propolis was extracted by ethanol with various concentrations. The contents of total flavonoids and total phenols in EEPs were analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC). The inhibitory effect of EEPs on sucrase and maltase in rat intestinal tract was also investigated. The results indicated that EEP extracted by 75% ethanol revealed the highest content of total flavonoids, which was ( ± 6.15) mg rutin/g EEP. However, EEP extracted by 25% ethanol had the highest content of total phenols, which was ( ± 17.40) mg gallic acid/g EEP. Moreover, the EEP extracted by 75% ethanol showed the highest anti-sucrase activity with IC50 of (32.30 ± 0.60) μg/ml. In contrast, the aqueous extract of propolis exhibited the highest anti-maltase activity with IC50 of (32.60 ± 0.20 )μg/ml). Compared with the positive control group, the IC50 of each EEP against sucrase from rat intestinal tract exhibited a significant decrease (P < 0.05). Key words:propolis;maltase;sucrase;phenolic compound 中 图 分 类 号 :S896 文 献 标 识 码 :A 文 章 编 号 : (2011) Ⅱ 型 糖 尿 病 是 一 种 慢 性 代 谢 紊 乱 疾 病, 以 高 血 糖 为 其 主 要 特 征 据 统 计,2008 年 全 世 界 患 Ⅱ 型 糖 尿 病 的 人 已 达 到 1.71 亿, 而 且 随 着 生 活 水 平 的 提 高, 人 数 还 [1] 在 不 断 的 增 长, 到 2030 年 估 计 要 达 到 3.66 亿 因 而, 寻 求 有 效 的 治 疗 糖 尿 病 的 药 物 和 保 健 品 成 为 该 领 域 的 研 究 热 点 自 19 世 纪 开 始,α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 就 作 为 收 稿 日 期 : 基 金 项 目 : 十 二 五 国 家 科 技 支 撑 计 划 项 目 (2011BAD33B04); 国 家 现 代 农 业 ( 蜂 ) 产 业 技 术 体 系 项 目 (CARS-45-KXJ18) 作 者 简 介 : 王 光 新 (1986 ), 男, 硕 士 研 究 生, 研 究 方 向 为 食 品 生 物 技 术 wangguangxin052@126.com * 通 信 作 者 : 张 红 城 (1967 ), 男, 副 研 究 员, 博 士, 研 究 方 向 为 食 品 生 物 技 术 zzhc@sohu.com

2 营 养 卫 生 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No [2] 治 疗 糖 尿 病 药 物 而 受 到 人 们 的 关 注 因 为 高 血 糖 是 糖 尿 病 人 各 种 并 发 症 的 主 要 诱 因, 而 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 剂 阻 止 低 聚 糖 和 双 糖 在 肠 道 中 分 解 成 单 糖, 降 低 其 吸 收 率, 达 到 抑 制 餐 后 血 糖 升 高, 从 而 实 现 对 Ⅱ 型 糖 尿 病 [3] 治 疗 蜂 胶 是 蜜 蜂 从 植 物 新 生 芽 孢 和 树 干 处 采 集 的 树 胶, 并 混 合 自 身 上 腭 分 泌 物 和 蜂 蜡 而 加 工 成 的 一 种 具 有 芳 香 气 [4] 味 的 胶 状 黏 性 物 这 一 特 性 使 得 蜂 胶 的 化 学 成 分 依 靠 [5] 蜜 蜂 所 采 集 的 胶 原 植 物 的 种 类 不 同 而 有 着 很 大 的 变 化 到 目 前 为 止, 已 经 从 蜂 胶 中 鉴 定 出 了 300 多 种 化 学 成 分, [6-7] 包 括 黄 酮 类 酚 酸 类 萜 烯 类 等 生 物 活 性 物 质 现 代 药 理 研 究 表 明, 蜂 胶 具 有 抗 氧 化 抑 菌 消 炎 抗 [8-14] 病 毒 抗 癌 保 肝 等 作 用, 而 且 蜂 胶 具 有 改 善 人 体 健 康 和 治 疗 某 些 疾 病 的 作 用, 如 免 疫 调 节 和 治 疗 糖 尿 [15-16] 病 等, 特 别 是 蜂 胶 对 Ⅱ 型 糖 尿 病 的 治 疗 作 用, 越 来 越 受 到 人 们 的 关 注 目 前, 关 于 蜂 胶 提 取 物 能 够 控 制 Ⅱ 型 糖 尿 病 人 的 餐 后 血 糖 水 平 已 有 报 道, 但 是 主 要 是 集 中 [17-19] 在 动 物 实 验 上, 而 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 对 动 物 α- 糖 苷 酶 的 作 用, 特 别 是 对 来 自 小 鼠 肠 道 中 的 蔗 糖 酶 和 麦 芽 糖 酶 未 见 报 道 本 研 究 通 过 建 立 体 外 α- 葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 模 型, 研 究 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 对 来 自 小 鼠 肠 道 中 的 蔗 糖 酶 和 麦 芽 糖 酶 的 抑 制 作 用, 揭 示 出 有 效 控 制 餐 后 血 糖 控 制 最 佳 蜂 胶 乙 醇 提 取 物, 有 助 于 改 进 蜂 胶 的 提 取 工 艺, 更 加 有 效 的 利 用 蜂 胶 资 源 1 材 料 与 方 法 1.1 材 料 与 试 剂 蜂 胶 为 中 国 农 业 科 学 院 蜜 蜂 研 究 所 提 供 小 鼠 肠 道 丙 酮 粉 阿 卡 波 糖 二 甲 基 亚 砜 (DMSO) 哌 嗪 -N,N - 双 (2- 乙 磺 酸 )(PIPES) 美 国 Sigma 公 司 ; 麦 芽 糖 蔗 糖 乙 醇 北 京 化 学 试 剂 公 司 ; 葡 萄 糖 氧 化 检 测 试 剂 盒 南 京 建 成 生 物 试 剂 有 限 公 司 ; 所 有 化 学 试 剂 均 为 分 析 纯 1.2 仪 器 与 设 备 AL204 电 子 分 析 天 平 中 国 梅 特 勒 - 托 利 多 ( 上 海 ) 有 限 公 司 ;UV-2550 紫 外 - 可 见 分 光 光 度 计 ( 配 有 UV-probe 处 理 软 件 ) Shimadzu LC-6AD 高 效 液 相 色 谱 仪 日 本 岛 津 公 司 ; 恒 温 加 热 器 台 湾 Wealtec 公 司 ; FW135 中 草 药 粉 碎 机 天 津 市 泰 斯 特 仪 器 有 限 公 司 ; HZQ-F160 恒 温 振 荡 培 养 箱 太 仓 市 实 验 设 备 厂 ; RE-3000 旋 转 蒸 发 仪 上 海 亚 荣 生 化 仪 器 厂 ;LCJ-18S 冷 冻 干 燥 机 北 京 松 源 华 兴 科 技 发 展 有 限 公 司 ;KQ-500DB 型 数 控 超 声 波 清 洗 器 昆 山 市 超 声 仪 器 有 限 公 司 1.3 方 法 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 [20] 称 取 10g 经 粉 碎 机 粉 碎 过 40 目 筛 后 的 原 蜂 胶, 按 照 料 液 比 1:20 的 比 例 加 入 200mL 不 同 体 积 分 数 乙 醇 溶 液, 超 声 处 理 2h, 然 后 放 置 在 摇 床 上 37 摇 12h 将 提 取 液 1000 g 离 心 15min 后 取 上 清 液, 旋 转 蒸 发 器 浓 缩 后 进 行 真 空 冷 冻 干 燥, 得 到 的 固 形 物 放 在 - 20 保 存 备 用 总 多 酚 含 量 的 测 定 [21] 标 准 曲 线 的 建 立 : 精 确 称 取 0.005g 没 食 子 酸, 蒸 馏 水 定 容 至 50mL, 准 确 量 取 上 述 标 准 液 mL 置 于 10mL 的 容 量 瓶 中, 各 加 入 6mL 蒸 馏 水, 摇 匀, 再 加 入 0.5mL 2mol/mL 斐 林 酚 试 剂, 充 分 摇 匀 1min 之 后 加 入 碳 酸 钠 溶 液 (20g 碳 酸 钠 /100mL) 1.5mL, 混 匀 定 容, 放 置 10min 后 在 765nm 波 长 处 测 定 其 吸 光 度 以 吸 光 度 对 没 食 子 酸 质 量 浓 度 绘 制 标 准 曲 线 得 回 归 方 程 y = 67.08x (R 2 = ) 样 品 测 定 时 根 据 不 同 溶 剂 提 取 物 的 质 量 浓 度 不 同 取 样 量 也 不 同, 但 吸 光 度 选 取 在 0.2~0.8 之 间 总 黄 酮 含 量 的 测 定 [22] 标 准 溶 液 的 配 置 : 精 确 称 量 0.01g 芦 丁 标 准 品, 用 60% 乙 醇 溶 解, 定 容 至 100mL 容 量 瓶 中 得 到 质 量 浓 度 为 0.1mg/mL 标 准 溶 液 标 准 曲 线 的 建 立 : 准 确 吸 取 上 述 标 准 溶 液 mL 置 于 25mL 的 容 量 瓶 中, 加 水 补 到 12mL, 摇 匀, 再 加 入 5%NaNO2 溶 液 1mL 充 分 摇 匀 ; 放 置 6min 之 后 加 入 10%Al(NO3)3 溶 液 1mL 摇 匀 ; 放 置 6min 之 后 加 入 4.3% NaOH 溶 液 10mL, 充 分 摇 匀, 最 后 用 60% 乙 醇 定 容 至 25mL 放 置 15min 后, 在 波 长 510nm 处 测 定 其 吸 光 度, 以 芦 丁 溶 液 的 质 量 浓 度 为 横 坐 标, 吸 光 度 为 纵 坐 标, 绘 制 标 准 曲 线, 得 回 归 方 程 y = x (R 2 = ) 样 品 测 定 时 根 据 不 同 溶 剂 提 取 物 的 浓 度 不 同 取 样 量 也 不 同, 但 吸 光 度 选 取 在 0.2~0.8 之 间 HPLC 的 分 析 条 件 [23] Shim-Pack PREP-ODS (250mm 4.6mm,5μm) 色 谱 柱 ; 检 测 温 度 35 ; 检 测 波 长 280nm; 进 样 量 10μL; 流 动 相 :B 相 : 甲 醇,A 相 :1 乙 酸 水 水 溶 液, 所 用 的 梯 度 洗 脱 程 序 如 下 :0min,18% B;10min,28% B; 35min,38%B;58min,50%B;70min,55%B; 85min, 59%B; 95min,62%B; 105 min,70%b;120min, 75%B;140min,75%B, 流 速 为 1mL/min 小 鼠 肠 道 的 蔗 糖 酶 和 麦 芽 糖 酶 抑 制 率 的 测 定 采 用 小 鼠 肠 道 丙 酮 粉 制 取 的 酶 液 来 研 究 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 对 双 糖 酶 的 抑 制 率 [24] 称 取 100mg 小 鼠 肠 道 丙 酮 粉, 加 入 15mL 0.9% 的 生 理 盐 水 溶 液,1000 g 离 心 40min, 取 上 清 液 4 储 藏 备 用 取 不 同 体 积 分 数

3 , Vol. 32, No. 19 食 品 科 学 营 养 卫 生 乙 醇 的 蜂 胶 提 取 物 0.1mL 放 入 试 管 中, 加 入 0.75mL 取 PIPES 和 0.8mL 56mmol/L 蔗 糖 溶 液 或 10mmol/L 麦 芽 糖 溶 液, 然 后 再 加 入 0.7mL 上 述 制 备 的 酶 液 37 下 恒 温 30min 后, 取 出 加 入 0.75mL 2mol/L Tris-HCl, 然 后 利 用 葡 萄 糖 氧 化 检 测 试 剂 盒, 在 波 长 505nm 处 测 定 其 吸 光 度 (A1) 用 0.1mL PIPES 代 替 蜂 胶 乙 醇 提 取 物 溶 液, 其 他 条 件 不 变, 测 定 其 吸 光 度 (A0), 同 时 做 空 白 对 照 组 以 上 实 验 进 行 3 次 平 行 A1 抑 制 率 /% =(1 - ) 100 A 数 据 统 计 使 用 统 计 软 件 SPASS, 统 计 方 法 单 因 素 方 差 分 析, 使 用 邓 肯 进 行 多 重 比 较 2 结 果 与 分 析 2.1 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 中 总 多 酚 和 总 黄 酮 含 量 的 测 定 由 表 1 可 知, 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 中 多 酚 含 量 有 明 显 差 别 其 中 25% 乙 醇 提 取 物 所 含 有 的 总 多 酚 量 最 多 达 到 了 ( ± 17.40)mg 没 食 子 酸 /g 蜂 胶 提 取 物, 其 次 是 水 提 取 物 含 量 这 说 明 蜂 胶 中 的 多 酚 类 物 质 多 数 易 溶 于 水, 而 25% 乙 醇 提 取 物 中 多 酚 含 量 最 高, 可 能 是 由 于 部 分 醇 溶 性 多 酚 被 提 取 出 来 所 致 由 表 2 可 知, 在 乙 醇 体 积 分 数 低 于 75% 的 时 候, 随 着 乙 醇 体 积 分 数 的 增 加, 提 取 的 黄 酮 总 量 也 在 不 断 的 增 加, 达 到 最 大 值 ( ± 6.15)mg 芦 丁 /g 蜂 胶 提 取 物, 而 后 随 着 乙 醇 体 积 分 数 的 加 大, 总 黄 酮 的 提 取 量 却 有 所 减 少, 这 可 能 由 于 部 分 水 溶 性 的 多 酚 类 物 质 没 有 溶 解 提 [25] 取 出 来 Ahn 等 曾 报 道 过 中 国 各 地 蜂 胶 中 的 总 多 酚 和 总 黄 酮 的 含 量, 与 之 相 比, 本 实 验 所 测 得 量 要 高 于 其 报 道, 这 可 能 是 由 于 所 测 定 的 蜂 胶 产 地 不 同 所 致 2.3 不 同 提 取 方 法 对 蜂 胶 中 酚 类 化 合 物 含 量 的 影 响 标 准 品 液 相 图 谱 如 图 1 所 示 由 表 3 可 知, 蜂 胶 水 提 物 和 25% 乙 醇 提 取 物 的 活 性 成 分 主 要 集 中 在 酚 酸 类, 黄 酮 类 物 质 含 量 较 少, 其 中 咖 啡 酸 的 含 量 最 高, 表 1 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 中 的 总 多 酚 含 量 Table 1 Effect of ethanol concentration on the content of total polyphenols in EEP 乙 醇 体 积 分 数 /% 总 多 酚 含 量 /(mg 没 食 子 酸 / g 蜂 胶 提 取 物 ) ± ab ± a ± ab ± b ± cb ± 1.80 d 注 : 肩 标 字 母 不 同, 差 异 显 著 ( P < 0.05) 下 同 表 2 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 中 的 总 黄 酮 含 量 Table 2 Effect of ethanol concentration on the content of total flavonoids in EEP 乙 醇 体 积 分 数 /% 总 黄 酮 含 量 /(mg 芦 丁 / g 蜂 胶 提 取 物 ) ± 0.67 a ± 3.21 b ± 4.08 ce ± 6.15 df ± 8.13 ec ± 5.96 fd 表 3 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 中 各 组 分 含 量 Table 3 Contents of individual components in EEPs 组 分 不 同 提 取 物 中 各 组 分 含 量 /(mg/g 蜂 胶 提 取 物 ) 水 25% 乙 醇 50% 乙 醇 75% 乙 醇 95% 乙 醇 100% 乙 醇 咖 啡 酸 p- 香 豆 酸 阿 魏 酸 羟 基 -4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 苯 甲 酸 ,4- 二 甲 氧 基 肉 桂 酸 肉 桂 酸 山 奈 酚 异 鼠 李 素 芹 菜 素 鼠 李 素 松 属 素 柯 因 咖 啡 酸 苯 乙 酯 高 良 姜 素 苯 甲 酰 肉 桂 酯 注 :. 未 检 测 到

4 营 养 卫 生 食 品 科 学 2011, Vol. 32, No 分 别 为 mg/g 蜂 胶 提 取 物 ; 而 高 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 活 性 物 主 要 集 中 在 黄 酮 类 化 合 物, 特 别 是 松 属 素 柯 因 和 高 良 姜 素 的 含 量 很 高 但 从 总 体 上 看, 不 同 的 蜂 胶 乙 醇 提 取 物 活 性 成 分 主 要 是 酚 酸 类 和 黄 酮 类, 这 和 之 前 有 关 中 国 大 陆 地 区 蜂 胶 主 要 成 分 种 [26] [27-28] 类 报 道 相 符 合, 而 欧 洲 巴 西 和 台 湾 地 区 的 蜂 胶 成 分 却 与 之 有 区 别, 这 个 差 异 来 自 蜜 蜂 采 集 的 胶 源 植 物 的 不 同 mau 时 间 /min 1. 3,4- 二 羟 基 苯 甲 醛 (3,4-dihydroxybenzaldehyde); 羟 基 苯 甲 酸 (4- hydroxy-benzoic acid);3. 香 草 酸 (vanillic acid);4. 咖 啡 酸 (caffeic acid);5. 香 兰 素 (vanillin);6. p- 香 豆 酸 (p-coumaric acid);7. 阿 魏 酸 (ferulic acid); 羟 基 -4- 甲 氧 基 肉 桂 酸 (3-hydroxy-4-methoxy-cinnamicacid);9. 苯 甲 酸 (benzoic acid);10. 3,4- 二 甲 氧 基 肉 桂 酸 (3,4-dimethoxy cinnamic acid); 11. 肉 桂 醇 (cinnamyl alcohol);12. 杨 梅 酮 (myricetin);13. 桑 色 素 (morin); 14. 肉 桂 酸 (cinnamic acid);15. 坎 非 醇 (kaempferol);16. 异 鼠 李 素 (isorhamnetin);17. 芹 菜 素 (apigenin);18. 鼠 李 素 (rhamnetin);19. 松 属 素 (pinocembrin);20. 柯 因 (chrysin);21. 咖 啡 酸 苯 乙 酯 (caffeic acid phenethyl ester);22. 高 良 姜 素 (galangin);23. 苯 甲 酰 肉 桂 酯 (benzyl cinnamate) 图 1 标 准 品 液 相 图 谱 Fig.1 Chromatogram of mixed standards 2.4 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 对 小 鼠 肠 道 双 糖 酶 抑 制 作 用 表 4 不 同 体 积 分 数 的 蜂 胶 乙 醇 提 取 物 对 小 鼠 肠 道 酶 的 抑 制 作 用 Table 4 Inhibitory effect of EEPs on enzymes in rat intestinal tract IC50/(μg/mL) 提 取 物 蔗 糖 酶 麦 芽 糖 酶 水 提 取 物 ± 0.50 a ± 0.20 a 23 25% ± 1.00 ac ± 0.30 b 50% ± 1.00 acd ± 2.90 ce 乙 醇 提 取 物 75% ± 0.60 ace ± 3.00 d 95% ± 0.50 aceg ± 1.50 ec 100% ± 0.60 acdeg ± 1.80 f 阿 卡 波 糖 ( 阳 性 对 照 组 ) ± b ± 0.90 g 由 表 4 可 知, 与 阳 性 对 照 组 相 比 较, 各 种 提 取 物 对 小 鼠 肠 道 中 的 蔗 糖 酶 抑 制 作 用 效 果 更 好, 且 存 在 显 著 差 异 (P < 0.05) 当 乙 醇 体 积 分 数 低 于 50% 时, 随 着 乙 醇 体 积 分 数 的 增 加, 提 取 物 对 蔗 糖 酶 的 半 数 抑 制 质 量 浓 度 逐 渐 增 大 而 75% 乙 醇 提 取 物 对 蔗 糖 酶 的 半 数 抑 制 质 量 浓 度 达 到 最 小, 为 (32.30 ± 0.60)μg/mL, 之 后 随 着 乙 醇 体 积 分 数 的 增 加 变 化 不 明 显 了 结 合 表 1 和 表 2 可 知, 蜂 胶 水 提 取 物 以 及 低 体 积 分 数 乙 醇 (< 50%) 提 取 物 中 主 要 是 水 溶 性 的 酚 酸 类 物 质, 它 对 蔗 糖 酶 抑 制 起 着 主 [29] 要 作 用 Gao 等 也 研 究 了 几 种 水 果 中 的 酚 酸 对 蔗 糖 酶 的 抑 制 作 用, 结 果 显 示 其 比 阳 性 对 照 组 要 好 的 多 75% 乙 醇 提 取 物 含 总 黄 酮 最 多, 且 酚 酸 类 物 质 总 量 也 比 较 多, 这 使 得 对 蔗 糖 酶 的 抑 制 效 果 最 好 这 表 明 蜂 胶 对 蔗 糖 酶 的 抑 制 作 用 不 仅 仅 是 来 自 酚 酸, 也 包 括 黄 酮 类 物 质, 可 能 是 两 者 共 同 作 用 的 结 果 蜂 胶 水 提 和 25% 乙 醇 提 取 物 对 于 麦 芽 糖 酶 的 抑 制 效 果 较 好, 其 半 数 抑 制 质 量 浓 度 分 别 为 (32.60±0.20)μg/mL 和 (44.80±0.30)μg/mL 但 与 阳 性 对 照 组 相 比, 各 提 取 物 的 作 用 效 果 都 不 如 阿 卡 波 糖 对 麦 芽 糖 酶 的 抑 制 除 75% 乙 醇 提 取 物 外, 随 着 乙 醇 体 积 分 数 增 加, 提 取 物 对 麦 芽 糖 酶 的 半 数 抑 制 质 量 浓 度 变 大, 对 于 75% 乙 醇 提 取 物 特 异 性 可 能 主 要 在 于 其 含 有 较 多 的 黄 酮 类 物 质 和 相 对 较 多 的 酚 酸 类 物 质, 两 者 起 到 了 协 同 作 用 所 导 致 结 合 表 1 和 表 2 可 知, 蜂 胶 水 提 物 和 25% 乙 醇 提 取 物 中 酚 酸 类 物 质 含 量 最 大, 这 表 明 在 对 麦 芽 糖 酶 抑 制 中 酚 酸 类 物 可 能 起 着 主 要 的 作 用 再 由 表 3 可 知, 蜂 胶 水 提 物 和 25% 乙 醇 提 取 物 中, 咖 啡 酸 的 含 量 最 大, 说 明 咖 啡 酸 可 能 是 酚 酸 类 物 质 中 抑 制 麦 芽 糖 酶 主 要 物 质 之 一 而 黄 酮 类 物 质 随 着 乙 醇 体 积 分 数 增 加 而 不 断 增 加, 但 其 对 麦 芽 糖 酶 作 用 效 果 却 相 对 较 弱, 这 可 能 一 方 面 是 由 于 黄 酮 类 物 质 在 水 溶 液 体 系 下 溶 解 度 较 低, 另 一 方 面 部 分 黄 酮 类 物 质 对 麦 芽 糖 酶 没 有 抑 制 作 [30] 用 Gao 等 也 曾 报 道 了 几 种 合 成 的 黄 酮 类 物 质 对 对 麦 芽 糖 酶 没 有 抑 制 效 果 综 上 所 述 可 以 看 出, 蜂 胶 对 小 鼠 肠 道 中 α- 糖 苷 酶 的 抑 制 作 用 不 仅 仅 是 来 自 酚 酸, 也 包 括 黄 酮 类 物 质, 甚 至 可 能 是 两 者 共 同 作 用 的 结 果 3 结 论 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物, 随 着 所 用 的 乙 醇 体 积 分 数 不 同, 提 取 物 所 含 有 物 质 种 类 和 含 量 也 不 同, 其 对 酶 的 抑 制 作 用 也 有 着 不 同 蜂 胶 水 提 取 物 和 25% 乙 醇 提 取 物 主 要 是 酚 酸 类, 且 25% 乙 醇 提 取 物 的 总 多 酚 含 量 最 大, 为 ( ± 17.40)mg 没 食 子 酸 /g 蜂 胶 提 取 物 之 后 随 着 乙 醇 体 积 分 数 的 增 加, 提 取 物 的 成 分 主 要 集 中 在 黄 酮 类, 且 75% 乙 醇 提 取 物 总 黄 酮 含 量 最 大, 为 ( ± 6.15)mg 芦 丁 /g 蜂 胶 提 取 物 此 外, 各 个 体 积 分 数 的 提 取 物 对 小 鼠 肠 道 酶 的 作 用 效 果 也 不 同,75% 乙 醇 提 取 物 对 来 自 小 鼠 肠 道 的 蔗 糖 酶 半 数 抑 制 质 量 浓 度 最 低, 为 (32.30 ± 0.60)μg/mL; 蜂 胶 水 提 物 对 小 鼠 肠 道 的 麦 芽 糖 酶 半 数 抑 制 质 量 浓 度 最 低, 为 (32.60 ± 0.20)μg/mL 这 表 明 蜂 胶 对 小 鼠 肠 道 蔗 糖 酶 和 麦 芽 糖 酶 的 抑 制 作 用 不

5 , Vol. 32, No. 19 食 品 科 学 营 养 卫 生 仅 仅 是 来 自 酚 酸, 也 包 括 黄 酮 类 物 质, 甚 至 可 能 是 两 者 共 同 作 用 的 结 果 因 而 可 以 得 出, 蜂 胶 不 同 体 积 分 数 乙 醇 提 取 物 可 以 有 效 的 抑 制 哺 乳 动 物 肠 道 中 α- 糖 苷 酶 的 活 性 这 对 于 控 制 糖 尿 病 人 的 餐 后 高 血 糖 起 着 一 定 的 作 用, 为 进 一 步 利 用 蜂 胶 资 源, 开 发 功 能 性 食 品 提 供 理 论 依 据 参 考 文 献 : [1] SHINDE J, TALDONE T, BARLETTA M, et al. α-glucosidase inhibitory activity of Syzygium cumini (Linn.) Skeels seed kernel in vitro and in Goto-Kakizaki (GK) rats[j]. Carbohydrate Research, 2008, 343: [2] YE F, SHEN Z, XIE M. Alpha-glucosidase inhibition from a Chinese medical herb(ramulus mori) in normal and diabetic rats and mice[j]. Phytomedicine, 2002, 9: [3] KIM Y M, WANG M H, RHEE H I. A novel α -glucosidase inhibitor from pine bark[j]. Carbohydrate Research, 2004, 339: [4] BANSKOTA A H, TEZUKA Y T, KADOTA S. Recent progress in pharmacological research of propolis[j]. Phytother Res, 2001, 15: [5] ASSYA P, MILENA P, CHRISTINA K, et al. New biologically active compounds from Kenyan propolis[j]. 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