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秋汲
5 years ago
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1 液质联用在水产品分析中的应用柯明容厦门 Sales

2 主要内容水产品的质谱检测项目及背景介绍水产品质谱分析的特点及 AB SCIEX 公司的策略应用案例 AB SCIEX

3 主要内容水产品的质谱检测项目及背景介绍水产品质谱分析的特点及 AB SCIEX 公司的策略应用案例 AB SCIEX

4 水产品分析哪些物质? 孔雀石绿 ( 有色和隐色 ) 硝基呋喃类 ( 常见的有四种药物 ) 氯霉素磺胺类 ( 磺胺噻唑磺胺嘧啶磺胺甲基异恶唑磺胺多辛等 ) 喹诺酮类 ( 诺氟沙星恩诺沙星环丙沙星等 ) 其它 : 喹乙醇代谢物氟苯尼考甲基睾酮喹烯酮及其代谢物 AB SCIEX

5 孔雀石绿的背景简介孔雀石绿又称苯胺绿碱性绿, 孔雀石绿易溶于水, 溶液呈绿色孔雀石绿对真菌等具有相当好的抑制效果和抗外寄生虫效果, 且价格低廉, 在水产品养殖中被广泛用于水体消毒和预防鱼病 ( 水霉病等 ) 近年来, 发现孔雀石绿特别是其代谢产物在水产动物体内有明显的蓄积残留现象, 在体内不容易降解, 其化学官能团三苯甲烷是一类致癌物质孔雀石绿及其代谢产物通过鱼肉食物链传递给人类, 会使人体在不知不觉中受害此外, 人食用经孔雀石绿治疗的水产品后, 对免疫系统和繁殖系统有较大的影响我国于 2002 年 5 月将孔雀石绿列入食品动物禁用的兽药及其化合物清单中, 禁止用于所有食品动物孔雀石绿代谢相对较快代谢产物无色孔雀石绿残留时间较长, 可以作为检测的标志物 AB SCIEX

6 硝基呋喃类的背景简介硝基呋喃类抗菌剂是一种广效性抗生素, 因价格较低廉且疗效佳, 广泛用于畜禽及水产养殖鱼类, 用以治疗由大肠杆菌或沙门式杆菌所引起之肠炎, 养殖鱼之疥疮赤鳍病溃疡病等, 于饲料中添加或养殖药浴使用硝基呋喃类抗菌剂及其代谢物对人体长期食入有致癌致畸胎及安全之顾虑,1995 年起欧盟禁止硝基呋喃类抗菌剂在食用之畜禽及水产动物使用, 并严格执行对输入之食用鱼虾及禽类进行硝基呋喃的残留检测,2002 年美国亦起而效尤硝基呋喃类抗菌剂原型药在生物体内代谢迅速, 无法检测 ; 利用代谢物的检测可反映硝基呋喃类抗菌剂的残留状况硝基呋喃类抗菌剂常见有以下四种药物呋喃唑酮呋喃它酮呋喃西林和呋喃妥因 ( 代谢物分别为 AZ AMZ AHD SEM) AB SCIEX

7 硝基呋喃的代谢及衍生化途径 ( 衍生化试剂 : 邻硝基苯甲醛 ) 2 N N N 代谢 H 2 N N 衍生化 N 2 CH N N 呋喃唑酮 AZ NP-AZ 2 N N N N 代谢 NH N N 衍生化 N 2 CH N N 呋喃它酮 AMZ NP-AMZ N 2 N N H N 代谢 H 2 N H N 衍生化 N 2 H C N H N NH 2 NH 2 NH 2 呋喃西林 SC NP-SC 2 N N N NH 代谢 H 2 N N NH 衍生化 N 2 H C N N NH 呋喃妥英 AHD NP-AHD AB SCIEX

8 氯霉素的背景简介在水产养殖业中, 细菌性疾病对水产动物的危害仍非常严重, 氯霉素抗菌效果好 ; 氯霉素对人的造血系统消化系统具有严重的毒性反应, 有可能引发人的再生障碍性贫血 ; 同时还会引起视神经炎皮疹等不良反应中国农业部已将氯霉素从 2000 年版中国兽药典中删除列为禁药而欧盟的进口食品卫生标准规定氯霉素含量标准为不得检出不得检出的含义是氯霉素含量在 1ppb 以下, 即含量在十亿分之一以下 ; 德国部分州的特殊检测标准为 0.2ppb AB SCIEX

9 磺胺类的背景简介磺胺类药物是应用最早的一类人工合成抗菌药, 具有抗菌谱广疗效确定方便安全的特点, 对水产养殖中的细菌性竖鳞病烂鳃病弧菌病疖疮赤鳍病肠炎鞭毛虫病有良好的防治效果, 已在水产养殖中广泛应用它可能导致过敏反应, 使患者出现药物热和皮疹, 严重者可发生多形性红斑剥脱性皮炎等还可能使患者出现骨髓抑制 : 血小板减少, 白细胞下降, 导致血红蛋白尿溶血性贫血再生障碍性贫血, 严重者可致死 ; 另外, 还可能导致患者肝脏及肾脏损害 ; 以及恶心, 呕吐等消化道不适症状少数患者用药后会出现头晕, 头痛, 乏力, 萎靡和失眠等精神症状所以欧盟和日本的相关法规都对磺胺类药物在各种食品中的残留限量作了明确的规定, 动物源性食品中每种磺胺的最大残留限量不能大于 20ug/kg(20ppb) AB SCIEX

10 喹诺酮类的背景简介这类药物抗菌谱广高效低毒组织穿透能力强, 抗菌作用是磺胺类的近千倍, 可与第三代头孢类抗生素相媲美, 成为治疗动物疾病的主要抗菌药物但随之而来的在动物源性食品中残留问题也引起了人们的重视, 已证实喹诺酮类药物存在耐药日本欧盟均对喹诺酮类药物制定了最大允许限量, 但美国等一些国家未允许用于水产养殖业中国农业部 <50ppb, 中国出入境检验检疫局根据出口国家不同而有不同规定 ; AB SCIEX

11 欧盟 2002/657/EC 法规根据欧盟规定, 动物用药分为两类 : 1 Group A 为禁用药物 (Banned Drugs): 为不得检出且完全禁止使用, 法规对于这类药物的检验方法有 : 最低检出极限要求 (Minimum Required Performance Limit,MRPL), 如 : 硝基呋喃氯霉素孔雀绿兴奋剂等 2 Group B 为合法可使用的兽药 (Legal Medicine): 对于不同的药物规定有不同的最大允许残留量 ( Maximum ResidueLimit, MRL) 如 : 四环素类 (10 种 ) 磺胺类 (20 种 ) 喹诺酮类 (20 种 ) 等 AB SCIEX

12 欧盟对违禁药物残留组分的鉴定和确证 AB SCIEX

13 各种离子的鉴别点数 AB SCIEX

14 各种分析方法的鉴别点 AB SCIEX

15 主要内容水产品的质谱检测项目及背景介绍水产品质谱分析的特点及 AB SCIEX 公司的策略应用案例 AB SCIEX

16 水产品质谱分析的客户群体 CIQ 水产渔业 ( 水产研究所渔业监测中心 ) 企业 ( 出口型企业, 如烤鳗厂 ) 高校 ( 水产相关专业, 如水产学院 ) AB SCIEX

17 水产品质谱分析的特点样品基质复杂负离子检测是常规检测项目同时定性定量的需求部分客户有做代谢物鉴定及代谢组学 ( 如水产研究所 ) AB SCIEX

18 AB SCIEX 的策略一 -QQQ 传统竞争 -QQQ 样品基质复杂污染信号干扰 Turbo V, 气帘气, 脉冲计数检测器 ( 强调非毛细管接口 ) 负离子为常规检测项目 - 正负离子检测能力要求高 - 电子倍增管 ( 非光电倍增管 ) AB SCIEX

适合大流速和大体积进样, 最高流速可达 3mL/min APCI 源新型陶瓷加热技术, 更高的电离效率

19 亮点一便利的即插即用离子源耐用可靠方便更换覆盖宽范围的应用领域和化合物包容各种不同的流速 Turbo V 电离源配置 ESI 和 APCI 最洁净的离子源 - 气帘和废气排放装置适合大流速和大体积进样, 最高流速可达 3mL/min APCI 源新型陶瓷加热技术, 更高的电离效率 ESI 和 APCI 探头快速更换 (< 1 分钟 ) 2011 AB SCIEX AB SCIEX

20 亮点二专利的气帘气设计高抗污染助气化的实现 rifice plate Curtain plate rifice plate Curtain plate Turbo V 离子源 + 简单接口的设计大大提高仪器对抗污染的能力确保复杂基质中低浓度分析物的优异重现性三片式的接口维护简易方便气帘气 AB SCIEX

有效消除传统四级杆记忆效应 - 减少交叉污染 High Gas Pressure, Collisional

21 亮点三 :LINAC Q2: 专利的线性加速高压聚焦技术分析更低含量杂质高压碰撞池设计使离子连续加速, 快速通过碰撞池 - 提高灵敏度分析更多样品 MRM 模式下, 减少离子驻留时间, 而不损失灵敏度 - 提高分析速度和通量分析结果更加可靠有效消除传统四级杆记忆效应 - 减少交叉污染 High Gas Pressure, Collisional Focusing Low Gas Pressure LINAC / 8 mtorr entrance exit AB SCIEX

22 亮点四 : 数字式的检测器 : 脉冲离子计数器有效保证低浓度样品测定的真实性 AB SCIEX

23 Accuracy% 模拟式数字式 Concentration (pg/ul) 脉冲计数式检测器相对于模拟检测器而言, 数据结果更真实, 准确度和精度更高在低浓度范围 (<10ppb) 数字式检测器相对于模拟式检测器具有更好的准确度 AB SCIEX

24 亮点五 :Cliquid 软件特点完全符合国际法规要求完整的实验方法学 - 从样品处理方法到结果简单的鼠标点击即可得到准确结果数据安全性保护 / 身份识别方法可扩展性一目了然的报告格式让初学者的分析报告即可可以达到专家级的效果!!! AB SCIEX

25 第一家专用于食品安全和环保领域的质谱中文软件 AB SCIEX

26 专利技术仪器亮点总结 1. Turbo V TM 离子源 ( 辅助加热气, 废气排放设计 ): 提高样品离子化效率, 提高灵敏度, 降低基质抑制, 广泛适合各种 HPLC 分离条件 3. LINAC 线性离子加速碰撞池技术 : 使离子连续加速通过碰撞池,MRM 模式下 ( 定量 ), 允许减少离子驻留时间, 而不损失灵敏度, 实现多组分同时检测 ; 同时, 可消除记忆效应, 保证数据的可靠性 4. 脉冲技术检测器技术 : 真实反映信号情况, 低浓度下无衰减 2011 AB SCIEX 2. 气帘气设计 : 抗污染能力强, 利于去离子簇化, 离子流稳定, 重现性好, 结构简单, 性能可靠, 易于维护 5. 可立快软件 : 让初学者的分析报告达到专家级的效果 AB SCIEX

27 AB SCIEX 的策略二 -QTrap 差异化竞争 -QTrap 代谢物鉴定及代谢组学 ( 如水产研究所 )-Qtrap 同时定性定量, 阳性确证和假阳性排除 -Qtrap ( MRM-IDA-EPI,MRM3) AB SCIEX

28 主要内容水产品的质谱检测项目及背景介绍水产品质谱分析的特点及 AB SCIEX 公司的策略应用案例 AB SCIEX

29 应用案例案例 1, 孔雀石绿隐色孔雀石绿同时定性定量 AB SCIEX

30 仪器条件色谱柱,Phenomenex Synergi 4u MAX-RP 80A 50X2.00 mm 4 micron 流动相 A,5% 乙腈水溶液, 含 0.1% 甲酸 B,95% 乙腈水溶液, 含 0.1% 甲酸时间 (min) 流速 (ml/min) B (%) 化合物 Q1(Da) Q3(Da) DP(V) CE(eV) 孔雀石绿隐色孔雀石绿 AB SCIEX

31 IDA 工作流程 (MRM-IDA-EPI) N MRM 条件判断 Y 感兴趣的母离子增强子离子扫描步骤 1, 若干个 MRM 同时采集, 可用于定量 ; 步骤 2, 系统自动判断 : 某个 MRM 通道采集到的信号强度超过预设值 ( 即出现色谱峰 ); 步骤 3, 当步骤 2 的条件满足时, 系统自动切换 (<1ms) 为线性离子阱模式, 触发增强子离子扫描 (EPI), 获得对应 MRM 通道之母离子的 MSMS 谱图, 可用于定性分析 ; 返回步骤 AB SCIEX

32 某基质加标样品 MRM 色谱图 I n t e n s i t y... XIC of +MRM (4 pairs): / Da ID: MG 1 from Sample 24 (SAM_65_SPK_d50_RSD) of DataSAM.wiff (Turbo Spray), Smoothed 1.5e5 1.0e5 5.0e4 孔雀石绿 MRM 329/313 MRM 329/ Max. 1.6e5 cps. RSD = 1.38%,n=10 I n t e n s i t y Time, min XIC of +MRM (4 pairs): / Da ID: LMG 1 from Sample 24 (SAM_65_SPK_d50_RSD) of DataSAM.wiff (Turbo Spray), Smoothed 1.3e4 1.0e 隐色孔雀石绿 MRM 331/239 MRM 331/ Max. 1.3e4 cps. RSD = 1.42%,n= Time, min AB SCIEX

33 基质加标样品谱库搜索确证孔雀石绿样品中化合物谱图孔雀石绿标准化合物谱图匹配度 (Fit)83.1% AB SCIEX

34 基质加标样品谱库搜索确证隐色孔雀石绿样品中化合物谱图隐色孔雀石绿标准化合物谱图匹配度 (Fit)83.1% AB SCIEX

35 应用案例案例 2, 水产品种 8 种磺胺和两种喹诺酮兽药的定性定量测定 AB SCIEX

36 IDA 工作流程 (MRM-IDA-EPI) N MRM 条件判断 Y 感兴趣的母离子增强子离子扫描步骤 1, 若干个 MRM 同时采集, 可用于定量 ; 步骤 2, 系统自动判断 : 某个 MRM 通道采集到的信号强度超过预设值 ( 即出现色谱峰 ); 步骤 3, 当步骤 2 的条件满足时, 系统自动切换 (<1ms) 为线性离子阱模式, 触发增强子离子扫描 (EPI), 获得对应 MRM 通道之母离子的 MSMS 谱图, 可用于定性分析 ; 返回步骤 AB SCIEX

37 仪器条件液相条件色谱柱,Shim-Pack VP-DS 2.1X150mm 流动相 A,5% 乙腈水溶液, 含 0.1% 甲酸 B,95% 乙腈水溶液, 含 0.1% 甲酸时间 (min) 流速 (μl/min) B% 序号英文名中文名保留时间 (min) 1 Sulfadiazine 磺胺嘧啶 Sulfathiazole 磺胺噻唑 Sulfamerazine 磺胺甲基嘧啶 Sulfameter 磺胺对甲氧嘧啶 Sulfamethoxypyridazine 磺胺甲氧哒嗪 Sulfamonomethoxine 磺胺间甲氧嘧啶 Sulfamethoxazole 磺胺甲基异噁唑 Flumequin 氟甲喹 Sulfaquinoxaline 磺胺喹噁啉 xolinic 噁喹酸 AB SCIEX

38 某样品定性定量数据 R e l. I n t. ( % ) R e l. I n t. ( % ) +EPI (281.10) Charge (+0) CE (35) CES (15) FT (5): E % 80% 60% 40% 20% Max. 3.2e7 cps R e l. I n t. ( % ) +EPI (281.10) Charge (+0) CE (35) CES (15) FT (5): E... Max. 2.9e7 cps. 0% 0% m/z, Da m/z, Da XIC of +MRM (9 pairs): Exp 1, / amu Expected RT: 2.9 ID: SDZ 1 from Sample 5 (Sam_IDA_1_1) of Data _ID... Max cps. I n t e n e6 5.0e6 4.0e6 3.0e6 2.0e6 1.0e6 100% 80% 60% 40% 20% Time, min +EPI (281.10) Charge (+0)... Max. 3.2e7 cps. +EPI (262.10) Charge (+0)... Max. 2.9e7 cps. +EPI (262.10) Charge (+0) C... Max. 2.4e7 cps. 100% 80% 60% 40% 20% D 阳性检出为 5 种 F 100% H 100% J 80% 80% % m/z, Da R e l. I n t. ( % ) 60% 40% 20% D E F % m/z, Da E H R e l. I n t. ( % ) 60% 40% 20% J % m/z, Da 二级质谱图 AB SCIEX

39 某样品定性定量数据说明使用上页图中的二级质谱图, 搜索标准谱库, 获得的谱库匹配度, 记录在下表中同时, 利用 MRM 定量数据计算所得样品中目标化合物含量上图中所对应保留时间谱库匹配度含量 RSD 英文名中文名二级质谱图 (min) (%) (ng/ml) (%) D Sulfameter 磺胺对甲氧嘧啶 E Sulfamethoxypyridazine 磺胺甲氧哒嗪 F Sulfamonomethoxine 磺胺间甲氧嘧啶 H Flumequin 氟甲喹 J xolinic 噁喹酸 AB SCIEX

40 某样品中阳性检出的谱库搜索确证举例噁喹酸样品中化合物谱图噁喹酸标准化合物谱图匹配度 (Fit)83.1% AB SCIEX

41 标准曲线示例磺胺间甲氧嘧啶 y = e5 x r = weighting: 1 / x^2 理论浓度 (ng/ml) 实测浓度 (ng/ml) 准确度 (%) AB SCIEX

42 应用案例案例 3, 兽药假阳性确证 AB SCIEX

43 某样品和基质加标样克伦特罗 MRM 色谱图的比较 MRM 277/203 MRM 277/168 I n t e n s i t y, c p s XIC of +MRM (6 pairs): / amu Expected RT: 3.4 ID: CLB 1 from Sample 1 (Matrix_SPK_0.005) of DataCURVE_MRM.w e4 7.0e4 6.0e4 5.0e4 4.0e4 3.0e4 2.0e4 1.0e 基质加标 MRM Ratio = Max. 2.3e5 cps. I n t e n s i t y, c p s Time, min XIC of +MRM (6 pairs): / amu Expected RT: 3.4 ID: CLB 1 from Sample 9 (CK1) of DataCURVE_MRM.wiff (Turbo Spra... Max. 2.3e5 cps. 3.5e4 3.0e4 2.5e4 2.0e4 1.5e4 1.0e 实际样品 MRM Ratio = Time, min AB SCIEX

44 样品基质加标样和标准溶液 3.35 分钟处,m/z 277 的 EPI 图比较 EPI 证明, 样品中克伦特罗为假阳性 R e l. I... +EPI (277.10) Charge (+0) CE (35) CES (15) FT (10): Exp 2, to min from Sample 2 (CK1_IDA) of DataCURVE_IDA.wiff (T % 80% 60% 40% 20% R e l. I Max. 2.5e7 cps. 0% m/z, Da +EPI (277.10) Charge (+0) CE (35) CES (15) FT (10): Exp 2, to min from Sample 1 (Matrix_SPK_0.1_IDA) of DataCURVE... Max. 2.7e7 cps. 100% 80% 60% 40% 20% 0% m/z, Da +EPI (277.10) Charge (+0) CE (35) CES (15) FT (10): Exp 2, to min from Sample 2 (STD_0.1_IDA) of DataCURVE.wiff (Tu... Max. 2.2e7 cps. R e l. I % 80% 60% 40% 20% % m/z, Da 样品基质加标标准溶液 AB SCIEX

45 样品基质加标样 MRM 3 277/203/132 色谱图比较 I n t e n s i t y, c p s MRM 3 分析可以清晰地证明该样品中不存在克伦特罗 TIC of +MS3 (277.10),(259.10): Exp 1, from Sample 6 (STD_0.2pg_MS3) of wiff (Turbo Spray) 2.4e7 2.0e7 1.5e7 1.0e7 5.0e6 I n t e n s i t y, c p s 4.42 Max. 2.4e7 cps Time, min TIC of +MS3 (277.10),(259.10): from Sample 4 (Sample_006_MS3) of wiff (Turbo Spray) Max. 3.9e6 cps. 3.9e6 3.5e6 3.0e e e e e e5 基质加标实际样品 Time, min AB SCIEX

46 MRM 3 工作原理 Q1 Q2 Q0 Q1 IQ3 LIT Q2 EXB 1 级母离子选择 RF only CAD = high 1. Q1,1 级母离子选择 1 级子离子阱集选择 2 级母离子碎裂 2 级子离子阱集扫描 2. 母离子在 Q2 中裂成碎片离子 3. LIT1 级子离子阱集 4. LIT 选择 2 级母离子 ( 即选择某个 1 级子离子 ), 并击碎 5. LIT2 级子离子阱集 6. LIT 做质谱扫描 AB SCIEX

47 QTRAP 和四级杆系统典型工作原理的比较增强子离子扫描 EPI 子离子扫描 MS AB SCIEX

48 克伦特罗 MRM 3 定量原理 MRM 3 277/203/132 R e l. I n t. ( % ) +MS2 (277.10) CE (35): 28 MCA scans from Sample 1 (MS2) of _Cle.wiff (Turbo Spray) 100% R e l. I n t. ( % ) 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% Max. 3.7e7 cps. 0% m/z, Da +MS3 (277.10),(203.00): to min from Sample 4 (MS3_277_203) of _Cle.wiff (Turbo Spray) Max. 3.2e7 cps. 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% % m/z, Da AB SCIEX

49 样品 C+1 和基质加标样 MRM 3 色谱图和 MRM 色谱图的比较 MRM 3 可以明显去除绝大多数基质干扰 I n t e n s i t y, c p s XIC of +MS3 (277.10),(203.00): to Da from Sample 11 (C+1) of DataCURVE_MRM3.wiff (Turbo Spray) 1.07e7 1.00e7 9.00e6 8.00e6 7.00e6 6.00e6 5.00e6 4.00e6 3.00e6 2.00e6 1.00e6 I n t e n s i t y, c p s Max. 1.1e7 cps Time, min XIC of +MS3 (277.10),(203.00): to Da from Sample 3 (Matrix_SPK_0.01) of DataCURVE_MRM3.wiff (Turbo Spray) Max. 5.8e6 cps. 5.8e6 5.0e6 4.0e6 3.0e6 2.0e6 1.0e 样品 MRM 3 m/z 277/203/132 基质加标 MRM 3 m/z 277/203/ Time, min I n t e n s i t y, c p s I n t e n s i t y, c p s XIC of +MRM (6 pairs): / amu Expected RT: 3.4 ID: CLB 1 from Sample 11 (C+1) of DataCURVE_MRM.wiff (Turbo Spr e5 3.0e5 2.5e5 2.0e5 1.5e5 1.0e5 5.0e Max. 3.3e5 cps Time, min TIC of +MRM (6 pairs): from Sample 2 (Matrix_SPK_0.01) of DataCURVE_MRM.wiff (Turbo Spray) Max. 2.3e5 cps. 2.3e5 2.0e5 1.5e5 1.0e5 5.0e 样品 MRM 277/203 基质加标 MRM 277/ Time, min AB SCIEX

50 总结水产品分析对质谱的需求 : 抗基质效应, 负离子检测代谢物鉴定及代谢组学, 同时定性定量 ( 阳性确证和假阳性排除 ) AB SCIEX 的 QQQ 和 QTRAP 系统拥有优秀的定量分析能力良好的抗污染能力优异的定量灵敏度重现性和准确度 AB SCIEX 的 QTRAP 系统拥有独特的定性能力同时获得目标化合物高质量的二级质谱图, 通过自动化的谱库匹配, 进行阳性确证和假阳性排除 (MRM-IDA-EPI) 特有的 MRM 3 功能, 大大提高了定量和定性的能力 AB SCIEX

51 谢谢

硝基呋喃类抗喹诺酮类抗体 2-CPAHD-BSA( 或 OVA) 抗 2-NPAHD-BSA( 或 OVA) 抗 2-NPAOZ-BSA( 或 OVA) 抗 2-NPAMOZ-BSA( 或 OVA) 抗 2-NPSEM-BSA( 或 OVA) 抗达氟沙星单抗培氟沙星单抗诺氟沙星单抗沙拉沙星

硝基呋喃类抗喹诺酮类抗体 2-CPAHD-BSA( 或 OVA) 抗 2-NPAHD-BSA( 或 OVA) 抗 2-NPAOZ-BSA( 或 OVA) 抗 2-NPAMOZ-BSA( 或 OVA) 抗 2-NPSEM-BSA( 或 OVA) 抗达氟沙星单抗培氟沙星单抗诺氟沙星单抗沙拉沙星兽残类分类产品名称简介规格备注四环素类抗体四环素类单克隆抗体 IC50:0.5-1.0ppb 四环素 -BSA 抗土霉素 -BSA 抗四环素类抗强力霉素 -BSA 抗金霉素 -BSA 抗呋喃唑酮代谢物 (2-NPAOZ) 单抗 IC50:0.25ppb 呋喃它酮代谢物 (2-NPAMOZ) 单抗 IC50:0.25ppb 硝基呋喃类抗呋喃西林代谢物 (2-NPSEM) 体单抗