GC 和进样口条件 TRACE 1310 GC 进样体积 (µl): 1.0 衬管 : SSL 单锥形 (P/N:453A2342) 进样口 ( ): 240 进样模块和模式 : 不分流进样载气 (ml/min): He,1.2 柱温箱温度

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巧蟹伏
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1 基于三重四极杆 TSQ 8000 Evo 平台的快速方法将婴儿食品中的农药残留的分析效率提高三倍应用文献 Cristian Cojocariu, 1 Michael T. Hetmanski, 2 Paul Silcock, 1 and Richard J. Fussell 2 1 赛默飞世尔科技, 英国朗科恩 2 食品与环境研究院 (FERA), 英国约克关键词农药分析, 婴儿食品,GC-MS/MS,TraceFinder, 食品安全目的评估 Thermo Scientific TSQ 8000 Evo GC-MS/MS 在农药残留分析方面的性能和分析效率前言农药是超过 1000 种不同的化合物的统称, 用于控制和消除害虫目前已有各种严格的法规要求来确保安全有效的使用这些化学品, 避免给人类野生动植物和环境带来不利影响包括 EU 在内的许多国际机构已经规定了食品和饲料中农药的最大残留限量 (MRLs) 1 和痕量水平的农药残留的检测方法因此, 农药的定量分析和准确鉴定需要使用灵敏度高选择性强和耐用的分析仪器随着易腐坏商品需要快速分析的压力不断增加, 测试周期要求越来越短, 高通量的第三方分析实验室在寻求不断提高分析效率近期以来, 通过采用 QuEChERS( 快速简单便宜有效耐用和安全 ) 样品萃取方法与气相或液相色谱 (GC 或 LC) 质谱 (MS) 联用技术相结合已经实质性的提高了分析效率本文报告了通过采用先进快速的 GC-MS/MS 技术与新的软件相结合以减少数据采集和处理的时间, 从而进一步提高分析效率乙腈是 QuEChERS 常用的萃取溶剂直接测定乙腈中的农药残留能避免费时费钱的溶剂置换过程但是乙腈的极性特点会程序升温方法相结合能提高实验室分析效率本文使用了 TSQ 8000 Evo 三重四极杆 GC-MS/MS, 其革新的 EvoCell 碰撞腔体技术与 time-srm 软件的高效选择反应监测相结合使分析效率的提高成为可能本文根据 SANCO 标准全面评估了直接使用乙腈的快速 GC 分析的耐用性 2 仪器和方法设置 TSQ 8000 Evo 三重四极杆 GC-MS/MS 仪器与 Thermo Scientific TRACE 1310 GC 相结合用于本研究进样采用 Thermo Scientific TriPlus RSH 自动进样器, 色谱分离采用 Thermo Scientific TraceGOLD TG-5SilMS 15 m 0.25 mm I.D µm 毛细管色谱柱 (P/N: ) 其余仪器参数如下表所示导致色谱峰不集中, 而且其高膨胀系数限制了进样体积本文采用了一种快速简单和耐用的工作流程来分析婴儿食品中的农药残留由于这些化学品更容易损害婴儿的健康, 婴儿食品中农药的准确和灵敏的测定定量和定性鉴定尤其重要结果显示直接进样小体积的 QuEChERS 提取物, 与快速

2 GC 和进样口条件 TRACE 1310 GC 进样体积 (µl): 1.0 衬管 : SSL 单锥形 (P/N:453A2342) 进样口 ( ): 240 进样模块和模式 : 不分流进样载气 (ml/min): He,1.2 柱温箱温度程序温度 1( ): 60 保持时间 (min): 1 温度 2( ): 180 升温速率 ( /min): 50 温度 3( ): 320 升温速率 ( /min): 35 保持时间 (min): 4 质谱条件 TSQ 8000 Evo 质谱仪传输线 ( ): 280 离子化类型 : EI 离子源 ( ): 320 电子能量 (ev): 70 采集模式 : t-srm Q2 气体压力 ( 氩气 ) (psi): 60 Q1 峰宽 (Da): 0.7 Q3 峰宽 (Da): 0.7 TSQ 8000 Evo 三重四极杆质谱仪的 MS/MS 模式采用电子轰击电离源 (EI) 每个化合物选择两个 SRM 离子对 - 一个用于定量, 另一个用于定性一共采集得到 264 个 SRM 离子对, 驻留时间根据同时监测的 SRM 离子对数量不同在 1 ms 到 52 ms 之间色谱数据采集在定时选择反应监测模式 (t-srm) 进行, 每个峰至少采集 12 个点样品前处理婴儿食品样品按照柠檬酸盐缓冲体系的 QuEChERS 方数据处理数据采集和处理采用 Thermo Scientific TraceFinder 3.2 版本软件, 此软件包括仪器控制方法开发和定量工作流程为一体每种化合物用一个 SRM 离子对定量, 另一个 SRM 离子对用于定性结果和讨论本研究介绍了一种快速 GC 用于提高实验室测定婴儿食品中的多种农药残留的分析效率的方法方法直接使用 QuEChERS 的萃取溶剂乙腈做为最终萃取物的溶剂, 并采用低体积和加热不分流的方式进样通过测定婴儿食品样品萃取物中目标农药成分的色谱分离灵敏度线性和重现性来评估 TSQ 8000 Evo GC-MS/MS 系统的性能样品处理量增加三倍常规 GC 方法分析 132 种农药成分通常需要大约 42 分钟, 以保证每个色谱峰都有足够的扫描次数 ( 图 1), 特别是包含多个共洗脱峰的时间窗口一个目标物色谱峰的准确积分至少需要次扫描在此之前, 提高扫描速度需要牺牲仪器灵敏度, 特别是同时监测几个 SRM 离子对的时候采用如上所述的快速 GC 条件能将 GC 分析时间减少到大 11 分钟, 并且不需要减少每个色谱峰采集的数据点 ( 图 2 和 3) 这是由于 EvoCell 技术能快速清除掉碰撞池中的离子, 从而提高数据采集速度, 而且不会影响仪器的灵敏度快速数据采集能在更短的时间内收集到更多的信息, 最终实现快速 GC 分析采用此快速方法能将样品分析效率提高大约三倍, 通宵运行的样品序列能增加大约三倍样品 / 标样进样次数案萃取均质后的样品 (10 g) 加入乙腈 (10 ml) 萃取, 然后加入 MgSO 4 (4 g) NaCl(1.0 g) 柠檬酸氢二钠倍半水合物 (0.5 g) 和二水合柠檬酸三钠 (1.0 g) 样品净化采用分散固相萃取 [ 每毫升萃取物需 MgSO4(150 mg) C18 (50 mg),psa(50 mg) 和碳 (7.5 mg)] 在最终萃取物 (1 g/ml 的乙腈溶液 ) 中加入 132 种农药的混合溶液, 对应的加标物浓度为 ng/g(ppb), 某些分析物加标量为 ng/g (ppb)

3 全扫 ng/g TG-5 SILMS 色谱柱,30 m 0.25 mm 0.25 µm GC 分析时间 :37 分钟 Relative Abundance Minutes 图 1. 常规 GC-MS 方法测定浓度范围为 ng/g 的 132 种农药成分的总离子流色谱图 (TIC, 全扫描 ), 总分析时间大约为 40 分钟图中标出了色谱图中的第一个 ( 敌敌畏,RT = 5.77 min) 和最后一个 ( 溴氰菊酯,RT = min) 农药成分的色谱峰 ng/g TG-5 SILMS 色谱柱,15 m 0.25 mm 0.25 µm GC 分析时间 :11 分钟 Relative Abundance Minutes 图 2. 快速 GC-MS 方法测定浓度范围为 ng/g 的 132 种农药成分的 SRM 色谱图, 总分析时间大约为 11 分钟图中标出了色谱图中的第一个 ( 敌敌畏,RT = 4.33 min) 和最后一个 ( 溴氰菊酯,RT = 9.15 min) 农药成分的色谱峰

4 100 Relative Abundance 灵敏度几乎所有的目标农药成分 (97%) 的检测浓度都为 0.5 或 1.0 ng/g(ng/ml), 线性校准曲线的浓度范围为 ng/g( 或 ng/g) 此低浓度农药成分的色谱图和校准曲线示例见图 4 在最低校准浓度 5 10 ng/g(0.5 1 默认 MRL) 下能轻松测定所有化合物, 用于化合物鉴定的所有离子比在平均离子比 ( 根据整个浓度范围内的校准曲线计算得到的 ) 的 15% 范围以内 Minutes 图 3. 乙基对硫磷的 SRM 色谱图,RT = 6.89 min, 一个色谱峰采集 13 次扫描 ( 峰宽 1.8 秒, 驻留时间 1.7 ms) 仪器检出限 (IDL) 的评估和峰面积重复性目标农药成分的 IDL 的测定方法为重复进样 (n=20) 浓度为 5 ng/g( 和 10 ng/g) 的基质匹配标准样品, 并将对应自由度 (99% 置信度 ) 的 Student s-t 临界值考虑在内图 4. 氟乐灵二甲戊乐灵和灭菌丹的色谱图 (0.5 pg 进入色谱柱 ) 和线性 ( 无内标校正 ) 示例

5 本实验的峰面积重现性的平均 RSD 为 7.3%,IDL 值的范围为 0.2 ng/g( 二甲吩草胺 ) 到 3.7 ng/g( 克菌丹 )( 表 3) 如果采用内标校正补偿进样误差, 峰面积重现性的 RSD 能进一步改善表 1. 进入色谱柱绝对量为 5 或 10 pg 的农药成分的峰面积重现性 (% RSD,n = 20) 和仪器 IDL 计算值 ( 单位 ng/g) 编号化合物 RT(min) 上柱量 (pg) %RSD IDL 1 乙草胺苯草醚艾氏剂益棉磷苯霜灵 α- 六六六 β- 六六六 γ- 六六六甲羧除草醚联苯菊酯联苯乙基溴硫磷溴螨酯乙嘧酚磺酸酯噻嗪酮硫线磷克菌丹双酰草胺氯炔灵 α- 顺式氯丹 γ- 反式氯丹百菌清氯苯胺灵乙基毒死蜱甲基毒死蜱乙菌利异噁草松蝇毒磷氰草津环草敌氟氯氰菊酯, 峰 I-IV 三氟氯氰菊酯 -S 氯氰菊酯, 峰 I-IV p,p'- 滴滴滴 p,p'- 滴滴伊 o,p'- 滴滴涕 p,p'- 滴滴涕溴氰菊酯二嗪磷敌草腈苯氟磺胺氯硝胺

6 编号化合物 RT(min) 上柱量 (pg) %RSD IDL 43 敌敌畏百治磷狄氏剂吡氟酰草胺二甲吩草胺二苯胺硫丹 I 硫丹 II 硫丹硫酸盐异狄氏剂苯硫磷扑草灭乙硫磷乙氧呋草黄灭线磷乙螨唑土菌灵乙嘧硫磷喹螨唑杀螟硫磷甲氰菊酯氰戊菊酯 I 氰戊菊酯 II 氟氰戊菊酯 I 氟氰戊菊酯 II 编号化合物 RT(min) 上柱量 (pg) %RSD IDL 68 氟咯草酮氟酰胺氟胺氰菊酯灭菌丹呋霜灵七氯环氧顺式七氯环氧反式七氯六氯苯环嗪酮异菌脲马拉氧磷地胺磷吡唑草胺虫螨畏杀扑磷甲氧滴滴涕嗪草酮

7 编号化合物 RT(min) 上柱量 (pg) %RSD IDL 86 敌草胺除草醚酞菌酯噁草酮氧化氯丹乙氧氟草醚甲基对氧磷乙基对硫磷甲基对硫磷二甲戊灵五氯苯胺甲氯酰草胺氯菊酯 I 氯菊酯 II 伏杀硫磷亚胺硫磷甲基嘧啶磷乙基嘧啶磷腐霉利扑草胺敌稗炔螨特巴胺磷苯胺灵苄草丹丙硫磷吡菌磷哒螨灵哒嗪硫磷 E- 啶斑肟喹硫磷灭螨猛五氯硝基苯苄呋菊酯螺螨酯四氯硝基苯七氟菊酯特丁津特丁净杀虫畏三氯杀螨砜胺菊酯甲基立枯磷甲苯氟磺胺野麦畏氟乐灵乙烯菌核利

8 图 5. 浓度线性范围为 ng/g( 或 ng/g) 的校准曲线的相关系数 (R 2 ) 和残差 (%RSD) 虚线代表 10% 和 20% RSD 的残差限值响应值的线性采用基质匹配标准样品测定了 GC-MS/MS 系统在浓度范围为 ng/g( 某些分析物为 ng/g) 的线性所有目标物的相关系数 (R 2 ) 都大于 0.99, 平均值为 R 2 = 此外, 所有残差值均小于 20%, 平均为 10%( 图 5) 其它农药成分的全面分析虽然对已知数量的目标农药成分的筛查和定量非常重要, 但是人们对筛查样品中除目标物以外的其余化合物的兴趣在不断增加要回答我的样品中还有什么这个问题, 必须筛选样品中除目标化合物以外可能存在的其余未知或全新的农药成分, 或者代谢 / 转化产物快速分析仪器能同时采集全扫描和 SRM/ SIM 数据本实验采用 TSQ 8000 Evo GC-MS/MS 系统筛选了婴儿食品样品中额外的化合物同时在全扫描和 SRM 模式下采集数据全扫描 /SRM 色谱图示例如图 6 根据 NIST 质谱数据库鉴定出提取的质谱图上洗脱时间为 RT= 5.89 min 的峰为异丙甲草胺 ( 此化合物不在加标溶液中或目标物之列 ), 可能性达 95% 结果显示了同时数据采集模式的优势, 这只可能通过类似 TSQ 8000 Evo GC-MS/MS 的快速仪器方法来实现结论本文显示 Thermo Scientific TSQ 8000 Evo 三重四极杆 GC-MS/ MS 系统能将实验室的分析能力增加三倍样品分析效率的提高可能通过如下特征实现 : 直接分析乙腈萃取物, 不需要额外的溶剂置换步骤 EvoCell 快速碰撞池技术能快速采集数据, 缩短 GC 分析时间同时全扫描和 SRM 数据采集全面测定目标和非目标农药成分通过将全扫描数据与 NIST 数据库比对鉴定出更多农药成分方法灵敏度优异所有农药成分的检测和鉴定的浓度水平低至 5 10 ng/g,idl 值范围为 ng/g 结果显示采用 TSQ 8000 Evo GC-MS/MS 系统的快速 GC 数据采集能力能带来优异的峰面积重现性和化合物线性

9 应用文献图 6. 同时全扫描 /SRM 数据采集全面分析婴儿食品污染物全扫描采集窗口鉴定出 RT = 5.89 min 的化合物为异丙甲草胺 (NIST) 赛默飞世尔科技 ( 中国 ) 有限公司

22 8529 專用或主要用於第 8525 至 8528 節所屬器具之零件 23 8308 用於衣服靴鞋帳蓬手提包旅行用品或其他已製作品之卑金屬搭鈕帶搭鈕之框架帶扣帶扣搭鈕眼環眼及其

22 8529 專用或主要用於第 8525 至 8528 節所屬器具之零件 23 8308 用於衣服靴鞋帳蓬手提包旅行用品或其他已製作品之卑金屬搭鈕帶搭鈕之框架帶扣帶扣搭鈕眼環眼及其附表一項次 4 位碼稅號我國對哥倫比亞出口符合哥國零關稅項目清單 ( 以 2014 年海關稅則前 4 碼排名前 300 項產品為比對基礎 ) 中文名稱 2013/01-2013/12 2014/01-2014/12 單位 : 金額 ( 美元 ) 名次增減比 (%) 全部貨品出口總額

GC 和 进 样 口 条 件 TRACE 1310 GC 进 样 体 积 (µl): 1.0 衬 管 : SSL 单 锥 形 (P/N:453A2342) 进 样 口 ( ): 240 进 样 模 块 和 模 式 : 不 分 流 进 样 载 气 (ml/min): He,1.2 柱 温 箱 温 度

GC 和进样口条件 TRACE 1310 GC 进样体积 (µl): 1.0 衬管 : SSL 单锥形 (P/N:453A2342) 进样口 ( ): 240 进样模块和模式 : 不分流进样载气 (ml/min): He,1.2 柱温箱温度