1312 中南大学学报 ( 医学版 ) J Cent South Univ (Med Sci) 2016, 41(12) http://www.csumed.org DOI:10.11817/j.issn.1672-7347.2016.12.010 www.csumed.org/xbwk/fileup/pdf/2016121312.pdf 乳酸脱氢酶 -5 在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义 董菲 1, 隋爱霞 2 1, 景红梅 ( 1. 北京大学第三医院血液科, 北京 100191;2. 河北省人民医院肿瘤一科, 石家庄 050051 ) [ 摘要 ] 目的 : 探讨乳酸脱氢酶同工酶 (lactate dehydrogenase,ldh)-5 在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义 方法 : 利用琼脂糖凝胶电泳法及酶促法分别对 63 例非霍奇金淋巴瘤患者的 LDH 及 LDH-5 表达水平进行检测, 对两组阳性进行比较 结果 :63 例患者的中位发病年龄为 56(19~84) 岁, 男 36 例, 女 27 例 初治组 43 例 LDH 及 LDH-5 总阳性比较差异有统计学意义 (P<0.05), 其中 22 例弥漫大 B 细胞淋巴瘤及 9 例 T 细胞淋巴瘤 LDH-5 阳性明显多于 LDH(P<0.05), 而 12 例小 B 细胞淋巴瘤 LDH 及 LDH-5 阳性比较差异无统计学意义 (P>0.05); 疾病进展组 29 例 LDH 及 LDH-5 总阳性比较差异无统计学意义 (P>0.05); 疾病复发组 15 例 LDH 及 LDH-5 总阳性比较差异无统计学意义 (P>0.05), 但 11 例小 B 细胞淋巴瘤 LDH-5 的阳性明显多于 LDH(P<0.05) 结论:LDH-5 可作为非霍奇金淋巴瘤判断肿瘤侵袭性 预测复发的指标 [ 关键词 ] 乳酸脱氢酶 -5; 非霍奇金淋巴瘤 ; 琼脂糖凝胶电泳 Expression of lactate dehydrogenase-5 in non-hodgkin lymphoma and its clinical significance DONG Fei 1, SUI Aixia 2, JING Hongmei 1 ( 1. Department of Hematology, Peking University Third Hospital, Beijing 100191; 2. Department of Oncology, Hebei General Hospital, Shijiazhuang 050051, China ) ABSTRACT Objective: To determine expression of lactate dehydrogenase (LDH)-5 in non-hodgkin lymphoma and its clinical significance. Methods: LDH-5 levels and LDH levels in NHL patients were examined by agarose gel electrophoresis and enzymatic method (n=63), respectively. Positive rates of LDH-5 and LDH were statistically analyzed. Results: The median age of NHL patients was 56(19 84) years old, including 36 males and 27 females. The positive numbers for LDH-5 and LDH in the initial treatment group (n=43) were significantly different (P<0.05). There was significant difference in 22 cases of diffuse large B cell 收稿日期 (Date of reception):2015-12-21 第一作者 (First author): 董菲,Email: knowflying@163.com 通信作者 (Corresponding author): 景红梅,Email: jinghm@yahoo.com 基金项目 (Foundation item): 北京大学第三医院种子基金 (Y79467-1); 河北省卫生计生委课题 (20130113) This work was supported by Seed Fund of Peking University Third Hospital (2014) and Project of Health and Family Planning Commission of Hebei (20130113), P. R. China.
乳酸脱氢酶 -5 在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义董菲, 等 1313 lymphoma and in 9 cases of T cell lymphoma, whereas there was not significant difference in 12 cases of small B cell lymphoma (P>0.05). In 15 cases under the status of progress, the difference of LDH-5 and LDH expressions were not significant (P>0.05), whereas the difference in cases of small B cell lymphoma was significant (P<0.05). Conclusion: LDH-5 can be used as an index for NHL to judge the tumor load and to predict the recurrence. KEY WORDS lactate dehydrogenase-5; non-hodgkin lymphoma; agarose gel electrophoresis 非霍奇金淋巴瘤 (non-hodgkin s lymphoma,nhl) 是一大类异质性的恶性淋巴增殖性疾病, 占新发肿 瘤病例的 4% 和肿瘤相关死亡的 3%, 我国淋巴瘤患者 中 NHL 的构成比为 87.69%, 且发病率逐年上升, 成 为目前发病率增长最快的恶性肿瘤之一 [1], 故对其 早期诊断 早期治疗尤为重要 乳酸脱氢酶 (lactate dehydrogenase,ldh) 被国际 NHL 预后因素研究组认为 是最具独立性的重要预后指标之一 [2], 包括 LDH-1 至 LDH-5 共 5 种同工酶, LDH-5 主要存在于骨骼肌中, 但在许多恶性肿瘤中其表达明显升高 [3-5],Alexandra [6] 等的研究发现 NHL 患者中存在 LDH-5 组织异常表达 现象 本研究将不同疾病状态患者 LDH-5 阳性与 LDH 阳性相比较, 旨在探究在 NHL 患者中检测血 清 LDH-5 的意义 1 资料与方法 1.1 病例资料 收集北京大学第三医院血液科 2013 年 11 月至 2015 年 4 月收治的病例, 病例均根据临床表现 组织 病理学 免疫组织化学 ( 免疫组化 ) 及影像学检查确诊 为 NHL, 肝 肾 心肌功能检查均无异常, 共计 63 例患者 63 例患者中男性 36 例, 女性 27 例, 中位年龄 56(19~84) 岁, 具体病理分型为 : 弥漫大 B 细胞淋巴瘤 30 例, 小 B 细胞淋巴瘤 22 例 ( 慢性淋巴细胞白血病 / 小 淋巴细胞淋巴瘤 5 例, 滤泡细胞淋巴瘤 8 例, 套细胞 淋巴瘤 8 例, 黏膜相关淋巴组织淋巴瘤 1 例 ),T 细胞 淋巴瘤 11 例 (T 淋巴母细胞淋巴瘤 4 例, 间变大细胞淋 巴瘤 3 例, 外周 T 细胞淋巴瘤 2 例, 肠病 T 细胞淋巴瘤 1 例, 血管免疫母细胞淋巴瘤 1 例 ) 共行 LDH 及 LDH-5 检测 87 例次, 其中初治病例 43 例次, 疾病进展 29 例 次, 疾病复发 15 例次 根据患者的临床表现 体格检查 影像学 (CT PET/CT B 超或 X 线胸片 ) 结果, 参照美国国立综 合癌症网 (National Comprehensive Cancer Network, NCCN) 淋巴瘤疗效标准评判治疗效果, 将患者按照 疾病状态分为初发组 疾病进展组及疾病复发组 1.2 标本采集与处理采集患者 4 ml 静脉血置于促凝管内, 以 4 000 r/min 离心 (10 min) 标本, 吸出血清进行分析 血清置于室温 15~30 可保存 1 周 1.3 LDH 的检测 LDH-5 检测采用琼脂糖凝胶电泳法, 使用法国 Sebia 公司的 LDH 同工酶检测试剂盒及法国 HYDRASYS SEBLA PN1210 全自动电泳仪进行, 将 5 种同工酶总量设定为 100%,LDH-5 含量百分比正常范围为 2.8%~6.2%, 高于 6.2% 定义为阳性 LDH 检测采用酶促法, 使用美国 Beckman Coulter 公司全自动生化分析仪 AU5800\AU2700 进行, 正常值范围为 109~245 U/L, 高于 245 U/L 定义为阳性 1.4 统计学处理应用 SPSS 19.0 软件分析数据, 采用 Mcnemar 配对卡方检验对 LDH 及 LDH-5 阳性进行比较, 所有 P 值为双向,P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 初治组临床特点及 LDH,LDH-5 阳性初治组共 43 例患者, 其中男 25 例, 女 18 例, 大于 60 岁患者占 46.5%, 病理分型以弥漫大 B 细胞型 (diffuse large B cell lymphoma,dlbcl) 居多, 占 51.2%( 表 1) 初治组 43 例患者 LDH 表达水平为 129~1 829 (297.1±275.5) U/L, 为 210.0 U/L,LDH-5 表达量为 4.2%~39.9%(13.5±5.5)%, 13.2%, 两组阳性比较差异有统计学意义 (P<0.05) 其中 22 例初治弥漫大 B 细胞淋巴瘤及 9 例 T 细胞淋巴瘤两指标阳性比较差异有统计学意义 (P<0.05), 而 12 例小 B 细胞淋巴瘤患者两指标阳性比较差异无统计学意义 (P>0.05, 表 2) 2.2 疾病进展组临床特点及 LDH,LDH-5 阳性疾病进展组共 29 例患者, 其中男 18 例, 女 11 例, 大于 60 岁的患者占 48.3%, 病理分型小 B 细胞淋巴
1314 中南大学学报 ( 医学版 ), 2016, 41(12) http://www.csumed.org 瘤及弥漫大 B 细胞淋巴瘤各占 37.9%,T 细胞淋巴瘤占 24.2%( 表 3) 疾病进展组患者 LDH 表达水平为 178~957 (362.6±169.6) U/L, 为 310.0 U/L,LDH-5 表达量为 3.0%~28.1%(15.3±7.3)%, 15.8% 按病理类型进行比较后, 弥漫大 B 细胞型 小 B 细胞型及 T 细胞型淋巴瘤的两指标阳性比较均差异无统计学意义 (P>0.05, 表 4) 2.3 疾病复发组临床特点及 LDH 和 LDH-5 阳性疾病复发组共 15 例患者, 其中男 4 例, 女 11 例, 大于 60 岁的患者占 66.7%, 病理分型小 B 细胞淋巴瘤占 73.3%, 其余为弥漫大 B 细胞淋巴瘤, 占 26.7% ( 表 5) 疾病复发组患者 LDH 表达水平为 161~605 (283.0±122.8) U/L, 为 261.0 U/L,LDH-5 表达量为 3.9%~21.5%(10.1±5.1)%, 8.9%, 两指标阳性比较差异无统计学意义 (P>0.05) 按病理类型分类后,11 例小 B 细胞淋巴瘤, 两指标阳性比较差异有统计学意义 (P<0.05), 而 4 例弥漫大 B 细胞淋巴瘤患者两指标阳性比较差异无统计学意义 (P>0.05, 表 6) 表 1 初治组临床特点 Table 1 Clinical characteristics of the initial treatment group 因素 n 构成比 /% <60 23 53.5 60 20 46.5 性别男 25 58.1 女 18 41.9 分期 I~II 13 30.2 III~IV 30 69.8 B 症状 * 有 18 41.9 无 25 58.1 病理类型小 B 细胞淋巴瘤 12 27.9 弥漫大 B 细胞型 22 51.2 T 细胞型 9 20.9 * 发热 ( 体温 38.5 以上 ) 盗汗 体质量减轻 ( 就诊前 6 个月内无其他原因体质量减轻 10% 以上 ) 表 2 初治组 LDH 及 LDH-5 表达的及阳性 Table 2 Median value and positive numbers of LDH-5 and LDH expression in different pathological types of initial treatment group 初发组 43 210.0 13.2 13 38 <0.05 病理类型弥漫大 B 细胞型 22 225.5 12.8 7 19 <0.05 小 B 细胞型 12 216.0 12.0 4 11 >0.05 T 细胞型 9 228.0 16.9 2 8 <0.05 表 3 疾病进展组临床特点 Table 3 Clinical characteristics of the progressing disease group 因素 构成比 /% 因素 构成比 /% B 症状 <60 15 51.7 有 14 48.3 60 14 48.3 无 15 51.7 性别 病理类型 男 18 62.1 小 B 细胞型 11 37.9 女 11 37.9 弥漫大 B 细胞型 11 37.9 分期 T 细胞型 7 24.2 I~II 7 24.1 III~IV 22 75.9
乳酸脱氢酶 -5 在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义董菲, 等 1315 表 4 疾病进展组 LDH 及 LDH-5 表达的中位数及阳性 Table 4 Median value and positive numbers of LDH-5 and LDH expression of the progressing disease group 进展组 29 310.0 15.8 23 26 >0.05 病理类型弥漫大 B 细胞型 11 337.0 15.8 11 10 >0.05 小 B 细胞型 11 276.0 16.9 7 9 >0.05 T 细胞型 7 281.0 11.9 5 7 >0.05 表 5 疾病复发组临床特点 Table 5 Clinical characteristics of the relapse group 因素 构成比 /% 因素 构成比 /% B 症状 <60 5 33.3 有 9 60.0 60 10 66.7 无 6 40.0 性别 病理类型 男 4 26.7 小 B 细胞型 11 73.3 女 11 73.3 弥漫大 B 细胞型 4 26.7 分期 T 细胞型 7 24.2 I~II 1 0.07 III~IV 14 93.3 表 6 疾病复发组 LDH 及 LDH-5 表达的及阳性 Table 6 Median value and positive numbers of LDH-5 and LDH expression of the relapse group 复发组 15 261.0 8.9 7 13 >0.05 病理类型弥漫大 B 细胞型 4 383.5 13.6 4 4 >0.05 小 B 细胞型 11 204.0 8.1 3 9 <0.05 T 细胞型 7 281.0 11.9 5 7 >0.05 3 讨论 Federico,MD Anderson 等国外知名肿瘤研究中心将 LDH 列为评价淋巴瘤预后的主要指标之一, 在国际预后指数 (International Prognostic Index,IPI) 的 5 [7-8] 项指标里,LDH 亦位列其中, 国内也不断有研究支持 LDH 在淋巴瘤监测中的作用, 可见 LDH 在淋巴瘤评估中的重要性 在其 5 种同工酶中,LDH-5 的升高被认为与 NHL 的预后与转归有关, 国内江铭磊 [9-10] 等的研究表明 : 化学治疗 ( 化疗 ) 有效的 NHL 患者, 化疗前后血清 LDH-5 水平呈递减趋势, 不同疗效组间的结果差异有统计学意义, 且 LDH-5 含量与 NHL 预后指标具有相关性 目前尚无研究将 LDH 与 LDH-5 的敏感性进行比较 本研究取 LDH 阳性较高的 初发 进展及复发 NHL 患者分别进行 LDH 与 LDH-5 水平的检测后, 再按照不同病理类型进行统计学比较, 以期探寻其临床意义 初发组共有患者 43 例, 在不进行具体病理分型的情况下 LDH-5 组的阳性多于 LDH 组, 且两组差异有统计学意义 (P<0.05) 进一步行病理分型后发现弥漫大 B 细胞淋巴瘤组及 T 细胞淋巴瘤组的 LDH-5 阳性仍多于 LDH 者 (P<0.05); 而对于小 B 细胞淋巴瘤来说 LDH-5 组的阳性虽多于 LDH 组但并无统计学意义 (P>0.05), 提示对于初发的 NHL,LDH-5 在弥漫大 B 细胞淋巴瘤及 T 细胞淋巴瘤中的检测意义更大, 可能较之 LDH 更能早期发现初发病例, 但是由于每种病理类型的样本量较小, 不能得出 LDH-5 阳性越多则肿瘤的侵袭性越高的结论, 这需要更多
1316 中南大学学报 ( 医学版 ), 2016, 41(12) http://www.csumed.org 病例资料的支持 疾病进展组 29 例患者 LDH 及 LDH-5 的阳性均增多, 但总阳性及进行病理分型后的每组阳性两组间均无明显差别, 提示无论肿瘤的初始阶段侵袭性如何, 在疾病的进展阶段其肿瘤增殖均较为明显, 因此 LDH-5 在预测疾病进展期可能较之 LDH 并无明显优势 疾病复发组 15 例患者的 LDH 及 LDH-5 总阳性差异亦无统计学意义 (P>0.05), 但在小 B 细胞淋巴瘤组,LDH-5 组的阳性显著高于 LDH 组 (P<0.05), 提示对于小 B 细胞淋巴瘤复发时 LDH-5 的升高可能会先于且显著于 LDH 的升高, 因此在小 B 细胞淋巴瘤患者治疗及随访期间进行 LDH-5 水平的监测可能较之 LDH 更有助于我们早期发现肿瘤复发 综上所述, 对于初发的 NHL 来说,LDH-5 在弥漫大 B 细胞淋巴瘤及 T 细胞淋巴瘤中的检测意义更大, 而我国较之欧美等西方国家 T 细胞淋巴瘤的发病率比较高 [11], 所以在我国积极开展 LDH-5 的检测对初发 NHL 患者的意义更重大 ; 对于疾病复发的 NHL 来说, 积极开展 LDH-5 水平的监测将可能有助于临床医生提早发现肿瘤的复发 在本研究中, 由于患者在化疗过程可能存在肝 肾及心功能损害, 在选取病例时同时都检测了肝 肾及心功能, 均无异常, 但仍不能完全排除肝 肾及心功能损害对于 LDH 及 LDH-5 检测的影响, 而且在病理分型中除弥漫大 B 细胞淋巴瘤外其余病理类型病较少, 结果可能存在偏倚, 故有必要增加样本数以便进一步证实 LDH-5 表达在 NHL 中的临床意义 参考文献 [1] 李小秋, 李甘地, 高子芬, 等. 中国淋巴瘤亚型分布 : 国内多中 心性病例 10 002 例分析 [ J]. 诊断学理论与实践, 2012, 11(2): 111-115. LI Xiaoqiu, LI Gandi, GAO Zifen, et al. Distribution pattern of lymphoma subtypes in China: A nationwide multicenter study of 10 002 cases[ J]. Journal of Diagnostics Concepts & Practice, 2012, 11(2): 111-115. [2] Shipp M, Harringtin D, Anderson J, et al. A predictive model for aggressive lymphome: the international NHL progostic facters project[ J]. Engl J Med, 1993, 329(14): 987. [3] 袁春平, 李中武, 张玮, 等. LDH5 在舌鳞状细胞癌中的表达及 其临床意义 [ J]. 南京医科大学学报 : 自然科学版, 2014, 34(7): 926-929. YUAN Chunping, LI Zhongwu, ZHANG Wei, et al. The expression and clinical significance of LDH-5 in tongue squamous cell carcinoma[ J]. Journal of Nanjing Medical University. Natural Sciences, 2014, 34(7): 926-929. [4] Koukourakis MI, Kontomanolis E, Giatromanolaki A, et al. Serum and tissue LDH levels in patients with breast/gynaecological cancer and benign diseases[ J]. Gynecol Obstet Invest, 2009, 67(3): 162-168. [5] Kayser G, Kassem A, Sienel W, et al. Lactate-dehydrogenase 5 is overexpressed in non-small cell lung cancer and correlates with the expression of the transketolase-like protein 1[ J]. Diagn Pathol, 2010, 5(10): 22-32. [6] Alexandra G, Michael IK, Francesco P, et al. Lactate dehydrogenase 5 expression in non-hodgkin B cell lymphomas is associated with hypoxia regulated proteins[ J]. Leuk Lymphoma, 2008, 49(11): 2181-2186. [7] 万祥辉, 杨细媚, 邹学森. CBC 联合 LDH 对白血病 淋巴瘤骨髓侵犯诊断价值的 ROC 分析研究 [ J]. 实验与检验医学, 2015, 33(2): 140-143. WAN Xianghui, YANG Ximei, ZOU Xuesen. Diagnostic value of using ROC curve to evaluate CBC and LDH in leukemia and lymphoma with bone marrow involvement[ J]. Experimental and Laboratory Medicine, 2015, 33(2): 140-143. [8] 陈维, 魏涛. 血清 LDH TPS CEA 和 β2-mg 在非霍奇金淋巴瘤诊断中的价值 [ J]. 分子影像学杂志, 2015, 38(3): 257-259. CHEN Wei, WEI Tao. Value of serum LDH, TPS, CEA and β2- MG in the diagnosis of non-hodgkin s lymphoma[ J]. Journal of Molecular Imaging, 2015, 38(3): 257-259. [9] 江铭磊, 陈祝俊, 卢仁泉, 等. LDH-5 在非霍奇金淋巴瘤诊断与疗效监测中的作用 [ J]. 中国癌症杂志, 2013, 23(1): 55-58. JIANG Minglei, CHEN Zhujun, LU Renquan, et al. The level of LDH isoenzym in non-hodgkin lymphoma patients and its preliminary application in disease monitoring[ J]. China Oncology, 2013, 23(1): 55-58. [10] Lu R, Jiang M, Chen Z, et al. Lactate dehydrogenase 5 expression in non-hodgkin lymphoma is associated with the induced hypoxia regulated protein and poor prognosis[ J]. PLoS One, 2013, 8(9): e74853 [11] Jaffe ES, Nicolae A, Pittaluga S. Peripheral T-cell and NK-cell lymphomas in the WHO classification: pearls and pitfalls[ J]. Mod Pathol, 2013, 26(Suppl): S71-87. ( 本文编辑陈丽文 ) 本文引用 : 董菲, 隋爱霞, 景红梅. LDH-5 在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义 [ J]. 中南大学学报 : 医学版, 2016, 41(12): 1312-1316. DOI:10.11817/j.issn.1672-7347.2016.12.010 Cite this article as: DONG Fei, SUI Aixia, JING Hongmei. Expression of lactate dehydrogenase in non-hodgkin lymphoma and its clinical significance[ J]. Journal of Central South University. Medical Science, 2016, 41(12): 1312-1316. DOI:10.11817/j.issn.1672-7347.2016.12.010