计划类别 : 项目类别 : 支持方向 : 管理处室 : 科技支撑计划重点科技攻关项目现代农业农村处 项目名称 : 申报主持单位 ( 盖章 ): 项目负责人 : 通讯地址 : 主要农畜产品常见食源性病原菌溯源技术研究吉林农业大学胡桂学长春市新城大街 2888 号 固定电话 : 043184533482 移动电话 : 13604428433 传真 : 043184533462 邮编 : 130118 电子邮箱 : huguixue901103@163.com 填报日期 : 2012-10-04 吉林省科学技术厅 二 O 一二年八月制
一 申报项目基础信息 项目名称 主要农畜产品常见食源性病原菌溯源技术研究 项目所属学科畜牧兽医科学技术项目所属专业畜禽产品安全生产检测监控 经费预算总额 50.0 万元, 其中申请经费 40.0 万元起止年限 2013-01-01 至 2015- 申报主持单位 参加单位 1 参加单位 2 项目负责人及主要参加人 创新类型 名称吉林农业大学所在长春市地通讯地址长春市新城大街 2888 号邮编 130118 单位类别 企业 科研机构 高等院校 事业单位 其它 隶属 中直 省直 其它 帐 号 开户银行 名称 所在地 参与方式 合作 技术承接 技术依托 名称 吉林省疾病预防控制中心 所在地 长春市 参与方式 合作 技术承接 技术依托 项目负责人 第一参加人 第二参加人 原始创新 集成创新 引进消化吸收再创新 姓 名 胡桂学 性别 男 出生年月 1963-05-16 学 历 研究生 学位 博士 身份证号 220102196305 525x 职 务 副院长 职称 正高级 电 话 13604428433 工作单位 吉林农业大学 邮 箱 huguixue9011 @163.com 姓 名 王伟利 性别 女 出生年月 1965-06-01 学 历 研究生 学位 博士 身份证号 220102196506 524X 职 务 主任 职称 正高级 电 话 13069111211 工作单位 吉林出入境检疫检验局检验检疫技术中心 邮 箱 wangweili@163.co 姓 名 邓立权 性别 男 出生年月 1978-09-06 学 历 研究生 学位 硕士 身份证号 220105197809 2610 职 务 所长 职称 副高级 电 话 13500893638 工作单位 吉林省疾病预防控制中心 邮 箱 331523789@qq om 申报方式 技术创新战略联盟申报 产学研联合申报 其它 ( 一 ) 研发内容 :1 吉林省主要农畜产品常见食源性病原菌的分离鉴定;2 不同食源性项目简介 ( 研病原菌脉冲场凝胶电泳技术 (PFGE) 条件的优化及其标准的制定 ;3 常见食源性病原菌发内容 拟解 PFGE 溯源技术的应用, 揭示主要动物性食品食源性病原菌污染的主要来源 ( 二 ) 解决的关键技术 : 常见食源性病原菌 PFGE 最佳条件的筛选 决关键技术 ( 三 ) 预期技术 经济指标 :1 分别从患病农畜 动物产品和人类食物中毒食物中分离预期技术 经到 40 株以上的食源性病原菌 ;2 筛选出不同细菌悬液的浓度 细胞裂解的条件 内切酶济指标等的种类 酶切时间 电泳条件等 PFGE 最佳条件, 制定出不同病原菌 PFGE 标准 ;3 阐明我 )(400 字以内省主要农畜产品食源性病原菌主要来源 ;4 项目的实施将为我省常见食源性病原菌溯源 ) 研究提供技术支撑, 揭示我省主要农畜产品食源性病原菌污染的主要来源, 为制定科学的动物性食品细菌性食物中毒防控措施提供科学依据, 减少食物中毒造成的经济损失 预期成果 新产品 新品种 新工艺 新装置 新材料 技术标准 ( 国际标准 国家标准 行业标准 企业标准 ) 专利 计算机软件 论文论著 研究报告 其它 预期专利授权获得国外发明专利 0 项, 国内专利 1 项, 其中发明专利 0 项 成果预期 形成自主研发能力 突破关键技术 试点示范 规模生产 推广应用 提高经济效益 第 1 页
作用 其它 第 2 页
二 申报项目内容概况 (1) ( 一 ) 立项的必要性 (150 字以内 ) 细菌性食物中毒发生率高, 直接影响人们日常生活甚至危及生命 常见的食源性病原菌主要包括大肠杆菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌等 食源性病原菌与动物疾病 食品加工 储藏和运输等多个环节有关, 传统的细菌分离鉴定 血清学 噬菌体分型等技术不能有效地开展溯源研究 因此, 研究食源性病原菌新型溯源技术非常必要 ( 二 ) 相关技术国内外发展现状与趋势 (150 字以内 ) PFGE 是基因分型新技术, 具有对细菌全染色体的整体分析 分辨率高 重复性好 结果稳定 易于标准化的特点, 是分子指纹图谱的 金标准, 其数据能够利用网络在全世界分子分型实验室之间的数据进行比对, 实现资源共享 建立常见食源性病原菌 PFGE 技术标准, 规范检测程序, 是未来食源性病原菌溯源研究的发展趋势 ( 三 ) 前期工作基础 1 申报单位和项目负责人前期所开展的相关研究工作 (200 字内 ); (1) 收集了大量患病畜禽 动物性食品样品 ;(2) 初步开展了动物食源性病原菌分离鉴定工作, 分离到多株食源性病原菌 ;(3) 初步开展了大肠杆菌 沙门氏菌和金黄色葡萄球菌 PFGE 方法研究 ; 2 前期研究所取得的进展和阶段性成果(200 字以内 ) 从患病动物体内分离到沙门氏菌 18 株 葡萄球菌 21 株 大肠杆菌 45 株, 从动物性食品中分离并鉴定了沙门氏菌 12 株 葡萄球菌 13 株 大肠杆菌 19 株 发表了多篇相关研究论文, 主要有 : 胡桂学等 鹅源沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验 ( 经济动物学报,2005) 王伟利等 脉冲场凝胶电泳技术的研究进展 ( 黑龙江畜牧兽医,2012) 王伟利等 利用 PCR 技术检测鸡肉产品中的空肠弯曲杆菌 ( 吉林农业大学学报,2005) ( 四 ) 研究 ( 开发 ) 内容和拟解决的关键技术问题 1 研究 ( 开发 ) 内容 (400 字以内 ) (1) 吉林省主要农畜产品常见食源性致病菌的分离鉴定 1 病料采集 : 与吉林省不同地区生猪 家禽 奶 ( 肉 ) 牛等生产企业和兽医诊疗机构建立联系, 广泛收集病料 从省内不同地区的超市采集动物性食品 由项目合作单位吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心采集农畜产品, 由吉林省疫病预防控制中心采集吉林省境内发生的人类食物中毒样品 2 分离鉴定方法 : 按照国家制定的相关食源性病原菌检验标准, 在实验室内开展细菌的分离 常规方法和 16srRNA 鉴定 (2) 吉林省主要农畜产品常见食源性致病菌 PFGE 溯源技术的建立与标准制定 : 筛选不同食源性病原菌 PFGE 技术中细菌悬液的浓度 细胞裂解的条件 限制性内切酶的种类 酶切时间 电泳条件等, 制定技术标准 (3) 常见食源性病原菌 PFGE 溯源技术的应用研究 : 采用建立的常见食源性病原菌 PFGE 溯源技术, 研究本项目分离鉴定的病原菌, 以揭示我省乳 肉 蛋等主要动物性食品食源性病原菌的亲缘关系, 找到主要污染的来源 2 拟解决的关键技术 (400 字以内 ) 大肠埃希氏菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌 溶血性链球菌 空肠弯曲菌 小肠结肠炎耶尔森氏菌等常见食源性致病菌 PFGE 最佳条件的筛选是本研究的关键技术 第 3 页
二 申报项目内容概况 (2) ( 五 ) 实施方案 1 技术路线(600 字以内 ) (1) 吉林省疑似食源性致病菌感染样品的采集 : 广泛收集疑似患有大肠埃希氏菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌 溶血性链球菌 空肠弯曲菌 小肠结肠炎耶尔森氏菌等常见食源性致病菌农畜病料, 采集乳 肉和蛋等主要农畜产品材料, 获取疑似人细菌性食物中毒食品或食物材料 (2) 细菌的分离与纯培养 : 按常规方法富集细菌, 采用选择培养基分离培养细菌, 获得纯培养物 (3) 致病性实验 : 将分离细菌的纯培养物接种实验小鼠, 观察小鼠临床表现 病理解剖和病理组织学变 化, 获得有致病性细菌 PCR 获得细菌毒力相关基因, 进一步验证细菌的病原性 (4) 细菌鉴定 : 采用常规生化 血清学试验和 16srRNA 基因测序鉴定病原菌 (5)PFGE 分子溯源技术的建立 标准制定 : 大量培养分离到的致病菌, 分别对细菌悬液浓度 细菌裂解条件 限制性内切酶种类 酶切时间和电泳条件进行优化, 制定技术标准 (6) 溯源技术的应用 : 采用本项目建立的 PFGE 技术, 获得不同病原菌脉冲场凝胶电泳图谱, 与美国疾病控制中心和公众健康实验室协会建立的脉冲网和由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所牵头成立的中国脉冲网数据库进行分析比对, 获得吉林省主要畜禽产品食源性致病菌的主要污染来源 2 实施方案( 组织方式 产学研合作机制等 )(200 字以内 ) 吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心和吉林省疫病预防控制中心通过正常的检疫检验和疾病防控, 收集临床病料 ; 吉林农业大学利用研究室平台开展研究, 建立常见食源性病原菌 PFGE 技术方法, 制定检测标准, 同时培养青年科研人员和研究生 把研究成果在两个单位应用, 转化为可应用的研究成果 ( 六 ) 预期成果及指标 1 预期技术指标(200 字以内 ) (1) 常见食源性病原菌的分离与鉴定 : 分别从患病的鸡猪等农畜 乳肉蛋等动物产品和人类食物中毒食物中分离到 40 株以上的食源性病原菌 (2)PFGE 方法的建立 : 筛选出不同细菌悬液的浓度 细胞裂解的条件 内切酶的种类 酶切时间 电泳条件等 PFGE 最佳条件, 制定出不同病原菌 PFGE 溯源技术标准 (3)PFGE 的应用 : 阐明我省主要农畜产品食源性病原菌主要来源 2 预期经济指标(100 字以内 ) 该项目的实施并取得研究成果, 将为我省食源性病原菌溯源研究提供技术支撑, 揭示我省主要农畜产品主要食源性病原菌污染的主要来源, 为制定细菌性食物中毒防控措施提供科学依据, 减少食物中毒造成的经济损失 3 预期产业应用前景和社会 生态效益(100 字以内 ) 项目的实施并取得研究成果, 将为我省食源性病原菌溯源研究提供技术支撑, 揭示我省主要农畜产品常见食源性病原菌污染的主要来源, 为制定细菌性食物中毒的防控策略提供科学依据, 减少食物中毒事件的发生 因此, 本项目研究成果并将获得良好的社会和生态效益 4 成果提供形式( 授权专利 技术标准 新技术 新产品 新装置 论文专著的数量等 )(100 字以内 ) 项目获得资助并开展研究, 研发出常见食源性病原菌 PEGF 检测新技术, 拟申请 1 种或几种病原菌 PFGE 授权专利, 制定 1 项或几项国家或行业标准, 发表学术论文 5-7 篇 5 人才队伍建设( 培养博士 硕士数等 )(100 字以内 ) 项目完成后, 将培养 1 名博士研究生 3 名硕士研究生, 完成他们的学位论文 第 4 页
三 项目团队构成 项目负责人简介 ( 参与过的主要研究 开发和成果转化项目及任务分工, 授权发明专利, 在国内外核心期刊上发表的代表性学术论文等研究成果情况 )(350 字以内 ): 1 主持科研项目 (1) 鹅重要传染病诊断与高效防制技术研究, 省科技进步三等奖 (2010), 第一获奖人 ;(2) 乳酸杆菌微生态制剂表达仔猪冠状病毒性腹泻病毒保护性抗原基因研究 (2006-2008), 国家自然基金项目, 主持人 2 代表性学术论文 (1)Feng-Shan Gao,Gui-Xue Hu[ 通讯作者 ]. Isolation and ide pandas (Ailuropoda melanoleuca).j.vet. SCI,2009,10(3 泻病毒 COE 基因的重组乳酸菌的构建与鉴定, 畜牧兽医学报,2008,39(12) 项目负责人 姓名性别年龄 胡桂学男 49 主要参加人 所在单位及部门 职称现从事专业在本项目中承担的主要工作 教授总体设计和实施 王伟利女 47 吉林省出入境检验检疫局 研究员 动物食品样品采集及其病原菌的分离鉴定 邓立权男 35 吉林省疫病预防控制中心 副主任医师 预防医学 食物中毒样品的采集及其病原菌的分离鉴定 参加人员 王开男 35 讲师临床兽医学病原菌致病性实验 裴志花女 35 博士研究生 基础兽医学 大肠杆菌 PFGE 建立及其溯源研究 董浩男 34 吉林农业大学生命科学院 副教授 沙门氏菌 PFGE 建立及其溯源研究 王为男 33 吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心 助理研究员 空肠弯曲杆菌 PFGE 建立及其溯源研究 李公美女 38 副教授 金黄色葡萄球菌 PFGE 建立及其溯源研究 黄海龙男 39 吉林农业大讲师临床兽医学动物临床病料的采集与病原菌 第 5 页
学动物科技学院 分离鉴定 赵立峰男 36 高级兽医师 临床兽医学 患病动物病料采集及其病原菌菌的分离鉴定 刘秋艳女 23 在读硕士 溶血性链球菌 PFGE 建立及其溯源研究 王力波男 24 在读硕士 单增李斯特菌 PFGE 建立及其溯源研究 赵健男 24 在读硕士 结肠炎耶尔森氏菌 PFGE 建立及其溯源研究 第 6 页
四 经费预算表 单位 : 万元 序号 科目名称 合计 申请经费 自筹经费申报单位参加单位 1 一 经费支出合计 50.0 40.0 10.0 0.0 2 ( 一 ) 直接费用 44.0 34.0 10.0 0.0 3 1 设备费 0.0 0.0 0.0 0.0 4 (1) 购置设备费用 0.0 0.0 0.0 0.0 5 (2) 原设备升级改造费用 0.0 0.0 0.0 0.0 6 (3) 设备租赁费 0.0 0.0 0.0 0.0 7 (4) 非标设备 ( 试验装置 ) 试制费 null null null null 8 2 材料费 20.0 15.0 5.0 0.0 9 3 测试 化验 检验 试验 加工费 8.0 8.0 0.0 0.0 10 4 燃料动力费 2.0 2.0 0.0 0.0 11 5 差旅费 2.0 2.0 0.0 0.0 12 6 会议费 2.0 2.0 0.0 0.0 13 7 国际合作与交流费 0.0 0.0 0.0 0.0 14 8 出版/ 文献 / 信息传播 / 知识产权事务费 2.0 2.0 0.0 0.0 15 9 劳务费 3.0 1.0 2.0 0.0 16 10 专家咨询费 2.0 2.0 0.0 0.0 17 11 其它支出 3.0 0.0 3.0 0.0 18 ( 二 ) 间接费用 6.0 6.0 0.0 0.0 19 1 房屋租赁费 0.0 0.0 0.0 0.0 20 2 水 电费 1.6 2.0 0.0 0.0 21 3 暖消耗费 1.6 2.0 0.0 0.0 22 4 绩效支出 2.0 2.0 0.0 0.0 23 5 其它支出 0.8 0.0 0.0 0.0 24 二 经费来源合计 50.0 40.0 10.0 0.0 25 1 申请专项经费资助 40.0 40.0 / / 26 2 自筹经费来源 10.0 / 10.0 0.0 27 (1) 其它财政拨款 0.0 / 0.0 0.0 28 (2) 单位自有资金 0.0 / 0.0 0.0 29 (3) 其它资金 10.0 / 10.0 0.0 第 7 页
五 年度计划安排 (1) 年 月 项目计划完成的内容及目标 1 内容 : 患病动物 动物产品和食物中毒样品的收集 2 内容 : 样品数量分别达到 100 份以上 2013 年 01 月至 2013 年 06 月 2013 年 07 月 至 2013 年 12 月 1 内容 : 继续收集样品, 开展食源性病原菌的分离鉴定研究 2 内容 : 分离鉴定出大肠埃希氏菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌 溶血性链球菌 空肠弯曲菌 小肠结肠炎耶尔森氏菌各 40 株以上 1 内容 : 开展大肠埃希氏菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌 PFGE 方法的建立研究 2014 年 01 月 至 2014 年 06 月 2 内容 : 制定相应的检测标准 第 8 页
五 年度计划安排 (2) 年 月 项目计划完成的内容及目标 1 内容 : 开展溶血性链球菌 空肠弯曲菌 小肠结肠炎耶尔森氏菌 PFGE 方法的建立 2 内容 : 制定相应检测标准 2014 年 07 月 至 2014 年 12 月 1 内容 : 利用建立的 PFGE 方法对分离到的大肠埃希氏菌 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌进行溯源研究 2015 年 01 月 至 2015 年 06 月 1 内容 : 利用建立的 PFGE 方法对分离到的溶血性链球菌 空肠弯曲菌 小肠结肠炎耶尔森氏菌进行溯源研究 2 内容 : 撰写结题报告, 组织专家鉴定 2015 年 07 月 至 2015 年 12 月 第 9 页
六 任务分工及申请经费分配 项目申报形式 : 独立 合作 产学研合作 单位 任务 申请经费 ( 万元 ) 参与方式 申报主持单位 / 申报参加单位 合 作 技术承接 技术依托 合 作 技术承接 技术依托 合 作 技术承接 技术依托 合 作 技术承接 技术依托 合 作 技术承接 技术依托 第 10 页
七 申报单位与推荐部门意见 申报主持单位意见 : 盖章年月日 申报参加单位意见 : 盖 章 年月日 盖 章 年月日 盖 章 年月日 盖 章 年月日 盖 章 年月日 推荐部门意见 : 盖章盖章 年月日年月日 第 11 页